CN116919899A - 一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒及其稳定的皮克林高内相乳液的制备及应用 - Google Patents
一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒及其稳定的皮克林高内相乳液的制备及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种螺旋藻分离蛋白‑单宁酸复合纳米颗粒及其稳定的皮克林高内相乳液的制备及应用，包括，将螺旋藻分离蛋白和单宁酸分别溶于去离子水中，制得螺旋藻分离蛋白溶液以及单宁酸溶液；将螺旋藻分离蛋白溶液与单宁酸溶液混合，超声处理后制备螺旋藻分离蛋白‑单宁酸复合纳米颗粒分散液；将螺旋藻分离蛋白‑单宁酸复合纳米颗粒分散液中加入油相，均质制备螺旋藻分离蛋白‑单宁酸复合纳米颗粒稳定的高内相乳液。本发明的螺旋藻分离蛋白‑单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液的稳定性较高，在2个月的常温储存以及UV照射期间，未出现乳析以及破乳现象，乳液体系生物安全性高。
Description
技术领域
本发明属于药品、化妆品和食品应用领域，具体涉及到一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒及其稳定的皮克林高内相乳液的制备及应用。
背景技术
螺旋藻资源丰富，是一种理想的天然保健食品资源。螺旋藻中蛋白质含量高达70％，每单位总量所含的蛋白质比牛肉高出3倍，被公认为“最佳蛋白质来源之一”。螺旋藻分离蛋白所含氨基酸种类繁多，富含人和动物所必需的赖氨酸、苏氨酸。目前螺旋藻分离蛋白主要具有三方面功能：(1)可作为纯天然的色素，用于食品、化妆品和染料等工业。(2)试剂级藻胆蛋白可制成荧光试剂，应用于医学临床诊断和免疫学及生物工程等研究领域。(3)可制成食品和药品用于医疗保健。目前，已经有一些研究表明，螺旋藻分离蛋白具有一定的乳化能力，但是抗氧化性能不足。
单宁酸是一种食品添加剂，化学式为C76H52O46，为黄色或棕黄色粉末，为收敛剂，能沉淀蛋白质，与生物碱、甙及重金属等均能形成不溶性复合物。除此之外，单宁酸还是一种强抗氧化剂以及UV吸收剂。
由于螺旋藻分离蛋白具有较好的乳化性能，但抗氧化能力和抗UV能力不足，目前，尚无将螺旋藻分离蛋白与单宁酸复配形成复合物用于稳定皮克林高内相乳液的报道。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本发明。
因此，本发明的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液的制备方法，包括，
将螺旋藻分离蛋白和单宁酸分别溶于去离子水中，制得螺旋藻分离蛋白溶液以及单宁酸溶液；
将螺旋藻分离蛋白溶液与单宁酸溶液混合，超声处理后制备螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液；
将螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液中加入油相，均质制备螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的高内相乳液。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液，其中，螺旋藻分离蛋白溶液的浓度为0.5～5wt％，单宁酸溶液的浓度为0.1～5wt％。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述将螺旋藻分离蛋白溶液与单宁酸溶液混合，其中，螺旋藻分离蛋白溶液与单宁酸溶液的质量比为1:0.05～1:3。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述超声处理时间为1～10min。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述油相包括葵花籽油、橄榄油、辛酸癸酸甘油三酯、异十六烷、异十二烷、D5硅油、液体石蜡和角鲨烷。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述高内相乳液的油相体积分数为75％～85％。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述均质时间为1～10min，均质的转速为16000～18000rpm。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述制备方法还包括，
在油相中加入活性物，与螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液混合均质，制备包载活性物的螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液稳定的高内相乳液。
作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述活性物包括姜黄素、β-胡萝卜素、白藜芦醇、柠檬烯和维生素E。
本发明的再一个目的是，克服现有技术中的不足，提供一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液的制备方法制得的高内相乳液。
本发明有益效果：
(1)本发明的螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒的制备工艺简单，所用设备常见，适合工业化生产。
(2)本发明的螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液的稳定性较高，在2个月的常温储存以及UV照射期间，未出现乳析以及破乳现象，同时，螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液体系生物安全性高，即避免了表面活性剂的使用，又复合绿色可持续的发展理念。
(3)本发明的螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液对脂质氧化有优异的抑制作用，油溶性活性物载量高，且对油溶性活性物有优异的保护效果，在食品、化妆品和医药领域展现了良好的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：
图1为本发明实施例2～6中ST-CNP分散液、对比例1和对比例3溶液在24h前后的外观图。
图2为本发明实施例2～6中ST-CNP和对比例1的粒径分布图。
图3为本发明实施例2～6中ST-CNP分散液、对比例1和对比例3溶液的自由基清除率对比图。
图4为本发明实施例2～6和对比例2得到的高内相乳液在常温条件下储存的光学显微镜图。
图5为本发明实施例2～6和对比例2得到的高内相乳液在常温条件下储存58天后的光学显微镜图。
图6为本发明实施例2～6和对比例2得到的高内相乳液在UV照射下储存58天后的光学显微镜图。
图7为本发明实施例2～6和对比例2得到的高内相乳液中MDA随时间变化的浓度变化图。
图8为本发明实施例10～12和对比例4得到的高内相乳液中姜黄素随时间变化的百分含量变化图。
图9为本发明实施例4得到的高内相乳液对人永生化表皮细胞(HaCaT)的细胞毒性结果。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
本实施例中所使用的材料、试剂等，如无特别说明，为从商业途径得到的材料和试剂。
SPI的制备：具体为将螺旋藻按料液比1：30g/mL加入去离子水，使用水浴在40℃下磁力搅拌1h制成悬浊液。冻融10次后超声10min，离心取上清液。上清液过滤后冷冻干燥即得SPI。
ST-CNPs的制备:将SPI和TA分别溶于去离子水中制备SPI溶液和TA溶液。分别调整SPI与TA溶液的质量比，超声处理后得到ST-CNPs分散液，冷冻干燥得到ST-CNPs。
抗氧化能力:
1)ABTS·清除实验：配置2.6mM的过硫酸钾溶液，7.4mM的ABTS溶液，两者等体积混合,在黑暗中放置12h生成ABTS·，稀释至吸光度值为0.7±0.02(λ＝734nm)。分别向96孔板中加入As：20μL不同比例的样品溶液和80μLABTS·稀释液，Ab：20μL不同比例的样品溶液和80μL H2O，Ac：20μL H2O和80μLABTS·稀释液(As是样品组，Ab是空白组，Ac是对照组)，振摇10min充分混匀，在734nm处测量吸光度。ABTS·清除率＝1-(As-Ab)/Ac×100％。
2)DPPH·清除实验：配置0.2mmol/L的DPPH·溶液(溶剂为乙醇)，分别向96孔板中加入As：20μL不同比例的样品溶液和80μL DPPH·溶液，Ab：20μL不同比例的样品溶液加80μL乙醇，Ac：20μL H2O加80μL DPPH·溶液，震荡60s，避光反应30min，在517nm处测量吸光度。DPPH·清除率＝1-(As-Ab)/Ac×100％。
ST-CNPs稳定的高内相乳液的稳定性实验:将制备的ST-CNPs分散液和SPI溶液与油相混合后均质制备高内相乳液。将制备的高内相乳液分别置于常温以及UV照射条件下，定期观察其外观以及拍摄光学显微镜图片。
ST-CNPs稳定的皮克林高内相乳液的应用-脂质抗氧化:将制备的ST-CNPs分散液和SPI溶液与油相混合后均质制备高内相乳液。将制备的高内相乳液分别置于常温以及UV照射条件下，定期(0、10、50和60天)从高内相乳液中取出0.2mL乳液，将0.2mL乳液、4mLTBA试剂和1.8mL去离子水混合，95℃水浴15min后冷却至室温。最后，使用酶标仪测量冷却液在532nm处的吸光度。将吸光度带入标准曲线进行换算，得出高内相乳液中MDA的浓度。
ST-CNPs稳定的皮克林高内相乳液的应用-活性物保护:首先将活性物溶解在油中作为油相，避光搅拌12h，得到含活性物的油溶液。将ST-CNPs分散液和SPI溶液与油溶液混合后均质制备含活性物的高内相乳液。将含活性物的高内相乳液放置在透明玻璃瓶(10mL)中，然后将其放置在室温和UV照射条件中。定期(第0、10、14和58天)从高内相乳液中取100mg乳液，使用1mL无水乙醇将乳液破乳得到混合物。用无水乙醇将混合物继续稀释至合适浓度，然后用酶标仪在425nm处测定吸光度，随后带入标准曲线得到原始浓度，最后计算活性物的剩余百分含量。
ST-CNPs稳定的皮克林高内相乳液的应用-生物安全性:对HaCaT进行培养，待细胞进入对数生长期，用胰蛋白酶消化后利用DMEM培养基分散细胞，并利用血球计数器对细胞进行计数，用DMEM培养基稀释细胞浓度至10×104个/mL；将稀释后的细胞悬液加入到96孔板中，每孔100μL，即1×104个/孔，置于37℃，5％CO2的培养箱中培养24h；移除96孔板中的培养基，用PBS洗涤2次，每孔加入100μL待测样品，每个样品6个复孔；将96孔板置于37℃，5％CO2的培养箱中培养24h；移除板中的培养基，用PBS洗涤2次，每孔加入100μL 0.5mg/mL的噻唑蓝，继续在37℃培养箱中孵育4h；移除孔中的上清液，加入150μL二甲基亚砜，37℃下震荡10min，利用酶标仪测定490nm处的吸光度值，根据吸光度值计算HaCaT细胞的存活率。公式如下：
细胞存活率＝AS/Ab×100％
其中，AS为样品组吸光度值，Ab为空白组吸光度值。
实施例1
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声1min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为0.5wt％,TA的浓度为0.1wt％。
之后，在ST-CNPs分散液中加入GTCC，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例2
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.2wt％。
之后，在ST-CNPs分散液中加入葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例3
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.4wt％。
之后，在ST-CNPs分散液中加入葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例4
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.6wt％。
之后，在ST-CNPs分散液中加入葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例5
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.8wt％。
之后，在ST-CNPs分散液中加入葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例6
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为1.0wt％。
之后，在ST-CNPs分散液中加入葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例7
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声5min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为2.5wt％,TA的浓度为2.5wt％。
之后，在ST-CNPs分散液中加入橄榄油，其中油水体积比为4:1，10000rpm下均质10min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例8
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声10min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为5.0wt％,TA的浓度为5.0wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入异十六烷，其中油水体积比为4:1，10000rpm下均质10min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例9
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声10min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.1wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入液体石蜡，其中油水体积比为85:15，10000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
对比例1
将SPI溶于去离子水中，制得SPI溶液，其中，SPI的浓度为1.0wt％。
实施例2～6中ST-CNP和对比例1的粒径分布图参见图2。
对比例2
将SPI溶于去离子水中，制得SPI溶液，其中，SPI的浓度为1.0wt％。之后，在SPI溶液中加入葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备SPI稳定的高内相乳液。
对比例3
将TA溶于去离子水中，制得TA溶液，其中，TA的浓度为1.0wt％。
实施例2～6中ST-CNP分散液、对比例1和对比例3溶液在24h前后的外观图，参见图1。
实施例2～6中ST-CNP分散液、对比例1和对比例3溶液的自由基清除率对比图，参见图3。
从实施例2-6和对比例2可以得出，如表1和图4所示，浓度为1wt％的SPI稳定的乳液液滴的平均尺寸为37.97μm，在添加了TA之后，液滴的尺寸明显下降。在室温条件下储存了58天之后，所有乳液都没有发生破乳和乳析的现象。
如图5所示，由浓度为1wt％的SPI稳定的高内相乳液的液滴已经发生了明显聚结，液滴由球形变为棒状。ST CNPs中的TA浓度为0.8wt％和1wt％的乳液液滴也发生了比较明显的聚结，而低于此TA浓度的乳液依旧保持稳定，这说明加入适量的TA会提高乳液的稳定性，但过量的TA则不会继续提高乳液的稳定性。
表1由SPI以及ST CNPs稳定的高内相乳液在常温条件下储存58天前后的液滴尺寸变化表
在UV 302nm的紫外暗箱分析仪中同样观察了58天，得到了类似的结果，如表2和图6所示。
综上所述，当ST-CNPs中TA的浓度在0.2-0.6wt％时，形成的乳液具有较好的稳定性。
表2由SPI以及ST CNPs稳定的高内相乳液在UV照射条件下储存58天前后的液滴尺寸变化表
实施例10
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.2wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入含姜黄素的葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例11
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.4wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入含姜黄素的葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例12
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2min后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.6wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入含姜黄素的葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例13
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2分钟后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.6wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入含β-胡萝卜素的GTCC，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例14
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2分钟后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.6wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入含白藜芦醇的GTCC，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
实施例15
将SPI和TA分别溶于去离子水中，制得SPI溶液以及TA溶液，将SPI溶液与TA溶液混合超声2分钟后，得到螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒(ST-CNPs)分散液，其中，SPI的浓度为1.0wt％,TA的浓度为0.6wt％。之后，在ST-CNPs分散液中加入含维生素E的橄榄油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备ST-CNPs稳定的高内相乳液。
对比例4
将SPI溶于去离子水中，制得SPI溶液，其中，SPI的浓度为1.0wt％。之后，在SPI溶液中加入含姜黄素的葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备SPI稳定的高内相乳液。
对比例5
将TA溶于去离子水中，制得TA溶液，其中，TA的浓度为1.0wt％。之后，在TA溶液中加入葵花籽油，其中油水体积比为3:1，16000rpm下均质2min制备TA稳定的高内相乳液。乳液在24h后出现完全分层现象。
如图7所示。在常温条件下储存60天后，纯葵花籽油中的MDA浓度从23.4μmmol/kg油增加到99.5μmmol/kg油，由浓度为1wt％的SPI溶液稳定的高内相乳液中MDA的浓度为79.3μmmol/kg油，由不同比例的ST CNPs稳定的高内相乳液中MDA的浓度分别为53.6，46.6和45.3μmmol/kg油。这些数据显示，SPI稳定的高内相乳液可以延缓葵花籽油的氧化，引入TA之后延缓油脂氧化的效果明显提高，TA的量越多，延缓效果越明显。在UV照射条件下，观察到了类似的现象。但是，与常温下储存有所不同的是，UV照射之后，纯葵花籽油中的MDA浓度明显上升，说明在紫外条件下油脂氧化的速度更快。由于TA的紫外吸收能力以及抗氧化能力非常高，因此ST-CNPs稳定的高内相乳液对油脂保护的效果非常明显。
如图8所示，在常温条件下储存58天后，纯葵花籽油中的姜黄素的含量降为原来的53.73％，由浓度为1wt％的SPI溶液稳定的高内相乳液中姜黄素的含量降为原来的56.61％，由不同比例的ST-CNPs稳定的高内相乳液中姜黄素的含量分别降为原来的80.75％，84.16％和85.86％。这些数据显示，SPI稳定的高内相乳液可以延缓姜黄素的降解，引入TA之后延缓姜黄素降解的效果明显提高，TA的量越多，延缓效果越明显。在UV照射条件下，观察到了类似的现象。但是，与常温下储存有所不同的是，UV照射之后，纯葵花籽油中的姜黄素含量明显下降，降为原来的33.67％，说明在UV照射条件下姜黄素降解的速度更快。由于TA的UV吸收能力以及抗氧化能力非常高，因此ST-CNPs稳定的高内相乳液对姜黄素的保护效果非常明显。
如图9所示，本发明设计的高内相乳液具有很好的生物安全性，在样品浓度高达1mg/mL的条件下，对人皮肤细胞仍无明显毒性。
本发明首次使用螺旋藻蛋白与单宁酸复合纳米粒子作为高内相乳液的稳定剂，并包埋活性物。通过调节螺旋藻蛋白浓度、螺旋藻蛋白与单宁酸质量比、油相体积、油相种类等，考察了高内相乳液的稳定性，抗脂质氧化和活性物保护效果。以上结果所示，相比单纯的SPI，使用了ST-CNPs粒子稳定的乳液无论在稳定性、抗脂质氧化还是活性物保护方面都展现出了更加优异的性能。同时，此方法稳定的乳液的载量大，包封率高，且此乳液载体体系具有良好的生物相容性，是一个有潜力的生物活性物递送体系。
本发明中加入单宁酸，乳液的抗氧化效果会更好，但是没有预料到可以改善乳液自身的稳定性(以往都是用疏水的蛋白加入亲水的单宁酸，改善颗粒的亲水性，改进了颗粒的乳化效果；现在用的蛋白非常亲水，乳化效果已经很好，单宁酸也是亲水的，而且单宁酸不能降低油水界面张力，不能乳化乳液，所以理论上应该不会改善乳液稳定性)。除了常温的稳定性外，乳液的光照稳定性也得到了显著的提高，根本无法预料。同时，本发明由于体系优异的稳定性，所有对活性物的保护效果也相比其他技术优异的多，常温两个月储存，活性物损失少于20％。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的范围当中。
Claims (10)
1.一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液的制备方法，其特征在于：包括，
将螺旋藻分离蛋白和单宁酸分别溶于去离子水中，制得螺旋藻分离蛋白溶液以及单宁酸溶液；
将螺旋藻分离蛋白溶液与单宁酸溶液混合，超声处理后制备螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液；
将螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液中加入油相，均质制备螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的高内相乳液。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液，其中，螺旋藻分离蛋白溶液的浓度为0.5～5wt％，单宁酸溶液的浓度为0.1～5wt％。
3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于：所述将螺旋藻分离蛋白溶液与单宁酸溶液混合，其中，螺旋藻分离蛋白溶液与单宁酸溶液的质量比为1:0.05～1:3。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述超声处理时间为1～10min。
5.如权利要求1、2或4中任一所述的制备方法，其特征在于：所述油相包括葵花籽油、橄榄油、辛酸癸酸甘油三酯、异十六烷、异十二烷、D5硅油、液体石蜡和角鲨烷。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述高内相乳液的油相体积分数为75％～85％。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述均质时间为1～10min，均质的转速为16000～18000rpm。
8.如权利要求1、2、6或7中任一所述的制备方法，其特征在于：所述制备方法还包括，
在油相中加入活性物，与螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液混合均质，制备包载活性物的螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒分散液稳定的高内相乳液。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于：所述活性物包括姜黄素、β-胡萝卜素、白藜芦醇、柠檬烯和维生素E。
10.权利要求1～9中任一所述的制备方法制得的螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒稳定的皮克林高内相乳液。
Priority Applications (1)
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| CN202310635705.XA CN116919899A (zh) | 2023-05-31 | 2023-05-31 | 一种螺旋藻分离蛋白-单宁酸复合纳米颗粒及其稳定的皮克林高内相乳液的制备及应用 |
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