CN116832019A - 芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用 - Google Patents
芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116832019A CN116832019A CN202210305499.1A CN202210305499A CN116832019A CN 116832019 A CN116832019 A CN 116832019A CN 202210305499 A CN202210305499 A CN 202210305499A CN 116832019 A CN116832019 A CN 116832019A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bone marrow
- fingolimod
- preparation
- mice
- pp2a
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N fingolimod Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(CCC(N)(CO)CO)C=C1 KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 62
- 229960000556 fingolimod Drugs 0.000 title claims abstract description 61
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 32
- 230000004048 modification Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 238000012986 modification Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 claims abstract description 32
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 20
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 4
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 2
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 108700012434 CCL3 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000000013 Chemokine CCL3 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 claims description 2
- 101710139422 Eotaxin Proteins 0.000 claims description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 claims description 2
- -1 INF-gamma Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 claims description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims description 2
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 claims description 2
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 2
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 claims description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 claims description 2
- 101710151805 Mitochondrial intermediate peptidase 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 59
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 abstract description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 abstract description 2
- 101000741929 Caenorhabditis elegans Serine/threonine-protein phosphatase 2A catalytic subunit Proteins 0.000 description 37
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 27
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 12
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 12
- 230000008859 change Effects 0.000 description 12
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 11
- QNDVLZJODHBUFM-WFXQOWMNSA-N okadaic acid Chemical compound C([C@H](O1)[C@H](C)/C=C/[C@H]2CC[C@@]3(CC[C@H]4O[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]4O3)=C)[C@@H](O)C[C@H](C)[C@@H]3[C@@H](CC[C@@]4(OCCCC4)O3)C)O2)C(C)=C[C@]21O[C@H](C[C@@](C)(O)C(O)=O)CC[C@H]2O QNDVLZJODHBUFM-WFXQOWMNSA-N 0.000 description 10
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 10
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- VEFJHAYOIAAXEU-UHFFFAOYSA-N okadaic acid Natural products CC(CC(O)C1OC2CCC3(CCC(O3)C=CC(C)C4CC(=CC5(OC(CC(C)(O)C(=O)O)CCC5O)O4)C)OC2C(O)C1C)C6OC7(CCCCO7)CCC6C VEFJHAYOIAAXEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 7
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 229940122454 Protein phosphatase 2A inhibitor Drugs 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 6
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 210000001357 hemopoietic progenitor cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000001167 microscope projection photolithography Methods 0.000 description 4
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 3
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000001400 myeloablative effect Effects 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009097 Phosphorylases Human genes 0.000 description 2
- 108010073135 Phosphorylases Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 2
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 2
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 101150028074 2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100036009 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 1
- 206010065553 Bone marrow failure Diseases 0.000 description 1
- 102100036008 CD48 antigen Human genes 0.000 description 1
- 101100289995 Caenorhabditis elegans mac-1 gene Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000783681 Homo sapiens 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000716130 Homo sapiens CD48 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000633780 Homo sapiens Signaling lymphocytic activation molecule Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101800004021 PP2-A Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 description 1
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 description 1
- 102100029215 Signaling lymphocytic activation molecule Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000008484 agonism Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003995 blood forming stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 230000004640 cellular pathway Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
- A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明属于医药领域，具体涉及芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用。本发明提供的芬戈莫德用在小鼠骨髓移植中，可以显著提高受体小鼠的存活率，促进了供体骨髓细胞在受体小鼠骨髓中的早期定植，显著调节了受体免疫细胞的含量，以及可以显著降低小鼠血清中的炎症因子含量，减轻机体损伤。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及芬戈莫德(FTY720)和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用。
背景技术
蛋白分子的磷酸化和去磷酸化是细胞信号通路的重要分子开关，决定着细胞命运走向和机体表征，而PP2A是一种蛋白磷酸化酶，能够调节细胞中的众多磷酸化酶，从而对多种信号通路产生影响。FTY720是PP2A的小分子有效激动剂，而冈田酸(OA)为抑制剂，现有文献表明FTY720可通过PP2A/AMPK通路诱发骨髓瘤细胞发生铁死亡和自噬，具有广泛的抗肿瘤和抗炎症作用；OA对PP2A具有较强的抑制作用，能够促进肿瘤的发展诱发癌变。PP2A激动剂和抑制剂均能够改变PP2A的活性，影响细胞的磷酸化和去磷酸化水平，进而调控辐照后引起的细胞通路激动状态。
造血干细胞是存在于骨髓中能分化产生红细胞、白细胞、血小板以及各种免疫细胞的原始造血细胞，对机体的造血和免疫系统更替具有重要作用，对于机体造血功能的损伤修复具有重要意义。造血系统是引起辐照损伤小鼠死亡的主要靶向系统之一。在临床上，骨髓移植的成功率受到多种因素影响：如炎症免疫反应和骨髓抑制等，而炎症和骨髓抑制是经典的受蛋白磷酸化/去磷酸化修饰调控的病理效应。目前，骨髓移植成功率不稳定依是影响临床治疗和患者预后生存率的重要瓶颈问题。因此，亟需一种切实有效的辅助制剂促进骨髓移植的效率和作用。
发明内容
有鉴于此，本发明发现PP2A激动剂芬戈莫得(FTY720)对骨髓细胞移植后重建受体小鼠造血系统具有促进作用，主要表现为：FTY-720能够提高受体小鼠在造血重建过程中的生存率；发现FTY-720促进供体骨髓细胞在受体小鼠中的早期定植；FTY-720对造血干细胞骨髓移植后的血象恢复有显著辅助作用；以及FTY-720显著缓解调节造血重建过程中受体小鼠体内炎症因子水平。
具体地，本发明目的在于提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进辐照后机体造血重建的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于减少辐照后机体损伤的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于提高骨髓移植后受体机体生存率的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于调节骨髓移植后造血干细胞分化的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进骨髓移植后受体机体骨髓细胞早期定植的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于降低骨髓移植后受体机体骨髓细胞含量的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进骨髓移植后受体机体免疫细胞增殖的制剂中的应用。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于降低辐照后机体血清中炎症因子含量的制剂的应用。
进一步，所述机体血清中炎症因子包括：IL-5、Eotaxin/IL-1beta、IL-6、GM-CSF、IL-3、IL-13、G-CSF、KC、IL-1alpha、MCP-1、IL-17A、IL-2、IL-10、TNF-alpha、IL-12-p70、INF-gamma、IL-4、IL-9、L-12-p40、RNATES、MIP-1alpha或MIP-1beta中的一种或多种。
具体地，本发明目的在于还提供芬戈莫德在制备或作为用于促进骨髓移植后受体机体骨髓造血干细胞增殖的制剂中的应用。
具体地，上述的所有应用在某些具体实施例中，一般是在受体移植骨髓前进行给药FTY720，给药剂量为10mg/kg。
具体地，上述所有的制剂包括注射制剂、口服制剂或者其他可用于机体的制剂，也可以制作成食品或者饮料类的食品。
本发明中，术语“改构体”指的是改变芬戈莫德的结构(磷酸化修饰，盐酸盐或其他生物电子等排体等)，但是不改变芬戈莫德的药用性质的物质。
本发明有益效果在于
本发明提供的FTY720用在小鼠骨髓移植中，可以显著提高受体小鼠的存活率，以及促进了供体骨髓细胞在受体小鼠骨髓中的早期定植，以及显著促进了受体免疫细胞的含量。
本发明提供的FTY720在小鼠辐照前注射，可以显著降低小鼠血清中的炎症因子含量，减轻机体损伤。
附图说明
图1为小鼠清髓前使用PP2A激动剂(芬戈莫德)能够提高对造血重建小鼠的存活率。
图2为小鼠辐照清髓前给予PP2A激动剂(芬戈莫德)和抑制剂(冈田酸)后进行骨髓移植，检测骨髓移植后小鼠的体重变化情况，黑色正方形表示使用PP2A激动剂(芬戈莫德)，黑色三角形表示使用PP2A抑制剂，黑色圆形表示对照组使用生理盐水处理。
图3为小鼠髓移植后第35天的体重变化情况，“*”表示处理组与对照组体重变化比较差异显著P<0.05。
图4为小鼠给于PP2A激动剂(芬戈莫德)后第5天受体小鼠中供体骨髓的定植情况。
图5为小鼠给于PP2A激动剂(芬戈莫德)骨髓移植后第5天骨髓造血干细胞的含量变化。
图6为鼠给于PP2A激动剂(芬戈莫德)骨髓移植后第35天骨髓造血干细胞的含量变化。
图7为小鼠给于PP2A激动剂(芬戈莫德)骨髓移植后第35天，血小板和血小板积压指数的变化情况。
图8为FTY-720对造血重建小鼠免疫细胞含量的影响，实心圆形表示生理盐水对照组，“*”表示两组之间差异显著P<0.05。
图9为PP2A激动剂对清髓剂量辐照后小鼠血清免疫因子含量的影响，使用10Gy剂量辐照小鼠以及辐照前使用PP2A激动剂(芬戈莫德)后辐照小鼠后第4天小鼠血清检测血清中免疫因子含量的变化，深色表示因子高表达，浅色表示因子低表达，横向表示为样本类型及重复，纵向表示验证因子信息。
其中，图1中，Survival Rate：动物存活率；NC：溶剂对照组；PP2A agnonist：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)；PP2A inhibitor：磷酸酶2A抑制剂(冈田酸)。
其中，图2中，Weight Change ratio(％)：体重变化百分率；NC：溶剂对照组；PP2Aagnonist：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)；PP2A inhibitor：磷酸酶2A抑制剂(冈田酸)。
其中，图3中，Weight Change ratio(％)：体重变化百分率；NC：溶剂对照组；PP2Aagnonist：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)；PP2A inhibitor：磷酸酶2A抑制剂(冈田酸)。
其中，图4中，CD45.1：供体小鼠骨髓细胞的表面标记；Veh：溶剂对照组；PP2Aagnonist：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)。
其中，图5中，％with HSCs：在LSK标记造血干细胞中的占比；Veh：溶剂对照组；PP2A agnonist：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)；LT-HSCs：长期造血干细胞；ST-HSCs：短期造血干细胞；MPPs：多能祖细胞。
其中，图6中，Relative content value：相对含量值；Veh：溶剂对照组；PP2A–IR-BMT：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)预处理的辐射后骨髓移植；IR-BMT：溶剂对照组预处理的辐射后骨髓移植；CD45.1：供体来源的骨髓细胞；LT-HSCs：长期造血干细胞；ST-HSCs：短期造血干细胞；MPP：多能祖细胞。
其中，图7中，Relative content value：相对含量值；Veh：溶剂对照组；PP2A–IR-BMT：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)预处理的辐射后骨髓移植；IR-BMT：溶剂对照组预处理的辐射后骨髓移植；CD45.1：供体来源的骨髓细胞；LT-HSCs：长期造血干细胞；ST-HSCs：短期造血干细胞；MPP：多能祖细胞。
其中，图8中，NC：非照射对照组；Veh：溶剂对照组；PP2A–IR-BMT：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)预处理的辐射后骨髓移植；IR-BMT：溶剂对照组预处理的辐射后骨髓移植；Myeloid:髓系细胞；B lymphocyte：长期造血干细胞；T lymphocyte：短期造血干细胞。
其中，图9中，NC：非照射对照组；Veh：溶剂对照组；PP2A–IR-BMT：磷酸酶2A激活剂(芬戈莫德)预处理的辐射后骨髓移植；IR-BMT：溶剂对照组预处理的辐射后骨髓移植；Myeloid:髓系细胞；NC-IR1-5：溶剂对照辐射小鼠；FTY-IR1-5：芬戈莫德处理的辐射小鼠；NC1-3：溶剂对照非辐射小鼠；FTY1-3：芬戈莫德处理的非辐射小鼠。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明进行说明，但并不是本发明的内容仅局限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1辐照前注射PP2A激动剂能够增加髓移植后的小鼠生存率
使用C57小鼠为骨髓细胞供体，CD45.2基因小鼠为骨髓细胞受体，以10Gy剂量Co源辐照对受体小鼠进行清髓处理，辐照前2小时受体小鼠腹腔注射PP2A激动剂和抑制剂给药；对照组使用生理盐水；激动剂组为FTY720，给药剂量为10mg/kg；抑制剂组为OA，给药剂量为48ug/kg；每组10只小鼠，辐照后6小时以内以每只受体小鼠移植5×106骨髓细胞，具体实施方案为将供体小鼠脱颈处死，取其股骨和胫骨，用1ml注射器冲出骨髓腔中的骨髓，用枪头吹散后使用70um过滤网过滤得到骨髓单细胞悬液，使用红细胞裂解液冰上裂解10min去除红细胞，重悬后调整细胞悬液为5×106个/ml，受体小鼠眼球静脉移植100μl骨髓细胞悬液，移植后观察每组小鼠存活率并绘制生存曲线。结果如图1所示：使用PP2A激动剂组FTY720在辐照前2小时腹腔注射给药受体小鼠存活率为70％，PP2A抑制剂组OA组小鼠存活率为40％，阴性对照组小鼠存活率为40％，死亡时间集中在髓移植后第5-7天。
实施例2辐照前注射PP2A激动剂不影响髓移植后的小鼠体重状态
与实施例1处理方法一致，受体小鼠移植后记录小鼠体重变换情况以及毛发状态，检测PP2A激动剂与抑制剂对移植后受体小鼠生存质量和状态的影响。结果如图2和图3所示，使用PP2A激动的FTY720组体重变化情况与对照组差异不显著，使用PP2A抑制剂OA组体重变化情况显著高于对照组。
实施例3辐照前注射PP2A激动剂对短期和长期造血干细胞含量的影响
与实施例1处理方法一致，分别在移植后第5天，第35天对受体小鼠以及不辐照仅给于小鼠PP2A激动剂FTY720取材，观察PP2a激活剂对小鼠骨髓移植的影响。具体实施方案为：将供体小鼠脱颈处死，取其股骨和胫骨，用1ml注射器冲出骨髓腔中的骨髓，用枪头吹散后使用70um过滤网过滤得到骨髓单细胞悬液，使用红细胞裂解液冰上裂解5min去除红细胞，离心去除上清后，使用CD45.1、CD45.2、Lin、Sca-1、c-Kit、CD150和CD48荧光抗体进行流式染色，检测LT-HSC、ST-HSC、LSK、MPP和CD45.1细胞比例。结果如图4、图5、图6、图7所示，使用PP2A激动剂能够促进供体骨髓细胞在受体小鼠骨髓中的早期定植，调节造血干细胞比例，但对长期骨髓移植后的受体小鼠骨髓细胞比率影响不显著。单独使用PP2a激活剂对小鼠骨髓细胞无显著影响。
实施例4辐照前注射PP2A激动剂对血液免疫细胞比例的影响
与实施例1处理方法一致，受体小鼠移植后在第35天对受体小鼠进行眼球取血，具体实施方案为将供体小鼠眼球摘除，加入肝素钠浸润的离心管，使用红细胞裂解液裂解红细胞，离心后重悬细胞悬液，使用CD45.1、CD45.2、CD3、B220、Gr1和Mac-1流式抗体检测CD45.1(供体)来源的髓系细胞(myeloid cells)、B淋巴细胞和T淋巴细胞的含量。结果如图8所示，使用PP2A激动剂能够显著调节外周血中髓系细胞和B细胞比例。
实施例5辐照前注射PP2A激动剂能够显著降低小鼠血清中的炎症因子含量
以10Gy的辐照剂量处理小鼠，实验组辐照前给予PP2A激动剂，对照组给予生理盐水，同时设定PP2A激动剂直接给药和生理盐水给药不辐照组，检测辐照后第4天取小鼠血清送上海华盈生物医药科技有限公司对其炎症因子含量情况进行检测。结果如图9所示，10Gy辐照后第4天显著提高了炎症因子在血清中的含量水平，但辐照前给予PP2A激动剂后能够显著降低小鼠血清中的炎症因子含量。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，但不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围。
Claims (10)
1.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用。
2.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进辐照后机体造血重建的制剂中的应用。
3.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于提高骨髓移植后受体机体生存率的制剂中的应用。
4.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于调节造血干细胞分化的制剂中的应用。
5.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进骨髓移植后受体机体骨髓细胞早期定植的制剂中的应用。
6.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于降低骨髓移植后受体机体骨髓细胞含量的制剂中的应用。
7.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进骨髓移植后受体机体免疫细胞增殖的制剂中的应用。
8.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于降低辐照后机体血清中炎症因子含量的制剂的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，所述机体血清中炎症因子包括：IL-5、Eotaxin/IL-1beta、IL-6、GM-CSF、IL-3、IL-13、G-CSF、KC、IL-1alpha、MCP-1、IL-17A、IL-2、IL-10、TNF-alpha、IL-12-p70、INF-gamma、IL-4、IL-9、L-12-p40、RNATES、MIP-1alpha或MIP-1beta中的一种或多种。
10.芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进骨髓移植后受体机体骨髓造血干细胞增殖的制剂中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210305499.1A CN116832019A (zh) | 2022-03-25 | 2022-03-25 | 芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210305499.1A CN116832019A (zh) | 2022-03-25 | 2022-03-25 | 芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116832019A true CN116832019A (zh) | 2023-10-03 |
Family
ID=88171224
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210305499.1A Pending CN116832019A (zh) | 2022-03-25 | 2022-03-25 | 芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116832019A (zh) |
-
2022
- 2022-03-25 CN CN202210305499.1A patent/CN116832019A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Panch et al. | Sources of hematopoietic stem and progenitor cells and methods to optimize yields for clinical cell therapy | |
| AU2016204920B2 (en) | Expansion of haemopoietic precursors | |
| RU2756561C2 (ru) | Среда для формирования колоний и её применение | |
| WO2006093857A2 (en) | Method of providing readily available cellular material derived from peripheral blood and a composition thereof | |
| WO2014053418A2 (en) | Method for obtaining mesenchymal stem cells and use thereof | |
| WO2018030448A1 (ja) | 細胞培養用培地、及び細胞培養方法 | |
| JPH10510842A (ja) | 造血細胞の増加方法 | |
| WO1994016715A1 (en) | Selective cell proliferation | |
| WO2024070382A1 (ja) | 微小粒子、ｎｋ細胞活性化剤、ｎｋ細胞の培養方法、活性化ｎｋ細胞の製造方法およびｎｋ細胞の活性化方法 | |
| Piguet et al. | Administration of recombinant interleukin 2 to mice enhances production of hemopoietic and natural killer cells | |
| CN116832019A (zh) | 芬戈莫德和/或其改构体在制备或作为用于促进机体造血重建的制剂中的应用 | |
| EP2331676A2 (en) | Hematopoietic stem cell growth factor | |
| CN114561349A (zh) | Il18，il12，il15处理的间质干细胞所产生的外泌体及抗病毒应用 | |
| JP7003283B2 (ja) | 末梢血から間葉系幹細胞集団を製造する方法及びその使用 | |
| Chen et al. | Platelet‐Derived Mitochondria Attenuate 5‐FU‐Induced Injury to Bone‐Associated Mesenchymal Stem Cells | |
| KR101757530B1 (ko) | 조혈모세포의 세포주기를 조절하는 kai1 단백질 및 이의 용도 | |
| van den Brink et al. | Lak Cells and Autologous Bone Marrow Transplantation: Toward a Cure for Leukemia 1 | |
| Jackson | Hematopoietic stem cell properties, markers, and therapeutics | |
| Balint et al. | Hematopoietic stem cells–from hemobiology to the extracorporeal manipulative viewpoints | |
| TWI656215B (zh) | 自周邊血液製備間質幹細胞群的方法及其用途 | |
| Suter et al. | Cellular Therapy | |
| US20100129329A1 (en) | METHODS FOR USING ALDHbr CELLS TO SUPPLEMENT STEM CELL TRANSPLANTATION | |
| JP2002171967A (ja) | 造血細胞群の体外培養方法 | |
| JP2003289856A (ja) | 造血細胞培養用培地 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |