CN117202899A - 用于治疗与由液体分泌导致的药物洗脱相关的疾病的组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

一种用于治疗腹泻和其他疾病的组合物，其包含一种或多种多酚化合物；硫糖铝；和至少一种酸的反应产物。

Description

用于治疗与由液体分泌导致的药物洗脱相关的疾病的组合物 和方法
相关申请
本申请要求2021年2月19日提交的美国申请63/151,485的权益，其整体内容通过引用并入本文。
发明领域
本发明涉及用于治疗腹泻和其他疾病的组合物，以及它们用在治疗腹泻和其他疾病中的方法。
背景
上皮分泌单元由连接上皮腺底部和器官表面的空间组成。它可以被视为具有不同直径的圆柱体，受到腺体上皮细胞和相关结构(诸如肠上皮实例中所示的上皮绒毛(灰色空间，图1))的限制。
每个分泌单元产生(分泌)水、电解质和粘液。所有分泌单元的输出沿着器官的长度结合。如果分泌>吸收，则上皮器官处于所谓的净分泌状态，并导致液体排出。如果分泌<吸收，则肠处于所谓的净吸收状态，不会发生液体排出，并且随之发生液体吸收。
分泌单元覆盖着层厚50-500μm的未搅拌液体，由固定的粘液层和水组成。这种粘液层通常被视为保护屏障，其为药物接近其靶创造障碍。
粘液具有双重特性，粘液的宏观和微观流变学截然不同。这就是为什么粘液移动相对缓慢并捕获大于约200-500nm的物体，同时允许小于约200nm或2000Da阈值的分子和颗粒自由并无阻碍地通过。
对于口服施用的药物，其作用在形成隐窝壁的肠细胞的腔(顶端)表面，活性物质必须从肠腔扩散到分泌单元底部的作用部位。这种扩散针对来自分泌单元的液体连续流出(flux)发生，即所谓的“对流洗脱(convective washout)”。如果对流洗脱太强，药物就无法克服洗脱到达靶受体，并且不能达到期望的治疗效果。对流洗脱的问题已被其他人注意到，例如Lin等人在2013年所描述和建模的。
两个参数对于小分子的及时扩散是重要的：浓度梯度和扩散系数。本发明人计算了药物在肠净吸收状态(分泌速率＝0)和肠净分泌状态(分泌速率＝4e-2μl/cm2)下的浓度分布。浓度分布变化很大。在扩散系数2e-10m2/s、浓度10μm和时间20min时，药物在吸收状态中完全渗入隐窝，并且在分泌状态下不渗入隐窝。这证明了对流洗脱的影响，即当分泌液体流出阻止药物渗入分泌单元底部时。有两种方法改善渗入：1)更高的扩散系数，和2)更高的浓度；扩散系数具有10x更显著的效果。
根据上皮组织的解剖和功能特性，每个肠上皮分泌单元含有不同量的粘液。如上所述，粘液层具有双重流变学：高粘性的宏观流变学和水样微观流变学。来自肠分泌单元和此类单元内的对流洗脱的速率由此类单元中包含的液体的组成决定。泊肃叶定律规定，半径和粘度是限定管中的流动以及确保流动所需的压力梯度的关键参数。如果水占据了分泌单元体积的大部分，则可预期高度的对流洗脱。如果粘液占据了体积的大部分，则可预期缓慢的运动和最小的对流洗脱。
粘液占据分泌单元体积的50％或更多并不少见。粘液不与水混溶(图2)。在这种情况下，两种不同的流动模式将在相同分泌单元中共存：低粘度水组分的快速流出，其阻碍扩散，以及粘性粘液的缓慢流出，其有利于扩散。粘液由于其宏观流变特性而影响液体的速率，但粘液不会影响小分子的扩散，由于其微观流变特性而与水表现没有区别。
对于7Pa的dP和相同的分泌单元几何形状，水的线速率(0.00089Pas)＝2.14E-13m/s，以及在(10Pas)粘液的速率＝1.91E-17m/s。发明人已经确定，与这些速率对应的药物扩散模式表明完全渗入分泌隐窝中。不希望受理论束缚，进一步认为，固定液相的外边界具有最高药物浓度，其等于在时间等于0时溶解在肠腔中的药物浓度。
附图的简要说明
图1呈现了代表上皮分泌单元的横截面图，其包括连接上皮腺底部和器官表面的空间。它可以被视为或被建模为具有不同直径的圆柱体(实心灰色形状)，受腺体上皮细胞和相关结构(诸如肠上皮实例中所示的上皮绒毛或纤毛壁)的限制。
图2呈现了显微照片，其显示肠上皮、上皮分泌单元、绒毛、具有粘液的隐窝和不混溶粘液模型。
图3呈现了小鼠在霍乱毒素(CTx)攻击以及用示例性组合物(VR-AD-1005)和单独的比较组合物硫糖铝和多酚处理后的液体积累数据。与比较组合物相比，示例性组合物在CTx攻击后显著减少小肠分泌。这完全是出乎意料和令人惊讶的。
图4呈现的数据显示，示例性组合物VR-AD-1005在致死剂量的CTx后显著改善小鼠的存活率。
图5呈现的数据显示，与比较对照相比，在小鼠中的非致死96小时5％DSS攻击后示例性组合物(VR-AD-2005)减少腹泻发作。
图6呈现的数据显示，与比较对照相比，在小鼠的非致死96小时5％DSS攻击后示例性组合物(VR-AD-2005)降低腹泻严重度。
发明的简要描述
本发明通过提供抗分泌抗腹泻药物来解决上述问题和其他问题。本发明的其他实施方式包括克服对流洗脱问题的方法、克服对流洗脱问题的组合物、治疗涉及对流洗脱或与对流洗脱相关的疾病的方法，所述疾病例如通过上皮细胞或组织的分泌(例如在肠内)由对流洗脱指示或加速。提供了实例并证实了本发明组合物在肠内分泌、表现为(诸如霍乱导致的)严重腹泻的情况下的功效。
在实施方式中，提供了组合物，其包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；和
至少一种酸。
在实施方式中，并且参考前述组合物，多酚可以是蓝莓、越橘、黑刺李、苦莓、葡萄、葡萄渣、黑玫瑰、黑醋栗、山核桃、克罗非莫、龙血(巴豆属)、其干燥形式、其种子形式、其汁液、其粉末形式、其液体形式、其提取物或其组合中的一种或多种。
在实施方式中，并且参考前述组合物，多酚可以是蓝莓、越橘、黑刺李、苦莓、黑醋栗、其干燥形式、其种子形式、其汁液、其粉末形式、其液体形式、其提取物或其组合中的一种或多种。
在实施方式中，并且参考前述组合物，多酚可以是黑刺李和蓝莓的混合物、黑刺李和越橘的混合物、其干燥形式、其种子形式、其汁液、其粉末形式、其液体形式、其提取物或其组合。
在实施方式中，并且参考前述组合物，多酚可以是没食子酸、可水解没食子酸、不可水解没食子酸、浓缩没食子酸、褐藻多酚、花青素、花翠素、矮牵牛素、花葵素、芍药素、锦葵素、儿茶素、没食子儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、槲皮素、单宁酸、芹菜素、五间二没食子酰葡萄糖、单宁、浓缩单宁、没食子单宁酸、没食子单宁、鞣质(tanninium)、其单体形式、其聚合度为1、2或更大的聚合物、其糖基化形式、其糖苷配基形式、其盐、其酯或其组合中的一种或多种。
在实施方式中，并且参考前述组合物，多酚可以是单宁酸、没食子酸、其盐或其组合。
在实施方式中，并且参考前述组合物，酸可以选自由柠檬酸、HCl、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸、苯甲酸、异柠檬酸、奎宁酸、富马酸、乙酸、乳酸、果酸及其组合组成的组。
在实施方式中，并且参考前述组合物，酸可以选自由柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸或其任意组合组成的组。
在实施方式中，并且参考前述组合物，酸可以选自由HCl、柠檬酸、苹果酸及其组合组成的组。
在实施方式中，并且参考前述组合物，酸/多酚/硫糖铝重量比可以是酸0.0001-1：多酚0.001-1：硫糖铝0.0001-1。
在实施方式中，并且参考前述组合物，酸/多酚/硫糖铝重量比可以是酸0.001-0.5：多酚0.002-0.5：硫糖铝0.0001-0.5。
在实施方式中，并且参考前述组合物，酸/多酚/硫糖铝重量比可以是酸0.1-1：多酚0.05-0.5：硫糖铝0.01-1。
在实施方式中，并且参考前述组合物，组合物可进一步包含选自由洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合组成的组的活性剂或抗腹泻剂。
在实施方式中，并且参考前述组合物，组合物可以是水凝胶形式。
在实施方式中，提供了用于制备组合物的方法，其包括：
将一种或多种多酚化合物、硫糖铝和至少一种酸接触；和
进行反应，以形成反应产物。
参考前述方法，多酚和硫糖铝可任选地首先彼此接触，并且然后与酸接触。
在实施方式中，并且参考前述方法，硫糖铝和酸可任选地首先彼此接触和反应，并且然后与多酚接触和反应。
在实施方式中，提供了用于治疗腹泻病的方法，其包括向需要此类治疗或处于需要此类治疗的风险的受试者施用组合物；所述组合物包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；和
至少一种酸。
在实施方式中，提供了用于治疗腹泻病的组合物，其包含：
一种或多种多酚化合物；和
硫糖铝；
其中，多酚不是从绿茶叶提取的，并且不含从绿茶叶提取的儿茶素类。
在实施方式中，提供了用于治疗腹泻病的方法，其包括向需要此类治疗或处于需要此类治疗的风险的受试者施用组合物；所述组合物包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；和
至少一种酸；
以及至少一种选自由洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合组成的组的活性剂或抗腹泻剂。
在实施方式中，提供了用于治疗分泌性腹泻的方法，其包括向需要此类治疗或处于需要此类治疗的风险的受试者施用组合物；所述组合物包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；和
至少一种酸。
在实施方式中，提供了用于治疗与由液体分泌导致的药物洗脱相关的腹泻病的组合物，其包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；
至少一种酸：
以及至少一种选自由洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合组成的组的活性剂或抗腹泻剂。
在实施方式中，提供了用于治疗与由液体分泌导致的药物洗脱相关的腹泻病的方法，其包括向需要此类治疗或处于需要此类治疗的风险的受试者施用组合物；所述组合物包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；
至少一种酸：
以及至少一种选自由洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合组成的组的活性剂或抗腹泻剂。
发明详述
本发明人已经发现如何利用上皮组织的杯状细胞产生的粘液来促进上皮器官中的药物转运，并且提供了新颖的组合物，其令人惊讶且出乎意料地证明了在治疗腹泻病和其他疾病中(包括在严重的分泌性腹泻中)的有效性。在实施方式中，腹泻病与由液体分泌导致的药物洗脱相关。
本发明人认为，由于粘液(粘弹性水凝胶)对填充上皮分泌单元的液体体积有贡献，因此可以存在有利的液体输出速率分布，如果正确利用，其可以允许有效的药物递送。本发明人发现，如果药物要作用于位于隐窝细胞顶端区域的靶受体，则必须(1)显著增加药物的剂量，以使其在对流洗脱背景下起作用，(2)设计具有更高扩散系数的药物，或(3)设计完全不依赖于对流洗脱的全身药物。这些选择都不是一个好的选择：增加剂量和全身给药都会导致副作用的发展，并且找到一种具有期望药理学和高扩散系数的组合的分子可能根本不可能。
在一个实施方式中，提供了药物施用方法，其中在包含在上皮分泌单元中的粘液存在的情况下，粘液被用作用于药物递送的载体，并作为通过将载有药物的载体固定到固定或相对固定的包含在上皮分泌单元中的粘液的层来避免对流洗脱的手段。药物递送载体(小颗粒、凝胶、膜等)被粘液固定，并且随后与对流洗脱分离，同时释放的药物通过粘液自由扩散并快速与其上皮表面的靶元件接触。期望的是药物通过粘液自由扩散(即尺寸<2000Da)，而载体应被粘液截留，例如，由于载体相对较大的尺寸(>200nm)或由于其粘膜粘附特性。在这方面，使用粘液作为载体不同于传统的片剂、胶囊或缓释制剂。
如上所述，克服对流洗脱问题的一种方式是将药物浓度增加100倍。人体小肠是长约6米(5-7m)并且直径约5cm的管，其稳态体积为12升。在12升中Kd为10μm和MW为300g/mol的1mM药物将构成3.6g的稳态剂量。考虑到霍乱患者的粪便量达到100ml/kg/天，稳态体积应通过粪便流失体积来补充，在70kg的成人中，每天额外增加7l。因此，为了确保抗腹泻效果，该组成的总剂量可接近6g/天。显然，该剂量非常高，并且预计由该剂量会随之产生显著的副作用。
上述计算中有一个元素，其是由上皮分泌单元的形态定义的。药物浓度定义在固定液相的外边界。从解剖学上讲，腔内容物和固定液相的外边界之间没有区别。因此，固定液相的外边界具有最高药物浓度，其等于时间＝零时溶解在肠腔中的药物浓度。
如果全部量的高度浓缩药物被附着作为覆盖固定液相的层而不是溶解在占据肠腔的全部液体中，则腔体积不再是药物递送的因素，并且药物的剂量可显著减少。
在本申请中，提供了药物施用方法，其中药物作为高度浓缩活性物质的薄层来递送，所述高度浓缩活性物质的薄层通过粘附到肠上皮细胞的表面元件、或肠粘液层、或覆盖肠上皮的固定液相来覆盖肠上皮表面。不希望受理论的束缚，这被认为与口服载体的经典想法不同，口服载体将药物释放到整个肠内容物体积中(无论是立即还是经过一段时间，作为活性物质或纳米颗粒等)，因为它允许需要施用至患者的药物剂量减少达至100倍。
在一个方面中，提供了用于治疗与由液体分泌导致的药物洗脱相关的腹泻病的组合物，其包含：
至少一种活性剂或抗腹泻剂，其选自由多酚、洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合组成的组；和
上皮表面或粘液结合的薄膜形成化合物，其选自由水凝胶形成剂，酸改性硫糖铝，硫糖铝、酸改性硫糖铝和蔗糖八硫酸酯的混合物，硫糖铝，胶，粘液结合剂，生物粘合剂，其盐或其组合组成的组。
在实施方式中，提供了组合物，其包含针对对流洗脱而递送的活性剂或抗腹泻剂，以及上皮表面或粘液结合的薄膜形成化合物，其中上皮表面或粘液结合的薄膜形成化合物携带活性剂或抗腹泻剂，与上皮表面或上皮组织产生的粘液结合，形成覆盖粘膜区域的薄膜，并将活性剂或抗腹泻剂释放到粘液中。
活性剂或抗腹泻剂没有特别限制。一些非限制性实例包括多酚、洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合。
活性剂或抗腹泻剂的优选实施方式是多酚。在将多酚与薄膜形成化合物组合之前，多酚可以是液体提取物、悬浮液或分散体的形式，或其可以是干燥粉末的形式，或其任意组合。多酚的合适实例可以在2018年11月29日公开的美国公开号2018/0338932，和2021年1月14日公开的美国公开号2021/0008028中找到，二者均属于本申请人，其全部内容通过引用并入本文中的所有组合。
多酚没有特别限制。多酚是富含-OH基团并具有抗增殖特性和/或对离子和水转运蛋白的抑制活性的合成或天然存在的多酚。
在实施方式中，多酚是植物来源的、植物性的、花色苷(anthocyanoside)、花色素、原花色素、单宁或其组合中的一种或多种。
在实施方式中，多酚是蓝莓、越橘、黑刺李、苦莓、葡萄、葡萄渣、黑玫瑰、黑醋栗、山核桃、克罗非莫、龙血(巴豆属)、其干燥形式、其种子形式、其汁液，其粉末形式、其液体形式、其提取物或其组合中的一种或多种。在实施方式中，多酚是蓝莓、越橘、黑刺李、苦莓、黑醋栗或其组合中的一种或多种。在优选的实施方式中，多酚是黑刺李和蓝莓的混合物、或黑刺李和越橘的混合物。更优选的是黑刺李和蓝莓的混合物。
在实施方式中，多酚是没食子酸、可水解没食子酸、不可水解没食子酸、浓缩没食子酸、褐藻多酚、花青素、花翠素、矮牵牛素、花葵素、芍药素、锦葵素、儿茶素、没食子儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、槲皮素、单宁酸、芹菜素、五间二没食子酰葡萄糖、单宁、浓缩单宁、没食子单宁酸、没食子单宁、鞣质、其单体形式、其聚合度为1、2或更大的聚合物、其糖基化形式、其糖苷配基形式、其盐、其酯或其组合中的一种或多种。在优选的实施方式中，多酚是花青素、花翠素、儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、单宁酸、没食子酸、其糖基化形式、其糖苷配基形式、其聚合物或其组合。在另一优选的实施方式中，多酚是单宁酸、没食子酸、其盐或其组合。
如果多酚是液体提取物形式，则溶剂没有特别限制。优选的溶剂包括乙醇、水或其组合。尽管本文也考虑更低的浓度，但是液体提取物中的多酚浓度或通过FC方法建立的总多酚指数(TPI)优选为15mg/100ml或更高。例如，对于液体提取物，TPI的范围可以是0.5至50mg/mL以及更高，包括0.8-4.5mg/mL、2.0-4.5mg/mL、2.5-4.0mg/mL、2.8-4.5mg/mL、5-30mg/mL、10-25mg/mL、15mg/mL、0.5至100mg/mL和更高。
如果多酚是固体形式，诸如干燥粉末或干燥液体提取物，则TPI优选为10mg/g或更高，0.1-999.9mg/g、0.1-2mg/g、0.5-3.5mg/g、0.5-15mg/g、1-500mg/g、5-400mg/g、10-300mg/g、20-200mg/g、325-500mg/g、300-450mg/g和更高。根据上下文，术语“多酚提取物”可以指液体形式或固体形式。在优选的实施方式中，该术语在本文中是指固体形式。
在一个实施方式中，除了多酚之外，组合物可另外包含其他活性剂。一些非限制性实例包括洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合。
上皮表面或粘液结合的薄膜形成化合物没有特别限制。一些非限制性实例包括水凝胶形成剂，酸改性硫糖铝，硫糖铝、酸改性硫糖铝和蔗糖八硫酸酯的混合物，硫糖铝，胶，粘液结合剂，生物粘合剂，其盐或其组合。在实施方式中，上皮表面或粘液结合的薄膜形成化合物选自硫糖铝，酸改性硫糖铝，或硫糖铝、酸改性硫糖铝和蔗糖八硫酸盐的混合物，及其盐。最优选硫糖铝和酸改性硫糖铝。
硫糖铝(C12H54Al16O75S8)具有以下化学结构：
硫糖铝难溶于水。另一方面，蔗糖八硫酸钾盐易溶于水。当施用到酸性环境(例如胃)时，硫糖铝作为酸浓度的函数失去Al(OH)3，作为失去的Al(OH)3部分的数量的函数从固体转变为水凝胶到液体。为了硫糖铝的最佳临床疗效，最好经口施用，以与胃酸发生反应以最大化其有益的肠衣特性。
酸改性硫糖铝由用一种或多种酸处理硫糖铝得到。硫糖铝是蔗糖和氢氧化铝的复合物，其在含水酸性介质中将粘性水凝胶形成为松散的水凝胶到液体粘性糊状物。在酸性环境(pH<4)中，硫糖铝发生交联和聚合，这被认为至少部分是由于Al(OH)3从SO3 -基团脱离、一个或多个羟基-水合物和铝的水合氧化物Al(OH)n(H2O)5-n +(3-n)(其中n为1-3)之间的氢键合所致。对于反应产物，在与多酚结合时，认为多酚上的-OH基团参与氢键合(或配位键合、螯合键合或(不太可能)共价键合)网络，并因此夹带在酸改性硫糖铝中，以进一步交联水凝胶网络。硫糖铝、酸和多酚可以以任何顺序接触，并且任选地干燥和/或用水和/或乙醇重构，以产生反应产物，其可以进一步包括硫糖铝、蔗糖八硫酸酯、蔗糖八硫酸盐、硫糖铝的混合盐、铝的羟基-水合物和水合氧化物、其他铝盐及其组合中的一种或多种作为反应产物。
还预期该组合物可以通过以蔗糖八硫酸酯或蔗糖八硫酸盐(并且非硫糖铝)开始，和添加Al(III)盐和多酚，并调节pH获得。
硫糖铝与酸和多酚反应后被认为充当水凝胶，被抗分泌多酚饱和，并且所得组合物以薄层覆盖肠上皮分泌单元，而不需要溶解在肠腔中；将多酚与单元中固定的粘液结合，并且这样做时允许多酚避免对流洗脱的影响，扩散到肠隐窝中，并抑制肠细胞分泌Cl-和水。
在一个实施方式中，将硫糖铝和多酚混合在一起，并且之后添加酸。在一个实施方式中，酸可以源自胃或胃道，在其中发生反应。在另一个实施方式中，将硫糖铝和酸混合在一起，并且之后添加多酚。在另一个实施方式中，基本上同时将硫糖铝、多酚和酸混合在一起。
通过控制溶液或固体中酸的浓度，我们可以从固体到粘性水凝胶到松散的水凝胶到液体获得硫糖铝所需的化学组成和物理/化学状态。
通过调整酸、硫糖铝和多酚之间的比率，获得在水中具有从不溶到水凝胶到完全溶解的不同溶解度的配方。
酸没有特别限制，并且可以例如选自柠檬酸、HCl、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸、苯甲酸、异柠檬酸、奎宁酸、富马酸、乙酸、乳酸、果酸或其任意组合。在实施方式中，酸选自柠檬酸、HCl、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸、异柠檬酸、富马酸或其任意组合。在实施方式中，酸选自柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸、异柠檬酸或其任意组合。在实施方式中，酸选自柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸或其任意组合。在实施方式中，酸是HCl、柠檬酸、苹果酸或其组合。
活性剂或抗腹泻剂与上皮表面或粘液结合的薄膜形成化合物的相对量没有特别限制。例如，它们可以以范围为1:100至100:1(包括端点)，包括1:100、10:90、20:80、30:70、40:60、50:50、60:40、70:30、80:20、90:10和100:1或其间的任何值或子范围的w/w比存在。
多酚、硫糖铝和酸的w/w/w比没有特别限制，并且可以根据所需制剂适当调整。例如，在本文的任意组合物中，酸/多酚/硫糖铝重量比可以是酸0.0001-1：多酚0.001-1：硫糖铝0.0001-1；酸0.001-0.5：多酚0.002-0.5：硫糖铝0.0001-0.5；酸0.05-0.25：多酚0.02-0.1：硫糖铝0.02-0.25；以及酸0.1-1：多酚0.05-0.5：硫糖铝0.01-1；以及其间的所有值、组合和子范围。
在实施方式中，硫糖铝(粉末)与多酚(粉末)混合并在酸溶液(即盐酸、柠檬酸、苹果酸、乙酸等)中重构将形成被多酚饱和的水不溶性水凝胶。水凝胶粘度可以通过改变酸浓度来调节。与如本文所述的多酚混合的水凝胶VR-AD-1005是一个实例。
搅拌时水凝胶可稳定达至12小时；之后，或者如果混合均匀并允许静置超过10分钟，液体水凝胶重聚合成固体糊状物。通过干燥和冷促进再聚合。
通过调整多酚的类型，可以得到在水中具有从不溶到水凝胶到完全溶解的不同溶解度以及不同体内功效的配方。
重构后具有水凝胶结构的配方最有利于附着至胃肠粘膜并对抗对流洗脱。
可存在任选的成分，包括蔗糖、钠、钾、镁、锌、钙、硒、铋、有机酸、其盐中的一种或多种。在一个实施方式中，组合物不包含蔗糖。在另一个实施方式中，组合物不包含任何糖。在一个实施方式中，多酚不是从绿茶叶中提取的，并且不含从绿茶叶提取的儿茶素类。
一个实施方式是硫糖铝和从蓝莓和黑刺李浆果的混合物中提取的多酚组合的组合物。
用于治疗腹泻的组合物的一个实施方式包括多酚、硫糖铝和柠檬酸。
其他示例性组合物和方法描述如下：
将多酚(黑刺李浆果和蓝莓提取物)和硫糖铝结合。
A.固-固制剂。对于固-固混合，1:1w/w或1:1:1w/w/w是可接受的，但也可考虑其他比率。
1.将黑刺李浆果、蓝莓或富含多酚的混合浆果液体提取物干燥成细粉。将获得的粉末与硫糖铝混合。按照适用的标准方案和程序封装或压制成丸。
2.将黑刺李浆果、蓝莓或富含多酚的混合浆果液体提取物干燥成细粉。将获得的粉末与硫糖铝和柠檬酸混合。按照适用的标准方案和程序封装或制成丸。
B.液-固混合。对于液-固混合，液体提取物与硫糖铝的工作比率范围为1:3-1:10v/w(ml/g)；在醇步骤中：(液体提取物+硫糖铝)对醇：1:1v/v((液体提取物+硫糖铝):醇)得到凝胶；1:10v/v 10份醇和1份多酚/硫糖铝混合物((液体提取物+硫糖铝)：醇)得到固体。
1.将富含多酚的液体提取物与硫糖铝加热混合。建议40℃；勿超过100℃。搅拌15分钟。在室温下不搅拌静置1小时。倒出上清液并收集沉淀物(凝胶)。干燥和粉碎沉淀物并收集所得粉末。同时遵循适用的标准方案和程序，将粉末封装或压制成丸。
2.用柠檬酸将液体黑刺李浆果、蓝莓或混合提取物酸化至pH2至pH3之间的pH范围；加热的同时将富含多酚的液体提取物与硫糖铝混合。建议40℃；勿超过100℃。搅拌15分钟。在室温下不搅拌静置1小时。倒出上清液并收集沉淀物(凝胶)。干燥、粉碎并收集沉淀物。与次序1相比，产率显著提高。
3.用柠檬酸将液体黑刺李浆果、蓝莓或混合提取物酸化至pH2至pH3之间的pH范围；加热的同时将富含多酚的液体提取物与硫糖铝混合。建议40℃；勿超过100℃。搅拌15分钟。以1:1v/v比添加乙醇并混合均匀。在室温下孵育(不混合)至少1小时允许形成沉淀物；4℃过夜孵育后观察到最佳沉淀物。倒出上清液并收集沉淀物(凝胶)。干燥沉淀物，粉碎并收集所得粉末。与次序2相比，产率显著提高。
4.用柠檬酸将液体黑刺李浆果、蓝莓或混合提取物酸化至pH2至pH3之间的pH范围；加热的同时将富含多酚的液体提取物与硫糖铝混合。建议40℃；勿超过100℃。搅拌15分钟。以10:1v/v比添加乙醇(10份乙醇和1份多酚/硫糖铝混合物)。在室温下孵育(不混合)至少3小时以形成沉淀物。与之前的次序不同，沉淀物不是凝胶，而是100％脆性固体。倒出乙醇并收集固体，除去残留的醇(即通过蒸发)，粉碎并收集所得粉末。与次序3相比，产率显著提高。此外，无需干燥凝胶，并且整个体积的提取物/硫糖铝都转化为固体。
在一个实施方式中，受试者是哺乳动物。在一个实施方式中，受试者是人类。
适应症包括治疗人类或动物受试者中任何具有分泌增加的腹泻病；还考虑了治疗上皮器官的其他疾病，其中药物渗入腺体中以对抗主动分泌。
本发明可适当地用于治疗人类感染性和人类非感染性腹泻。可以通过本发明治疗的人类感染性腹泻没有特别限制并且可包括例如细菌和病毒感染性腹泻。细菌感染性腹泻的一些非限制性实例包括由弧菌属(例如霍乱弧菌)、大肠杆菌、志贺氏菌属、沙门氏菌属、弯曲杆菌属、葡萄球菌属、耶尔森氏菌属、假单胞菌属、克雷伯氏菌属、气单胞菌属、梭菌属(例如艰难梭菌)引起的那些腹泻，食物中毒和毒素介导的腹泻(例如，霍乱毒素、耐热肠毒素、不耐热肠毒素、志贺毒素、细胞毒素等)或其任意组合。病毒感染性腹泻的一些非限制性实例包括由轮状病毒性腹泻、诺如病毒性腹泻、细小病毒性腹泻、腺病毒性腹泻、星状病毒性腹泻、环曲病毒性腹泻、卡西韦病毒性腹泻(Calciviral diarrhea)、小双节病毒性腹泻、冠状病毒性腹泻、瘟病毒性腹泻和HIV腹泻或其任意组合引起的那些。人类非感染性腹泻病的一些非限制性实例包括炎症性肠病、肠易激综合征、先天性腹泻(先天性氯化物腹泻、先天性钠腹泻、微绒毛包涵体病、簇状肠病、原发性胆汁酸吸收不良等)、药物相关性腹泻、由化疗或放疗诱导的粘膜炎引起的腹泻、其他腹泻病或其任意组合。
本发明可适当地用于治疗动物感染性腹泻诸如细菌性或病毒性腹泻，或非感染性腹泻。这些的一些非限制性实例包括小牛腹泻、牛病毒性腹泻、已知引起小牛腹泻的其他肠道病原体(即，牛轮状病毒(BRV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛病毒性腹泻病毒、肠道沙门氏菌、大肠杆菌、产气荚膜梭菌和小隐孢子虫)以及新出现的肠道病原体诸如牛环曲病毒(BToV)和杯状病毒(牛诺如病毒(BNoV)和纽布病毒)、3周龄以下仔猪的传染性胃肠炎(TGE和猪流行性腹泻)腹泻；猪中的断奶猪沙门氏菌腹泻、猪腹泻、轮状病毒、隐孢子虫病、猪痢疾短螺旋体和大肠杆菌。
一般而言，药物组合物含有有效量的活性化合物以实现其预期目的。在一个实施方式中，治疗有效量是指有效抑制正在治疗的受试者中腹泻病的发展或进展、或消除腹泻病的量。鉴于本文提供的描述，有效量的确定在本领域技术人员的能力范围内。治疗有效剂量可以单独施用或作为与其他治疗组合的辅助疗法。
根据需要，组合物可以以固体、液体、糊状物、乳液、悬浮液或分散体等形式施用。如果是液体、糊状物、乳液、悬浮液或分散体，则液体可以是水、盐水、乙醇、其他生理载体或其组合。
只要不减损本文的预期效果或偏离本文的教导，可以使用一种或多种生理上可接受的载体、赋形剂和助剂以常规方式配制组合物，所述载体、赋形剂和助剂有利于将化合物加工成药学上可以使用的制剂。适当的制剂可以取决于所选择的施用途径，鉴于本文提供的描述，这在本领域技术人员的能力之内。
鉴于本文提供的描述，剂量、频率和治疗方案在本领域技术人员的能力之内。
不旨在进行限制的合适的施用途径可以包括例如口服、直肠、小肠，优选口服。鉴于本文提供的描述，其他途径在本领域技术人员的能力之内。
当在权利要求和/或说明书中与术语“包括/包含/含有(comprising)”结合使用时，词语“一/一个/一种(a/an)”的使用可以指“一个”，但它也与“一个或多个/一种或多种(one or more)”、“至少一个/至少一种(at least one)”和“一个或多于一个/一种或多于一种/一个或超过一个/一种或超过一种(one or more than one)”的含义一致。
术语“约”用于指示值包括标准差。
实施例
提取方法
使用几种已知洗脱和提取多酚的溶剂进行提取实验。测试作为提取剂的丙酮、甲醇、乙醇和水及其组合。蓝莓以新鲜(Importaciones Samanes，西班牙纳瓦拉)、冷冻(StopandShop，美国康涅狄格州哈姆登)或干果粉(NutriSeed，英国伦敦)的形式购买。黑刺李浆果和粉末购自DZ Licores(DZ Licores，西班牙迪卡斯蒂略)和西班牙纳瓦拉Importaciones Samanes。苦莓购自Amazon.com(亚马逊，美国华盛顿州西雅图)。提取后，通过众所周知的福林-西奥卡特(Folin-Ciocalteu,FC)比色法测定混合物中的总多酚含量。当使用以下两种方法时观察到多酚的最高产率。
方法A.
将新鲜或新鲜冷冻的水果混合物与96％甜菜醇(DZ Licores)以50/50v/v比混合。水果混合物由w/w比为50％黑刺李浆果、49％蓝莓和1％苦莓的预先称重的组合组成。添加醇后，将提取混合物在黑暗中孵育并定期搅拌90天，然后分离并收集液相。从提取物中蒸发残留的醇，并通过FC法研究水相中总多酚的浓度。反应中的水来自浆果，因为它是新鲜和新鲜冷冻水果的主要成分，其包含达至水果总重量的90％。
此类提取方法在混合物中产生的总多酚浓度达至15mg/ml的提取物。
发现，负面影响产率的主要因素是暴露在光中以及将混合物加热至40℃以上。用丙酮或甲醇进行类似的提取效率较低。
为了进一步提高多酚的产率，发明人认为，提取的限制因素是新鲜水果中的水分含量和反应中乙醇的具体百分比。
方法B.
为了改善对提取反应中水量的控制，使用了干果粉。在所有测试的粉末中，冻干浆果在提取物中多酚的产率方面表现出优越性。测试了几种浆果粉的w/w比，发现蓝莓和黑刺李浆果的50/50w/w比总体上最有效，但是每种浆果的重量百分比可在5至95％之间显著变化，所得提取物中的多酚浓度没有太大损失。使用含水乙醇(食品级)作为提取剂，浓度范围为95％醇对纯水。提取反应按照浆果粉与提取剂的1:3v/v比进行。反应在黑暗中在室温下连续搅拌进行1-2小时。反应时间的进一步增加导致反应效率的递减收益。孵育后，从反应物中分离出液相并收集。通过蒸发从液相中去除醇。在所有阶段控制反应温度不超过40℃。通过FC法测量多酚的产率。
这种提取方法显著提高了多酚浓度到30mg/ml的提取物。提取效率随着醇百分比的增加而增加，在50％和70％v/v醇之间达到峰值，之后效率再次开始下降，在95％醇时达到最低值。
提取物进一步在分泌性腹泻小鼠模型中进行如下测试：
蓝莓和黑刺李浆果的1:1w/w混合物的提取物在肠分泌小鼠模型中进行了如下测试。我们在实验中使用的所有批次的提取物均已标准化为15mg/ml总多酚浓度，并进一步称为“多酚提取物”。
实验步骤
小鼠禁食：选择20-25g之间的实验C57/Bl6小鼠用于以下实验。记录小鼠质量。小鼠在单独的笼子里禁食过夜，笼子包含一个塑料红色小屋，并允许小鼠自由接近水。每个笼子内没有垫子，并且当可能时，用镊子取出粪便颗粒。经由在笼子下方放置加热垫，将笼子的环境温度保持在65–75°F。
小鼠管饲：通过颈项(scuffing)人工限制小鼠。经由连接到1ml注入器的口腔管饲针，对小鼠强制喂食200μl在7％ V/V NaHCO3 PBS中的CTx(0.05ug/ul)。每个小鼠笼内放置两张纸巾垫子。小鼠可以自由接近水和红色塑料小屋。用CTx管饲小鼠30分钟后，通过颈项手动约束小鼠并管饲测试变量或对照(媒介缓冲物)。CTx管饲后一小时，通过颈项约束小鼠，并再次管饲测试变量。允许溶液在小鼠中孵育五个小时。
小肠切除和测量结果：记录手术前小鼠的质量。通过断头对小鼠实施安乐死。用遮蔽胶带将小鼠仰卧位固定在平坦的表面上。在下腹部开小的浅的横切口(1-2cm)(不切腹部肌肉)。从下腹部喙侧切开纵向切口，不切割腹部肌肉。使用镊子将皮肤与下面的肌肉层分离。对腹部肌肉重复此操作以允许接近腹膜。在切之前用镊子垂直拉腹部肌肉以避免刺穿肠。在整个过程中使用通过滴管表面施用的PBS维持小肠的水合作用。紧接着在幽门括约肌后和盲肠之前用双缝丝线结扎小肠。在第一次结扎之前和紧接盲肠之后切开小肠。在从腹部去除小肠之前，用剪刀剪断肠系膜和连接小肠的所有组织。在去除之前小心地从小肠去除所有结缔组织，以防止拉扯，并且从而防止肠延长。将小肠放置在不可吸收的放置垫上，以尽量减少肠的延长。这包括将肠的一侧放在垫上，并且然后将肠沿直线放置，而不拉动肠。如果肠不直，则使用镊子将肠推成直线，而不捏住肠。使用公制系统确定从第一到第二缝合线的肠长度。使用镊子和剪刀去除所有残余的结缔组织。记录肠的质量。将小肠的质量除以小肠的长度。对每个变量的每个群体进行平均。未配对学生T检验用于确定药物变量与对照群体之间在95％置信区间内的差异显著性。
由于诱导水样排便的共同机制，霍乱被用作更大组的急性水样感染性腹泻的模型。引起霍乱、旅行者腹泻、病毒性腹泻和其他具有分泌成分的腹泻病的微生物有一个重要的共同点：它们都迫使肠细胞产生大量氯化物进入肠开口。氯化物通过渗透作用将水吸入肠中，并且通过对流洗脱确保腹泻。这种机制是普遍的，并非针对单一病原体是特异性的；而它涵盖了统称为水样(分泌性)腹泻的腹泻病的整个亚组。本发明是有利的，因为其设计用于解决对流洗脱问题，并且即使在水样腹泻的最严重情况下也可以作为口服药物起作用，而与粪便排出量无关，这是当前治疗选择的显著限制。
霍乱的病理学至关重要的是两个关键特征-腹泻和死亡率。本文呈现的结果表明，本发明理想地且出乎意料地改进了两者。
用于管饲的物质的制备：
材料：
化学名称 制造商
硫糖铝 Spectrum
盐酸(1N) Sigma-Aldrich
乙醇(95％) Graves
蒸馏水 Vanessa Research
实施例1：
1.将200mL的蒸馏水添加到带有磁力搅拌棒的1,000mL侧臂Erlenmeyer烧瓶中，并且放在加热板上。
2.将20克硫糖铝加入侧臂Erlenmeyer烧瓶中，同时微热搅拌。
3.将200mL的1N HCl添加到侧臂Erlenmeyer烧瓶中，同时搅拌并微热。
a.用铝箔盖住烧瓶的开口。
4.边剧烈搅拌和微热边将烧瓶孵育1小时。
a.一小时后，烧瓶底部应可见糊状凝胶。
5.将400mL的95％ EtOH添加到侧臂Erlenmeyer烧瓶中，同时搅拌。
6.边搅拌边孵育烧瓶45分钟。
7.倒出侧臂Erlenmeyer烧瓶的上清液。
8.用100mL 95％ EtOH或1:1 95％ EtOH/H2O进行三个洗涤步骤。
9.对侧臂Erlenmeyer烧瓶底部形成的干燥糊状物抽真空，直至形成薄片。
10.使用血清移液管头刮烧瓶底部。
11.使用研钵和杵将薄片研磨成细粉。
12.称量粉末并计算百分比产率。
a.通常，百分比产率为原始反应物的30％。
13.将所得粉末与富含多酚的液体提取物(黑刺李和蓝莓)混合，搅拌直至溶解，从而制备示例性组合物VR-AD-1005，并如上施用于动物。
*倒出的上清液可以在侧臂Erlenmeyer烧瓶中孵育一周，然后经由真空过滤干燥以提高百分比产率*
实施例2：
将无水柠檬酸(Fisher chemical，USP级，CAS 77-92-9)、多酚(单宁酸，SigmaAldrich)和硫糖铝(Spectrum chemical)的粉末按照重量/重量比混合，其中柠檬酸可以以按重量计0.01至1的比率存在；单宁酸可以以按重量计0.001至1的比率存在，以及硫糖铝可以以按重量计0.01至1的比率存在。
具体来说，按以下比率测试混合物：
柠檬酸/单宁酸/硫糖铝如下(此处为重量份)：
0.12/0.05/0.1
0.12/0.01/0.1
0.2/0.1/1
0.25/0.03/1
0.25/0.04/1
0.25/0.05/1
0.25/0.06/1
0.25/0.07/1
0.25/0.08/1
0.25/0.09/1
0.26/0.2/1
0.26/0.02/1
0.26/0.3/1
0.26/1/1
0.3/0.02/1
0.3/0.06/1
0.3/0.1/1
0.4/0.02/1
0.4/0.06/1
0.4/0.1/1
0.5/0.03/1
0.5/0.04/1
0.5/0.05/1
0.5/0.06/1
0.5/0.07/1
0.5/0.08/1
0.5/0.09/1
0.5/0.1/1
1/0.8/0.83
1/0.4/0.83
将成分溶解在水中并在室温下搅拌平均2小时(30min-过夜)。收集所得液体/凝胶/糊状物，并且在室温和常压下干燥直至完全干燥成无定形固体(硫糖铝含量增加，加热和醇促进凝固和硬化)，然后在瓷研钵中将其研磨成粉末。粉末不吸湿，并且因此将其收集并储存在4℃的密闭管中，无需任何额外的预防措施。
磨碎的粉末可以如下在水中重悬、胶凝或溶解：
0.25/0.03/1以100mg/ml溶解在水中，在底部形成难移液的凝胶。
0.25/0.09/1以100mg/ml溶解在水中，同上。
0.5/0.03/1以100mg/ml溶解在水中，溶解，形成浆液。
0.5/0.1/1以100mg/ml溶解在水中，溶解，形成比以上更多的浆液。
1/0.08/0.83以100mg/ml溶解在水中：完全溶解，形成透明淡黄色溶液，pH 2.3。
实施例3：
将无水柠檬酸(Fisher chemical，USP级，CAS 77-92-9)、多酚(干黑刺李浆果提取物，Zoco Pharmaceuticals)和硫糖铝(Spectrum chemical)的粉末按如下重量/重量比混合：
柠檬酸/黑刺李浆果提取物/硫糖铝(此处为重量份)：
0.12/0.12/1
0.12/0.12/0.5
0.12/0.1/1
0.12/0.1/0.3
0.12/0.05/1
0.12/0.01/1
0.12/0.01/0.5
0.12/0.05/1
0.12/0.015/0.3
0.12/0.025/0.3
0.12/0.05/0.3
0.12/0.05/0.1
0.12/0.05/0.5
将成分溶解在水中并在室温下搅拌平均2小时(30min-过夜)。收集所得不透明凝胶，并在室温和常压下干燥直至完全干燥(硫糖铝含量增加，加热和醇促进凝固)，然后在瓷研钵中研磨成粉末。粉末不吸湿，并且因此将其收集并储存在4℃的密闭管中，无需进一步的预防措施。
磨碎的粉末可在水中重悬、胶凝或溶解。
实施例4：
将无水柠檬酸(Fisher chemical，USP级，CAS 77-92-9)、多酚(干黑刺李浆果提取物，Zoco Pharmaceuticals)和硫糖铝(Spectrum chemical)的粉末按如下重量/重量比混合：
柠檬酸/黑刺李浆果提取物/硫糖铝
0.12/0.12/1.1
0.05/0.4/1
将成分溶解在水中并在室温下搅拌5-10分钟直至胶凝。如以下实施例之一中所示，可以施用所得不透明凝胶用于治疗腹泻病。
实施例5：
实施例2-4中的上述组合物以固体粉末的形式制备(酸/多酚/硫糖铝)，并且在施用之前不与水接触。
实施例6：
施用如上制备的VR-AD-1005(CTx+VR-AD-1005，图3，黑色柱)后，霍乱毒素引起的肠分泌(CTx，图3，灰色柱)减少了70％。如果单独施用，多酚和硫糖铝均不会减少肠分泌体积(硫糖铝，对角线阴影；和多酚，水平阴影)，表明组合VR-AD-1005的协同作用。结果如图3所示。在我们的严重霍乱模型中，单剂量的我们的药物显示出将过量霍乱毒素引起的肠分泌体积减少超过70％(图3)和将致命剂量的霍乱毒素后的死亡率降低30％以上(图4)的能力。
实施例7：
用于制备该物质的一般反应顺序的一个实施方式：
将酸溶解或稀释在水中至期望浓度(柠檬酸为10-100％，HCl为0.1-2M)
通过在室温下搅拌将多酚溶解或稀释在酸溶液中，以形成酸-多酚溶液。
将硫糖铝溶解在酸多酚溶液中。
边搅拌/混合边孵育，直至硫糖铝完全溶解并形成均匀的凝胶或液体(30min-2小时)。可以观察到颜色变化。
干燥所得凝胶或液体。粉碎。
将所得粉末溶解在水中。
施用至实验动物或细胞。
实施例8：
在霍乱毒素诱导的腹泻小鼠模型中，已通过口服施用和/或肠袢注入测试了如上所述制备的以下组合物：
0.5/1/1.2的w/w比的(干黑刺李浆果提取物)-硫糖铝-柠檬酸以50mg/ml、每只动物100微升通过管饲施用。
w/w比为0.1/1/0.5的单宁酸-硫糖铝-柠檬酸以100mg/ml、每只动物100微升通过管饲施用。
w/w比为0.1/1/0.5的没食子酸-硫糖铝-柠檬酸以100mg/ml、每只动物100微升通过管饲施用。
所有组合物均表现出响应20微克霍乱毒素攻击的肠液分泌减少。在(干黑刺李浆果提取物)-硫糖铝-柠檬酸的情况下，平均液体分泌为4.663±0.2313N＝3，p＝0.0019。在单宁酸-硫糖铝-柠檬酸的情况下，平均液体分泌为6.473±0.5885N＝3，p＝0.0185。在没食子酸-硫糖铝-柠檬酸的情况下，平均液体分泌为5.727±0.4480N＝3，p＝0.0068。在对照(磷酸盐缓冲盐水)的情况下，平均液体分泌为9.853±0.7188N＝4。经由响应霍乱毒素攻击而分泌的液体体积的减少观察到抗腹泻作用。
实施例9：
在使用5-氟尿嘧啶用于诱导粘膜炎的化疗诱导的肠粘膜炎小鼠模型中，已通过口服施用测试了以下组合物：
比率为0.5/1/1.2和0.1/1/0.24的(黑刺李浆果-蓝莓混合物的干燥提取物)-硫糖铝-柠檬酸。在施用处理之前，用50mg/kg 5-氟尿嘧啶处理小鼠3天。每天根据每只小鼠的重量计算剂量。第4天，小鼠开始接受口服管饲的50mg/ml的上述比率的(黑刺李浆果-蓝莓混合物的干燥提取物)-硫糖铝-柠檬酸，每只动物每天一次100微升添加到处理计划中。每只动物每天一次100微升磷酸盐缓冲盐水作为对照。处理第4天，对照组因5-氟尿嘧啶处理而损失的重量恢复了25％，而以0.5/1/1.2和0.1/1/0.24比率的(黑刺李浆果-蓝莓混合物的干提取物)-硫糖铝-柠檬酸的两个处理组显示完全重量恢复，并且与5-氟尿嘧啶处理导致的重量损失相比，重量增加了64％和23％。
实施例10：
在5％葡聚糖硫酸钠诱导的炎性肠病小鼠模型中，已通过口服或直肠施用测试了以下组合物：
w/w比0.05/0.4/1的(干黑刺李浆果提取物)-硫糖铝-柠檬酸(VR-AD-2005)。
通过将5％ DSS的饮用水施用至C57BL6小鼠5天来诱导炎性肠病。通过管饲共施用(干黑刺李浆果提取物)-硫糖铝-柠檬酸制剂5天，降低了腹泻发生率和严重度。
来自小鼠的非致死(96小时)5％ DSS攻击数据如图5和6所示。显示了用pH 2.5(干黑刺李浆果提取物)-硫糖铝-柠檬酸水凝胶(VR-AD-2005)施用5天的处理期间。腹泻频率表示为有症状天数占处理期间总天数的百分比。对于腹泻严重度，腹泻评分为0(正常大便)、2(软便)或4(液状便)，并且腹泻发作次数和严重度均作为因素考虑在腹泻严重度计算中。

Claims (20)

1.一种组合物，其包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；和
至少一种酸。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中多酚是蓝莓、越橘、黑刺李、苦莓、葡萄、葡萄渣、黑玫瑰、黑醋栗、山核桃、克罗非莫、龙血(巴豆属)、其干燥形式、其种子形式、其汁液、其粉末形式、其液体形式、其提取物或其组合中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的组合物，其中多酚是蓝莓、越橘、黑刺李、苦莓、黑醋栗、其干燥形式、其种子形式、其汁液、其粉末形式、其液体形式、其提取物或其组合中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中多酚是黑刺李和蓝莓的混合物、黑刺李和越橘的混合物、其干燥形式、其种子形式、其汁液、其粉末形式、其液体形式、其提取物或其组合。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中多酚是没食子酸、可水解没食子酸、不可水解没食子酸、浓缩没食子酸、褐藻多酚、花青素、花翠素、矮牵牛素、花葵素、芍药素、锦葵素、儿茶素、没食子儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、槲皮素、单宁酸、芹菜素、五间二没食子酰葡萄糖、单宁、浓缩单宁、没食子单宁酸、没食子单宁、鞣质、其单体形式、其聚合度为1、2或更大的聚合物、其糖基化形式、其糖苷配基形式、其盐、其酯或其组合中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的组合物，其中多酚是单宁酸、没食子酸、其盐或其组合。
7.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中酸选自由柠檬酸、HCl、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸、苯甲酸、异柠檬酸、奎宁酸、富马酸、乙酸、乳酸、果酸及其组合组成的组。
8.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中酸选自由柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、草酸或其任意组合组成的组。
9.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中酸选自由HCl、柠檬酸、苹果酸及其组合组成的组。
10.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中酸/多酚/硫糖铝重量比为酸0.0001-1：多酚0.001-1：硫糖铝0.0001-1。
11.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中酸/多酚/硫糖铝重量比为酸0.001-0.5：多酚0.002-0.5：硫糖铝0.0001-0.5。
12.前述权利要求中任一项所述的组合物，其中酸/多酚/硫糖铝重量比为酸0.1-1：多酚0.05-0.5：硫糖铝0.01-1。
13.前述权利要求中任一项所述的组合物，其进一步包含选自由洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合组成的组的活性剂或抗腹泻剂。
14.前述权利要求中任一项所述的组合物，其为水凝胶形式。
15.一种用于制备前述权利要求中任一项所述的组合物的方法，其包括：
将一种或多种多酚化合物、硫糖铝和至少一种酸接触；和
进行反应，以形成反应产物。
16.根据权利要求15所述的方法，其中多酚和硫糖铝首先彼此接触，并且然后与酸接触。
17.根据权利要求15所述的方法，其中硫糖铝和酸首先彼此接触和反应，并且然后与多酚接触和反应。
18.一种用于治疗腹泻病的方法，其包括向需要此类治疗或处于需要此类治疗的风险的受试者施用组合物；所述组合物包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；和
至少一种酸。
19.一种用于治疗腹泻病的组合物，其包含：
一种或多种多酚化合物；和
硫糖铝；
其中，多酚不是从绿茶叶中提取的，并且不含从绿茶叶提取的儿茶素类。
20.一种用于治疗腹泻病的方法，其包括向需要此类治疗或处于需要此类治疗的风险的受试者施用组合物；所述组合物包含以下的反应产物：
一种或多种多酚化合物；
硫糖铝；和
至少一种酸；
以及至少一种选自由洛哌丁胺、消旋卡多曲、阿洛司琼、消胆胺、克罗非莫、阿托品、地芬诺酯、碱式水杨酸铋、抗体、靶向毒素的抗体片段、靶向诱导腹泻病的信号传导分子的抗体片段、肽、抗分泌肽、抗生素、不可吸收抗生素、离子通道抑制剂、作用于肠细胞表面元件的剂或其组合组成的组的活性剂或抗腹泻剂。
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