CN116492320B - 大果桉醛i在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用 - Google Patents
大果桉醛i在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116492320B CN116492320B CN202310764409.XA CN202310764409A CN116492320B CN 116492320 B CN116492320 B CN 116492320B CN 202310764409 A CN202310764409 A CN 202310764409A CN 116492320 B CN116492320 B CN 116492320B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- eucalyptol
- cancer
- tumor
- cells
- immune
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- WEEGYLXZBRQIMU-UHFFFAOYSA-N 1,8-cineole Natural products C1CC2CCC1(C)OC2(C)C WEEGYLXZBRQIMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 62
- WEEGYLXZBRQIMU-WAAGHKOSSA-N Eucalyptol Chemical compound C1C[C@H]2CC[C@]1(C)OC2(C)C WEEGYLXZBRQIMU-WAAGHKOSSA-N 0.000 title claims abstract description 62
- 229960005233 cineole Drugs 0.000 title claims abstract description 62
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 33
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 21
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 7
- 102100023990 60S ribosomal protein L17 Human genes 0.000 claims 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 abstract description 19
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 abstract description 19
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 abstract description 18
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 abstract description 18
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 abstract description 18
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 abstract description 18
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 abstract description 18
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 abstract description 18
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 abstract description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 16
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 abstract description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 abstract description 6
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 abstract description 5
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 abstract description 5
- 239000012270 PD-1 inhibitor Substances 0.000 abstract description 5
- 239000012668 PD-1-inhibitor Substances 0.000 abstract description 5
- 229940121655 pd-1 inhibitor Drugs 0.000 abstract description 5
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 3
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 230000009545 invasion Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 37
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 4
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 3
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 3
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000004082 Calreticulin Human genes 0.000 description 2
- 108090000549 Calreticulin Proteins 0.000 description 2
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 238000011393 cytotoxic chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000009093 first-line therapy Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000037449 immunogenic cell death Effects 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 238000011470 radical surgery Methods 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 244000034068 Elaeocarpus grandis Species 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- 244000166124 Eucalyptus globulus Species 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 206010063916 Metastatic gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 210000001099 axilla Anatomy 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 208000002925 dental caries Diseases 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- -1 diformyl phloroglucinol compound Chemical class 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940095399 enema Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000005206 flow analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 208000028169 periodontal disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/11—Aldehydes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0031—Rectum, anus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/02—Suppositories; Bougies; Bases therefor; Ovules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
大果桉醛I在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用,涉及医药领域。大果桉醛I可作为免疫治疗增效剂诱导多瘤种癌细胞免疫源性死亡,增强免疫检查点治疗效果。大果桉醛I与PD1抑制剂联合用药能显著抑制肿瘤的生长。此外,大果桉醛I可以有效抑制胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞增殖和侵袭,可作为天然抗肿瘤小分子药物应用于对结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌的治疗。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域,特别是涉及大果桉醛I在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用。
背景技术
目前,对于实体肿瘤的治疗策略仍然是优先考虑行根治性手术治疗,放疗和化疗为辅,然而由于恶性实体肿瘤具有发展快、难发现以及手术根治不完全等因素,导致了扩散和转移,此时化疗将作为主要手段用于治疗。随着近年来靶向药物和免疫检查点治疗策略的开发,展示出了良好的疗效和安全性,因此靶向药物也被用于临床治疗。例如HER2单抗被用于HER2阳性的转移性胃癌患者以及乳腺癌患者,而在HER2阴性PD-L1 CPS≥5的患者中,PD-1单抗联合细胞毒性药物被用于一线治疗。尽管靶向药物的使用提高了一线治疗的效果和安全性,然而靶向治疗受限于靶标状态、个体遗传背景等因素导致适用人群并不广泛;传统细胞毒性化疗药物由于在杀伤肿瘤细胞的同时也能对正常细胞造成一定程度的损伤,会引起严重的毒副作用,因此在很大程度上限制了其使用;免疫检查点抑制剂在结直肠癌、胃癌、胰腺癌等实体瘤中疗效不佳,因此,寻找安全性佳、疗效好的免疫治疗增效药物,具有重要的意义。
大果桉醛I最初是从桉树叶中分离得到的一种天然产物,属于二甲酰间苯三酚类化合物。已有研究表明,大果桉醛类物质对龋齿、牙周病的各病原菌具有非常强的抗菌活性。有关大果桉醛I的抗肿瘤专利有CN108451937A,其公开了大果桉醛I在抑制结直肠癌中的应用。但是现有技术中未见有报道关于大果桉醛I在结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌治疗的应用,尤其是关于肿瘤免疫治疗增效的作用。
发明内容
基于此,本发明的提供大果桉醛I在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用。大果桉醛I可作为免疫治疗增效剂诱导多瘤种癌细胞免疫源性死亡,增强免疫检查点阻断疗法的治疗效果。
大果桉醛I在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用。
进一步地,所述肿瘤包括结直肠癌、胃癌、胰腺癌或乳腺癌中任一种。
进一步地,所述大果桉醛I的起效浓度不低于170μM。
进一步地,所述大果桉醛I包括以下的任一种:
a)结构式为式Ⅰ所示的化合物;
式Ⅰ
b) 与a化合物具有相同或相近药学活性或在体内水解得到的与a化合物具有相同或相近药学活性的药学上可接受的衍生物。
进一步地,所述药学上可接受的衍生物选自其药用盐、药用酯、药用醚、药用酰胺或糖基化物中的任一种。
大果桉醛I在制备PD-1抑制剂的增效药物中的应用。
大果桉醛I在制备抗肿瘤药物中的应用,所述肿瘤包括胃癌、胰腺癌或乳腺癌中任一种。
进一步地,所述大果桉醛I的浓度为100 -300μM。
一种肿瘤免疫治疗药物,包括PD-1抑制剂和大果桉醛I。
进一步地,所述肿瘤免疫治疗药物的剂型为栓剂或灌肠剂。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
1)大果桉醛I可作为免疫治疗增效剂诱导多瘤种癌细胞免疫源性死亡,增强免疫检查点治疗效果。大果桉醛I与PD-1抑制剂联合用药能显著抑制肿瘤的生长。
2)大果桉醛I可以有效抑制胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞增殖和侵袭,可作为天然抗肿瘤小分子药物应用于对胃癌、胰腺癌、乳腺癌的治疗。
附图说明
图1是本发明的实施例1中胃癌细胞在不同大果桉醛I剂量下的抑制效果图。
图2是本发明的实施例1中胰腺癌细胞在不同大果桉醛I剂量下的抑制效果图。
图3是本发明的实施例1中乳腺癌细胞在不同大果桉醛I剂量下的抑制效果图。
图4是本发明的实施例2中结直肠癌细胞在大果桉醛处理后的Calreticulin表达图。
图5是本发明的实施例2中胃癌细胞在大果桉醛处理后的Calreticulin表达图。
图6是本发明的实施例2中胰腺癌细胞在大果桉醛处理后的Calreticulin表达图。
图7是本发明的实施例2中乳腺癌细胞在大果桉醛处理后的Calreticulin表达图。
图8是本发明的实施例3中大果桉醛I和PD-1抗体联合治疗中肿瘤生长率对比图。
图9是本发明的实施例3中大果桉醛I和PD-1抗体联合治疗后的流式检测图。
具体实施方式
在本说明书中提到或者可能提到的上、下、左、右、前、后、正面、背面、顶部、底部等方位用语是相对于其构造进行定义的,它们是相对的概念。因此,有可能会根据其所处不同位置、不同使用状态而进行相应地变化。所以,也不应当将这些或者其他的方位用语解释为限制性用语。
以下示例性实施例中所描述的实施方式并不代表与本公开相一致的所有实施方式。相反,它们仅是与本公开的一些方面相一致的实施方式的例子。
以下实施例中大果桉醛I指式Ⅰ所示的化合物;
式Ⅰ
实施例1
大果桉醛对胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞株的抑制
1、细胞培养
胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞株来源于本实验室已有的细胞株。培养细胞所用的培养基购买自Gibco公司,胎牛血清购自ExCell Bio公司。细胞株是通过含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基进行培养,培养环境为37℃、5% CO2的培养箱,取生长状态良好的细胞进行后续实验。
2、细胞增殖实验-浓度梯度
将大果桉醛I溶解于DMSO配制为20 mM母液。待细胞株生长至80%汇合度,使用0.05%胰蛋白酶消化,RPMI-1640完全培养基重悬,计数,接种于96孔板中,每孔7000个细胞,使用100 μl培养基培养。待细胞单层贴壁后,加入大果桉醛I,使其终浓度分别为20,50,80,100,200,300μM。同时设空白孔和100%细胞培养基孔作对照,每个药物浓度设3个复孔,将培养板放回37℃、5% CO2培养箱。培养24h后加入10 μl的MTT溶液,继续在培养箱中孵育4h,吸掉上清,加入150 μl DMSO,培养箱孵育10 min,用全自动酶标仪在490 nm测定吸光度(OD值)。
根据各孔的OD值,采用以下公式计算大果桉醛I对细胞的抑制率:
抑制率%=[(对照孔吸光度-实验孔吸光度)/(对照孔吸光度-空白孔吸光度)]×100%,细胞存活率%=1-抑制率%。
实验结果如图1-图3、表1所示。
表1
从图1-3可以看出,大果桉醛对胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞株的杀伤具有剂量依赖性,并且其对癌细胞的抑制作用具有阈值效应。剂量处于20μM-100μM之间时,大果桉醛对肿瘤细胞没有抑制效果,而剂量处于100μM-300μM时,大果桉醛表现出了明显的细胞抑制作用。
从表1看出,大果桉醛I对不同肿瘤细胞的IC50值在88-182μM,抑制较强,其中对乳腺癌的SKBR3为88.3μM,其诱导细胞凋亡所需的药物剂量最小,肿瘤细胞抑制效果显著。
因此,大果桉醛I可以有效抑制胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞增殖,可作为天然抗肿瘤小分子药物应用于对胃癌、胰腺癌、乳腺癌的治疗。
实施例2
大果桉醛I诱导肿瘤细胞表面的Calreticulin表达
使用化学药物治疗肿瘤时,肿瘤细胞可发生免疫原性细胞死亡,即肿瘤细胞在发生凋亡的同时,由非免疫原性的细胞转变为具有免疫原性的细胞,并在机体内激发抗肿瘤免疫效应。肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡的同时,会产生一系列的信号分子,主要包括细胞表面的钙网蛋白(Calreticulin)暴露增加、ATP释放。
为了探讨大果桉醛I促进机体抗肿瘤免疫反应是否由免疫原性细胞死亡引起的,我们检测了肿瘤细胞表面的Calreticulin表达。在六孔板中分别铺1X106个结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞,分别接受0、10、100μM 大果桉醛I药物处理24h。收集细胞,PBS清洗2次,4%多聚甲醛室温固定10min,1000 rpm/min离心4min,PBS清洗2次,5%胎牛血清室温封闭30min,离心细胞,直接加入100ul anti-Calreticulin抗体(1:100)室温孵育30min。随后PBS清洗2次,加入山羊抗兔DyLight 488荧光标记二抗,避光孵育至少半小时后流式细胞仪检测,Flow Jo软件分析。
实验结果如图4-图7所示。
从图4-7可以看出,结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌细胞在接受10μM 、100μM 大果桉醛I药物处理24h后经流式细胞仪检测发现Calreticulin胞膜表达的细胞占比增加,尤其是100μM 大果桉醛I药物处理后阳性细胞占比显著增加;证明大果桉醛I诱导肿瘤细胞表面的Calreticulin表达,大果桉醛I可作为免疫增效剂诱导瘤种癌细胞免疫源性死亡。
实施例3
大果桉醛I和PD-1抗体联合治疗实验
选取3-4周龄的雌性C57鼠28只,在每只C57鼠双侧腋下皮下接种1×106个结直肠癌细胞MC38K细胞,约7天后可见C57鼠皮下肿瘤形成,待28只C57鼠均成瘤后,将C57鼠随机分为4组,分别为对照组、PD-1抗体单药组、大果桉醛I单药组、联合用药组,每组7只C57鼠。
由于大果桉醛I是通过DMSO来溶解的,因此对照组按裸鼠体重每天给予腹腔注射60mg/kg的DMSO,大果桉醛I按C57鼠体重每天给予腹腔注射60mg/kg的大果桉醛I;PD-1抗体的使用量为200ug/只,3天/次进行腹腔注射,同时对照组给予相应量的IgG。由于28只C57鼠成瘤的时间顺序有先后,我们以C57鼠全部出现皮下瘤为起始点开始给药, 以任何一只C57鼠皮下瘤长到1500mm3为终止点,共历时十二天。每隔一天用游标卡尺测量瘤体大小,分别测量瘤体长(L)和宽(W)后根据公式Volume(mm3 )=LW2 /2来计算肿瘤的体积,每隔一天用电子天平称量C57鼠的体重,累计测量7次。各组C57鼠肿瘤体积取均值后以第一次测量为对照组,腹腔注射后的各次测量为实验组,按照公式(实验组-对照组)/对照组×100%计算肿瘤生长率,绘制生长率曲线。实验结束时每组各取两只小鼠的肿瘤进行流式检测,分析肿瘤内免疫细胞浸润情况。
实验结果如图8-9所示。
通过12天的给药发现C57鼠的生活状态未受影响,饮食活动正常。参照图8,通过计算各组的瘤体增长率可以发现,大果桉醛I用药组的肿瘤生长速度低于对照组,尤其是联合用药组的肿瘤被显著抑制。这说明了大果桉醛I能够抑制C57鼠皮下瘤的生长并增强PD-1抑制剂在肿瘤治疗中的功效。又通过对各组裸鼠平均体重的检测发现随着给药时间的增加裸鼠体重并没有明显变化,这也进一步说明了天然产物大果桉醛I对裸鼠并没有明显的毒副作用。同时参照图9,流式分析显示大果桉醛I治疗后肿瘤内CD4、CD8细胞浸润增加,表明大果桉醛I能够促进机体的抗肿瘤免疫反应。
综上,一方面,大果桉醛I对胃癌、胰腺癌、乳腺癌具有明显的抑制作用,另一方面,大果桉醛I可作为免疫增效剂诱导多瘤种癌细胞免疫源性死亡,增强免疫检查点治疗效果,有望作为天然抗肿瘤小分子药物应用于对胃癌、胰腺癌、乳腺癌等实体瘤的治疗。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。
Claims (4)
1.大果桉醛I作为唯一活性成分在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用,所述肿瘤免疫治疗的药物为PD-1 抗体,所述肿瘤为结直肠癌。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述大果桉醛I的起效浓度不低于170μM。
3.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述大果桉醛I的结构式为式Ⅰ所示的化合物;
式Ⅰ。
4.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述大果桉醛I的浓度为100 -300μM。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310764409.XA CN116492320B (zh) | 2023-06-27 | 2023-06-27 | 大果桉醛i在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310764409.XA CN116492320B (zh) | 2023-06-27 | 2023-06-27 | 大果桉醛i在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN116492320A CN116492320A (zh) | 2023-07-28 |
CN116492320B true CN116492320B (zh) | 2023-09-29 |
Family
ID=87328756
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202310764409.XA Active CN116492320B (zh) | 2023-06-27 | 2023-06-27 | 大果桉醛i在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN116492320B (zh) |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2465945A1 (en) * | 2001-11-06 | 2003-05-15 | The Quigley Corporation | Nutritional supplements and methods for prevention, reduction and treatment of radiation injury |
CN108434455A (zh) * | 2018-04-23 | 2018-08-24 | 中山大学肿瘤防治中心 | Mthfd2特异性抑制剂在防治结直肠癌方面的应用 |
CN108451937A (zh) * | 2018-05-24 | 2018-08-28 | 南方医科大学 | 大果桉醛i在制备抗肿瘤药物中的应用 |
CN108771663A (zh) * | 2018-09-06 | 2018-11-09 | 淮安安莱生物科技有限公司 | 大果桉醛b或大果桉醛c在治疗乳腺癌中的应用 |
CN109091471A (zh) * | 2018-09-06 | 2018-12-28 | 淮安安莱生物科技有限公司 | 大果桉醛b用于制备治疗人结肠癌的药物的用途 |
-
2023
- 2023-06-27 CN CN202310764409.XA patent/CN116492320B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2465945A1 (en) * | 2001-11-06 | 2003-05-15 | The Quigley Corporation | Nutritional supplements and methods for prevention, reduction and treatment of radiation injury |
CN108434455A (zh) * | 2018-04-23 | 2018-08-24 | 中山大学肿瘤防治中心 | Mthfd2特异性抑制剂在防治结直肠癌方面的应用 |
CN108451937A (zh) * | 2018-05-24 | 2018-08-28 | 南方医科大学 | 大果桉醛i在制备抗肿瘤药物中的应用 |
CN108771663A (zh) * | 2018-09-06 | 2018-11-09 | 淮安安莱生物科技有限公司 | 大果桉醛b或大果桉醛c在治疗乳腺癌中的应用 |
CN109091471A (zh) * | 2018-09-06 | 2018-12-28 | 淮安安莱生物科技有限公司 | 大果桉醛b用于制备治疗人结肠癌的药物的用途 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
Antiproliferative activities of the lipophilic fraction of eucalyptus camaldulensis against mcf-7 breast cancer cells, uplc-esi-qtof-ms metabolite profile, and antioxidative functions;Huang Y, An M, Fang A, et al.;ACS omega;第7卷;摘要、表1-60、fig4 * |
The inhibition of colorectal cancer growth by the natural product macrocarpal I;Qi L, Zhang Y, Zhang W, et al.;Free Radical Biology and Medicine;摘要、讨论部分、fig1-4 * |
桉属植物中间苯三酚衍生物的研究进展;李伟;;中草药(23);全文 * |
蓝桉的化学成分及其药理活性研究进展;唐云;李伟;;中草药(06);全文 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN116492320A (zh) | 2023-07-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20220218605A1 (en) | Bifunctional nucleoside hydrogel, preparation method therefor and use thereof | |
Hou et al. | In vitro and in vivo antitumor evaluation of berbamine for lung cancer treatment | |
CN111956804A (zh) | Otub1的抑制剂的新应用 | |
CN111358952A (zh) | 一种抗肿瘤药物组合物及其制剂和应用 | |
CN116492320B (zh) | 大果桉醛i在制备肿瘤免疫治疗增效剂中的应用 | |
CN108451937B (zh) | 大果桉醛i在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
CN115400216B (zh) | 一种用于甲状腺未分化癌的药物组合物和应用 | |
CN108295085B (zh) | 原薯蓣皂苷在制备抗耐药性骨肉瘤药物中的应用 | |
Zhang et al. | Curcumin in combination with homoharringtonine suppresses lymphoma cell growth by inhibiting the TGF-β/Smad3 signaling pathway | |
WO2012075957A1 (zh) | 咖啡酸苯乙酯类衍生物在制备抗肿瘤血管形成的药物中的用途 | |
WO2017177515A1 (zh) | 4-羟基水杨酰苯胺在制备抗骨髓瘤、淋巴瘤药物中的应用 | |
CN111494385B (zh) | 一种治疗卵巢癌的药物及其制备方法和用途 | |
Wu et al. | Neogambogic acid induces apoptosis of melanoma B16 cells via the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway | |
KR20140032586A (ko) | Pten 기능저하에 의한 egfr-tki 저해제-내성 폐암의 방사선 치료용 약학 조성물 | |
CN112263579A (zh) | 一种抗肿瘤药物组合物及其应用 | |
CN110354121A (zh) | 环吡酮胺在制备治疗肿瘤药物中的应用和包含环吡酮胺的组合药物及用途 | |
CN105517558A (zh) | 土庄绣线菊提取物及其用途 | |
CN115869308B (zh) | 一种小分子化合物在制备抗结直肠癌药物中的应用 | |
CN112773793B (zh) | 表观遗传因子抑制剂40569z在制备抗肝癌药物增敏剂中的应用 | |
CN115607561B (zh) | 一种协同增效抗肺癌药物组合物及其在医药上的应用 | |
CN110693903B (zh) | 一种治疗急性单核细胞白血病的药物及三氧化二砷和双氢青蒿素的应用 | |
CN118161508A (zh) | 一种mapk12抑制剂及其衍生物在制备靶向治疗肿瘤药物的增效剂中的应用 | |
CN112843052B (zh) | 表观遗传因子抑制剂2800z在制备抗肝癌药物增敏剂中的应用 | |
Cao et al. | Rosiglitazone enhances 5-fluorouracil-induced cell growth inhibition in hepatocellular carcinoma cell line Hep3B | |
WO2021016987A1 (en) | Pharmaceutical compound for treating colorectal cancer |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |