CN116617137B - 一种人参籽提取物及其制备方法 - Google Patents

一种人参籽提取物及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116617137B
CN116617137B CN202310764449.4A CN202310764449A CN116617137B CN 116617137 B CN116617137 B CN 116617137B CN 202310764449 A CN202310764449 A CN 202310764449A CN 116617137 B CN116617137 B CN 116617137B
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
water
weight
parts
ethanol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202310764449.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN116617137A (zh
Inventor
黄格昕
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhencui Guangdong Innovation Technology Co ltd
Original Assignee
Zhencui Guangdong Innovation Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhencui Guangdong Innovation Technology Co ltd filed Critical Zhencui Guangdong Innovation Technology Co ltd
Priority to CN202310764449.4A priority Critical patent/CN116617137B/zh
Publication of CN116617137A publication Critical patent/CN116617137A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN116617137B publication Critical patent/CN116617137B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/29—Titanium; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/63—Steroids; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/645—Proteins of vegetable origin; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
    • A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/805—Corresponding aspects not provided for by any of codes A61K2800/81 - A61K2800/95
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/84—Products or compounds obtained by lyophilisation, freeze-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/54—Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明提出了一种人参籽提取物及其制备方法，属于人参籽技术领域。将人参籽经过超临界流体萃取得到萃取液后，加入水中酶解，进行乳杆菌酶助发酵，得到的发酵产物加入水中加热提取，过滤，滤渣留用，水提取物中加入乙醇沉淀，得到多糖提取物，滤渣加入乙醇水溶液中，加热提取，得到醇提取物，将萃取液、多糖提取物、醇提取物混合加入水中，加入氯化钛、氨水和表面活性剂，搅拌反应，干燥，制得人参籽提取物。本发明制得的人参籽提取物含有高含量的蛋白肽、多糖、皂苷、黄酮类物质，同时形成了蛋白肽‑钛氧化物、多糖‑钛氧化物，具有抗衰、抗炎、防晒、美白以及促进胶原蛋白的合成等护肤功效，具有广阔的应用前景。

Description

一种人参籽提取物及其制备方法
技术领域
本发明涉及人参籽技术领域，具体涉及一种人参籽提取物及其制备方法。
背景技术
随着经济和社会的发展，人们对延缓衰老的追求也日益增加，而衰老最明显的特征，就是皮肤的衰老。作为人体的第一道屏障，个人魅力对外展示的重要窗口，皮肤的美白和抗衰老日渐引起人们的重视。皮肤老化是由自然因素或非自然因素造成的皮肤衰老现象。人出生后皮肤组织日益发达，功能逐渐活跃，当到达某种年龄就会开始退化，这种退化往往在人们不知不觉中慢慢进行。
皮肤受外界影响的因素很多，而紫外线是引起皮肤衰老的一个重要因素，光老化造成的胶原蛋白和弹力蛋白的减少、细胞过早消耗完分裂次数，提前进入程序衰老等。国内外均有不少针对皮肤光衰老的产品，效果不一，而采用中药美容的历史可谓源远流长，如著名的七子白方。
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础，细胞以分裂的方式进行增殖。Hayflick研究发现，正常细胞有一定的寿命，它们的增殖能力也不是无限的，而是有一定的界限，这就是有名的Hayflick界限理论。细胞增殖越快，细胞生命就越短。减缓了细胞增殖就是延长了细胞的生命，延缓了老化的进程，达到抗老化作用。减缓细胞的增殖，让皮肤细胞暂时处于休眠状态，避免过早让皮肤细胞消耗完增殖能力，保留肌肤年轻的资本，是减缓肌肤老化的合理方法之一。
人参籽，又称为人参子，为五加科人参属植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的果实，其是内含一粒种子的果核，常用于体虚乏力，头昏失眠，胸闷气短。人参籽中的总皂苷含量约为1-2％，人参籽中还含有高达40％的不饱和脂肪酸，30％的蛋白质。此外，人参籽中还含有11种微量元素，人参多糖，氨基酸，多肽等成分，对生物体内的代谢过程起着很大作用。
发明内容
本发明的目的在于提出一种人参籽提取物及其制备方法，含有高含量的蛋白肽、多糖、皂苷、黄酮类物质，同时形成了蛋白肽-钛氧化物、多糖-钛氧化物，具有抗衰、抗炎、防晒、美白以及促进胶原蛋白的合成等护肤功效，具有广阔的应用前景。
本发明的技术方案是这样实现的：
本发明提供一种人参籽提取物的制备方法，将人参籽经过超临界流体萃取得到萃取液后，加入水中酶解，进行乳杆菌酶助发酵，得到的发酵产物加入水中加热提取，过滤，滤渣留用，水提取物中加入乙醇沉淀，得到多糖提取物，滤渣加入乙醇水溶液中，加热提取，得到醇提取物，将萃取液、多糖提取物、醇提取物混合加入水中，加入氯化钛、氨水和表面活性剂，搅拌反应，干燥，制得人参籽提取物。
作为本发明的进一步改进，包括以下步骤：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
S2.酶解：将步骤S1中的固渣加入水中，加入复合酶酶解，得到酶解产物，灭菌，留用；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，酶助发酵培养，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
S4.水提取：将步骤S3中的发酵产物加入水中，加热提取，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇，沉淀，离心，干燥，得到多糖提取物；
S6.醇提取：将步骤S4中的滤渣加入乙醇溶液中，加热提取，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S7.人参籽提取物的制备：将氯化钛溶于水，搅拌加入步骤S1制得的萃取液、步骤S5制得的多糖提取物、步骤S6制得的醇提取物、氨水和表面活性剂，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
作为本发明的进一步改进，步骤S1中所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：20-32MPa，萃取温度：35-45℃，CO2流量：7-12L/h，萃取时间：1-3h，所述夹带剂的添加量为2-3wt％。
作为本发明的进一步改进，步骤S2中所述复合酶选自纤维素酶、果胶酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、γ-淀粉酶中的至少一种，优选地，为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2-3:5，所述酶解的条件为40-45℃，酶解1-2h。
作为本发明的进一步改进，步骤S3中所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，38-40℃，50-70r/min活化培养12-18h，制得含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1-2％和1.5-3％，所述酶助发酵培养的条件为微缺氧条件下，38-40℃，50-70r/min，酶助发酵培养48-56h，所述微缺氧条件为2-3v/v％二氧化碳、5-7v/v％氧气，余量为氮气。
作为本发明的进一步改进，步骤S4中所述发酵产物和水的质量比为10-15:30-50，所述加热至80-100℃，提取2-4h；步骤S5中所述乙醇加入至体系乙醇含量为70-80wt％，沉淀12-18h。
作为本发明的进一步改进，步骤S6中所述乙醇溶液为浓度为50-70wt％的乙醇水溶液，所述滤渣和乙醇溶液的质量比为10-12:40-50，所述加热提取的温度为40-60℃，时间为1-3h。
作为本发明的进一步改进，步骤S7中所述氯化钛、萃取液、多糖提取物、醇提取物、氨水和表面活性剂的质量比为3-5:5-7:7-10:4-7:1.5-2:0.5-1，所述氨水的浓度为20-22wt％，所述表面活性剂选自卵磷脂、甜菜碱、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基磺酸钠、十四烷基磺酸钠、十四烷基苯磺酸钠、十四烷基硫化钠、十六烷基苯磺酸钠、十六烷基磺酸钠、十六烷基硫酸钠、十八烷基磺酸钠、十八烷基苯磺酸钠、十八烷基硫酸钠中的至少一种。
作为本发明的进一步改进，具体包括以下步骤：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：20-32MPa，萃取温度：35-45℃，CO2流量：7-12L/h，萃取时间：1-3h，所述夹带剂的添加量为2-3wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.5-1重量份复合酶，40-45℃酶解1-2h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2-3:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1-2％和1.5-3％，微缺氧条件下，38-40℃，50-70r/min，酶助发酵培养48-56h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2-3v/v％二氧化碳、5-7v/v％氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，38-40℃，50-70r/min活化培养12-18h，制得含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液；
S4.水提取：将10-15重量份步骤S3中的发酵产物加入30-50重量份水中，加热至80-100℃，提取2-4h，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇至体系乙醇含量为70-80wt％，沉淀12-18h，离心，固体干燥，得到多糖提取物；
S6.醇提取：将10-12重量份步骤S4中的滤渣加入40-50重量份50-70wt％的乙醇水溶液中，加热至40-60℃，提取1-3h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S7.人参籽提取物的制备：将3-5重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入5-7重量份步骤S1制得的萃取液、7-10重量份步骤S5制得的多糖提取物、4-7重量份步骤S6制得的醇提取物、1.5-2重量份20-22wt％的氨水和0.5-1重量份表面活性剂，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
本发明进一步保护一种上述的制备方法制得的人参籽提取物。
本发明具有如下有益效果：紫外线照射会造成皮肤光老化，活性氧簇分子(ROS)产生，脂类和蛋白质被破坏，皮肤组织SOD活力下降，MDA含量增加，通过氧化作用损伤皮肤中的成纤维细胞，从而造成皮肤的光衰老。
本发明人参籽首先经过超临界流体萃取，具有萃取效率高、无溶剂残留、操作条件温和等优点，得到高含量人参籽精油，可抑制中波紫外线诱导的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMP)MMP-1和MMP-13的产生达到抗光老化的作用。
进一步，萃取后的固体加入水中，加入复合酶酶解，复合酶包括果胶酶和β-淀粉酶，能够将人参籽中大部分的胶质结构以及淀粉类多糖等酶解成小分子，从而大大促进多糖和蛋白质的溶出率，大大提高了多糖和蛋白质的提取率。进一步加入副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌酶助发酵，一方面有助于将底物降解成小分子便于发酵菌的发酵利用，同时，发酵菌也将植物细胞发酵降解，破坏细胞壁结构，大大促进了人参籽活性组分的溶出，从而大大提高了人参皂苷、人参蛋白肽、人参糖等的溶出，提高了后续人参多糖、人参多肽、人参皂苷、黄酮等的产率；
随后进行水提醇沉，得到了高收率的人参多糖，人参多糖具有提高SOD，GSH-Px和CAT活力，降低MDA含量的作用能明显降低MDA含量，提高血清SOD、CAT、GSH-PX活性及皮肤羟脯氨酸(hydroxyproline，HYP)含量，从而大大提高了抗氧化效果，从而有效抑制的光氧老化。
进一步，将滤渣经过醇提取，得到大量的多种人参皂苷、黄酮等脂溶性化合物，人参皂苷Rd可抑制中波紫外线诱导的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)-1和MMP-13的产生达到抗光老化的作用，促进I型胶原合成。黄酮类化合物能够活化皮肤细胞，补充皮肤的水分，增强肌肤弹性，减少肌肤水分流失。人参水提物能有效提高超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)活性，降低过氧化脂质和脂褐素的含量，拮抗过氧化损伤，保护皮肤细胞对抗光老化。人参皂苷Rb1可通过促进皮肤成纤维细胞(HSF)增值调节皮肤胶原代谢，通过影响HSF蛋白质表达促进胶原合成、抑制胶原降解，从而提高胶原蛋白总量，人参皂苷Rg3对调节黑色素生成的信号分子Akt和细胞外信号调节激酶来减少黑色素含量和抑制酪氨酸酶的活性，是一种安全有效的皮肤美白剂。从而大大提高了人参籽提取物的抗氧化、抗光老化的效果。
然后将萃取液、多糖提取物、醇提取物混合加入水中，加入氯化钛和氨水，从而形成了蛋白肽-钛氧化物、多糖-钛氧化物组合物，该组合物可通过抑制酪氨酸酶而表现出美白功效，通过抑制酪氨酸酶的活性，从而抑制黑色素的生成，激活皮肤的新陈代谢、减少角质化、滋润和软化皮肤以及减轻皱纹。同时，形成的蛋白肽-钛氧化物、多糖-钛氧化物能够起到阻隔反射，具有高折光性和高光活性，起到了很好的抗紫外线效果以及美白皮肤的效果。
本发明制得的人参籽提取物含有高含量的蛋白肽、多糖、皂苷、黄酮类物质，同时形成了蛋白肽-钛氧化物、多糖-钛氧化物，具有抗衰、抗炎、防晒、美白以及促进胶原蛋白的合成等护肤功效，具有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
β-淀粉酶，FDY-2218，70万U/g，果胶酶，SDG-2406，2500U/g，购于夏盛(北京)生物科技开发有限公司；副干酪乳杆菌，JLPF-176，鼠李糖乳杆菌，JYLR-005，均为100亿cfu/g，购于山东中科嘉亿生物工程有限公司。
实施例1
本实施例提供一种人参籽提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：20MPa，萃取温度：35℃，CO2流量：7L/h，萃取时间：1h，所述夹带剂的添加量为2wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.5重量份复合酶，40℃酶解1h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1％和1.5％，微缺氧条件下，38℃，50r/min，酶助发酵培养48h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2v/v％二氧化碳、5v/v％氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，38℃，50r/min活化培养12h，制得含菌量为108cfu/mL的菌种种子液；
S4.水提取：将10重量份步骤S3中的发酵产物加入30重量份水中，加热至80℃，提取2h，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇至体系乙醇含量为70wt％，沉淀12h，离心，固体干燥，得到多糖提取物；
S6.醇提取：将10重量份步骤S4中的滤渣加入40重量份50wt％的乙醇水溶液中，加热至40℃，提取1h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S7.人参籽提取物的制备：将3重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入5重量份步骤S1制得的萃取液、7重量份步骤S5制得的多糖提取物、4重量份步骤S6制得的醇提取物、1.5重量份20wt％的氨水和0.5重量份十八烷基硫酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
实施例2
本实施例提供一种人参籽提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：32MPa，萃取温度：45℃，CO2流量：12L/h，萃取时间：3h，所述夹带剂的添加量为3wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入1重量份复合酶，45℃酶解2h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比3:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为2％和3％，微缺氧条件下，40℃，70r/min，酶助发酵培养56h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为3v/v％二氧化碳、7v/v％氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，40℃，70r/min活化培养18h，制得含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S4.水提取：将15重量份步骤S3中的发酵产物加入50重量份水中，加热至100℃，提取4h，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇至体系乙醇含量为80wt％，沉淀18h，离心，固体干燥，得到多糖提取物；
S6.醇提取：将12重量份步骤S4中的滤渣加入50重量份70wt％的乙醇水溶液中，加热至60℃，提取3h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S7.人参籽提取物的制备：将5重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入7重量份步骤S1制得的萃取液、10重量份步骤S5制得的多糖提取物、7重量份步骤S6制得的醇提取物、2重量份22wt％的氨水和1重量份十四烷基苯磺酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
实施例3
本实施例提供一种人参籽提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：27MPa，萃取温度：40℃，CO2流量：10L/h，萃取时间：2h，所述夹带剂的添加量为2.5wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.7重量份复合酶，42℃酶解1.5h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2.5:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1.5％和2.2％，微缺氧条件下，39℃，60r/min，酶助发酵培养52h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2.5v/v％二氧化碳、6v/v％氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，39℃，60r/min活化培养15h，制得含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S4.水提取：将12重量份步骤S3中的发酵产物加入40重量份水中，加热至90℃，提取3h，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇至体系乙醇含量为75wt％，沉淀15h，离心，固体干燥，得到多糖提取物；
S6.醇提取：将11重量份步骤S4中的滤渣加入45重量份60wt％的乙醇水溶液中，加热至50℃，提取2h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S7.人参籽提取物的制备：将4重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入6重量份步骤S1制得的萃取液、8.5重量份步骤S5制得的多糖提取物、5.5重量份步骤S6制得的醇提取物、1.7重量份21wt％的氨水和0.7重量份十二烷基硫酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
实施例4
与实施例3相比，不同之处在于，复合酶为单一的β-淀粉酶。
实施例5
与实施例3相比，不同之处在于，复合酶为单一的果胶酶。
对比例1
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S1中未进行超临界流体萃取。
具体如下：
S1.将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉。
对比例2
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S2未加入复合酶。
具体如下：
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，留用。
对比例3
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S2中进行灭酶处理。
具体如下：
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.7重量份复合酶，42℃酶解1.5h，得到酶解产物，灭酶灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2.5:5。
对比例4
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S3中未接种副干酪乳杆菌。
具体如下：
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量为3.7％，微缺氧条件下，39℃，60r/min，酶助发酵培养52h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2.5v/v％二氧化碳、6v/v％氧气，余量为氮气。
对比例5
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S3中未接种鼠李糖乳杆菌。
具体如下：
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌菌种种子液的接种量为3.7％，微缺氧条件下，39℃，60r/min，酶助发酵培养52h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2.5v/v％二氧化碳、6v/v％氧气，余量为氮气。
对比例6
与实施例3相比，不同之处在于，未进行步骤S3。
具体如下：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：27MPa，萃取温度：40℃，CO2流量：10L/h，萃取时间：2h，所述夹带剂的添加量为2.5wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.7重量份复合酶，42℃酶解1.5h，干燥，得到酶解产物；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2.5:5；
S3.水提取：将12重量份步骤S2中的酶解产物加入40重量份水中，加热至90℃，提取3h，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S4.醇沉：向步骤S3中的水提取物中加入乙醇至体系乙醇含量为75wt％，沉淀15h，离心，固体干燥，得到多糖提取物；
S5.醇提取：将11重量份步骤S3中的滤渣加入45重量份60wt％的乙醇水溶液中，加热至50℃，提取2h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S6.人参籽提取物的制备：将4重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入6重量份步骤S1制得的萃取液、8.5重量份步骤S4制得的多糖提取物、5.5重量份步骤S5制得的醇提取物、1.7重量份21wt％的氨水和0.7重量份十二烷基硫酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
对比例7
与实施例3相比，不同之处在于，未进行S4和S5。
具体如下:
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：27MPa，萃取温度：40℃，CO2流量：10L/h，萃取时间：2h，所述夹带剂的添加量为2.5wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.7重量份复合酶，42℃酶解1.5h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2.5:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1.5％和2.2％，微缺氧条件下，39℃，60r/min，酶助发酵培养52h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2.5v/v％二氧化碳、6v/v％氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，39℃，60r/min活化培养15h，制得含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S4.醇提取：将11重量份步骤S3中的发酵产物加入45重量份60wt％的乙醇水溶液中，加热至50℃，提取2h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S5.人参籽提取物的制备：将4重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入6重量份步骤S1制得的萃取液、5.5重量份步骤S4制得的醇提取物、1.7重量份21wt％的氨水和0.7重量份十二烷基硫酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物.
对比例8
与实施例3相比，不同之处在于，未进行步骤S5。
具体如下：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：27MPa，萃取温度：40℃，CO2流量：10L/h，萃取时间：2h，所述夹带剂的添加量为2.5wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.7重量份复合酶，42℃酶解1.5h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2.5:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1.5％和2.2％，微缺氧条件下，39℃，60r/min，酶助发酵培养52h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2.5v/v％二氧化碳、6v/v％氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，39℃，60r/min活化培养15h，制得含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S4.水提取：将12重量份步骤S3中的发酵产物加入40重量份水中，加热至90℃，提取3h，过滤，滤渣留用，滤液干燥，得到水提取物；
S5.醇提取：将11重量份步骤S4中的滤渣加入45重量份60wt％的乙醇水溶液中，加热至50℃，提取2h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S6.人参籽提取物的制备：将4重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入6重量份步骤S1制得的萃取液、8.5重量份步骤S4制得的水提取物、5.5重量份步骤S5制得的醇提取物、1.7重量份21wt％的氨水和0.7重量份十二烷基硫酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
对比例9
与实施例3相比，不同之处在于，未进行步骤S6。
具体如下：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：27MPa，萃取温度：40℃，CO2流量：10L/h，萃取时间：2h，所述夹带剂的添加量为2.5wt％；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.7重量份复合酶，42℃酶解1.5h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2.5:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1.5％和2.2％，微缺氧条件下，39℃，60r/min，酶助发酵培养52h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2.5v/v％二氧化碳、6v/v％氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，39℃，60r/min活化培养15h，制得含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S4.水提取：将12重量份步骤S3中的发酵产物加入40重量份水中，加热至90℃，提取3h，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇至体系乙醇含量为75wt％，沉淀15h，离心，固体干燥，得到多糖提取物；
S6.人参籽提取物的制备：将4重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入6重量份步骤S1制得的萃取液、8.5重量份步骤S5制得的多糖提取物、1.7重量份21wt％的氨水和0.7重量份十二烷基硫酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
对比例10
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S7中未添加氯化钛和氨水。
具体如下：
S7.人参籽提取物的制备：向100重量份水中搅拌加入6重量份步骤S1制得的萃取液、8.5重量份步骤S5制得的多糖提取物、5.5重量份步骤S6制得的醇提取物和0.7重量份十二烷基硫酸钠，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
测试例1含量测试
将本发明实施例1-5和对比例1-10制得的人参籽提取物进行活性物质含量测定。
多糖采用苯酚硫酸法；蛋白质采用凯氏定氮法；总皂苷采用质量法(Standard ForGinseng Products Codex Stan 321-2015\CODEX ALIMENTARIUS)；总黄酮采用文献的方法：栗铭鸿,金铁,李官浩,等.元蘑醇提物不同极性部位有效成分含量及清除自由基活性[J].食品科技,2016,41(10):184-189。
结果见表1。
表1
组别 总多糖(mg/g) 总蛋白(mg/g) 总皂苷(mg/g) 总黄酮(mg/g)
实施例1 27.22 55.98 32.17 7.12
实施例2 27.28 56.10 32.53 7.22
实施例3 27.31 56.25 33.22 7.29
实施例4 24.53 49.89 29.84 6.32
实施例5 25.10 50.11 28.79 6.10
对比例1 26.82 54.87 30.42 5.79
对比例2 23.12 47.59 26.08 5.87
对比例3 26.40 54.61 30.01 6.52
对比例4 24.73 48.82 27.21 6.01
对比例5 24.42 48.75 27.05 5.92
对比例6 23.71 47.02 25.77 5.56
对比例7 0.89 27.12 30.77 6.72
对比例8 10.21 35.28 30.82 6.79
对比例9 26.78 53.42 19.12 3.25
对比例10 26.89 54.87 31.87 7.10
由上表可知，本发明实施例1-3制得的人参籽提取物含有丰富的活性物质。
测试例2对羟基自由基的抑制作用
样品溶液：本发明实施例1-5和对比例1-10制得的人参籽提取物配制成1g/L。
采用Fenton法，于96孔板中分别加入FeSO4(6mM)、样品溶液、H2O2(6mM)各20μL，静置10min，加入水杨酸溶液(6mM)20μL，静置30min，测定510nm处的吸光度A值，以蒸馏水作空白，每个样品3个复孔，计算羟自由基清除率。
清除率＝A空－(A样－A对)/A空。
A空为不加样品的A值，A对为不加水杨酸时的A值。
结果见表2。
表2
组别 ·OH清除率/％
实施例1 89.8
实施例2 90.3
实施例3 91.0
实施例4 87.2
实施例5 86.5
对比例1 88.7
对比例2 83.2
对比例3 87.0
对比例4 86.1
对比例5 85.8
对比例6 84.2
对比例7 85.5
对比例8 86.0
对比例9 81.9
对比例10 87.4
由上表可知，本发明实施例1-3制得的人参籽提取物具有较好的抑制羟基自由基的能力。
测试例3对UV照射下小鼠皮肤细胞活性影响
选择1d龄小鼠乳鼠，在背部正中剪开小口，钝性分离，剪下约0.5cm×1cm面积的皮肤，加入浓度为0.125％中性蛋白酶溶液，37℃下消化后，在37℃，5％CO2浓度条件下进行培养，取对数生长期细胞按2×104细胞/mL细胞密度接种在96孔板中，每孔加入100uL的细胞悬液，培养24h。
实验分空白对照组、模型组、阳性对照组(维生素E1g/L)、实施例1-5和对比例1-10组(1g/L)。
空白对照组给予普通培养液，模型组给予不含酚红的培养液，其他组按设置给药(也不含酚红)，除空白对照组外均置于紫外灯下进行分批次照射，照射剂量为100mJ/cm2。照射结束后，弃去旧培养基，模型组给于普通培养液，其他组按设置给药，继续培养48h。认定空白对照组存活率为100％。
结果见表3。
表3
组别 紫外照皮肤细胞存活率(％)
空白对照组 100
模型组 12.5
阳性对照组 40.2
实施例1 50.8
实施例2 51.2
实施例3 51.7
实施例4 48.9
实施例5 48.1
对比例1 46.8
对比例2 47.2
对比例3 50.0
对比例4 49.2
对比例5 48.9
对比例6 47.6
对比例7 48.1
对比例8 48.9
对比例9 45.7
对比例10 46.0
由上表可知，本发明实施例1-3制得的人参籽提取物对紫外诱导的细胞DNA损伤具有保护作用。
测试例4对皮肤超氧化物歧化酶SOD、丙二醛MDA含量的影响
取SPF级3月龄KM小鼠108只，每组6只，随机分成18组：空白对照组，模型组，实施例1-5组，对比例1-10组，阳性对照组。
将小鼠固定，用20％硫化钠脱去背部鼠毛，脱毛后迅速用大量沾有蒸馏水的消毒棉花擦干净硫化钠溶液。紫外照射前再用5％硫化钠除去新出幼毛。空白对照组不进行照射，其余各组按照射高度30cm，紫外强度100mJ/cm2每天照射UV 2h，每天不间隔持续2个月。
空白对照组和模型组每天在脱毛处皮肤涂抹生理盐水(1mL/cm2)。实施例1-5组，对比例1-10组每天在脱毛处皮肤涂抹相应的产品溶液(1mL/cm2)，所述产品溶液的浓度为0.5g/mL，阳性组每天涂抹浓度为0.5g/mL的维生素E(1mL/cm2)。
2个月后用颈椎脱臼法处死小鼠，取小鼠背部正中央皮肤，在生理盐水中清洗干净，除去非皮肤组织，将皮肤铺垫在滤纸上以吸干水分，称取皮肤组织进行匀浆，匀浆液离心，取上清液，按试剂盒说明方法测定皮肤SOD和MDA的含量。结果见表4。
表4
组别 SOD(U/mg) MDA(nmol/mg)
空白对照组 175.2±7.4 9.91±0.22
模型组 122.3±5.9* 16.24±0.89*
阳性对照组 148.2±6.2# 11.09±0.52#
实施例1 155.7±4.9# 10.12±0.49#
实施例2 157.4±5.1# 10.08±0.51#
实施例3 158.7±5.5# 10.04±0.44#
实施例4 150.1±4.8 10.56±0.57
实施例5 151.2±5.2 10.62±0.41
对比例1 152.4±6.0 10.37±0.42
对比例2 148.9±6.2 10.98±0.51
对比例3 149.4±5.8 10.67±0.48
对比例4 148.2±4.4 10.74±0.47
对比例5 147.8±5.3 10.79±0.56
对比例6 146.1±4.8 11.04±0.52
对比例7 145.9±4.6 11.12±0.48
对比例8 146.3±5.1 11.03±0.43
对比例9 146.7±5.0 11.01±0.49
对比例10 151.2±4.9 10.42±0.50
注释：*为与空白对照组相比，P<0.05；#为与模型组相比，P<0.05。
由上表可知，本发明实施例1-3制得的人参籽提取物对紫外线晒伤后的皮肤的中SOD含量明显提高，MDA含量明显降低。
实施例4、5与实施例3相比，复合酶为单一的β-淀粉酶或果胶酶。对比例2与实施例3相比，步骤S2未加入复合酶。活性物质含量下降，对羟基自由基的清除率下降，紫外诱导的细胞DNA损伤的保护作用下降，皮肤SOD含量下降，MDA含量提高。本发明萃取后的固体加入水中，加入复合酶酶解，复合酶包括果胶酶和β-淀粉酶，能够将人参籽中大部分的胶质结构以及淀粉类多糖等酶解成小分子，从而大大促进多糖和蛋白质的溶出率，大大提高了多糖和蛋白质的提取率。
对比例1与实施例3相比，步骤S1中未进行超临界流体萃取。黄酮类物质含量下降，紫外诱导的细胞DNA损伤的保护作用下降。本发明人参籽首先经过超临界流体萃取，具有萃取效率高、无溶剂残留、操作条件温和等优点，得到高纯度人参籽精油，可抑制中波紫外线诱导的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)MMP-1和MMP-13的产生达到抗光老化的作用。
对比例3与实施例3相比，步骤S2中进行灭酶处理。对比例4、5与实施例3相比，步骤S3中未接种副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌。对比例6与实施例3相比，未进行步骤S3。活性物质含量下降，对羟基自由基的清除率下降，紫外诱导的细胞DNA损伤的保护作用下降，皮肤SOD含量下降，MDA含量提高。本发明酶解后加入副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌酶助发酵，一方面有助于将底物降解成小分子便于发酵菌的发酵利用，同时，发酵菌也将植物细胞发酵降解，破坏细胞壁结构，大大促进了人参籽活性组分的溶出，从而大大提高了人参皂苷、人参蛋白肽、人参糖等的溶出，提高了后续人参多糖、人参多肽、人参皂苷、黄酮等的产率。
对比例7与实施例3相比，未进行S4和S5。对比例8与实施例3相比，未进行步骤S5。多糖含量下降，皮肤SOD含量下降，MDA含量提高。本发明进行水提醇沉，得到了高收率的人参多糖，人参多糖具有提高SOD，GSH-Px和CAT活力，降低MDA含量的作用能明显降低MDA含量，提高血清SOD、CAT、GSH-PX活性及皮肤羟脯氨酸(hydroxyproline，HYP)含量，从而大大提高了抗氧化效果，从而有效抑制的光氧老化。
对比例9与实施例3相比，未进行步骤S6。总皂苷、总黄酮含量下降，对羟基自由基的清除率下降，紫外诱导的细胞DNA损伤的保护作用下降，皮肤SOD含量下降，MDA含量提高。本发明将滤渣经过醇提取，得到大量的多种人参皂苷、黄酮等脂溶性化合物，人参皂苷Rd可抑制中波紫外线诱导的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)-1和MMP-13的产生达到抗光老化的作用，促进I型胶原合成。黄酮类化合物能够活化皮肤细胞，补充皮肤的水分，增强肌肤弹性，减少肌肤水分流失。人参水提物能有效提高超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)活性，降低过氧化脂质和脂褐素的含量，拮抗过氧化损伤，保护皮肤细胞对抗光老化。人参皂苷Rb1可通过促进皮肤成纤维细胞(HSF)增值调节皮肤胶原代谢，通过影响HSF蛋白质表达促进胶原合成、抑制胶原降解，从而提高胶原蛋白总量，人参皂苷Rg3对调节黑色素生成的信号分子Akt和细胞外信号调节激酶来减少黑色素含量和抑制酪氨酸酶的活性，是一种安全有效的皮肤美白剂。从而大大提高了人参籽提取物的抗氧化、抗光老化的效果。
对比例10与实施例3相比，步骤S7中未添加氯化钛和氨水。紫外诱导的细胞DNA损伤的保护作用下降。本发明将萃取液、多糖提取物、醇提取物混合加入水中，加入氯化钛和氨水，从而形成了蛋白肽-钛氧化物、多糖-钛氧化物组合物，该组合物可通过抑制酪氨酸酶而表现出美白功效，通过抑制酪氨酸酶的活性，从而抑制黑色素的生成，激活皮肤的新陈代谢、减少角质化、滋润和软化皮肤以及减轻皱纹。同时，形成的蛋白肽-钛氧化物、多糖-钛氧化物能够起到阻隔反射，具有高折光性和高光活性，起到了很好的抗紫外线效果以及美白皮肤的效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种人参籽提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：20-32MPa，萃取温度：35-45℃，CO2流量：7-12L/h，萃取时间：1-3h，所述夹带剂的添加量为2-3wt%；
S2.酶解：将步骤S1中的固渣加入水中，加入复合酶酶解，得到酶解产物，灭菌，留用；所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2-3:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，酶助发酵培养，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
S4.水提取：将步骤S3中的发酵产物加入水中，加热提取，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇，沉淀，离心，干燥，得到多糖提取物；
S6.醇提取：将步骤S4中的滤渣加入乙醇溶液中，加热提取，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S7.人参籽提取物的制备：将氯化钛溶于水，搅拌加入步骤S1制得的萃取液、步骤S5制得的多糖提取物、步骤S6制得的醇提取物、氨水和表面活性剂，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物；所述氯化钛、萃取液、多糖提取物、醇提取物、氨水和表面活性剂的质量比为3-5:5-7:7-10:4-7:1.5-2:0.5-1。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述酶解的条件为40-45℃，酶解1-2h。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，38-40℃，50-70r/min活化培养12-18h，制得含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1-2%和1.5-3%，所述酶助发酵培养的条件为微缺氧条件下，38-40℃，50-70r/min，酶助发酵培养48-56h，所述微缺氧条件为2-3v/v%二氧化碳、5-7v/v%氧气，余量为氮气。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述发酵产物和水的质量比为10-15:30-50，所述加热至80-100℃，提取2-4h；步骤S5中所述乙醇加入至体系乙醇含量为70-80wt%，沉淀12-18h。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S6中所述乙醇溶液为浓度为50-70wt%的乙醇水溶液，所述滤渣和乙醇溶液的质量比为10-12:40-50，所述加热提取的温度为40-60℃，时间为1-3h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S7中所述氨水的浓度为20-22wt%，所述表面活性剂选自卵磷脂、甜菜碱、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基磺酸钠、十四烷基磺酸钠、十四烷基苯磺酸钠、十四烷基硫酸钠、十六烷基苯磺酸钠、十六烷基磺酸钠、十六烷基硫酸钠、十八烷基磺酸钠、十八烷基苯磺酸钠、十八烷基硫酸钠中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1.超临界流体萃取：将人参籽洗净，干燥，粉碎，得到人参籽粉，进行超临界流体萃取，乙醇为夹带剂，回收乙醇，得到萃取液，固渣留用；
所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：20-32MPa，萃取温度：35-45℃，CO2流量：7-12L/h，萃取时间：1-3h，所述夹带剂的添加量为2-3wt%；
S2.酶解：将10重量份步骤S1中的固渣加入100重量份水中，加入0.5-1重量份复合酶，40-45℃酶解1-2h，得到酶解产物，灭菌，留用；
所述复合酶为β-淀粉酶和果胶酶的混合物，质量比2-3:5；
S3.酶助发酵：向步骤S2中的酶解产物中接种活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液，所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的接种量分别为1-2%和1.5-3%，微缺氧条件下，38-40℃，50-70r/min，酶助发酵培养48-56h，灭菌灭酶，干燥，得到发酵产物；
所述微缺氧条件为2-3v/v%二氧化碳、5-7v/v%氧气，余量为氮气；
所述活化的副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种种子液的制备方法如下：将副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别接种至高氏培养基中，38-40℃，50-70r/min活化培养12-18h，制得含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液；
S4.水提取：将10-15重量份步骤S3中的发酵产物加入30-50重量份水中，加热至80-100℃，提取2-4h，过滤，滤渣留用，得到水提取物；
S5.醇沉：向步骤S4中的水提取物中加入乙醇至体系乙醇含量为70-80wt%，沉淀12-18h，离心，固体干燥，得到多糖提取物；
S6.醇提取：将10-12重量份步骤S4中的滤渣加入40-50重量份50-70wt%的乙醇水溶液中，加热至40-60℃，提取1-3h，过滤，回收乙醇，干燥，得到醇提取物；
S7.人参籽提取物的制备：将3-5重量份氯化钛溶于100重量份水，搅拌加入5-7重量份步骤S1制得的萃取液、7-10重量份步骤S5制得的多糖提取物、4-7重量份步骤S6制得的醇提取物、1.5-2重量份20-22wt%的氨水和0.5-1重量份表面活性剂，搅拌混合均匀，冷冻干燥，得到人参籽提取物。
8.一种如权利要求1-7任一项所述的制备方法制得的人参籽提取物。
CN202310764449.4A 2023-06-27 2023-06-27 一种人参籽提取物及其制备方法 Active CN116617137B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310764449.4A CN116617137B (zh) 2023-06-27 2023-06-27 一种人参籽提取物及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310764449.4A CN116617137B (zh) 2023-06-27 2023-06-27 一种人参籽提取物及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN116617137A CN116617137A (zh) 2023-08-22
CN116617137B true CN116617137B (zh) 2023-10-20

Family

ID=87641926

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310764449.4A Active CN116617137B (zh) 2023-06-27 2023-06-27 一种人参籽提取物及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116617137B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117883347B (zh) * 2024-03-13 2024-05-28 广州梵之容化妆品有限公司 用于制备稀有人参皂苷的提取转化方法及其应用

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102349934A (zh) * 2011-10-24 2012-02-15 周伯扬 一种虫草菌丝体有效成分的提取工艺
KR20130090029A (ko) * 2012-02-03 2013-08-13 이현기 증숙 인삼씨를 주로 하는 피부 외용제 조성물 및 그를 이용한 증숙 인삼씨를 주로 하는 피부 외용제 제조방법
CN104292357A (zh) * 2014-11-11 2015-01-21 济南凯因生物科技有限公司 一种灵芝多糖的提取方法
CN104745287A (zh) * 2015-03-17 2015-07-01 吉林农业大学 一种人参子油的提取方法
KR20150084397A (ko) * 2014-01-14 2015-07-22 한국식품연구원 발효인삼종자 오일을 함유하는 미백용 조성물
CN105077464A (zh) * 2014-05-19 2015-11-25 金英旭 利用复合微生物发酵液的植物乳酸菌发酵饮料的制备方法
CN105232600A (zh) * 2015-10-22 2016-01-13 伽蓝（集团）股份有限公司 一种人参籽提取物及其制备方法和应用
CN108126099A (zh) * 2018-01-30 2018-06-08 绵阳师范学院 含麦冬的原料药发酵组合物及其制备方法和用途
KR20180064269A (ko) * 2016-12-02 2018-06-14 주식회사 아이피어리스 활성 단백질의 추출방법
CN110573029A (zh) * 2017-05-15 2019-12-13 姜承赞 使用乳酸菌的天然产物酶及其制造方法

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102349934A (zh) * 2011-10-24 2012-02-15 周伯扬 一种虫草菌丝体有效成分的提取工艺
KR20130090029A (ko) * 2012-02-03 2013-08-13 이현기 증숙 인삼씨를 주로 하는 피부 외용제 조성물 및 그를 이용한 증숙 인삼씨를 주로 하는 피부 외용제 제조방법
KR20150084397A (ko) * 2014-01-14 2015-07-22 한국식품연구원 발효인삼종자 오일을 함유하는 미백용 조성물
CN105077464A (zh) * 2014-05-19 2015-11-25 金英旭 利用复合微生物发酵液的植物乳酸菌发酵饮料的制备方法
CN104292357A (zh) * 2014-11-11 2015-01-21 济南凯因生物科技有限公司 一种灵芝多糖的提取方法
CN104745287A (zh) * 2015-03-17 2015-07-01 吉林农业大学 一种人参子油的提取方法
CN105232600A (zh) * 2015-10-22 2016-01-13 伽蓝（集团）股份有限公司 一种人参籽提取物及其制备方法和应用
KR20180064269A (ko) * 2016-12-02 2018-06-14 주식회사 아이피어리스 활성 단백질의 추출방법
CN110573029A (zh) * 2017-05-15 2019-12-13 姜承赞 使用乳酸菌的天然产物酶及其制造方法
CN108126099A (zh) * 2018-01-30 2018-06-08 绵阳师范学院 含麦冬的原料药发酵组合物及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN116617137A (zh) 2023-08-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8545905B2 (en) Whitening cosmetic composition containing green tea extract
JP5467106B2 (ja) 緑豆発酵−酵素抽出液を含む皮膚老化防止用化粧料組成物
CN110292552B (zh) 一种具有抗敏修复功效的复方植物提取物及其制备方法和应用
CN108245479B (zh) 一种含有乳双歧杆菌发酵活性提取物的面膜
KR101041403B1 (ko) 항산화 및 미백용 화장료 조성물
KR100727743B1 (ko) 캄페롤을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용, 피부 장벽기능 강화용, 및 피부 각질형성세포 분화 유도용 피부 외용 화장료 조성물
CN110420143B (zh) 一种含有九品香水莲花提取物的凝露及其制备方法
CN116617137B (zh) 一种人参籽提取物及其制备方法
CN103565729A (zh) 一种黑果枸杞保湿修复凝露及其制备方法
CN111789787B (zh) 一种具有抗衰功效的组合物及其化妆品
CN108042436B (zh) 蓝铜胜肽抗衰保湿精华霜
CN111419760A (zh) 一种黑老虎鲜叶提取液及其制备方法和应用
JP7466246B1 (ja) シワ改善剤及びその製造方法
CN113694142A (zh) 一种利用益生菌发酵抗衰老中药组方的制备方法
CN113350233A (zh) 一种抗衰组合物及其制备方法及用途
CN116807952A (zh) 一种植物提取活性组合物及其制备方法
KR20120054298A (ko) 발효 콩잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물
KR102010235B1 (ko) 피부보습 및 피부미백 기능을 갖는 화장료 조성물
CN108888554B (zh) 具有嫩肤淡斑的干细胞美容乳液及其制备方法
KR20200054590A (ko) 미강 발효 고형분을 유효성분으로 함유한 피부 장벽 강화용 화장료 조성물
CN111617025B (zh) 美白祛斑抗糖化的发酵产物化妆品
KR102054100B1 (ko) 뿌리식물 혼합 발효추출물을 함유하는 피부개선용 화장료 조성물
CN113940902A (zh) 一种保湿化妆品的氨基酸添加物及其制备方法
KR20210144725A (ko) 항노화제, 항산화제, 항염증제 및 미백제, 그리고 화장료
CN117338626B (zh) 一种抗衰老美白保湿组合物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant