CN116585460A - α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2在药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供α1‑抗胰蛋白酶(α1‑antitrypsin,AAT)与内源性大麻素受体2(Cannabinoid receptor 2,CB2R)相互作用在治疗或预防α‑突触核蛋白病药物中的应用。本发明预测α1‑抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2的几个结合位点，验证了在α‑突触核蛋白刺激下，缺失内源性大麻素受体2具有代偿性促進α1‑抗胰蛋白酶的基因和蛋白水平上升。同时α1‑抗胰蛋白酶主要靶向性表达于小胶质细胞，通过与内源性大麻素受体2相互作用可减轻α‑突触核蛋白所引起的神经炎症。这些特征使α1‑抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在α‑突触核蛋白病治疗中提供了一种解决方案。

Description

α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2在药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药领域，涉及一种α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,AAT)与内源性大麻素受体2(Cannabinoid receptor 2,CB2R)相互作用的医药新用途。

背景技术

目前α-突触核蛋白病是最常见的神经退行性疾病，包括帕金森(parkinson'sdisease，PD)、路易体痴呆(dementia with Lewy bodies，DLB)和多系统萎缩(multiplesystem atrophy，MSA)。其特点是α-突触核蛋白(α-Synuclein，α-Syn)在神经元中广泛聚集，导致神经元死亡，出现运动症状，神经精神障碍以及认知功能受损。

α-突触核蛋白异常聚集所引起的神经免疫炎症是其核心假说，通过减轻α-突触核蛋白的神经毒性和调节免疫异常来预防和改善α-突触核蛋白病的方式成为十分重要的策略。但目前临床上对α-突触核蛋白病的药物治疗主要包括胆碱酯能药物、多巴胺替代疗法的药物、促进多巴胺释放剂、抑制多巴胺分解代谢药物以及对症治疗的抗精神病药等等，尚没有一种根治α-突触核蛋白病发生和进展的药物，因此，有必要在基础研究上找出具有新药理机制的药物。

α1-抗胰蛋白酶(AAT)是一类重要的天然丝氨酸蛋白酶，主要由肝细胞、巨噬细胞等分泌。目前临床上主要应用AAT治疗AAT缺乏症并发的肺气肿。近期研究初步发现AAT还具有抗炎及免疫调控特性，对许多炎性介质和氧化基团具有显著的抑制作用，能有效诱导特异性免疫耐受，在糖尿病、移植免疫等领域中展现良好的应用前景。但目前还未有AAT应用于α-突触核蛋白病的预防或治疗。

内源性大麻素受体2(Cannabinoid receptor 2,CB2R)认为在免疫系统的细胞和器官中特异表达，在中枢神经系统CB2R存在于小胶质细胞，并在小胶质细胞应激状态时表达上调。药理学研究表明炎症和氧化应激对CB2R有激活作用，通过靶向高表达于小胶质细胞CB2R的特异性治疗，可改善神经炎症引起的衰老相关疾病。近年来，CB2R在脑内小胶质细胞特异性表达成为α-突触核蛋白病抗炎治疗的潜在可行靶点。

本发明证实了AAT与CB2R相互作用的有效结合位点，在CB2R缺乏时AAT在基因和蛋白层面代偿性上调表达于小胶质细胞，并且通过AAT与CB2R相互作用可有效减轻α-突触核蛋白所引起的炎症反应。拓展了AAT与CB2R相互作用在α-突触核蛋白病中的应用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供AAT与CB2R相互作用在治疗或预防α-突触核蛋白病药物中的应用。AAT与CB2R具有相应的几个结合位点，CB2R缺失情况下AAT在基因和蛋白水平具有代偿性表达上升，同时AAT主要表达于小胶质细胞，通过与CB2R相互作用可减轻α-突触核蛋白所引起的神经炎症。因此，AAT与CB2R相互作用可用于制备预防或治疗α-突触核蛋白病的药物。

为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防α-突触核蛋白病药物中的应用。

α1-抗胰蛋白酶衍生物与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防α-突触核蛋白病药物中的应用。

α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防脑内病理性α-突触核蛋白过度聚集引发的免疫异常紊乱疾病的药物中的应用。

α1-抗胰蛋白酶衍生物与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防脑内病理α-突触核蛋白过度聚集引发的免疫异常紊乱疾病的药物中的应用。

α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在增强脑神经小胶质细胞吞噬清除的功能达到减少α-突触核蛋白在脑中沉积药物中的应用。

α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在改善脑内α-突触核蛋白过度聚集引起小胶质细胞活化所产生的炎症反应药物中的应用。

α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在改善α-突触核蛋白相关炎症反应所引起的认知功能损伤药物中的应用。

内源性大麻素受体2(Cannabinoid receptor 2,CB2R)主要通过α-突触核蛋白诱导产生。或者通过JWH133内源性大麻素受体2激动剂进行干预处理。

内源性大麻素受体缺失通过购买Jackson实验室CB2^-/-小鼠，货号码RRID:IMSRJAX:005786。通过剪取小鼠尾巴提取DNA样本以进行基因鉴定。其中鉴定出来的CB2^+/+作为实验对照组。所有实验均按照福建医科大学动物保护与使用委员会的指导方针进行。

本发明将AAT与CB2R相互作用主要用于治疗α-突触核蛋白病，并通过体内立体定位实验，体外原代培养小胶质细胞建立模型进行效果评价：(1)网络蛋白预测分析；(2)RNA测序分析；(3)q-PCR或WB分子生物学分析；(4)免疫荧光染色；(5)CCK8实验。

本发明通过Pymol蛋白互作分析证明：AAT与CB2R之间存在多组用于形成氢键的残基，具有相应的相互作用力。

本发明通过体内实验证明：AAT基因表达在α-突触核蛋白病的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠的具有显著差异。

本发明通过体内实验证明：AAT蛋白表达在α-突触核蛋白病的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠的具有显著差异，并且特异性表达于小胶质细胞。

本发明通过体外实验证明：AAT在浓度超过40mg/ml对小胶质细胞具有明显毒性作用。

本发明通过体外实验证明：CB2R激动剂可增强小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应减少AAT代偿性表达。

本发明通过体外实验证明：在CB2R存在下AAT可减轻α-突触核蛋白在小胶质细胞所引起的炎症反应。

本发明的有益效果：

α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,AAT)与内源性大麻素受体2(Cannabinoidreceptor 2,CB2R)相互作用的医药新用途，具体涉及AAT与CB2R相互作用在治疗或预防α-突触核蛋白病药物中的应用。AAT与CB2R具有相应的几个结合位点，CB2R缺失情况下AAT在基因和蛋白水平具有代偿性表达上升，同时AAT主要特异性表达于小胶质细胞，通过与CB2R相互作用可减轻α-突触核蛋白所引起的神经炎症。因此，AAT与CB2R相互作用可用于制备预防或治疗α-突触核蛋白病的药物。并为长期困扰的-突触核蛋白病提供了一种解决方案。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为Pymol蛋白互作分析图。

图2为RNA测序分析图。

图3为q-PCR实验结果柱状图。

图4为免疫荧光实验结果图。

图5为CCK8实验结果柱状图。

图6为免疫荧光实验结果图。

图7为免疫荧光实验结果图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

图1为Pymol蛋白互作分析，AAT被表示为深色的卡通模型，CB2R被显示为浅色的卡通模型，它们的结合点被显示为相应颜色的棍棒结构。AAT与CB2R之间存在多组用于形成氢键的残基，如AIT1的Asn158和CNR2的His267形成的氢键。在这些相互作用力的作用下，AIT1-CNR2的打分表现较好。

图2为RNA测序分析，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中分别检测到14036和14069个基因数，其中AAT表达基因Serpina1a、Serpina1b、Serpina1c、Serpina1d的四个亚型均具有显著差异。

图3为q-PCR实验，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中，AAT表达基因Serpina1a、Serpina1b、Serpina1c、Serpina1d的四个亚型的mRNA水平均具有显著上调。

图4为免疫荧光实验，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中，CB2^-/-小鼠中的AAT蛋白表达显著上调(P<0.01)。并且发现AAT靶向表达于小胶质细胞(Iba1)，而在星形胶质细胞(GFAP)和神经元(βIII tublin)中均未表达。

图5为CCK8实验，AAT在0.5-100mg/ml范围内对小胶质细胞活性的影响随药物剂量的增加而增强(P<0.05),当剂量超过40mg/ml时，细胞活性逐渐下降(P<0.01)。

图6为免疫荧光实验，在α-突触核蛋白作用下可促进AAT的表达，CB2R激动剂可增强小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应减少AAT代偿性表达，同时CB2R缺失可促进小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应增加AAT代偿性表达。

图7为免疫荧光实验，α-突触核蛋白作用下可促进CB2R以及炎症小体NLRP3的表达；在CB2R存在下，AAT可减轻小胶质细胞的激活进而减少NLRP3炎症小体的表达；在CB2R缺失情况下，AAT不能减轻小胶质细胞的激活进而减少NLRP3炎症小体的表达。

AAT与CB2R互作在治疗α-突触核蛋白病的药理实验资料

实验1：AAT与CB2R相互作用的预测与评估实验方法：AAT(1HP7)和CB2R(6KPF)的X射线晶体结构来自蛋白质数据库。为了保证对接结果准确性，我们随后使用AutoDockTools-1.5.7对两个蛋白结构手动进行去水，加氢等优化操作。之后使用对接服务器(GRAMM)进行蛋白-蛋白对接。然后将得到的蛋白-蛋白复合物同样使用AutoDockTools-1.5.7手动进行去水，加氢等优化操作。最后使用PyMol进行蛋白相互作用预测并生成蛋白蛋白相互作用图。在PyMol中，AAT被表示为深蓝色的卡通模型，CB2R被显示为青色的卡通模型，它们的结合点被显示为相应颜色的棍棒结构。当聚焦于结合区域时，结合位点则会以所属蛋白的演示展示。

实验结果：通过Pymol蛋白互作分析，AAT被表示为深蓝色的卡通模型，CB2R被显示为青色的卡通模型，它们的结合点被显示为相应颜色的棍棒结构。AAT与CB2R之间存在多组用于形成氢键的残基，如AIT1的Asn158和CNR2的His267形成的氢键。在这些相互作用力的作用下，AIT1-CNR2的打分表现较好(图1)。

实验2：AAT基因表达在α-突触核蛋白病的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠的中具有显著差异。

实验材料：

(一)实验动物：购买Jackson实验室CB2^-/-小鼠，货号码RRID:IMSRJAX:005786。通过剪取小鼠尾巴提取DNA样本以进行基因鉴定。其中鉴定出来的CB2^+/+作为实验对照组。所有实验均按照福建医科大学动物保护与使用委员会的指导方针进行。

(二)建立α-突触核蛋白病模型小鼠：通过使用上述两种基因型8周龄小鼠，将具有4.5*10^13gp/ml的空载体或人突变A53T-aSyn(购自和元)的AAV病毒双侧立体定位注射到伏隔阂脑区。以0.02μl/min的速度以0.2μl/侧的体积注射。使用的立体坐标为：AP＝+1.2mm，ML＝±0.75毫米，DV＝-4.5毫米。过表达4周后建立α-突触核蛋白病模型。

实验方法：

(一)通过美吉生物RNA测序分析。

(二)q-PCR检测。

第一步提取RNA

1、原代小胶质细胞加200μL Trizol，置于冰上匀浆，放置室温5min；

2、12000rpm离心5min，弃沉淀；

3、加入氯仿200μL/mL Trizol，上下颠倒30-50次，室温置15min；

4、12000g，4℃，离心15min；

5、此时分3层，上层RNA，下层酚相DNA和蛋白质；加等体积异丙醇，上下混匀5-6次，置温5-10min；

6、12000g，4℃，离心10min，弃上清；

7、加入1mL 75％酒精(25mL DEPC水和75mL无水乙醇)，混匀；

8、8000g，4℃，离心5min，弃上清；

9、干燥至半透明，按需加DEPC水；

第二步：测RNA浓度

Onedrop仪器进行测RNA浓度，DEPC水平衡至初始值>0.5μm/μL，<-0.5μm/μL，加1μL样本测浓度，建议浓度建议在500-1000，纯度1.8-2.1；

第三步：RNA浓度配平

第四步：qPCR

准备引物如表4，反应体系配制如下：Rox 10μL，Primer F和Primer R各加0.6μL，DEPC水7.8μL。每管PCR管加入体系19μL，样本cDNA 1μL，总共20μL；贴膜，低速离心，上机测量；上机反应体系如下：第一步：55℃，2min95℃ 10min；第二步：95℃ 15s，60℃ 1min进行40个循环；第三步：95℃ 15s。基因表达以GAPDH标准化的倍数变化计算。

实验结果：通过RNA测序分析，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中分别检测到14036和14069个基因数，其中AAT表达基因Serpina1a、Serpina1b、Serpina1c、Serpina1d的四个亚型均具有显著差异(图2)。通过q-PCR实验，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中，AAT表达基因Serpina1a、Serpina1b、Serpina1c、Serpina1d的四个亚型的mRNA水平均具有显著上调(图3)

实验3：AAT蛋白表达在α-突触核蛋白病的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠的中具有显著差异，并且靶向表达于小胶质细胞。

实验方法：

第一步：病理组织取样材料准备：高压器械(眼科剪、眼科镊、尖镊、骨钳、血管钳)，微注泵，冰，4％多聚甲醛，生理盐水，30％蔗糖(0.1M PBS，蔗糖)，麻醉剂2％异氟烷，12孔板。

1、2％异氟烷(2L/min氧气流速)通过麻醉鼻锥麻醉小鼠。

2、面部朝上固定小鼠四肢，剪开胸腔皮肤暴露胸腔和心脏。

3、在右心耳剪个小口，先用冰的生理盐水在心尖部位灌注(100mL/min，100mL)可见肝脏由红变白表示灌注成功。

4、灌注冰的4％多聚甲醛(100mL/min，20mL)。

5、断头，用骨钳取脑，放于相应耳标号标记的12孔板中，用4％多聚甲醛固定12h。

6、30％蔗糖脱水，隔天换液，连续3次。

第二步：病理组织切片材料准备：OCT组织包埋剂，冻头，12孔板或者24孔板，含有0.005％叠氮钠0.01M PBS。

1、将脑组织从30％蔗糖取出吸干，用刀片将底部切平，在冷冻切片机，用OCT包埋至看不见组织。

2、冠状切片40μm，放于含有含有0.005％叠氮钠0.01M PBS的12孔板中。

3、4℃冰箱保存，未切片的组织可包埋于OCT置于-80℃保存一年以上。

第三步：免疫荧光染色材料准备：驴血清(Sigma-Aldrich)，Triton X-100，甘氨酸，Tris，玻片，盖玻片，抗淬灭剂。

1、TBS洗3×10min；

2、甘氨酸孵育20min去背景(2.25g甘氨酸+100mL TBS配制)；

3、TBST(TBS+1％ Triton X-100)洗3×5min；

4、室温封闭1h；

5、孵育一抗，4℃冰箱，24h，用一抗稀释液(0.3％ Triton X-100+1％ BSA+2％驴血清，TBS配制)配一抗；

6、一抗室温孵育1h；

7、TBST洗3×5min；

8、二抗室温孵育1h；

9、TBST洗3×5min；

10、DAPI 20min，1:10000；

11、TBST洗3×5min；封片。

第四步：共聚焦上机拍片

1、共焦显微镜ZEISS 780开机；

2、设置参数；

3、调节焦距与倍数，选择20×，63×拍片进行叠图或者拼图；

第五步：数据分析

利用NIH-ImageJ软件对25×物镜采集的图像进行小胶质细胞活化程度以及分支数计算sholl分析和细胞面积分析。用zen3.1(蓝色版)评估活化小胶质细胞的定量和小胶质细胞受体的共定位。

实验结果：通过免疫荧光实验，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中，CB2^-/-小鼠中的AAT蛋白表达显著上调(P<0.01)。并且发现AAT靶向表达于小胶质细胞(Iba1)，而在星形胶质细胞(GFAP)和神经元(βIII tublin)中均未表达(图4)。

实验5：AAT具有良好的药物容忍性，只在浓度超过40mg/ml对小胶质细胞具有明显毒性作用。

实验方法：

(一)原代培养小胶质细胞：

从上述两种基因鼠的P1-3中分离出原代小胶质细胞。将新生小鼠的整个大脑从头骨中解剖出来，并小心地取出血管和脑膜。然后，将从12只小鼠获得的全脑组织汇集在一起，切碎，并使用DMEM/营养混合物F-12(DMEM/F12,1:1)在含有200μl木瓜蛋白酶悬浮液(Worthington-Biochem，CAT#：LS003127)和少量DNase I power(Worthington-Biochem，CAT#)的12ml木瓜蛋白酶溶液(1ml/每脑)中37℃孵育40分钟。接下来，将消化的细胞通过70μm尼龙细胞滤网(BD Bioscience，Franklin Lakes，NJ)，然后接种到含有10％ FBS(PANSERATECH，德国，CAT#ST30-3302)、100IU/ml青霉素和10μg/ml链霉素(Invitrogen，MA，CAT#15140)。每3-5天更换一次培养基。培养2周后，将混合的神经胶质细胞培养物在37℃下以260rpm的转速摇动60分钟，从每个烧瓶中收集神经胶质细胞悬浮液并接种在聚-L-赖氨酸包被的细胞培养板上。

(二)CCK8实验：

以CCK8试剂检测α1-抗胰蛋白酶对小胶质细胞的最适浓度。分别给与不同剂量梯度(0、0.5、1、4、40、100mg/ml)于体外干预小胶质细胞后，通过CCK8对小胶质细胞活性地测定，经由酶标仪检测分析，确认α1-抗胰蛋白酶的安全使用范围。

实验结果：通过CCK8实验，AAT在0.5-100mg/ml范围内对小胶质细胞活性的影响随药物剂量的增加而增强(P<0.05),当剂量超过40mg/ml时，细胞活性逐渐下降(P<0.01)(图5)。

实验6：CB2R激动剂可增强小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应，减少AAT代偿性表达。

实验方法：将小胶质细胞以5x104个/孔密度接种于用多聚赖氨酸包被过的24孔板细胞爬片，培养24h。待细胞贴壁后，于培养基中加入CB2R激动剂JWH133(25μM)和α-Syn(500nM)孵育24h。4％多聚甲醛固定。清洗，封闭1h,用Iba1(1:1000)和AAT(1：500)一抗孵育过夜，二抗1h，并以DAPI染核，随后用抗荧光淬灭剂封片，于共聚焦显微镜观察、拍照、计数小胶质细胞内AAT的表达面积。

实验结果：通过免疫荧光实验，在α-突触核蛋白作用下可促进AAT的表达，CB2R激动剂可增强小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应减少AAT代偿性表达，同时CB2R缺失可促进小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应增加AAT代偿性表达(图6)。

实验7：在CB2R存在下AAT可减轻α-突触核蛋白对小胶质细胞引起的炎症反应

实验方法：将小胶质细胞以5x104个/孔密度接种于用多聚赖氨酸包被过的24孔板细胞爬片，培养24h。待细胞贴壁后，于培养基中加入AAT(40mg/mL)和α-Syn(500nM)孵育24h。4％多聚甲醛固定。清洗，封闭1h,用NLRP3(1:1000)和CB2R(1：500)一抗孵育过夜，二抗1h，并以DAPI染核，随后用抗荧光淬灭剂封片，于共聚焦显微镜观察、拍照、计数。

实验结果：通过免疫荧光实验，α-突触核蛋白作用下可促进CB2R以及炎症小体NLRP3的表达；在CB2R存在下，AAT可减轻小胶质细胞的激活进而减少NLRP3炎症小体的表达；在CB2R缺失情况下，AAT不能减轻小胶质细胞的激活进而减少NLRP3炎症小体的表达(图7)。

药理实验结果表明：

(1)通过Pymol蛋白互作分析，AAT被表示为深蓝色的卡通模型，CB2R被显示为青色的卡通模型，它们的结合点被显示为相应颜色的棍棒结构。AAT与CB2R之间存在多组用于形成氢键的残基，如AIT1的Asn158和CNR2的His267形成的氢键。在这些相互作用力的作用下，AIT1-CNR2的打分表现较好(图1)。(2)通过RNA测序分析，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中分别检测到14036和14069个基因数，其中AAT表达基因Serpina1a、Serpina1b、Serpina1c、Serpina1d的四个亚型均具有显著差异(图2)。

(3)通过q-PCR实验，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中，AAT表达基因Serpina1a、Serpina1b、Serpina1c、Serpina1d的四个亚型的mRNA水平均具有显著上调(图3)。

(4)通过免疫荧光实验，在α-突触核蛋白作用下的CB2^+/+和CB2^-/-小鼠中，CB2^-/-小鼠中的AAT蛋白表达显著上调(P<0.01)。并且发现AAT靶向表达于小胶质细胞(Iba1)，而在星形胶质细胞(GFAP)和神经元(βIII tublin)中均未表达(图4)。

(5)通过CCK8实验，AAT在0.5-100mg/ml范围内对小胶质细胞活性的影响随药物剂量的增加而增强(P<0.05),当剂量超过40mg/ml时，细胞活性逐渐下降(P<0.01)(图5)。

(6)通过免疫荧光实验，在α-突触核蛋白作用下可促进AAT的表达，CB2R激动剂可增强小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应减少AAT代偿性表达，同时CB2R缺失可促进小胶质细胞对α-突触核蛋白的反应增加AAT代偿性表达(图6)。

(7)通过免疫荧光实验，α-突触核蛋白作用下可促进CB2R以及炎症小体NLRP3的表达；在CB2R存在下，AAT可减轻小胶质细胞的激活进而减少NLRP3炎症小体的表达；在CB2R缺失情况下，AAT不能减轻小胶质细胞的激活进而减少NLRP3炎症小体的表达(图7)。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (7)

1.α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防α-突触核蛋白病药物中的应用。

2.α1-抗胰蛋白酶衍生物与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防α-突触核蛋白病药物中的应用。

3.α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防脑内病理性α-突触核蛋白过度聚集引发的免疫异常紊乱疾病的药物中的应用。

4.α1-抗胰蛋白酶衍生物与内源性大麻素受体2相互作用在治疗或预防脑内病理α-突触核蛋白过度聚集引发的免疫异常紊乱疾病的药物中的应用。

5.α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在增强脑神经小胶质细胞吞噬清除的功能达到减少α-突触核蛋白在脑中沉积药物中的应用。

6.α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在改善脑内α-突触核蛋白过度聚集引起小胶质细胞活化所产生的炎症反应药物中的应用。

7.α1-抗胰蛋白酶与内源性大麻素受体2相互作用在改善α-突触核蛋白相关炎症反应所引起的认知功能损伤药物中的应用。