CN117205270A - 一种组合物及其制备方法与在制备具有乌发作用的产品中的应用 - Google Patents

一种组合物及其制备方法与在制备具有乌发作用的产品中的应用 Download PDF

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林冠宇
罗小雨
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Abstract

本发明涉及生物医药技术领域,具体公开了一种组合物及其制备方法与在制备具有乌发作用的产品中的应用。所述的组合物,包含如下中药原料组分:山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞。研究表明,本发明所述的组合物具有酪氨酸酶激活作用。因此,将本发明所述的组合物作为活性成分用于制备乌发作用的物、保健品、护肤品或日化用品具有重要的应用价值。

Description

一种组合物及其制备方法与在制备具有乌发作用的产品中的 应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种组合物及其制备方法与在制备具有乌发作用的产品中的应用。
背景技术
白发指头发全部或部分变白,随着工作压力的增大,许多中青年都或多或少的出现白发。出现白发的因素很多,而酪氨酸酶活性降低,则会降低黑色素的产生,从而导致头发中黑色素减少,头发中黑色素减少进而导致了白发的出现。比如,中国发明专利CN200410091322.8公开了一种紫铆素及其衍生物在制备增殖黑色素细胞、提高酪氨酸酶的活性和增高黑色素含量药物的用途,其可以用于制备治疗色素代谢疾病如白癜风和白发的药物。
由此可见,开发具有酪氨酸酶激活活性的有效成分,是开发乌发产品的研究方向之一。中医药是我国的医药宝库;因此,以中医药为原料,开发更多的具有酪氨酸酶激活活性的中药组合物,对于白发转乌具有重要的应用价值。
发明内容
为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题,本发明首先提供了一种组合物。
本发明所要解决的技术问题,通过以下技术方案予以实现:
本发明首先提供了一种组合物,其包含如下中药原料组分:山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞。
发明人在研究中惊奇的发现,以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞为原料制备得到的组合物,其具有一定的酪氨酸酶激活作用。因此,将以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞为原料制备得到的组合物作为活性成分用于制备乌发作用的产品具有重要的应用价值。
优选地,所述的组合物,其包含如下重量份的中药原料组分:
山药8~15份;巴戟天5~10份;白芝麻3~6份;黑芝麻20~40份;核桃仁15~25份;肉苁蓉15~25份;黑枸杞10~20份。
最优选地,所述的组合物,其包含如下重量份的中药原料组分:
山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份。
优选地,所述组合物中还包含中药原料补骨脂、杜仲以及熟地黄。
发明人在研究中进一步惊奇的发现,在以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞为原料制备组合物的过程中,同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄,可以进一步显著提高制备得到的组合物的酪氨酸酶激活作用。
发明人在研究中还发现,在以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞为原料制备组合物的过程中,必须同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄,才可以进一步显著提高制备得到的组合物的酪氨酸酶激活作用。然而,仅仅加入补骨脂、杜仲以及熟地黄中的一种或两种的组合,并不能进一步显著提高制备得到的组合物的酪氨酸酶激活作用。
进一步最优选地,补骨脂、杜仲以及熟地黄在组合物中的重量份为:
补骨脂5~10份;杜仲3~6份;熟地黄5~10份。
最优选地,补骨脂、杜仲以及熟地黄在组合物中的重量份为:
补骨脂7份;杜仲5份;熟地黄7份。
本发明还提供了一种上述组合物的制备方法,其包含如下步骤:将所述组合物原料粉碎后混合均匀即得所述的组合物。
本发明提供了另一种组合物的制备方法,其包含如下步骤:
将中药原料混合后,用溶剂进行提取,得溶剂提取液;将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
优选地,所述的溶剂为乙醇水溶液;
进一步优选地,所述的乙醇水溶液为体积分数为70~95%的乙醇水溶液。
优选地,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:8~15L。
最优选地,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L。
优选地,所述的组合物的制备方法还包含如下步骤:
将溶剂提取物进一步上大孔树脂柱,先用3~6倍柱体积的体积分数为23~25%的乙醇水溶液洗脱除杂;然后再用4~8倍柱体积的体积分数为35~38%的乙醇水溶液洗脱,收集体积分数为35~38%的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液,浓缩干燥后即得所述的组合物。
最优选地,将溶剂提取物进一步上大孔树脂柱,先用4倍柱体积的体积分数为24%的乙醇水溶液洗脱除杂;然后再用6倍柱体积的体积分数为37%的乙醇水溶液洗脱,收集体积分数为37%的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液,浓缩干燥后即得所述的组合物。
优选地,所述的大孔树脂柱为D101型大孔树脂柱。
发明人在进一步研究中惊奇的发现,在以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉、黑枸杞、补骨脂、杜仲以及熟地黄为原料制备得到的溶剂提取物的基础上,进一步通过本发明上述大孔树脂柱制备得到的组合物,其相比于溶剂提取物,可以进一步大幅提高组合物的酪氨酸酶激活作用。
在此,发明人需要强调的是,本发明的大孔树脂洗脱条件十分关键;在本发明以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉、黑枸杞、补骨脂、杜仲以及熟地黄为原料制备得到的溶剂提取物的基础上,只有进一步在本发明所述大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的组合物,才能富集得到更多的具有酪氨酸酶激活作用的有效成分,才能进一步大幅提高组合物的酪氨酸酶激活作用;而在其它大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的组合物,并不能富集得到更多的具有酪氨酸酶激活作用的有效成分,并不能进一步提高或大幅提高组合物的酪氨酸酶激活作用。
本发明还提供了一种上述组合物在制备酪氨酸酶激活剂中的应用。
本发明还提供了一种上述组合物在制备具有酪氨酸酶激活作用的产品中的应用。
本发明还提供了一种上述组合物在制备具有乌发作用的产品中的应用。
优选地,所述的产品为药物、保健品、护肤品或日化用品。
有益效果:本发明提供了一种全新组成的组合物;研究表明,所述的组合物具有酪氨酸酶激活作用。因此,将本发明所述的组合物作为活性成分用于制备乌发作用的物、保健品、护肤品或日化用品具有重要的应用价值。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明,但实施例对本发明不做任何形式的限定。
实施例1组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
实施例2组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;补骨脂7份;杜仲5份;熟地黄7份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
实施例3组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;补骨脂7份;杜仲5份;熟地黄7份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物;
(3)将溶剂提取物进一步上大孔树脂柱(大孔树脂柱中填充有30倍溶剂提取物重量的D101型大孔树脂),先用4倍柱体积的体积分数为24%的乙醇水溶液洗脱除杂;然后再用6倍柱体积的体积分数为37%的乙醇水溶液洗脱,收集体积分数为37%的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液,浓缩干燥后即得所述的组合物。
对比例1组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;补骨脂7份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
对比例1与实施例2的区别在于,相比于实施例1只加入补骨脂;而实施例2则是同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄。
对比例2组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;杜仲5份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
对比例2与实施例2的区别在于,相比于实施例1只加入杜仲;而实施例2则是同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄。
对比例3组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;熟地黄7份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
对比例3与实施例2的区别在于,相比于实施例1只加入熟地黄;而实施例2则是同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄。
对比例4组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;补骨脂7份;杜仲5份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
对比例4与实施例2的区别在于,相比于实施例1只加入补骨脂和杜仲;而实施例2则是同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄。
对比例5组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;杜仲5份;熟地黄7份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
对比例5与实施例2的区别在于,相比于实施例1只加入杜仲和熟地黄;而实施例2则是同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄。
对比例6组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;补骨脂7份;杜仲5份;熟地黄7份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物;
(3)将溶剂提取物进一步上大孔树脂柱(大孔树脂柱中填充有30倍溶剂提取物重量的D101型大孔树脂),先用4倍柱体积的体积分数为10%的乙醇水溶液洗脱除杂;然后再用6倍柱体积的体积分数为30%的乙醇水溶液洗脱,收集体积分数为30%的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液,浓缩干燥后即得所述的组合物。
对比例6和实施例3的区别在于,大孔树脂柱的洗脱条件不同。
对比例7组合物的制备
中药原料重量份组成:山药10份;巴戟天8份;白芝麻5份;黑芝麻25份;核桃仁20份;肉苁蓉20份;黑枸杞15份;补骨脂7份;杜仲5份;熟地黄7份。
组合物的制备:
(1)将中药原料混合后,用体积分数为95%的乙醇在75℃下进行加热回流提取2h,提取结束后得溶剂提取液;其中,中药原料的总重量与乙醇水溶液的用量比为1kg:12L;
(2)将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物;
(3)将溶剂提取物进一步上大孔树脂柱(大孔树脂柱中填充有30倍溶剂提取物重量的D101型大孔树脂),先用4倍柱体积的体积分数为40%的乙醇水溶液洗脱除杂;然后再用6倍柱体积的体积分数为60%的乙醇水溶液洗脱,收集体积分数为60%的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液,浓缩干燥后即得所述的组合物。
对比例7和实施例3的区别在于,大孔树脂柱的洗脱条件不同。
实验例1
实验方法:取用DMSO溶解的不同浓度的待测样品溶液10μl以及pH值为6.8的磷酸缓冲液900μl混合后,然后加入浓度为0.5mg/mL酪氨酸酶溶液(用pH值为6.8的磷酸缓冲液配制)10μl,放入25℃的水浴中恒温40min;接着再浓度为1.5mg/mL的L-DOPA溶液80μl,摇匀后在25℃的恒温条件下测试475nm的光密度值(OD值);根据OD值增长直线求出其斜率值,所述的斜率值为酶活力值,即酪氨酸酶激活率;其中,实验组1~10的测试样品分别为实施例1~3以及对比例1~7制备得到的组合物;测试结果见表1。
表1.本发明组合物对酪氨酸酶的激活实验结果
测试样品 酪氨酸酶激活率
实验组1 实施例1制备得到的组合物 58%
实验组2 实施例2制备得到的组合物 81%
实验组3 实施例3制备得到的组合物 165%
实验组4 对比例1制备得到的组合物 62%
实验组5 对比例2制备得到的组合物 65%
实验组6 对比例3制备得到的组合物 68%
实验组7 对比例4制备得到的组合物 63%
实验组8 对比例5制备得到的组合物 66%
实验组9 对比例6制备得到的组合物 44%
实验组10 对比例7制备得到的组合物 89%
从表1实验结果中可以看出,实施例1制备得到的组合物具有一定的酪氨酸酶激活作用;这说明:本发明以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞为原料制备得到的组合物,其具有一定的酪氨酸酶激活作用。
从表1实验结果中可以看出,实施例2制备得到的组合物,其酪氨酸酶激活率要显著高于实施例1制备得到的组合物。这说明:在以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞为原料制备组合物的过程中,同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄,可以进一步显著提高制备得到的组合物的酪氨酸酶激活作用。
从表1实验结果中可以看出,对比例1~5制备得到的组合物,其酪氨酸酶激活率与实施例1制备得到的组合物相比,虽有提高,但是并不显著,其提高幅度显著低于实施例2制备得到的组合物。这说明:在以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞为原料制备组合物的过程中,必须同时加入补骨脂、杜仲以及熟地黄,才可以进一步显著提高制备得到的组合物的酪氨酸酶激活作用。然而,仅仅加入补骨脂、杜仲以及熟地黄中的一种或两种的组合,并不能进一步显著提高制备得到的组合物的酪氨酸酶激活作用。
从表1实验结果中可以看出,实施例3制备得到的组合物,其酪氨酸酶激活率要进一步大幅高于实施例2制备得到的组合物。在以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉、黑枸杞、补骨脂、杜仲以及熟地黄为原料制备得到的溶剂提取物的基础上,进一步通过本发明上述大孔树脂柱制备得到的组合物,其相比于溶剂提取物,可以进一步大幅提高组合物的酪氨酸酶激活作用。
从表1实验结果中可以看出,对比例6和7制备得到的组合物,其酪氨酸酶激活率与实施例2制备得到的组合物相比并未得到提高或大幅的提高。这说明:本发明的大孔树脂洗脱条件十分关键;在本发明以山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉、黑枸杞、补骨脂、杜仲以及熟地黄为原料制备得到的溶剂提取物的基础上,只有进一步在本发明所述大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的组合物,才能富集得到更多的具有酪氨酸酶激活作用的有效成分,才能进一步大幅提高组合物的酪氨酸酶激活作用;而在其它大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的组合物,并不能富集得到更多的具有酪氨酸酶激活作用的有效成分,并不能进一步提高或大幅提高组合物的酪氨酸酶激活作用。

Claims (10)

1.一种组合物,其特征在于,包含如下中药原料组分:山药、巴戟天、白芝麻、黑芝麻、核桃仁、肉苁蓉以及黑枸杞。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,包含如下重量份的中药原料组分:
山药 8~15份; 巴戟天 5~10份; 白芝麻 3~6份; 黑芝麻 20~40份;核桃仁 15~25份; 肉苁蓉 15~25份; 黑枸杞 10~20份。
3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,包含如下重量份的中药原料组分:
山药 10份;巴戟天 8份;白芝麻 5份;黑芝麻 25份;核桃仁 20份;肉苁蓉 20份; 黑枸杞 15份。
4.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述组合物中还包含中药原料补骨脂、杜仲以及熟地黄。
5.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,补骨脂、杜仲以及熟地黄在组合物中的重量份为:
补骨脂 5~10份; 杜仲 3~6份; 熟地黄 5~10份;
最优选地,补骨脂、杜仲以及熟地黄在组合物中的重量份为:
补骨脂7份;杜仲5份;熟地黄7份。
6.权利要求1~5任一项所述的组合物的制备方法,其特征在于,包含如下步骤:将所述组合物原料粉碎后混合均匀即得所述的组合物。
7.权利要求1~5任一项所述的组合物的制备方法,其特征在于,包含如下步骤:
将中药原料混合后,用溶剂进行提取,得溶剂提取液;将溶剂提取液浓缩干燥后得溶剂提取物,即得所述的组合物。
8.权利要求1~5任一项所述的组合物在制备酪氨酸酶激活剂中的应用。
9.权利要求1~5任一项所述的组合物在制备具有酪氨酸酶激活作用的产品中的应用。
10.权利要求1~5任一项所述的组合物在制备具有乌发作用的产品中的应用。
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