CN116459243A - γ-氨基丁酸在制备预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤产品中的应用 - Google Patents
γ-氨基丁酸在制备预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤产品中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本申请公开了γ‑氨基丁酸在制备预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤产品中的应用。所述γ‑氨基丁酸能够提高由乙醛处理后的细胞的存活率。
Description
技术领域
本申请涉及细胞损伤护理技术领域，尤其涉及γ-氨基丁酸在制备预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤产品中的应用。
背景技术
在日常生活中，烟、酒等多种物质及其代谢物会对细胞造成损害。例如，在日常饮食或饮酒后，口腔中的微生物会独立于肝脏代谢的方式利用酒精代谢产生大量乙醛(Acetaldehyde)。同时，大部分酒精经肝脏代谢后也会产生乙醛并进入血液流向包括口腔在内的全身各组织。此外，吸烟也是口腔中乙醛的一大来源，香烟在燃烧过程中会产生大量乙醛。而由于口腔中的微生物及人体缺乏ALDH，不能及时地将乙醛进一步代谢产生无害的乙酸，导致乙醛在口腔这个特殊环境中大量积累，引起口腔的严重损伤。
早在2012年，世界卫生组织(WTO)就将乙醛列为第一类致癌物。流行病学结果表明，饮酒与人体内的多种癌症风险上升有着明确的关联。全球每年有近80万癌症患者发病是由于酒精引起的，例如，有41％的口腔癌与酒精源性乙醛有关。
乙醛诱导的损伤与常规的创面性损伤不同。常见的创面性损伤主要涉及细胞破裂及外界微生物入侵诱发的炎症，同时，支持细胞的细胞外基质也会发生受损。因此，常规用于创面损伤的成分主要集中于止血、抗炎、促增殖等方面。而研究发现，乙醛诱导的损伤主要涉及氧化损伤和致癌两大方面。乙醛具有明显的细胞毒性，乙醛可诱导机体产生大量自由基，使细胞内的蛋白质、脂质、DNA等大分子发生氧化损伤。此外，乙醛还能与DNA共价结合形成加合物，引起DNA双链的交联与断裂，导致不可逆的细胞癌变。鉴于乙醛的种种危害，如何减轻乙醛对细胞组织的损伤具有重要意义。
发明内容
针对乙醛对细胞的巨大危害，本申请发现，γ-氨基丁酸(GABA)具有减轻乙醛引起的细胞损伤，从而完成了本发明。
本申请具体技术方案如下：
1.γ-氨基丁酸在制备预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤的产品中的应用。
2.根据项1所述的应用，所述γ-氨基丁酸用于预防或抑制由乙醛引起的氧化损伤或用于预防或抑制由乙醛引起的癌症。
3.根据项1或2所述的应用，所述由乙醛引起的细胞损伤的部位包括口腔、鼻腔或胃肠道。
4.根据项1-3中任一项所述的应用，所述产品包括口服制剂或外用制剂。
发明的效果
本申请将GABA或包含GABA的产品应用于由于乙醛引起的细胞损伤位置处，能够大大减少乙醛对细胞的损伤，这为制备抑制由乙醛引起的细胞损伤产品的开发制备提供新的理论基础和依据。
本申请将GABA应用于使用乙醛处理的细胞中，能够大大提高细胞的存活率，说明GABA可以减轻乙醛引起的细胞损伤。
具体实施方式
下面结合所描述的实施方式对本申请做以详细说明。虽然显示了本申请的具体实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本申请而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本申请，并且能够将本申请的范围完整的传达给本领域的技术人员。
需要说明的是，在说明书及权利要求当中使用了某些词汇来指称特定组件。本领域技术人员应可以理解，技术人员可能会用不同名词来称呼同一个组件。本说明书及权利要求并不以名词的差异作为区分组件的方式，而是以组件在功能上的差异作为区分的准则。如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本申请的较佳实施方式，然而所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本申请的范围。本申请的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。
本申请提供了γ-氨基丁酸在制备预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤产品中的应用。
在一些实施方式中，所述γ-氨基丁酸用于预防或抑制由乙醛引起的氧化损伤或用于预防或抑制由乙醛引起的癌症。
在一些实施方式中，所述由乙醛引起的细胞损伤的部位包括口腔、鼻腔或胃肠道。例如，包含由乙醛引起的口腔细胞损伤、鼻腔细胞损伤、呼吸道细胞损伤、胃黏膜细胞损伤、消化道细胞损伤及体内其它可能由乙醛引起的细胞损伤，优选口腔细胞损伤。
所述γ-氨基丁酸(GABA)指γ-aminobutyric acid，化学名为4-氨基丁酸，是一种在脊椎动物、植物和微生物中广泛存在的氨基酸，同时也是一种重要的抑制性神经递质。GABA最初是由Florey和Robert于1950年在哺乳动物脑萃取液中首先发现，之后大量研究表明GABA在哺乳动物神经中可降低神经元敏感性并防止神经细胞过度兴奋，具有安定、放松和消除神经紧张的作用。近年来也有研究表明GABA可以快速穿透皮肤，释放皱纹，淡化细纹，增强肌肉本身的放松机能，从而起到减压美容的效果。
本申请的发明人通过大量的实验研究创造性的发现，使用GABA对经过乙醛处理的细胞进行处理，能够提高细胞的活性，说明所述的GABA能够减缓乙醛对细胞的损伤，进而可以用于制备抑制由乙醛引起的细胞损伤产品中。
在一些实施方式中，所述产品包括口服制剂、外用制剂，对于具体的制剂类型，本申请不做限制，本领域技术人员可以根据使用需要自行在现有技术中进行选择，例如，所述口服制剂可以是粉剂、颗粒剂、胶囊、液体制剂、混悬液等，所述外用制剂可以是敷贴、喷剂、膏霜、液体涂抹制剂等。
在一些实施方式中，所述产品包括口腔护理产品。
本申请提供了一种具有预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤的产品，其包含0.0001％-5％的γ-氨基丁酸。
在一些实施方式中，所述γ-氨基丁酸在所述产品中的浓度为0.0001％-5％，优选为0.01％-5％。
例如，所述γ-氨基丁酸在所述产品中的浓度可以为0.0001％、0.0002％、0.0003％、0.0004％、0.0005％、0.0006％、0.0007％、0.0008％、0.0009％、0.001％、0.002％、0.003％、0.004％、0.005％、0.006％、0.007％、0.008％、0.009％、0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.5％、1％、2％、3％、4％、5％等。
在本申请中，当产品直接用于细胞实验时，γ-氨基丁酸在所述产品中的含量可以为0.0001％-0.1％，优选为0.01％-0.1％，当产品作为口服或外用制剂时，γ-氨基丁酸的含量可能会发生变化，但γ-氨基丁酸在产品中的含量一般不超过5％。
在一些实施方式中，所述产品包括口服制剂或外用制剂。对于具体的制剂类型，本申请不做限制，本领域技术人员可以根据使用需要自行在现有技术中进行选择，例如，所述口服制剂可以是粉剂、颗粒剂、胶囊、液体制剂、混悬液等，所述外用制剂可以是敷贴、喷剂、膏霜、液体涂抹制剂等。
在一些实施方式中，所述产品包括漱口水、牙膏、散剂、含片或口腔贴膜。对于漱口水、牙膏、散剂、含片或口腔贴膜的制备方法，本申请不作任何限制，其均可以通过本领域常规的制备方法制备得到。
在一些实施方式中，所述产品还包括抗菌剂、抗龋剂、抗敏剂、抗结石剂、抗炎剂、美白剂、保湿剂中的一种或两种以上。
例如，所述麦角硫因可以与包括抗菌剂、抗龋剂、抗敏剂、抗结石剂、抗炎剂、美白剂、保湿剂中的任一种或者任两种或者任三种或者任四种或者与上述所述的全部成分同时用于具有抑制由乙醛引起的细胞损伤的产品中。
在本申请中，对于抗菌剂，本申请不作任何限制，其可以是本领域常规的抗菌剂，例如，所述抗菌剂可以为氯化亚锡、四氢姜黄素、三氯生等。
在本申请中，对于抗龋剂，本申请不作任何限制，其可以是本领域常用的抗龋剂，例如，所述抗龋剂可以为磷酸钙、三偏磷酸钠、甘油磷酸镁、乳磷酸钙等。
在本申请中，对于抗敏剂，本申请不作任何限制，其可以是本领域常用的抗敏剂，例如，所述抗敏剂可以为甘草酸二钾、氟化钾、氯化钾等。
在本申请中，对于抗结石剂，本申请不作任何限制，其可以是本领域常用的抗结石剂，例如，所述抗结石剂可以为焦磷酸盐、三聚磷酸盐、柠檬酸盐等。
在本申请中，对于抗炎剂，本申请不作任何限制，其可以是本领域常用的抗炎剂，例如，所述抗炎剂可以为甲硝唑、替硝唑、奥硝唑等。
在本申请中，对于美白剂，本申请不作任何限制，其可以是本领域常用的美白剂，例如，所述美白剂可以为过氧化物漂白剂、木瓜蛋白酶、葡萄糖氧化酶等。
在本申请中，对于保湿剂，本申请不作任何限制，其可以是本领域常用的保湿剂，例如，所述保湿剂可以为甘油、丙二醇、山梨醇、木糖醇、玻尿酸等。
在一些实施方式中，所述产品还包括pH调节剂、增稠剂、渗透压调节剂中的一种或两种以上。所述pH调节剂可以为本领域领域可用的酸、碱、无机盐等；所述增稠剂可以为羟乙基纤维素、羧甲基纤维素及其盐、黄原胶等；所述渗透压调节剂可以是本领域可用的无机盐等。
本申请提供了一种以非治疗目的抑制由乙醛引起的细胞损伤的方法，包括将包含γ-氨基丁酸的产品或上述的产品施用于到所述损伤的位置处，能够降低乙醛引起的细胞损伤。
在一些实施方式中，包含γ-氨基丁酸的产品或上述的产品涂抹或喷洒到受试者的细胞损伤位置处，例如，涂抹或喷洒到受试者的口腔。
乙醛诱导的细胞损伤主要涉及氧化损伤和致癌两大方面，对于氧化损伤和致癌，目前均没有有效的治疗方法，而本申请的发明人创造性地发现γ-氨基丁酸能够减缓乙醛引起的损伤，这为治疗由于乙醛引起的氧化损伤和致癌提供了新的依据。
实施例
本申请对试验中所用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述，在下面的实施例中，如果无其他特别的说明，％表示wt％，即重量百分数。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
实施例1
实验材料：乙醛、DMEM培养基。
实验样品溶液：将17.7M的乙醛用DMEM培养基进行稀释，配成不同终浓度的实验样品溶液，其浓度为表2所示。
方法：将CA9-22细胞与不同的实验样品溶液共培养1天后，移除实验样品溶液，加入MTT，3小时后小心吸去上清液，加入二甲亚砜(DMSO)，利用酶标仪检测各孔在550nm处的吸光值；以未处理孔作为对照，定义样品孔吸光值为T，未处理孔吸光值为NT，以NT作为100％，样品孔T/NT的比值作为细胞活性，其结果如表1所示。在满足差异显著性要求的基础上，细胞活性％越大，抑制乙醛引起的细胞损伤效果越好。
表1细胞活性结果
| 样品 | 细胞活性 |
| 对照组 | 100％ |
| 乙醛-0.02M | 70％ |
| 乙醛-0.01M | 89％ |
| 乙醛-0.005M | 93％ |
| 乙醛-0.001M | 93％ |
| 乙醛-0.0001M | 96％ |
从上表可以看出，不同浓度的乙醛处理细胞后均会造成细胞损伤，随着乙醛浓度的增加，损伤越明显，为了验证GABA对乙醛引起的口腔损伤的缓解作用，本申请选用0.02M的乙醛作为细胞损伤剂量。
实施例2
实验材料：乙醛、GABA、DMEM培养基。
实验样品溶液：将GABA粉末和17.7M的乙醛分别用DMEM培养基进行溶解稀释，之后将两者按不同配比混合后，制成不同终浓度的实验样品溶液，其如表2所示。
方法：将CA9-22细胞与不同的实验样品溶液共培养1天后，移除实验样品溶液，加入MTT，3小时后小心吸去上清液，加入二甲亚砜(DMSO)，利用酶标仪检测各孔在550nm处的吸光值；以未处理孔作为对照，定义样品孔吸光值为T，未处理孔吸光值为NT，以NT作为100％，样品孔T/NT的比值作为细胞活性，其结果如表2所示。在满足差异显著性要求的基础上，细胞活性％越大，抑制乙醛引起的细胞损伤效果越好。
表2细胞活性结果
| 样品 | 乙醛浓度(M) | GABA浓度(wt％) | 细胞活性 |
| 1 | / | / | 100％ |
| 2 | 0.02 | / | 70％ |
| 3 | 0.02 | 0.001 | 75％ |
| 4 | 0.02 | 0.01 | 77％ |
| 5 | 0.02 | 0.02 | 78％ |
| 6 | 0.02 | 0.05 | 81％ |
| 7 | 0.02 | 0.1 | 83％ |
从上表可以看到，乙醛处理组的细胞存活率为70％，当加入GABA后，CA9-22的细胞活性上升，结果表明GABA可以减轻乙醛引起的细胞损伤。
以上所述，仅是本申请的较佳实施例而已，并非是对本申请作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本申请技术方案内容，依据本申请的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本申请技术方案的保护范围。
Claims (4)
1.γ-氨基丁酸在制备预防或抑制由乙醛引起的细胞损伤的产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，所述γ-氨基丁酸用于预防或抑制由乙醛引起的氧化损伤或用于预防或抑制由乙醛引起的癌症。
3.根据权利要求1或2所述的应用，所述由乙醛引起的细胞损伤的部位包括口腔、鼻腔或胃肠道。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，所述产品包括口服制剂或外用制剂。
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| WO2024140865A1 (zh) * | 2022-12-28 | 2024-07-04 | 华熙生物科技股份有限公司 | γ-氨基丁酸在预防和/或改善刺激物引起的细胞损伤的用途和方法 |
-
2022
- 2022-12-28 CN CN202211694759.5A patent/CN116459243A/zh active Pending
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024140865A1 (zh) * | 2022-12-28 | 2024-07-04 | 华熙生物科技股份有限公司 | γ-氨基丁酸在预防和/或改善刺激物引起的细胞损伤的用途和方法 |
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