CN116745293A - 盐和晶体 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及1‑甲基‑1,4,5,10‑四氢吡唑并[3,4‑b][1,5]苯二氮卓游离碱的固体形式，其具有理想的药代动力学特性，例如低吸湿性和改进的热稳定性。这些固体形式包括1‑甲基‑1,4,5,10‑四氢吡唑并[3,4‑b][1,5]苯二氮卓5游离碱和1‑甲基‑1,4,5,10‑四氢吡唑并[3,4‑b][1,5]苯二氮卓游离碱的磷酸盐和L‑酒石酸盐的结晶形式。还描述了包含这些固体形式的药物组合物、药物和试剂盒。还提供了使用这些形式治疗各种疾病、病症和病况的方法。

Description

盐和晶体
相关申请的交叉引用
本申请要求2020年9月7日提交的澳大利亚临时专利申请号2020903196的优先权，其全部内容通过引用并入本文。
发明领域
本发明涉及1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的盐和晶体。
发明背景
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓二盐酸盐在WO2017/004674中被描述为具有类似于催产素激动剂的生物活性，但对正构催产素受体结合位点或正构血管加压素受器结合位点没有表现出显著的结合亲和力。因此，有兴趣开发包含该化合物的药物。
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓具有以下结构:
该化合物也可以称为1-甲基-1,4,5,10-四氢苯并[b]吡唑并[3,4-e][1,4]二氮杂卓。提及1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓和1-甲基-1,4,5,10-四氢苯并[b]吡唑并[3,4-e][1,4]二氮杂卓时，它们在本文中可互换使用。
虽然能够诱导有希望的生物活性，但在1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓二盐酸盐的进一步开发中，发现这种盐形式显示出高吸湿性。对材料的动态蒸汽吸附(DVS)分析表明，相对湿度(RH)高于60％时会发生形态变化，RH低于30％时重量变化是可逆的。虽然仍是一种有用的实验室研究工具，但高吸湿性使二盐酸盐不适合进一步开发。
因此，需要提供1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的替代形式，以便纳入医药产品中。有利的是，与1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓二盐酸盐相比，替代形式将提供在60％RH及以上具有较低吸湿性的材料。
本文可能引用的所有出版物、专利和专利申请通过引用整体并入本文。
在说明书中提及任何现有技术并不意味着承认或暗示本现有技术构成了任何管辖范围内的共同常识的一部分，也不意味着本现有技术可以被本领域技术人员合理地理解、视为相关的和/或与其他现有技术相结合。
发明内容
本发明提供了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓(“本发明化合物”)的固体形式，其具有比先前描述的本发明化合物的药学上可接受的形式(包括本发明化合物的二盐酸盐)更低的吸湿性。与先前研究的化合物形式相比，本文所述的固体形式还可显示出改善的热稳定性，并且在给药后为受试者提供至少基本上等效的本发明的生物可利用化合物。
令人惊讶的是，本发明人已经发现本发明化合物的磷酸和L-酒石酸加成盐以及本发明化合物的游离碱的结晶形式具有这些改进的性质中的一种或多种。
在一个方面，本发明提供了本发明化合物的磷酸加成盐。该磷酸加成盐也可以称为本发明化合物的磷酸盐。
在另一方面，本发明提供了本发明化合物的L-酒石酸加成盐。该L-酒石酸加成盐也可以称为本发明化合物的L-酒石酸盐。
在一些实施方式中，本发明化合物的磷酸盐和/或L-酒石酸盐为结晶形式。
在另一方面，本发明提供了本发明化合物的结晶形式。该结晶形式也可以称为本发明化合物的游离碱的结晶形式。
在另一个方面，本发明提供了本发明化合物的固体形式，通常为结晶形式，选自：
·1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱；
·1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸盐；或
·1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸盐。
本文还描述了使用本发明化合物的这些盐和结晶形式的方法，包括以下方法：
·治疗或预防受试者的反社会行为，和/或
·为受试者的社会行为提供紧急和长期的调节，和/或
·治疗或预防受试者的药物滥用障碍，和/或
·治疗或预防受试者的社交障碍，和/或
·治疗或预防受试者的精神疾病，作为以社交障碍为主要或次要特征的精神疾病治疗的一部分；和/或
·使受试者体重减轻；和/或
·管理受试者的体重；和/或
·抑制受试者对食物的食欲；和/或
·减少受试者对食物的消耗；和/或
·治疗或预防受试者的阿片类药物戒断和/或与阿片类药物戒断相关的症状。
如本文所用，除非上下文另有要求，术语“包含(comprise)”和该术语的变体，例如“包含(comprising)”、“包括(comprises)”和“包含了(comprised)”，并不意味着排除进一步的添加剂、成分、整数或步骤。
必须注意，如本文和所附权利要求中所使用的，单数形式“一”、“一个”和“所述”包括复数引用，除非上下文另有明确规定。因此，例如，对“症状”和/或“至少一种症状”的引用可以包括一种或多种症状，等等。
术语“和/或”可以指“和”或“或”。
名词后面的"(s)"一词是指单数或复数形式，或两者兼而有之。
本发明的各种特征参照某一数值或数值范围进行描述。这些值旨在与各种适当的测量技术的结果相关，因此应被解释为包括任何特定测量技术中固有的误差容限。本文提到的一些数值用术语“约”表示，至少部分地说明了这种变化性。当用于描述值时，术语“约”可表示该值的±10％、±5％、±1％或±0.1％内的量。
本发明的进一步的方面和前述段落中描述的方面的进一步的实施方式将从以下描述中变得显而易见，所述描述通过实施例的方式并参考附图给出。
附图简要说明
图1显示了结晶形式1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的X射线衍射(XRD)图
图2显示了结晶形式1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的热重(TG)图
图3显示了结晶形式1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的差示扫描量热法(DSC)图
图4显示了结晶形式1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的DVS等温图
图5显示了结晶形式1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的DVS质量变化图。
图6显示了结晶形式1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的参考(上)X射线粉末衍射(XRPD)图与实施例1和6中所述的1周稳定性研究后的XRPD图的比较
图7显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓磷酸加成盐的多晶型(磷酸盐形式1)的XRD图
图8显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸加成盐的多晶型(磷酸盐形式1)的TGA/DTA图
图9显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的游离碱(上)、多晶型1(中)和磷酸加成盐形态2(下)的叠加XRD图
图10显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐的结晶形式的XRD图
图11显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐的结晶形式的TGA/DTA图
图12显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐的结晶形式的DSC热谱图(第一次加热)
图13显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐的结晶形式的DVS等温图
图14显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐的结晶形式的DVS质量变化图。
图15显示了雄性斯普拉格道利(Sprague Dawley)大鼠在口服给药本发明化合物(CMPD1)后的平均血浆浓度图，本发明化合物以二盐酸盐(di-HCL)或以磷酸盐形式1(磷酸盐)在盐水基和甲基纤维素的制剂中，以目标剂量5mg/kg给药。所有剂量和浓度均表示为游离碱当量。数据代表平均值±SD(n＝3只动物/组)。
图16显示了通过纳洛酮给药在C57BL/6小鼠中催促羟考酮戒断后治疗组的跳跃频率图表(仅溶媒、羟考酮、羟考酮随后磷酸盐形式1、羟考酮随后本发明化合物的二盐酸盐)(例10的爪震颤结果)。
图17显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸加成盐(磷酸盐形式1)的重量蒸气吸附(GVS)等温图。
图18显示了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸加成盐(磷酸盐形式1)的GVS动力学曲线。
具体实施方式
本发明涉及本发明化合物的盐和/或结晶形式。这些盐和/或结晶形式包括:
·本发明化合物的磷酸加成盐；
·本发明化合物的L-酒石酸加成盐；
·本发明化合物的结晶形式(游离碱)。
总的来说，本发明化合物的上述盐和结晶形式在本文中称为本发明的盐和/或晶体。
本发明的每种盐和/或晶体在保持本发明化合物的生物利用度的同时，出乎意料地发现具有低吸湿性的理想性质。本文所述的盐和/或结晶形式是从18种酸抗衡离子和5种溶剂体系的筛选中具有这些性质的本发明化合物的唯一形式(见实施例1)。
当暴露于具有至少约60％RH、70％RH、75％RH或80％RH的最小相对湿度的环境中时，本发明的盐和/或晶体可以基本上不吸湿。当暴露于最大相对湿度不大于约90％、85％、80％或75％的环境时，本发明的盐和/或晶体可以基本上不吸湿。当暴露于具有从任何这些最小值到任何这些最大值的相对湿度的环境中时，本发明的盐和/或晶体可以是基本上不吸湿性的，前提是所述最小值小于所述最大值。例如，在一些实施方式中，当暴露于约60％至约90％或约75％至约85％的相对湿度的环境时，本发明的盐和/或晶体基本上不吸湿。在约90％RH及以上的相对湿度下，本发明的盐和/或晶体的因水的吸附导致的＝质量增加不超过约2wt％、1.5wt％、1wt％、0.9wt％、0.8wt％、0.7wt％、0.6wt％或0.5wt％。质量的增加可以通过DVS来测量，例如，根据本文所述的任何程序。
本发明的盐和/或晶体也可以在较长的一段时间内基本稳定。例如，在25℃和60％RH下，盐和/或晶体可稳定储存1周、1、2、3、4、5、6个月或更长时间。在加速储存条件下(例如，在40℃、75％RH下)，所述盐和/或晶体也可以稳定储存1周、1、2、3、4、5、6个月或更长时间。在一些实施方式中，在任何这些储存条件下，所述盐和/或晶体储存时保持至少约95％、96％、97％、98％、98.5％或99％的纯度。
本发明的盐和/或晶体可以由通过任何合适的方法制备的1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓制备。1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓及其二盐酸盐的合成先前已经描述，包括WO2017/004674(US11033555)，其通过引用整体并入本文。
在一些实施方式中，本发明的盐和/或晶体由1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓制备，制备方法是通过使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1，2-二胺与甲醛在溶剂中和酸存在下反应，得到1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓。可以使用任何能够介导反应的酸。合适的酸包括乙酸、磷酸等。如下面将进一步讨论的，当在该反应步骤中包括磷酸时，产物可以是本发明化合物的磷酸加成盐。
在一些实施方式中，本发明的盐和/或晶体由1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓制备的，其通过以下步骤制备：
·使1-甲基-1H-吡唑-5-胺和1-氟-2-硝基苯在有机溶剂(通常为四氢呋喃)中，碱(通常为醇盐，如叔丁醇钾)的存在下反应，得到2-(1-甲基-1H-吡唑-5-氨基)-1-硝基苯；
·还原2-(1-甲基-1H-吡唑-5-氨基)-1-硝基苯，通常在钯催化剂(如碳钯)的存在下，在极性溶剂(如乙酸乙酯、乙腈等极性非质子溶剂，或质子溶剂如甲醇等)中，得到N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺；和
·使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛在溶剂中和酸存在下反应，得到1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓。
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸加成盐
在第一方面，本发明提供1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸加成盐。这种盐形式在本文中可以称为本发明的磷酸盐。
本发明的磷酸盐可以是本发明化合物的磷酸氢盐、磷酸二氢盐或磷酸盐。在一些实施方式中，所述磷酸盐是本发明化合物的磷酸二氢盐。
通常，本发明的磷酸盐是结晶的。已经发现，本发明的磷酸盐的结晶形式表现出多晶型，其中鉴定了2种不同的多晶型物，在本文中称为磷酸盐形式1和磷酸盐形态2。还发现，磷酸盐形式1是本发明的磷酸盐的稳定结晶形式，而形式2是不稳定的，并随时间转化为形式1。因此，在一些实施方式中，本发明的磷酸盐以磷酸盐形式1提供。
磷酸盐形式1通过其X射线衍射(XRD)图来表征。磷酸盐形式1的XRD图谱包括在约12°和约18°2θ处的强峰。
另外，磷酸盐形式1可以通过XRD图案中约12°、14°、17.5°、18°、19°、20°、20.8°、22.5°、24°、24.8°、26°、26.5°和27.8°2θ处的峰来表征。
通常，磷酸盐形式1通过图7中所示的XRD图来表征。
磷酸盐形式1附加地或替代地以其熔点为特征。已经发现，磷酸盐形式1的熔点(约200℃)比磷酸盐形态2的熔点高约8℃，这表明其具有更高的结晶度并因此具有更高的稳定性。磷酸盐形式2的DT分析显示从约201℃开始的宽熔融吸热，在206℃时达到峰值，随后立即发生热降解。相反，DT分析表明，磷酸盐形式1从209℃开始发生了较大的吸热熔化转变，在214℃出现峰值。因此，在一些实施方式中，本发明化合物的磷酸盐可具有约200℃的熔点。
本发明化合物的磷酸盐通常是无水晶体。这种晶体形式的无水性质可以通过热重分析确定。
当在环境条件下或在加速储存条件下储存时，本发明的磷酸盐可以保持基本上无水并且纯度水平基本上不变。加速的储存条件可以包括升高的温度(例如40℃或80℃)和/或增加的相对湿度。在一些实施方式中，在高温(例如40℃)和高达约60％RH、70％RH或75％RH的条件下，磷酸盐可在储存时保持基本上无水，例如至少1、2或3周、1、2、3、4、5、6个月或更长时间。通常，磷酸盐在这些储存条件下也将保持稳定，始终保持基本上纯，例如产生最多约2％、1.5％或1％的可通过HPLC检测的降解产物。HPLC可以通过本文所述的任何技术进行。
本发明的磷酸盐可以通过任何合适的方法制备。该方法可涉及磷酸与本发明的化合物在合适的溶剂中的组合。该方法可以在分离的游离碱材料上进行，或者可以在制备本发明化合物的最终合成步骤的一锅法中进行，其在不分离游离碱的情况下形成盐。
进行广泛的溶剂筛选以确定什么条件影响结晶形式-形式1和形态2的形成(参见实施例4)。研究发现除了在高极性溶剂(如水，N-甲基吡咯烷(NMP)和二甲亚砜(DMSO))中，由于盐的溶解性，当静置已经历加热冷却循环的乙酸乙酯、甲基异丁基酮和叔丁基甲基醚的浓溶液时，或在使其在叔丁基甲基醚中成晶时，在大多数条件下得到形式1。当甲酸乙酯(热循环后熟化并静置)，乙酸异丙酯(热循环后静置)，甲基乙基酮(热循环后静置)和氯仿(在热循环后静置，痕量的形态2)时，可以获得形式1和形态2的混合物。
因此，还提供了制备本发明的磷酸盐的方法，包括：
·制备包含1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱、溶剂和磷酸的溶液；和
·分离过量的溶剂和磷酸，得到磷酸盐。
在一些实施方式中，所述方法还包括制备磷酸盐的结晶溶液和最小体积的结晶溶剂以形成结晶溶液。可以使结晶溶液在环境条件下静置和/或冷却和/或浓缩以形成晶体。
在需要形式1的实施方式中，结晶溶剂通常不包含乙酸乙酯、甲基异丁基酮、叔丁基甲基醚、甲酸乙酯、乙酸异丙酯和甲基乙基酮或其组合。在一些实施方式中，所述溶剂还不包含氯仿。
当需要形式1时，结晶溶剂可以选自：1,4-二恶烷、2-丁醇、2-乙氧基乙醇、2-甲基四氢呋喃、2-丙醇、丙酮、乙腈、甲醇、苯甲醚、乙醇、四氢呋喃、乙二醇和水或其组合。
当需要磷酸盐形态2时，结晶溶剂优选为叔丁基甲基醚。
还提供了制备本发明的磷酸盐的方法，该方法包括使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1，2-二胺与甲醛在磷酸存在下在溶剂中反应，得到本发明化合物的磷酸加成盐。
N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛的反应可以在任何合适的溶剂中进行，例如本文所述的任何结晶溶剂。N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛的反应可进一步包括形成N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1，2-二胺和磷酸在溶剂中的溶液，并向溶液中添加甲醛。所述溶液可包含任何合适的溶剂。在一些实施方式中，所述溶剂为水性溶剂。在一些实施方式中，所述溶剂选自：1,4-二恶烷、2-丁醇、2-乙氧基乙醇、2-甲基四氢呋喃、2-丙醇、丙酮、乙腈、甲醇、苯甲醚、乙醇、四氢呋喃、乙二醇和水或其组合。在一些实施方式中，所述溶剂选自：乙腈、水或其组合。溶剂的组合可包含任何合适的组分混合物，例如乙腈和水的2种溶剂混合物，按重量计算，乙腈与水的比例可从约1:1到约2:1。
N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛的反应可在高温升高的温度下进行。在一些实施方式中，反应的温度为约25℃至约50℃、约25℃至约45℃或约35℃至约45℃。在一些实施方式中，该反应的温度可以在约30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44或45℃的温度下进行。反应温度可以是从这些温度中的任何一个到这些温度中的任何其他温度。
N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛的反应可以包括任何合适量的磷酸。通常，在该步骤中，磷酸的量是相对于N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺(因而也是反应产物)约1摩尔当量。在一些实施方案中，提供的磷酸的摩尔量相对于N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺是过量的，例如至少约1、1.05、1.1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5当量或更多。磷酸的摩尔当量可以是从这些值中的任何一个到这些值中的任何其他值，例如，相对于N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺为约1-约5当量的磷酸。
在这些方法中产生的本发明的磷酸盐可以是结晶的，例如磷酸盐形式1。然而，在一些实施方式中，所述方法可进一步包括形成包含磷酸加成盐的结晶溶液的步骤，其可根据本文所述的任何此类步骤进行。
在反应步骤之后，所述方法通常包括分离过量的溶剂和磷酸以得到磷酸盐。在一些实施方式中，所述分离可以通过过滤来实现。
在一些实施方式中，用于制备本发明的磷酸盐的方法可以包括:
·使1-甲基-1H-吡唑-5-胺和1-氟-2-硝基苯在有机溶剂(通常为四氢呋喃)中，碱(通常为醇盐，如叔丁醇钾)的存在下反应，得到2-(1-甲基-1H-吡唑-5-氨基)-1-硝基苯；
·还原2-(1-甲基-1H-吡唑-5-氨基)-1-硝基苯，通常在钯催化剂(如碳钯)的存在下，在极性溶剂(极性非质子溶剂如乙酸乙酯、乙腈等，或质子溶剂如甲醇等)中，得到N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺；和
·使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺在溶剂中磷酸存在下与甲醛反应，得到本发明的磷酸盐。
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐
在第二方面，本发明提供了1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐。这种盐形式在本文中可以称为本发明的L-酒石酸盐。
通常，本发明的L-酒石酸盐以结晶形式提供。结晶形式可以通过XRD表征。因此，在一些实施方式中，L-酒石酸盐以图10中所示的XRD表征。
本发明的L-酒石酸盐可以附加地或可选地以其熔点为特征。在一些实施方案中，本发明的L-酒石酸盐的熔点为约181℃。
本发明的L-酒石酸盐可以是无水晶体。这种晶体形式的无水性质可以通过TGA确定。
本发明化合物的L-酒石酸盐可以保持基本无水，并且当在环境条件下或加速储存条件下储存时，其纯度水平基本不变。加速的储存条件可以包括升高的温度(例如40℃或80℃)和/或增加的相对湿度。在一些实施方式中，在升高的温度(例如40℃)和高达约60％RH、70％RH或75％RH的条件下，L-酒石酸盐可在储存至少一周时保持基本上无水。通常，L-酒石酸盐在这些储存条件下也将保持稳定，始终保持基本上纯，例如产生最多约2％、1.5％或1％的可通过HPLC检测的降解产物。HPLC可以通过本文所述的任何技术进行。
本发明的L-酒石酸盐可以通过任何合适的方法制备。通常，本发明的L-酒石酸盐的制备包括将本发明的化合物暴露于L-酒石酸。
相应地，还提供了制备本发明的L-酒石酸盐的方法，该方法包括:
·制备包含1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱、溶剂和L-酒石酸的溶液；和
·从L-酒石酸盐中分离出过量的溶剂和L-酒石酸。
在一些实施方式中，所述方法还包括制备L-酒石酸盐的结晶溶液和最小体积的结晶溶剂以形成结晶溶液。可以使结晶溶液在环境条件下静置和/或冷却和/或浓缩以形成晶体。
还提供了制备本发明的L-酒石酸盐的方法，该方法包括使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1，2-二胺与甲醛在L-酒石酸存在下反应，得到本发明化合物的L-酒石酸加成盐。
N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛的反应可以在任何合适的溶剂中发生，例如本文所述的任何结晶溶剂。N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛的反应可进一步包括形成N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1，2-二胺的溶液，并向溶液中添加甲醛。所述溶液可包含任何合适的溶剂，例如本文所述的用于形成酒石酸盐的任何结晶溶剂。
在这些方法中制备的本发明的磷酸盐可以是结晶的。然而，在一些实施方式中，所述方法可进一步包括形成包含L-酒石酸加成盐的结晶溶液的步骤，其可根据本文所述的任何此类步骤进行。
在一些实施方式中，用于制备本发明的L-酒石酸盐的方法可以包括:
·使1-甲基-1H-吡唑-5-胺和1-氟-2-硝基苯在有机溶剂(通常为四氢呋喃)中，碱(通常为醇盐，如叔丁醇钾)的存在下反应，得到2-(1-甲基-1H-吡唑-5-氨基)-1-硝基苯；
·还原2-(1-甲基-1H-吡唑-5-氨基)-1-硝基苯，通常在钯催化剂(如碳钯)的存在下，在极性溶剂(极性非质子溶剂如乙酸乙酯、乙腈等，或质子溶剂如甲醇等)中，得到N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺；和
·使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺在溶剂中在L-酒石酸存在下与甲醛反应，得到本发明的L-酒石酸盐。
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的结晶形式
在第三方面，本发明提供了本发明化合物的晶体。该晶体在本文中可以称为本发明的游离碱晶体。
典型地，本发明的游离碱晶体是无水晶体。
本发明的游离碱晶体可以通过其XRD图谱来表征，其如图1所示。另外地或替代地，本发明的游离碱晶体可以通过其熔点来表征，其通过DTA和DSC分析确定为约200℃。
本发明的游离碱晶体可以通过任何合适的方法制备。通常，本发明的游离碱晶体的制备包括将本发明化合物的盐(例如本发明化合物的盐酸盐)暴露于水性碱(例如碳酸氢钠)以中和酸加成抗衡离子，然后用有机溶剂进行液-液萃取，以萃取有机相中的游离碱化合物。
因此，还提供了一种制备1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的结晶形式的方法，包括：
·制备1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的盐酸盐(例如二盐酸盐)和饱和碳酸氢盐水溶液的溶液；和
·使该溶液与有机溶剂接触以从该溶液中萃取1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱。
还提供了一种制备1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的结晶形式的方法，包括：提供1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的溶液，并使1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓结晶，其中所述溶液基本上不含酸。
在这些方法中，1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓可以通过任何合适的方式提供，包括通过合成，包括本文所述的合成方法。
还提供了一种制备1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的结晶形式的方法，包括：使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛在溶剂中在酸存在下反应，然后将反应产物暴露在碱中，并任选地结晶，得到1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的结晶形式。
在一些实施方式中，所述酸为乙酸。
在一些实施方式中，所述碱为水性碱，例如碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、碳酸钾等的水溶液。所述暴露步骤可包括用所述碱对所述反应产物进行多次洗涤。
暴露于碱后的产物可以是结晶形式，或者所述方法可能需要随后的结晶步骤。结晶步骤可包括提供1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的溶液，并使1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓结晶。本文所述的任何合适的结晶步骤都可以用于这些方法中。
药物组合物
还提供了包含本发明的任何一种或多种盐和/或晶体的药物。
还提供了包含本发明的任何一种或多种盐和/或晶体的药物组合物。通常，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂。
所述药物和药物组合物包括用于口服、直肠、鼻、局部(包括颊和舌下)、肠胃外给药(包括肌内、腹膜内、皮下和静脉内)或适于通过吸入或吹入给药的形式的药物和药物组合物。因此，可以将本发明的盐和/或晶体任选地与常规佐剂、载体或稀释剂一起置于药物组合物及其单位剂量的形式中，并且在这种形式中可以用作固体，例如片剂或填充的胶囊，或液体，例如溶液、悬浮液、乳剂、酏剂或填充胶囊，全部用于口服，或以无菌注射溶液的形式用于肠胃外(包括皮下)使用。通常，本发明的盐和/或晶体由于其在固态中的有利性质而用作固体。
本发明的盐和/或晶体的药物组合物可以方便地以剂量单位形式存在，并且可以通过药学领域公知的任何方法制备，并且可以包括药学领域公知的任何常规载体、稀释剂和/或赋形剂(参见，例如，《雷明顿：药学的科学与实践》(Remington：The Science andPractice of Pharmacy,第21版,2005,Lippincott Williams&Wilkins)。通常，本文所述的药物组合物的制备包括使活性成分(例如本发明的任何一种盐和/或晶体)与构成一种或多种辅助成分的载体结合的步骤。通常，通过使活性成分(例如本发明的盐和/或晶体)与液体载体或细碎的固体载体或两者均匀且紧密地结合，然后(如果需要)使产品成型为所需的制剂，来制备药物组合物。在药物组合物中，包含足以产生所需效果的量的本发明的盐和/或晶体。
本文所述的药物组合物可以用于本文所述的任何方法中。
治疗方法
涉及本发明化合物的治疗方法描述于WO2017/004674、WO2020/102857和WO2021/042178中。由于本发明的盐和/或晶体是有利的固体形式，具有低吸湿性和改善的稳定性，可以设想它们可以用于任何这些治疗方法中。
因此，在另一方面，提供了一种方法:
·治疗或预防受试者的反社会行为，和/或
·为受试者的社交行为提供紧急和长期的调节，和/或
·治疗或预防受试者的药物滥用障碍，和/或
·治疗或预防受试者的社交障碍，和/或
·治疗或预防受试者的精神疾病，作为以社交障碍为主要或次要特征的精神疾病治疗的一部分；和/或
·使受试者体重减轻；和/或
·管理受试者的体重；和/或
·抑制受试者对食物的食欲；和/或
·减少受试者对食物的消耗；和/或
·治疗或预防受试者的阿片类药物戒断和/或与阿片类药物戒断相关的症状。
所述方法包括向所述受试者施用有效量的本发明的任何一种或多种盐和/或晶体。
在另一个方面，还提供了一种治疗患有或有可能患上药物滥用障碍的受试者，或从药物滥用障碍中恢复并寻求保持持续戒断该物质的受试者的方法，包括向受试者施用有效量的任何一种或多种本发明的盐和/或晶体，从而治疗或预防该药物滥用障碍。
在一些实施方式中，本发明的方法包括施用有效量的包含本发明的盐和/或晶体以及药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂的药物组合物。
在一些实施方式中，所述治疗或预防受试者中的反社会行为的方法包括刺激所述受试者中的亲社会(pro-social)行为。
在一些实施方式中，所述精神障碍选自：自闭症谱系障碍、物质滥用障碍、精神分裂症或其组合。
在一些实施方式中，所述物质滥用障碍选自对阿片类药物(opioid)、鸦片(opiate)、酒精、可卡因或其组合中的任何一种的成瘾和/或依赖。
在一些实施方式中，本发明的方法治疗阿片类药物戒断的症状。阿片类药物戒断的症状包括心理，身体和/或躯体症状。
阿片类药物戒断的身体和躯体症状包括颤栗、颤抖、热或冷潮红、鸡皮疙瘩、出汗、呼吸加快、心率加快、血压升高、身体疼痛、呕吐、腹泻和发热。在一些实施方式中，所述方法治疗阿片类药物戒断的身体和/或躯体症状。在一些实施方式中，所述身体和/或躯体症状选自：颤栗和颤抖。
阿片类药物戒断的心理症状包括烦躁、焦虑、躁动不安、易怒、失眠、打哈欠、幻觉、痛觉过敏、截断超敏反应(hyperkatifiteia)和厌食症。据信，尽管这些症状不是身体/躯体症状，但它们是阿片类药物戒断的症状，并且源于阿片类药物剂量停止或减少和/或阿片类拮抗剂给药引起的生理变化。在一些实施方式中，所述方法治疗烦躁。
阿片类药物戒断的症状包括:烦躁、焦虑、躁动不安、易怒、失眠、打哈欠、幻觉、颤栗、颤抖、潮热或潮冷、鸡皮疙瘩、打喷嚏、出汗、呼吸急促、心率加快、血压升高、瞳孔扩大、立毛、头疼、身体疼痛、肌肉痉挛、肌肉酸痛、骨痛、关节酸痛、痛觉过敏、截断超敏反应(hyperkatifiteia)、眼睛和鼻子的水样分泌物(流泪和流涕)、恶心、呕吐、腹泻、腹痛、厌食症和发热。如上所述，关于阿片类药物戒断开发的诊断工具之一是DSM-5。DSM-5规定，对于被诊断为阿片类药物戒断的受试者，以下9种症状中的3种必须在停止(或减少)阿片类药物暴露或给予阿片类药物拮抗剂或部分激动剂后的几分钟至几天内出现。DSM-5症状是(1)烦躁情绪，(2)恶心，(3)肌肉酸痛，(4)流泪或流涕，(5)瞳孔扩大、立毛或出汗，(6)腹泻，(7)打哈欠，(8)发烧和(9)失眠。因此，在一些实施方式中，受试者经历至少1、2、3、4、5、6、7、8或9种上述的DSM-5症状，并且优选地，施用式(I)化合物至少可治疗受试者经历的症状中的一种。
戒断症状的严重程度将取决于引起依赖性的阿片类药物，治疗或滥用的剂量和时间，阿片类药物停止使用的速度以及受试者的特征，包括年龄、性别、体重等。
因此，在一些实施方式中，所述的方法治疗选自下组的阿片类药物戒断症状：颤栗、颤抖、潮热或潮冷、鸡皮疙瘩、出汗、呼吸急促、心率升高、血压升高、身体疼痛、呕吐、腹泻、发热、烦躁、焦虑、躁动、易怒、失眠、打哈欠、幻觉、痛觉过敏、截断超敏反应(hyperkatifiteia)和厌食症，或其组合。
给药
本发明的盐和/或晶体可以通过任何合适的方式给药，例如，口服、直肠、鼻、阴道、局部(包括颊和舌下)、肠胃外，例如通过皮下、腹膜内、静脉内、肌内或脑内注射、吸入、吹入、输注或植入技术(例如，作为无菌可注射的水溶液或非水溶液或悬浮液)。
本发明的盐和/或晶体可以作为任何合适的剂型提供，包括本文所述的任何药物和/或药物组合物。
本发明的盐和/或晶体可以约0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.15、0.2、0.5、1、2、3、5、10、15、20、25或30mg/kg受试者的体重的剂量施用。在一些实施方式中，剂量可以是这些量中的任一种至任何其他量，例如约0.001mg/kg至约30mg/kg、约0.2mg/kg至约30mg/kg或约0.2mg/kg至约10mg/kg。然应当理解，针对任何特定受试者的剂量的具体剂量水平和频率可能会有所不同，并取决于多种因素包括所用具体化合物的活性、代谢稳定性和化合物的作用时间、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药方式和时间、排泄速率、药物组合、特定疾病状态的严重程度，以及接受治疗的宿主。
本发明的盐和/或晶体可以“有效量”给药，例如当适当的量包含在药物组合物中时。“有效量”被认为是指将引起使用本发明的盐和/或晶体或包括本发明的盐和/或晶体的组合物的研究人员、兽医、医生或其他临床医生所寻求的对组织、系统、动物或人的期望的生物或医学反应的化合物的量。在一些实施方式中，所述有效量可以是“治疗有效量”，其中本发明的盐和/或晶体的量有效治疗已经在受试者中表现的病症和/或其症状。在其他实施方式中，有效量可以是“预防有效量”，其中本发明的盐和/或晶体的量足以预防治疗和/或预防病症和/或其症状的发作，或者如果出现症状，使所述病症和/或其症状的严重程度与在未接受式(I)化合物和/或其药学上可接受的盐和/或前药治疗的受试者群体中所述病症和/或其症状的平均严重程度相比处于降低的水平。
“有效量”将取决于许多因素，包括要治疗的受试者的身体状况、症状的严重程度、化合物的剂型和/或对医疗状况的专业评估。在确定受试者应接受的本发明的盐和/或晶体的量时，受试者的体重和年龄也可能是本领域技术人员考虑的因素。
术语“施用”和“给药”本发明的盐和/或晶体应理解为是指将目标活性化合物提供给有需要的受试者。
如本文所提供的，本发明所公开的盐和/或晶体的有益或期望的临床结果包括但不限于停止目标疾病、病症或病况的症状；减轻目标疾病、病症或病况的症状的严重性；预防目标疾病、病症或病况的症状的发作；和/或管理目标疾病、病症或病况的症状，例如防止症状的严重程度恶化或使症状严重程度减轻或在比预期短的时间内停止。可以实现治疗或预防措施。需要治疗的对象包括已经经历目标疾病、病症或病况的对象以及要预防目标疾病、病症或病况的对象。与没有治疗相比，治疗是指抑制或减少目标疾病、病症或病况的症状的增加，并且不一定意味着暗示相关状况的完全停止。
因此，通常，术语“治疗”(及其变体包括“处理”)意指影响受试者、组织或细胞以获得所需的药理和/或生理作用，包括上文讨论的有益或所需的临床结果。
试剂盒
还提供了一种试剂盒，所述的试剂盒包括如下所述的单独部分：
·本发明的一种或多种盐和/或晶体；和
·其在本发明的任何方法中的使用说明书。
在本文公开的任何试剂盒中，本发明的盐和/或晶体可任选地与药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂一起配制为药物组合物。药物组合物可以配制成通过本文公开的任何途径给药，包括口服、直肠、鼻、局部(包括颊和舌下)、肠胃外给药(包括肌内、腹膜内、皮下和静脉内)，或以适合通过吸入或吹入给药的形式给药。
实施例
通用方法
X射线粉末衍射(XRPD)
XRPD分析在具有PIXcel检测器(128通道)的PANalytical X'pert pro上进行，在3至35°2θ之间扫描样品。将材料轻轻研磨以释放任何附聚物，并将其装载到带有Kapton或Mylar聚合物膜来支撑样品的多孔板上。然后将多孔板放入衍射仪中，并使用以传输模式(步长0.0130°2θ，步长时间18.87s)，使用40kV/40mA发电机设置运行的Cu K辐射(α1λ＝α1:α2比率＝0.5)进行分析。使用HighScorePlus 4.7桌面应用程序(PANalytical，2017)可视化数据并生成图像。
偏光显微镜(PLM)
使用配备了交叉偏振透镜和Motic相机的Olympus BX50显微镜确定结晶度(双折射)的存在。使用Motic图像加2.0(Motic Images Plus 2.0)捕获图像。除非另有说明，否则所有图像均使用20x物镜记录。
热重/差热分析(TGA/DTA)
将大约5mg的材料称重到开放的铝盘中，并加载到同步热重/差热分析仪(TG/DTA)中，并在室温下保存。然后将样品以10℃/min的速率从20℃加热到300℃，在此期间，记录样品重量的变化以及任何差热事件(DTA)。氮气用作吹扫气体，流速为300cm3/min。
差示扫描量热法(DSC)
将大约5毫克的材料称重到铝DSC盘中，并用穿孔的铝盖非气密地密封。然后将样品盘装入精工DSC6200(配备有冷却器)中冷却并保持在20℃。一旦获得稳定的热流响应，则以10℃/min的扫描速率将样品和参考物加热至250℃，并监测所得的热流响应。氮气用作吹扫气体，流速为50cm3/min。
核磁共振(NMR)
在配备有DCH冷冻探针的Bruker AVIIIHD光谱仪上进行NMR实验，质子500.12MHz下工作。在氘代DMSO中进行实验，并将每个样品制备成约10mM的浓度。
动态蒸汽吸附(DVS)
将大约10-20mg的样品放入网状蒸汽吸附天平盘中，并通过表面测量系统(Surface Measurement Systems)将其装入DVS固有动态蒸汽吸附天平中。以10％的增量使样品经受40-90％相对湿度(RH)的斜坡曲线，在每一个步长下保持样品，直到在25℃达到稳定重量(dm/dt 0.004％，最小步长30分钟，最大步长500分钟)。在完成吸附循环之后，使用相同的程序干燥样品至0％RH，然后第二次吸附循环回到40％RH。执行两个循环。绘制吸附/脱吸附循环期间的重量变化，从而测定样品的吸湿性。然后对保留的任何固体进行XRPD分析。
重量蒸汽吸附(GVS)
将大约10-20mg的样品放入网状蒸汽吸附天平盘中，并通过Hiden Analytical将其装入IGASorp水分吸附分析仪天平中。以10％的增量使样品经受40-90％相对湿度(RH)的斜坡曲线，在每一个步长下于25℃保持该样品直至已经实现稳定重量(98％步长完成，最小步长长度30分钟，最大步长长度60分钟)。在吸附循环完成后，使用相同程序将样品干燥至0％RH，并最终返回至40％RH的起始点。执行两个循环。绘制吸附/脱吸附循环期间的重量变化，从而测定样品的吸湿性。
高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)
仪器:Dionex Ultimate 3000
梯度程序:
时间(分钟) 溶剂B[％]
0 0
13.0 55
14.0 55
14.1 0
20 0
液相色谱-质谱法
仪器：Dionex Ultimate 3000
Thermo Finnigan LCQ Advantage MS
梯度程序：
-时间(分钟) 溶剂B[％]
0 5
12.0 95
15.0 95
15.1 5
20 5
实施例1-由1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3，4-b][1,5]苯二氮卓二盐酸盐制备其游离碱
用于初级盐筛选(实施例2)的1-甲基-1，4，5，10-四氢吡唑并[3，4-b][1，5]苯二氮卓游离碱的制备使用以下步骤：
·将约5.5g1-甲基-1，4，5，10-四氢吡唑并[3，4-b][1，5]苯二氮卓的二盐酸盐加入到1L圆底烧瓶中，并与在去离子水中制备的200mL饱和NaHCO3溶液混合。
·将500mL二氯甲烷(DCM)和200mL乙酸乙酯(EtOAc)加入到烧瓶中。
·将混合物剧烈混合，并分离有机相。
·用另外的200mLDCM萃取水相。
·将分离出的有机相合并并经Na2SO4干燥并过滤。
·将过滤后的溶液真空浓缩，得到米色固体。
·在过滤和在过滤床上干燥之前，用叔丁基甲基醚(TBME)将固体研磨(triturated)(例如约1小时)。可以任选地在约40℃的减压下进一步干燥所述材料。
分离的1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱通过TG/DTA、DSC、DVS和后DVS、XRPD、HPLC、1H NMR和LC-MS表征，按照如以上详述的方法。将1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱在40℃/75％相对湿度(RH)下储存1周，以确定材料在增加的RH下的稳定性并鉴定潜在的水合物形成。
在游离碱的制备过程中获得了以下结果:
·分离了3.627g游离碱。
··通过XRPD，分离出的材料表现出高度结晶(图1)。
·通过TG分析，该材料呈无水状态，未观察到明显的质量损失。在观察到的熔融转变过程中观察到约1.6％的质量损失，这可能是由于在结晶材料中截留的溶剂(约0.12当量的EtOAc、0.12当量的DCM或0.6当量的水)(图2)。
·DT分析显示从约201℃开始的，在206℃时达到峰值的大而尖锐熔点。没有观察到其他热事件(图2)。
·DSC分析显示从约199℃开始，在206℃时达到峰值的大的熔融吸热，对应于在DT分析中观察到的熔融转变(图3)。在DSC分析的冷却和第二热期间未观察到热事件。
·材料在70％RH以上的DVS下表现出吸湿性，在70和90％RH之间质量增加约2.74％约0.31当量的水)。在0和70％RH之间，材料是非吸湿性的，质量增加了约0.11％(图4和图5)。XRPD后DVS分析未观察到形式变化。
·1H NMR谱显示了结构具有预期的连通性。观察到痕量的EtOAc和DCM。
·HPLC分析证实该材料表现出98.4％的高纯度(按面积％计)。
·LC-MS显示201.03m/z的正电离质量[M+H]，对应于200.24g/mol的预期质量。
·在40℃/75％RH下储存1周后未观察到形态的显著变化。与在1周的稳定性测试之前的样品的XRPD相比，该材料的XRPD显示出更高的结晶性。在大约10.2、11.9和14.3°2θ处观察到新的小峰，这与结晶度的改善或开始形成的潜在水合物有关(图6)。
成功地制得了本发明化合物的游离碱，并对其进行了充分的表征。XRPD发现该材料是高度结晶的。通过TG分析，材料呈无水状态。DTA和DSC分析证实了约200℃的熔点。游离碱通过DVS表现出吸湿性，在70和90％RH之间约有2.74％的质量增加。在0和70％RH之间，材料表现出非吸湿性，质量增加约0.11％。XRPD后DVS分析未观察到形式变化。收集的1H NMR谱显示了所提供结构的预期连通性。通过HPLC分析证实纯度为98.4％(高纯度)。LC-MS显示m/z为201.3，对应预期质量为200.24g/mol。XRPD显示，在40℃/75％RH下储存1周的游离碱材料在形式上没有变化。
实施例2-初级盐筛选
使用5种溶剂体系和18种酸抗衡离子对1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯并二氮卓游离碱进行盐筛选(见表1)。
在该盐筛中使用的溶剂体系是(1)乙醇(EtOH)；(2)四氢呋喃(THF)；(3)乙酸异丙酯；(4)丙酮；和(5)95％2-丙醇，5％水(％v/v)。
使用了以下步骤：
·将约30mg的1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯并二氮卓游离碱称量到5×1.5mL玻璃小瓶中。
·将300μL选定的溶剂体系加入到每个小瓶中以形成流动浆液，并且观察到米色浆液。
·在每个样品中加入1.05(或0.525，用于半实验)当量的酸抗衡离子(见表1)，并记录初步观察结果。
·样品在环境温度和40℃之间进行4小时循环，持续约72小时。
·收集样本并进行观察。
·通过离心过滤观察到固体的样品，并将固体装载到多孔XRPD板上并通过XRPD分析。
·打开未观察到固体的样品的盖子，保持其不受干扰，以使在环境温度下蒸发。蒸发后在所有样品中均观察到棕色黏胶。
·将XRPD板在40℃的烘箱中放置约24小时。通过XRPD分析干燥的样品，以确定形态/潜在无水盐的任何变化。
·然后将XRPD板在40℃/75％RH的稳定室中放置约24小时。
·通过XRPD分析稳定后样品，以确定潜在的水合物形成和盐歧化。
·通过TG/DTA分析观察到的在干燥和40℃/75％RH下储存时稳定的形态，以确定适合放大的盐形式。
在测试的18种酸性抗衡离子的初级盐筛选过程中，有16种产生了该化合物的潜在固体盐形式。然而，根据热分析和观察到的形态在40℃/75％RH下的稳定性，只有磷酸盐和L-酒石酸盐具有合适的性能。
表1.酸抗衡离子，储备溶液的制备和添加到盐筛样品中的量
该盐筛的结果总结在表2中。
表2.酸加成盐筛选结果总结
根据以上结果，只有磷酸盐和L-酒石酸盐具有可接受的热稳定性和吸湿性。
在初级多晶型物筛选过程中，发现了16种潜在的盐形式。通过TG/DTA分析了在40℃/75％ RH下表现稳定的潜在盐形式，以确定具有理想热性能的盐形式。TG/DTA分析确定了4种具有理想特性的潜在盐形式；磷酸盐形态1(磷酸盐形式1)，L-酒石酸盐形态1(L-酒石酸盐形式1)，甲苯磺酸盐形态1和甲苯磺酸盐形态3。热分析表明磷酸盐形式1和L-酒石酸盐形式1是无水的。
实施例3-1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓形式1的磷酸盐的制备
本实施例描述了制备11-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸加成盐的方案。
实验3.1由游离碱制备
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓磷酸盐形式1使用以下步骤制备:
·将约500mg的1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱称重到20ml闪烁小瓶中。
·向材料中加入5mL乙醇，形成可流动的浆液。
·将2.62ml(1.05当量)的1M磷酸储备溶液(在THF中制备)加入到所述材料的浆液中。添加酸抗衡离子后观察到粉红色的浆液。
·然后将浆液在搅拌下，在环境温度和40℃之间以4小时循环进行温度循环，持续约24小时。在40℃搅拌约2小时后，观察到厚粉红色浆液。
·大约24小时后收集样品，使用塑料移液管分离少量材料，并在潮湿的情况下用XRPD分析。
·使用布氏漏斗过滤大部分材料并在过滤床上干燥约1小时。材料迅速过滤，观察到可流动的粉红色粉末。
·在真空40℃干燥大部分材料约16小时。
按照如以上详述的方法，通过TG/DTA、DSC、DVS和后DVS、XRPD、HPLC、1H NMR和LC-MS对干燥材料进行充分表征。
根据XRPD，分离出的材料表现出高度结晶(图7)。
·PLM显微照片显示了小的双折射颗粒，没有确定的形态(未显示)。缺少形态可能是由于放大过程中使用了搅拌棒。
·TG分析显示，在约200℃以上热降解之前，没有质量损失(图8)。
·DT分析显示，从209℃开始出现一个较大的吸热熔化转变，其峰值在214℃(图8)。
通过上述方法成功制备了磷酸盐形式1。分离出的材料在XRPD和PLM中显示出高度结晶。观察到的晶体未通过PLM显示出明确的形态，这可能是由于在制备过程中使用了搅拌棒。TG分析证实该材料是无水的。DT和DSC分析发现熔点约为200℃，与初级筛选数据一致。通过DVS，该材料表现出轻微的吸湿性，在90％RH下质量增加约0.4％(图17和18)。XRPD后DVS分析未观察到形式变化或水合物形成的证据。收集的1H NMR谱显示了与所提供的结构的预期连通性。定量31P NMR证实材料中存在1当量的磷。HPLC分析证实了98.7％的高纯度(按面积％计算)，表明纯度比投入材料的游离碱纯度略有提高。
实验3.2-合成制备
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯并二氮卓形式1是通过在磷酸存在下使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛反应而制备的。N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺可以按照Katte，TA；Reekie，TA；Jorgensen，WT；和Kassiou，M；有机化学期刊(J.Org.Chem).2016,81(11),4883-4889所述地制备，其全部通过引用并入，包括所有支持信息。
将N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺从乙酸乙酯和庚烷中重结晶，然后加入以下反应。重结晶的N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺具有使用常规分离技术通过HPLC评估的99.4％面积的纯度。应当理解，重结晶对于成功完成以下与甲醛的反应不是必需的。
1升烧瓶装有冷凝器、恒压滴液漏斗、氮气入口和磁力搅拌器棒，并用氮气吹扫。将重结晶的N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺(37.2g)加入到烧瓶中，随后加入乙腈(184.6g)和水(145.0g)的混合物，该混合物先前已脱气。将该混合物加热至30℃，并在加入2.9g磷酸(23.1g)和水(26.3g)的混合物后不久，用水(14.9mL)洗涤。10分钟后，在25分钟内加入37％含甲醛水溶液(15.9g)，保持温度在36℃至43℃之间。在10分钟内用14.9mL的水将溶液冲洗干净。在开始添加甲醛后70分钟，将混合物过滤到氮气吹扫的接收器中，并用乙腈(7.9mL)洗涤反应烧瓶，洗涤物通过过滤器。用氮气吹扫反应液烧瓶，然后将其重新加热至34℃。剩余的磷酸用乙腈(49.2g)进一步稀释，并在34℃至39℃下在35分钟内加入，用乙腈(5.8g)洗涤。将混合物搅拌5分钟，然后在2小时内冷却至19℃，然后在冰浴中冷却105分钟。在6℃下，过滤混合物，用约三分之二的乙腈(26.4g)和水(22.8g)的混合物洗涤滤饼，然后压缩滤饼。滤饼用剩余的三分之一乙腈/水混合物洗涤，在烧结物上用氮气层干燥2分钟。将淡粉红色固体(66.9g)转移到烘箱中并在40℃下干燥115小时，得到磷酸盐形式1(收率51.0g，86.5％)。
实施例4-磷酸盐的多晶型物筛选和1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓形态2的磷酸盐的制备
使用以下步骤制备本发明化合物的磷酸的冻干材料:
·称重约1g的游离碱并加入到100mL的圆底烧瓶中。
··加入15ml的1,4-二恶烷以形成流动浆液。
·加入1.05当量(357.7μL)的纯磷酸。搅拌后，观察到粉红色的浆液。
·向烧瓶中加入60mL去离子水，并轻轻加热混合物直至观察到溶解。
·将所得的透明粉红色溶液在25×20mL的小瓶间分开，并将样品冷冻。每个小瓶含有约40mg的磷酸盐。
·然后在约72小时内将样品冻干。
·冻干后观察到浅粉红色、蓬松的固体。
材料的XRPD分析显示出以前没有观察到的不良结晶形态。该形态表示为磷酸盐形态2(图9中示出了游离碱、形式1和形态2的XRPD图的差异)。
溶剂溶解度
将选定的溶剂以50μL等分试样加入到约10mg的低结晶磷酸盐形态中(从上述冻干获得)。在每次添加之间，检查混合物的溶解，并且在没有明显溶解的情况下，将混合物加热至约40℃并再次检查。继续该过程直到观察到溶解或直到添加了2mL的溶剂。观察到溶解的样品在环境温度下无封盖地保存，以使其蒸发。其中未观察到溶解的样品通过离心过滤。所有观察到的固体均通过XRPD进行分析。在溶剂溶解度筛选过程中使用的溶剂体系详见表3。
在溶剂溶解度筛选过程中，获得了以下结果:
·在大多数溶剂系统中观察到低溶解度(<5mg/mL)。
·在二甲基亚砜、N-甲基吡咯烷酮和去离子水中观察到中等溶解度(10>x>100mg/ml)。
··XRPD分析剩余的固体溶解度后确定磷酸盐形式1为主。
·从乙酸乙酯、甲基异丁基酮和叔丁基甲基醚中观察到低结晶的磷酸盐形态2。
·从甲酸乙酯、乙酸异丙酯和甲乙酮观察到磷酸盐形式1和形态2的混合物。
表3.溶剂溶解度筛选过程中使用的溶剂体系。
除氯仿(观察到痕量的形态2)、二甲亚砜(无固体)、乙酸乙酯(形态2)、甲酸乙酯(形式1和形态2的混合)、乙酸异丙酯(形态2)、甲基乙基酮(形式1和形态2的混合)、甲基异丁基酮(形态2)、N-甲基吡咯烷酮(无固体)、叔丁基甲基醚(形态2)和水(无固体)外，大多数上述样品均产生磷酸盐形式1。
熟化实验
在多晶型物筛选熟化实验中使用了以下步骤:
·在每个样品中加入1mL的选定溶剂体系的等分试样，直到有约30mg的材料溶解，或直到加入20mL的溶剂(小瓶的最大体积)。所选择的溶剂总结在表4中。
·然后将样品在环境温度和40℃之间以4小时循环进行温度循环，搅拌约48小时(将含有水的样品进行约72小时的温度循环)。由于对材料稳定性的关注，对可能观察到磷酸盐形态2的溶剂进行48小时的温度循环。
·收集样本并进行观察。
··分离观察到的固体，并通过XRPD进行分析。
表4.熟化实验中使用的溶剂。
在熟化实验中主要观察到磷酸盐形式1。从甲酸乙酯中观察到形式1和性2的混合物。仅从叔丁基甲基醚中观察到磷酸盐形态2。
磷酸盐形态2的表征
收集从叔丁基甲基醚分离的磷酸盐形态2材料，并在40℃下真空干燥约2小时。收集干燥的材料并通过TG/DTA进行分析。
在磷酸盐形态2的表征过程中获得了以下观察结果:
·TG分析显示与过量表面溶剂的损失有关的从加热开始的约0.6％的质量损失。
·DT分析显示从约201℃开始的宽熔融吸热，在206℃时达到峰值。熔融吸热后立即发生热降解。
·观察到的熔点比磷酸盐形式1的熔点低约8℃。
·XRPD分析表明，磷酸盐形态2样品在40℃/75％ RH下储存后全部转化为形式1。
收集在溶剂溶解度筛中观察到的含有磷酸盐形态2材料的XRPD多孔板，并在40℃/75％RH的稳定室中储存约16小时。样品用XRPD进行分析。
确定磷酸盐形态2的熔点低于形式1，表明该材料不太稳定。在40℃/75％ RH下储存后，磷酸盐形态2材料完全转化为形式1，确认形态2是磷酸盐的亚稳态形式。
实施例5-1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓L-酒石酸盐的制备
1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓L-酒石酸盐使用以下步骤制备:
·将约500mg的1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱称重到20ml闪烁小瓶中。
·向材料中加入5mL乙醇，形成可流动的浆液。
·将2.62ml(1.05当量)的1M酒石酸储备溶液(在THF中制备)加入到所述材料的浆液中。观察到少量悬浮在深粉色溶液中的米色固体。
·然后将浆液在搅拌下，在环境温度和40℃之间以4小时循环进行温度循环约24小时。在40℃搅拌约2小时后，观察到厚灰白色浆液。
·大约24小时后收集样品，使用塑料移液管分离少量材料，并在潮湿的情况下用XRPD分析。
·使用布氏漏斗过滤大部分材料并在过滤床上干燥约1小时。材料过滤缓慢，观察到厚的团块灰白色粉末。
·真空下40℃干燥大部分材料约16小时。
··通过XRPD分析干燥的材料。
按照如以上详述的方法，通过TG/DTA、DSC、DVS和后DVS、XRPD、HPLC、1H NMR和LC-MS对干燥材料进行充分表征。
根据XRPD，分离出的材料表现出高度结晶(图10)。
·PLM显微照片显示了小的双折射颗粒团聚体，其没有确定的形态(未示出)，这可能是由于在放大过程中使用了搅拌棒。
·TG分析显示，在约200℃以上热降解之前，没有质量损失。
·DT分析显示，从约181℃开始的较大的热降解的吸热熔化转变，峰值在约183℃(图11)。
·DSC分析显示，从约182℃开始的较大的吸热熔化转变，峰值在约185℃(图12)。在冷却和第二加热步骤中未观察到热事件。DSC数据与TG/DTA数据相对应。
·根据DVS，该材料表现出轻微的吸湿性，在90％RH下质量增加约0.6wt.％。在DVS动力学图中未观察到形式的变化。在等温线图中观察到的滞后现象表明在实验中无定形成分的结晶(图13和图14)。
··对后DVS材料的XRPD分析显示形式没有变化。
·通过-1H NMR确定在L-酒石酸盐样品中存在少量杂质，其也在投入的L-酒石酸中被鉴定出来。
·HPLC分析证实了99.0％的高纯度(按面积％计)。
通过上述工艺成功制备了L-酒石酸盐形式1盐。分离出的材料在XRPD和PLM中显示出高度结晶。观察到的晶体未通过PLM显示出明确的形态，这可能是由于在制备过程中使用了搅拌棒。在PLM分析中观察到颗粒的团聚。TG分析证实该材料是无水的。DT和DSC分析发现熔点约为181℃，与初级筛选数据一致。通过DVS，该材料表现出轻微的吸湿性，在90％RH下质量增加约0.6％。XRPD后DVS分析未观察到形式变化或水合物形成的证据。收集的1H NMR谱显示了与所提供的结构的预期连通性。在1H NMR谱中观察到约1当量的L-酒石酸。在1HNMR谱中观察到少量杂质，这些杂质后来在l-酒石酸输入材料中被鉴别出来。HPLC分析证实了99.0％的高纯度(按面积％计算)，表明纯度比投入材料的游离碱纯度略有提高。
例6-1周稳定性研究
使用以下步骤对游离碱(实施例1)，磷酸盐形式1(实施例3)和L-酒石酸盐形式1(实施例5)盐进行为期一周的稳定性研究:
·将大约20mg的每种形式称量到3×2mL玻璃小瓶中。
·每种形式的一个小瓶在以下条件下储存1周:
1.环境温度、光照和湿度(未密封的小瓶)
2. 40℃/75％ RH(未密封小瓶)
3. 80℃(密封小瓶)
·1周后收集样品并进行观察。
·通过XRPD和HPLC分析固体。
在为期1周的稳定性研究中，XRPD在磷酸盐形式1和L-酒石酸盐形式1中未发现形式变化。HPLC分析未发现盐样品纯度的任何显著变化。
在40℃/75％RH和80℃下储存的游离碱样品在形式或纯度上没有变化。在环境条件下存储的游离碱样品的XRPD衍射图中观察到一个额外的峰，表明形式或降解的潜在变化。2周后收集的另一XRPD图案显示衍射图案进一步变化。HPLC分析未显示纯度有任何明显变化。数据表明，游离碱在环境光下可能不稳定，但在热条件下可能稳定。
实施例7-盐歧化和水合研究
进行了以下实验，以评估在去离子水中磷酸盐形式1和L-酒石酸盐形式1的盐歧化的可能性以及使用具有各种水活性(Water Activity)的溶剂/水混合物形成水合物的可能性。
在盐歧化研究中使用了以下步骤：
·将约20mg的磷酸盐形式1(实施例3)和L-酒石酸盐形式1(实施例5)称量到2mL玻璃小瓶中。
·将去离子水以100μL等分试样添加到每个样品中，直到观察到流动浆液。
·将浆液在环境温度下搅拌约24小时。
·收集浆液并通过离心过滤。
·分离的固体通过XRPD分析。
·记录母液的pH。
在水合研究过程中使用了以下步骤：
·将约20mg的磷酸盐形式1(实施例3)和L-酒石酸盐形式1(实施例5)称量到2mL玻璃小瓶中。
·将选择的甲醇/去离子水混合物(参见表5)以100μL等分试样加入到每个样品中，直到观察到流动浆液。
·将浆液在环境温度下搅拌约24小时。
·收集浆液并通过离心过滤。
·分离的固体通过XRPD分析。
·记录母液的pH。
表5.盐歧化和水合研究中使用的溶剂/水混合物。
在磷酸盐形式1(实施例3)和L-酒石酸盐形式1(实施例5)盐的盐歧化研究中获得以下结果：
·在盐样品中未观察到盐歧化。
·在水中浆化的磷酸盐形态1材料中没有观察到XRPD图的变化。
·在水中浆化的L-酒石酸盐形态1材料中，未观察到XRPD图的变化。
在磷酸盐形式1(实施例3)和L-酒石酸盐形式1(实施例5)盐的水合研究中获得以下结果：
·在溶剂/水混合物中的盐样品中未观察到水合物的形成。
·在KNX-100磷酸盐形态1样品中未观察到XRPD图的变化。
·在KNX-100的L-酒石酸盐形态1样品中未观察到XRPD图的变化。
在磷酸盐形式1和L-酒石酸盐中未观察到水合物形成或盐歧化的证据。
实施例8-热力学溶解度评估
在pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水(PBS)缓冲液中，根据以下步骤评估了游离碱(实施例1)、磷酸盐形式1(实施例3)和L-酒石酸盐形式1(实施例5)的热力学溶解度：
·将大约30mg的每种形式称量到2mL玻璃小瓶中。
·向每个小瓶中加入100μL的缓冲溶液，直到观察到部分溶解。
·观察到的浆料在环境温度下搅拌约24小时。
·收集样品，并记录观察结果。
·通过离心过滤样品。
·记录母液的pH。
·通过HPLC记录母液的浓度。
在游离碱(实施例1)、磷酸盐形式1(实施例3)和L-酒石酸盐形式1(实施例5)的热力学溶解度评估过程中获得以下结果(总结于表6):
·HPLC分析确定了游离碱在pH 7.4的PBS缓冲液中的溶解度为0.3mg/mL。
·HPLC分析确定磷酸盐形式1盐在pH 7.4的PBS缓冲液中的的溶解度为7.4mg/mL。
·HPLC分析确定L-酒石酸盐形式1盐在pH 7.4的PBS缓冲液中的溶解度为6.3mg/mL。
表6.本发明化合物的固体形式的溶解度
在热力学溶解度筛选期间，发现KNX-100游离碱在pH 7.4的PBS缓冲液中具有最低的溶解度，溶解度为0.3mg/mL。在盐形式中发现了更高的溶解度。KNX-100L-酒石酸盐形式1的溶解度为6.3mg/ml，发现KNX-100磷酸盐形态1具有7.4mg/ml的最高溶解度。
实施例9-本发明化合物的磷酸盐形式1和二盐酸盐的药代动力学性质
本实施例描述了雄性斯普拉格道利大鼠的药代动力学实验。本实施例表明，口服施用作为磷酸盐形式1的本发明化合物(CMPD1)导致了与以二盐酸盐形式给药的本发明化合物相同的暴露曲线，无论该药物是使用盐水还是甲基纤维素(methocel)溶媒给药。
方法
在四种条件下分别使用了N＝3只大鼠：
(1)二HCL的盐水溶液
(2)二HCL的甲基纤维素溶液
(3)磷酸盐形式1的盐水溶液
(4)磷酸盐形式1的甲基纤维素溶液
在给药的当天，将固体化合物溶解于盐水(0.9％)或0.5％羟丙基甲基纤维素(优级粉状羟丙甲纤维素(Methocel E3 Premium LV))的Milli-Q水溶液中。然后将制剂彻底涡旋以产生无色溶液。
向过夜禁食(可自由饮水)的大鼠施用其剂量的本发明化合物的各种形式，通过口服灌胃(PO)以3ml/kg的剂量体积和5mg/kg的游离碱当量的剂量。用药后4小时(h)重新开始进食。给药后24小时内收集动脉血样本。收集后，将样品离心，除去血浆并在-80℃下冷冻保存，然后通过LC-MS进行分析。在给药前、给药后0-4小时、4-7小时和7-24小时收集尿液样本，并在提取后通过LC-MS进行分析。
结果
在用药后的24h采样期间，没有发现任何大鼠有不良反应或与化合物有关的副作用。
图15中示出了口服给药后在每种制剂中的二盐酸盐和磷酸盐形式1后，本发明化合物的平均血浆浓度相对时间的曲线，并且本发明化合物的平均暴露参数总结于表7中。表7.口服给药作为在盐水和甲基纤维素制剂中的二盐酸盐和磷酸盐(形式1)的本发明化合物后，本发明化合物在雄性斯普拉格道利大鼠中的平均血浆暴露参数。所有剂量和浓度均表示为游离碱当量。数据显示为所有组的平均值±标准差，n＝3
对于所有四个处理组，本发明化合物的血浆浓度与时间的关系非常相似。这反映在相似的剂量标准化的C最大和AUC0-无穷值中，表明盐形式和制剂载体对受试者暴露于本发明化合物都没有任何实质性影响。
实施例10-磷酸盐形式1与本发明化合物的二盐酸盐相比的生物效果
本实施例描述了在阿片类药物戒断(羟考酮给药后纳洛酮催促戒断)的C57BL/6小鼠模型中的实验，以及本发明化合物以两种不同的盐形式(以相同的游离碱当量剂量给药)治疗戒断症状的潜力。该实验证实，对于磷酸盐形式1，与本发明化合物先前描述的形式基本上相似的生物活性。
实验10.1:评估本发明化合物作为二盐酸盐(CMPD1-2HCL)和作为磷酸盐形式1(CMPD1-PO4)对纳洛酮催促羟考酮戒断的影响
对两组成年雄性C57BL/6小鼠进行了测试，评估7.3mg/kg游离碱当量(FBE)IP的本发明化合物的二盐酸盐形式(CMPD1-2HCL)和磷酸盐形式1(CMPD1-PO4)对纳洛酮催促的戒断诱导跳跃的影响。
第一组小鼠(N＝30)分为以下条件：
(1)溶媒，0mg/kg(n＝10)；
(2)羟考酮，0mg/kg本发明的化合物FBE的2HCL盐形式(n＝10)；
(3)羟考酮，7.3mg/kg本发明的化合物FBE的2HCL盐形式(n＝10)。
第二组小鼠(N＝24)分为以下条件：
(1)溶媒，0mg/kg(n＝8)；
(2)羟考酮，0mg/kg本发明的化合物FBE的PO4盐形式(n＝8)；
(3)羟考酮，7.3mg/kg本发明的化合物FBE的PO4盐形式(n＝8)。
在羟考酮条件下的小鼠根据表8中列出的时间表和剂量接受i.p.注射羟考酮5天。上午和下午的剂量间隔7小时。处于媒介条件的小鼠接受注射媒介盐水代替羟考酮。在第5天早上注射后1小时45分钟，给药小鼠本发明化合物的i.p.剂量。15分钟后，他们接受了i.p.注射10mg/kg纳洛酮(羟考酮组)或生理盐水(溶媒组)，并立即进行检测。
表8.羟考酮条件下小鼠的羟考酮给药时间表。
测试包括将小鼠单独放置在20(l)x20(w)x30(h)cm的场地中30分钟。通过侧视高速(120fps)、高分辨率(4K)摄像机拍摄过程。经验丰富的对条件盲目的实验者对视频中的跳跃次数进行了评分。
数据通过SPSS使用单向ANOVA分析和计划对比。
跳跃
跳跃的数据如图16所示。来自组1小鼠的数据用正方形符号显示，来自组2小鼠的数据用圆形符号显示。
评估跳跃的总ANOVA是显著的[F3，50＝21.52，p<0.0001]。计划的对比显示，经历羟考酮戒断的小鼠在测试过程中显著跳跃更多次[VEH_VEH vs OXY_VEH，p<0.0001]。
作为磷酸盐(CMPD1-PO4)和2HCl(CMPD1-2HCL)盐形式的7.3mg/kg的本发明的FBE化合物在所有测试剂量下均显著抑制羟考酮戒断诱导的跳跃[OXY_VEH vs:OXY_CMPD1-PO4,p<0.01；OXY_CMPD1-2HCL,p<0.001]。此外，两种盐形式的FBE给药后的结果在戒断诱导的跳跃方面没有显着差异[OXY_CMPD1-PO4 vs OXY_2HCL，p＝0.901](图16)。

Claims (21)

1.一种1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的磷酸加成盐。
2.如权利要求1所述的磷酸加成盐，其特征在于，其为结晶形式，其由X射线衍射(XRD)图谱中在约12°和约18°2θ处的强峰来表征。
3.如权利要求1或2所述的磷酸加成盐，其特征在于，其由XRD图中约12°、14°、17.5°、18°、19°、20°、20.8°、22.5°、24°、24.8°、26°、26.5°和27.8°2θ处的峰来表征。
4.如权利要求1-3中任一项所述的磷酸加成盐，其特征在于，其具有约200℃的熔点。
5.如权利要求1-4中任一项所述的磷酸加成盐，其特征在于，其为无水晶体。
6.一种1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的L-酒石酸加成盐。
7.如权利要求6所述的L-酒石酸加成盐，其特征在于，其呈结晶形式。
8.如权利要求7所述的L-酒石酸加成盐，其特征在于，其为无水晶体。
9.一种1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的晶体。
10.如权利要求9所述的晶体，其特征在于，所述晶体为无水晶体。
11.一种制备如权利要求1-5中任一项所述的磷酸加成盐的方法，包括：
·制备包含1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱、溶剂和磷酸的溶液；和
·分离过量的溶剂和磷酸，得到磷酸加成盐。
12.一种制备如权利要求1-5中任一项所述的磷酸加成盐的方法，包括使N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-苯-1,2-二胺与甲醛在有磷酸的溶剂中反应。
13.如权利要求11或12所述的方法，其特征在于，所述溶剂选自：1,4-二恶烷、2-丁醇、2-乙氧基乙醇、2-甲基四氢呋喃、2-丙醇、丙酮、乙腈、甲醇、苯甲醚、乙醇、四氢呋喃、乙二醇和水或其组合。
14.如权利要求11至13中任一项所述的方法，其特征在于，所述溶剂不包含乙酸乙酯、甲基异丁基酮、叔丁基甲基醚、甲酸乙酯、乙酸异丙酯和甲基乙基酮或其组合。
15.一种制备如权利要求6-8中任一项所述的L-酒石酸加成盐的方法，包括：
·制备包含1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱、溶剂和L-酒石酸的溶液；和
·从L-酒石酸加成盐中分离出过量的溶剂和L-酒石酸。
16.一种制备1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱的晶体的方法，包括：
·制备1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓的盐酸盐和饱和碳酸氢盐水溶液的溶液；和
·使该溶液与有机溶剂接触以从该溶液中萃取1-甲基-1,4,5,10-四氢吡唑并[3,4-b][1,5]苯二氮卓游离碱。
17.一种药物，其包含如权利要求1至8中任一项所述的盐或如权利要求9或10所述的晶体。
18.一种药物组合物，其包含如权利要求1至8中任一项所述的盐或如权利要求8或9所述的晶体。
19.一种下述的方法：
·治疗或预防受试者的反社会行为，和/或
·为受试者的社交行为提供紧急和长期的调节，和/或
·治疗或预防受试者的药物滥用障碍，和/或
·治疗或预防受试者的社交障碍，和/或
·治疗或预防受试者的精神疾病，作为以社交障碍为主要或次要特征的精神疾病治疗的一部分；和/或
·使受试者体重减轻；和/或
·管理受试者的体重；和/或
·抑制受试者对食物的食欲；和/或
·减少受试者对食物的消耗；和/或
·治疗或预防受试者的阿片类药物戒断和/或其症状；
所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至8中任一项所述的盐、如权利要求9或10中任一项所述的晶体、如权利要求17中所述的药物或权利要求18所述的药物组合物。
20.一种治疗患有或有可能患上药物滥用障碍的受试者，或从药物滥用障碍中恢复并寻求保持持续戒断该物质的受试者的方法，包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至8中任一项所述的盐、如权利要求9或10中任一项所述的晶体、如权利要求17所述的药物或如权利要求18所述的药物组合物，从而治疗或预防所述药物滥用障碍。
21.如权利要求1至8中任一项所述的盐或权利要求9或10所述的晶体在制备用于以下的药物中的用途：
·治疗或预防受试者的反社会行为，和/或
·为受试者的社交行为提供紧急和长期的调节，和/或
·治疗或预防受试者的药物滥用障碍，和/或
·治疗或预防受试者的社交障碍，和/或
·治疗或预防受试者的精神疾病，作为以社交障碍为主要或次要特征的精神疾病治疗的一部分；和/或
·使受试者体重减轻；和/或
·管理受试者的体重；和/或
·抑制受试者对食物的食欲；和/或
·减少受试者对食物的消耗；和/或
·治疗或预防受试者的阿片类药物戒断和/或其症状。
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