CN116590204B - 副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用 - Google Patents
副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116590204B CN116590204B CN202310850231.0A CN202310850231A CN116590204B CN 116590204 B CN116590204 B CN 116590204B CN 202310850231 A CN202310850231 A CN 202310850231A CN 116590204 B CN116590204 B CN 116590204B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus paracasei
- paracasei
- product
- aging
- mice
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 title claims abstract description 54
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 230000032683 aging Effects 0.000 title abstract description 31
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims abstract description 13
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000013588 oral product Substances 0.000 claims description 20
- 229940023486 oral product Drugs 0.000 claims description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 14
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 claims description 11
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 5
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 4
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 238000012136 culture method Methods 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- JEBFVOLFMLUKLF-IFPLVEIFSA-N Astaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C(=C/C=C/C1=C(C)C(=O)C(O)CC1(C)C)/C)C=CC=C(/C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)C(=O)C(O)CC2(C)C JEBFVOLFMLUKLF-IFPLVEIFSA-N 0.000 claims description 2
- ACTIUHUUMQJHFO-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q10 Natural products COC1=C(OC)C(=O)C(CC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C)=C(C)C1=O ACTIUHUUMQJHFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000015781 Dietary Proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010010256 Dietary Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 claims description 2
- JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N Lycophyll Natural products OC/C(=C/CC/C(=C\C=C\C(=C/C=C/C(=C\C=C\C=C(/C=C/C=C(\C=C\C=C(/CC/C=C(/CO)\C)\C)/C)\C)/C)\C)/C)/C JEVVKJMRZMXFBT-XWDZUXABSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 2
- 239000001168 astaxanthin Substances 0.000 claims description 2
- 235000013793 astaxanthin Nutrition 0.000 claims description 2
- MQZIGYBFDRPAKN-ZWAPEEGVSA-N astaxanthin Chemical compound C([C@H](O)C(=O)C=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C(=O)[C@@H](O)CC1(C)C MQZIGYBFDRPAKN-ZWAPEEGVSA-N 0.000 claims description 2
- 229940022405 astaxanthin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000017471 coenzyme Q10 Nutrition 0.000 claims description 2
- ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N coenzyme Q10 Chemical compound COC1=C(OC)C(=O)C(C\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C)=C(C)C1=O ACTIUHUUMQJHFO-UPTCCGCDSA-N 0.000 claims description 2
- 229940110767 coenzyme Q10 Drugs 0.000 claims description 2
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 2
- 239000001751 lycopene Substances 0.000 claims description 2
- 235000012661 lycopene Nutrition 0.000 claims description 2
- OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N lycopene Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)CCC=C(C)C OAIJSZIZWZSQBC-GYZMGTAESA-N 0.000 claims description 2
- 229960004999 lycopene Drugs 0.000 claims description 2
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 claims description 2
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 claims description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- 229940100691 oral capsule Drugs 0.000 claims description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 2
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 2
- ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N trans-isorenieratene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/c1c(C)ccc(C)c1C)C=CC=C(/C)C=Cc2c(C)ccc(C)c2C ZCIHMQAPACOQHT-ZGMPDRQDSA-N 0.000 claims description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 claims 1
- 235000003687 soy isoflavones Nutrition 0.000 claims 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 28
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 abstract description 24
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 abstract description 22
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 abstract description 22
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 19
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 7
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract description 4
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 abstract description 4
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 abstract description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 51
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 34
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 30
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 23
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 23
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 20
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 17
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 17
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 17
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 17
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 16
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 16
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 16
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 16
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 16
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 15
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 15
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 8
- 102100022397 Nitric oxide synthase, brain Human genes 0.000 description 7
- 101710111444 Nitric oxide synthase, brain Proteins 0.000 description 7
- 101710090055 Nitric oxide synthase, endothelial Proteins 0.000 description 7
- 102100028452 Nitric oxide synthase, endothelial Human genes 0.000 description 7
- 108010021188 Superoxide Dismutase-1 Proteins 0.000 description 7
- 102000008221 Superoxide Dismutase-1 Human genes 0.000 description 7
- 102100032891 Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial Human genes 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 7
- 108010045815 superoxide dismutase 2 Proteins 0.000 description 7
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 description 6
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 6
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 5
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 5
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 5
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 5
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- -1 GSH-Px Proteins 0.000 description 4
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 4
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 4
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 3
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 3
- 230000006851 antioxidant defense Effects 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 229940105657 catalase Drugs 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 2
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002633 protecting effect Effects 0.000 description 2
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 2
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 101100029855 Arabidopsis thaliana PIP1.4 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 206010020651 Hyperkinesia Diseases 0.000 description 1
- 208000000269 Hyperkinesis Diseases 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 201000001431 Hyperuricemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000878006 Miscanthus sinensis Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 240000000103 Potentilla erecta Species 0.000 description 1
- 235000016551 Potentilla erecta Nutrition 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 238000010818 SYBR green PCR Master Mix Methods 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000000980 acid dye Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003627 anti-cholesterol Effects 0.000 description 1
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007621 bhi medium Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008809 cell oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 235000019264 food flavour enhancer Nutrition 0.000 description 1
- 230000008717 functional decline Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 210000001280 germinal center Anatomy 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N isoflavone Chemical compound C=1OC2=CC=CC=C2C(=O)C=1C1=CC=CC=C1 GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000008897 memory decline Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Mycology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明提供副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用，属于微生物领域。本发明公开了一株副干酪乳酪杆菌（Lacticaseibacillus paracasei），于2023年01月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.26439。本发明提供的副干酪乳酪杆菌3Q225能够提高D‑半乳糖诱导小鼠的氧化衰老模型中多种抗氧化相关酶的活性，并降低了氧化衰老小鼠模型血清和肝脏中丙二醛的水平，减轻氧化性衰老损伤，效果优于现有菌株和VC，具有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于微生物领域，具体涉及副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用。
背景技术
随着人类寿命的延长，衰老是不可避免的，这是压力和劳累、伤害和感染、免疫反应受损、营养不良、代谢紊乱以及过失和滥用药物造成的结果。衰老与许多疾病密切相关，包括高血压、2型糖尿病、动脉粥状硬化和阿尔茨海默病，这些疾病的发病可以通过延迟衰老来减缓。
抗氧化是抗衰老的一个方向，但合成抗氧化剂对于人体肝脏、肺部、脾部都有不利影响。有些人口服抗氧化剂后，存在高铁红细胞贫血。如果服用抗氧化剂量超标，就会出现腹泻、肠蠕动亢进、腹痛以及消化道出血等症状，还会引起高尿酸血症等副作用。开展具有抗氧化抗衰老且安全的产品十分必要，益生菌是当前研究一个方向。
益生菌中较为常用的菌是乳酸菌（LAB）。LAB在酸奶中发挥着重要作用，因为这些细菌产生的有机酸，包括乳酸，可以作为天然防腐剂和增味剂。LAB作为益生菌的接受度越来越高，它有助于刺激宿主的免疫系统，降低癌症风险，提供抗高血压、抗炎、抗糖尿病、抗氧化、免疫调节、抗胆固醇或微生物组调节，同时防止病原微生物的感染。乳酸菌，包括乳杆菌和双歧杆菌，已经被认为可以防止D-半乳糖诱导的氧化应激。
申请号为202211367692 .4的中国专利中公开了一株副干酪乳杆菌及其应用，涉及微生物技术领域。该发明公开的副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)，该菌株被命名为GforU-31，其保藏编号为CCTCC No:M20221354的副干酪乳杆菌。实验表明，GforU-31具有促进细胞增殖、抗衰老、提升皮肤抗菌能力的功能，可用于制备食品、药品、化妆品等。
申请号为202011038787 .2的中国专利中公开了具有抗氧化功能的副干酪乳杆菌(Lactobacillus Paracasei)ZJUIDS05及应用。保藏号为CGMCC NO .20515，其具有很强的体内和体外抗氧化能力。该副干酪乳杆菌ZJUIDS05的用途是：制备具有抗氧化功能的活菌制剂，制备具有抗氧化功能的各类产品。
但以上现有技术均是针对过氧化氢诱导的氧化损伤，与自然衰老的机制相去较远，其实际抗氧化抗衰老作用并不能达到预期。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种新筛菌株，具体为一株副干酪乳酪杆菌，并通过对小鼠血清和组织的分析，观察到副干酪乳酪杆菌3Q225对氧化衰老的抑制作用，验证了其抗氧化和抗衰老作用，以期扩展抗衰老和抗氧化方向的益生菌种质资源，为进一步深入人体研究和产业发展奠定了理论基础。
一方面，本发明提供了一株副干酪乳酪杆菌（Lacticaseibacillus paracasei）。
所述的副干酪乳酪杆菌保藏编号为CGMCC NO.26439，于2023年01月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
所述的副干酪乳酪杆菌生理特征为：革兰氏阳性，菌体呈杆状，无芽胞，菌落圆形，接触酶阴性，兼性厌氧，蛋白水解活力较高。
另一方面，本发明提供了前述的副干酪乳酪杆菌的培养方法。
所述的培养方法中包括将前述副干酪乳酪杆菌接种在培养基中进行培养。
所述的培养基的类型可以是固体培养基、半固体培养基或液体培养基。
所述的培养基包括但不限于：MRS培养基、BHI培养基、M17培养基。
所述的培养基也可以是根据现有技术中的培养基针对上述副干酪乳酪杆菌进行优化的培养基。
所述的培养条件可以是：37℃，厌氧或兼性厌氧培养24小时。
所述的培养条件也可以是根据现有技术针对上述副干酪乳酪杆菌进行优化的条件，包括但不限于温度、时间、补料、接种量、搅拌程度、氧含量、二氧化碳含量等。
本发明同时提供了前述的培养方法制备的产物。
所述的产物中包括副干酪乳酪杆菌。
所述的产物包括但不限于发酵液、发酵液上清、发酵液沉淀、冻干粉、活菌、死菌中的任意一种或多种。
再一方面，本发明提供了前述的副干酪乳酪杆菌或产物在抗衰老或抗皮肤氧化中的应用。
具体地，用于制备抗衰老或抗皮肤氧化的产品。
所述的衰老的表现包括但不限于：皮肤松弛、消化功能减退、记忆力下降、毛发变白、骨关节退变等。
所述的氧化可以是皮肤氧化，皮肤氧化表现包括但不限于：皮肤蜡黄、嘴角暗沉、毛孔粗大、色斑、皮肤干燥粗糙。
本发明同时提供包括前述的副干酪乳酪杆菌或产物的抗衰老或抗氧化的口服产品。
具体地，所述的口服产品可以是药品、食品或保健品。
所述的药品、食品、保健品满足国家质量标准。
优选地，所述的口服产品中可以包括107CFU/g或107CFU/mL以上的副干酪乳酪杆菌。
所述的口服产品中可以包括108-1011CFU/g或108-1011CFU/mL的副干酪乳酪杆菌。优选地，所述的口服产品中可以包括109-1010CFU/g或109-1010CFU/mL的副干酪乳酪杆菌。
事实上，所述的口服产品中的副干酪乳酪杆菌含量可以调整，具体的副干酪乳酪杆菌摄入量可以根据口服产品的服用量进行调整，当口服产品中的副干酪乳酪杆菌含量较低时，可以通过增加口服产品服用量保证足量副干酪乳酪杆菌的摄入。
所述的口服产品中还可以包括其他抗氧化或者抗衰老成分已发挥共同作用。
所述的共同作用可以是相加作用或协同作用。
具体地，如还可以包括大豆异黄酮、番茄红素、虾青素、维生素、辅酶Q10、烟酰胺中的一种或多种。
所述的抗氧化或抗衰老成分还包括选自植物提取物、动物提取物或中药提取物。
所述的口服产品中还可以包括辅料。
所述的辅料可以是药学上可接受的载体或赋形剂，也可以是食品或保健品领域常规的辅料或添加剂。
所述的辅料可以选自：淀粉、低聚糖、蛋白类、膳食纤维、香辛料、调味剂、调香剂、调色剂中的一种或多种。
在一些实施例中，所述的口服产品可以是口服液或口服胶囊。
本发明的有益效果：
本发明提供的副干酪乳酪杆菌3Q225能够提高D-半乳糖诱导小鼠的氧化衰老模型中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽（GSH）的活性，同时降低了氧化衰老小鼠模型血清和肝脏中丙二醛（MDA）的水平。病理观察显示，副干酪乳酪杆菌3Q225减轻了氧化性衰老小鼠的肝脏、脾脏和皮肤的损伤。本发明的副干酪乳酪杆菌3Q225能够比保加利亚乳杆菌（LB）和维生素C更好地保护D-半乳糖诱导的衰老模型免受氧化应激。
保藏说明
菌种名称：副干酪乳酪杆菌3Q225（TMPC 3Q225）；
分类命名：副干酪乳酪杆菌Lacticaseibacillus paracasei；
保藏编号：CGMCC NO.26439；
保藏时间：2023年01月09日；
保藏中心：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
附图说明
图1为小鼠血清中SOD、GSH、GSH-Px、CAT和MDA的水平。
图2为小鼠肝脏中SOD、GSH、GSH-Px、CAT和MDA的水平。
图3为小鼠肝脏的H&E病理观察（组织学显微照片）。
图4为小鼠脾脏的H&E病理观察（组织学显微照片）。
图5为小鼠皮肤的H&E病理观察（组织学显微照片）。
图6为小鼠肝脏组织中SOD1、SOD2、CAT、eNOS、nNOS和iNOS的mRNA表达水平。
图7为小鼠脾脏组织中SOD1、SOD2、CAT、eNOS、nNOS和iNOS的mRNA表达水平。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
以下实施例中，所采用的动物验证模型为D-半乳糖诱导的衰老模型，D-半乳糖是一种可以控制衰老的药剂，D-半乳糖诱导的衰老模型与自然衰老相似，并已被广泛用于动物建模。这个模型的机制是，细胞内的半乳糖被还原成半乳糖醇，不能进一步降解，半乳糖醇的积累扰乱了细胞的新陈代谢，并诱导产生活性氧（ROS），导致细胞损伤和衰老。
实施例1
（1）实验室菌种
从中国云南省德宏傣族景颇族自治州芒市的酸黄笋分离出副干酪乳酪杆菌3Q225，鉴定后保存在中国微生物菌种保藏中心，分类命名为Lacticaseibacillus paracasei，保藏编号为CGMCC NO.26439。德氏乳杆菌保加利亚亚种（LB，CGMCC 1.16075）从中国微生物菌种保藏中心获得，作为与副干酪乳酪杆菌3Q225的对比菌株。
（2）氧化诱导衰老的动物模型
60只昆明（KM）小鼠（6周龄，雌性，20-25g）购自重庆医科大学实验动物中心（中国重庆）。给予它们自由的饮食和水，并适应实验室环境。一周后，将所有小鼠随机分为6组（n=10/组）：正常组、对照组（模型组）、维生素C（Vc）、德氏乳杆菌保加利亚亚种（LB）、副干酪乳酪杆菌3Q225处理的低剂量组（3Q225-L）、副干酪乳酪杆菌3Q225处理的高剂量组（3Q225-H）。在前三周，正常组和对照组没有接受任何处理，LB组的小鼠每天以2.0×109cfu/kg体重的浓度灌服LB；3Q225-L组和3Q225-H组的小鼠每天分别被给予2.0×108cfu/kg体重和2.0×109cfu/kg体重的副干酪乳酪杆菌3Q225；Vc组的小鼠以每天100mg/kg体重的浓度灌服维生素C（灌服体积与其他组相当）。三周后，除正常组外，所有组的小鼠每天腹腔注射浓度为120mg/kg体重的D-半乳糖，持续六周。最后，所有小鼠禁食24小时，并以颈椎脱位法处死。获得血液、脾脏、皮肤和肝脏用于后续实验。
（3）血清和肝脏中SOD、GSH、GSH-Px、CAT和MDA水平的测定
取小鼠血液，在4℃下以4500r/min离心15min，制备血清，血清样品保存于-80℃备用。血清和肝脏中的超氧化物歧化酶（SOD，货号：A001-1-1）、谷胱甘肽（GSH，货号：A005-1-1）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px，货号：A005-1-1）、过氧化氢酶（CAT，货号：A007-2-1）和丙二醛（MDA，货号：A003-1-1）水平由试剂盒（南京建成生物工程研究所，江苏南京）测定。
（4）皮肤、肝脏和脾脏组织的病理观察
每只小鼠各取0.5 cm2的皮肤、肝脏和脾脏，立即在10%福尔马林溶液中固定48小时。经过脱水、透明处理、浸蜡、包埋和切片后，进行H&E染色，在光学显微镜下观察这些组织的形态变化。
（5）定量PCR（qPCR）检测
根据说明书，用TRIzol试剂（Invitrogen,Waltham, MA, USA）提取肝脏和脾脏组织总RNA。总RNA的纯度和浓度由超微分光光度计（Nano-100，All For Life Science，杭州，中国）测定。总RNA样品被用作模板，通过逆转录生成cDNA；根据转录试剂盒（ ThermoFisherScientific）的说明，所有样品中cDNA的浓度被调整到1pg/μL的相同水平。PCR反应的总体积为20μL，其中包括1μL的cDNA，10μL的荧光核酸染料预混液（SYBR Green PCRMaster Mix，购自Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA），7.8μL的ddH2O和0.6μL的每种引物。PCR参数如下：95℃60秒；95℃15秒，55℃30秒，72℃35秒，40个循环；95℃30秒，55℃35秒。以GAPDH为内参，用2-ΔΔCt方法计算目标基因的相对表达量（Zhang等，2018）。
（6）统计分析
实验3次重复，结果为平均数±标准差。用SPSS软件（IBM公司，North Castle, NY,USA）进行统计分析，采用单向方差分析（ANOVA）和LSD检验。P<0.05的值被认为是显著的。所有的测量都至少重复三次，数据以平均值±标准差表示。所有数字均由Origin 8.0软件绘制。
（7）结果
SOD、GSH、GSH-Px、CAT和MDA的水平：
如图1-2所示，与正常组小鼠相比，模型组小鼠血清和肝脏中的MDA含量最高，SOD、GSH、GSH-Px和CAT的含量最低。用LB、副干酪乳酪杆菌3Q225或维生素C处理后，氧化诱导衰老小鼠的MDA含量下降，SOD、GSH、GSH-Px和CAT的含量升高。特别是高剂量副干酪乳酪杆菌3Q225组小鼠的MDA、SOD、GSH、GSH-Px和CAT的指标水平与正常组非常接近，说明副干酪乳酪杆菌3Q225菌对小鼠的衰老指标的延缓作用比LB和维生素C好。
小鼠肝脏、脾脏和皮肤的病理观察：
肝脏的组织学显微照片见图3。正常组的小鼠，肝细胞形态规则，大小和染色均匀，没有炎症的迹象，肝细胞线排列有序，边界清晰，中心静脉呈放射状分布。然而，与正常组的小鼠相比，对照组的小鼠所含的肝细胞排列紊乱，形态不规则，细胞边界消失，中心静脉形状不规则，细胞肿胀，并有广泛的炎症浸润痕迹。与对照组的小鼠相比，用维生素C、LB或副干酪乳酪杆菌3Q225治疗的小鼠显示出这种化学损害的减少。在副干酪乳酪杆菌3Q225治疗组中，肝脏损伤的程度比对照组（仅D-半乳糖治疗）要轻，因此副干酪乳酪杆菌3Q225在预防肝脏萎缩方面的疗效更好。此外，保护肝脏的效果与剂量有关。
脾脏的组织学显微照片见图4。正常组中，脾囊平坦，脾小梁结构正常，红髓和白髓的界限清晰，未见明显的眼病。对照组与正常组相比，脾脏失去了正常的组织形态和细胞组织，伴有红髓窦扩张，大量红细胞，白髓淋巴细胞减少，红髓索变窄，细胞密度降低。与对照组相比，经维生素C、LB或副干酪乳酪杆菌3Q225处理后，脾脏组织形态明显改善，表现为红髓和白髓界限清晰，脾囊扁平，生发中心明显，细胞组织良好。各治疗组显示出与正常组小鼠相似的显微照片，其中副干酪乳酪杆菌3Q22显示出最佳效果。
皮肤的组织学显微照片显示在图5。正常皮肤组织的表皮结构清晰而完整.真皮中的胶原纤维含量丰富。真皮和表皮的边界清晰而完整。真皮层中的胶原纤维含量丰富，脂肪空泡的数量正常。与正常组的小鼠相比，对照组的小鼠胶原纤维含量减少，脂肪空泡的数量增加，真皮内发生内渗，真皮和表皮之间的界限模糊不清。与对照组小鼠相比，用维生素C、LB或副干酪乳酪杆菌3Q225治疗可明显改善皮肤组织脂质空泡、内渗现象和表皮与真皮之间的界限，缓解D-半乳糖诱导的衰老小鼠的皮肤病变。另外，副干酪乳酪杆菌3Q225-H 组的小鼠比LB组和Vc组的小鼠的显微照片更接近于正常小鼠，因此副干酪乳酪杆菌3Q225 在预防皮肤病变方面的疗效更好。
小鼠肝脏氧化相关基因的表达：
小鼠肝脏组织中SOD1、SOD2、CAT、eNOS、nNOS和iNOS的mRNA表达水平见图6。
结果显示，正常组小鼠肝脏中SOD1、SOD2、CAT、eNOS、nNOS的mRNA水平最高，iNOS的mRNA水平最低。对照组的上述基因的mRNA表达水平与正常组的趋势相反。经维生素C、LB或3Q225处理后，衰老小鼠的SOD1、SOD2、CAT、eNOS、nNOS和iNOS的表达得到明显改善（P＜0.05），其中高剂量的3Q225效果最好。
小鼠脾脏氧化相关基因的表达
小鼠脾脏组织中SOD1、SOD2、CAT、eNOS、nNOS和iNOS的mRNA表达水平见图7。
脾脏组织的qPCR结果与肝脏的结果相似。对照组小鼠脾脏组织中SOD1、SOD2、CAT、eNOS和nNOS的mRNA表达最弱，但正常组小鼠的这些表达最强。与对照组相比，维生素C、LB或3Q225处理可以增加表达。3Q225处理的小鼠的表达比维生素C和LB处理的小鼠强，并接近于正常小鼠，维生素C处理的小鼠也比LB处理的小鼠表达强。
（8）讨论
乳酸菌（LAB）因其众多的益生特性而被广泛应用于食品行业，成为日常生活中相对不可缺少的健康食品。从发酵食品中分离的LAB菌株可能具有抗氧化活性。因此，本发明重点研究了从传统发酵食品中分离的副干酪乳酪杆菌3Q225菌株的抗氧化活性。通过连续皮下注射D-半乳糖已被证明可以诱发建立小鼠的衰老模型，导致小鼠体内活性氧自由基（ROS）的增加和抗氧化酶活性的降低，自由基的增加可能导致衰老相关机制的退化，最终导致氧化应激的增加，加速衰老过程。
病理观察是观察器官、组织或细胞的形态变化，以确定身体的病理变化。皮肤、脾脏和肝脏可以反映出身体因衰老而发生的特征性变化。根据这项研究，与正常组小鼠相比，衰老组的肝脏和脾脏组织萎缩，皮肤受损。维生素C、LB或副干酪乳酪杆菌3Q225处理后，组织的异常形态得到明显改善，其中副干酪乳酪杆菌3Q225的改善效果最明显。副干酪乳酪杆菌3Q225治疗的小鼠的形态组织最接近于正常组。
在人体的生物氧化过程中，会产生大量的自由基。体内自由基的平衡是由一些抗氧化防御系统完成的，包括GSH-Px、SOD、CAT、还原GSH和维生素C，它们的协同作用将体内多余的自由基转化为氧分子和水分子，从而起到抗氧化的作用。乳酸菌具有抗氧化活性，具有清除自由基的功能，可以协助抗氧化酶完成抗氧化作用。此外，细菌在体内代谢过程中会释放抗氧化酶，如超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶，以阻止氧化过程。临床研究表明，在接受抗氧化治疗的患者中，SOD、GSH-Px、GSH、CAT和MDA水平发生变化。SOD保护细胞免受氧化造成的损害，间接反映其抗氧化活性。GSH-Px可以清除活性氧和羟基自由基诱发的脂质过氧化，保护细胞膜结构和功能的完整性。在本发明中，副干酪乳酪杆菌3Q225能显著提高小鼠血清和肝脏组织中的SOD水平和GSH-Px活力。作为非酶抗氧化防御系统之一，GSH负责在谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的催化下还原过氧化氢。与正常组相比，肝脏GSH含量明显下降，表明D-半乳糖造成了严重的细胞氧化应激。此外，CAT水平也明显降低，表明衰老模型小鼠的总抗氧化能力下降。在本发明中，副干酪乳酪杆菌3Q225、保加利亚乳杆菌LB和维生素C被证明可以抑制肝脏和血清GSH、GSH-Px和CAT水平的下降。副干酪乳酪杆菌3Q225的抗氧化作用高于其他实验组。有研究表明，益生菌能明显改善高脂血症小鼠的抗氧化能力，提高SOD、GSH-PX、GPT和GOT等抗氧化酶的活性。因此，进一步证明了乳酸菌具有增强抗氧化酶合成的能力。MDA是脂质过氧化的最终产物之一，会引起蛋白质和核酸等生物大分子的交联聚合，并具有细胞毒性和基因毒性作用。因此，MDA的水平是氧化损伤和衰老的一个重要指标。本发明中，与D-半乳糖模型组相比，副干酪乳酪杆菌3Q225低剂量组小鼠肝组织中的MDA含量显著降低，高剂量实验组小鼠肝组织中的MDA含量接近于正常水平。本发明中，副干酪乳酪杆菌3Q225可以降低血清和肝脏中的MDA含量，进一步证明3Q225可以增强机体的抗氧化防御系统。本发明的研究证实，副干酪乳酪杆菌3Q225能缓解衰老对小鼠的影响，使衰老小鼠模型中SOD、GSH-Px、GSH、CAT和MDA水平恢复至与正常小鼠相似。
Claims (9)
1.一株副干酪乳酪杆菌（Lacticaseibacillus paracasei），其特征在于，保藏编号为CGMCC NO.26439。
2.权利要求1所述的副干酪乳酪杆菌的培养方法，其特征在于，包括将副干酪乳酪杆菌接种在培养基中进行培养。
3.权利要求2所述的培养方法制备的产物，其特征在于，包括副干酪乳酪杆菌活菌，选自发酵液、发酵液沉淀、冻干粉中的任意一种或多种。
4.包括权利要求1所述的副干酪乳酪杆菌或权利要求3所述的产物的抗衰老或抗皮肤氧化的口服产品。
5.根据权利要求4所述的口服产品，其特征在于，所述的口服产品为药品或保健品。
6.根据权利要求5所述的口服产品，其特征在于，包括107CFU/g或107CFU/mL以上的副干酪乳酪杆菌。
7.根据权利要求5所述的口服产品，其特征在于，还包括大豆异黄酮、番茄红素、虾青素、维生素、辅酶Q10、烟酰胺中的一种或多种。
8.根据权利要求5所述的口服产品，其特征在于，还包括植物提取物、动物提取物或中药提取物；还包括辅料，所述的辅料选自：淀粉、低聚糖、蛋白类、膳食纤维、香辛料、调味剂、调香剂、调色剂中的一种或多种。
9.根据权利要求5所述的口服产品，其特征在于，为口服液或口服胶囊。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310850231.0A CN116590204B (zh) | 2023-07-12 | 2023-07-12 | 副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310850231.0A CN116590204B (zh) | 2023-07-12 | 2023-07-12 | 副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116590204A CN116590204A (zh) | 2023-08-15 |
| CN116590204B true CN116590204B (zh) | 2023-10-20 |
Family
ID=87594016
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310850231.0A Active CN116590204B (zh) | 2023-07-12 | 2023-07-12 | 副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116590204B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210030663A (ko) * | 2019-09-10 | 2021-03-18 | 서울시립대학교 산학협력단 | 피부 주름 개선능을 갖는 고기능성 천연 대사산물을 생산하는 락토바실러스 파라카세이 아종 톨러란스 sw1 균주 및 이의 용도 |
| CN114504599A (zh) * | 2020-11-16 | 2022-05-17 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 副干酪乳杆菌et-22在抗衰老、提高先天免疫方面的新应用 |
| CN115505550A (zh) * | 2022-11-03 | 2022-12-23 | 梁天晓 | 一株副干酪乳杆菌及其应用 |
-
2023
- 2023-07-12 CN CN202310850231.0A patent/CN116590204B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210030663A (ko) * | 2019-09-10 | 2021-03-18 | 서울시립대학교 산학협력단 | 피부 주름 개선능을 갖는 고기능성 천연 대사산물을 생산하는 락토바실러스 파라카세이 아종 톨러란스 sw1 균주 및 이의 용도 |
| CN114504599A (zh) * | 2020-11-16 | 2022-05-17 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 副干酪乳杆菌et-22在抗衰老、提高先天免疫方面的新应用 |
| CN115505550A (zh) * | 2022-11-03 | 2022-12-23 | 梁天晓 | 一株副干酪乳杆菌及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116590204A (zh) | 2023-08-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK2360237T3 (en) | NEW Lactobacillus plantarum AND COMPOSITION CONTAINING SAME | |
| EP1923065B1 (en) | Cholesterol absorption inhibitor | |
| JP5791009B2 (ja) | 乳酸菌およびそれらを用いた飲食物又は化粧品 | |
| CA2767410C (en) | Novel lactobacillus plantarum and composition containing same | |
| US20140363501A1 (en) | The protective effects and application of a Lactobacillus rhamnosus on the alleviation of chronic alcoholic liver injury | |
| Yamamoto et al. | Antioxidant capacity of soymilk yogurt and exopolysaccharides produced by lactic acid bacteria | |
| WO2005117926A1 (ja) | 腸内菌叢改善剤 | |
| CN113925923B (zh) | 一种抗痘美白的复合益生菌组合物及其制备方法 | |
| KR102543494B1 (ko) | 신규 프로바이오틱스 및 이의 용도 | |
| JPWO2018003899A1 (ja) | 腎性貧血改善用組成物 | |
| CN113604395A (zh) | 一株可发酵石斛且其发酵液可改善皮肤质量的植物乳杆菌 | |
| CN113717883B (zh) | 促进机体健康长寿的植物乳杆菌flpl05及其应用 | |
| CN116590204B (zh) | 副干酪乳酪杆菌及其在抗衰老和改善皮肤抗氧化中的应用 | |
| CN112708581A (zh) | 一种青春双歧杆菌dh162及其发酵产物、应用和微生态制剂 | |
| CN112442458A (zh) | 唾液乳杆菌tci153、其及/或其破菌液改善肌肤状况的用途 | |
| JPH07265064A (ja) | 腸内細菌叢改善組成物 | |
| TWI797881B (zh) | 抗老化組合物及其延緩衰老的用途 | |
| CN112111430B (zh) | 一种抗氧化与抗衰老双效益生菌及其应用 | |
| TWI593352B (zh) | 一種具有抗氧化／消除自由基能力之黑蒜頭發酵乳及其製造方法 | |
| CN112167345B (zh) | 含抗氧化的乳酸菌发酵物的食品组合物以及医药组合物 | |
| KR101969420B1 (ko) | 락토바실러스 카제이 hy2782를 유효성분으로 함유하는 미세먼지와 자외선으로 인한 산화적 스트레스 및 피부 보습을 개선하기 위한 조성물 | |
| TWI764356B (zh) | 含乳酸菌菌株或其發酵物的抗老化組合物及其用途 | |
| CN117099850B (zh) | 一种发酵植物基酸奶及制备方法和应用 | |
| CN114933998B (zh) | 能够改善衰老状态或提升运动能力的德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株及其应用 | |
| CN116676240B (zh) | 鼠李糖乳酪杆菌及其在预防或治疗酒精性肝病中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 40090601 Country of ref document: HK |