CN117295520A - 使用内皮素受体拮抗剂治疗眼部疾病 - Google Patents

Abstract

本公开涉及这样的发现：某些严重影响人类视觉系统并因此影响生活质量的眼部疾病可以使用艾多南坦或A‑182086进行治疗。疾病的实例包括但不限于眼部新生血管形成、新生血管性青光眼、血管渗漏、黄斑水肿和新生血管性年龄相关性黄斑变性。

Description

使用内皮素受体拮抗剂治疗眼部疾病

相关申请

本申请要求2021年4月30日提交的美国临时专利申请No.63/182,750的优先权，出于所有目的，其全部内容通过引用并入本文。

背景技术

使人衰弱的眼部疾病的实例包括新生血管性青光眼、眼部新生血管形成、血管渗漏、黄斑水肿、新生血管性年龄相关性黄斑变性、视网膜静脉阻塞(RVO)和早产儿视网膜病变(ROP)。这些眼部疾病会对眼睛造成不同程度的长期损害，并最终导致失明。虽然新生儿、年轻人、所有年龄段的成年人和老年人都会受到影响，但目前只有少数治疗方法。这些治疗仅针对一部分眼部疾病，可以减缓失明，但不能防止失明。仅美国每年的经济负担就超过1000亿美元。

眼部新生血管形成，即从现有血管树形成新血管，是全世界严重视力丧失和严重视力障碍的主要原因。它会影响眼睛的不同结构，包括视网膜、脉络膜和角膜。当新的异常血管生长并扩散到整个视网膜和/或眼睛的其他部分(例如，排列在眼睛后部和前房的组织)时，就会发生这种情况。与正常血管相比，新的异常血管是渗漏的，允许血液中的液体进入视网膜。该液体会立即扭曲视力并损害视网膜。

新生血管性青光眼(NVG)是一种可能致盲的继发性青光眼，其特征是虹膜新生血管形成、眼内压(IOP)升高，并且在许多情况下视力预后不良。NVG是一种严重的青光眼，归因于继发于后段缺血的新生血管阻碍房水流出。它与虹膜前表面和前房虹膜角膜角上纤维血管膜的发育有关。

视网膜静脉阻塞(RVO)是一种视网膜血管疾病，也是全球视力丧失的最常见原因之一。具体来说，它是继糖尿病视网膜病变之后由视网膜血管疾病导致失明的第二最常见原因。RVO通常是潜在健康问题(例如高血压、高胆固醇、糖尿病和其他健康问题)的结果。视网膜静脉阻塞有两种类型：视网膜中央静脉阻塞(CRVO)是视网膜主静脉的阻塞，而视网膜分支静脉阻塞(BRVO)是较小分支静脉之一的阻塞。

目前，没有办法疏通视网膜静脉，公认的治疗方法旨在解决与视网膜静脉阻塞相关的健康问题。一些患有视网膜静脉阻塞的眼睛可能会恢复视力。大约1/3有一些改善，大约1/3保持不变，大约1/3逐渐改善，但可能需要一年或更长时间才能确定最终结果。在某些情况下，血管堵塞会导致视网膜积液。在其他情况下，缺血的发生会导致新血管的形成。RVO目前的治疗方法是玻璃体内注射抗血管内皮生长因子(VEGF)药物。

早产可能会导致早产儿视网膜病变(ROP)。继发于其他早产儿治疗的视网膜中异常、渗漏的血管生长(新生血管)通常可导致新生儿失明。怀孕期间，血管在母亲怀孕16周时从发育中的婴儿视网膜中心开始生长，然后向外分支并在怀孕8个月时到达视网膜边缘。在早产儿中，正常的视网膜血管生长不完整，因此可能更容易受到干扰。

因此，新生血管性青光眼、眼部新生血管形成、血管渗漏、黄斑水肿、新生血管性年龄相关性黄斑变性、视网膜静脉阻塞(RVO)和早产儿视网膜病变(ROP)的更有效的发病率降低、治疗或其它改善的需求尚未得到满足。

发明内容

本公开提供了在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部疾病的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的内皮素受体拮抗剂或其药学上可接受的盐的组合物接触。可以使用本文描述的方法治疗的眼部疾病包括但不限于新生血管性青光眼、视网膜静脉阻塞(RVO)、早产儿视网膜病变(ROP)、眼部新生血管形成、血管渗漏、新生血管性年龄相关性黄斑变性和黄斑水肿。

该方法包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的内皮素受体拮抗剂或其药学上可接受的盐的组合物接触。在各种实施方案中，内皮素受体拮抗剂选自由艾多南坦、替唑生坦、A-182086、克拉生坦、S1255、ACT-132577、恩拉生坦和司帕森坦组成的组。优选地，内皮素受体拮抗剂是艾多南坦或A-182086。

本公开还提供了在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成、血管渗漏、黄斑水肿或新生血管性年龄相关性黄斑变性的方法，包括使受试者的光学组织与组合物接触，所述组合物包含治疗有效量的式I化合物：

或其药学上可接受的盐。

附图说明

图1描绘了代表性实验的光学相干断层扫描-血管造影(OCT-A)图像，显示通过玻璃体内注射(IVT)注射0.5μg内皮素-1(ET-1)后45分钟，焦点兔视网膜血管结构中出现严重血管痉挛。

图2描绘了荧光素血管造影(FA)图像，其揭示了IVT施用10μg艾多南坦后ET-1诱导的血管痉挛的逆转。

图3描绘了在IVT施用单独的媒介物(对照组)、或单独的0.5μg ET-1、或0.5μg ET-1和10μg艾多南坦，或0.5μg ET-1和10μg A-182086后，健康兔(n＝5/组)中作为视网膜血流指标的荧光素染料速度的比较，揭示了在经过ET-1处理的兔子中染色速度延长/流量减少，在用艾多南坦或A-182086治疗后改善至对照水平。

图4描绘了在以1mg/kg局部滴眼艾多南坦、媒介物对照或腹膜内注射阿柏西普之后，具有氧诱导的缺血性视网膜病变(OIR)的7日龄新生C57BL/6小鼠中的新生血管面积(NV)的比较。

图5A描绘了局部施用单独媒介物(对照组)或艾多南坦后眼内压(IOP)升高的大鼠(对于对照，n＝4只大鼠/组，对于艾多南坦，n＝6只大鼠/组)周边视网膜中的视网膜神经节细胞(RGC)计数的比较。图5B描绘了局部施用单独媒介物(对照组)或艾多南坦后眼内压(IOP)升高的大鼠(对于对照，n＝4只大鼠/组，对于艾多南坦，n＝5只大鼠/组)的图形视网膜电图(PERG)变化的比较。图5A和图5B显示用艾多南坦治疗后防止了RGC损失并维持了RGC功能。图5C描绘了局部或口服施用的艾多南坦在大鼠血浆、视网膜/视网膜色素上皮(RPE)/脉络膜、玻璃体液和房水中的药代动力学特征。图5C揭示了艾多南坦在局部给药后渗透通过角膜/巩膜并实现视网膜暴露的能力。

图6A描绘了局部施用单独媒介物(对照组)或A-182086后眼内压(IOP)升高的大鼠(对于对照，n＝4只大鼠/组，对于A-182086，n＝6只大鼠/组)周边视网膜中的视网膜神经节细胞(RGC)计数的比较。图6B描绘了局部施用单独媒介物(对照组)或A-182086后眼内压(IOP)升高的大鼠(对于对照，n＝4只大鼠/组，对于A-182086，n＝5只大鼠/组)的图形视网膜电图(PERG)变化的比较。图6A和图6B显示用A-182086治疗后防止了RGC损失并维持了RGC功能。

图6C描绘了局部或口服施用的A-182086在大鼠血浆、视网膜/视网膜色素上皮(RPE)/脉络膜、玻璃体液和房水中的药代动力学特征。图6C揭示了A-182086在局部施用后渗透通过角膜/巩膜并实现视网膜暴露的能力。

图7A-7L描绘了激光散斑流图(LSFG)，其用于比较三种非人灵长类动物的实验性青光眼眼和对侧健康眼(对照)的整体平均模糊率(MBR)或MBR随时间相对于基线的变化(作为激光诱导青光眼模型中视神经头(ONH)血流的指标)。图7M显示了三种非人灵长类动物的汇总结果。图7N显示了其中一种非人灵长类动物在各个选定时间点的LSFG扫描。

图8A和图8B描绘了在IVT施用单独的媒介物(对照)、0.1μg ET-1和10μg艾多南坦、0.1μg ET-1和2.5μg艾多南坦、0.1μg ET-1和0.5μg艾多南坦、0.1μgET-1和0.1μg艾多南坦，或单独0.1μg ET-1之后，ET-1诱导的兔子(n＝5只兔子/组)中作为视网膜血流指标的荧光素染料速度的比较，揭示了兔ET-1诱导的血管痉挛模型中的剂量反应。

图9A、图9B、图9C和图9D描绘了玻璃体内递送的艾多南坦在兔的血浆、视网膜、虹膜睫状体(ICB)、视网膜色素上皮(RPE)/脉络膜、玻璃体液或房水中的药代动力学特征(图9A、图9B、图9C和图9D)，揭示了艾多南坦的t_1/2更长。

图10描绘了局部施用的艾多南坦在兔的血浆、视网膜、玻璃体液和球结膜中的药代动力学特征，揭示了艾多南坦在单次局部施用到眼睛后穿透通过眼层的能力。

图11A和图11B描绘了玻璃体内递送的艾多南坦在用注射模制和柱塞挤出产品的2个植入物给药的兔(图11A、图11B)的视网膜和视网膜色素上皮(RPE)/脉络膜中的药代动力学特征。

图12描绘了形式1-4的XRPD图的示例性叠加。

图13描绘了形式1的示例性XRPD图。

图14描绘了形式2的示例性XRPD图。

图15描绘了形式3的示例性XRPD图。

图16描绘了形式4的示例性XRPD图。

图17描绘了形式1的示例性DSC曲线。

图18描绘了形式2的示例性DSC曲线。

图19描绘了形式3的示例性DSC曲线。

图20描绘了形式4的示例性DSC曲线。

图21描绘了图16所示的晶型4的XRPD特征峰。

图22描绘了在用2个注射成型产品植入物给药的有色兔子中进行12周单剂量玻璃体内眼部药代动力学研究期间艾多南坦视网膜水平的时程。

图23描绘了在用2个注射成型产品植入物给药的有色兔子中进行12周单剂量玻璃体内眼部药代动力学研究期间艾多南坦RPE/脉络膜水平的时程。

详细说明

本公开提供了用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成的方法。本文还提供了用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善血管渗漏或新生血管性年龄相关性黄斑变性的方法。本公开源自以下发现：艾多南坦和A-182086可用于预防、治疗或以其他方式改善眼部疾病，包括但不限于新生血管性青光眼、视网膜静脉阻塞(RVO)和早产儿视网膜病变(ROP)。

化合物

本发明的方法包括接触眼组织或施用(例如通过局部、眼内、玻璃体内)治疗有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。本文涵盖的化合物是内皮素受体拮抗剂，例如艾多南坦(Edonentan)、替唑生坦(Tezosentan)、A-182086、克拉生坦(Clazosentan)、S1255、ACT-132577、恩拉生坦(Enrasentan)和司帕森坦(Sparsentan)。

在某些实施方案中，该化合物是式I化合物：

或其药学上可接受的盐。

式I化合物也称为艾多南坦。艾多南坦的化学名称为N-[[2'-[[(4,5-二甲基-3-异噁唑基)氨基]磺酰基]-4-(2-噁唑基)[1,1'-联苯]-2-基]甲基]-N,3,3-三甲基丁酰胺(分子量536.6g/mol)。制备艾多南坦的方法是本领域技术人员众所周知的。合适的方法公开于例如美国专利No.6,043,265中。艾多南坦是一种高度选择性且非常有效的内皮素A受体拮抗剂。艾多南坦是在第一个临床候选药物BMS-193884(该候选药物正在开发用于治疗充血性心力衰竭(CHF))停止后开发的第二代类似物。艾多南坦于2002年4月进入I期试验，但其开发已停止。

在一些实施方案中，本文所述的组合物包含A-182086，其具有以下结构：

或其药学上可接受的盐。

A-182086的化学名称为(2R,3R,4S)-4-(2H-1,3-苯并间二氧杂环戊烷-5-基)-2-(3-氟-4-甲氧基苯基)-1-[2-(N-丙基戊烷-1-磺酰胺基)乙基]吡咯烷-3-甲酸(分子量578.7g/mol)。制备A-182086的方法是本领域技术人员众所周知的。合适的方法公开于例如美国专利No.6,162,927中。A-182086是一种有效的双重ET_A/ET_B受体拮抗剂，具有4倍的ET_A/ET_B选择性。迄今为止，A-182086尚未在临床环境中进行研究。

如本文所述，本公开提供了在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的式I化合物或A-182086的组合物接触。

本公开还提供了在有需要的受试者中预防、治疗或改善血管渗漏的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的式I化合物或A-182086的组合物接触。

本公开还提供了在有需要的受试者中预防、治疗或改善新生血管性年龄相关性黄斑变性的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的式I化合物或A-182086的组合物接触。

本文还提供了在有需要的受试者中预防、治疗或改善黄斑水肿的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的式I化合物或A-182086的组合物接触。

晶型

本发明的方法包括接触眼组织或施用(例如通过局部、眼内、玻璃体内)固体形式的式I化合物。在某些实施方案中，固体形式的式I化合物：

是无水晶型(形式4)，其X射线粉末衍射图以2θ计包含至少三个特征峰，选自5.6±0.2°、11.4±0.2°、17.7±0.2°、19.3±0.2°、21.1±0.2°和21.9±0.2°处的峰。

在固体形式的一些实施方案中，无水晶型4具有以下以衍射角(2θ)表示的X射线粉末衍射图：5.6±0.2°、11.4±0.2°、17.7±0.2°、19.3±0.2°和21.9±0.2°。在固体形式的一些实施方案中，无水晶型4具有以下以衍射角(2θ)表示的X射线粉末衍射图：11.4±0.2°、17.7±0.2°和19.3±0.2°。在固体形式的一些实施方案中，通过DSC分析，无水晶型4显示出约163℃的T_m。在固体形式的一些实施方案中，无水晶型4具有以下以衍射角(2θ)表示的X射线粉末衍射图：5.6±0.2°、11.4±0.2°、17.7±0.2°、19.3±0.2°，和21.9±0.2°。在固体形式的一些实施方案中，无水晶型4具有以下以衍射角(2θ)表示的X射线粉末衍射图：11.4±0.2°、17.7±0.2°和19.3±0.2°。在固体形式的一些实施方案中，通过DSC分析，无水晶型4显示出约163℃的T_m。

在一些实施方案中，基于组合物中存在的化合物的总重量，所述化合物的90重量％或更多为晶型4。在一些实施方案中，基于组合物中存在的化合物的总重量，式I化合物的95重量％或更多为晶型4。在一些实施方案中，基于组合物中存在的化合物的总重量，式I化合物的96重量％或更多为晶型4。在一些实施方案中，基于组合物中存在的化合物的总重量，式I化合物的97重量％或更多为晶型4。在一些实施方案中，基于组合物中存在的化合物的总重量，式I化合物的98重量％或更多为晶型4。在一些实施方案中，基于组合物中存在的化合物的总重量，式I化合物的99重量％或更多为晶型4。

在某些实施方案中，式I化合物是无水晶型(形式1)，其中无水晶型1具有以2θ计包含至少三个特征峰的X射线粉末衍射图，所述特征峰选自在6.3±0.2°、7.5±0.2°、11.7±0.2°、15.1±0.2°和17.3±0.2°处的峰；并且基于组合物中存在的化合物的总重量，所述化合物的90重量％或更多为晶型1。

在某些实施方案中，式I化合物是一水合物晶型(形式2)，其中该一水合物晶型2具有以2θ计包含至少三个特征峰的X射线粉末衍射图，所述特征峰选自9.6±0.2°、10.4±0.2°、19.6±0.2°、19.7±0.2°、22.0±0.2°、22.9±0.2°和23.7±0.2°处的峰；并且基于组合物中存在的化合物的总重量，所述化合物的90重量％或更多为晶型2；

在某些实施方案中，式I化合物是无水结晶(形式3)，其中无水晶型3具有以2θ计包含至少三个特征峰的X射线粉末衍射图，所述特征峰选自7.8±0.2°、9.0±0.2°、11.6±0.2°、15.8±0.2°和19.1±0.2°处的峰；基于组合物中存在的化合物的总重量，所述化合物的90重量％或更多为晶型3。

如本文所用，术语“无定形”是指在其分子位置不具有长程有序的固体材料。无定形固体通常是过冷液体，其中分子以随机方式排列，因此没有明确的排列(例如分子堆积)，也没有长程有序。无定形固体通常是各向同性的，即在所有方向上表现出相似的性质并且不具有确定的熔点。例如，无定形材料是在其X射线粉末衍射(XRPD)图中不具有尖锐特征结晶峰的固体材料(即，如通过XRPD确定的不是结晶的)。相反，在其XRPD图中会出现一个或多个宽峰(例如光晕)。

涵盖结晶艾多南坦的水合物形式，例如艾多南坦·(H₂O)_m，其中m是约0至约4之间的分数或整数，包括端值。例如，本文涵盖的是结晶艾多南坦的无水物或一水合物形式。在一个实施方案中，所公开的艾多南坦的晶型可具有约1至10重量％(例如，3至9重量％或5至8重量％)的水含量。

可生物降解的眼部植入物

本发明的方法包括接触眼组织或施用(例如通过局部、眼内、玻璃体内)包含式I化合物(本文也称为艾多南坦)的可生物降解的眼部植入物。

本文所述的包含艾多南坦的生物可降解的眼部植入物可用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成、血管渗漏、新生血管性年龄相关性黄斑变性、新生血管性年龄相关性黄斑变性或黄斑水肿。

本文所述的可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物。在优选的实施方案中，该化合物是式I化合物。

在各种实施方案中，植入物具有约300μm至约400μm(例如，约300μm、约325μm、约350μm、约375μm和约400μm)的直径和约4mm至约5mm(例如，约4.1mm、约4.2mm、约4.3mm、约4.4mm、约4.5mm、约4.6mm、约4.7mm、约4.8mm、约4.9mm和约5mm)的长度。在某些实施方案中，植入物具有约300μm的直径和约4mm的长度。在某些实施方案中，植入物具有约340μm的直径和约4mm的长度。

在各种实施方案中，植入物的总重量为约250μg至约450μg(例如，约250μg、约270μg、约290μg、约310μg、约330μg、约350μg、约370μg、约390μg、约410μg、约430μg和约450μg)。在各种实施方案中，植入物具有约300μg至约450μg的总重量。在各种实施方案中，植入物具有约350μg至约450μg的总重量。在一些实施方案中，植入物的总重量为约380μg。

在各种实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物(例如式I化合物)存在于可生物降解的聚合物中的浓度为约5％w/w至约95％w/w(例如，约10％w/w至约95％w/w、约15％w/w至约95％w/w、约20％w/w至约95％w/w、约25％w/w至约95％w/w、约30％w/w至约95％w/w、约35％w/w至约95％w/w、约40％w/w至约95％w/w、约45％w/w至约95％w/w、约50％w/w至约95％w/w、约55％w/w至约95％w/w、约60％w/w至约95％w/w、约65％w/w至约95％w/w、约70％w/w至约95％w/w、约75％w/w至约95％w/w、约80％w/w至约95％w/w、约85％w/w、约95％w/w、约90％w/w至约95％w/w、约5％w/w至约10％w/w、约5％w/w至约15％w/w、约5％w/w至约20％w/w、约5％w/w至约25％w/w、约5％w/w至约30％w/w、约5％w/w至约35％w/w、约5％w/w至约40％w/w、约5％w/w至约45％w/w、约5％w/w至约50％w/w、约5％w/w至约55％w/w、约5％w/w至约60％w/w、约5％w/w至约65％w/w、约5％w/w至约70％w/w、约5％w/w至约75％w/w、约5％w/w至约80％w/w、约5％w/w至约85％w/w和约5％w/w至约90％w/w)。在某些实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物存在于可生物降解的聚合物中的浓度为约20％w/w至约60％w/w(例如，约20％w/w至约55％w/w、约20％w/w至约50％w/w、约20％w/w至约45％w/w、约20％w/w至约40％w/w、约20％w/w至约35％w/w、约20％w/w至约30％w/w、约20％w/w至约25％w/w、约25％w/w至约60％w/w、约30％w/w至约60％w/w、约35％w/w至约60％w/w、约40％w/w至约60％w/w、约45％w/w至约60％w/w、约50％w/w至约60％w/w、约55％w/w至约60％w/w)。在某些实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物存在于可生物降解的聚合物中的浓度为约25％w/w至约45％w/w。在某些实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物存在于可生物降解的聚合物中的浓度为约40％w/w至约50％w/w(例如，约40％w/w至约45％w/w、约45％w/w至约50％w/w)。在各种实施方案中，化合物的浓度为约5％w/w、约10％w/w、约15％w/w、约20％w/w、约25％w/w、约30％w/w、约35％w/w、约40％w/w、约45％w/w或约50％w/w。在各种实施方案中，化合物的浓度为约30％w/w。在各种实施方案中，化合物的浓度为约40％w/w。在各种实施方案中，化合物的浓度为约45％w/w。在各种实施方案中，化合物的浓度为约50％w/w。

在实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物(例如，式I化合物，A-182086)在可生物降解的聚合物中的存在量为约1μg至约500μg(例如，约10μg至约500μg、约20μg至约500μg、约30μg至约500μg、约40μg至约500μg、约50μg至约500μg、约60μg至约500μg、约70μg至约500μg、约80μg至约500μg、约90μg至约500μg、约100μg至约500μg、约100μg至约500μg、约125μg至约500μg、约150μg至约500μg、约175μg至约500μg、约200μg至约500μg、约225μg至约500μg、约250μg至约500μg、约275μg至约500μg、约300μg至约500μg、约325μg至约500μg、约350μg至约500μg、约375μg至约500μg、约400μg至约500μg、约425μg至约500μg、约450μg至约500μg和约475μg至约500μg)。在各种实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物(例如，式I化合物，A-182086)在可生物降解的聚合物中的存在量为约70μg至约230μg(例如，约70μg、约75μg、约80μg、约85μg、约90μg、约95μg、约100μg、约105μg、约110μg、约115μg、约120μg、约125μg、约130μg、约135μg、约140μg、约145μg、约150μg、约155μg、约160μg、约165μg、约170μg、约175μg、约180μg、约185μg、约190μg、约195μg、约200μg、约205μg、约210μg、约215μg、约220μg、约225μg和约230μg)。在各种实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物(例如，式I化合物，A-182086)在可生物降解的聚合物中的存在量为约165μg至约220μg(例如，约165μg、约170μg、约175μg、约180μg、约185μg、约190μg、约195μg、约200μg、约205μg、约210μg、约215μg和约220μg)。在一些实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物(例如，式I化合物，A-182086)在可生物降解的聚合物中的存在量为约150μg至约250μg、约300μg至约550μg，或约300μg至约600μg。在各种实施方案中，可生物降解的眼部植入物中的化合物(例如，式I化合物，A-182086)在可生物降解的聚合物中的存在量为约330μg至约500μg(例如，约330μg、约335μg、约340μg、约345μg、约350μg、约355μg、约360μg、约365μg、约370μg、约375μg、约380μg、约385μg、约390μg、约395μg、约400μg、约405μg、约410μg、约415μg、约420μg、约425μg、约430μg、约435μg、约440μg、约445μg、约450μg、约455μg、约460μg、约465μg、约470μg、约475μg、约480μg、约485μg、约490μg、约495μg和约500μg)。

在一些实施方案中，所述可生物降解的眼部植入物最初包含至少约95％至约99％(例如，约95％、约96％、约97％、约98％和约99％)的所述可生物降解的聚合物的基质和所述化合物。在一些实施方案中，所述可生物降解的眼部植入物最初包含至少95％的所述可生物降解的聚合物的基质和所述化合物。在一些实施方案中，所述可生物降解的眼部植入物最初包含至少约80％至约95％(例如，约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％和约95％)的所述可生物降解的聚合物的基质和所述化合物。

治疗剂(例如，式I化合物)从玻璃体内植入物或颗粒悬浮液(例如，本公开的可生物降解的眼部植入物)释放的速率可以取决于数个因素，包括但不限于植入物的表面积、治疗剂含量、治疗剂的水溶性以及聚合物降解的速度。

在一些实施方案中，当放入磷酸盐缓冲盐水(PBS)中约1个月时，少于40％(例如，约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％和约5％)的化合物从所述可生物降解的眼部植入物释放。在一些实施方案中，当放入磷酸盐缓冲盐水(PBS)中约1个月至约12个月(约1个月、约2个月、约3个月、约4个月、约5个月、约6个月、约7个月、约8个月、约9个月、约10个月、约11个月、约12个月)时，少于90％(例如，约90％、约85％、约80％、约75％、约70％、约65％、约60％、约55％、约50％、约45％、约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％和约5％)的化合物从所述可生物降解的眼部植入物释放。

在各种实施方案中，植入物作为玻璃体内施用进行施用。玻璃体内施用是指将药物施用到眼睛的玻璃体液中。在一些实施方案中，植入物局部施用于眼睛后部。在一些实施方案中，将植入物使用针和涂抹器注入玻璃体内空间中。在一些实施方案中，所述可生物降解的眼部植入物包含的化合物(例如，式I化合物或其晶型)的剂量范围为约1μg至约1mg(例如，约1μg、约10μg、约25μg、约50μg、约75μg、约100μg、约125μg、约150μg、约175μg、约200μg、约225μg、约250μg、约275μg、约300μg、约325μg、约350μg、约375μg、约400μg、约425μg、约450μg、约475μg、约500μg、约525μg、约550μg、约575μg、约600μg、约625μg、约650μg、约675μg、约700μg、约725μg、约750μg、约775μg、约800μg、约825μg、约850μg、约875μg、约900μg、约925μg、约950μg和约975μg)。在一些实施方案中，所述可生物降解的眼部植入物包含的化合物(例如，式I化合物或其晶型)的剂量范围为约10μg至约100μg。在一些实施方案中，所述可生物降解的眼部植入物包含的化合物(例如，式I化合物或其晶型)的剂量范围为约500μg至约4mg(例如，约1mg、约1.5mg、约2mg、约2.5mg、约3mg和约3.5mg)。在一些实施方案中，所述剂量为约150μg至约250μg。在某些实施方案中，所述剂量为约165μg至约220μg(例如，约165μg、约170μg、约175μg、约180μg、约185μg、约190μg、约195μg、约200μg、约205μg、约210μg、约215μg和约220μg)。在一些实施方案中，所述剂量为约300μg至约500μg。在一些实施方案中，所述剂量为约300μg至约550μg。在一些实施方案中，所述剂量为约300μg至约600μg。在某些实施方案中，所述剂量为约330μg至约500μg(例如，约330μg、约335μg、约340μg、约345μg、约350μg、约355μg、约360μg、约365μg、约370μg、约375μg、约380μg、约385μg、约390μg、约395μg、约400μg、约405μg、约410μg、约415μg、约420μg、约425μg、约430μg、约435μg、约440μg、约445μg、约450μg、约455μg、约460μg、约465μg、约470μg、约475μg、约480μg、约485μg、约490μg、约495μg和约500μg)。在一些实施方案中，所述剂量为约200μg至约400μg(例如，约200μg、约210μg、约220μg、约230μg、约240μg、约250μg、约260μg、约270μg、约280μg、约290μg、约300μg、约310μg、约320μg、约330μg、约340μg、约350μg、约360μg、约370μg、约380μg、约390μg、约400μg)。在一些实施方案中，所述剂量为约175μg。

在一些实施方案中，可生物降解的眼部植入物是无菌的可生物降解的眼部植入物。如本文所用，“无菌”是指组合物满足药物监管机构(例如英国的MCA或美国的FDA)强制执行的无菌要求。测试包含在当前版本的药典中，例如英国药典和美国药典。在一些实施方案中，可生物降解的眼部植入物是基本上纯的可生物降解的眼部植入物。在一些实施方案中，可生物降解的眼部植入物是医疗级可生物降解的眼部植入物。在一些实施方案中，每3至12个月将可生物降解的眼部植入物施用到玻璃体内空间中。

可生物降解聚合物

用于本文所述的植入物中的合适的聚合物材料或组合物包括与眼睛相容(即生物相容)的那些材料，以便不会对眼睛的功能或生理学造成实质干扰。这种聚合物材料可以是可生物降解的、可生物蚀解的或既可生物降解又可生物蚀解的。

本文所用的术语“生物降解”或“可生物降解”通常是指构成植入物的聚合物在生物环境中(例如在受试者体内)经历的生物辅助降解过程。应当理解，生物降解在其范围内包括植入物从身体(生物环境)吸收、溶解、分解、降解、同化或以其他方式去除的过程。

本文所用的术语“聚合物”涵盖均聚物(仅具有一种类型的重复单元的聚合物)和共聚物(具有多于一种类型的重复单元的聚合物)。

本文所用的术语“可生物降解的聚合物”是指在生理条件下在体内降解的一种或多种聚合物。治疗剂的释放与可生物降解的聚合物随时间的降解同时或随后发生。

在优选的实施方案中，可生物降解的聚合物是PLGA(聚(乳酸-共-乙醇酸))。众所周知，PLGA聚合物会通过主链水解(整体侵蚀)进行降解，最终降解产物是乳酸和乙醇酸，它们是无毒的，被认为是天然代谢化合物。乳酸和乙醇酸通过克雷布斯循环转化为二氧化碳和水而被安全消除。

PLGA是通过乙醇酸和乳酸的环状二聚体的无规开环共聚合成的。连续的乙醇酸或乳酸单体单元通过酯键连接在一起。丙交酯与乙交酯的比例可以改变，从而改变产品的生物降解特性。通过改变比例，可以调整聚合物的降解时间。重要的是，药物释放特性受到药物递送系统中生物降解速率、分子量和结晶度的影响。通过改变和定制可生物降解的聚合物基质，可以改变药物输送特征。

在周围组织中存在水的情况下，PLGA主要通过整个聚合物基质中的酯键的非酶水解来裂解。PLGA聚合物具有生物相容性，因为它们在体内水解产生原始单体、乳酸和/或乙醇酸。乳酸和乙醇酸无毒，可通过克雷布斯循环转化为二氧化碳和水而安全消除。PLGA聚合物的生物相容性已在动物和人类的非眼组织和眼组织中得到进一步检验。研究结果表明聚合物具有良好的耐受性。

可以在本公开的实施方案中使用的PLGA聚合物的实例包括来自EvonikIndustries的产品线，其被标识为但不限于RG502、RG502H、RG503、RG503H、RG504、RG504H、RG505、RG653H、RG750S、RG752H、RG752S、RG753H、RG753S、RG755S、RG756S、RG757S和RG858S。

此类PLGA聚合物包括酸和酯封端的聚合物，当使用Ubbelhode尺寸0c玻璃毛细管粘度计在25℃在CHCl₃中以0.1％w/v测量时，其特性粘度范围为约0.14至约1.7dL/g。本公开的各种实施方案中使用的示例聚合物可包括D,L-丙交酯与乙交酯的摩尔比从约50:50至约85:15的变化，包括但不限于50:50、65:35、75:25和85:15。

可用于本公开的实施方案中的PLGA聚合物的其他实例包括由LakeshoreBiomaterials生产的被鉴定为但不限于DLG 1A、DLG 3A或DLG 4A的那些。此类DLG聚合物包括酸(A)和酯(E)封端的聚合物，当使用Ubbelhode尺寸0c玻璃毛细管粘度计在25℃在CHCl₃中以0.1％w/v测量时，其特性粘度范围为约0.0.5至约1.0dL/g。本公开的各种实施方案中使用的示例性聚合物可包括D,L-丙交酯与乙交酯的摩尔比从约1:99至约99:1的变化，包括但不限于50:50、65:35、75:25和85:15。

(在产品名称中以“RG”或“DLG”标识，例如RG752S)是具有通式结构(V)的聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)或PLGA：

可以合成具有不同D,L-丙交酯-乙交酯比例的不同分子量的DLG。在一种实施方案中，可以使用特性粘度为约0.05至约0.15dL/g的DLG，例如1A。在另一个实施方案中，可以使用特性粘度为约0.15至约0.25dL/g的DLG，例如2A。[0168]聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)或PLGA共聚物可以以不同的丙交酯与乙交酯比率合成，例如75:25的丙交酯:乙交酯比率。这些共聚物可以是酯封端的PLGA共聚物，如产品名称中的末端“S”所标识的，或者是酸封端的PLGA共聚物，如产品名称中的末端“H”所标识的。

在一些实施方案中，本公开的生物可降解的眼部植入物包含至少一种PLGA，其中每种PLGA独立地选自由RG502、RG502S、RG502H、RG503、RG503H、RG504、RG504H、RG505、RG506、RG653H、RG752H、RG752S、RG753H、RG753S、RG755、RG755S、RG756、RG756S、RG757S、RG750S、RG858和RG858S组成的组。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含聚(乳酸-乙醇酸)共聚物(PLGA)，其中PLGA选自由RG502、RG503H、RG503、RG752S、RG753S、RG755S、RG756S和RG858S组成的组。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含聚(乳酸-乙醇酸)共聚物(PLGA)，其中PLGA选自由RG502、RG503、RG752S、RG753S、RG755S、RG756S和RG858S组成的组。在一些实施方案中，本公开的可生物降解的眼部植入物包含一种PLGA。在一些实施方案中，PLGA具有约65:35的PLA和PLG比率。

在一些实施方案中，本公开的可生物降解的眼部植入物包含至少两种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种PLGA(例如，三至六种PLGA、三种PLGA、四种PLGA、五种PLGA)。

在一些实施方案中，本公开的生物可降解的眼部植入物包含至少两种PLGA，其中每种PLGA独立地选自由RG502、RG502H、RG503、RG503H、RG504、RG504H、RG505、RG653H、RG750S、RG752H、RG752S、RG753H、RG753S、RG755S、RG756S、RG757S和RG858S组成的组。在一些实施方案中，本公开的可生物降解的眼部植入物包含至少两种PLGA，其比例为约99％:约1％(例如，约98％:约2％、约97％:约3％、约96％:约4％、约95％:约5％、约94％:约6％、约95％:约5％、约94％:约6％、约93％:约7％、约92％:约8％、约91％:约9％、约90％:约10％、约90％:约10％、约89％:约11％、约88％:约12％、约87％:约13％、约87％:约13％、约86％:约14％、约85％:约15％、约84％:约16％、约83％:约17％、约82％:约18％、约81％:约19％、约80％:约20％、约79％:约21％、约78％:约22％、约77％:约23％、约76％:约24％、约75％:约25％、约74％:约26％、约73％:约27％、约72％:约28％、约71％:约29％、约70％:约30％、约69％:约31％、约68％:约32％、约67％:约33％、约66％:约34％、约65％:约35％、约64％:约36％、约63％:约37％、约62％:约38％、约61％:约39％、约60％:约40％、约59％:约41％、约58％:约42％、约57％:约43％、约56％:约44％、约55％:约45％、约54％:约46％、约53％:约47％、约52％:约48％、约51％:约49％、约50％:约50％、约49％:约51％、约48％:约52％、约47％:约53％、约46％:约54％、约45％:约55％、约44％:约56％、约43％:约57％、约42％:约58％、约41％:约59％,约40％:约60％、约39％:约61％、约38％:约62％、约37％:约63％、约36％:约64％、约35％:约65％、约34％:约66％、约33％:约67％、约32％:约68％、约31％:约69％、约30％:约70％、约29％:约71％、约28％:约72％、约27％:约73％、约26％:约74％、约25％:约75％、约24％:约76％、约23％:约77％、约22％:约78％、约21％:约79％、约20％:约80％、约19％:约81％、约18％:约82％、约17％:约83％、约16％:约84％、约15％:约85％、约14％:约86％、约13％:约87％、约12％:约88％、约11％:约89％、约10％、约90％、约9％:约91％、约8％:约92％、约7％:约93％、约6％:约94％、约5％:约95％、约4％:约96％、约3％:约97％、约2％:约98％，和约1％:约99％)。在一些实施方案中，本公开的生物可降解的眼部植入物包含至少两种PLGA，其比例为约50％至约75％:约25％至约50％(例如，约50％至约70％:约30％至约50％、约50％至约65％:约35％至约50％、约50％至约60％:约40％至约50％，和约55％:约45％)。在某些实施方案中，本公开的可生物降解的眼部植入物包含比例为约50％:约50％的至少两种PLGA。在实施方案中，两种PLGA是RG503和RG503H。在实施方案中，两种PLGA是RG502和RG502H。在实施方案中，两种PLGA是RG504和RG504H。

在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种不同的可生物降解的聚合物。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种PLGA，其中每种PLGA独立地选自RG502、RG502H、RG503、RG503H、RG504、RG504H、RG505、RG653H、RG750S、RG752H、RG752S、RG753H、RG753S、RG755S、RG756S、RG757S和RG858S。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种PLGA，其比例为约1％至约95％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％，和约95％):约1％至约95％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％，和约95％):约1％至约95％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％，和约95％)。

在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约40％:约40％:约20％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约10％:约50％:约40％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约40％:约40％:约20％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约10％:约50％:约40％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约60％:约20％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约50％:约30％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约15％:约50％:约35％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约15％:约45％:约40％的至少三种PLGA。在实施方案中，每个PLGA独立地选自由RG503、RG503H和RG753S组成的组。在实施方案中，每个PLGA独立地选自由RG502、RG503和RG753S组成的组。在实施方案中，每个PLGA独立地选自由RG502、RG503和RG752S组成的组。在某些实施方案中，每个PLGA独立地选自由RG502、RG503和RG755S组成的组。在某些实施方案中，每个PLGA独立地选自由RG502、RG503和RG756S组成的组。

在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少四种不同的可生物降解的聚合物。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少四种PLGA，其中每种PLGA独立地选自RG502、RG502H、RG503、RG503H、RG504、RG504H、RG505、RG653H、RG750S、RG752H、RG752S、RG753H、RG753S、RG755S、RG756S、RG757S和RG858S。在某些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少四种PLGA，其中每种PLGA独立地选自RG502、RG503、RG753S、RG755S、RG756S和RG858S。在某些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少四种PLGA，其中每种PLGA独立地选自RG502、RG503、RG753S和RG858S。

在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少四种PLGA，其比例为约1％至约95％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％，和约95％):约1％至约95％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％，和约95％):约1％至约95％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％，和约95％):约1％至约95％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％，和约95％)。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少四种PLGA，其比例为约10％至约30％(例如，约10％、约15％、约20％、约25％，和约30％):约20％至约40％(例如，约20％、约25％、约30％、约35％、约40％):约20％至约40％(例如，约20％、约25％、约30％、约35％、约40％):约10％至约30％(例如，约10％、约15％、约20％、约25％，和约30％)。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少四种PLGA，其比例为约1％至约20％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％):约40％至约60％(例如，约40％、约45％、约50％、约55％、约60％):约20％至约40％(例如，约20％、约25％、约30％、约35％、约40％):约1％至约20％(例如，约1％、约5％、约10％、约15％、约20％)。

在某些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约30％:约30％:约20％的至少四种PLGA。在某些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约10％:约50％:约30％:约10％的至少四种PLGA。可生物降解的聚合物中的四种PLGA中的每一种可独立地选自RG502、RG503、RG753S、RG755S、RG756S和RG858S。在一些实施方案中，每个PLGA独立地是RG502、RG503、RG753S或RG858S。

在一些实施方案中，可生物降解的聚合物(例如，PLGA)从约1个月至约24个月(例如，约2个月至约24个月、约5个月至24个月、约7个月至约10个月、约10个月至约24个月、约12个月至约24个月、约15个月至约24个月、约17个月至约24个月、约20个月至约24个月，和约22个月至约24个月)基本上生物降解。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物(例如，PLGA)从约3个月至约12个月(例如，约4个月至约12个月、5个月至约12个月、约5个月至约12个月、约6个月至约12个月、约7个月至约12个月、约8个月至约12个月、约9个月至约12个月、约10个月至约12个月，和约11个月至约12个月)基本上生物降解。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物(例如，PLGA)从约12个月至约18个月(例如，约13个月至约18个月、约14个月至约18个月、约15个月至约18个月、约16个月至约18个月，和约17个月至约18个月)基本上生物降解。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物(例如，PLGA)在约3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月后基本上生物降解。

本文还提供了用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成的方法，该方法包括接触可生物降解的眼部植入物，所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中该化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的至少三种PLGA。在某些实施方案中，三种PLGA选自由RG503、RG502和RG753S组成的组。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式1、3或4)或一水合物晶型(例如，形式2)。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式4)。

本文还提供了一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善血管渗漏的方法，该方法包括接触可生物降解的眼部植入物，该可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中该化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的至少三种PLGA。在某些实施方案中，三种PLGA选自由RG503、RG502和RG753S组成的组。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式1、3或4)或一水合物晶型(例如，形式2)。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式4)。

本文还提供了一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善新生血管性年龄相关性黄斑变性的方法，该方法包括接触可生物降解的眼部植入物，所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中该化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的至少三种PLGA。在某些实施方案中，三种PLGA选自由RG503、RG502和RG753S组成的组。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式1、3或4)或一水合物晶型(例如，形式2)。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式4)。

本文还提供了一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善黄斑水肿的方法，该方法包括接触可生物降解的眼部植入物，所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中该化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含至少三种PLGA。在某些实施方案中，三种PLGA选自由RG503、RG502和RG753S组成的组。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的至少三种PLGA。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约20％:约20％:约60％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物中式I化合物的浓度为约45％w/w，并且可生物降解的聚合物包含比例为约50％:约10％:约40％的RG503、RG502和RG753S。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式1、3或4)或一水合物晶型(例如，形式2)。在一些实施方案中，式I化合物是无水晶型(例如，形式4)。

植入物的制作方法

制造本文所述的可生物降解的眼部植入物的方法包括对含有化合物的可生物降解的聚合物进行溶剂浇铸、注射成型或挤出，其中所述化合物是式I化合物：

或其药学上可接受的盐。

在制造植入物之前，可以将聚合物基质和治疗剂的共混物溶解并与溶剂混合以产生在植入物主体中均匀分散的治疗剂。制备的共混物可以各自含有不同比例的多种例如三种不同的PLGA聚合物。用于生产本发明的药物组合物的PLGA聚合物可以包括但不限于RG502、RG503、RG752SRG753S和65/35PLA/PLG，所有这些都是可商购的。

以下是用于制备本发明组合物的示例性程序：例如，将聚合物以特定比例溶解在有机溶剂如二氯甲烷中。然后将治疗剂(例如艾多南坦)添加到聚合物溶液中并溶解。然后在聚四氟乙烯(PTFE)皿中于室温蒸发二氯甲烷。二氯甲烷蒸发后，留下均匀材料的薄膜。在一个实施方案中，薄膜的厚度范围为200μm至300μm。

然后使用低温研磨机将剩余的均质膜研磨成粉末。将一小部分薄膜添加到带有2至3个适当尺寸的研磨球的不锈钢低温研磨容器中，并使用液氮在5Hz预冷却2至3分钟。然后将材料从20Hz到25Hz研磨1分钟，并在5Hz下休息1分钟。该铣削/休息循环重复2至5次。所得材料是由粗到细的均质材料粉末。

在一个实施方案中，可以使用上述均质材料来制备本发明的植入物。在一个实施方案中，植入物通过注射成型形成。注射模制可以例如通过合适的注射模制机进行，例如改进的Haake MiniJet(ThermoFisher Scientific)。以下是用于制备本发明的植入物的示例性程序。

将均质粉末装载并注射到由适当尺寸(例如300μm x 12mm)的通道组成的模具中。将粉末装入通向模具的桶中，并将模具置于真空下。模具温度保持在15℃至75℃。将包围装有粉末的桶的圆筒在145℃至220℃的温度下保持10至15分钟，以熔化粉末混合物。使用220巴至330巴的注射压力并保持2至10分钟来进行注射。注射后压力保持在50巴2至10分钟。然后将模具冷却至15至23℃，然后将模具从注射挤出机中取出。然后将模制的纤维从模具中取出，然后切成具有目标重量和长度的植入物。在一些实施方案中，植入物的长度为4mm并且含有约165μg至约220μg的活性成分，例如艾多南坦。

在一个实施方案中，可以使用上述均质材料来制备本发明的植入物。在一个实施方案中，植入物通过挤出例如热熔挤出形成。热熔挤出可使用ThermoFisher Pharma miniHME微混炼机、ThermoFisher FP-Pharma-11-Twin-230x100、ThermoFisher Pharma 11双螺杆挤出机、ThermoFisher FP-Pharma-16-230x100、ThermoFisher Pharma16双螺杆挤出机或Barrell Engineering微型注射式挤出机来实施。

眼部疾病

本公开的方法包括上述艾多南坦和A-182086在预防、治疗和改善选自以下的眼部疾病中的用途：眼部新生血管形成、血管渗漏、新生血管性年龄相关性黄斑变性、新生血管性青光眼、视网膜静脉阻塞(RVO)和早产儿视网膜病变(ROP)，如下所述。

如本文所证明的，该方法的疗效通过评估新血管形成的减少来确定，或者通过眼部新生血管形成速率的降低来确定。在进一步的实施方案中，方法或治疗的疗效通过组织、视网膜灌注、视敏度、视野、对比敏感度或色觉的改善来指示。

新生血管形成和血管渗漏

眼部新生血管形成，也称为血管生成，当异常血管生长并扩散到整个视网膜和眼睛后部的组织和/或眼睛中的其他结构(例如前房)时，就会发生眼部新生血管形成。这些异常血管脆弱且经常渗漏，使视网膜留下疤痕并将其拉出位置或导致房水引流受阻，导致眼内压升高(即新生血管性青光眼)。新生血管形成起作用的眼部疾病是年龄相关性黄斑变性(AMD)，它是老年人严重视力丧失的主要原因。AMD的视力丧失是由脉络膜新生血管(CNV)引起的。新血管形成起源于脉络膜血管，并通过布鲁赫膜(通常在多个部位)生长到视网膜下色素上皮空间和/或视网膜。这些新血管的渗漏和出血会导致视力丧失。

眼部新生血管形成，也称为血管生成，当异常血管生长并扩散到整个视网膜、眼睛后部的组织和/或眼睛中的其他结构(例如前房)时，就会发生眼部新生血管形成。这些异常血管脆弱且经常渗漏，使视网膜留下疤痕并将其拉出位置或导致房水引流受阻，导致眼内压升高(即新生血管性青光眼)。

眼部新生血管形成(例如，脉络膜新生血管形成)的类型包括但不限于由于组织胞浆菌病和病理性近视导致的新生血管形成、血管样条纹、前部缺血性视神经病变、细菌性心内膜炎、贝斯特氏病、鸟弹状视网膜脉络膜病变、脉络膜血管瘤、脉络膜痣、脉络膜无灌注、脉络膜骨瘤、脉络膜破裂、脉络膜血症、慢性视网膜脱离、视网膜缺损、玻璃膜疣、内源性念珠菌性眼内炎、视网膜色素上皮乳头外错构瘤、眼底黄斑、特发性、黄斑裂孔、恶性黑色素瘤、膜增生性肾小球肾炎(II型)、金属眼内异物、牵牛花盘综合征、多发性消失性白点综合征(MEWDS)、锯齿缘新生血管、手术显微镜烧伤、视神经头凹陷、光凝、点状内层脉络膜病变、风疹、结节病、匐行性或地图样脉络膜炎，视网膜下液引流、倾斜椎间盘综合征、弓形虫性视网膜脉络膜炎、结核病、Vogt-小柳-原田综合征、糖尿病性视网膜病变、非糖尿病性视网膜病变、分支静脉阻塞、视网膜中央静脉阻塞、早产儿视网膜病变、虹膜红变、新生血管性青光眼、黄斑中心凹周围毛细血管扩张、镰状细胞性视网膜病、伊尔氏病、视网膜血管炎、VonHippel Lindau病、放射性视网膜病变、视网膜冷冻损伤、色素性视网膜炎、视网膜脉络膜缺损、单纯疱疹性角膜炎引起的角膜新生血管、角膜溃疡、角膜移植术、翼状胬肉和外伤。

在实施方案中，眼部新生血管形成或血管渗漏障碍可以是任何闭塞性或炎性视网膜血管疾病的水肿或新生血管形成，例如虹膜红变、新生血管性青光眼、翼状胬肉、血管化青光眼滤过泡、结膜乳头状瘤；脉络膜新生血管形成，例如新生血管性年龄相关性黄斑变性(AMD)、近视、既往葡萄膜炎、外伤或特发性；黄斑水肿，例如手术后黄斑水肿、继发于葡萄膜炎(包括视网膜和/或脉络膜炎症)的黄斑水肿、继发于糖尿病的黄斑水肿、以及继发于视网膜血管闭塞性疾病(即视网膜分支静脉和中央静脉闭塞)的黄斑水肿；糖尿病引起的视网膜新生血管形成，例如视网膜静脉闭塞、葡萄膜炎、颈动脉疾病引起的眼部缺血综合征、眼动脉或视网膜动脉闭塞、镰状细胞性视网膜病、其他缺血性或闭塞性新生血管性视网膜病、早产儿视网膜病变或伊尔氏病；以及遗传性障碍，例如VonHippel-Lindau综合征。

在一些实施方案中，眼部新生血管形成与选自早产儿视网膜病变、视网膜静脉阻塞、黄斑水肿、镰状细胞性视网膜病、脉络膜新生血管形成、放射性视网膜病变、新生血管性青光眼、微血管病、视网膜缺氧、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、消融诱导的新生血管形成、年龄相关性黄斑变性和血管渗漏的病症相关。

在一个实施方案中，新生血管性年龄相关性黄斑变性是湿性年龄相关性黄斑变性。在另一个实施方案中，新生血管性年龄相关性黄斑变性是干性年龄相关性黄斑变性，并且患者的特征在于发生湿性年龄相关性黄斑变性的风险增加。

在实施方案中，眼部新生血管形成与选自早产儿视网膜病变、视网膜静脉阻塞、黄斑水肿、镰状细胞性视网膜病、脉络膜新生血管形成、放射性视网膜病变、新生血管性青光眼、微血管病、视网膜缺氧、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、消融诱导的新生血管形成、年龄相关性黄斑变性和血管渗漏的病症相关。

新生血管性青光眼

在使用本文所述的艾多南坦或A-182086治疗青光眼(例如，新生血管性青光眼)中，“治疗有效量”可以通过评估视网膜血流(RBF)相对于护理标准可实现的改善(降低眼内压(IOP))来确定。对于青光眼(例如，新生血管性青光眼)适应症，健康兔眼模型中血流的改善可用于预测人类药效反应(PD)。由于兔子和人眼的解剖和功能相似，因此通常使用兔子来评估针对人类眼部疾病的化合物的眼部PK/PD关系。此前，兔眼玻璃体内注射内皮素1(ET-1)已被证明会引起显著的血管收缩和视神经损伤(Sasaoka M.等人，Exp Eye Res2006；Sugiyama T.等人，Arch Ophasemol 2009)。该模型中的功效以逆转玻璃体内施用一定浓度的ET-1引起的灌注损伤为基准。例如，可以在与人类青光眼患者血浆和房水中观察到的水平相当的浓度下实现功效(Li S.等人，眼科杂志2016)。

相关动物青光眼模型的其他实例是Morrison眼压升高的大鼠模型和激光诱导的非人灵长类动物(NHP)青光眼模型。Morrison大鼠模型中的青光眼是通过巩膜外静脉施用高渗盐水持续升高眼压而诱发的。在激光诱导的NHP青光眼模型中，在持续升高IOP后，视神经头血流量已显示减少(Wang L.等人，Invest Ophamol Vis Sci 2012)。此外，视神经头血流量的减少已被证明与视神经的长期结构变化相关(Cull G.等人，Invest Ophasemol VisSci 2013)。

上述青光眼模型中的功效被定义为眼压降低、视神经头或视网膜血流相对于基线的改善、预防或减缓结构性神经退行性变化的进展，例如通过光学相干断层扫描(OCT)测量的视网膜神经纤维层厚度或平装上的视网膜神经节细胞计数，以及使用Edonentan或A-182086治疗后的功能变化，例如视网膜电图(ERG)或对比敏感度。

据认为，艾多南坦或A-182086对视网膜血流的影响可以通过血管半径(r)以泊肃叶定律来评估。使用内皮素拮抗剂增加(r)会引起比通过降低IOP增加灌注压所实现的血流量更显著的增加：

血流量＝(灌注压xπr⁴⁾/(8ηl)

其中

l：血管长度

r：血管半径

η：血液粘度

灌注压：平均动脉压-IOP

此外，艾多南坦或A-182086可以通过独立于视网膜/视神经头组织灌注改善的机制来降低IOP和/或预防RGC死亡。因此，通过使用某些特定的内皮素受体拮抗剂，可以改变上述参数中的一项(r)或多项(IOP)以改善RBF，从而达到治疗青光眼的疗效。

在一些实施方案中，青光眼患者一经诊断就开始治疗。在一些实施方案中，艾多南坦或A-182086使用玻璃体内、局部、脉络膜上或植入物递送平台(例如可生物降解的眼部植入物)局部施用到眼睛后部，频率为每3至12个月(例如，每3至6个或每4至6个)一次。

视网膜静脉阻塞(RVO)

视网膜静脉阻塞(RVO)是一种视网膜血管疾病，目前的治疗方法是玻璃体内注射抗VEGF药物来抑制导致黄斑水肿的生长因子，并玻璃体内注射皮质类固醇来对抗导致水肿的炎症成分。非常需要使用艾多南坦和A-182086疗法通过改善组织灌注和减少炎症来治疗RVO，同时避免全身免疫抑制的不良影响和/或类固醇的局部不良反应。

RVO目前采用玻璃体内类固醇和抗VEGF药物治疗。我们认为改善现有血管的灌注将减少黄斑水肿和VEGF上调的程度以及表现为RVO的下游适应不良变化。为了测试功效，可以使用缺血性视网膜病变的临床前小鼠模型。小鼠氧诱导视网膜病变是一种可重复且可量化的增殖性视网膜新生血管模型，适用于检查包括RVO在内的许多缺血性视网膜病变的视网膜新生血管的发病机制和治疗干预。该模型是通过将1周大的C57BL/6J小鼠暴露于75％氧气中5天，然后暴露于室内空气(如前所述)而诱导的(Smith LEH等人，Invest OphasemolVis Sci 1994)。可以通过研究视网膜缺氧和新生血管形成来评估这种缺血性视网膜病变临床前模型的疗效。本文所述的“治疗有效量”的艾多南坦或A-182086可以通过改善组织灌注并减少由ET-1介导的炎症同时避免局部类固醇的不良作用而添加到当前的护理标准中。在治疗RVO的一些实施方案中，使用玻璃体内、局部、脉络膜上或植入物递送平台(例如，可生物降解的眼部植入物)将艾多南坦或A-182086局部施用至眼睛后部。给药频率将根据患者的病程和对治疗的反应而变化。

早产儿视网膜病变(ROP)

早产儿视网膜病变(ROP)是一种影响早产儿的视网膜血管增生性疾病。ROP仍然是全球失明和视力障碍的一个主要可预防原因。随着围产期护理的改善、中度早产儿生存率的提高以及氧气输送和监测资源的有限，在发展中国家，更多成熟的早产儿正在患上严重的ROP。

ROP的病理生理学特征有两个阶段。I期ROP是由于出生后立即开始的血管闭塞，继发于VEGF和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的显著减少。第二阶段开始于月经后33周(PMA)左右。在此阶段，VEGF水平增加，尤其是当视网膜缺氧、视网膜代谢增加和对氧气的需求增加导致异常血管增殖时。对于晚期ROP，可采用激光消融视网膜无血管、ROP早期治疗(ETROP)方案、玻璃体内注射抗VEGF抗体(如贝伐珠单抗)和玻璃体切除术来保护中心视力并预防视网膜脱离。长期并发症，如难治性错误、ROP复发和视网膜脱离风险，需要眼科医生在青春期及以后持续随访。

ROP是由早产继发的视网膜血管发育不全引起的严重缺血引起的。因此，作为本发明的一个方面，我们相信用艾多南坦或A-182086改善现有血管的灌注将减少缺血和VEGF上调的程度以及表现为ROP的下游适应不良变化。为了测试功效，可以使用ROP的临床前小鼠模型。小鼠氧诱导视网膜病变是一种可重复且可量化的增殖性视网膜新生血管模型，适用于检查ROP视网膜新生血管的发病机制和治疗干预。该模型是通过将1周大的C57BL/6J小鼠暴露于75％氧气中5天，然后暴露于室内空气(如前所述)而诱导的(Smith LEH等人，InvestOphasemol Vis Sci 1994)。可以通过研究视网膜缺氧和新生血管形成来评估该ROP临床前模型的功效。如本文所述的“治疗有效量”的艾多南坦或A-182086将通过改善组织灌注和减少由VEGF诱导的病理性新血管形成来补充当前的护理标准。在一些实施方案中，根据患者的病程和对治疗的反应，根据需要将药物使用玻璃体内、局部、脉络膜上或植入物递送平台(例如，可生物降解的眼部植入物)局部施用至眼睛后部，频率为每4至6周一次。例如，根据患者的病程和对治疗的反应，根据需要以每5周一次的频率通过玻璃体内注射将药物局部施用到眼睛后部。

药物组合物

本文所述的一些实施方案涉及药物组合物，其可包含治疗有效量的本文所述的艾多南坦和A-182086之一或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或其组合。这样的拮抗剂或其药学上可接受的盐可以是晶型或无定形形式，每种形式都可以用于药理学上可接受的用途。

术语“药物组合物”是指本文公开的一种或两种化合物与其他化学组分(例如稀释剂或载体)的混合物。该药物组合物有利于将化合物施用于生物体。药物组合物通常会根据特定的预期施用途径进行调整。

一些药物组合物涉及制备药学上可接受的盐。药学上可接受的盐包括本发明化合物中存在的酸性或碱性基团的盐。药学上可接受的酸加成盐包括但不限于盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、糖二酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐(即，1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐))。本发明的某些化合物可以与各种氨基酸形成药学上可接受的盐。合适的碱盐包括但不限于铝盐、钙盐、锂盐、镁盐、钾盐、钠盐、锌盐和二乙醇胺盐。有关药学上可接受的盐的综述，请参见Berge等人，66J.PHARM。SCI.，1-19(1977)。

术语“药学上可接受的”定义了对于其预期用途是安全且有效的并且具有期望的生物和药理学活性的载体、稀释剂、赋形剂、盐或组合物。

如本文所用，“载体”是指促进化合物掺入细胞或组织中的化合物。例如但不限于，二甲基亚砜(DMSO)是常用的载体，其促进许多有机化合物摄取到受试者的细胞或组织中。

如本文所用，“稀释剂”是指药物组合物中缺乏药理学活性但可能是药学上必需或期望的成分。例如，稀释剂可用于增加有效药物的体积，该有效药物的质量对于制造和/或施用而言太小。它也可以是用于溶解通过注射、摄入或吸入施用的药物的液体。本领域稀释剂的常见形式是缓冲水溶液，例如但不限于模拟人血液组成的磷酸盐缓冲盐水。

如本文所用，“赋形剂”是指添加到药物组合物中以向组合物提供但不限于体积、稠度、稳定性、结合能力、润滑、崩解能力等的惰性物质。“稀释剂”是赋形剂的一种。

本文描述的药物组合物本身可以施用于人类患者，或者以药物组合物的形式施用于人类患者，其中它们与其他活性成分(如在联合治疗中)，或载体、稀释剂、赋形剂或其组合混合。适当的制剂取决于所选择的给药途径。本文所述的化合物的配制和施用技术是本领域技术人员已知的。

本文公开的药物组合物可以以本身已知的方式制造，例如通过常规混合、溶解、造粒、磨细、乳化、包封或包埋方法。参见，例如，Encapsulation Processes，in：FoodPowders，2005，199-299。另外，活性成分的含量可有效实现其预期目的。本文公开的药物组合中使用的化合物可以以药学上可接受的盐的形式提供。

优选以局部方式施用本发明的化合物或药物组合物，作为局部眼用制剂或通过将化合物或药物组合物直接注射至眼组织，通常以储库或持续释放制剂的形式。局部施用的方式可以是制剂的玻璃体内、脉络膜上、眼周或结膜下注射，或使用植入技术或局部施用。例如，该化合物以脂质体制剂的形式给药，该制剂缓慢释放该化合物，维持所需的药理作用。或者，可以通过众所周知的方法制备聚乙烯醇纳米颗粒，以提供用于局部或眼内应用的持续或延长释放制剂。

此外，可以在靶向药物递送系统中施用该化合物。靶向药物递送系统的实例包括但不限于由均匀分散在PLGA聚合物中的艾多南坦组成的可生物降解的眼部植入物。在一些实施方案中，可生物降解的眼部植入物是持续释放的可生物降解的眼部植入物。

在一些实施方案中，药物组合物是眼用制剂，其包含治疗有效量的一种或多种本文所述的内皮素受体拮抗剂或其药学上可接受的盐。本文所用的“眼用制剂”是指一种专门的剂型，设计用于滴注到眼睛外表面(局部)、在眼睛内部(眼内)或邻近(眼周)给药或与眼科装置结合使用。在一些实施方案中，眼用制剂是溶液、混悬液或软膏的形式。在其他实施方案中，眼用制剂是凝胶、凝胶形成溶液、眼插入物、用于局部或优选玻璃体内注射的微米/纳米颗粒制剂或植入物的形式。

在一些实施方案中，眼用制剂包含防腐剂。合适的防腐剂的实例包括但不限于阳离子润湿剂(例如苯扎氯铵)、有机汞(例如硝酸苯汞、乙酸苯汞)、有机酸或其酯(例如山梨酸、对羟基苯甲酸酯如羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯)和醇替代品(例如，氯丁醇、苯乙醇)。防腐剂可以以约0.002％w/v至约0.5％w/v(例如0.01-0.25％w/v)范围内的量存在于眼用制剂中。眼用制剂还可包含防腐助剂。合适的防腐助剂的实例包括但不限于乙二胺四乙酸(EDTA)。

在一些实施方案中，眼用制剂包含一种或多种另外的赋形剂或试剂以赋予粘度或润滑、稳定活性成分以防止分解、增加活性或非活性成分的溶解度、调节张力或充当溶剂。用于赋予粘度或润滑的赋形剂或试剂的实例包括羟丙甲纤维素、卡波姆974P、羟乙基纤维素(HEC)、聚乙烯醇、透明质酸钠、羧甲基纤维素钠、卡波普940、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、泊洛沙姆、木葡聚糖、藻酸、藻酸钠、结冷胶、邻苯二甲酸醋酸纤维素和黄原胶。作为稳定剂的赋形剂或试剂的实例包括亚硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠和硫酸钠/硫酸，它们可以充当抗氧化剂。作为增溶剂的赋形剂或试剂的实例包括但不限于聚维酮、肌酸酐、蓖麻油和环糊精(例如，γ-环糊精)。用于调节张力的赋形剂或试剂的实例包括但不限于氯化钠、氯化钾、二水氯化钙、六水氯化镁、糖(例如蔗糖、麦芽糖、右旋糖等)、甘油、丙二醇、甘露醇、抗坏血酸和乙酰半胱氨酸。

在一些实施方案中，眼用制剂包含一种或多种缓冲剂以调节pH。用于调节pH的缓冲剂的实例包括但不限于柠檬酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、硼酸、七水合物、三水合乙酸钠、二水合柠檬酸钠、组氨酸和磷酸盐缓冲盐水(PBS)。所得组合物可具有5.0-8.5的pH值(例如，5.0-6.0、5.2-5.8、6.0-8.0、6.6-7.8、6.2-8.2和6.2-7.5)

在一些实施方案中，眼用制剂包含一种或多种表面活性剂。表面活性剂的实例包括油酸的脱水山梨糖醇醚酯(例如聚山梨醇酯或吐温20和80)和泰洛沙泊。

一次可注射到人眼的体积为，通过玻璃体内途径约50-90μL，通过视网膜下途径最多450μL，通过脉络膜上途径最多200μL，以及通过局部途径约40-50μL(例如作为滴眼剂局部给药)。这些路线中使用的针尺寸通常为27至30G。剂量取决于可以配制以适合每种适应症的体积、效力、目标功效和药代动力学特征的浓度。一般来说，眼睛注射的频率不会超过每只眼睛每月一次。对于局部给药(例如滴眼剂)，在大多数情况下，向眼睛给药的频率不超过每天一次或两次。

在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约1μg至约1mg(例如，约1μg、约5μg、约10μg、约25μg、约50μg、约75μg、约100μg、约125μg、约150μg、约175μg、约200μg、约250μg、约500μg、约700μg，和约1mg)。第一示例性制剂包含约1μg至约1mg上述化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)、约10mM组氨酸HCl、约10％α,α-海藻糖二水合物和约0.01％聚山梨醇酯20。第二示例性制剂包含约1μg至约1mg的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)、约10mM磷酸钠、约40mM氯化钠、约0.03％聚山梨酯20和约5％蔗糖。

在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约1μg至约500μg(例如，约10μg至约500μg、约20μg至约500μg、约30μg至约500μg、约40μg至约500μg、约50μg至约500μg、约60μg至约500μg、约70μg至约500μg、约80μg至约500μg、约90μg至约500μg、约100μg至约500μg、约100μg至约500μg、约125μg至约500μg、约150μg至约500μg、约175μg至约500μg、约200μg至约500μg、约225μg至约500μg、约250μg至约500μg、约275μg至约500μg、约300μg至约500μg、约325μg至约500μg、约350μg至约500μg、约375μg至约500μg、约400μg至约500μg、约425μg至约500μg、约450μg至约500μg，和约475μg至约500μg)。

在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约10μg至约500μg。在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约10μg至约300μg。在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约1μg、约5μg、约10μg、约15μg、约20μg、约25μg、约30μg、约35μg、约40μg、约45μg、约50μg、约55μg、约60μg、约65μg、约70μg、约75μg、约80μg、约85μg、约90μg、约95μg、约100μg、约110μg、约120μg、约130μg、约140μg、约150μg、约160μg、约170μg、约180μg、约190μg、约200μg、约210μg、约220μg、约230μg、约240μg、约250μg、约260μg、约270μg、约280μg、约290μg、约300μg、约310μg、约320μg、约330μg、约340μg、约350μg、约360μg、约370μg、约380μg、约390μg、约400μg、约410μg、约420μg、约430μg、约440μg、约450μg、约460μg、约470μg、约480μg、约490μg，和约500μg。第一示例性制剂包含约10μg至约500μg(例如300μg)上述化合物(例如内皮素受体拮抗剂)、约10mM组氨酸HCl、约10％α,α-海藻糖二水合物和约0.01％的聚山梨酯20。第二示例性制剂包含约10μg至约500μg(例如300μg)的化合物(例如内皮素受体拮抗剂)、约10mM磷酸钠、约40mM氯化钠、约0.03％聚山梨酯20，和约5％的蔗糖。

在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约150μg至约300μg。在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约165μg至约220μg(例如，约165μg、约170μg、约175μg、约180μg、约185μg、约190μg、约195μg、约200μg、约205μg、约210μg、约215μg，和约220μg)。

在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约300μg至约600μg。在一些实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂，例如式I化合物)的剂量范围为约330μg至约500μg(例如，约330μg、约335μg、约340μg、约345μg、约350μg、约355μg、约360μg、约365μg、约370μg、约375μg、约380μg、约385μg、约390μg、约395μg、约400μg、约405μg、约410μg、约415μg、约420μg、约425μg、约430μg、约435μg、约440μg、约445μg、约450μg、约455μg、约460μg、约465μg、约470μg、约475μg、约480μg、约485μg、约490μg、约495μg，和约500μg)。

在进一步的实施方案中，玻璃体内制剂包含的化合物(例如，内皮素受体拮抗剂)的剂量范围为约500μg至约4mg(例如，约500μg、约725μg、约1mg、约1.5mg、约2mg、约2.5mg、约3mg，和约3.5mg)。第一示例性制剂包含约500μg至约1mg上述化合物(例如内皮素受体拮抗剂)、约0.014％磷酸二氢钾、0.08％磷酸二氢钠、0.7％氯化钠、0.02％聚山梨醇酯和0.5％羧甲基纤维素钠。第二示例性制剂包含约500μg至约1mg上述化合物(例如内皮素受体拮抗剂)、约0.04％磷酸二氢钠一水合物、约0.3％磷酸二氢钠七水合物、0.63％氯化钠和约1％至约2.3％透明质酸钠。

无需进一步详细说明，相信本领域技术人员基于上述描述能够最大限度地利用本发明。因此，以下具体实施例，即实施例1-15，应被解释为仅是说明性的，而不以任何方式限制本公开的其余部分。

实施例

实施例1：化合物理化和生化表征

下表1提供了上述艾多南坦和A-182086的物理化学和生物化学数据。如表1所示，在pH 2，A-182086的溶解度优于艾多南坦。另一方面，在pH 7，艾多南坦的溶解度优于A-182086。

表1.化合物的理化和生化表征

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^A数据来自无定形形式。

^b考虑表面电荷分布(主要是O和N)的计算性质。PSA约为90或更低的化合物预计可以穿过血脑屏障。

在上表中，物理化学数据例如溶解度是按照本领域已知的标准方案获得的(参见例如Reis等人，Mini Rev Med Chem.，2010，10(11)：1071-6；Avdeef等人，Expert OpinDrug Metab Toxicol.,2005,1(2):325-42；Bharate等人，Comb Chem High ThroughputScreen.,2016,19(6):461-9；Jain等人，J Pharm Biomed Anal.,2013,86:11-35.)；生化数据，即ET_A/ET_B效力，按照本领域已知的方案获得(参见例如Kirkby等人，Br J Pharmacol.，2008，153(6)：1105-19；和Maguire等人，Br J Pharmacol.，2014，171(24)：5555-72.)。

实施例2：用于兔玻璃体内使用的艾多南坦制剂

将适量的艾多南坦溶解在纯PEG400中，然后添加15％ CD(HP-β-环糊精)溶液。测得PEG400的最终浓度为20％。根据艾多南坦的量，目标浓度为5mg/ml和0.5mg/ml。使用0.25微米过滤器过滤所得溶液。

实施例3：艾多南坦和ET-1在兔模型中的效果

成年雄性荷兰带兔进行20μl玻璃体内注射(IVT)0.5μg ET-1，随后在ET-1给药30分钟后进行20μl玻璃体内注射10-100μg艾多南坦。施用ET-1和艾多南坦后，在预先指定的时间点(30、45、60和75分钟)进行IOP、光学相干断层扫描-血管造影(OCT-A)和荧光素血管造影(FA)，以评估ET-1+/-艾多南坦引起的视网膜血流变化。如图1所示，ET-1给药在45分钟内有效诱导视网膜血管床中的明显血管收缩。图2显示了随后在90分钟内(艾多南坦施用后60分钟)施用10μg艾多南坦逆转了ET-1的效果。

实施例4：含有艾多南坦的缓释制剂的制备

浓缩艾多南坦分散液是通过将艾多南坦与水、维生素E-TPGS和γ-环糊精组合制成的。将这些成分混合以分散艾多南坦，然后高压灭菌。透明质酸钠可以作为无菌粉末购买，或者通过过滤稀溶液然后冻干以产生无菌粉末来灭菌。将无菌透明质酸钠溶解在水中以制成含水浓缩物。将浓缩的艾多南坦分散体混合并作为浆料添加至透明质酸钠浓缩物中。足量地加入水(适量，足够多，在这种情况下是制备均匀混合物、分散体、凝胶或悬浮液所需的量)，并将混合物混合直至均匀。下表2提供了这些组合物的示例：

表2.含有艾多南坦的缓释制剂的组成

	组合物A	组合物B
			艾多南坦	2.0％(重量/体积)	8.0％(重量/体积)
透明质酸钠(聚合)	2.5％(重量/体积)	2.3％(重量/体积)
			氯化钠	0.63％(重量/体积)	0.63％(重量/体积)
磷酸氢二钠，七水合物	0.30％(重量/体积)	0.30％(重量/体积)
			磷酸二氢钠，一水合物	0.04％(重量/体积)	0.04％(重量/体积)
注射用水	适量	适量

这些示例性组合物含有足够浓度的高分子量(即聚合)透明质酸钠，以便在玻璃体内注射到人眼中时形成凝胶状塞或药物贮库。优选地，所使用的透明质酸盐的平均分子量小于200万，并且更优选地，所使用的透明质酸盐的平均分子量在约130万至160万之间。实际上，艾多南坦颗粒被捕获或保留在该透明质酸盐粘性塞内，使得在玻璃体内注射制剂时不会发生不希望的羽化现象。因此，药物颗粒不利地直接沉降在视网膜组织上的风险显著降低，例如，相对于使用具有类似水的粘度的组合物，例如40。由于透明质酸钠溶液经历显著的剪切稀化，这些制剂可以通过25号、27号甚至30号针轻松注射。

实施例5：局部艾多南坦制剂的制备

局部用艾多南坦制剂可以按照已知方法(例如WO 2016156639 A1)来制备。更具体地，通过磁力搅拌将20gRH40溶解在75mL去离子水中，搅拌直至完全溶解。然后将1.5g氨丁三醇添加到所得溶液中并搅拌15分钟，实现完全溶解。添加0.5g艾多南坦并搅拌15分钟，确保完全溶解。然后加入2克甘氨酸和1克硼酸并搅拌直至完全溶解。向所得溶液中加入足量的100mL去离子水。最终溶液用滤纸过滤，得到澄清、无色溶液，pH为8.06。将溶液装入体积为5mL的滴管瓶滴眼液中。

实施例6：含有艾多南坦的局部滴眼液纳米颗粒

采用溶剂蒸发技术制备纳米粒子。制备120mg 50:50PLGA在60mL乙酸乙酯中的溶液。在涡轮搅拌下向该溶液中加入50ml水与12mg艾多南坦和0.5mg聚乙烯醇的水溶液。将所得混合物在连续搅拌和真空下放置2小时。然后将所得制剂超速离心并用水洗涤3次以从介质中除去纳米颗粒。将由此获得的纳米颗粒在真空烘箱中干燥，并在评估后，分散在足以达到5mg/1mL艾多南坦的浓度的等渗水溶液中。

实施例7：青光眼临床前研究

使用健康兔模型来评估艾多南坦和/或A-182086或其药学上可接受的盐的药效学作用(体内)。这些研究是用不同剂量的所选内皮素拮抗剂进行的。通过将内皮素拮抗剂与当前的护理标准相结合来进行其他动物研究。Morrison大鼠青光眼模型、急性眼压升高大鼠模型和非人灵长类动物激光诱导青光眼模型用于评估不同剂量的所选内皮素拮抗剂在有和没有标准护理的情况下的视神经头血流量和视网膜神经节细胞损失率。

通过局部施用ET-1诱导灌注损伤后，测量不同剂量的所示内皮素受体拮抗剂在健康兔模型中血流的改善。对于不同剂量的指定内皮素受体拮抗剂，测量非人灵长类青光眼模型中视神经头血流量和视网膜神经纤维层(RNFL)厚度的变化。结果显示，由于使用选定的内皮素受体拮抗剂，RGC存活率、视网膜和视神经头血流量得到改善，RNFL变薄速度减慢。根据健康兔子和非人灵长类青光眼模型的结果预测人类的给药方案。

评估兔视网膜血流变化的药效学研究

为了评估在兔中玻璃体内相继施用内皮素-1(ET-1)和拮抗剂艾多南坦对视网膜血流的影响，兔子(Oryctolagus cuniculus)左眼玻璃体内注射20μLET-1，然后玻璃体内注射2(或3)种不同剂量(例如0.1μg、0.5μg、2.5μg)的20μL艾多南坦。进行脉搏氧、眼压计、光学相干断层扫描血管造影(OCTA)、荧光素血管造影(FA)和视网膜渗漏评分进行评估。兔子中的剂量反应显示在图8A和8B中。

在兔玻璃体内递送的艾多南坦的药代动力学和耐受性分析

为了确定艾多南坦在兔子玻璃体内给药后的药代动力学和安全性，兔子(Oryctolagus cuniculus)接受双侧玻璃体内注射(20μL注射体积/眼)。注射后，用氯胺酮/赛拉嗪混合物使动物镇静，然后用过量的戊巴比妥钠(Euthasol)对动物实施安乐死。指定用于药代动力学分析的动物在不同时间点(例如12、16、24、36和48小时)被安乐死。从耳缘静脉或心脏穿刺(仅末梢出血)抽取至少1.0mL全血至K₂EDTA管中用于血浆收集并进行处理以进行分析性分析。

安乐死后，眼睛立即被摘除。通过注射器取出双眼的房水并速冻用于分析。冷冻时解剖眼睛以分离各种眼组织并尽量减少药物扩散到邻近组织。将左眼和右眼的组织收集在不同的小瓶中进行分析。收集的组织包括血浆和房水、虹膜/睫状体(ICB)、视网膜、玻璃体液和RPE/脉络膜。玻璃体内递送的艾多南坦在兔体内的药代动力学特性如图9A、图9B、图9C和图9D中所示。

在兔中局部给药的艾多南坦的药代动力学分析

为了测定兔子局部给药后艾多南坦的药代动力学特性，兔子(荷兰带兔)双眼接受滴眼液(100μg艾多南坦，35μL剂量体积/眼)。给药后，在不同时间点(例如10分钟(罐给药(pot-dose)后立即)、2小时和7小时)对动物(N＝2)实施安乐死，并收集组织用于分析。收集的组织包括血浆、视网膜、玻璃体和球结膜。局部递送的艾多南坦在兔体内的药代动力学特性如图10所示，其显示在单次局部应用后在所有时间点检查的所有组织中均检测到艾多南坦。

在青光眼的Morrison大鼠模型中的功效研究

成年雄性和雌性退休饲养棕色挪威大鼠(大约8至11个月的年龄组)获自Envigo(印第安纳州印第安纳波利斯)。在IOP升高手术之前收集基线IOP测量值和图形视网膜电图(PERG)幅度(以确保IOP和PERG幅度在预期值范围内)。大鼠一只眼(左眼)的眼压升高，而相应的右眼作为对侧对照。提高大鼠眼压的Morrison法通过以下方法实施：通过巩膜外静脉注射50μL高渗盐水以使小梁网硬化。在整个实验期间，每周测量两次眼压。手术后七至十天，在大鼠的手术眼中观察到眼压升高。连续两天检测到IOP升高后，开始局部施用滴眼液(在IOP升高的眼睛中每剂受试化合物20μL(100μg))，每周进行5天，总计四周。在治疗第4周，进行PERG分析，并通过过量的戊巴比妥(Fatal-Plus)处死大鼠。从大鼠眼中收集房水，冷冻并运输用于分析。准备好视网膜平片，用RGC标记物、Brn3a抗体进行免疫染色，并在两个偏心点(中央和外周)对存活的RGC进行计数。

在本研究中，Morrison模型用于诱导成年雄性退休饲养棕色挪威大鼠出现高眼压，如Morrison等人之前所述(Morrison JC、Moore CG、Deppmeier LM、Gold BG、MeshuulCK、Johnson EC.A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.ExpEye Res.1997；64(1):85-96)。

获得免疫染色的视网膜平片以测量视网膜神经节细胞(RGC)计数。为了获得免疫染色的视网膜平片，在治疗后对动物实施安乐死，然后摘除它们的眼睛。将眼杯在4％多聚甲醛(PFA)中于4℃固定过夜，并准备视网膜平面支架用于收集图像。使用免疫染色视网膜平片的图像进行视网膜神经节细胞(RGC)计数。这些图像被上传到ImageJ，这是一款专为生物学研究而设计的照片编辑器(Rasband，1997-2018)，并且标记的视网膜神经节细胞在两个偏心率(中央和外围)处进行手动计数。图5A显示媒介物和艾多南坦之间周边视网膜中RGC计数的比较，以及图6A显示媒介物与A-182086之间的比较。

图形ERG(PERG)用于评估RGC功能。为获得图形erg记录，按照Porciatti等人描述的方法使用UTAS视觉电诊断系统(LKC,Gaithersburgh,MD,USA)(Porciatti V,Saleh M,Nagaraju M.The pattern electroretinogram as a tool to monitor progressiveretinal ganglion cell dysfunction in the DBA/2J mouse model ofglaucoma.Invest Ophthalmol Vis Sci.2007；48(2):745-751)。简而言之，从放置在角膜表面下部的DTL-plus电极获取PERG信号，并使用EMWIN软件(LKC)分析PERG波。计算主要正波(P1)和负波(N2)幅度之间的差异，以解读PERG幅度。图5B显示了媒介物和艾多南坦之间IOP介导的PERG变化，以及图6B显示了媒介物和A-182086之间的变化。

RGC计数和PERG变化表明，艾多南坦和A-182086均防止Morrison青光眼大鼠模型中的RGC损失并维持RGC功能，如图5A、图5B、图6A和图6B所示。

艾多南坦或A-182086在大鼠中局部或口服给药的药代动力学分析

为了测定艾多南坦或A-182086在大鼠局部给药后的药代动力学特性，大鼠(棕色挪威大鼠)接受滴眼剂(100μg艾多南坦，20μL剂量体积/只；或100μgA-182086，20μL剂量体积/眼)。为了测定艾多南坦或A-182086在大鼠口服给药后的药代动力学特性，大鼠(棕色挪威大鼠)接受口服给药10mg/kg或50mg/kg艾多南坦，或口服给药1.7mg/kg或17mg/kg的A-182086。给药后，在不同时间点(例如4小时和8小时)对动物(N＝2)实施安乐死，并收集组织用于分析。收集的组织列表包括血浆、视网膜/视网膜色素上皮(RPE)/脉络膜、玻璃体液和房水。图5C显示了大鼠中局部或口服施用的艾多南坦的药代动力学特性。图6C显示了大鼠中局部或口服施用的A-182086的药代动力学特性。图5C和图6C显示，局部施用后4和8小时在视网膜/RPE/脉络膜、房水和玻璃体液中检测到艾多南坦和A-182086。这些数据还表明，口服艾多南坦后，在房水中可检测到艾多南坦(17mg/kg)，在视网膜/RPE/脉络膜和玻璃体液中可检测到艾多南坦(1.7和17mg/kg)，并且在口服A-182086后，在视网膜/RPE/脉络膜中可检测到A-182086(50mg/kg)。

实施例8：激光诱导青光眼，非人灵长类动物研究-药效学研究

本研究使用非人灵长类动物(恒河猴、猕猴)。每只动物的一只眼睛通过重复激光光凝小梁网来诱导眼内压(IOP)升高。重复成像以监测视神经头(ONH)和视网膜结构变化。

艾多南坦对IVT给药后视神经头血流的影响

一项研究比较了三种非人灵长类动物的实验性青光眼眼和对侧健康眼(对照)的整体平均模糊率(MBR)以及MBR相对于基线随时间的变化(作为激光诱导的青光眼模型中ONH血流的指标)。更具体地，将媒介物对照、0.02mg/mL艾多南坦、0.2mg/mL艾多南坦或2.0mg/mL艾多南坦玻璃体内施用(50μL)至三种非人灵长类动物(恒河猴，猕猴)中每种的青光眼眼。然后使用激光散斑血流成像(LSFG)在6小时内测量ONH血流，如图7A-7L所示。这些图显示了在IVT施用单独的媒介物(图7A、图7E和图7I)、0.02mg/mL的艾多南坦(图7B、图7F和图7J)、0.2mg/mL的艾多南坦(图7C、图7G和图7K)或2.0mg/mL的艾多南坦(图7D、图7H和图7L)后，三种非人灵长类动物中的ONH血流量。图7A-7L揭示了用艾多南坦治疗后ONH血流以剂量依赖性方式改善。来自三种非人灵长类动物的汇总结果显示在图7M中，其显示与对照眼相比，艾多南坦明显表现出与剂量相关的ONH血流增加，这是由于实验性青光眼眼中视网膜动脉、静脉和毛细血管扩张所致。

在上述三种非人灵长类动物之一中，当以2.0mg/mL施用艾多南坦时，在不同的选定时间点进行LSFG扫描。结果如图7N所示。

艾多南坦局部给药后对眼压的影响

对右眼(OD)患有激光诱导青光眼的三只非人灵长类动物局部施用单剂量0.5％噻吗洛尔或单剂量2mg/mL艾多南坦，并按随机顺序进行1周清除。

研究结果：

对照1：每只眼睛单剂量局部使用50μL 0.5％的噻吗洛尔，从给药前到给药后(120分钟)，眼压降低约20％。

对照2：每只眼睛单剂量局部使用50μL 0.5％的噻吗洛尔，从给药前到给药后(120分钟)，眼压降低约30％。

非人灵长类动物1：50μL艾多南坦滴眼液(2mg/mL)在实验性青光眼眼中显示，从给药前到给药后(120分钟)，眼压降低了约60％，而在对侧健康眼中显示，从给药前到给药后(120分钟)，眼压降低了约10％。

非人灵长类动物2：50μL艾多南坦滴眼液(2mg/mL)在实验性青光眼眼中显示，从给药前到给药后(15分钟)眼压降低约50％，从给药前到给药后(120分钟)眼压降低约30％。50μL艾多南坦滴眼液(2mg/mL)在对侧健康眼中显示，从给药前到给药后(15分钟)眼压降低约20％，从给药前到给药后(120分钟)眼压降低约0％。

非人灵长类动物3：50μL艾多南坦滴眼液(2mg/mL)在实验性青光眼眼中显示，从给药前到给药后(15分钟)眼压降低约40％，从给药前到给药后(120分钟)眼压降低约40％。50μL艾多南坦滴眼液(2mg/mL)在对侧健康眼中显示，从给药前到给药后(15分钟)眼压降低约10％，从给药前到给药后(120分钟)眼压降低约40％。

实施例9：配制用于在氧诱导缺血性视网膜病变小鼠中研究的艾多南坦

在含有羟丙基β环糊精(HPβCD)和羧甲基纤维素钠(CMC)的生理相容系统中，以0.05％w/w和0.2％w/w活性物浓度制备合适的艾多南坦局部制剂，两者均得自Sigma-Aldrich。HPβCD以15％w/w的浓度溶解在pH 7.4的PBS中。向该溶液中添加浓度为0.3％w/w的低分子量CMC。混合溶液直至聚合物完全溶解并润湿。然后将活性成分溶解在适当体积的具有0.3％w/w CMC的15％ HPβCD中。将活性溶液置于高压釜中并加热至120℃持续15分钟并使其冷却至室温。然后将溶液通过0.22μm PVDF过滤器过滤。

实施例10：在患有氧诱导缺血性视网膜病变的小鼠中的研究

使用小鼠模型获得氧诱导缺血性视网膜病变(OIR)小鼠不同时间点的视网膜缺氧面积，如图4所示。7日龄新生C57BL/6小鼠从出生后(P)7天到P12暴露于75％氧气。在P12恢复正常含氧量后，通过每天两次的艾多南坦(0.05％和0.2％溶液，实施例9)或媒介物对照的局部滴眼剂(5μL)以及每天一次腹膜内注射1mg/kg的阿柏西普来治疗小鼠。治疗5天后收获组织并进行异凝集素-IB4染色以用于NV的可视化和分析。进行了一项单独的研究以确定0.2％溶液在视网膜和RPE/脉络膜中达到的药物水平作为目标治疗水平。

实施例11：可生物降解的艾多南坦眼部植入物-材料和制备方法

使用不同等级的PLGA聚合物制备可生物降解的植入物。将聚合物以特定比例溶解在二氯甲烷中。然后将治疗剂(例如艾多南坦)添加到聚合物溶液中并溶解。然后在聚四氟乙烯(PTFE)盘中在室温蒸发二氯甲烷。除去二氯甲烷后，留下均匀材料的薄膜。

将示例性聚合物以特定比例例如50％RG503和50％RG503H(50/50RG503/RG503H)溶解在二氯甲烷中。然后将30％w/w的艾多南坦添加到聚合物溶液中并溶解。然后在聚四氟乙烯(PTFE)盘中在室温将二氯甲烷蒸发72至120小时。除去二氯甲烷后，留下聚合物和艾多南坦的均匀混合物的薄膜。薄膜的厚度可为200μm至300μm。然后将薄膜切成能够装入22号针中的3.5毫米长的植入物。将植入物切割成重量从大约200μg至380μg，导致药物负载量为60μg至114μg。

实施例12：艾多南坦的可生物降解的眼部植入物-药代动力学和耐受性分析

实施例11的可生物降解的眼部植入物被设计用于在3个月的时间内玻璃体内递送艾多南坦。对于体外药物释放测试，将三个植入物在设置为37℃和50rpm的摇床孵育器中在3mL pH 7.4的PBS中孵育。在指定时间点对药物释放进行取样，并通过HPLC测定分析药物含量。在每个采样时间点期间，释放介质完全被新鲜介质替换。在兔子身上评估了艾多南坦可生物降解植入物的药代动力学和耐受性，持续时间为最多给药后21天。进行大体眼科检查，并在给药后14天和21天通过LC-MS/MS处理和分析包括植入物中剩余内容物的眼基质。

实施例13：可生物降解的艾多南坦眼部植入物-材料和制备方法

使用实施例11中生产均匀膜的程序，使用注射成型和柱塞挤出来制备另外的制剂。

将示例性聚合物以特定比例例如50％RG503、10％RG502和40％RG753S溶解在二氯甲烷中。包含各种聚合物和药物比例的示例性制剂示于表3中。然后将45％w/w的艾多南坦添加到聚合物溶液中并溶解。然后将二氯甲烷在聚四氟乙烯(PTFE)盘中在室温蒸发24小时，然后在25℃和20毫巴真空干燥24小时。然后使用低温研磨机将薄膜研磨成粉末。将一小部分薄膜添加到具有2至3个适当尺寸的研磨球的不锈钢低温研磨容器中，并使用液氮在5Hz预冷却2或3分钟。然后将材料从20Hz到25Hz研磨1分钟，并在5Hz下休息1分钟。该研磨/休息循环重复2至5次。所得材料为均质材料的粗粉至细粉。

植入物通过改进的Haake MiniJet(ThermoFisher Scientific)注射挤出成型。将均匀粉末装载并注射到由适当尺寸(例如300μm x 12mm或325μm x 12mm)通道组成的模具中。将粉末装入通向模具的桶中并将模具置于真空下。模具温度保持在15-25℃。将装有粉末的桶周围的圆筒在145℃至165℃的温度下保持12至15分钟，以熔化粉末混合物。使用230巴至320巴的注射压力并保持2至5分钟来进行注射。注射后压力在50巴保持2至5分钟。然后将模具冷却至15至23℃，然后将模具从注射挤出机中取出。然后将模制的纤维从模具中取出，然后将它们切成4毫米的植入物，每个植入物含有165μg至220μg艾多南坦。

还使用改良的Barrell微型挤出机(Barrell Engineering)通过柱塞挤出来形成选定配方的植入物。将均匀粉末装入3mm机筒中，并通过0.30μm模具挤出，保持温度为68℃至80℃，流速为5μL/min至6μl/min。然后将挤出的细丝切成4毫米的植入物，每个植入物含有165μg至220μg艾多南坦。所得植入物具有与注射成型生产的植入物相似的性能特征。

表3.示例性配方。

实施例14：艾多南坦的可生物降解的眼部植入物-药代动力学和耐受性分析

实施例13的可生物降解的眼部植入物被设计用于在3个月的时间内玻璃体内递送艾多南坦。对于体外药物释放测试，将三个植入物在设置为37℃和50rpm的摇床孵育器中在3mL pH 7.4的PBS中孵育。在指定时间点对药物释放进行取样，并通过HPLC测定分析药物含量。在每个采样时间点期间，释放介质完全被新鲜介质替换。

在DB兔中进行的一项为期12周的非GLP眼部和全身药代动力学研究中，将采用注射成型(IM)或柱塞挤出(RE)制造工艺生产的2个艾多南坦玻璃体内植入物(植入物总重量IM 423μg/植入物；380μg艾多南坦/2个植入物，RE 461μg/植入物，415μg艾多南坦/2个植入物)在DB兔中作为单次双侧IVT注射施用(每个时间点2只动物和4只眼睛)。植入物含有45％艾多南坦，混合在含有50％ RG503、10％ RG502和40％ RG753S的混合物中。在第4、8、10、11和12周时对兔子实施安乐死，并测定房水、晶状体、玻璃体、视网膜、RPE/脉络膜和血浆中的药物浓度。

使用基于蛋白质沉淀和液-液萃取的分析方法，然后进行反相LC-MS/MS分析，分析眼组织和血浆中的艾多南坦含量。使用与Agilent 6430三重四极杆质谱仪联用的Agilent1290UPLC进行分析。艾多南坦的定量范围为1至250ng/mL。将组织和血浆样品匀浆并用乙腈中的0.1％甲酸提取，乙腈中掺有约10ng/mL的氘化艾多南坦。在艾多南坦定量转变(m/z537.2至439.1)和氘化艾多南坦定量转变(m/z 540.2至442.1)之后，使用反相液相色谱分离和串联质谱检测以正离子模式分析提取物。

在该PLGA植入物中IVT持续释放递送45％艾多南坦证明，在研究期间实现了艾多南坦的可持续治疗目标组织水平。图11A，图11B。如下表4所示，第8周时从植入物中释放的艾多南坦累积总量为100％。

表4.艾多南坦玻璃体内植入物在兔研究中的12周眼部和全身药代动力学期间从植入物中累积释放的艾多南坦。

实施例15.艾多南坦的晶型

制备晶型1的示例性方法

无定形艾多南坦(840mg)溶解在12mL IPA中。过滤所得溶液并用另外的2.5mL IPA洗涤过滤器。将滤液浓缩至干，溶解在11.8mL IPA中并在搅拌下加热至60℃。然后，在剧烈搅拌的同时，在60℃滴加18mL温水，并将溶液在60℃搅拌1小时。将溶液缓慢冷却至25℃，过滤并在25℃真空干燥以提供660mg晶型1(XRPD和DSC分别在图13和图17中)。

制备晶型2的示例性方法

无定形艾多南坦(250mg)溶解在3.5mL IPA中。过滤所得溶液并用另外的0.25mLIPA洗涤过滤器。然后将溶液加热至60℃，随后在60℃滴加7.5mL温水，同时剧烈搅拌，然后在60℃搅拌1小时。缓慢冷却至25℃后，过滤混合物以提供晶型2(XRPD和DSC分别在图3和图7中)。或者，制备晶型2的优选方法如下。将无定形艾多南坦(1g)在20mL水中于25℃浆化15小时。然后过滤溶液得到晶型2(XRPD和DSC分别在图14和图18中)。

制备晶形3的示例性方法

无定形艾多南坦(250mg)溶解在0.5mL乙酸乙酯中。将所得溶液过滤并加热至60℃，并在60℃滴加1.5mL己烷，同时剧烈搅拌。向所得稍微混浊的溶液中添加0.1mL乙酸乙酯，得到澄清溶液，然后将其在60℃搅拌1小时。将溶液缓慢冷却至25℃并过滤所得沉淀以提供晶型3(XRPD和DSC分别在图15和图19中)。

制备晶型4的示例性方法

无定形艾多南坦(100mg)添加到含有0.2mL四氢呋喃(THF)的2mL水中。将所得混合物在50℃搅拌24小时，冷却并过滤以提供形式4，其通过XRPD(图16)和DSC(图20)证实其与形式1、2和3不同。

在另一种方法中，将107mg无定形艾多南坦添加到1mL水中，然后添加在1mL水中的等当量KOH。将所得溶液加热至60℃并保持20分钟，温热过滤并用1mL 0.2N HCl酸化。将所得混合物在60℃搅拌5小时，冷却并过滤以得到形式4，其通过XRPD证实。

在另一种方法中，将150mg艾多南坦(形式3)添加到异丙醇和水(分别为1mL和2mL)的混合物中。将所得浆料在15℃搅拌48小时，然后过滤。XRPD分析证实样品为形式4，表明在这些条件下，形式4比形式3在热力学上更稳定。

在另一种方法中，将200mg艾多南坦(形式1)添加至异丙醇和水(分别为1.3mL和2.6mL)的混合物中。将所得溶液加热至80℃并搅拌24小时，然后冷却并过滤。由此获得的样品通过XRPD分析确认为形式4，证明在这些条件下，形式4比形式1在热力学上更稳定。

在另一种方法中，将100mg艾多南坦(无定形)在10mL水中搅拌并加热至100℃40小时。将所得溶液冷却至环境温度并过滤，得到形式4。在另一种方法中，将无定形(粗)艾多南坦在60℃溶解在8体积的异丙醇中。将所得溶液冷却至57℃，然后添加晶型4的小晶体。2小时后，将溶液冷却至5℃，保持15小时，并过滤，得到晶型4。

晶型的XRPD图

晶型1-4的XRPD图谱显示于图12-16中。使用多晶X射线衍射仪(Bruker，D8ADVANCE)记录本文所述晶型的XRPD图。CuKa辐射的工作电压为40kv，电流为40mA，传输狭缝为1.0mm，斜拉狭缝(cable-stayed slit)为0.4°。将样品放置在样品架凹槽的中心，并使样品架表面与样品架表面齐平。使用lynxeye探测器以0.02°的步长和8°/min的速度连续扫描收集数据。

下表5-8分别列出了晶型1-4的某些XRPD特征峰。

表5.晶型1的示例性XRPD图谱

2θ	强度(计数)
		6.3	1250
7.5	2750
		11.7	1400
15.1	2200
		17.3	900

表6.晶型2的示例性XRPD图谱

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表7.晶型3的示例性XRPD图谱

2θ	强度(计数)
		7.8	2000
9.0	2750
		11.6	750
15.8	2500
		19.1	900

表8.晶型4的示例性XRPD图谱

角度[2θ]	强度(计数)
		5.6	1800
11.4	12600
		14.4	1400
15.7	1200
		16.8	1400
17.7	4800
		19.3	6700
21.1	2900
		21.9	2400
23.9	2400
		24.6	1900

晶型的理化性质

本文提供了晶型的示例性物理化学性质。本文所述的熔点可以使用以下程序测量：

i.熔点方案

使用DSC测定每种晶型的最大熔点峰(T_m)。使用TA仪器DSC Q2000测量本文所述晶型的DSC。在铝坩埚中称取样品(1.3010mg)，并以10℃/min的加热速率从30℃加热至300℃。收集晶体熔化峰开始、峰开始、峰最大和峰结束时的温度。

本文所述的溶解度可以使用以下程序测量：

ii.溶解度分析方案

1.将不少于2.0mg的样品称入Whatman Miniuniprep小瓶(GE Healthcare)的下室。每个室中添加450μL缓冲液。

2.放置miniuniprep小瓶的过滤器活塞并压缩至液面位置，以允许缓冲液和化合物在孵育期间与过滤器接触。

3.将样品涡旋2分钟，然后在室温(约25±2℃)以500rpm振荡孵育24小时。

4.将Miniunipreps压缩以制备滤液，用于注入HPLC系统。过滤前检查所有小瓶是否有可见的未溶解物质，过滤后检查是否有泄漏。

5.用缓冲液将上清液稀释100倍，制成稀释液，用HPLC进行分析。

下表9提供了晶型1-4的示例性物理化学性质。可以使用上述方法获得物理化学性质。

表9.晶型1-4的示例性物理化学性质

其他实施方案

本说明书中公开的所有特征可以以任何组合进行组合。本说明书中公开的每个特征可以由服务于相同、等同或相似目的的替代特征来替代。因此，除非另外明确说明，所公开的每个特征仅是一系列一般等同或相似特征的示例。

此外，根据上述描述，本领域技术人员可以容易地确定本发明的本质特征，并且在不背离本发明的精神和范围的情况下，可以对本发明进行各种改变和修改以使其适应各种用途和条件。因此，其他实施方案也在权利要求内。

Claims (70)

1.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的内皮素受体拮抗剂或其药学上可接受的盐的组合物接触，其中所述内皮素受体拮抗剂选自艾多南坦、替唑生坦、A-182086、克拉生坦、S1255、ACT-132577、恩拉生坦和司帕森坦。

2.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的艾多南坦或A-182086或其药学上可接受的盐的组合物接触。

3.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善眼部新生血管形成的方法，包括使受试者的光学组织与组合物接触，所述组合物包含治疗有效量的式I化合物：

或其药学上可接受的盐。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述眼部新生血管形成与选自早产儿视网膜病变、视网膜静脉阻塞、黄斑水肿、镰状细胞性视网膜病、脉络膜新生血管形成、放射性视网膜病变、新生血管性青光眼、微血管病、视网膜缺氧、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、消融诱导的新生血管形成、年龄相关性黄斑变性和血管渗漏的病症相关。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述方法的疗效通过评估新血管形成的减少来确定。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述方法的疗效通过眼部新生血管形成率的降低来确定。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效由组织或视网膜灌注的改善来指示。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效通过评估视敏度、视野、对比敏感度或色觉的改善程度来确定。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述组合物以约1μg至约4mg之间的剂量施用。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述组合物以约10μg至约500μg之间的剂量施用。

11.根据权利要求1-9中任一项的方法，其中所述组合物以约150μg至约300μg之间的剂量施用。

12.根据权利要求1-9中任一项的方法，其中所述组合物以约350μg至约500μg之间的剂量施用。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述接触包括将所述组合物局部施用至眼睛或其一部分的表面。

14.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述接触包括将组合物注射到眼睛或其部件中。

15.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述接触包括在可生物降解的眼部植入物中玻璃体内施用所述组合物。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述组合物包含眼用制剂，所述眼用制剂含有一种或多种防腐剂、防腐助剂、粘度或润滑调节剂、张力调节剂、增溶剂、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述艾多南坦或式I化合物为无水晶型(晶型4)，其X射线粉末衍射图以2θ计包含至少三个特征峰，选自5.6±0.2°、11.4±0.2°、17.7±0.2°、19.3±0.2°、21.1±0.2°和21.9±0.2°处的峰。

18.根据权利要求15所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约50％:约10％:约40％。

19.根据权利要求15所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约20％:约20％:约60％。

20.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善血管渗漏的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的内皮素受体拮抗剂或其药学上可接受的盐的组合物接触，其中所述内皮素受体拮抗剂选自艾多南坦、替唑生坦、A-182086、克拉生坦、S1255、ACT-132577、恩拉生坦和司帕森坦。

21.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善血管渗漏的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的艾多南坦或A-182086或其药学上可接受的盐的组合物接触。

22.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善血管渗漏的方法，包括使受试者的光学组织与组合物接触，所述组合物包含治疗有效量的式I化合物：

或其药学上可接受的盐。

23.权利要求20-22中任一项的方法，其中所述血管渗漏与选自早产儿视网膜病变、视网膜静脉阻塞、黄斑水肿、镰状细胞性视网膜病、脉络膜新生血管形成、放射性视网膜病变、新生血管性青光眼、微血管病、视网膜缺氧、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、消融诱导的新生血管形成、年龄相关性黄斑变性和血管渗漏的病症相关。

24.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述方法的疗效通过血管渗漏率的降低来确定。

25.根据权利要求20-24中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效由组织或视网膜灌注的改善来指示。

26.根据权利要求20-25中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效通过评估视敏度、视野、对比敏感度或色觉的改善程度来确定。

27.根据权利要求20-26中任一项所述的方法，其中所述组合物以约1μg至约4mg之间的剂量施用。

28.根据权利要求20-26中任一项所述的方法，其中所述组合物以约10μg至约500μg之间的剂量施用。

29.根据权利要求20-26中任一项所述的方法，其中所述组合物以约150μg至约300μg之间的剂量施用。

30.根据权利要求20-26中任一项所述的方法，其中所述组合物以约350μg至约500μg之间的剂量施用。

31.根据权利要求20-30中任一项所述的方法，其中所述接触包括将所述组合物局部施用至眼睛或其一部分的表面。

32.根据权利要求20-30中任一项所述的方法，其中所述接触包括将组合物注射到眼睛或其部件中。

33.根据权利要求20-30中任一项所述的方法，其中所述接触包括在可生物降解的眼部植入物中玻璃体内施用所述组合物。

34.根据权利要求20-33中任一项所述的方法，其中所述组合物包含眼用制剂，所述眼用制剂含有一种或多种防腐剂、防腐助剂、粘度或润滑调节剂、张力调节剂、增溶剂、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。

35.根据权利要求20-34中任一项所述的方法，其中所述艾多南坦或式I化合物为无水晶型(晶型4)，其X射线粉末衍射图以2θ计包含至少三个特征峰，选自5.6±0.2°、11.4±0.2°、17.7±0.2°、19.3±0.2°、21.1±0.2°和21.9±0.2°处的峰。

36.根据权利要求33所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约50％:约10％:约40％。

37.根据权利要求33所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约20％:约20％:约60％。

38.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善新生血管性年龄相关性黄斑变性的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的内皮素受体拮抗剂或其药学上可接受的盐的组合物接触，其中所述内皮素受体拮抗剂选自由艾多南坦、替唑生坦、A-182086、克拉生坦、S1255、ACT-132577、恩拉生坦和司帕森坦组成的组。

39.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善新生血管性年龄相关性黄斑变性的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的艾多南坦或A-182086或其药学上可接受的盐的组合物接触。

40.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善新生血管性年龄相关性黄斑变性的方法，包括使受试者的光学组织与组合物接触，所述组合物包含治疗有效量的式I化合物：

或其药学上可接受的盐。

41.根据权利要求38-40中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效由组织或视网膜灌注的改善来指示。

42.根据权利要求38-41中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效通过评估视敏度、视野、对比敏感度或色觉的改善程度来确定。

43.根据权利要求38-42中任一项所述的方法，其中所述组合物以约1μg至约4mg之间的剂量施用。

44.根据权利要求38-42中任一项所述的方法，其中所述组合物以约10μg至约500μg之间的剂量施用。

45.根据权利要求38-42中任一项所述的方法，其中所述组合物以约150μg至约300μg之间的剂量施用。

46.根据权利要求38-42中任一项所述的方法，其中所述组合物以约350μg至约500μg之间的剂量施用。

47.根据权利要求38-46中任一项所述的方法，其中所述接触包括将所述组合物局部施用至眼睛或其一部分的表面。

48.根据权利要求38-46中任一项所述的方法，其中所述接触包括将组合物注射到眼睛或其部件中。

49.根据权利要求38-46中任一项所述的方法，其中所述接触包括在可生物降解的眼部植入物中玻璃体内施用所述组合物。

50.根据权利要求38-49中任一项所述的方法，其中所述组合物包含眼用制剂，所述眼用制剂含有一种或多种防腐剂、防腐助剂、粘度或润滑调节剂、张力调节剂、增溶剂、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。

51.根据权利要求38-50中任一项所述的方法，其中所述艾多南坦或式I化合物为无水晶型(晶型4)，其X射线粉末衍射图以2θ计包含至少三个特征峰，选自5.6±0.2°、11.4±0.2°、17.7±0.2°、19.3±0.2°、21.1±0.2°和21.9±0.2°处的峰。

52.根据权利要求49所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约50％:约10％:约40％。

53.根据权利要求49所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约20％:约20％:约60％。

54.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善黄斑水肿的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的内皮素受体拮抗剂或其药学上可接受的盐的组合物接触，其中所述内皮素受体拮抗剂选自由艾多南坦、替唑生坦、A-182086、克拉生坦、S1255、ACT-132577、恩拉生坦和司帕森坦组成的组。

55.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善黄斑水肿的方法，包括使受试者的光学组织与包含治疗有效量的艾多南坦或A-182086或其药学上可接受的盐的组合物接触。

56.一种用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善黄斑水肿的方法，包括使受试者的光学组织与组合物接触，所述组合物包含治疗有效量的式I化合物：

或其药学上可接受的盐。

57.根据权利要求54-56中任一项所述的方法，其中所述方法的疗效通过评估黄斑中的流体减少来确定。

58.根据权利要求54-56中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效由组织或视网膜灌注的改善来指示。

59.根据权利要求54-58中任一项所述的方法，其中所述治疗的疗效通过评估视敏度、视野、对比敏感度或色觉的改善程度来确定。

60.根据权利要求54-59中任一项所述的方法，其中所述组合物以约1μg至约4mg之间的剂量施用。

61.根据权利要求54-59中任一项所述的方法，其中所述组合物以约10μg至约500μg之间的剂量施用。

62.根据权利要求54-59中任一项所述的方法，其中所述组合物以约150μg至约300μg之间的剂量施用。

63.根据权利要求54-59中任一项所述的方法，其中所述组合物以约350μg至约500μg之间的剂量施用。

64.根据权利要求54-63中任一项所述的方法，其中所述接触包括将所述组合物局部施用至眼睛或其一部分的表面。

65.根据权利要求54-63中任一项所述的方法，其中所述接触包括将组合物注射到眼睛或其部件中。

66.根据权利要求54-63中任一项所述的方法，其中所述接触包括在可生物降解的眼部植入物中玻璃体内施用所述组合物。

67.根据权利要求54-66中任一项所述的方法，其中所述组合物包含眼用制剂，所述眼用制剂含有一种或多种防腐剂、防腐助剂、粘度或润滑调节剂、张力调节剂、增溶剂、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。

68.根据权利要求54-67中任一项所述的方法，其中所述艾多南坦或式I化合物为无水晶型(晶型4)，其X射线粉末衍射图以2θ计包含至少三个特征峰，选自5.6±0.2°、11.4±0.2°、17.7±0.2°、19.3±0.2°、21.1±0.2°和21.9±0.2°处的峰。

69.根据权利要求66所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约50％:约10％:约40％。

70.根据权利要求66所述的方法，其中所述可生物降解的眼部植入物包含可生物降解的聚合物，所述可生物降解的聚合物含有掺入其中的化合物；其中所述化合物是式I化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物在可生物降解的聚合物中的浓度为约45％w/w；所述可生物降解的聚合物包含RG503、RG502和RG753S，其比例为约20％:约20％:约60％。