CN116997254A - 改良稻米产量及治疗稻作稻热病、纹枯病或其组合的方法 - Google Patents

改良稻米产量及治疗稻作稻热病、纹枯病或其组合的方法 Download PDF

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CN116997254A CN202280022686.7A CN202280022686A CN116997254A CN 116997254 A CN116997254 A CN 116997254A CN 202280022686 A CN202280022686 A CN 202280022686A CN 116997254 A CN116997254 A CN 116997254A
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    • A01P3/00—Fungicides

Abstract

本发明涉及一种使稻作的稻米产量相对于未经治疗的稻作的稻米产量增加的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。本发明还涉及一种预防或控制稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地施加天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物。

Description

改良稻米产量及治疗稻作稻热病、纹枯病或其组合的方法
【技术领域】
本发明宽泛地处于农业领域，更准确而言处于水稻的作物保护领域。具体而言，本发明是关于一种预防或控制稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法。此外，本发明涉及一种相对于未经治疗的稻作的稻米产量增加稻作的稻米产量的方法。
【背景技术】
水稻是当今世界大部分人口的主食作物。稻作所遭受的稻热病是由稻梨孢菌(Pyricularia oryzae)真菌引起的，是阻碍全球栽培稻作地区水稻生产的最关键因素之一。侵袭稻作的稻热病可能导致每公顷稻米产量损失高达61％或相当于3.65吨(Suganda等人，Jurnal Agrikultura，2016，27(3)：154-159)。稻热病可以侵袭稻作的各个部位，包括叶片、中肋、颈部、穗(panicles)及稻米谷粒，可能导致作物歉收。
稻热病在稻作上的症状是多种多样的，并且取决于作物的抗性程度。在较脆弱的植株的情况下，会出现病斑，病斑潮湿且呈灰绿色，边缘呈深绿色。而在抗性较强的品种上，病斑尺寸较小，约为1-2mm，且呈褐色或深褐色。
水稻的其他严重病害之一是纹枯病，其是由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的。据报导，在生产世界稻米的几个国家，纹枯病使收成减少了20-35％(Inagaki，Scl.Rep.Fac.Agric.Meljo Univ.，2001，37：57-66)。立枯丝核菌真菌感染会影响每个穗上的籽粒填充量、穗的长度以及籽粒填充的百分比。首发症状是在靠近水面的叶子中肋上出现灰绿色病斑。病斑呈椭圆形或卵圆形，长1cm，跨度2-3cm，并黏在一起。病斑的边界及颜色的变化在植株的受感染部分上给出了清晰的模式。在潮湿的条件下，真菌菌丝体会呈现白色，且真菌形成不规则菌核。在最佳湿度下，与附近受感染的茎干接触的叶片亦会被感染。这些症状通常在成熟阶段很明显，并且可以在水稻的叶子上发现。
控制稻热病及纹枯病的建议包括使用抗性品种、平衡施肥、杀真菌剂及栽培实践。最主要的控制方法是使用抗性品种植株。然而，事实证明，诸如稻梨孢菌(Pyriculariaoryzae)的真菌能够快速适应，因此其可以破坏抗性品种建立的抗性。因此，经由使用杀真菌剂进行控制仍是最可靠的方法。然而，杀真菌剂的长期使用亦可能引发耐药菌株的出现。
鉴于上述问题，本领域中仍需要进一步和/或改进的方法来控制稻作上的稻热病及纹枯病。
WO 2020/104645涉及包含C8-C10脂肪酸的胆碱盐的组合物作为杀真菌剂在植株或植株部分上的用途。据描述，C8-C10脂肪酸(诸如辛酸、壬酸或癸酸)在调配成脂肪酸的胆碱盐时，对植株具有令人满意的杀真菌活性，并强烈降低或甚至没有植物毒性作用，尽管通常已知此类脂肪酸被用作接触性除草剂。WO 2020/104645并未涉及稻作稻热病或纹枯病的预防或控制。
【发明内容】
本发明人已经发现，天竺葵酸胆碱可以用作有效的杀真菌剂，以对抗稻作或其部分上的稻热病及/或纹枯病。本发明人发现用天竺葵酸胆碱获得的抗稻作稻热病的结果出乎意料地优于获得的抗大麦等其他作物稻热病的结果。
因此，本发明的第一方面是关于一种预防或控制稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
通过广泛的实验测试，本发明人发现使用天竺葵酸胆碱的功效水平类似于或甚至优于使用市售参考产品(例如，Nordox 56WP，Allied Botanical Corporation，Philippines，用于预防性治疗稻热病； Antracol 70WP，Bayer Crop Science，用于预防性治疗纹枯病；或Amistar Top 325S C，Syngenta Bangladesh，用于治疗性治疗稻热病或纹枯病)的功效水平。有利的是，目前使用天竺葵酸胆碱对抗稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合导致稻米损失减少及稻米产量增加，甚至成效超越使用市售参考产品后获得的结果。
因此，本发明的另一方面是关于一种相对于未经治疗的稻作的稻米产量增加稻作的稻米产量的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。一相关方面提供天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物用于相对于未经治疗的稻作的稻米产量增加稻作的稻米产量的用途。如实施例部分所示，用根据本发明的一个实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物治疗的稻作的产量成效超越未经治疗的稻作及用市售参考产品治疗的稻作的产量，而该组合物对稻作或其部分没有造成植物毒性。
此外，本发明人发现，用天竺葵酸胆碱进行预防性治疗时，亦即当在表现出稻热病、纹枯病或其组合的症状之前，将天竺葵酸胆碱施加于稻作或其部分时，可获得最高的抗稻热病、纹枯病或其组合的功效水平，以及最高的稻米产量。
因此，本发明优选提供一种预防或控制稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之前将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
此外，本发明人出人意料地发现，天竺葵酸胆碱(例如在不引起植物毒性的浓度下)在治疗性治疗后对稻作上的稻热病及纹枯病的发展提供完全的阻止作用。鉴于稻热病及纹枯病的主要控制方法涉及使用内吸性杀真菌剂，而已知天竺葵酸通常用作接触性(亦即非内吸性)除草剂，此发现令人惊讶。因此，本未预想到天竺葵酸胆碱会用作内吸性杀真菌剂用于治疗性病害控制。
因此，本发明优选提供一种预防或控制稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，优选在稻热病、纹枯病或其组合的症状强度为至多25％之前，将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
此外，使用天竺葵酸胆碱对抗稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合，不会对稻作或其部分造成植物毒性。
另一方面是关于天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物在预防或控制稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合中的用途。
本发明的上述及其他方面以及优选实施例在以下部分及所附申请专利范围中进行描述。所附申请专利范围的主题在此具体并入本说明书中。
【具体实施方式】
如本文所用的单数形式「一个(a/an)」及「该」包括单数及复数指示物，除非上下文另有明确规定。
如本文所用的术语「包含(comprising/comprises/comprised of)」与「包括(including/includes)」或「含有(containing/contains)」同义，并且是包容性或开放式的，且不排除额外的、未列举的成员、要素或方法步骤。此等术语亦涵盖「由......组成」及「基本上由......组成」。
由端点引述的数值范围包括包含在相应范围内的所有数字及分数，以及所引述的端点。
如本文所用的术语「约」在指可量测的值，诸如参数、量、持续时间及其类似值时，意欲涵盖指定值的及与指定值相差的变化，具体地，指定值的及与指定值相差的+/-10％或更小、优选+/-5％或更小、更佳+/-1％或更小以及更优选+/-0.1％或更小的变化，只要此类变化适合在所揭示的本发明中进行。应当理解，修饰语「约」所指的值本身亦是具体且优选地揭示的。
尽管术语「一或多个」，诸如一组成员中之一或多个成员本身是清楚的，但藉由进一步举例说明，该术语尤其涵盖对所述成员中的任何一个或所述成员中的任何两个或更多个的提及，诸如，所述成员中的任何≥3、≥4、≥5、≥6或≥7个等，以及直至所有所述成员。
本说明书中引用的所有文件均以其全文引用的方式并入本文中。
除非另有说明，否则用于揭示本发明的所有术语，包括技术及科学术语，具有本发明所属领域的一般技术者通常理解的含义。藉由进一步的指导，可以包括术语定义以更好地理解本发明的教导。
通过广泛的实验测试，本发明人发现，天竺葵酸胆碱可以用作有效的杀真菌剂，用于预防性及治疗性病害控制，对抗稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合。
因此，本发明的第一方面是关于一种治疗稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，该方法是农业方法。
如本文所用的术语「农业」是指种植包括水稻在内的作物的活动或业务。
如贯穿本说明书所使用的，术语「治疗」是指病害之一或多种可量测的症状或标志物的减轻或可量测的减少，该等病害诸如稻热病、纹枯病或其组合。可量测的减少包括可量测的症状或标志物的任何统计学上显著的下降。通常，该术语涵盖治疗性治疗及旨在减轻症状及/或减缓病害进展的治疗。此等术语涵盖对已经发展的病害的治疗性治疗，以及防治性或预防性措施或治疗，其中目的是预防或减少病害发生的机会。在实施例中，治疗可以是治疗性治疗。在其他实施例中，治疗可以是预防性治疗。本发明人惊奇地发现，施加天竺葵酸胆碱以高功效水平(例如，在不引起植物毒性的剂量下)抑制稻热病、纹枯病或其组合的发展，并允许增加稻米产量，甚至成效超越藉由市售参考产品进行预防性及治疗性治疗后获得的稻米产量。
如本文所用的术语「预防性治疗」、「保护性治疗」或「保护剂治疗」是指预防或减少稻热病、纹枯病或其组合发生的机会，诸如预防稻热病、纹枯病或其组合的发生、发展及进展。
如本文所用的术语「治疗性治疗」是指治疗已发展的稻热病、纹枯病或其组合，诸如减少、稳定、抑制及治愈已发展的稻热病、纹枯病或其组合。
措辞「预防或控制稻热病、纹枯病或其组合」及「治疗稻热病、纹枯病或其组合」在本文中可以互换使用，并且涵盖对已经发展的稻热病、纹枯病或其组合的实际治疗，诸如减少、稳定、抑制及治愈已经发展的稻热病、纹枯病或其组合，以及防治性或预防性措施，其中目的是预防或减少稻热病、纹枯病或其组合发生的机会，诸如预防稻热病、纹枯病或其组合的发生、发展及进展。
术语「稻热病(blast disease)」、「水稻稻热(rice blast)」、「水稻稻热病(riceblast disease)」或「枯萎病(blight disease)」在本文中可以互换使用并且指由稻梨孢菌引起的稻作病害。
稻梨孢菌亦称为稻热真菌、水稻烂颈病(rice rotten neck)、水稻立枯病(riceseedling blight)、水稻稻热(blast of rice)、禾本亚目卵形叶斑病(oval leaf spot ofgraminea)、点蚀病(pitting disease)、黑麦草灰斑病(ryegrass blast)、约翰逊斑病(Johnson spot)及颈瘟(neck blast)，是一种植物病原真菌，会引起稻热病，影响水稻及谷物，包括小麦、黑麦、大麦及珍珠粟。稻梨孢菌亦称为灰菌核病菌(Magnaporthe grisea)、灰梨孢菌(Pyricularia grisea)、灰色大角间座壳菌(Ceratosphaeria grisea)、灰似指状孢菌(Dactylaria grisea)、稻似指状孢菌(Dactylaria oryzae)、稻热病菌(Phragmoporthegrisea)或灰斑单端孢菌(Trichothecium griseum)。名称灰梨孢菌及灰菌核病菌最常用于此种病原体，并且与病原体生命周期的不同阶段有关：灰梨孢菌是无性型，而灰菌核病菌是有性型。
稻热病的症状包括可以在植株的所有地上部分(包括叶子、叶圈、颈部、穗、花梗及种子)以及根上发现的病灶。优选地，稻热病的症状包括叶子上的病灶。最初的症状是白色至灰绿色的病灶或病斑，边界较暗，在枝条的所有部分产生，而较陈旧的病灶为椭圆形或纺锤形，且略带白色至灰色，有坏死的边界。病灶可能扩大并合并以杀死整片叶子。稻热病亦阻止了实际谷粒的成熟。
一般来说，可以在每个稻区识别(确定)稻热病症状开始出现的水稻发育阶段范围(亦即BBCH范围)。此BBCH范围对应于杀真菌剂治疗的时间。此外，可以确定稻热病症状恶化或增加的发育阶段范围(亦即BBCH范围)。此等BBCH范围对应于进一步杀真菌剂治疗的时间。举例而言，在意大利，治疗的重点是BBCH范围：37-43；49-53；61-67。然而，根据有利于病害发展及寄主植物侵袭的气候条件，症状的出现可能会有所不同(更早或更晚)。在实施例中，水稻纹枯病的症状出现在BBCH 21至BBCH 53，诸如BBCH 30至BBCH 53，例如BBCH 30或更晚，诸如BBCH 31、BBCH 32、BB CH 33、BBCH 34、BBCH 35、BB CH 36或更晚。在实施例中，水稻纹枯病的症状出现在BB CH 37至BBCH 43，诸如BBCH 37或更晚，诸如BBCH 38、BBCH39、BB CH 40、BBCH 41、BBCH 42或BBCH 43。在实施例中，水稻纹枯病的症状出现在BBCH 49至BBCH 53。在实施例中，水稻纹枯病的症状出现在BBCH 61至BBCH 67。
术语「纹枯病(sheath blight)」、「水稻纹枯病(rice sheath blight)」、「纹枯病害(sheath blight disease)」或「水稻纹枯病害(rice sheath blight disease)」在本文中可以互换使用，且是指由立枯丝核菌引起的稻作病害。
立枯丝核菌是一种寄主范围广的植物病原真菌。立枯丝核菌亦称为黑斑念珠菌根菌(Mon iliopsis aderholdii)、立枯念珠菌根菌(Moniliopsis solani)、灰丝核菌(Rhizoctonia grisea)、纳帕丝核菌(Rhizocronia napaeae)。
纹枯病的症状包括下部叶片上的圆形或长圆形病灶，通常呈灰绿色及水浸状。首发症状是在靠近水面的叶子中肋上出现灰绿色病斑。病斑呈椭圆形或卵圆形，长1cm，跨度2-3cm，并黏在一起。病斑的边界及颜色的变化在植株的受感染部分上给出了清晰的模式。在潮湿的条件下，真菌菌丝体会呈现白色，且真菌形成不规则菌核。在最佳湿度下，与附近受感染的茎干接触的叶片亦会被感染。
在实施例中，水稻纹枯病的症状在植株生长的分蘖后期至节伸长阶段(BBCH25-35)开始出现，并且随着稻作转移至穗分化(生殖)阶段(BBCH＞51)而变得更具侵袭性。在实施例中，水稻纹枯病的症状出现在BBCH 25至BBCH 35，诸如BBCH 25或更晚，诸如BBCH 26、BBCH 27、BBCH 28、BBCH 29，或BBCH 30或更晚，诸如BBCH 31、BBCH 32、BBCH 33、BBCH 34或BBCH 35。
如上所述，稻热病是由真菌稻梨孢菌引起的，纹枯病是由真菌立枯丝核菌引起的。
因此，一方面是关于一种用于预防或对抗稻作或其部分的真菌感染的方法，其中该真菌感染是稻梨孢菌、立枯丝核菌或其组合，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
措辞「预防或对抗真菌感染」及「治疗真菌感染」在本文中可以互换使用，并且涵盖对已经发展的真菌感染的实际治疗，诸如减少、控制、稳定及抑制已经发展的真菌感染，以及防治性或预防性措施，其中目的是预防或减少真菌感染的发生机会，诸如防止真菌感染的发生、发展及进展。
术语「真菌感染」或「真菌病害」在本文中可以互换使用。
在如本文教导的方法或用途的实施例中，真菌感染是在稻作上天然发生的真菌感染，诸如立枯丝核菌、稻梨孢菌或其组合。
术语「稻作」、「水稻生产植株」或「水稻生产作物」是指能够生产水稻的植株。
如本文所用的措辞「稻作的部分」是指稻作的叶子、茎干、根、穗及种子中的任何一或多者。叶子、茎干及根是营养器官。穗及种子是生殖器官。提及的「叶子」可以包括叶片、叶圈及叶鞘。提及的「穗」可以包括小梗(带有小穗)及花。术语「种子」、「谷粒」或「稻谷(paddy)」在本文中可以互换使用，且是指由稻壳、胚乳及胚芽构成的稻米谷粒。
在实施例中，稻作的部分可以是叶子(包括叶片、叶圈及叶鞘)、茎干、穗(包括花梗及花)、种子及根中的任何一或多者。在实施例中，稻作的部分可以是叶子、茎干、穗及种子中的任何一或多者。在实施例中，稻作的部分可以是叶子及茎干中的任何一或多者。
在实施例中，当根据本文教导的方法治疗时，稻作的叶子、茎干、穗、种子及根可以附着于(例如，生长在)稻作上。治疗种子(谷粒)的收获后方法不包括在本文教导的方法中。
如本文所用的措辞「稻作的所在地」或「稻作的生长所在地」是指非常接近稻作的区域。举例而言，稻作的所在地可以是稻作茎干周围的圆形区域，诸如稻作茎干周围的直径至多1公尺、例如至多50公分(cm)、至多40cm、至多30cm、至多20cm、至多10cm或至多5cm的圆形区域。
如本文所用的术语「稻米」是指稻作的种子。
如本文所用的稻作是指稻属(Oryza)、菰属(Zizania)及野稻属(Porteresia)的禾本科物种。该术语涵盖粮食作物稻作(包括主要的粮食作物稻种水稻(Oryza sativa)及西非栽培稻(Oryza glaberrima))及野生稻作，包括丛集野稻(Porteresia coarctata)及形成菰属的四种禾本科物种。
在本文教导的方法或用途的实施例中，稻作可以选自由以下组成的组：水稻(亚洲水稻)、西非栽培稻(非洲水稻)、澳洲稻(Oryza australiensis)、巴司稻(Oryza barthii)、短花稻(Oryza brachyantha)、双弧稻(Oryza coarctata)、艾氏稻(Oryza eichingeri)、大颖稻(Oryza grandiglumis)、阔叶稻(Oryza latifolia)、长颖稻(Oryza longiglumis)、长药稻(Oryza longistam inata)、梅氏稻(Oryza meyeriana)、微粒稻(Oryza minuta)、新喀里多尼亚稻(Oryza neocaledonica)、亚洲稻(Oryza officinalis)、东非野生稻(Oryzapunctata)、立特来稻(Oryza ridleyi)、宿根稻(Oryza rufipogon)、史氏稻(Oryzaschlechteri)、沼生菰(Zizania palustris)、水生菰(Zizania aquatica)、得克萨斯菰(Zizania texana)、菰(Zizania latifolia)及丛集野稻。
在本文教导的方法或用途的实施例中，稻作可以选自由以下组成的组：水稻(亚洲水稻)、西非栽培稻(非洲水稻)、澳洲稻、巴司稻、短花稻、双弧稻、艾氏稻、大颖稻、阔叶稻、长颖稻、长药稻、梅氏稻、微粒稻、新喀里多尼亚稻、亚洲稻、东非野生稻、立特来稻、宿根稻及史氏稻。
在本文教导的方法或用途的实施例中，稻作可以是稻。在本文教导的方法或用途的实施例中，稻作可以是籼稻(Oryza sativa indica)或粳稻(Oryza sativa japonica)。
在实施例中，如本文教导的方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加(亦即施用、递送、提供、投放)于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
术语「天竺葵酸胆碱」、「壬酸胆碱」或「天竺葵酸三甲基乙醇胺」可以互换使用，且是指天竺葵酸的胆碱盐。在本文所述的浓度下，天竺葵酸胆碱似乎对人类、非目标生物体或环境没有不可接受的毒性或有害影响；例如喷雾在稻作上时没有不可接受的毒性或有害影响。此外，如实验部分所示，将包含天竺葵酸胆碱的组合物以抗纹枯病或稻热病的所有测试剂量施加在稻作上(具有预防性及治疗性治疗方案)不会对稻作造成植物毒性症状。
如本文所用的术语「天竺葵酸」亦可称为「壬酸」或「1-辛烷羧酸」或C9脂肪酸，且是指由以羧酸官能基为末端的九碳链构成的有机化合物。
天竺葵酸胆碱可以在本文中作为组合物的一部分施加，该组合物具体为抗真菌组合物，诸如包含天竺葵酸胆碱的水性组合物。
术语「组合物」、「调配物」或「制剂」在本文中可互换使用，且是指包含作为活性成分的天竺葵酸胆碱及一或多种助剂的混合物。
术语「活性成分」或「活性组分」可以互换使用，且广义上是指当以有效量提供时，实现所需结果的化合物或物质。通常，如本文所指的活性成分可以经由与该稻作、其部分或该稻作的生长所在地相互作用及/或对其进行调节来实现此类结果。
在如本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以是水性组合物或液体。在本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以包含在0.001％(w/v)与70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。通常，包含天竺葵酸胆碱的组合物可以是包含在0.001％(w/v)至70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱的液体或水性组合物。举例而言，包含天竺葵酸胆碱的组合物可以是液体或水性组合物，其包含在0.005％(w/v)与65％(w/v)之间、在0.01％(w/v)与60％(w/v)之间，在0.05％(w/v)与55％(w/v)之间，或在0.1％(w/v)与50％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
如本文教导的组合物可以包含可以通过合适的器具施加于植株的备用型组合物，但亦可以包含在使用前必须用水稀释的浓缩物或浓缩调配物。在本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以是可喷雾液体或浓缩物。
在实施例中，如本文教导的组合物可以调配成备用型形式，诸如喷雾剂或可喷雾液体或浸液，其包含非植物毒性量的天竺葵酸胆碱，其在施加时有效抑制稻作或其部分上的立枯丝核菌及/或稻梨孢菌的生长。
在如本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以是喷雾剂、可喷雾液体或浸液。优选地，天竺葵酸胆碱以有效量存在于如本文教导的组合物中。
在如本文教导的方法或用途的实施例中，如本文教导的组合物可以是水性组合物，特别是可喷雾液体或浸液，包含在0.001％(w/v)与5.0％(w/v)的天竺葵酸胆碱，优选在0.001％(w/v)与2.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱，诸如在0.001％(w/v)与1.50％(w/v)之间或在0.001％(w/v)与1.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。在实施例中，如本文教导的组合物可以是水性组合物，特别是可喷雾液体或浸液，其包含在0.001％(w/v)与4.0％(w/v)之间、在0.001％(w/v)与3.5％(w/v)之间、在0.01％(w/v)与3.0％(w/v)之间、在0.01％(w/v)与2.5％(w/v)之间或在0.05％(w/v)及2.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱，诸如在0.1％(w/v)与2.5％(w/v)之间、在0.1％(w/v)与2.0％(w/v)之间或在0.1％(w/v)与1.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。举例而言，如本文教导的组合物可以是水性组合物，特别是可喷雾液体或浸液，包含在0.1％(w/v)与0.8％(w/v)之间、在0.2％(w/v)与0.8％(w/v)之间、在0.3％(w/v)与0.8％(w/v)之间或在0.4％(w/v)与0.8％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。此类浓度有利地允许有效治疗稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合。与无治疗或用市售参考产品治疗相比，此类浓度亦减少稻米损失并增加稻米产量。
在本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以是浓缩物。
在本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以是浓缩物，其包含在5.0％(w/v)与70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱、优选在10％(w/v)与60％(w/v)之间或在10％(w/v)与50％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。举例而言，该组合物可以是浓缩物，其包含在15％(w/v)与55％(w/v)之间、在20％(w/v)与50％(w/v)之间、在25％(w/v)与45％(w/v)之间、在30％(w/v)与40％(w/v)之间或在30％(w/v)与35％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
有利的是，天竺葵酸胆碱是一种稳定的化合物，可以在使用前容易地浓缩、储存及稀释。此允许生产包含天竺葵酸胆碱的浓缩组合物，接着可以容易地对其进行稀释，例如用水稀释，以获得具有有效抑制一或多种植物病原真菌在稻作或其部分上生长且无植物毒性作用的天竺葵酸胆碱浓度的组合物。浓缩组合物的可用性允许在生产便利性、运输及储存成本方面获得额外的益处。应当理解，如本文教导的备用型抗真菌组合物包含活性但无植物毒性量的天竺葵酸胆碱。「活性但无植物毒性量」应意谓足以控制或杀死非所需真菌的天竺葵酸胆碱的量，该量同时不表现出显著的植物毒性症状。
在实施例中，组合物可以调配成粉末。在本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以是固体或粉末状组合物。
术语「粉末」是指由许多非常细的颗粒构成的干燥的块状固体，其在摇晃或倾斜时可以自由流动。
在如本文教导的方法或用途的实施例中，如本文教导的组合物可以是包含70％(w/w)至100％(w/w)的天竺葵酸胆碱的固体或粉末组合物。在实施例中，如本文教导的组合物可以是固体或粉末状组合物，其包含75％(w/w)至100％(w/w)、80％(w/w)至100％(w/w)、90％(w/w)至100％(w/w)、或95％(w/w)至99％(w/w)的天竺葵酸胆碱。在实施例中，如本文教导的组合物可以包含至少70％(w/w)、至少80％(w/w)、至少90％(w/w/)、至少95％(w/w)或高达100％(w/w)的天竺葵酸胆碱，特别是当调配成粉末时。
在本文教导的方法或用途的实施例中，组合物可以进一步包含一种或多种助剂(auxiliary/auxiliary agent)，诸如溶剂、载体、表面活性剂、黏着剂(例如改善组合物对植株或其部分的黏着性质的添加剂或佐剂)、防冻剂、增稠剂、缓冲剂、消泡剂、抗氧化剂、防腐剂、芳香剂或着色剂。
合适的助剂及惰性剂是此项技术中已知的并且是市售的。通常，活性化合物(亦即天竺葵酸胆碱)可以与任何常用于调配目的的固体或液体添加剂组合。载体应理解为意谓与活性化合物混合或组合以更好地施加，特别是施加于植株或植株部分的天然或合成的有机或无机物质。载体可以是固体或液体，通常是惰性的并且应该适用于农业。举例而言，液体载体可以包括水、有机溶剂、及矿物油及植物油。合适的液化气态增量剂或载体是在环境温度及大气压下为气态的液体，例如气溶胶推进剂，诸如丁烷、丙烷、氮气及二氧化碳。合适的表面活性剂是具有离子或非离子性质的乳化剂、分散剂或润湿剂，或这些表面活性剂的混合物。可以使用着色剂，诸如无机颜料，例如氧化铁、氧化钛、普鲁士蓝；及有机染料，诸如茜素染料、偶氮染料及金属酞青素染料；以及微量营养素，诸如铁盐、锰盐、硼盐、铜盐、钴盐、钼盐及锌盐。亦可以存在稳定剂，诸如低温稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、光稳定剂或其他改善化学及/或物理稳定性的试剂。该组合物亦可以包含其他作物保护剂及/或杀虫剂。
包含天竺葵酸胆碱的典型组合物的实例包括水溶性液体(SL)、乳剂(EC)、水乳剂(EW)、悬浮剂(SC、SE、F S、OD)、水分散性颗粒剂(WG)、颗粒剂(GR)及胶囊剂(C S)，这些在本领域中是已知的。
在实施例中，可以将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施用于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
在实施例中，可以将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于田野中存在的稻作、该稻作的部分或该稻作的生长所在地。
术语「田间」或「农田」在本文中可以互换使用，且是指用于农业目的的土地区域，诸如栽培农作物或栽培稻作。
在实施例中，当稻作部分，诸如叶子，存在于或附着于(例如生长在)稻作上时，可以向该稻作部分，诸如向该叶子施加如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物。
在实施例中，可以将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于叶子、茎干、穗、种子及根中的任何一或多者。在实施例中，该方法可以包含将天竺葵酸胆碱或组合物施加于稻作的整个地上部分。在如本文教导的方法或用途的某些实施例中，可以将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于(例如，喷雾在)稻作的整个地上部分。因此，在实施例中，可以将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于(例如，喷雾在)稻作的叶子、茎干、穗及种子中的任何一或多者。在实施例中，可以将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于(例如，喷雾在)稻作的叶子及茎干中的任何一或多者。在实施例中，可以将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于(例如，喷雾在)稻作的叶子上。
因此，一方面提供一种预防或控制稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作的叶子、叶圈、颈部及茎干。
在如本文教导的方法或用途的实施例中，可以将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物喷雾在该稻作、其部分或该稻作的生长所在地上。在实施例中，可以藉由本领域中已知的传统喷雾设备，诸如飞机、背负式喷雾机、安装在拖拉机上的杆架式喷雾机等，通过喷雾该稻作、其部分或该稻作的生长所在地来施加可喷雾液体。
在实施例中，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地可直接进行或使用常规治疗方法作用于其周围环境或栖息地进行，例如采用浸渍、喷雾、雾化、灌溉、蒸发、喷粉、成雾、撒施、发泡、涂刷、播撒、浇水(淋水)或滴灌。在实施例中，该方法可以包含用如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物喷雾、喷洒、淋浴、喷射、液滴撒布、泼溅、分散、扩散或灌洗该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
在实施例中，施加可以是单次施加或频繁(多次)施加，施加时间间隔相同或不同。在实施例中，可以进行至少一次、至少两次、至少三次、至少四次、至少五次或至少六次的施加。优选地，可以进行至少五次施加。此种治疗方案有利地引起稻作或其部分上的稻热病、纹枯病或其组合的有效治疗。与未治疗或用市售参考产品治疗相比，此类治疗方案亦减少了稻米损失并增加了稻米产量。
两次顺序施加之间的时间间隔可以是三天至四周(一个月)。举例而言，两次顺序施加之间的时间间隔可以是四天至三周、五天至两周、或六天至十天。两次顺序施加之间的时间间隔可以是至少四天、至少五天、至少六天、至少七天(一周)、至少八天、至少九天、至少十天或至少两周。优选地，两次顺序施加之间的时间间隔可以是至少一周。优选地，施加可以进行至少两次，诸如至少三次、至少四次或至少五次，并且两次顺序施加之间的时间间隔可以是至少一周。此种治疗方案有利地引起稻作或其部分上的稻热病、纹枯病或其组合的有效治疗。与未治疗或用市售参考产品治疗相比，此类治疗方案亦减少了稻米损失并增加了稻米产量。
在如本文教导的方法的实施例中，施加如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的时间可以是在显现真菌病(特别是稻热病或纹枯病)或其症状之前(「预防性施加」)或之后(「治疗性施加」)。
在如本文教导的方法的实施例中，可以在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合之前，将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，可以在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合的症状之前，将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，该方法可以包含预防性施加如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物。在实施例中，该方法可以包含天竺葵酸胆碱或如本文教导的组合物的预防性治疗方案。使用天竺葵酸胆碱(例如，以不引起植物毒性的剂量)的预防性施加或预防性治疗方案有利地引起稻热病、纹枯病或其组合的高效治疗以及增加的稻米产量，甚至成效超越在利用市售参考产品进行预防性或治疗性治疗之后及在利用天竺葵酸胆碱进行治疗性治疗之后获得的功效及稻米产量。
如本文所用的术语「预防性施加」是指在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合之前或显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合的症状之前，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
如本文所用的术语「预防性治疗方案」是指其中施加是如本文所定义的预防性施加的治疗方案。
在实施例中，第一次将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地的时间可以在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合之前或显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合的症状之前。在实施例中，当进行超过一次施加时，在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合之前或显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合的症状之前，亦对该稻作、其部分或该稻作的生长所在地进行如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的顺序施加。
在实施例中，可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合之后，将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，该方法可以包括如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的治疗性施加。在实施例中，该方法可以包含如本文教导的天竺葵酸胆碱或该组合物的治疗性治疗方案。尽管通常已知将天竺葵酸用作接触性除草剂，但治疗性施加或治疗性治疗方案出人意料地引起稻热病、纹枯病或其组合的高效治疗以及增加的稻米产量。使用天竺葵酸胆碱(例如，以不引起植物毒性的剂量)的治疗性施加或治疗性治疗方案有利地成效超越在利用市售参考产品进行治疗性治疗之后获得的功效及稻米产量。
如本文所用的术语「治疗性施加」是指在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合之前或显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
如本文所用的术语「治疗性治疗方案」是指其中施加是如本文定义的治疗性施加的治疗方案。
在实施例中，可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，且在稻热病、纹枯病或其组合的症状强度为至多25％之前，将天竺葵酸胆碱或该组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，且在稻热病、纹枯病或其组合的症状强度为至多20％、至多15％、至多10％或至多5％之前，将天竺葵酸胆碱或该组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。举例而言，可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，且在稻热病、纹枯病或其组合的症状强度为至多4％、至多3％、至多2％或至多1％之前，将天竺葵酸胆碱或该组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。此种使用天竺葵酸胆碱(例如，以不引起植物毒性的剂量)的治疗性施加或治疗性治疗方案引起稻热病、纹枯病或其组合的高效治疗以及改良的稻米产量，成效超越在利用市售参考产品进行治疗性治疗之后获得的功效及稻米产量。
在实施例中，可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的首发症状之后的同一天，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物对该稻作、其部分或该稻作的生长所在地的第一次施加可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的首发症状之后1天至14天(2周)，诸如1天至7天(1周)、1天至4天、1天至3天或1天至2天进行。在实施例中，如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物对该稻作、其部分或该稻作的生长所在地的第二次或其他施加可以在前次施加之后7天(1周)进行。在实施例中，如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物对该稻作、其部分或该稻作的生长所在地的第二次或其他施加可以在前次施加之后1周至4周，诸如1周至3周或1周至2周进行。在实施例中，如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物对该稻作、其部分或该稻作的生长所在地的第一次施加可以在稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的首发症状之后的同一天进行，且如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物对该稻作、其部分或该稻作的生长所在地的第二次施加可以在第一次施加之后7天(1周)进行。
在实施例中，该方法可以包含如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的治疗性施加或治疗性治疗方案，其中在第一次施加时稻热病、纹枯病或其组合的症状强度为至多25％、至多20％、至多15％、至多10％或至多5％。在实施例中，该方法可以包含如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的治疗性施加或治疗性治疗方案，其中在第一次施加时稻热病、纹枯病或其组合的症状强度为至多4.5％，至多4％、至多3.5％、至多3％、至多2.5％、至多2％、至多1.5％或至多1％。
在实施例中，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地的时间可以在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，优选在症状强度为至多25％、至多20％、至多15％、至多10％或至多5％之前。在实施例中，当进行超过一次施加时，在稻作或其部分上显现(或出现、发生)稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，优选在症状强度为至多25％、至多20％、至多15％、至多10％或至多5％之前或之后，对该稻作、其部分或该稻作的生长所在地进行如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的顺序施加。
表现出稻热病、纹枯病或其组合或表现出稻热病、纹枯病或其组合的症状的时间取决于许多不同的因素及条件，包括稻作的种类、稻作的品种、天气条件等。根据经验，农民基于占优因素及条件将知道或将能够确定(例如预测)表现出稻热病、纹枯病或其组合或表现出稻热病、纹枯病或其组合的症状的时间。真菌病害时间的确定(例如预测)可以基于决策支持是统(D S S)的使用，例如欧洲及美国所使用的。D S S将气候数据与田间孢子侦测器相关数据相结合，从而预测病原体侵袭的概率。根据风险预测，农民可以施加如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物。
通常，在实施例中，该方法可以包含在播种水稻种子之后第15天至第100天、第15天至第90天、第15天至第80天、第15天至第75天或第15天至第70天，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物(例如第一次)施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，该方法可以包含在播种水稻种子之后第20天至第65天，将天竺葵酸胆碱或组合物(例如第一次)施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
在实施例中，可以藉由在播种水稻种子之后第1 5天至第30天将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物(例如，第一次)施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，从而进行预防性施加。在实施例中，可以藉由在播种水稻种子之后第20天至第30天将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物(例如，第一次)施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，从而进行预防性施加。
在实施例中，可以藉由在播种水稻种子之后第31天至第100天、第31天至第90天、第31天至第80天、第31天至第75天或第31天至第70天将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物(例如，第一次)施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，从而进行治疗性施加。在实施例中，可以藉由在播种水稻种子之后第31天至第65天、31天至第55天或第31天至第45天将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物(例如，第一次)施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，从而进行治疗性施加。在实施例中，可以藉由在播种水稻种子之后第35天至第80天、第40天至第75天或第45天至第70天将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物(例如，第一次)施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，从而进行治疗性施加。
在实施例中，如本文教导的方法包括以有效预防或控制稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合的量将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，如本文教导的方法包括以有效预防或对抗稻作或其部分的立枯丝核菌及/或稻梨孢菌的真菌感染的量将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
在实施例中，包含天竺葵酸胆碱的组合物可以0.1L/ha至10L/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，包含天竺葵酸胆碱的组合物可以0.5L/ha至10L/ha、1 L/ha至1 0L/ha、2L/ha至8L/ha或2L/ha至6L/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物以3L/ha至7L/ha，诸如4L/ha至6L/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。与市售参考产品相比，此类剂量有利地允许更有效地治疗稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合。
在实施例中，天竺葵酸胆碱可以以至少0.01kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，天竺葵酸胆碱可以以至少0.02kg/ha、至少0.04kg/ha、至少0.06kg/ha、至少0.08kg/ha或至少0.1kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。举例而言，天竺葵酸胆碱可以以至少0.2kg/ha、至少0.4kg/ha、至少0.6kg/ha、至少0.8kg/ha、至少1.0kg/ha、至少1.5kg/ha、至少2.0kg/ha或至少2.5kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
在实施例中，天竺葵酸胆碱可以0.01kg/ha至10.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在实施例中，天竺葵酸胆碱可以0.04kg/ha至5.0kg/ha、0.1kg/ha至4.0kg/ha、或0.2kg/ha至10kg/ha、0.4kg/ha至8.0kg/ha、0.5kg/ha至5.0kg/ha、0.6kg/ha至4.0kg/ha、0.8kg/ha至4.0kg/ha、0.75kg/ha至3.0kg/h、0.8kg/ha至3.0kg/ha、或1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，天竺葵酸胆碱以0.8kg/ha至3.0kg/ha、1.0kg/ha至3.0kg/ha、或1.5kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。在与市售参考产品相比时，此类剂量有利地引起更有效地治疗稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗稻热病)的实施例中，天竺葵酸胆碱可以0.01kg/ha至10kg/ha的浓度，例如以0.04kg/ha至5.0kg/ha、0.1kg/ha至4.0kg/ha、0.8kg/ha至3.0kg/ha、或1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，且可以在稻作或其部分上表现出稻热病或表现出稻热病症状之前将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，施加可以进行至少两次，并且两次顺序施加之间的时间间隔可以是至少一周。此类施加提供治疗稻作或其部分的稻热病的高功效，并因此提供高稻米产量。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗稻热病)的实施例中，天竺葵酸胆碱可以0.01kg/ha至10kg/ha的浓度，诸如以0.04kg/ha至5.0kg/ha、0.1kg/ha至4.0kg/ha、0.8kg/ha至3.0kg/ha、或1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，且可以在稻作或其部分上表现出稻热病或表现出稻热病症状之后，优选在症状强度为至多25％之前，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，施加可以进行至少五次，并且两次顺序施加之间的时间间隔可以是至少一周。此类施加提供治疗稻作或其部分的稻热病的高功效，并因此提供高稻米产量。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，天竺葵酸胆碱可以0.01kg/ha至10kg/ha的浓度，诸如以0.04kg/ha至5.0kg/ha、0.1kg/ha至4.0kg/ha、0.8kg/ha至3.0kg/ha、或1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，且可以在稻作或其部分上表现出纹枯病或表现出纹枯病症状之前，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，施加可以进行至少两次，并且两次顺序施加之间的时间间隔可以是至少一周。此类施加提供治疗稻作或其部分的纹枯病的高功效，并因此提供高稻米产量。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，天竺葵酸胆碱可以0.01kg/ha至10kg/ha的浓度，诸如以0.04kg/ha至5.0kg/ha、0.1kg/ha至4.0kg/ha、0.8kg/ha至3.0kg/ha、或1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地，且可以在稻作或其部分上表现出纹枯病或表现出纹枯病症状之后，优选在症状强度为至多25％之前，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。优选地，施加可以进行至少四次，并且两次顺序施加之间的时间间隔可以是至少一周。此类施加提供治疗稻作或其部分的纹枯病的高功效，并因此提供高稻米产量。
在本文教导的方法或用途的实施例中，如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的功效水平可以是至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％，至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。
在实施例中，由诸如稻热病或纹枯病的真菌病害引起的作物损害强度(I)可以利用公式(1)计算：
其中I＝作物损害强度；n＝每个侵袭规模中的分蘖数目；v＝每个侵袭类别的侵袭规模值；V＝指定的最高侵袭规模值；N＝观察到的分蘖总数。
稻热病的侵袭规模可以如下确定：0＝无侵袭；1＝病斑：针尖大小；2＝病斑：大于针尖；3＝病斑：坏死斑块，圆形，略椭圆形，长1-2mm，边缘棕色；4＝典型长孔，1-2mm长，不到2％受影响的叶子面积；5＝2-10％受影响的典型稻热病叶子面积；6＝11-25％受影响的典型稻热病叶子面积；7＝26-50％受影响的典型稻热病叶子面积；8＝51-75％受影响的典型稻热病叶子面积；9＝76-100％受影响的典型稻热病叶子面积。
纹枯病的侵袭规模可以如下确定：0＝无侵袭；1＝叶片损伤的早期症状；3＝第一个及第二个穗(panicle)损伤超过25％的症状；5＝第一个、第二个及第三个穗损伤超过25％的症状；7＝所有穗损伤超过25％的症状；9＝所有分蘖均腐烂。
在实施例中，杀真菌剂(诸如，如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物)的功效水平(百分比)可根据公式(2)计算：
功效水平(％)＝(ISK-ISP)(ISK)-1×100％ (2)
其中：ISK＝对照(不含杀真菌剂)中真菌病害对作物的损害强度；及ISP＝杀真菌剂治疗中真菌病害对作物的损害强度。作物损害的强度可以利用如本文提供的公式(1)计算。
在本文教导的方法或用途(诸如用于治疗稻热病)的实施例中，如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的功效水平可以是至少65％、至少70％、或至少75％，优选至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。有利的是，在本文教导的方法或用途(诸如用于治疗稻热病)的实施例中，在如本文教导的预防性治疗方案中，天竺葵酸胆碱的功效水平可以是至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。在本文教导的方法或用途(诸如用于治疗稻热病)的实施例中，在如本文教导的治疗性治疗方案中，天竺葵酸胆碱的功效水平可以是至少65％、至少70％、或至少75％，优选至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，优选当向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地以0.8kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时，天竺葵酸胆碱的功效水平可以是至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、或至少95％。在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，优选当向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时，天竺葵酸胆碱的功效水平可以是至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，在如本文教导的预防性治疗方案中，天竺葵酸胆碱的功效水平可以是至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，在如本文教导的预防性治疗方案中，优选当向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时，天竺葵酸胆碱的功效水平可以是至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，在如本文教导的治疗性治疗方案中，优选当向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时，天竺葵酸胆碱的功效水平可以是至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。
在实施例中，相对于未经杀真菌剂治疗(亦即未经治疗的对照)的稻米产量或在施加市售参考杀真菌剂之后的稻米产量而言(亦即，与之比较)，在施加如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物之后的稻米产量可以提高(亦即增加)至少约5％(亦即，在施加如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物之后的稻米产量可以是至少约1.05倍)。
本文所用的术语「稻米产量」或「干稻榖收成」是指每表面积收获的糙米(收获的干粮(gabahkering panen)或GKP)的平均重量。稻米产量可以表示为kg/ha或kg/m2。
在向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地施用如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物之后介于约7天至约350天、约7天至约300天、约7天至约250天、约7天至约200天、约7天至约150天，或约10天至约100天、诸如约15天至约75天、约20天至约60天、或约25天至约50天之间的时间点，可以量测已施用该如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的稻作的稻米产量。在实施例中，在收获稻作以收集其谷粒或农产品之时，亦即在自田间采集成熟稻作之时，可以量测已施用如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的稻作的稻米产量。举例而言，在播种之后介于约75天至约200天之间，诸如在播种之后介于约100天至约150天或约110天至约130天之间的时间点，可以量测已施用如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的稻作的稻米产量。将在相同时间点量测已施用如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的稻作与未如此治疗的稻作(亦即未经治疗的对照)的稻米产量。
如本文所教导的方法及用途可以在用其治疗的植株中相对于未经治疗的植株提供优势。「未经治疗的稻作」或「未经治疗的对照」是指与已经施用如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物的稻作属于同一物种(例如，与其同基因型或与其在遗传上相同)并在基本上相同的条件(例如，持续相同的时间量，在相同的气候中，并根据相同的方法使用相同的材料进行栽培，并且根据相同的方法量测产量及其他特征)下生长的稻作，不同之处在于未经治疗的稻作没有向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地施用如本文教导的所述天竺葵酸胆碱或组合物。这些术语可以与「参考植株」或「参考」同义使用，「参考植株」或「参考」是与经治疗的植株在遗传上相同且除了正在研究的治疗之外以基本上相同的方式操纵的植株，且该植株因此为侦测该治疗的效果提供有意义且信息充足的对照。因此，经治疗的植株及参考植株可暴露于基本上相同的环境条件。
市售接触性参考杀真菌剂的实例包括Nordox 56WP(Allied BotanicalCorporation，Philippines；活性成分：氧化铜)、Antracol 70WP(Bayer CropScience；活性成分：甲基锌乃浦(Propineb))、Seltima(BASF；活性成分：百克敏(pyraclostrobin))、Thiopron(UPL Europeltd；活性成分：硫)。
市售内吸性参考杀真菌剂的实例包括Amistar Top 325SC(SyngentaBangladesh；活性成分：亚托敏(Azoxystrobin)及待克利(Difenoconazole))、Zerox(Dhanuka；活性成分：普克利(propiconazole))、Luna experience(Bayer；活性成分：氟吡菌酰胺(Fluopyram)及得克利(Tebuconazole))、Roko(Biostadt；活性成分：甲基多保净(thiophanate methyl))。
在实施例中，相对于未经杀真菌剂治疗(亦即未经治疗的对照)的稻米产量(例如表示为kg/面积)或在施加市售参考杀真菌剂之后的稻米产量而言(亦即，与之比较)，在施加如本文教导的天竺葵酸胆碱或组合物之后的稻米产量(例如，表示为kg/面积)可以提高(亦即增加)至少约5％(亦即，可以是至少1.05倍)、至少约10％(亦即可以是至少1.10倍)、至少约15％(亦即1.15倍)、至少约20％(亦即1.20倍)、至少约25％(亦即1.25倍)、至少约30％(亦即1.30倍)、至少约35％(亦即1.35倍)、至少约40％(亦即1.40倍)、至少约45％(亦即1.45倍)、至少约50％(亦即1.50倍)、至少约55％(亦即1.55倍)、至少约60％(亦即1.60倍)、至少约65％(亦即1.65倍)、至少约70％(亦即1.70倍)、至少约75％(亦即1.75倍)、至少约80％(亦即1.80倍)、至少约85％(亦即1.85倍)、至少约90％(亦即1.90倍)、至少约95％(亦即1.95倍)、或至少约100％(亦即2倍)。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗稻热病)的实施例中，相对于在施加市售参考杀真菌剂或以如本文教导的治疗性治疗方案施加天竺葵酸胆碱之后的稻米产量(例如表示为kg/面积)而言(亦即，与之比较)，在以如本文教导的预防性治疗方案施加天竺葵酸胆碱之后的稻米产量(例如，表示为kg/面积)可以提高(亦即增加)至少约5％(亦即，在如本文教导的预防性治疗方案之后的稻米产量可以是至少约1.05倍)。在如本文教导之方法或用途(诸如用于治疗稻热病)的实施例中，相对于在施加市售参考杀真菌剂或以如本文教导的治疗性治疗方案施加天竺葵酸胆碱之后的稻米产量(例如表示为kg/面积)而言(亦即，与之比较)，在以如本文教导的预防性治疗方案施加天竺葵酸胆碱之后的稻米产量(例如，表示为kg/面积)可以提高(亦即增加)至少约10％(亦即1.10倍)、至少约15％(亦即1.15倍)、至少约20％(亦即1.20倍)、至少约25％(亦即1.25倍)、至少约30％(亦即1.30倍)、至少约35％(亦即1.35倍)、至少约40％(亦即1.40倍)、至少约45％(亦即1.45倍)、至少约50％(亦即1.50倍)、至少约55％(亦即1.55倍)、至少约60％(亦即1.60倍)、至少约65％(亦即1.65倍)、至少约70％(亦即1.70倍)、至少约75％(亦即1.75倍)、至少约80％(亦即1.80倍)、至少约85％(亦即1.85倍)、至少约90％(亦即1.90倍)、至少约95％(亦即1.95倍)、或至少约100％(亦即2倍)。
在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，相对于在向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地施加市售参考杀真菌剂或以如本文教导的治疗性治疗方案施加天竺葵酸胆碱(优选当以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时)之后的稻米产量(例如表示为kg/面积)而言(亦即，与之比较)，在向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地以如本文教导的预防性治疗方案施加天竺葵酸胆碱(优选地当以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时)之后的稻米产量(例如，表示为kg/面积)可以提高(亦即增加)至少约5％(亦即，在如本文教导的预防性治疗方案之后的稻米产量可以是至少约1.05倍)。在如本文教导的方法或用途(诸如用于治疗纹枯病)的实施例中，相对于在向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地施加市售参考杀真菌剂或以如本文教导的治疗性治疗方案施加天竺葵酸胆碱(优选当以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时)之后的稻米产量(例如表示为kg/面积)而言(亦即，与之比较)，在向该稻作、其部分或该稻作的生长所在地以如本文教导的预防性治疗方案施加天竺葵酸胆碱(优选地当以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加时)之后的稻米产量(例如，表示为kg/面积)可以提高(亦即增加)至少约10％(亦即1.10倍)、至少约15％(亦即1.15倍)、至少约20％(亦即1.20倍)、至少约25％(亦即1.25倍)、至少约30％(亦即1.30倍)、至少约35％(亦即1.35倍)、至少约40％(亦即1.40倍)、至少约45％(亦即1.45倍)、至少约50％(亦即1.50倍)、至少约55％(亦即1.55倍)、至少约60％(亦即1.60倍)、至少约65％(亦即1.65倍)、至少约70％(亦即1.70倍)、至少约75％(亦即1.75倍)、至少约80％(亦即1.80倍)、至少约85％(亦即1.85倍)、至少约90％(亦即1.90倍)、至少约95％(亦即1.95倍)、或至少约100％(亦即2倍)。
因此，本发明的一方面提供了一种用于相对于没有杀真菌剂治疗的稻米产量(亦即未经治疗的对照)或施加市售参考杀真菌剂之后的稻米产量而言(亦即，与之比较)提高(亦即增加)稻作的稻米产量的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
另一方面是关于天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物在预防或控制稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合中的用途。
因此，一相关方面提供天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物在预防或对抗稻作或其部分的真菌感染中的用途，其中该真菌感染是立枯丝核菌或稻梨孢菌。
因此，一方面提供天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物作为杀真菌剂对抗稻作或其部分的立枯丝核菌或稻梨孢菌的用途。
在实施例中，杀真菌剂是接触性杀真菌剂。优选地，杀真菌剂是内吸性杀真菌剂。
因此，一方面提供天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物作为内吸性杀真菌剂对抗稻作或其部分的立枯丝核菌或稻梨孢菌的用途。鉴于已知天竺葵酸用作接触性(亦即非内吸性)除草剂，这是出乎意料的。
本申请案还提供如以下陈述中所述的方面及实施例：
1.一种预防或控制稻作或其一部分的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
2.根据陈述1的方法，其中该稻作选自由以下各项组成的组：水稻、西非栽培稻、澳洲稻、巴司稻、短花稻、双弧稻、艾氏稻、大颖稻、阔叶稻、长颖稻、长药稻、梅氏稻、微粒稻、新喀里多尼亚稻、亚洲稻、东非野生稻、立特来稻、宿根稻、史氏稻、沼生菰、水生菰、得克萨斯菰、菰及丛集野稻。
3.根据陈述1或2所述的方法，其中该稻作是水稻；优选地，其中该稻作是籼稻或粳稻。
4.根据陈述1至3中任一项的方法，其中该组合物是水性组合物。
5.根据陈述1至4中任一项的方法，其中该组合物是可喷雾液体或浓缩物。
6.根据陈述1至5中任一项的方法，其中该组合物包含在0.001％(v/v)与70％(v/v)之间的天竺葵酸胆碱。
7.根据陈述1至6中任一项的方法，其中该组合物是浓缩物，其包含在5.0％(w/v)与70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱、优选在10％(w/v)与60％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
8.根据陈述1至6中任一项的方法，其中该组合物是可喷雾液体，其包含在0.001％(w/v)与5.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱、优选在0.1％(w/v)与2.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱，更佳在0.1％(w/v)与1.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
9.根据陈述1至8中任一项的方法，其中该组合物进一步包含一或多种助剂，诸如溶剂、载体、表面活性剂、黏着剂、防冻剂、增稠剂、缓冲剂、消泡剂、抗氧化剂、防腐剂、芳香剂或着色剂。
10.根据陈述1至9中任一项的方法，其中该方法包括将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作的整个地上部分。
11.根据陈述1至10中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地是在该稻作或其部分上显现该稻热病、纹枯病或其组合的症状之前进行的。
12.根据陈述1至10中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地是在该稻作或其部分上显现该稻热病、纹枯病或其组合的症状之后进行的。
13.根据陈述1至10中任一项或12的方法，其中在该稻作或其部分上显现该稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，且在该稻热病、纹枯病或其组合的该等症状的强度为至多25％，诸如至多20％、至多15％、至多10％或至多5％之前，将天竺葵酸胆碱或该组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
14.根据陈述1至13中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱以0.01kg/ha至10.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地；优选地，其中将天竺葵酸胆碱以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
15.根据陈述1至14中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱或该组合物喷雾在该稻作、其部分或该稻作的生长所在地上。
16.天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物在预防或控制稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合中的用途。
以下非限制性实例进一步支持上述方面及实施例。
实例
比较实例1：根据本发明的一个实施例使用包含天竺葵酸胆碱的组合物对抗冬大麦的稻热病的评估
建立了冬大麦盆栽试验以确定包含天竺葵酸胆碱的组合物(称为「BPA 056」)作为对抗大麦稻热病(稻菌核病菌(Magnaporthe oryzae))的保护性(或预防性)及治疗性治疗的功效。
方法
实验设计
使用冬大麦栽培种SY Venture播种盆栽试验(第0天)。以每盆10粒种子的比率将种子播种至直径9cm的盆中，每种治疗播种三个重复盆。将盆转移至温室中并在23℃下生长，直至植株达到第一片叶子完全出芽的生长阶段(BBCH 11)。该试验由10种治疗组成，并接种了稻菌核病菌的孢子悬浮液。
产品施加
施加于试验的治疗在表1中详述。组合物(「BPA 056」)包含42％(w/v)天竺葵酸胆碱或每公升组合物0.42kg天竺葵酸胆碱。当植株在BBCH 11时(保护剂治疗第11天及治疗性治疗第14天)，以高水量(每个复制盆2ml，相当于3125L/ha)施加喷雾。用2ml水喷雾经接种及未经接种的对照。使用手持式雾化器喷雾机施加治疗。一旦经接种的叶子上的水分干了，就自保湿室中取出来施加治疗性治疗。
0.5％、0.75％及1％(v/v)的剂量是喷雾溶液中包含天竺葵酸胆碱的组合物的浓度。
表1：测试不同组合物及治疗方案对控制冬大麦植株稻热病的功效的试验中的治疗清单及施加时间
编号 产品 剂量(v/v) 每个重复盆中的产品量 时间
1 BPA056 1％ 20 在接种之前1天
2 BPA056 0.75％ 15 在接种之前1天
3 BPA056 0.5％ 10 在接种之前1天
4 Proline 275 0.72l/ha 0.46 在接种之前1天
5 BPA056 1％ 20 在接种之后2天
6 BPA056 0.75％ 15 在接种之后2天
7 BPA056 0.5％ 10 在接种之后2天
8 Proline 275 0.72l/ha 0.46 在接种之后2天
9 未经治疗-经接种 - - -
10 未经治疗-未经接种 - - -
接种
当植株处于BBCH 11(第12天)时，使用手持式雾化器喷雾机为每个盆接种2ml孢子悬浮液。施加的孢子悬浮液含有浓度为4×104孢子ml-1的稻菌核病菌的分生孢子。
接种后立即将植株转移至保湿室(100％湿度)并在约25℃的温度下培育。接种两天后将植株自保湿室中取出并转移至设定在23℃的检疫温室中。
叶子评估
一旦在经接种的对照上完全出现症状，就评估病害。将病害严重程度评估为每个重复盆中五株植株的第一片叶子(经治疗/经接种的叶子)上受病害症状影响的总叶子面积的百分比。自每个复制盆中随机选择评估的叶子。
统计分析
经由使用Genstat版本16及使用ANO VA的分析来计算平均值的最小显著差来确定治疗之间的差异。在进行统计分析之前，使用角度变换对百分比值进行变换。
结果与讨论
在第24天(接种后12天)，当植株处于BBCH 13时(三片叶子完全展开)时，评估了由稻菌核病菌引起的稻热病的症状。仅评估第一批叶子，亦即未评估治疗后出现的叶子。未经治疗的植株的病害水平评估为受影响叶子面积的39.6％(表2，变换数据)。
表2：在测试不同组合物及治疗方案对控制冬大麦植株稻热病的功效的试验中受影响的叶子面积(％)的结果
编号 施加时间 产品 原始数据 变换数据＊ ＊＊
1 保护剂 BPA056(1％) 20.7 25.98 c
2 保护剂 BPA056(075％) 35.3 35.93 de
3 保护剂 BPA056(0.5％) 52.0 45.7 f
4 保护剂 Proline 275(0.72l/ha) 0.0 0 a
5 治疗性 BPA056(1％) 35.3 35.58 de
6 治疗性 BPA056(0.75％) 39.0 38.29 def
7 治疗性 BPA056(0.5％) 27.3 30.7 cd
8 治疗性 Proline 275(0.72l/ha) 3.6 10.55 b
9 对照 经接种 41.0 39.56 ef
10 对照 未经接种 0 0 a
*在进行任何统计分析之前，使用角度变换对病害数据进行变换。**具有相同字母的变换数据在5％显著性水平下没有显著差异(LSD(5％)＝7.77)
用BPA056(1％)或Proline(0.72L/ha)的保护剂治疗或BPA056(0.5％)或Proline(0.72L/ha)的治疗性治疗进行治疗的植株导致与经接种的对照相比，由稻菌核病菌引起的症状显著(p＝0.05)减少。所有其他治疗给出的病害水平与经接种的对照没有显著差异(表2，变换数据)。
使用市售参考产品(0.72L/ha的Proline 275)实现的对照水平(无论是作为保护剂还是治疗性治疗施加)均显著高于任何BPA056治疗。鉴于此，在水稻田间试验中用BPA056获得的优异结果(如实例1及2中所述)是无法预料的。
实例1：根据本发明的一个实施例使用包含天竺葵酸胆碱的组合物对稻作稻热病的田间功效测试
建立了一项田间试验，以确定包含天竺葵酸胆碱的组合物(称为「BPA 056」)作为对抗稻作稻热病的保护剂及治疗性治疗的功效。
材料与方法
本实验所指的田间试验均是在田间条件下进行的实验性测试。测试地点：BojongTerong Sub-Village，Palabuan Village，Ujungjaya District，Sumedang Regency，WestJava。
试验使用了Inpari 32水稻品种或试验地点周边其他常用且易感染稻热病(稻梨孢菌)的品种。
使用无害虫且无病害的水稻种子。肥料的施加按照当地的建议进行。植株维护以最佳方式进行，以达到试验的目的。
使用播种后21天的幼苗。每个种植孔的种子量为2-3粒。根据印度尼西亚农民的习惯，且基于杀虫剂委员会的批准，一块试区的尺寸为10m×10m大小，每块试区观察的样品植株数目为25丛，且试区之间的距离是宽50cm的田埂。种植日期自第0天开始。
试区布局
随机完全区组设计，有9种治疗方案，如表3中所提供，且有3个重复。简而言之，表3中报导了9种不同的治疗方案。每种治疗方案在三个不同的试区(重复)上进行。每个试区的尺寸为10m×10m。试区根据随机完全区组设计进行分布。
用水量：400L/ha。接触剂量是组合物在喷雾溶液中的最终浓度。举例而言，Nordox以2g/L喷雾溶液的最终浓度施加。以每公顷Nordox公克数表示：2g/L×400L/ha＝每公顷800g Nordox。举例而言，AmistarTop 325SC以最终浓度300mL/ha施加。以mL/L喷雾溶液表示：300mL/400L＝0.75mL/L。举例而言，BPA056以2L/ha施加。以ml/L喷雾溶液表示：2000mL/400L＝5mL/L喷雾溶液。
包含天竺葵酸胆碱的组合物(称为「BPA 056」)的浓度为42％(w/v)天竺葵酸胆碱或每100mL组合物42g天竺葵酸胆碱或每公升420g(亦即0.42kg)。喷雾溶液中天竺葵酸胆碱的浓度为：2L组合物×0.42kg天竺葵酸胆碱/L组合物＝0.84kg天竺葵酸胆碱；4L组合物×0.42L天竺葵酸胆碱/L组合物＝1.68kg天竺葵酸胆碱；或6L组合物×0.42L天竺葵酸胆碱/L组合物＝2.52kg天竺葵酸胆碱。
因此，喷雾溶液中天竺葵酸胆碱的浓度为0.84kg/400L＝0.21kg/100L＝210g/100L＝2.10g/L＝0.21g/100ml＝0.21％(w/v)；1.68kg/400L＝0.42g/100ml＝0.42％(w/v)；或2.52kg/400L＝0.63g/100ml＝0.63％(w/v)。
活性成分的接触剂量对于预防性参考产品：448g/ha；对于治疗性参考产品：60g/ha亚托敏及37.5g/ha待克利；对于BPA0562l/ha：0.84kg/ha；对于BPA0564l/ha：1.68kg/ha；以及对于BPA0566l/ha：2.52kg/ha。
表3：在测试不同组合物及治疗方案对控制稻作稻热病的功效的试验中所测试的组合物、剂量及治疗时间
数据评估
目标害虫对植株损害的数据评估以及作物产量数据根据使用的实验设计进行分析，经治疗及对照植株的差异水平为5％。
施加的方式及手段
教导农民如何背负半自动高压400l/ha或基于校准使用杀真菌剂喷雾机应用。
施加的时间及次数
对于时间A：施加是预防性施加，在症状出现之前施加。
对于时间B：施加是治疗性施加。若在每个试区开始出现侵袭症状且强度仍然很轻(小于5％)，则进行第一次施加。
施加间隔：以1周的间隔进行施加。
施加次数：在方案治疗/SOP中，最晚在收获之前2周内进行至少5次施加，但根据田间条件，所进行的施加次数不同。这是由于更快地出现了侵袭症状，因此预防性施加仅进行了2次。第一次施加是在植株为20DAS时进行的。
功效标准
若试验开始时病害分布相对均匀分布，则功效标准以病原体对植株的损害程度为依据。但是，若在试验开始时，试区之间的作物损害程度不均匀，则根据病害进展确定功效标准。这可以经由(治疗前一天)植栽观察的变异数分析结果看出。
所测试的杀真菌剂的功效水平可以使用以下公式自最后的观察计算：
功效水平＝(ISK-ISP)(ISK)-1×100％
其中：ISK＝对照中病害侵袭强度(没有杀真菌剂)；ISP＝杀真菌剂治疗中病害侵袭强度。
观察果
在试验中，对全部试区进行治疗(试区尺寸为10m×10m)，但对每个试区的25个稻丛进行病害评估。在每个实验中，均系统地选择25丛。
稻梨孢菌对植株的危害程度按以下公式计算：
其中：I＝作物损害强度；n＝每个侵袭规模中的分蘖数目；v＝每个侵袭类别的侵袭规模值；V＝指定的最高侵袭规模值；N＝观察到的分蘖总数。
稻梨孢菌的侵袭规模如下确定：
0＝无侵袭；1＝病斑：针尖大小；2＝病斑：大于针尖；3＝病斑：坏死斑块，圆形，略椭圆形，长1-2mm，边缘棕色；4＝典型长孔，1-2mm长，少于2％受侵袭的叶子面积；5＝2-10％受侵袭的典型稻热病叶子面积；6＝11-25％受侵袭的典型稻热病叶子面积；7＝26-50％受影响的典型叶子面积斑点(blots)；8＝51-75％受侵袭的典型稻热病叶子面积；9＝76-100％受侵袭的典型稻热病叶子面积。
观察时间
对于所有治疗方案，第一次观察是在第一次预防性施加之后6天进行。每隔一周进行进一步的观察。观察时间呈现于表4。
结果与讨论
使用根据本发明的一个实施例的组合物对稻热病对稻作的损害程度的影响
包含天竺葵酸胆碱的组合物(如上所述，称为「BPA056」)作为抗稻热病发展的杀真菌剂的能力提供于表4中。根据治疗的时间，研究中使用的施加治疗是预防性及治疗性治疗。至于预防性治疗，在病害侵袭症状不明显或病害强度值为0％进行杀真菌剂施加。在第一次施加(预防性)之后的观察中，病害侵袭强度仍然不可见，每次治疗的侵袭强度为0％。在第二次观察(预防性)时，稻热病的症状开始出现。在此观察中，可以看出在所有治疗中均呈现出病害侵袭强度，亦即在BPA056杀真菌剂治疗及比较杀真菌剂(NORDOX 56WP及AMISTARTOP 325SC)两者中均呈现出病害侵袭强度。因此仅进行了2次预防性杀真菌剂的施加，因为在第二次观察中或在第二次预防性杀真菌剂施加之后一周，病害侵袭的症状已经开始出现。与尚未进行杀真菌剂施加的治疗性治疗相比，在预防性治疗中第二次观察时的侵袭强度显著不同。与比较杀真菌剂治疗及治疗性治疗相比，预防性BPA056杀真菌剂治疗中病害侵袭强度值要低得多。
治疗性治疗开始之后六天(观察3)，杀真菌剂治疗试区之间的病害侵袭强度没有显著差异。与对照治疗相比，杀真菌剂治疗的病害侵袭强度要低得多。然而，从所有杀真菌剂治疗中可以看出，预防性BPA056杀真菌剂治疗(时间A)具有最低的病害强度值。
表4：使用根据本发明的实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物及治疗方案对稻作稻热病侵袭的平均强度(％)的影响(n＝3)*
*经由邓氏多距检定(Duncan′s Multiple Range Test)，按5％的显著性水平，同一纵行中标有相应字母的值未显示出显著性差异。
每次观察时出现的损害强度均会增加。表4中的观察结果表明，BPA056治疗中损害强度的增加在随后的每次观察中均非常低。与对照治疗相比，这是不同的，在对照治疗中，侵袭强度的增加非常显著。实验结束时，对照治疗中侦测到的稻热病强度最高，达到25.26％。同时，在BPA056杀真菌剂治疗中，侦测到稻热病强度较低。当与治疗性治疗(时间B)相比时，杀真菌剂BPA056预防性治疗(时间A)是抑制稻热病发展的最佳治疗。根据整体观察结果，可以看出，当与治疗性杀真菌剂施加相比时，预防性杀真菌剂施加总体上具有较低的侵袭强度值。当与预防性参考产品相比时，4l/ha或6l/ha剂量的杀真菌剂BPA056预防性治疗(时间A)提供更好的稻热病治疗。当与治疗性参考产品相比时，4l/ha或6l/ha剂量的杀真菌剂BPA056治疗性治疗(时间B)提供更好的稻热病治疗。
表5：使用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物及治疗方案在最后一次观察时(第68天)对稻作稻热病的功效水平
治疗 功效水平(％)
未经治疗 0
预防性参考产品 84.27
治疗性参考产品 77.10
BPA056(时间A)2l/ha 83.95
BPA056(时间A)4l/ha 94.55
BPA056(时间A)6l/ha 95.35
BPA056(时间B)2l/ha 73.02
BPA056(时间B)4l/ha 82.10
BPA056(时间B)6l/ha 84.45
杀真菌剂的有效性水平是根据其功效水平的值来量测的。当杀真菌剂的功效水平超过50％时，其被认为可有效控制病害。杀真菌剂BPA056的功效水平可见于表5中。基于功效水平的计算，已知所有测试的剂量均能有效控制水稻稻热病。杀真菌剂BPA056以6l/ha的剂量进行预防性治疗，得到95.35％的最高功效水平值，可有效控制稻热病。尽管如此，其他测试剂量亦显示出超过50％的功效水平值。因此，此类剂量亦被认为在控制稻热病方面有效。
使用表示本发明的组合物的植物毒性
植物毒性意谓由于施加杀真菌剂而对植株造成的损害症状，即使该杀真菌剂已按照推荐的程度施加。根据对试验试区水稻作物外观的观察结果，未发现因施加BPA056而引起的植物毒性症状。在用不同剂量及治疗方案的BPA056治疗的试区上没有观察到植物毒性。
使用表示本发明的组合物对稻米产量的影响
表6中提供根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)以及比较组合物及治疗方案的施加对稻米产量的影响。BPA056的使用能够抑制由稻作稻热病引起的产量损失。所有杀真菌剂治疗的收获糙米(收获的干粮或GKP)的平均结果均高于对照治疗。
剂量为6l/ha的预防性治疗下的BPA056治疗获得的GKP最高，量为21.59kg/试区。此产量与其他治疗的结果显著不同。14.42kg/试区量的对照治疗的GKP结果与BPA056治疗有显著差异。BPA056治疗与对照治疗之间的GKP结果的差异证明BPA056的施加能够维持产量。
表6：使用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物及治疗方案对稻米产量的影响(第89天)
治疗 平均干稻谷(kg/试区)(n＝3)*
未经治疗 14.24a
预防性参考产品 20.96cde
治疗性参考产品 18.08b
BPA056(时间A)2l/ha 20.43cde
BPA056(时间A)4l/ha 21.21de
BPA056(时间A)6l/ha 21.59e
BPA056(时间B)2l/ha 18.52b
BPA056(时间B)4l/ha 19.33bc
BPA056(时间B)6l/ha 19.67bcd
*根据邓氏多距检定，按5％的显著性水平，同一纵行中标有相应字母的值未显示出显著性差异。
结论
-将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作(具有预防性及治疗性治疗方案)能够以高于50％的功效水平抑制稻作稻热病的发展。
-与治疗性治疗相比，当治疗是预防性治疗时，将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作更有效(例如更高的功效水平)。
-与对照治疗相比，将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作(具有预防性及治疗性治疗方案)能够抑制稻米产量损失。
-与治疗性治疗相比，当治疗是预防性治疗时，将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作得到更高的稻米产量。
-预防性施加包含天竺葵酸胆碱的组合物是控制稻作稻热病的最佳治疗方案。
-当与预防性参考产品相比时，以4l/ha或6l/ha的剂量预防性施加包含天竺葵酸胆碱的组合物提供更好的稻热病治疗(亦即稻热病的强度更低且功效更好)
-当与治疗性参考产品相比时，以4l/ha或6l/ha的剂量治疗性施加包含天竺葵酸胆碱的组合物提供更好的稻热病治疗(亦即稻热病的强度更低且功效更好)。
-将包含天竺葵酸胆碱的组合物以所有测试剂量(0.21％、0.42％或0.63％(w/v)天竺葵酸胆碱)施加于稻作(具有预防性及治疗性治疗方案)，不会对稻作造成植物毒性症状。
实例2：根据本发明的一个实施例使用包含天竺葵酸胆碱的组合物对稻作纹枯病的田间功效测试
材料与方法
本实验所指的田间试验均是在田间条件下进行的实验性测试。测试地点：BojongTerong Sub-Village，Palabuan Village，Ujungjaya District，Sumedang Regency，WestJava。
试验使用了Inpari 32水稻品种或试验地点周边其他常用且易感染纹枯病(立枯丝核菌)的品种。
使用无害虫且无病害的水稻种子。肥料的施加按照当地的建议进行。植株维护以最佳方式进行，以达到试验的目的。
使用播种后21天的幼苗。每个种植孔的种子量为2-3粒。根据印度尼西亚农民的习惯，且基于杀虫剂委员会的批准，一块试区的尺寸为10m×10m大小，每块试区观察的样品植株数目为25丛，且试区之间的距离是宽50cm的田埂。种植日期自第0天开始。
试区布局
随机完全区组设计，有9种治疗方案，如表7中所提供，且有三个重复。简而言之，表7中报导了9种不同的治疗方案。每种治疗方案在三个不同的试区(重复)上进行。每个试区的尺寸为10m×10m。试区根据随机完全区组设计进行分布。
用水量：400L/ha。接触剂量是组合物在喷雾溶液中的最终浓度。举例而言，Antracol 70以最终浓度1kg/ha施加。以g/L喷雾溶液表示：1000g/400L＝2.5g/L。
包含天竺葵酸胆碱的组合物(称为「BPA 056」)的浓度为42％(w/v)天竺葵酸胆碱或每100mL组合物42g天竺葵酸胆碱或每公升420g(亦即0.42kg)。喷雾溶液中天竺葵酸胆碱的浓度为：2L组合物×0.42kg天竺葵酸胆碱/L组合物＝0.84kg天竺葵酸胆碱；4L组合物×0.42L天竺葵酸胆碱/L组合物＝1.68kg天竺葵酸胆碱；或6L组合物×0.42L天竺葵酸胆碱/L组合物＝2.52kg天竺葵酸胆碱。
因此，喷雾溶液中天竺葵酸胆碱的浓度(亦即活性成分接触剂量)为0.84kg/400L＝0.21kg/100L＝210g/100L＝2.10g/L＝0.21g/100ml＝0.21％(w/v)；1.68kg/400L＝0.42g/100ml＝0.42％(w/v)；或2.52kg/400L＝0.63g/100ml＝0.63％(w/v)。
活性成分的接触剂量对于预防性参考产品：700g/ha；对于治疗性参考产品：60g/ha亚托敏及37.5g/ha待克利；对于BPA056 2l/ha：0.84kg/ha；对于BPA056 4l/ha：1.68 kg/ha；对于BPA056 6l/ha：2.52kg/ha。
表7：在测试不同组合物及治疗方案对控制稻作纹枯病(丝核菌属)的功效的试验中所测试的组合物、剂量及治疗时间
数据评估
目标害虫对植株损害的数据评估以及作物产量数据根据使用的实验设计进行分析，经治疗及对照植株的差异水平为5％。
施加的方式及手段
教导农民如何使用背负半自动高压400l/ha或基于校准的杀真菌剂喷雾机应用。
施加的时间及次数
对于时间A：施加是预防性施加，在症状出现之前施加。
对于时间B：施加是治疗性施加。若在每个试区开始出现侵袭症状且强度仍然很轻(小于5％)，则进行第一次治疗性施加。
施加间隔：以1周的间隔进行施加。最晚在收获之前2周内进行至少5次施加(在方案治疗/SOP中)，但根据田间条件，所进行的施加次数不同。这是由于更快地出现了侵袭症状，因此对于预防性施加，可仅进行2次。第一次施加是在植株为29DAS时进行的。对于治疗性施加，仅进行4次施加，这是由于即将进入收获阶段的植株状况所致。施加时间呈现于表7中。
功效标准
若试验开始时病害分布相对均匀分布，则功效标准以病原体对植株的损害程度为依据。但是，若在试验开始时，试区之间的作物损害程度不均匀，则根据病害进展确定功效标准。这可以经由(治疗前一天)耕地观察的变异数分析结果看出。
所测试的杀真菌剂的功效水平预计为≥50％，使用以下公式由最后的观察结果计算得到：
功效水平＝(ISK-ISP)(ISK)-1×100％
其中：ISK＝对照中病害侵袭强度(没有杀真菌剂)；ISP＝杀真菌剂治疗中病害侵袭强度。
观察结果
在试验中，对整个试区进行了治疗(试区尺寸为10m×10m)，但对每个试区的25个稻丛进行了病害评估。在每个实验中，系统地选择了25丛。
立枯丝核菌对植株的危害程度按以下公式计算：
其中：I＝作物损害强度；n＝每个侵袭规模中的分蘖数目；v＝每个侵袭类别的侵袭规模值；V＝指定的最高侵袭规模值；N＝观察到的分蘖总数。
立枯丝核菌的侵袭规模如下确定：
0＝无侵袭；1＝叶片损伤的早期症状；3＝第一个及第二个穗损伤超过25％的症状；5＝第一个、第二个及第三个穗损伤超过25％的症状；7＝所有穗损伤超过25％的症状；9＝所有分蘖均腐烂。
观察时间
对于所有治疗方案，第一次观察是在第一次预防性施加之后6天进行的。每隔一周进行进一步的观察。观察时间呈现于表8。
结果与讨论
使用根据本发明的一个实施例的组合物对稻作纹枯病强度的影响
该测试由两种治疗方案组成，亦即预防性治疗及治疗性治疗。在第一次观察时，仍然看不到病害侵袭的症状，可以看出病害强度值为0％(表8)。在第二次观察时，病害的症状开始出现，因此没有进行进一步的预防性施加。
表8中的数据显示，包含天竺葵酸胆碱之组合物(称为「BPA056」)的施加降低了纹枯病的强度，因为与对照相比，所有BPA 056治疗均产生了显著不同的结果。在实验过程中，与对照治疗相比，用BPA 056治疗(尤其在高剂量下)的纹枯病的强度是较低的。这表明施加包含天竺葵酸胆碱的组合物能够抑制稻作纹枯病的发展。
表8：使用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物及治疗方案对稻作纹枯病平均强度(％)的影响(n＝3)*
*根据邓氏多距检定，在5％的显著性水平下，同一纵行中标有相同字母的值未显示出显著性差异。
随着时间的推移(随着植株的年龄)，纹枯病的严重程度增加。在最低剂量的BPA056的测试中，以及在比较及对照杀真菌剂治疗中，病害强度出现了高增加。在用最低剂量(2L/ha)的BPA 056治疗时观察到纹枯病的症状及穗变空。在比较及对照治疗中观察到严重纹枯病的症状及穗变空。该病害的发展主要发生在植株成熟时。
在不同剂量及施加时间的治疗方案中，预防性施加最高剂量6l/ha的BPA056显示出最低的病害强度(表8)。自第二次至最后一次观察，预防性施加最高剂量6l/ha的BPA 056所获得的结果与预防性施加4l/ha剂量没有统计学差异，亦没有显著差异。在最后一次观察时，所有BPA056治疗中的纹枯病强度与对照治疗显著不同。
1.31％的最低强度发生在预防性施加的6l/ha治疗的最后一次观察中。与在最后一次观察中达到13.48％的对照治疗中的强度相比，预防性施加最高剂量6l/ha的BPA056在最后一次观察中获得的最低强度在统计学上不同且显著不同。所有剂量水平的BPA056均未在所测试稻作中引起植物毒性症状。
使用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物对抗稻作纹枯病的功效
BPA056在抑制纹枯病方面的功效显示出很好的效果。在以4l/ha及6l/ha的剂量进行预防性及治疗性施加以及以2l/ha的剂量进行预防性施加的情况下，所施加的BPA056治疗获得了超过50％的功效水平。然而，相同的结果不适用于在治疗性施加下2l/ha剂量的BPA056，其中最后一次观察时的功效水平低于50％(表9)。在6l/ha的预防性剂量下时获得了最高功效水平，达到90.31％。
表9：使用根据本发明实施例的组合物(「BPA056」)及比较组合物对抗稻作纹枯病的功效水平(第70天)
治疗 功效水平(％)
未经治疗 0
预防性参考产品 57.58
治疗性参考产品 50.53
BPA056(时间A)2l/ha 52.51
BPA056(时间A)4l/ha 87.39
BPA056(时间A)6l/ha 90.31
BPA056(时间B)2l/ha 32.98
BPA056(时间B)4l/ha 76.91
BPA056(时间B)6l/ha 76.91
使用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物对抗稻作纹枯病对稻米产量的影响
施加BPA056对稻米产量的影响呈现于表10中。使用BPA056能够减少水稻纹枯病造成的产量损失。所有实验试区的平均干稻谷收成与对照治疗显著不同(表10)。
在以6l/ha的剂量预防性施加BPA056的情况下获得最高产量，得到20.24kg/试区的平均产量，此与4l/ha的预防性剂量得到的20.13kg/试区的平均产量没有统计学差异(表10)。此外，在治疗性施加下BPA056的两种最高剂量(4l/ha及61/ha)的产量分别为19.73kg/试区及19.93kg/试区。因此，根据本发明的实施例将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作能够抑制纹枯病并减少由该病害引起的稻米产量损失。
表10：使用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物及治疗方案对稻米产量的影响(第96天)
治疗 平均干稻谷(kg/试区)(n＝3)*
未经治疗 14.36a
预防性参考产品 18.53bcd
治疗性参考产品 17.41b
BPA056(时间A)2l/ha 18.44bc
BPA056(时间A)4l/ha 20.13e
BPA056(时间A)6l/ha 20.24e
BPA056(时间B)2l/ha 17.29b
BPA056(时间B)4l/ha 19.73cde
BPA056(时间B)6l/ha 19.93de
*根据邓氏多距检定，在5％的显著性水半下，同一纵行甲标有相应字母的值未显示出显著性差异。
结论
-包含天竺葵酸胆碱的组合物在稻作上的预防性施加在所有测试剂量(0.21％、0.42％或0.63％(w/v)天竺葵酸胆碱)下在抑制稻作纹枯病发病率方面均有效，功效水平超过50％。
-包含天竺葵酸胆碱的组合物以41/ha(0.42％(w/v)天竺葵酸胆碱)及6l/ha(0.63％(w/v)天竺葵酸胆碱)的剂量在稻作上的治疗性施加在抑制稻作纹枯病发病率方面有效，功效水平超过50％。
-与治疗性治疗相比，当治疗是预防性治疗时，将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作对纹枯病更有效(例如更高的功效水平)。
-与对照治疗相比，将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作(具有预防性及治疗性治疗方案)在所有测试剂量下均减少了由于纹枯病引起的稻米产量损失。
-当与预防性参考产品相比时，以41/ha或6l/ha的剂量预防性施加包含天竺葵酸胆碱的组合物提供对纹枯病的更好治疗(亦即，最后一次观察时的纹枯病强度更小且功效更好)。
-当与治疗性参考产品相比时，以4l/ha或61/ha的剂量治疗性施加包含天竺葵酸胆碱的组合物提供对纹枯病的更好治疗(亦即，最后一次观察时的纹枯病强度更小且功效更好)。
-与治疗性治疗相比，当针对纹枯病的治疗是预防性治疗时，将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作得到更高的稻米产量。
-包含天竺葵酸胆碱的组合物的预防性施加是控制稻作纹枯病的最佳治疗方案。
-将包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于稻作抗纹枯病(具有预防性及治疗性治疗方案)在所有测试剂量下均不会导致稻作的植物毒性症状。
实例3：根据本发明一个实施例的用于治疗稻作纹枯病的方法
建立了一项田间试验，以测试不同组合物在泰国两个地点控制水稻纹枯病(立枯丝核菌)的功效：L1：Bang Kham，Sriprachan，Suphanburi；及L2：Don Pru，Sriprachan，Suphanburi。在第1次喷雾之前14天进行病害接种。
在地点L1，实验设计为随机完全区组(RCB)；不同治疗的数目：表11中提供的六种；重复数目：4；试区尺寸：6×5m/试区；水稻品种：PTT1；及喷雾体积：312.5L/ha。一种治疗有4个重复，且一个重复有10份取样。
包含天竺葵酸胆碱的组合物(称为「BPA 056」)的浓度为42％(w/v)天竺葵酸胆碱或每100mL组合物42g天竺葵酸胆碱或每公升420g(亦即0.42kg)。喷雾溶液中天竺葵酸胆碱的浓度为(每公顷)：2L组合物×0.42kg天竺葵酸胆碱/L组合物＝0.84kg天竺葵酸胆碱；3L组合物×0.42L天竺葵酸胆碱/L组合物＝1.26kg天竺葵酸胆碱；或4L组合物×0.42L天竺葵酸胆碱/L组合物＝1.68kg天竺葵酸胆碱。
表11：在测试不同组合物及治疗方案在泰国的地点L1及L2控制稻作纹枯病(立枯丝核菌)的功效的试验中所测试的组合物、剂量及治疗时间
数据评估包括在第1次喷雾之前、在第2次喷雾之前、在第2次喷雾之后7天、第2次喷雾之后2周、在第2次喷雾之后3周及在收获之前2周的所感染症状的长度(cm)与植株长度(cm)的百分比。表12提供在地点L1处数据评估的时间的概述。
病害百分比计算如下：
病害(％)＝[感染症状长度(cm)/植株长度(cm)]×100
表12：在地点L1 Bang Kham的稻作中的试验的数据评估时间
水稻阶段 数据评估 缩写
播种 无
61DAS 纹枯病接种
75DAS 在第1次喷雾之前/喷雾#1 BA#1
82DAS 在第2次喷雾之前/植物毒性/喷雾#2 BA#2
89DAS 在第2次喷雾之后7天/植物毒性 7DAA#2
96DAS 在第2次喷雾之后2周/植物毒性 14DAA#2
103DAS 在第2次喷雾之后3周/植物毒性 21DAA#2
106DAS 在收获之前2周/植物毒性 2WBH
120DAS 产量评估
DAS：播种后的天数
表13说明了在地点L1用2000ml/ha、3000ml/ha及4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)治疗稻作之后以及用市售参考产品(625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑)治疗之后的病害百分比。表13中的结果表明，与未经治疗的稻作相比，3000及4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)显示出对稻作纹枯病的优异控制。3000及4000ml/ha的表示本发明的组合物亦优于市售参考产品(625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑)。2000ml/ha的表示本发明的组合物亦显示出对稻作纹枯病的可接受控制。
在第2次喷雾之前、在第2次喷雾之后7天、在第2次喷雾之后2周、在第2次喷雾之后3周及在收获之前2周评估时，所有治疗后的稻作均未观察到植物毒性。
表13：用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA 056」)及比较组合物治疗对地点L1的稻作病害百分比(％)的影响(n＝40)*
*病害％：来自4个重复及每个重复10份取样的病害％平均值
**根据标准参数统计检定，同一纵行中标有相同字母的值未显示出显著性差异
在地点L2，实验设计为随机完全区组(RCB)；不同治疗的数目：表11中提供的六种；重复数目：4；试区尺寸：6×5m/试区；水稻品种：PTT1；及喷雾体积：312.5L/ha。一种治疗有4个重复，且一个重复有10份取样。
数据评估包括在第1次喷雾之前、在第2次喷雾之前、在第2次喷雾之后7天、第2次喷雾之后2周、在第2次喷雾后之3周、在收获之前2周的所感染症状的长度(cm)与植株长度(cm)的百分比。表14提供在地点L2处数据评估的时间的概述。
表14：在地点L2 Don Pru的稻作中的试验的数据评估时间
水稻阶段 数据评估 缩写
播种 无
56DAS 病害接种
70DAS 在第1次喷雾之前/喷雾#1 BA#1
77DAS 在第2次喷雾之前/植物毒性/喷雾#2 BA#2
84DAS 在第2次喷雾之后7天/植物毒性 7DAA#2
91DAS 在第2次喷雾之后2周/植物毒性 14DAA#2
98DAS 在第2次喷雾之后3周/植物毒性 21DAA#2
106DAS 在收获之前2周/植物毒性 2WBH
120DAS 产量评估
DAS：播种后的天数
表15说明了在地点L2用2000ml/ha、3000ml/ha及4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)治疗稻作之后以及用市售参考产品(625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑)治疗之后的病害百分比。表15中的结果表明，与未经治疗的稻作相比，3000及4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)显示出对稻作纹枯病的优异控制，并且亦优于市售参考产品(625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑)。2000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)亦显示出对稻作纹枯病的可接受控制。
在第2次喷雾之前、在第2次喷雾之后7天、在第2次喷雾之后2周、在第2次喷雾之后3周及在收获之前2周评估时，所有治疗后的稻作均未观察到植物毒性。
表15：用根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物治疗对地点L2的稻作纹枯病百分比(％)的影响(n＝40)*
*病害％：来自4个重复及每个重复10份取样的病害％平均值
**根据标准参数统计检定，同一纵行中标有相同字母的值未显示出显著性差异
实例4：根据本发明的一个实施例的用于增加稻作的稻米产量的方法
如实例3中所述的田间试验在泰国的两个地点进行：L1：Bang Kham，Sriprachan，Suphanburi；及L2：Don Pru，Sriprachan，Suphanburi。
收获时，稻米产量按如下确定：
1)以kg/试区为单位的产量(亦即3m×3m＝9m2)。对每个试区的中心部分(9m2)进行收获。
2)以kg/rai为单位的产量(亦即1600m2)
3)以kg/ha为单位的产量(亦即1600m2×6.25)
表16说明了在对稻作施加2000ml/ha、3000ml/ha及4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)及市售参考产品(625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑)之后，在地点L1的产量。结果表明，与未经治疗的稻作相比，4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)提供优异的稻米产量，并且亦优于625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑。与未经治疗的稻作相比，2000及3000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)仍然显示出高的稻米产量。
表16：在地点L1施加根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物之后的稻作产量(n＝40)*
编号 治疗 比率 产量(kg/试区) 产量(kg/rai) 产量(kg/ha)
1 BPA056 2000ml/ha 5.58 991.11 6194.44
2 BPA056 3000ml/ha 5.55 986.67 6166.67
3 BPA056 4000ml/ha 5.83 1035.56 6472.22
4 维利霉素3％SL 625ml/ha 5.53 982.22 6138.89
5 三环唑 750g/ha 5.28 937.78 5861.11
6 未经治疗 - 5.03 893.33 5583.33
*严量：来目4个重复及每个重复10份职样的严量半均值
表17说明了在对稻作施加2000ml/ha、3000ml/ha及4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)及市售参考产品(625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑)之后，在地点L2的产量。结果表明，与未经治疗的稻作相比，3000及4000ml/ha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)提供优异的稻米产量，并且优于625ml/ha的维利霉素3％SL及750g/ha的三环唑。与未经治疗的稻作相比，2000m1lha的表示本发明的组合物(「BPA 056」)仍然显示出高的稻米产量。
表17：在地点L2施加根据本发明实施例的包含天竺葵酸胆碱的组合物(「BPA056」)及比较组合物之后的稻作产量(n＝40)*
*产量：来自4个重复及每个重复10份取样的产量平均值
**根据标准参数统计检定，同一纵行中标有相同字母的值未显示出显著性差异

Claims (30)

1.一种使稻作的稻米产量相对于未经治疗的稻作的稻米产量增加的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
2.如权利要求1的方法，其中该稻作选自由以下各项组成的组：水稻(Oryza sativa)、西非栽培稻(Oryza glaberrima)、澳洲稻(Oryza australiensis)、巴司稻(Oryzabarthii)、短花稻(Oryza brachyantha)、双弧稻(Oryza coarctata)、艾氏稻(Oryzaeichingeri)、大颖稻(Oryza grandiglumis)、阔叶稻(Oryza latifolia)、长颖稻(Oryzalongiglumis)、长药稻(Oryza longistaminata)、梅氏稻(Oryza meyeriana)、微粒稻(Oryza minuta)、新喀里多尼亚稻(Oryza neocaledonica)、亚洲稻(Oryza officinalis)、东非野生稻(Oryza punctata)、立特来稻(Oryza ridleyi)、宿根稻(Oryza rufipogon)、史氏稻(Oryza schlechteri)、沼生菰(Zizania palustris)、水生菰(Zizania aquatica)、得克萨斯菰(Zizania texana)、菰(Zizania latifolia)及丛集野稻(Porteresiacoarctata)；优选地，其中该稻作是水稻；更优选，其中该稻作是籼稻(Oryza sativaindica)或粳稻(Oryza sativa japonica)。
3.如权利要求1或2的方法，其中该组合物是水性组合物。
4.如权利要求1至3中任一项的方法，其中该组合物是可喷雾液体或浓缩物。
5.如权利要求1至4中任一项的方法，其中该组合物包含在0.001％(w/v)与70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
6.如权利要求1至5中任一项的方法，其中该组合物是浓缩物，其包含在5.0％(w/v)与70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱、优选在10％(w/v)与60％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
7.如权利要求1至5中任一项的方法，其中该组合物是可喷雾液体，其包含在0.001％(w/v)与5.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱、优选在0.1％(w/v)与2.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱，更优选在0.1％(w/v)与1.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
8.如权利要求1至7中任一项的方法，其中该组合物进一步包含一种或多种助剂，诸如溶剂、载体、表面活性剂、黏着剂、防冻剂、增稠剂、缓冲剂、消泡剂、抗氧化剂、防腐剂、芳香剂或着色剂。
9.如权利要求1至8中任一项的方法，其中该方法包括将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作的整个地上部分。
10.如权利要求1至9中任一项的方法，其中所述将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地是在该稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之前进行的。
11.如权利要求1至9中任一项的方法，其中所述将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地是在该稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后进行的，诸如其中所述将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地是在该稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后的同一天进行的。
12.如权利要求1至9或11中任一项的方法，其中在该稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，且在该稻热病、纹枯病或其组合的症状的强度为至多25％，诸如至多20％、至多15％、至多10％或至多5％之前，将如本文教导的天竺葵酸胆碱或该组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
13.如权利要求1至12中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱以0.01kg/ha至10.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地；优选地，其中将天竺葵酸胆碱以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
14.如权利要求1至13中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱或该组合物喷雾于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地上。
15.天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物用于使稻作的稻米产量相对于未经治疗的稻作的稻米产量增加的用途。
16.一种预防或控制稻作或其部分上的稻热病、纹枯病或其组合的方法，该方法包括将天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
17.如权利要求16的方法，其中该稻作选自由以下各项组成的组：水稻、西非栽培稻、澳洲稻、巴司稻、短花稻、双弧稻、艾氏稻、大颖稻、阔叶稻、长颖稻、长药稻、梅氏稻、微粒稻、新喀里多尼亚稻、亚洲稻、东非野生稻、立特来稻、宿根稻、史氏稻、沼生菰、水生菰、得克萨斯菰、菰及丛集野稻；优选地，其中该稻作是水稻；更优选地，其中该稻作是籼稻或粳稻。
18.如权利要求16或17的方法，其中该组合物是水性组合物。
19.如权利要求16至18中任一项的方法，其中该组合物是可喷雾液体或浓缩物。
20.如权利要求16至19中任一项的方法，其中该组合物包含在0.001％(w/v)与70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
21.如权利要求16至20中任一项的方法，其中该组合物是浓缩物，其包含在5.0％(w/v)与70％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱、优选在10％(w/v)与60％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
22.如权利要求16至21中任一项的方法，其中该组合物是可喷雾液体，其包含在0.001％(w/v)与5.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱、优选在0.1％(w/v)与2.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱，更优选在0.1％(w/v)与1.0％(w/v)之间的天竺葵酸胆碱。
23.如权利要求16至22中任一项的方法，其中该组合物进一步包含一种或多种助剂，诸如溶剂、载体、表面活性剂、黏着剂、防冻剂、增稠剂、缓冲剂、消泡剂、抗氧化剂、防腐剂、芳香剂或着色剂。
24.如权利要求16至23中任一项的方法，其中该方法包括将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作的整个地上部分。
25.如权利要求16至24中任一项的方法，其中所述将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地是在该稻作或其部分上显现该稻热病、纹枯病或其组合的症状之前进行的。
26.如权利要求16至24中任一项的方法，其中所述将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地是在该稻作或其部分上显现该稻热病、纹枯病或其组合的症状之后进行的，诸如其中所述将天竺葵酸胆碱或该组合物施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地在该稻作或其部分上显现稻热病、纹枯病或其组合的症状之后的同一天进行的。
27.如权利要求16至24或26中任一项的方法，其中在该稻作或其部分上显现该稻热病、纹枯病或其组合的症状之后，且在该稻热病、纹枯病或其组合的症状的强度为至多25％，诸如至多20％、至多15％、至多10％或至多5％之前，将天竺葵酸胆碱或该组合物第一次施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
28.如权利要求16至27中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱以0.01kg/ha至10.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地；优选地，其中将天竺葵酸胆碱以1.0kg/ha至3.0kg/ha的浓度施加于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地。
29.如权利要求16至28中任一项的方法，其中将天竺葵酸胆碱或该组合物喷雾于该稻作、其部分或该稻作的生长所在地上。
30.天竺葵酸胆碱或包含天竺葵酸胆碱的组合物在预防或控制稻作或其部分的稻热病、纹枯病或其组合中的用途。
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