CN117085183B - 一种原位固化、无缝合移植材料及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种原位固化、无缝合移植材料及其制备方法和应用，它是将甲基丙烯酰化化合物复合到移植材料中得到的。该复合型移植材料具有温敏性和光聚合特性，可在35℃以上渗出单体聚合物并通过光聚合，在植床表面形成稳定的生物粘合。该复合型移植材料具有材料来源丰富，无需手术缝合快速修复创伤的特点。

Description

一种原位固化、无缝合移植材料及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于组织工程和再生医学领域，具体涉及一种原位固化、无缝合复合型移植材料及其制备方法。

背景技术

以无缝合方式植入移植材料，在临床上是非常可取的，可以显著减少患者的不适、感染风险、康复时间和治疗成本。当前仍然缺少一种可用于无缝合修复的移植材料制备方法。中国发明专利（申请号202310284669.7）公开了一种免缝合复合型人工角膜及其制备方法。该发明由生物前膜片和高分子后膜片组成，通过生物前膜片中的固定导丝插入植床实现角膜免缝合修复。固定导丝插入角膜会造成二次损伤，存在形成基质瘢痕和刺激新生血管的风险，另外固定导丝的存在也影响角膜的透明度和美观。中国发明专利（申请号CN20130241872）公开了一种无缝合主动脉瓣置换的装置，可在体外循环支持下剪去病变主动脉瓣，并将无缝合主动脉瓣植入相应位置，完成主动脉瓣的无缝合修复。该发明为人工合成材料，通过金属支架支撑实现无缝合修复。当前仍然缺少一种能够实现生物愈合的无缝合移植材料。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

为解决现有技术的不足，本发明一方面提供一种原位固化、免缝合脱细胞角膜，其内部含有凝固的单体聚合物溶液，施用于受体角膜后，单体聚合物溶液液化并渗出脱细胞角膜，并浸入受体角膜与脱细胞角膜之间、受体角膜基质中；在可见光或紫外线照射下，所述单体聚合物发生聚合反应，在脱细胞角膜与受体角膜之间形成粘附层。

本发明中，所述脱细胞角膜选取适于制备人工角膜的生物材料，包括但不限于来源于人、猪、马、牛等哺乳动物的眼角膜、脱细胞角膜、转基因角膜。

受体是指接受植入脱细胞角膜的个体，可以是一种脊椎动物，优选一种哺乳动物。哺乳动物可以是人、非人灵长类动物、小鼠、大鼠、狗、猫、马或牛，但不限于这些实例。

本发明中，单体聚合物溶液包括甲基丙烯酰化明胶和光引发剂或温度引发剂；还可以包括选自甲基丙烯酰化硫酸软骨素或甲基丙烯酰化衍生物的一种或多种；所述甲基丙烯酰化衍生物包括但不限于甲基丙基酰化的多糖、蛋白质或脱细胞基质；其浓度为10-50 %（w/v）。

在一种优选的实施方式中，所述单体聚合物溶液进一步包括选自聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA）或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（PEGMA）的一种或多种；其浓度为0.001 g/ml-1g/ml。

在一种更优选的实施方式中，所述单体聚合物溶液包含：

组分1溶液：10-30 %（w/v）甲基丙烯酰化明胶；组分2溶液：0.001 g/ml-0.5g/ml聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA）或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（PEGMA）；所述单体聚合物溶液由组分1溶液与组分2溶液混合而成；组分1溶液和组分2溶液的体积比为10:0-8:2，优选为9:1-8:2。

在一种更优选的实施方式中，所述单体聚合物溶液包含20 %（w/v）的甲基丙烯酰化明胶溶液和0.1 g/ml聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA）溶液，其体积比为8:2。

在一种优选的实施方式中，所述光引发剂为蓝光或紫外光引发剂,包括2,4,6-三甲基苯甲酰基磷酸锂盐（LAP）；所述温度引发剂包括偶氮二异丁腈（AIBN）。

在一种优选的实施方式中，光引发剂的浓度为0.1%-0.5%；温度引发剂的浓度为0.1-0.2 mol/L。

在一种优选的实施方式中，保持所述凝固的单体聚合物溶液的条件为4-25℃；优选为4-20℃。

在一种优选的实施方式中，所述液化的条件为表面温度为35-38℃。

在一种优选的实施方式中，可见光的波长范围为300-800nm，光的能量为100-500mW/cm²，光照时间为30秒至2分钟；更优选的，波长范围为365-405nm，光照时间为30-60秒。

本发明另一方面提供了一种制备原位固化、免缝合移植材料的方法，包括：

将移植材料浸泡到单体聚合物溶液中，取出移植材料后冷却到4-25℃，使单体聚合物在移植材料的基质网络中凝固；

所述单体聚合物溶液包含甲基丙烯酰化明胶,还可以包括选自甲基丙烯酰化硫酸软骨素或甲基丙烯酰化衍生物的一种或多种；所述甲基丙烯酰化衍生物包括但不限于甲基丙基酰化的多糖、蛋白质或脱细胞基质；其浓度为10-50 %（w/v）。

在一种优选的实施方式中，所述单体聚合物溶液进一步包括选自聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA）或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（PEGMA）的一种或多种；其浓度为0.001 g/ml-1g/ml。

在一种更优选的实施方式中，所述单体聚合物溶液包含：

组分1溶液：10-30 %（w/v）甲基丙烯酰化明胶；组分2溶液：0.001 g/ml-0.5g/ml聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA）或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯（PEGMA）或其混合物；所述单体聚合物溶液由组分1溶液与组分2溶液混合而成；组分1溶液和组分2溶液的体积比为10:0-8:2，优选为9:1-8:2。

在一种更优选的实施方式中，所述单体聚合物溶液包含20 %（w/v）的甲基丙烯酰化明胶溶液和0.1 g/ml聚乙二醇二丙烯酸酯（PEGDA）溶液，其体积比为8:2。

本发明中，所述单体聚合物溶液还可以包含伏立康唑、甲基丙烯酰化硫酸软骨素或甲基丙烯酰化衍生物等消炎类、抗生素类、和/或用于改善生物相容性等物质。

进一步，所述单体聚合物溶液中含有光引发剂或温度引发剂。

在一种优选的实施方式中，所述光引发剂为蓝光或紫外光引发剂,包括2,4,6-三甲基苯甲酰基磷酸锂盐（LAP）；所述温度引发剂包括偶氮二异丁腈（AIBN）。

在一种优选的实施方式中，光引发剂的浓度为0.1%-0.5%；温度引发剂的浓度为0.1-0.2 mol/L。当采用光激活时，波长300nm-600nm，激活的时间为30秒至2分钟；当采用温度激活时，60℃以上，反应时间为2小时至12小时。

在一种优选的实施方式中，所述单体聚合物溶液的制备过程为：

a）用0.1-0.5% LAP溶液配置10-30 %（w/v）的甲基丙烯酰化明胶溶液，制得组分1溶液；

b）配置0.001 g/ml-0.5g/ml的PEGDA溶液，制得组分2溶液；

c）将组分1溶液与组分2溶液以体积比10:0-8:2的比例混合。

本发明中，所述浸泡过程中，可以同时采用超声、抽真空或搅拌的方式加速浸泡或浸入的过程，促进单体聚合物进入移植材料的基质内。

在一种优选的实施方式中，所述浸泡的操作方式为将移植材料浸入至少10倍体积的单体聚合物溶液中，120转/分钟摇床震荡18-48小时。

在一种优选的实施方式中，所述冷却使其凝固的方法为将移植材料置于4℃环境中放置15-30分钟，随后储存在4-25℃环境中；优选储存在4-20℃的环境中。

本发明提供的上述制备方法，优选地所有操作均在无菌超净环境中进行。

进一步，本发明所述的方法还包括凝固的后处理步骤，包括去除移植材料表面的单体聚合物溶液，方法采用常规操作即可，例如冲洗、擦拭等。以脱细胞角膜为例，去除方法可以为用镊子夹取脱细胞角膜，在无尘吸水纸表面擦拭，去除多余的单体聚合物溶液；还包括对产物灭菌处理，切割为不同尺寸的植片等。

本发明中，所述移植材料包括但不限于生物组织、脱细胞支架材料、转基因器官、转基因组织、细胞制品及其衍生物、人造仿生材料。

在一种优选的实施方式中，所述移植材料为脱细胞角膜，所述受体组织为角膜；在另一种优选的实施方式中，所述移植材料为脱细胞皮肤，所述受体组织为皮肤（表皮、真皮）、皮下组织和皮肤附属器。

进一步，当移植材料为脱细胞角膜时，本发明所述的方法还包括对脱细胞角膜进行前处理步骤，包括飞秒切削得到厚度为100-400um直径为9mm的角膜基质片；刮除上皮和内皮、脱细胞工艺处理、病毒灭活，获得包含前弹力层和角膜基质层的脱细胞角膜。

本发明另一方面提供了经上述方法处理后的移植材料，所述移植材料内部含有和/或表面附着有凝固的单体聚合物溶液，施用于受体组织时，受体组织表面温度使单体聚合物溶液液化并渗出移植材料，并浸入受体组织与移植材料之间、受体组织中；在可见光或紫外线照射下，所述单体聚合物发生聚合反应，在移植材料与受体组织之间形成粘附层。

本发明中，受体是指接受植入移植材料的个体，可以是一种脊椎动物，优选一种哺乳动物。哺乳动物可以是人、非人灵长类动物、小鼠、大鼠、狗、猫、马或 牛，但不限于这些实例。

本发明中，粘附层由在受体组织与移植材料的基质网络之间的甲基丙烯酰化化合物或其衍生物（甲基丙烯酰化明胶、甲基丙烯酰化硫酸软骨素等）形成的聚合网络构成。

在一种优选的实施方式中，保持所述凝固的单体聚合物溶液的条件为4-20℃。

在一种优选的实施方式中，所述液化的条件为表面温度为35-38℃。

在一种优选的实施方式中，可见光的波长范围为300-800nm，光的能量为100-500mW/cm²，光照时间为30秒至2分钟；更优选的，波长范围为365-405nm，光照时间为30-60秒。

本发明另一方面提供了经上述方法得到的移植材料和/或制备移植材料的方法，在制备角膜供体、角膜移植物、组织替代材料、组织密封剂、医用敷料、或药物载体方面的应用。

有益效果

本发明利用甲基丙烯酰化明胶（Gelma）具有在4-20℃为凝固，当温度升高到35-38℃快速转变为液态的物理特性，使已浸入生物材料基质网络中的Gelma，置于体表后快速液化渗出，并通过光激活形成聚合网络，达到粘合植片的效果。当Gelma与其他的单体聚合物按特定比例混合后，可以保留这种对温度敏感的物理特性，同时改善粘合层的抗降解性和粘合强度。本发明提供的复合型移植材料具有温敏性和光聚合特性，且材料来源丰富，无需手术缝合快速修复创伤。

附图说明

图1复合型脱细胞猪角膜和普通脱细胞猪角膜随温度变化的流变特性。

图2复合型脱细胞猪角膜和普通脱细胞猪角膜405nm光激活前后的流变特性。

图3复合型脱细胞猪角膜和普通脱细胞猪角膜抗拉强度对比。

图4复合型脱细胞猪角膜测试界面强度模式图。

图5复合型脱细胞猪角膜和医用生物胶界面强度对比。

图6复合型脱细胞猪角膜无缝合修复角膜基质缺损。

图7复合型脱细胞猪角膜修复角膜基质缺损术前和术后的大体照，AS-OCT和厚度扫描结果对比。

图8复合型脱细胞猪角膜与天然角膜之前形成稳定粘附。

图9复合型脱细胞猪角膜形成粘合层的组织学染色照片

图10在体内动物实验中通过裂隙灯、荧光素染色、AS-OCT和厚度扫描结果。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

虽然本发明实施过程中可使用类似于或等价于本文公开的那些的步骤、物质或材料、反应条件，但本文描述了优选的步骤、物质或材料、反应条件。

当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数，并且该范围内的所有数值均能实现本发明的效果。

除非另外说明，本文所用的所有技术和科学术语和缩略语具有本发明领域或该术语应用领域中普通技术人员通常所理解的含义。

本文所用，单词的单数形式包括复数，反之亦然。因此， “一”、“一个”和“该”通常包括相应术语的复数。本文所用“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。

脱细胞角膜：以常规脱细胞方法（包括反复冻融，高低渗透压处理，表面活性剂处理，超静压处理，核酸酶处理，磷脂酶处理）处理自于人、猪、马、牛等哺乳动物的眼角膜，使其基质细胞和内皮细胞脱落，即得到脱细胞角膜。

脱细胞猪角膜：经病毒灭活与脱细胞工艺制备而成，包括前弹力层和角膜基质层。

实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

本发明实施例的部分材料来源

新鲜猪角膜：从市场购置的未变性的新鲜猪角膜。

SDS溶液：十二烷基硫酸钠溶液，购于北京索莱宝科技有限公司，货号S8010。

核酸酶：脱氧核糖核酸酶，购于北京义翘神州科技股份有限公司，货号SSNP01。

光引发剂LAP 苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐，购于上海源叶生物科技有限公司，货号Y43995。

甲基丙烯酰化明胶(GelMA) :是一种由明胶和甲基丙烯酸酐反应得到的明胶衍生物，购于苏州永沁泉智能设备有限公司，货号EFL-GM-90、EFL-GM-70。

PEGDA溶液：聚乙二醇二丙烯酸酯溶液，购于Sigma，货号455008。

PBS缓冲液：磷酸盐缓冲液，购于北京索莱宝科技有限公，货号P1020。

兔：购于济南西岭角养殖繁育中心。

实施例1 甲基丙烯酰化明胶及其混合物的物理学特性

将20%的GelMA（甲基丙烯酰化明胶）与0.1g/ml平均质量分数为700的PEGMA溶液按不同比例混合后，进行物理状态、粘度、透光率、吸水率以及细胞粘附性分析，结果如表1所示，当20%GelMA所占比例大于20%时，在4-20℃为固体状态，在37℃为液体状态。随GelMA所占比例的增加，粘度提高，透光率下降，吸水率提高。当20%GelMA的比例大于80%时，成胶后表现出了良好的细胞粘附性。

表1

实施例2 制备无缝合复合型脱细胞猪角膜

（1）制备脱细胞猪角膜：新鲜猪角膜刮除上皮和内皮，浸泡在0.5 % SDS溶液中，500 U/ml核酸酶处理2小时，随后用足量的平衡盐缓冲液清洗6-8次。

（2）制备甲基丙烯酸化化合物溶液：用0.3% LAP溶液配置20%的甲基丙烯酰化明胶溶液和0.1g/ml的PEGDA溶液。将甲基丙烯酰化明胶溶液与PEGDA溶液以体积比为8:2的比例混合。

（3）复合甲基丙烯酰化明胶：将脱细胞猪角膜浸泡到甲基丙烯酸化化合物溶液中，随后放入37℃恒温摇床中120转/分钟震荡搅拌24小时。

（4）制备复合型脱细胞猪角膜：将脱细胞猪角膜取出，去除表面溶液，4℃冷却使明胶衍生物凝固。

实施例3 制备无缝合脱细胞皮肤

（1）制备脱细胞猪皮肤：新鲜猪皮肤用0.25%胰蛋白酶振荡6小时，随后浸入5%TritonX-100溶液中，振荡6小时，最后用平衡盐溶液清洗6次。

（2）制备甲基丙烯酸化化合物溶液：用0.1%LAP溶液配置10%的甲基丙烯酰化明胶溶液。

（3）制备复合型脱细胞猪皮肤：将脱细胞猪皮肤浸泡到10% 甲基丙烯酰化明胶溶液中，随后放入37℃恒温摇床中震荡搅拌24小时。随后将脱细胞猪皮肤取出，去除表面溶液，4℃冷却使明胶衍生物凝固。

（4）手术过程中将合适大小的脱细胞猪皮肤置于皮肤缺损处，用365 nm紫外光照射2分钟，实现脱细胞猪皮肤在真皮移植手术中的无缝合修复。

实施例4 制备伏立康唑复合脱细胞猪角膜

（1）制备脱细胞猪角膜：新鲜猪角膜刮除上皮和内皮，浸泡在0.5 % SDS溶液中，500 U/ml核酸酶处理2小时，随后用足量的平衡盐缓冲液清洗6-8次。

（2）制备伏立康唑-甲基丙烯酰化明胶混合液：用0.5% LAP溶液配置30%的甲基丙烯酰化明胶溶液。称取5mg伏立康唑粉末溶解于10ml 二甲基亚砜溶液中，制备500μg/ml的储备液。将甲基丙烯酰化明胶溶液与伏立康唑溶液以体积比为9:1的比例混合。

（3）制备伏立康唑复合脱细胞猪角膜：将脱细胞猪角膜浸泡到伏立康唑-甲基丙烯酰化明胶混合液中，随后放入37℃恒温摇床中120转/分钟震荡搅拌24小时。将脱细胞猪角膜取出，去除表面溶液，4℃冷却。

（4）使用过程中将合适大小的脱细胞猪皮肤置于皮肤缺损处，用365 nm紫外光照射90秒，实现脱细胞猪皮肤在真皮移植手术中的无缝合修复。

对比例1复合型脱细胞猪角膜与普通脱细胞猪角膜的物理学特性

通过流变仪分别检测实施例2制备的复合型脱细胞猪角膜和普通脱细胞猪角膜在不同温度条件下的流变特性。结果如图1所示，在低于20℃的条件下，复合型脱细胞猪角膜的流变特性保持稳定，大于20℃时，复合型脱细胞猪角膜的储能模量开始下降，在27℃左右降低到最低点，随后开始上升。这与复合型脱细胞猪角膜中的甲基丙烯酰化明胶在大于20℃时，由凝固转为液态渗出脱细胞猪角膜有关。普通脱细胞猪角膜在0-40℃的观察范围内流变特性保持稳定，未发生明显变化。证明，复合型脱细胞猪角膜较普通脱细胞猪角膜具有温度敏感性。

随后，用405nm光源照射复合型脱细胞猪角膜和普通脱细胞猪角膜，结果发现，复合型脱细胞猪角膜的储能模量和耗损模量发生明显改变，储能模量与耗损模量的数值差距拉大（图2）。而普通脱细胞猪角膜的流变特性未随光照发生明显变化。证明，复合型脱细胞猪角膜较普通脱细胞猪角膜具有光敏感性。

最后，通过抗拉实验分别测试复合型脱细胞猪角膜和普通脱细胞猪角膜的机械性能差异。结果显示如图3，复合型脱细胞猪角膜的平均抗拉强度为7.52N，较天然人角膜（5.20N）和猪角膜（5.03N）更高，表现出了良好的机械性能。这是由于复合型脱细胞猪角膜基质内部的聚合物聚合，增加了角膜的交联强度所导致的。而脱细胞猪角膜由于脱细胞处理，使内部胶原纤维发生了损伤，平均抗拉强度为3.36N，低于复合型脱细胞猪角膜和天然角膜。

对比例2 复合型脱细胞猪角膜粘合性与现有生物粘合剂的对比

当前临床常用的生物粘合剂主要包括纤维蛋白胶，α-氰基丙烯酸酯胶和PEG类生物胶水。PEG类的生物胶水在临床上的应用受到很大的限制。纤维蛋白粘合剂属于天然生物材料，具有良好的生物相容性，但粘结强度较弱，同时其原料来自异体组织，存在传播病毒的风险。α-氰基丙烯酸酯胶具有较高的粘结强度，但α-氰基丙烯酸酯胶的缺点也非常明显。α-氰基丙烯酸酯胶使用时会产生聚合热，使粘接组织受到热损伤。此外其固化后形成的材料比较脆与软组织的力学相容性不好，并产生异物反应阻碍伤口愈合。PEG类生物胶水使用后则容易溶胀造成伤口开裂，此外PEG凝胶后不利于细胞粘附，阻碍伤口修复。与传统应用的代表性生物粘合剂相比，复合型脱细胞猪角膜无需使用生物胶水，即可实现与受体组织的生物粘合，具有更高的可操作性，生物相容性和促进创伤愈合的优势。

通过测试实施例2制备的复合型脱细胞猪角膜和传统生物粘合剂在天然角膜表面的粘合强度（图4），结果显示，复合型脱细胞猪角膜能够与天然角膜之间形成91.1J/m²的界面强度。而纤维蛋白胶（猪源纤维蛋白粘合剂 广州倍绣生物技术有限公司）的界面强度为22.3 J/m²，PEG类胶水（可吸收硬脑膜封合医用胶 赛克赛斯生物科技股份有限公司）的界面强度为25.1J/m²，α-氰基丙烯酸酯胶（α-氰基丙烯酸酯快速医用胶 广州白云医用胶有限公司）的界面强度为38.6 J/m²。复合型脱细胞猪角膜在天然角膜表面性能的界面强度明显高于传统的生物粘合剂（图5）。

实施例4 复合型脱细胞猪角膜与猪眼球形成稳定粘合

（1）在猪眼球角膜表面用环钻和板层刀制造一个直径为6 mm深度为500μm的圆形角膜基质缺损。

（2）将同等大小的按照实施例2方法制备得到的复合型脱细胞猪角膜放置于角膜缺损处，将周围环境温度升高到37℃后，用405 nm的可见光照射60秒（图6）。

（3）修复后的猪眼球与术前对比，在裂隙灯下观察表明基质缺损成功封闭。眼前节光学相干断层扫描（AS-OCT）和厚度扫描证明基质缺损被填补，角膜曲率恢复（图7）。

（4）用镊子夹起复合脱细胞猪角膜可将整个眼球提起，证明复合脱细胞猪角膜与天然角膜形成牢固粘附，48小时候仍然可以保持稳定粘附（图8）。

（5）将粘合后的角膜进行组织学切片染色，通过H&E染色结果可以观察到，复合脱细胞猪角膜与受体角膜之间存在聚合反应，形成了粘合层（图9）。

实施例5 复合型脱细胞猪角膜在体内修复兔角膜基质缺损

（1）在兔角膜表面用环钻和板层刀制造一个直径为6 mm深度为200μm的圆形角膜基质缺损。

（2）原位固化：将同等大小和厚度的按照实施例2方法制备得到的复合型脱细胞猪角膜放置于角膜缺损处，然后用405 nm的可见光照射60秒。

（3）术后每隔两周进行一次检查。术后两周植片稳定存在，未发生移位和剥脱；上皮缺损染色证明，角膜上皮2周内修复完好；OCT和厚度图扫描结果显示，角膜缺损被成功修复，基质再生（图10）。

以上对本发明实施例进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明仅用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。同时，本领域技术人员依据本发明的思想，基于本发明的具体实施方式及应用范围上做出的改变或变形之处，都属于本发明保护的范围。综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (11)

1.一种原位固化、免缝合脱细胞角膜，其特征在于：所述脱细胞角膜内部含有凝固的单体聚合物溶液，施用于受体角膜后，单体聚合物溶液液化并渗出脱细胞角膜，之后浸入受体角膜与脱细胞角膜之间、受体角膜基质中；在可见光或紫外线照射下，所述单体聚合物发生聚合反应，在脱细胞角膜与受体角膜之间形成粘附层；

所述单体聚合物溶液包括组分1溶液：10-50 %（w/v）甲基丙烯酰化明胶；组分2溶液：0.001 g/ml-1g/ml聚乙二醇二丙烯酸酯或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯或其混合物；所述单体聚合物溶液由组分1溶液与组分2溶液混合而成，组分1溶液和组分2溶液的体积比为10:0-8:2；

所述单体聚合物溶液还包括光引发剂；光引发剂的浓度为0.1%-0.5%；

所述光引发剂为蓝光或紫外光引发剂,包括2,4,6-三甲基苯甲酰基磷酸锂盐。

2.如权利要求1所述的脱细胞角膜，其特征在于：

所述组分1溶液为10-30 %（w/v）甲基丙烯酰化明胶；所述组分2溶液为0.001 g/ml-0.5g/ml聚乙二醇二丙烯酸酯或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯或其混合物；组分1溶液和组分2溶液的体积比为9:1-8:2；

所述单体聚合物溶液还包括选自甲基丙烯酰化硫酸软骨素或甲基丙烯酰化衍生物中的一种或多种；所述甲基丙烯酰化衍生物包括甲基丙基酰化的多糖、蛋白质或脱细胞基质；

所述光引发剂为2,4,6-三甲基苯甲酰基磷酸锂盐。

3.如权利要求1或2所述的脱细胞角膜，其特征在于：

保持所述凝固的单体聚合物溶液的条件为4-25℃；

所述液化的条件为表面温度为35-38℃；

所述可见光的波长范围为300-800nm，光的能量为100-500mW/cm²，光照时间为30秒至2分钟。

4.如权利要求3所述的脱细胞角膜，其特征在于：

保持所述凝固的单体聚合物溶液的条件为4-20℃；

所述可见光的波长范围为365-405nm，光照时间为30-60秒。

5.一种制备原位固化、免缝合移植材料的方法，其特征在于，包括：将移植材料浸泡到单体聚合物溶液中，取出移植材料后冷却到4-25℃，使单体聚合物在移植材料中凝固；

所述单体聚合物溶液的制备过程为：

a）用0.1-0.5% LAP溶液配置10-50 %（w/v）的甲基丙烯酰化明胶溶液，制得组分1溶液；

b）配置0.001 g/ml-1g/ml的聚乙二醇二丙烯酸酯或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯或其混合物，制得组分2溶液；

c）将组分1溶液与组分2溶液以体积比10:0-8:2的比例混合；

所述浸泡的操作方式为将移植材料浸入至少10倍体积的单体聚合物溶液中18-48小时；

所述冷却的方法为将移植材料置于4℃环境中放置15-30分钟，随后储存在4-25℃环境中。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述移植材料为脱细胞角膜，受体组织为角膜；或所述移植材料为脱细胞皮肤，受体组织为皮肤、皮下组织和皮肤附属器；

所述步骤a）为用0.1-0.5% LAP溶液配置10-30 %（w/v）的甲基丙烯酰化明胶溶液，制得组分1溶液；

所述步骤b）为配置0.001 g/ml-0.5g/ml的聚乙二醇二丙烯酸酯或聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯，制得组分2溶液；

所述步骤c）中，组分1溶液与组分2溶液以体积比9：1-8：2的比例混合。

7.如权利要求5或6所述的方法制备的移植材料，其特征在于：所述移植材料内部含有和/或表面附着有凝固的单体聚合物溶液，施用于受体组织时，受体组织表面温度使单体聚合物溶液液化并渗出移植材料，之后浸入受体组织与移植材料之间、受体组织中；在可见光或紫外线照射下，所述单体聚合物发生聚合反应，在移植材料与受体组织之间形成粘附层。

8.如权利要求7所述的移植材料，其特征在于：

保持所述凝固的单体聚合物溶液的条件为4-20℃；

所述液化的条件为受体组织表面温度为35-38℃；

所述可见光的波长范围为300-800nm，光的能量为100-500mW/cm²，光照时间为30秒至2分钟。

9.如权利要求7所述的移植材料，其特征在于：所述粘附层由在受体组织与移植材料的基质网络之间的甲基丙烯酰化化合物或其衍生物形成的聚合网络构成；

所述移植材料包括生物组织、脱细胞支架材料、转基因器官、转基因组织、细胞制品及其衍生物、人造仿生材料、脱细胞角膜、脱细胞皮肤。

10.如权利要求9所述的移植材料，其特征在于：

所述移植材料为脱细胞角膜，所述受体组织为角膜；或所述移植材料为脱细胞皮肤，所述受体组织为皮肤、皮下组织和皮肤附属器；

所述可见光的波长范围为365-405nm，光照时间为30-60秒。

11.如权利要求1-4中任一所述的脱细胞角膜或如权利要求5-6中任一所述的方法或一种如权利要求7-10中任一所述的移植材料，在制备角膜供体、角膜移植物、组织替代材料、组织密封剂、医用敷料、或药物载体方面的应用。