CN116617240A - 芦丁或其水合物、盐或衍生物的新用途及其注射剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及芦丁或其水合物、盐或衍生物的新用途及其注射剂,属于生物医药领域。本发明提供了芦丁或其水合物、盐或衍生物在制备预防或/和治疗酒精中毒的药物中的用途;所述的药物是注射给药制剂、口腔内给药制剂、鼻腔给药制剂。本发明还提供了一种芦丁注射剂,它是将磺丁基‑β‑环状糊精包合芦丁制备而成。本发明还提供了芦丁或其水合物、盐在制备防止宿醉症状或饮用酒精饮料后表现失常的膳食补充剂中的用途。本发明芦丁注射或舌下给药用于治疗酒精中毒,安全、有效,此外,在对芦丁制剂的研究过程中,发现磺丁基‑β‑环糊精对芦丁有很好的增溶作用,且在治疗酒精中毒时,不仅可以显著缩短清醒时间,还可以明显降低死亡率。
Description
技术领域
本发明涉及芦丁或其水合物、盐或衍生物的新用途,具体地,是在制备预防或/和治疗酒精中毒的药物中的用途,属于生物医药领域。
背景技术
据世界卫生组织(WHO)2018年的报告,每年超过300万人因酗酒而死亡,占全球死亡人数的5.3%,15岁以上人口的人均饮酒总量从2005年的5.5升增加到2016年的6.4升,酗酒已是15-59岁男性死亡的主要因素之一。中国是一个酒文化浓厚的大国,目前已超5亿人有饮酒行为,据Lancet 2016全球饮酒调查报告显示,中国有高达71万人因酗酒而死亡,居于全球榜首并远超其他国家。几个世纪以来,酒精作为一种可能产生依赖性的精神活性物质,在全球被广泛用作娱乐性饮品,同时作为一种羟基衍生物,其脂溶性强,吸收迅速,大部分酒精都将被吸收进入血液,只有少量通过尿液、汗液、呼吸排泄。过量饮酒会引起机体多个器官或系统功能异常,常常诱发胃和肝脏病变、神经和心血管疾病以及癌症,严重者甚至直接导致呼吸中枢麻痹而死亡。大量饮酒对个体的健康、家庭、社会都产生了严重的影响,这也将是各国卫生系统面临的巨大挑战。
过量饮酒会导致酒精中毒,根据产生的症状不同,酒精中毒分为慢性、急性酒精中毒两种。慢性酒精中毒可导致全身多系统多器官损伤,脑组织是酒精重要的靶器官,最易受到伤害,脑损伤是慢性酒精中毒较常见和严重的并发症之一。临床上将长期饮酒导致的大脑额叶和边缘系统相关的记忆和高级精神功能的慢性损害所表现的反应迟钝、注意力不集中、记忆力下降、自发性语言减少、震颤性语妄、幻觉症、遗忘症、定向力障碍、共济失调、运动障碍等一系列精神及意识障碍综合征定义为酒精性脑病,慢性酒精中毒还会诱导大脑皮质神经细胞凋亡(唐发兵,慢性乙醇中毒诱导小鼠大脑皮质神经细胞凋亡的研究,中国药科大学,2010年4月)。针对慢性酒精中毒的治疗,有相关文献报道,如大蒜多糖对慢性酒精中毒小鼠脑损伤的保护作用(吴伟青,大蒜多糖对慢性酒精中毒小鼠脑损伤的保护作用,暨南大学硕士学位论文,2012年4 月)。
急性酒精中毒(acute alcoholism AAI),是指因一次性摄入过量的酒精或酒类饮料超过了肝脏的氧化代谢能力而发生在体内蓄积的情况,会引起中枢神经系统先兴奋后抑制,并伴有肝脏、心脑血管等多系统损伤的过程,中毒严重的可发生呼吸及循环衰竭,最终导致死亡。急性酒精中毒的临床表现因人而异,大致可分为兴奋期、共济失调期、昏迷期三期。对于急性酒精中毒的发病机制尚不明确,与以下几方面有关:由于酒精具有脂溶性,摄入的酒精可直接作用在神经细胞膜上影响细胞功能,使脑内蛋白减少,水分增加,髓鞘形成障碍。乙醇是一种亲神经性的毒物,可以透过血脑屏障,促使垂体前叶释放人量内啡肽,内啡肽系统活性被增强,能产生类似吗啡样生物学效应,出现嗜睡、意识模糊等,严重者中枢神经系统的大脑皮质直接受到抑制,进一步影响皮质下、延髓和脊髓,最终将抑制生命中枢引起呼吸功能、循环功能衰竭,导致死亡;酒精在肝脏代谢生成大量机体代谢出现异常,例如乳酸增高、酮体蓄积等导致代谢性酸中毒的发生,糖异生受阻还会发生低血糖;酒精能影响和抑制维生素的吸收,糖代谢发生障碍后,使神经组织功能和结构发生异常改变;酒精经消化道进入人体,可导致粘膜坏死,胃液分泌亢进造成消化道粘膜损伤。长期大量饮酒,降低了肠内消化酶的活性,肠液分泌亢进造成腹泻,日久导致营养不良;酒精可损害肺毛细血管壁和肺泡壁,使之通透性增强最终损害呼吸系统;酒精能改变心肌细胞膜的通透性,使其组织代谢发生异常,对心脏产生毒副作用。所以,急性酒精中毒会引发多系统损害,导致严重后果(高舒迪,不醉方防治小鼠急性酒精中毒作用的实验研究,成都中医药大学硕士学位论文,2013年4月)。临床上,针对酒精中毒的公认药物主要是纳洛酮,该药主要作用是对酒精中毒患者进行促醒,防止患者因为酒精抑制呼吸而造成死亡,但其加快乙醇代谢和降低酒精性组织损伤的作用甚微。也有文献报道将纳洛酮联合其它药物治疗酒精中毒(姚翠娥,等,纳洛酮联合醒脑静治疗急性酒精中毒疗效观察,齐齐哈尔医学院学报2012年第33卷第5期)。因此,非常迫切寻找一种安全、有效治疗酒精中毒的药物。
芦丁,又称为芸香甙、维生素P、紫槲皮甙、路丁、路丁粉、路通、络通、紫皮甙。临床上,芦丁主要用于脆性增加的毛细血管出血症,也用于高血压脑病、脑出血、视网膜出血、出血性紫癜、急性出血性肾炎、再发性鼻出血、创伤性肺出血、产后出血等的辅助治疗。有研究报道芦丁具有抗炎作用(刘欣,芦丁在脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠体内抗炎作用的 PK-PD 模型研究,沈阳农业大学,2020年12月);芦丁还有抗缺氧作用(姚娟,芦丁的抗缺氧作用及其分子机制研究,兰州大学,2012年4月、申请号 201110392838.6),文献报道芦丁可用于治疗银屑病,肿瘤(肝癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌)。专利申请号200910216333.7,发明名称:芦丁的新用途,公开了芦丁在制备治疗保肝药中的用途。通过药学实验证明芦丁可以有效地减轻肝移植体的低温保存再灌注损伤,对肝有保护作用,但是,也有文献报道芦丁有肝损害、造血功能障碍等副作用。另外,芦丁溶解性很特殊,难溶于水,微溶于乙醇、丙酮和乙酸乙酯,几乎不溶于氯仿、苯、二硫化物和石油醚。由于芦丁水难溶、脂难溶,现有芦丁上市剂型仅为口服用片剂,成人常用量一次20-40mg(1-2片) ,每日3次,芦丁的临床使用比较局限。
目前尚无芦丁用于治疗酒精中毒的报道,也没有芦丁新的给药方式的报道。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提供了一种芦丁的新用途,本发明另一技术方案是提供了芦丁注射剂。
本发明提供了芦丁或其水合物、盐或衍生物在制备预防或/和治疗酒精中毒的药物中的用途。
其中,所述的酒精中毒包括急性酒精中毒、慢性酒精中毒。
其中,所述的药物是预防或/和治疗宿醉状态或饮酒后失常的药物。
其中,所述的药物是注射给药制剂、口腔内给药制剂、鼻腔给药制剂;优选地,所述的注射给药制剂为注射液、注射用冻干粉针;所述的口腔内给药制剂是舌下给药制剂。
进一步优选地,所述的舌下给药制剂为舌下片、舌下滴丸、舌下喷雾、舌下滴液、舌下膜。
其中,所述的注射给药制剂的人用给药剂量为0.03-3mg/kg;口腔内给药制剂的人用给药剂量为:0.09-9mg/kg。
本发明还提供了一种芦丁注射剂,所述注射剂包含磺丁基-β-环状糊精和芦丁;其中,芦丁和磺丁基-β-环状糊精的重量配比为:
芦丁1份、磺丁基-β-环状糊精 9-50份。
该注射剂的制备工艺为:
a、称取原辅料芦丁、磺丁基-β-环状糊精,其重量配比为:
芦丁1份、磺丁基-β-环状糊精 9-50份;
b、将a步骤的原辅料加入生理盐水中,加热至70℃,搅拌并维持15-25min后,冷却至室温,即得芦丁包合物的澄清溶液,加上药学上可接受的辅料,灭菌,即得注射液,将注射液进一步进行冻干,即得注射用冻干粉针。
本发明还提供了芦丁或其水合物、盐在制备防止宿醉症状或饮用酒精饮料后表现失常的膳食补充剂中的用途;所述的膳食补充剂以舌下片、舌下滴液、舌下喷雾或口腔喷雾形式服用。其中,服用剂量为0.09-9mg/kg。
本发明芦丁注射或舌下给药用于治疗酒精中毒,安全、有效,在对芦丁制剂的研究过程中发现,磺丁基-β-环糊精对芦丁有很好的增溶作用,且在治疗酒精中毒时,不仅可以显著缩短清醒时间,还可以明显降低死亡率,可用于制备成药物,或膳食补充剂,使用范围广泛,满足临床需求。
附图说明
图1芦丁和磺丁基-β-环状糊精不同质量比对芦丁增溶的影响(质量比分别为:1︰50、1︰30、1︰20、1︰12、1︰9、1︰7、1︰5);
图2 芦丁静脉注射药效试验结果;
图3 芦丁静脉注射对酒精血液浓度的影响;
图4 芦丁舌下给药药效试验结果。
具体实施方式
本发明所使用的仪器和试药:
恒温水浴磁力搅拌器;CPA225D型电子天平(德国赛多利斯公司),ModulyoD冷冻干燥机(美国Thermo公司),7890B型气相色谱仪(美国Agilent公司),芦丁(上海源叶生物科技有限公司,98%),芦丁水合物(阿拉丁,98%),盐酸纳洛酮(阿拉丁,纯度99%),α-环状糊精、γ-环状糊精和β-环状糊精购于德国Wacker公司,羟丙基-β-环状糊精和磺丁基-β-环状糊精购于淄博千汇生物科技有限公司,PEARLITOL®Flash(甘露醇淀粉共处理物)购于法国罗盖特公司。
实施例1 芦丁包合物的制备
取15mg 芦丁和190mg磺丁基-β-环状糊精加入到5ml生理盐水中,加热至70℃,搅拌并维持20min后,冷却至室温,即得芦丁包合物的澄清溶液。
实施例2 芦丁包合物冻干
取15mg 芦丁和190mg磺丁基-β-环状糊精加入到5ml生理盐水中,加热至70℃,搅拌并维持20min后,冷却至室温,即得芦丁包合物的澄清溶液。在上述溶液中加入10%的甘露醇,冻干,即得芦丁包合物冻干粉。
实施例3 芦丁包合物的制备
将不同质量比(1:5、1:7、1:9、1:12、1:20、1:30、1:50)的芦丁和磺丁基-β-环状糊精分别加入到5ml生理盐水中,加热至70℃,搅拌并维持20min后,冷却至室温,观察溶液的状态。结果发现,当芦丁和磺丁基-β-环状糊精的质量比为1:9-50时,均能得到澄清溶液。而当芦丁和磺丁基-β-环状糊精的质量比为1:7和1:5时,有明显的沉淀。结果见图1。
实施例4 芦丁舌下片的制备
将芦丁水合物1.5g、甘露醇淀粉共处理物18.5g、阿斯巴糖220mg、硬脂酸镁260mg混合均匀,直接压片,制成100片,即得。
对比例1 芦丁包合物的制备
取190mgα-环状糊精和15mg 芦丁加入到5ml生理盐水中,加热至70℃,搅拌并维持20min后,冷却至室温。分别用β-环状糊精、羟丙基-β-环状糊精和γ-环状糊精代替α-环状糊精,使用相同的量按照相同方法制备芦丁包合物。结果发现,使用α-环状糊精、β-环状糊精以及羟丙基-β-环状糊精均不能制得无沉淀的澄清溶液。
上述试验说明,芦丁环状糊精包合物中,对于环状糊精的选择具有专一性,只有采用磺丁基-β-环状糊才能达到包合作用,解决芦丁溶解性问题。
以下通过具体的药效学试验证明本发明的有益效果。
试验例1 本发明芦丁静脉注射药效学试验
盐酸纳洛酮溶于生理盐水中,制备成纳洛酮溶液。将小鼠进行随机分为9组,每组11只,通过腹腔注射给予每只小鼠50%的乙醇溶液(剂量为0.1ml/10g),待小鼠翻正反射消失10min后,每组小鼠分别通过尾静脉注射给予等体积的生理盐水(记为生理盐水组)、38mg/ml的磺丁基-β-环状糊精生理盐水溶液(空白环状糊精组)、纳洛酮溶液(纳洛酮剂量为3mg/kg,记为纳洛酮组)、以及不同剂量的按照实施例1制备的芦丁包合物溶液(芦丁剂量分别为3mg/kg、1.5mg/kg、0.75mg/kg、0.3mg/kg以及0.1mg/kg,分别记为芦丁组(3mg/kg)、芦丁组(1.5mg/kg)、芦丁组(0.75mg/kg)、芦丁组(0.3mg/kg)和芦丁组(0.1mg/kg));最后一组小鼠,通过灌胃给予实施例1制备的芦丁包合物溶液(芦丁剂量为3mg/kg),记为芦丁灌胃组(3mg/kg)。记录小鼠2h内恢复翻正反射的时间(30秒内小鼠能翻正两次便认定其恢复翻正反射)和比率,并记录4h内各组小鼠的死亡率。
结果发现,生理盐水组、空白环状糊精组、纳洛酮组、芦丁组(3mg/kg)、芦丁组(1.5mg/kg)、芦丁组(0.75mg/kg)、芦丁组(0.3mg/kg)、芦丁组(0.1mg/kg)和芦丁灌胃组(3mg/kg)的小鼠2h内恢复翻正反射的比率分别为45.5%、45.5%、63.6%、81.8%、81.8%、72.7%、63.6%、54.5%和45.5%;4h观察内,生理盐水组、空白环状糊精组、纳洛酮组、芦丁组(3mg/kg)、芦丁组(1.5mg/kg)、芦丁组(0.75mg/kg)、芦丁组(0.3mg/kg)、芦丁组(0.1mg/kg)和芦丁灌胃组(3mg/kg)的小鼠死亡率分别为54.5%、54.5%、45.5%、18.2%、27.3%、36.4%、45.5%%、54.5%和54.5%。各组小鼠恢复翻正反射的时间如图2所示,纳洛酮可以比较快速地促醒酒精中毒的小鼠,但在观察期中,该组的小鼠死亡率较高(该组部分小鼠苏醒后,又会重新失去翻正反射,从而在4h观察期内死亡)。而经不同剂量芦丁静脉注射治疗后,相较于生理盐水对照组,酒精中毒的小鼠(特别是芦丁剂量≥0.3mg/kg的组)恢复翻正反射的时间均有不同程度的降低,而且观察期内这些芦丁处理的小鼠死亡率均低于生理盐水组;但当芦丁进行灌胃给药时,却未观察到类似的作用。这些结果充分说明,本发明的芦丁注射剂具有明显治疗酒精中毒的效果。
试验例2 本发明芦丁静脉注射对酒精血液浓度的影响试验
将大鼠进行随机分为4组,每组5只,通过腹腔注射给予每只大鼠50%的乙醇溶液(剂量为0.55ml/100g),给予乙醇5min后,每组大鼠分别通过尾静脉注射给予等体积的生理盐水(记为生理盐水组)、38mg/ml的磺丁基-β-环状糊精生理盐水溶液(空白环状糊精组)、纳洛酮溶液(纳洛酮剂量为2mg/kg,记为纳洛酮组)以及按照实施例1制备的芦丁包合物溶液(芦丁剂量为2mg/kg,记为芦丁组)。分别于给药后10min、30min、60min、120min、240min以及360min通过眼静脉取血,然后使用顶空法测定血液中的乙醇浓度。
结果发现,空白环状糊精组的大鼠血液酒精浓度与生理盐水组相比几乎没有差异;相较于生理盐水组,纳洛酮组的大鼠血液酒精浓度具有降低的趋势,但无统计学差异;芦丁组的大鼠血液酒精浓度则显著低于生理盐水组。这些结果说明,本发明的芦丁可以加快血液酒精的代谢速度(见图3)。
试验例3 本发明芦丁舌下给药的药效学试验
将小鼠进行随机分为4组,每组12只,通过腹腔注射给予每只小鼠50%的乙醇溶液(剂量为0.1ml/10g),待小鼠翻正反射消失10min后,每组小鼠分别通过舌下给予等体积的生理盐水(记为生理盐水组)、38mg/ml的磺丁基-β-环状糊精生理盐水溶液(空白环状糊精组)、实施例1制备的芦丁包合物溶液,作为舌下滴液给药(芦丁剂量为9mg/kg,记为芦丁溶液组)以及按照实施例2的处方,通过冻干制备成冻干片进行给药(芦丁剂量为9mg/kg,记为冻干芦丁组),记录小鼠2h内恢复翻正反射的时间(30秒内小鼠能翻正两次便认定其恢复翻正反射)和比率,并记录4h内各组小鼠的死亡率。
结果发现,生理盐水组、空白环状糊精组、芦丁溶液组和冻干芦丁组的小鼠2h内恢复翻正反射的比率分别为41.7%、50.0%、75.0%和66.7%;4h观察内,生理盐水组、空白环状糊精组、芦丁溶液组和冻干芦丁组的小鼠死亡率分别为58.3%、50%、25.0%以及25.0%。各组小鼠恢复翻正反射的时间如图4所示,生理盐水组和空白环状糊精组的小鼠苏醒时间较长,且观察期内的死亡率也较高;而经舌下给药的芦丁溶液和芦丁冻干品治疗后,相较于对照组,酒精中毒的小鼠恢复翻正反射的时间显著降低,而且观察期内小鼠的死亡率显著低于对照组。这些结果充分说明,本发明的芦丁可以通过舌下给药的方式治疗酒精中毒。
试验例4 本发明芦丁预防酒精中毒试验
将小鼠进行随机分为2组,每组15只。其中一组通过腹腔注射给予每只小鼠50%的乙醇溶液(剂量为0.1ml/10g),记为对照组;另外一组通过腹腔注射给予每只小鼠含芦丁的50%乙醇溶液(剂量为0.1ml/10g,芦丁的剂量为3mg/kg),记为芦丁组。注射完成后,记录小鼠翻正反射消失的时间和比率。
结果发现,对照组小鼠均会出现翻正反射消失,其平均翻正反射消失时间仅为2.5±1.2min;而芦丁组66.7%的小鼠在2h的观察期内均未观察到翻正反射消失现象,且该组剩下33.3%的小鼠出现翻正反射消失的平均时间为10.2±6.5min。这些结果表明,本发明的芦丁可以预防酒精中毒。
试验例5 本发明芦丁舌下给药临床试验
让受试者饮用含乙醇的酒精性饮料,直到血液乙醇浓度达到300mg/100mL。然后,让受试者饮用500mL的水,并在之后立即给予包含15mg的芦丁的舌下片。之后,让受试者睡觉。受试者完成8h睡眠后,记录受试者的宿醉症状。作为比较,给予不含芦丁的舌下片作为安慰剂进行相同试验。每组受试者16人。
结果表明,服用安慰剂的受试者中,11位受试者表现出明显的头痛、乏力等宿醉感,3位受试者的头晕、乏力感轻微,2位受试者没有任何典型的宿醉症状。服用含芦丁的舌下片的受试者中,仅有3位受试者具有明显的头痛、乏力等宿醉感,5位受试者的头晕、乏力感轻微,8位受试者不具有通常与饮用酒精性饮料相关的任何典型的宿醉症状。
Claims (10)
1.芦丁或其水合物、盐或衍生物在制备预防或/和治疗酒精中毒的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述的酒精中毒包括急性酒精中毒、慢性酒精中毒。
3.根据权利要求1或2所述的用途,其特征在于:所述的药物是预防或/和治疗宿醉状态或饮酒后失常的药物。
4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述的药物是注射给药制剂、口腔内给药制剂、鼻腔给药制剂;优选地,所述的注射给药制剂为注射液、注射用冻干粉针;所述的口腔内给药制剂是舌下给药制剂。
5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于:所述的舌下给药制剂为舌下片、舌下滴丸、舌下喷雾、舌下滴液、舌下膜。
6.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述的注射给药制剂的人用给药剂量为0.03-3mg/kg;口腔内给药制剂的人用给药剂量为:0.09-9mg/kg。
7.一种芦丁注射剂,其特征在于:所述注射剂包含磺丁基-β-环状糊精和芦丁;其中,芦丁和磺丁基-β-环状糊精的重量配比为:
芦丁1份、磺丁基-β-环状糊精 9-50份。
8.根据权利要求7所述的芦丁注射剂,其特征在于:该注射剂的制备工艺为:
a、称取原辅料芦丁、磺丁基-β-环状糊精,其重量配比为:
芦丁1份、磺丁基-β-环状糊精 9-50份;
b、将a步骤的原辅料加入生理盐水中,加热至70℃,搅拌并维持15-25min后,冷却至室温,即得芦丁包合物的澄清溶液,加上药学上可接受的辅料,灭菌,即得注射液,将注射液进一步进行冻干,即得注射用冻干粉针。
9.芦丁或其水合物、盐在制备防止宿醉症状或饮用酒精饮料后表现失常的膳食补充剂中的用途;所述的膳食补充剂以舌下片、舌下滴液、舌下喷雾或口腔喷雾形式服用。
10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于:服用剂量为0.09-9mg/kg。
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