CN117229280A

CN117229280A - 卡莫瑞林的制备方法

Info

Publication number: CN117229280A
Application number: CN202210647670.7A
Authority: CN
Inventors: 张许科; 索永波; 侯林
Original assignee: Luoyang Huizhong Animal Medicine Co ltd
Current assignee: Luoyang Huizhong Animal Medicine Co ltd
Priority date: 2022-06-08
Filing date: 2022-06-08
Publication date: 2023-12-15

Abstract

本发明提供了一种卡莫瑞林的制备方法，涉及有机合成技术领域。具体的合成路线如下：式(II)化合物与溴化苄发生反应，得到的式(III)化合物发生关环反应，得到的式(IV)化合物经脱保护基得到式(V)化合物，即卡莫瑞林。该方法成本低，易于操作，总收率高，适合工业化生产。

Description

卡莫瑞林的制备方法

技术领域

本发明涉及有机合成技术领域，尤其是涉及一种卡莫瑞林的制备方法。

背景技术

卡莫瑞林(Capromorelin，cas：193273-66-4)是一种生长激素促分泌剂，于2016年5月被FDA批准用于治疗犬的食欲不振，其制剂为口服溶液，制剂规格30mg/ml，包装规格有10ml、15ml、30ml，商品名于2020年10月被FDA批准用于治疗猫慢性肾病引起的体重减轻，商品名Elura^TM，剂型为口服溶液，制剂规格20mg/ml，包装规格15ml。

其药用形式为卡莫瑞林酒石酸盐(cas：193273-69-7)，具有两个手性中心，化学名为：2-氨基-N-[2-(3aR-苄基-2-甲基-3-氧-2,3,3a,4,6,7-六氢-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)-1R-苄氧甲基-2-氧-乙基]-异丁酰胺-L-酒石酸盐，分子式：C₂₈H₃₅N₅O₄·C₄H₆O₆，分子量：655.70，其结构式如下：

专利US2002002283 A1报道了一种卡莫瑞林的制备方法，路线如图1所示，该路线以4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯为起始原料，首先与二碳酸二叔丁酯反应得到中间体1-2，中间体1-2再与溴化苄得到中间体1-3，中间体1-3与甲基硫酸肼关环得到中间体1-4，中间体1-4脱保护基得到1-5，1-5与1-7经过酰胺缩合得到1-8，1-8在三氟乙酸的作用下得到1-9，最后与酒石酸成盐得到目标产物。

该方法中原料4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯价格昂贵，不易购买；氢化钠为1-3的催化剂，存在严重的安全隐患，该工艺放大可行性较低；路线中两个步骤使用三氟乙酸脱保护基，后处理需要加强碱调节pH，不易完全萃取，导致收率偏低；路线总收率21％，整体设计路线过长，不利于过程控制。

专利CN109320515A提供了一种卡莫瑞林手性中间体的不对称合成方法，路线如图2所示，该路线以1-N-苄基-4-氧代-3-哌啶羧酸乙酯为起始原料，以金鸡纳碱(2i)作为手性配体得到中间体2-2，中间体2-2在10％Pd/C的催化作用下脱去苄基得到中间体2-3，中间体2-3上保护基得到中间体2-5，中间体2-5经过关环，脱保护，偶联，脱保护，最后与酒石酸成盐得到目标产物。

该方法中原料1-N-苄基-4-氧代-3-哌啶羧酸乙酯价格昂贵，不易购买；金鸡纳碱，不易大量购买得到，反应手性不易控制；用10％Pd/C脱苄基，产品成本较高，容易着火，比较危险。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种卡莫瑞林的制备方法，以至少解决现有技术中存在的技术问题之一。

本发明的目的之二在于提供一种化合物。

本发明的目的之三在于提供上述化合物的制备方法。

本发明的目的之四在于提供上述化合物或制备方法的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种卡莫瑞林的制备方法，包括步骤：

(1)将式(II)化合物与溴化苄发生反应，得到式(III)化合物；

(2)式(III)化合物发生关环反应，得到式(IV)化合物；

(3)将式(IV)化合物脱保护基，得到式(V)化合物，即卡莫瑞林；

进一步地，步骤(1)中，式(II)化合物与溴化苄的摩尔比为1:1～3，优选1:1.2；

优选地，步骤(1)中，反应的催化剂包括氢化钠、氢化钙、叔丁醇钾或无水碳酸钾，优选为无水碳酸钾；

优选地，步骤(1)中，反应的温度为65～70℃；

优选地，步骤(1)中，反应在有机溶剂中进行，所述有机溶剂包括N,N-二甲基甲酰胺，四氢呋喃或丙酮，优选N,N-二甲基甲酰；

进一步地，步骤(2)中，式(III)化合物与甲基硫酸肼或甲基肼反应，得到式(IV)化合物；

优选地，式(III)化合物与甲基硫酸肼的摩尔比为1:1.5～3，优选1:2；

优选地，式(III)化合物与甲基肼的摩尔比为1:1～3，优选1:2；

进一步地，式(III)化合物与甲基硫酸肼在碱性条件下进行反应，所述无机碱为醋酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠或碳酸钾，优选为醋酸钠；

优选地，所述反应的有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或四氢呋喃，优选为乙醇；

优选地，所述反应的条件为：60～90℃反应15～20h。

进一步地，步骤(3)中，所述脱保护基采用的反应试剂为氯化氢，三氟乙酸或甲基磺酸，优选氯化氢；

优选地，所述脱保护基在有机溶剂中进行，所述有机溶剂为乙酸乙酯，乙醇或二氯甲烷，优选乙酸乙酯；

优选地，所述脱保护基的反应条件为20～30℃反应1～3h；

优选地，所述制备方法还包括步骤(4)：将式(V)化合物与酒石酸成盐，得到式(VI)化合物，即卡莫瑞林酒石酸盐；

一种化合物，所述化合物的结构式如式(II)所示：

上述化合物的制备方法，将4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐与式(I)化合物反应，得到式(II)化合物；

进一步地，向4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐、式(I)化合物和2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物的溶液中滴加N,N-二异丙基乙胺，-25～-20℃反应15-20h，得到式(II)化合物；

优选地，4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐和式(I)化合物的摩尔比为1:2～4.5；

优选地，所述溶液的溶剂为二氯甲烷；

优选地，向式(I)化合物和N,N-羰基二咪唑的溶液中滴加4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐溶液，室温反应15-20h，得到式(II)化合物；

优选地，4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐依次经饱和碳酸氢钠溶解，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥和二氯甲烷溶解后，得到4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐溶液。

进一步地，式(I)化合物的制备方法包括如下步骤：

(a)向N-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸、N-羟基丁二酰亚胺和EDCI中加入N,N-二甲基甲酰胺，反应得到2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯；

(b)2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯与O-苄基-D-丝氨酸反应得到式(I)化合物；

优选地，步骤(a)中反应的溶剂为乙酸乙酯；

优选地，步骤(a)中反应的时间为15-25h；

优选地，步骤(b)中反应的碱为三乙胺；

优选地，步骤(b)中反应的溶剂为二氧六环和水的混合液，其中，水与二氧六环的体积比为1:3～5；

优选地，步骤(b)中2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯与O-苄基-D-丝氨酸的摩尔比为1:2.5～1.5；

优选地，步骤(b)中反应的条件为45～55℃反应10～20h。

上述化合物或制备方法在制备卡莫瑞林中的应用。

与现有技术相比，本发明的技术效果为：

本发明提供了一种卡莫瑞林的制备方法，其中，涉及到式(II)的新中间体化合物，该制备方法为一种新的合成路线，起始原料廉价易得，生产成本可控，整个过程操作简单，工艺参数没有特殊要求，易于工业化实现，总收率可以达到33.6％，同时相较于目前已知方法成本可降低60％左右。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式，下面将对具体实施方式所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为US2002002283 A1中卡莫瑞林合成路线图；

图2是CN109320515A中卡莫瑞林合成路线图；

图3本发明实施例提供的卡莫瑞林合成路线图；

图4是原研卡莫瑞林¹HNMR；

图5是原研卡莫瑞林¹³CNMR；

图6是原研卡莫瑞林MS；

图7是原研卡莫瑞林分子立体结构椭球图；

图8是自制卡莫瑞林¹HNMR；

图9是自制卡莫瑞林¹³CNMR；

图10是自制卡莫瑞林MS；

图11是自制卡莫瑞林分子立体结构椭球图。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明中主要化合物的具体名称如下：

式(I)化合物，即中间体1-7：2(R)-3-苄氧基-2-(2-叔丁氧羰基氨基-2-甲基-丙酰氨基)-丙酸；

式(II)化合物，即中间体3-2：甲基1-((R)-2-((苄氧基)甲基)-5-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲基-4-氧代己基)-4-氧代哌啶-3-羧酸盐；

式(III)化合物，即中间体3-3：甲基3-苄基-1-((R)-2-((苄氧基)甲基)-5-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲基-4-氧代己基)-4-氧哌啶-3-羧酸酯；

式(IV)化合物，即中间体1-8：叔丁基((5R)-6-(3a-苄基-2-甲基-3-氧代-2,3,3a,4,6,7-六氢-5H-吡唑[4,3-c]吡啶-5-基)-5-((苄氧基)甲基)-2-甲基-3,6-二氧六烷-2-基)氨基甲酸酯；

式(V)化合物，即卡莫瑞林：2-氨基-N-[2-(3aR-苄基-2-甲基-3-氧-2,3,3a,4,6,7-六氢-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)-1R-苄氧甲基-2-氧乙基]-异丁酰胺；

式(VI)化合物：2-氨基-N-[2-(3aR-苄基-2-甲基-3-氧-2,3,3a,4,6,7-六氢-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)-1R-苄氧甲基-2-氧-乙基]-异丁酰胺-L-酒石酸盐。

本发明提供一种卡莫瑞林的制备方法，具体的合成路线如下：式(II)化合物与溴化苄发生反应，得到的式(III)化合物发生关环反应，得到的式(IV)化合物经脱保护基得到式(V)化合物，即卡莫瑞林。

上述合成路线中，式(II)化合物为发明人在研发卡莫瑞林生产路线过程中制备的全新化合物，借此为中间体可以高效合成卡莫瑞林，该工艺路线减少了上保护基和脱保护基步骤，收率得到提高，降低了成本，具体而言，按照US2002002283 A1制备卡莫瑞林，由于工艺路线使用上保护基和脱保护基步骤，估算成本约4.9万/Kg，按照本发明的制备方法，估算成本约为2万/kg；同时，本技术路线无特殊反应条件要求，行业内一般生产企业均可按照前述的条件进行产业化，易于实施。

在优选的实施方式中，式(II)化合物与溴化苄的反应中，有机溶剂优选为N,N-二甲基甲酰胺；催化剂可以为氢化钠、氢化钙、叔丁醇钾或无水碳酸钾，优选为无水碳酸钾，例如催化剂为无水碳酸钾时，反应的温度为65～70℃。

在具体的实施方式中，式(II)化合物溶于N,N-二甲基甲酰胺，再依次加入无水碳酸钾和溴化苄，升温至65～70℃，反应15～19h，TLC检测，依次加入饱和氯化铵和乙酸乙酯，混匀后分层，水相采用乙酸乙酯萃取两次，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，再用无水硫酸钠干燥，经过滤浓缩得式(III)化合物。该方法为优选方案，反应温和，收率较高(92％左右)，反应时间也更短。

在具体的实施方式中，式(II)化合物溶于N,N-二甲基甲酰胺，加入氢化钠，混匀后加入苄基溴，室温搅拌40～44h，加入乙酸乙酯，再用水洗涤一次和盐水洗涤四次，无水硫酸钠干燥，经过滤浓缩得式(III)化合物。收率89％左右。

在优选的实施方式中，式(III)化合物的关环反应是式(III)化合物与甲基硫酸肼或甲基肼反应实现，优选为与甲基硫酸肼反应。

在具体的实施方式中，式(III)化合物依次加入甲基硫酸肼、无水乙酸钠、无水乙醇，抽真空充氮气，置换三次后升温至75～80℃，反应15～19h，TLC检测，依次加入饱和碳酸氢钠、二氯甲烷混匀后分层，水相经二氯甲烷萃取两次后合并有机相，再用饱和食盐水洗涤三次，经无水硫酸钠干燥浓缩得式(IV)化合物。该方案中萃取后不纯化可以直接再次投料，收率为67％左右。

在具体的实施方式中，将式(III)化合物和甲基肼加入乙醇回流7～9h，降温至室温后除去溶剂，再加入甲苯回流15～19h，冷却至室温，过柱纯化洗脱得式(IV)化合物。该方案收率约为66％。

在优选的实施方式中，式(IV)化合物脱保护基通过与氯化氢或三氟乙酸反应实现，优选为氯化氢。

在具体的实施方式中，式(IV)化合物加入氯化氢的乙酸乙酯溶液中，反应条件为20～30℃反应1～3h，抽滤，用乙酸乙酯洗涤滤饼，得到式(V)化合物。该方案操作简单，副产物少，收率为85％左右。

在具体的实施方式中，式(IV)化合物加入二氯甲烷，降温至0℃，滴加冷却的三氟乙酸，滴加完毕升温至室温混匀2～4h，过滤浓缩，加入乙酸乙酯，有机相用饱和碳酸氢钠洗涤三次，饱和氯化钠洗涤两次，无水硫酸镁干燥浓缩，抽滤后固体加入异丙醇，升温至50℃搅拌过夜，过滤得到卡莫瑞林。该方案收率为77％。

本发明制得的卡莫瑞林通过与酒石酸反应，得到卡莫瑞林酒石酸盐，即式(VI)化合物。

上述制备方法中的式(II)化合物为发明人在卡莫瑞林生产过程中合成的全新中间体化合物。该化合物的合成可以为如下方法：将4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐与式(I)化合物反应。

在优选的实施方式中，向4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐、式(I)化合物和2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物的溶液中滴加N,N-二异丙基乙胺，-25～-20℃反应15-20h，得到式(II)化合物。其中，溶剂优选为二氯甲烷。反应结束后，依次加入饱和碳酸氢钠、二氯甲烷混匀分层，水相用二氯甲烷萃取两次后，合并有机相，再用10％盐酸洗涤。该方法操作简单，收率较高，为80％左右。

在优选的实施方式中，向式(I)化合物和N,N-羰基二咪唑的溶液中滴加4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐溶液，20～30℃反应15-20h，得到式(II)化合物。其中，4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐依次经饱和碳酸氢钠溶解，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥和二氯甲烷溶解后，得到4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐溶液。反应结束后，依次加入饱和碳酸氢钠、二氯甲烷混匀分层，水相用二氯甲烷萃取两次后，合并有机相，再用10％盐酸洗涤，收率约为40％。

对于式(I)化合物，本发明提供一种制备方法：

(a)向N-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸、N-羟基丁二酰亚胺和EDCI的溶液中加入N,N-二甲基甲酰胺，反应得到2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯；

(b)2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯与O-苄基-D-丝氨酸反应得到式(I)化合物。

在具体的实施方式中，称取N-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸、N-羟基丁二酰亚胺和EDCI，依次加入乙酸乙酯和N,N-二甲基甲酰胺，反应16～20h，依次加入乙酸乙酯、水、5％碳酸氢钠、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，得到2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯。2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯和O-苄基-D-丝氨酸加入二氧六环和水的混合液，氮气保护，缓慢加入三乙胺，升温至45～55℃，搅拌10～20h，减压蒸走溶剂。后处理的方案如下：(i)10％盐酸调节pH2～3，加水析出，搅拌过滤得到式(I)化合物，收率为99％左右；(ii)加入乙酸乙酯，10％盐酸调节pH2～3，有机相无水硫酸钠干燥，过滤蒸干得到式(I)化合物，收率为96％左右。优选地，后处理方案采用(i)，操作简单，产品纯度高，无需柱层析纯化。

本发明提供的新的中间体式(II)化合物及其制备方法，可以用于卡莫瑞林的制备中。

本发明的技术方案以4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐为起始原料制备中间体，降低工艺成本；式(IV)化合物合成过程中用到的碱优选无水碳酸钾，成本低，降低危险系数；式(IV)化合物脱保护基优选采用HCl/EA(乙酸乙酯)可以较高收率和纯度得到产品，减少纯化步骤，操作方便；4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐用于偶联，也避免了氮氢的保护、脱保护操作，整个合成路线适用于工业化生产。

下面通过实施例对本发明作进一步说明。如无特别说明，实施例中的材料为根据现有方法制备而得，或直接从市场上购得。

卡莫瑞林酒石酸盐的一种合成路线如图3所示，其路线即为下述各实施例中的第一方案。

需要说明的是，3-1为4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐，中间体1-7为式(I)化合物，中间体3-2为式(II)化合物，中间体3-3为式(III)化合物，中间体1-8为式(IV)化合物，中间体1-9为式(V)化合物。

实施例1制备中间体1-7 2(R)-3-苄氧基-2-(2-叔丁氧羰基氨基-2-丙酰氨基)-丙酸

方法1.1称取N-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸(11.0g，54.2mmol)，N-羟基丁二酰亚胺(7.47g，64.95mmol)和EDCl(12.45g，64.95mmol)，加入乙酸乙酯(200ml)，混浊，加入N,N-二甲基甲酰胺(100ml)，反应液变澄清，反应18h，加入乙酸乙酯(100ml)，依次加入水(100ml)，5％碳酸氢钠溶液(100ml)洗涤，饱和食盐水(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干得(13.8g，81％)(2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯)。称取2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯)(24g，0.079mol)，O-苄基-D-丝氨酸(17.16g，0.088mol)加入(水：二氧六环＝40：160ml)，氮气保护，缓慢加入三乙胺(20.74ml，0.16mol)，升温至50℃，搅拌15h，减压蒸走溶剂，用10％的稀盐酸调节ph至2～3，加水(1000ml)析出，搅拌2h，过滤，蒸干得到1-7(29g，99％)。

方法1.2称取N-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸(11.0g，54.2mmol)，N-羟基丁二酰亚胺(7.47g，64.95mmol)和EDCl(12.45g，64.95mmol)，加入乙酸乙酯(200ml)，混浊，加入N,N-二甲基甲酰胺(100ml)，反应液变澄清，反应18h，加入乙酸乙酯(100ml)，加入水(100ml)，5％碳酸氢钠溶液(100ml)洗涤，饱和食盐水(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干得(13.8g，81％)(2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯)。称取2,5-二氧吡咯烷-1-基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯)(16g，0.053mol)，O-苄基-D-丝氨酸(11.4g，0.059mol)加入(水：二氧六环＝25：100ml)，氮气保护，缓慢加入三乙胺(13.8ml，0.11mol)，升温至50℃，搅拌15h，减压蒸走溶剂，加入乙酸乙酯(500ml)，用10％的稀盐酸调节pH至2～3，有机相无水硫酸钠干燥，过滤，蒸干得到1-7(20g，96％)。

实施例2制备中间体3-2(甲基1-((R)-2-((苄氧基)甲基)-5-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲基-4-氧代己基)-4-氧代哌啶-3-羧酸盐)

方法2.1称取4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐10g(0.052mol)，1-7 58.81g(0.155mol)，2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物(CMPI)51.48g(0.201mol)，加入二氯甲烷100ml，将反应液冷却至-25℃，缓慢滴加N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)80.99ml(0.465mol)，滴加完毕，反应17h，TLC检测，反应结束后，加入饱和的碳酸氢钠溶液200ml，加入二氯甲烷200ml，搅拌30min，静止30min，分层，水相再用二氯甲烷(DCM)萃取两次，每次用100ml，合并有机相，用10％的稀盐酸洗涤，得到3-2粗品约21.48g，收率80％。

方法2.2称取1-7 58.81g(0.155mol)，加入二氯甲烷100ml，分批加入N,N-羰基二咪唑25.13g(0.155mol)，搅拌，称取4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐10g(0.052mol)，加入饱和碳酸氢钠溶液，加入二氯甲烷萃取三次，每次用100ml，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，再次加入二氯甲烷100ml，缓慢滴加至上述反应液，滴加完毕，反应17h，TLC检测，反应结束后，加入饱和的碳酸氢钠溶液，加入二氯甲烷200ml，搅拌30min，静止30min，分层，水相再用二氯甲烷萃取两次，每次用100ml，合并有机相，用10％的稀盐酸洗涤，得到3-2粗品约10.74g，收率40％。

实施例3制备中间体3-3(甲基3-苄基-1-((R)-2-((苄氧基)甲基)-5-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲基-4-氧代己基)-4-氧哌啶-3-羧酸酯)

方法3.1称取上步粗品30g，加入N,N-二甲基甲酰胺(DMF)300ml，加入无水碳酸钾10.39g(0.075mol)，加入溴化苄11.9g(0.069mol)，升温至68℃，反应17h，TLC检测，反应结束后，加入饱和的氯化铵溶液，加入乙酸乙酯400ml，搅拌30min，静止30min，分层，水相再用乙酸乙酯萃取两次，每次用200ml，合并有机相，用饱和食盐水洗涤3次，每次用500ml，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得3-3粗品约32g，收率92％。

方法3.2称取上步粗品30g,加入N,N-二甲基甲酰胺300ml，加入555mg(23.14mmol)氢化钠(60％油分散物)，在室温下搅拌15min,然后加入苄基溴(9.89g，57.85mmol溶解在150mlDMF)，在室温下搅拌42h,加入乙酸乙酯稀释，用水洗涤一次和用盐水洗涤四次，用无水硫酸镁干燥，浓缩得到3-3粗品约31.4g，收率89％。

实施例4制备中间体1-8(叔丁基((5R)-6-(3a-苄基-2-甲基-3-氧代-2,3,3a，4,6,7-六氢-5H-吡唑[4,3-c]吡啶-5-基)-5-((苄氧基)甲基)-2-甲基-3,6-二氧六烷-2-基)氨基甲酸酯)

方法4.1称取上步粗品3-3 29g(0.048mol)，加入甲基硫酸肼13.73g(0.095mol)，加入无水乙酸钠15.63g(0.190mol)，加入无水乙醇870ml，抽真空，充氮气，置换三次，升温至78℃，反应17h，TLC检测，反应结束后，加入饱和碳酸氢钠溶液，加入二氯甲烷400ml，搅拌30min，静止30min，分层，水相再用二氯甲烷萃取两次，每次用200ml，合并有机相，用饱和食盐水洗涤3次，每次用500ml，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得1-8粗品约19.3g，收率67％。

方法4.2称取4.00g(6.57mmol)3-3和302.75mg(6.57mmol)甲基肼，加入100ml乙醇，回流8h，降至室温，除去溶剂，加入100ml甲苯，回流17h，冷却至室温，过柱纯化，洗脱剂(乙酸乙酯：正己烷＝15：85～75：25)得到(2.6g，66％)1-8(无色油状物)。

实施例5制备中间体1-9((2R)-5-氨基-1-(3a-苄基-2-甲基-3-氧代-2,3,3a，4,6,7-六氢-5H-吡唑[4,3-c]吡啶-5-基)-2-((苄氧基)甲基)-5-甲基己烷-1,4-二酮)

方法5.1称取上步粗品19.3g(0.032mol)，加入氯化氢的乙酸乙酯溶液20ml，室温搅拌2h，抽滤，用乙酸乙酯溶液(20ml)洗涤滤饼，得到1-9的盐酸盐，重量约14g，收率85％。

方法5.2称取上步粗品19.3g(0.032mol)，加入二氯甲烷(100ml)降温至0℃，缓慢滴加冷却的三氟乙酸(100ml)，1.5h内滴加完毕，升至室温搅拌3h，过滤，母液浓缩，加入乙酸乙酯，有机相用饱和的碳酸氢钠洗三次，饱和的氯化钠洗两次，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，抽滤，固体加入异丙醇，升温至50℃搅拌过夜，过滤得到卡莫瑞林白色晶体，收率77％。

结构表征见图4～11，其中，图4-图7为原研卡莫瑞林的结构表征结果图，图8-图11为自制卡莫瑞林的结构表征结果图。

实施例6制备卡莫瑞林(2-氨基-N-[2-(3aR-苄基-2-甲基-3-氧-2,3,3a,4,6,7-六氢-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-基)-1R-苄氧甲基-2-氧-乙基]-异丁酰胺-L-酒石酸盐)

称取1-9的盐酸盐14g(0.026mol)加入饱和碳酸氢钠溶液500ml，用二氯甲烷萃取三次，每次用500ml，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩至无馏分，加入甲醇350ml，加入L-酒石酸3.88g(0.026mol)，在室温下搅拌17h，真空浓缩，得到所需产物约16.43g，收率97％。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims

1.一种卡莫瑞林的制备方法，其特征在于，包括步骤：

(1)将式(II)化合物与溴化苄发生反应，得到式(III)化合物；

(2)式(III)化合物发生关环反应，得到式(IV)化合物；

(3)将式(IV)化合物脱保护基，得到式(V)化合物，即卡莫瑞林；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，式(II)化合物与溴化苄的摩尔比为1:1～3_，优选1:1.2；

优选地，步骤(1)中，反应的温度为65～70℃；

优选地，步骤(1)中，反应在有机溶剂中进行，所述有机溶剂包括N,N-二甲基甲酰胺，丙酮或四氢呋喃，优选N,N-二甲基甲酰胺。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，式(III)化合物与甲基硫酸肼或甲基肼反应，得到式(IV)化合物；

优选地，式(III)化合物与甲基肼的摩尔比为1:1～3，优选1:2。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，式(III)化合物与甲基硫酸肼在碱性条件下进行反应，所述无机碱为醋酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠或碳酸钾，优选为醋酸钠；

优选地，反应的有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或四氢呋喃，优选为乙醇；

优选地，所述反应的条件为：60～90℃反应15～20h。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述脱保护基采用的反应试剂为氯化氢，三氟乙酸或甲基磺酸，优选氯化氢；

优选地，所述脱保护基的反应条件为20～30℃反应1～3h；

6.一种化合物，所述化合物的结构式如式(II)所示：

7.权利要求6所述的化合物的制备方法，其特征在于，将4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐与式(I)化合物反应，得到式(II)化合物；

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，向4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐、式(I)化合物和2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物的溶液中滴加N,N-二异丙基乙胺，-25～-20℃反应15-20h，得到式(II)化合物；

优选地，所述溶液的溶剂为二氯甲烷；

或者，向式(I)化合物和N,N-羰基二咪唑的溶液中滴加4-氧代哌啶-3-羧酸甲酯盐酸盐溶液，20～30℃反应15-20h，得到式(II)化合物；

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，式(I)化合物的制备方法包括如下步骤：

优选地，步骤(a)中反应的溶剂为乙酸乙酯；

优选地，步骤(a)中反应的时间为15-25h；

优选地，步骤(b)中反应的碱为三乙胺；

优选地，步骤(b)中反应的溶剂为二氧六环和水的混合液，其中，水与二氧六环的体积比为1:3～5_，优选1:4；

优选地，步骤(b)中反应的条件为45～55℃反应10～20h。

10.权利要求6所述的化合物或权利要求7～9任一项所述的制备方法在制备卡莫瑞林中的应用。