CN116322679A

CN116322679A - 用于降低脑组织中鞘糖脂浓度的方法以及涉及降低脑组织中鞘糖脂浓度的神经系统变性疾病的治疗方法

Info

Publication number: CN116322679A
Application number: CN202180065014.XA
Authority: CN
Inventors: T·Z·菲舍尔; J·佩特施密特
Original assignee: Genzyme Corp
Current assignee: Genzyme Corp
Priority date: 2020-07-30
Filing date: 2021-07-30
Publication date: 2023-06-23
Also published as: WO2022024062A1; US20230372313A1; JP2023535483A; IL300096A; CA3187086A1; AU2021317180A1; MX2023001285A; EP4188381A1; BR112023001362A2; KR20230047146A

Abstract

提供了用于治疗或预防人类受试者中的帕金森病或路易体痴呆的方法。所述方法靶向所述受试者脑组织中的脂质失调，并且尤其可以降低脑组织中鞘糖脂的浓度。所述方法使用式(I)的奎宁环化合物或其药学上可接受的前药或盐。特别地，所述人类受试者可以是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的携带者，例如GBA1突变的杂合携带者。还提供了用于评估如本文所述的治疗的有效性的方法。

Description

用于降低脑组织中鞘糖脂浓度的方法以及涉及降低脑组织中鞘糖脂浓度的神经系统变性疾病的治疗方法

本公开文本涉及用于治疗或预防人类受试者的帕金森病或路易体痴呆的改善的方法。所述方法靶向所述受试者脑组织中的脂质失调，并且尤其可以降低脑组织中鞘糖脂的浓度。所述方法使用式(I)的奎宁环化合物，包括(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯，或其药学上可接受的盐或前药。特别地，所述人类受试者可以是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的携带者，例如GBA1突变的杂合携带者。本公开文本还涉及用于评估如本文所述的治疗的有效性的方法。

背景技术

编码溶酶体酶葡糖脑苷脂酶的GBA1基因的突变增加了携带所述突变的人患上帕金森病(“PD”)的风险(Migdalska-Richards等人,J Neurochem 2016；139:77-90)。此风险在杂合GBA1突变携带者中增加5倍，并且在纯合携带者中增加10-20倍(Riboldi等人,Cells2019；8(4):364)。GBA1突变(功能失去)的纯合携带者通常患有戈谢病，一种溶酶体贮积障碍。尽管大多数GBA1突变携带者不会患上突触核蛋白病，但是估计7％-10％的PD患者携带GBA1突变，其患病率因种族和地理环境而异(Blandini等人,Mov Disord 2019；34:9-21)。这些突变与一些患者更早的疾病发作和更快的认知衰退相关。GBA1突变也归因于路易体痴呆(DLB)。

GBA1突变促进PD或DLB发病的确切机制尚不清楚。对戈谢相关突触核蛋白病(Gba^D409V/D409V)(其表现为α-突触核蛋白聚集体在CNS中的逐渐积累以及记忆障碍)的小鼠模型的研究已经表明，用脑渗透剂GCS抑制剂治疗可以减少海马病理性α-突触核蛋白聚集体积累和突触核蛋白病的症状(Sardi等人,Proc Natl Acad Sci USA 2017；114:2699-704)。然而，尚未确定这些结果与人类受试者(尤其是携带杂合GBA1突变的受试者)的脑组织中的脂质失调的相关性。因此，仍然需要阐明调节CNS中糖脂水平的影响，并且需要开发用于治疗人类PD和DLB的改善的方法。

本发明人已经出乎意料地发现，如本文所述的化合物能够在体内调节未患溶酶体贮积病(如戈谢病)的人类受试者的CNS中的鞘糖脂水平。鞘糖脂水平的这种调节反映在生物流体如脑脊液(“CSF”)中葡糖神经酰胺(“GL-1”)浓度的显著降低。此外，CSF中GL-1水平的降低也以剂量依赖性方式与施用的化合物的浓度相关。因此，诸位发明人已经确定，经由口服施用如本文所述的化合物，可以实现对患有PD的人类受试者脑组织中的鞘糖脂谱的调节。不希望受理论束缚，诸位发明人假设本发明的化合物能够对CNS中的鞘糖脂失调产生积极影响。这可以导致溶酶体功能改善、神经元蛋白α-突触核蛋白的加工改善以及神经元功能障碍的减少，即使是在携带杂合GBA1突变的受试者中。这在PD患者只能使用对症治疗(如左旋多巴、多巴胺激动剂和/或深部脑刺激)时特别重要，因此目前对于开发减缓、停止或甚至逆转神经变性的治疗存在尚未满足的医学需求。

发明内容

因此，在第一方面，本发明提供了一种治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病；所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(I)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中：

R¹选自氢、卤素(例如，氟)、氰基、硝基、羟基、硫代基、氨基、C_1-6-烷基(例如，甲基或乙基)、C_2-6-烯基、C_2-6-炔基、C_1-6-烷基氧基、C_2-6-烯基氧基和C_2-6-炔基氧基，其中所述烷基、烯基、炔基、烷基氧基、烯基氧基或炔基氧基任选地被选自卤素、氰基、硝基、羟基、硫代基或氨基的一个或多个(例如，1、2或3个)基团取代；

R²和R³独立地选自C_1-3-烷基，所述烷基任选地被一个或多个(例如，1、2或3个)卤素取代，或者R²和R³一起形成环丙基或环丁基，所述环丙基或环丁基任选地被一个或多个(例如，1或2个)卤素取代；

R⁴、R⁵和R⁶各自独立地选自氢、卤素、硝基、羟基、硫代基、氨基、C_1-6-烷基和C_1-6-烷基氧基，其中所述烷基或烷基氧基任选地被选自卤素、羟基、氰基和C_1-6-烷基氧基的一个或多个(例如，1、2或3个)基团取代；并且

A是5元或6元芳基或杂芳基(例如，苯基或噻唑基)，所述芳基或杂芳基任选地被独立地选自卤素、羟基、硫代基、氨基、硝基、C_1-6烷基氧基和C_1-6烷基的1、2或3个基团取代。

在实施方案中，R¹选自氢、氟、甲基和乙基，其中所述甲基或乙基任选地被选自卤素、羟基、硫代基或氨基的1或2个基团取代。

在实施方案中，R²和R³各自独立地选自甲基和乙基，所述甲基和乙基任选地被一个或多个氟取代。

在实施方案中，R⁴选自卤素(例如，氟)、C_1-3-烷基(例如，甲基)和C_1-3-烷基氧基(例如，甲氧基或乙氧基)，其中所述烷基或烷基氧基任选地被选自卤素和C_1-3-烷基氧基(例如，甲氧基或乙氧基)的一个或多个(例如1、2或3个)基团取代。

在实施方案中，R⁵和R⁶各自是氢。在实施方案中，R⁴是氟或2-甲氧基乙氧基，并且R⁵和R⁶是氢。

在实施方案中，R⁴位于其所附接的苯环的4位(即，A取代基的对位)。

在实施方案中，A是苯基，其任选地被独立地选自卤素、羟基、硫代基、氨基、硝基、C_1-6烷基氧基和C_1-6烷基(例如，甲基)的1、2或3个基团取代。在一个实施方案中，附接至所述A取代基的两个基团彼此的位置呈1,3-或1,4-关系(即，间位或对位)。在其他实施方案中，A是5元杂芳基，所述杂芳基含有选自N和S的1或2个杂原子。在一个实施方案中，附接至A取代基的两个基团彼此的位置呈1,3-关系(即，间位)。

在实施方案中，所述化合物是式(II)、(III)或(IV)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

在实施方案中，所述化合物是式(V)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

在实施方案中，所述化合物是式(VI)、(VII)或(VIII)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

在实施方案中，所述化合物是式(IX)或(XI)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。在一个实施方案中，R⁴是氟。

在实施方案中，所述化合物选自：奎宁环-3-基(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；及其药学上可接受的盐和前药。在一个实施方案中，所述化合物是奎宁环-3-基(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸酯。在另一个实施方案中，所述化合物是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯。在一个实施方案中，所述化合物是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯的酸加成盐形式，选自盐酸盐、羟基琥珀酸盐和苹果酸盐。

在实施方案中，所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者。例如，所述一个或多个基因(GBA1)突变可以选自严重突变(例如，在表1中表示为“严重GBA突变”的那些，如L444P)和其他(即非严重)GBA1突变(例如，在表1中表示为“其他GBA突变”的那些，如N370S)。在实施方案中，所述一个或多个GBA1突变选自L444P、84GG、A456P、R120W、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。例如，所述受试者是L444P突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。在另一个例子中，所述受试者是N370S突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。

在实施方案中，所述脑组织是(或包含)神经元。

在进一步的方面，本发明提供了一种治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者；所述方法包括向所述受试者施用有效量的如前文所定义的式(I)的化合物。

在实施方案中，所述一个或多个GBA1突变选自L444P、84GG、A456P、R120W、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。例如，所述受试者是L444P突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。在另一个例子中，所述受试者是N370S突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。

在实施方案中，所述方法导致CSF中的GL-1浓度降低至少40％，例如，至少50％、至少60％或至少70％。

在实施方案中，在开始治疗的3个月内(例如在开始治疗的2个月、4周、2周或1周内)，所述方法导致所述CSF中的GL-1浓度降低。

在实施方案中，所述受试者已经被诊断为患有帕金森病。在其他实施方案中，所述受试者已经被诊断为有风险患上帕金森病，并且所述方法预防或延迟所述受试者中的帕金森病的发作和/或发展。

在实施方案中，所述受试者具有帕金森病的诊断，并且所述方法预防、减少或逆转运动功能障碍(例如，震颤)、运动迟缓、强直、姿势不稳定和/或平衡受损。在一个实施方案中，所述受试者具有帕金森病的诊断，并且所述受试者具有至少一个以下特征：i)帕金森病的家族史；ii)基线蒙特利尔认知评估(MoCA)得分≤26(例如，从20至25)；以及iii)运动障碍学会-统一帕金森病评定量表(MDS-UPDRS)(第II部分+第III部分)得分为至少35。在一个实施方案中，所述受试者具有特征在于以下的早期帕金森病的诊断：i)至少两种以下病症：静止性震颤、姿势不稳定、运动不能/运动减少和肌强直；ii)在基线时Hoehn和Yahr量表分期≤2期；和/或iii)帕金森病诊断≥2年。

在实施方案中，所述受试者在过去已经用选自以下的药物治疗：二羟基苯丙氨酸(DOPA)或其衍生物(例如，左旋多巴/卡比多巴)、单胺氧化酶B抑制剂(例如，雷沙吉兰或司来吉兰)、多巴胺激动剂(例如，罗匹尼罗、溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索或阿朴吗啡)、儿茶酚-O-甲基转移酶抑制剂(例如，恩他卡朋、托卡朋)、抗胆碱药(例如，安坦、苯甲托品)、金刚烷衍生物和/或乙酰胆碱酯酶抑制剂(例如，他克林、利斯的明、加兰他敏、多奈哌齐或美金刚)。

在实施方案中，所述受试者具有路易体痴呆(DLB)的诊断。在一个实施方案中，所述方法预防、减少或逆转所述受试者的痴呆的进展。

在进一步的方面，本发明提供了一种降低有需要的人类受试者脑组织中的鞘糖脂浓度的方法，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度由于所述方法而降低，其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病；所述方法包括向所述受试者施用有效量的如前文所定义的式(I)的化合物。

在实施方案中，所述方法导致CSF中的GL-1浓度降低至少30％，例如，至少40％、至少50％、至少60％或至少70％。

在实施方案中，在开始治疗的3个月内(例如在开始治疗的2个月、1个月、3周、2周或1周内)，所述方法导致所述CSF中的GL-1浓度降低。

在实施方案中，所述脑组织是所述受试者的黑质、大脑皮层、海马、额叶和/或颞叶的神经元。

在实施方案中，将所述化合物或其药学上可接受的盐或前药通过全身施用来施用，例如经由非肠胃外途径施用。在一个实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐或前药是口服施用的。

在实施方案中，向所述受试者施用约2mg至约30mg的每日剂量的所述化合物或其药学上可接受的盐或前药，例如从2mg至20mg、或从2mg至10mg、或从4mg至8mg、或从10至20mg、或从4mg至15mg或选自4mg、8mg和15mg的剂量。

在实施方案中，所述方法预防、减少或逆转所述受试者的认知领域中的衰退。

在实施方案中，所述方法有效改善所述受试者的认知能力或减少认知缺陷，如通过以下测量的：完成连线试验(TMT)所花费的时间TMT-A和/或TMT-B的减少、TMT-A时间与TMT-B时间之间的差(TMT-A-TMT-B)的减少，例如，减少至少10％、或至少20％、或至少30％、或至少40％、或至少50％(例如，其中TMT-A减少5％-20％，和/或TMT-B减少25％-30％，和/或[TMT-A-TMT-B]减少25％-30％)。在一个实施方案中，所述方法预防、减少或逆转注意力和专注力、执行功能、记忆(例如，工作记忆)、语言、视觉构造技能、概念思维、计算、定向、决策和/或问题解决方面的衰退。

在实施方案中，所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变(例如，L444P和/或N370S)的杂合携带者，并且所述化合物是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯的苹果酸加成盐，并且以约15mg(按等效量的游离碱测量)的每日剂量口服施用。在一个实施方案中，在开始治疗的3个月内(例如在开始治疗的2个月、1个月、3周、2周或1周内)，所述化合物在所述受试者CSF中的浓度(按等效量的游离碱测量)为至少4ng/ml，例如，至少8ng/ml或至少10ng/ml。

在实施方案中，所述方法导致脑中(例如额叶、枕叶、顶叶或颞叶中的一个或多个中)的血流量增加，例如如通过fMRI成像所示；和/或脑中(例如，在脑的后部与前部之间，和/或在枕叶-顶叶结构与额叶、颞叶和/或边缘结构之间，例如如通过fMRI成像所示)的结节连通性增加。

本发明进一步提供了一种如前文所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法中，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病。

在实施方案中，所述治疗或预防的方法是如前文所定义的。

本发明还提供了如前文所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药在制造用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法的药剂中的用途，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病。在实施方案中，所述治疗或预防的方法是如前文所定义的。

本发明进一步提供了一种如前文所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法中，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变(例如，L444P和/或N370S)的杂合携带者。在实施方案中，所述治疗或预防的方法是如前文所定义的。

在进一步的方面，本发明提供了如前文所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药在制造用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法的药剂中的用途，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变(例如，L444P和/或N370S)的杂合携带者。在实施方案中，所述治疗或预防的方法是如前文所定义的。

本文所公开的方法和化合物的另外的特征和优点将根据以下详细描述而变得清楚。

附图说明

图1示出了临床试验第1部分中参与者的处置。两名世界其他地区(“ROW”)的参与者在接受化合物2后和第4周后(主要分析期)由于不良反应永久中止了研究。一名参与者(低剂量)由于意识错乱状态而中止，一名参与者(高剂量)由于惊恐发作而中止。

图2描绘了研究设计，包括次要终点和探索性终点。每4周跟踪所有参与者，持续最长36周(对于日本参与者，长达52周)。在当所有参与者完成第一个4周疗程时的数据审查后证明安全性和耐受性时，进行顺序群组中的剂量递增。

图3示出了在8周的重复给药期间，紧接在治疗施用之前在研究参与者中观察到的化合物2的平均血浆浓度(C_谷)。示出了接受低、中和高剂量化合物2的日本和ROW参与者的结果。虚线指示定量下限(LLOQ＝0.5ng/mL)。

图4示出了在试验的第1部分中接受安慰剂或用化合物2(低、中或高剂量)治疗的日本和ROW参与者中血浆(A)和CSF(B)GL-1水平相对于基线的平均变化百分比。在基线时、第2周结束时(深灰色条；每对的左侧条)和第4周结束时(浅灰色条；每对的右侧条)收集的血浆样品中以及在基线时和第4周结束时收集的CSF样品中，评估GL-1水平。^a没有收集来自ROW群体的1名参与者的第4周CSF样品。

图5示出了在基线时(深灰色条；每对的左侧条)和第4周(浅灰色条；每对的右侧条)，在试验的第1部分中接受安慰剂或化合物2(低、中或高剂量)的日本和ROW参与者的血浆(A)和CSF(B)中的平均GL-1水平。^a没有收集来自ROW群体的1名参与者的第4周CSF样品。

定义

除非另外定义，否则本文所用的全部技术和科学术语具有与本公开文本所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的意义。尽管在本发明的实施和测试中可以使用任何与本文所述的那些相似或等同的方法和材料，但现在描述示例性的方法、装置和材料。本文所引用的所有技术和专利出版物均都通过引用以其整体并入本文。本文的任何内容都不应解释为承认本发明因在先发明而无权早于此类披露内容。

除非另有指示，否则本公开文本的实践将采用组织培养、免疫学、分子生物学、微生物学、细胞生物学和重组DNA的常规技术，这些在本领域的技能之内。参见例如，MichaelR.Green和Joseph Sambrook,Molecular Cloning(第4版,Cold Spring HarborLaboratory Press 2012)；系列Ausubel等人编辑(2007)Current Protocols inMolecular Biology；系列Methods in Enzymology(Academic Press,Inc.,N.Y.)；MacPherson等人(1991)PCR 1:A Practical Approach(IRL Press at Oxford UniversityPress)；MacPherson等人(1995)PCR 2:A Practical Approach；Harlow和Lane编辑(1999)Antibodies,A Laboratory Manual；Freshney(2005)Culture of Animal Cells:A Manualof Basic Technique,第5版；Gait编辑(1984)Oligonucleotide Synthesis；美国专利号4,683,195；Hames和Higgins编辑(1984)Nucleic Acid Hybridization；Anderson(1999)Nucleic Acid Hybridization；Hames和Higgins编辑(1984)Transcription andTranslation；Immobilized Cells and Enzymes(IRL Press(1986))；Perbal(1984)APractical Guide to Molecular Cloning；Miller和Calos编辑(1987)Gene TransferVectors for Mammalian Cells(Cold Spring Harbor Laboratory)；Makrides编辑(2003)Gene Transfer and Expression in Mammalian Cells；Mayer和Walker编辑(1987)Immunochemical Methods in Cell and Molecular Biology(Academic Press,London)；Herzenberg等人编辑(1996)Weir’s Handbook of Experimental Immunology；Manipulating the Mouse Embryo:A Laboratory Manual,第3版(Cold Spring HarborLaboratory Press(2002))；Sohail(编辑)(2004)Gene Silencing by RNA Interference:Technology and Application(CRC Press)。

包括范围在内的所有数字表达(例如pH、温度、时间、浓度、分子量等)都是近似值，其在适当的情况下改变((+)或(-))0.1或1.0的增量。尽管不总是明确说明，但应理解，所有数字表达前面都有术语“约”。与任何数值相关的术语“约”表示在常规范围内围绕该值的可变性。例如，所述数值可以变化±10％、±5％、±1.0％或±0.5％。还应理解，尽管不总是明确说明，本文所述的试剂仅是示例性的并且此类试剂的等效物是本领域已知的。

为了避免疑问，对数值范围的任何公开，例如“高达X”量，旨在包括数值上限X。因此，公开的“高达60mg”包括60mg。类似地，数值范围的任何公开也旨在包括数值下限，例如“从A至”或“至少A”。因此，公开的“从5mg至50mg”或“至少5mg”包括5mg。

除非上下文另有明确指示，如说明书和权利要求中所用，单数形式“一个/一种(a/an)”以及“所述(the)”包括复数指示物。例如，术语“细胞”包括多个细胞，包括其混合物。除非具体说明或从上下文明显看出，如本文所用，术语“或”应理解为包含在内。术语“包括”在本文中用于意指短语“包括但不限于”并且可与其互换使用。术语“和/或”用于包括其中使用所述术语的列表的一个或多个项目的所有组合。例如，“特征A、B和/或C”涵盖“A”、“B”、“C”、“A和B”、“A和C”、“B和C”和“A、B和C”中的每一个。

如本文所用，术语“包含”(“comprising”或“comprise”)旨在表示组合物和方法包括所列举的元素，但不排除其他元素。当用于定义组合物和方法时，“基本上由……组成”应意指排除对所陈述目的的组合具有任何重要意义的其他元素。因此，如本文所定义的基本上由元素组成的组合物将不排除来自分离和纯化方法的微量污染物和药学上可接受的载体(如磷酸盐缓冲盐水)、防腐剂等。“由……组成”将意指排除超过微量的其他成分的元素以及用于施用本发明的组合物的实质方法步骤或产生组合物或实现预期结果的过程步骤。由这些过渡术语中的每一个定义的实施方案都在本发明的范围内。本文中的术语“包含”的使用旨在涵盖“基本上由……组成”和“由……组成”。

“受试者”、“个体”或“患者”在本文中可互换使用，并且是指人。

“施用”在本文中被定义为以导致药剂存在于受试者体内的方式向所述受试者提供所述药剂或含有所述药剂的组合物的手段。这种施用可以通过任何途径，包括但不限于口服、透皮(例如阴道、直肠、口腔粘膜)、通过注射(例如皮下、静脉内、肠胃外、腹膜内进入CNS)或通过吸入(如口服或经鼻)。当然，通过适合于每种施用途径的形式给予药物制剂。

疾病的“治疗”(“treating”或“treatment”)包括：(1)抑制疾病，即阻止或减少疾病或其临床症状的发展；和/或(2)缓解疾病，即引起疾病或其临床症状的消退。

疾病的“预防”(“preventing”或“prevention”)包括预防疾病，即使疾病的临床症状在可能易感染疾病但尚未经历或显示疾病症状的患者中不发展。

如本文所用，短语“治疗或预防……”(如短语“治疗或预防疼痛”)意在等同于短语“在治疗或预防……的方法中”(如在短语“在治疗或预防疼痛的方法中”中)。

“有风险患上”疾病(例如有风险患上溶酶体贮积病的患者)是指可能易感染所述疾病的患者，例如，患者可能在其家族谱系中有病史或存在与所述疾病相关的基因突变。有风险患上疾病的患者尚未发展出所述疾病的全部或一些特征性病理。

与术语“治疗”相关的术语“患有”是指被诊断为患有或易感染疾病的患者或个体。由于其家族谱系中的疾病史或由于存在与疾病相关的基因突变，患者也可能被称为“有风险患上”疾病。

术语“杂合的”是指具有两个不相同的等位基因的受试者。“杂合突变”意指其中单个等位基因携带一个或多个突变而另一个等位基因不携带突变的基因，或者其中两个等位基因都携带一个或多个突变且两个等位基因之间的突变不同的基因(“复合杂合的”)。

“有效量”或“治疗有效量”是足以实现所需的治疗或生理结局(即用于降低受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，例如，作为治疗或预防选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)的神经系统变性疾病的一部分)的量。有效量可以在一次或多次施用、应用或剂量中施用。这种递送取决于许多变量，包括使用单独剂量单位要持续的时间段、治疗剂的生物利用度、施用途径等。然而，应当理解，本发明的治疗剂对于任何特定受试者的特定剂量水平取决于多种因素，包括例如所使用的特定化合物的活性、受试者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食、施用时间、排泄速率、药物组合以及所治疗的特定障碍的严重程度和施用形式。通常可以对治疗剂量进行滴定以优化安全性和功效。典型地，来自体外和/或体内测试的剂量-效应关系最初可以提供关于供患者施用的适当剂量的有用指导。通常，期望施用化合物的量有效实现受试者CSF中的GL-1水平的降低，从而验证所述受试者脑组织中鞘糖脂浓度的降低。

如本文所用，术语“药学上可接受的赋形剂”涵盖任何标准药物赋形剂，包括载体如磷酸盐缓冲盐水溶液、水和乳液(如油/水或水/油乳液)以及各种类型的润湿剂。药物组合物还可以包含稳定剂和防腐剂。关于载体、稳定剂和佐剂的例子，参见Remington'sPharmaceutical Sciences(第20版,Mack Publishing Co.2000)。

如本文所用，术语“前药”意指母体药物分子的药理学衍生物，其需要在生物体内自发或酶促地进行生物转化以释放活性药物。例如，前药是本文所述的奎宁环化合物的变体或衍生物，所述变体或衍生物具有在某些代谢条件下可切割的基团，所述前药在被切割时变为本文所述的奎宁环化合物，例如，式I的化合物。当此类前药在生理条件下经历溶剂分解或经历酶促降解时，则它们在体内具有药学活性。本文的前药化合物可以被称为单重的、双重的、三重的等，这取决于在生物体内释放活性药物所需的生物转化步骤的数量以及前体型形式中存在的官能团的数量。前药形式在哺乳动物生物体内通常提供溶解性、组织相容性或延迟释放的优点(Bundgard,Design of Prodrugs,第7-9,21-24页,Elsevier,Amsterdam 1985和Silverman,“The Organic Chemistry of Drug Design and DrugAction”,第352-401页,Academic Press,San Diego,Calif.,1992)。

本领域通常已知的前药包括熟知的酸衍生物，例如像由酸化合物与合适的醇反应制备的酯、由酸化合物与胺反应制备的酰胺、碱性基团反应以形成酰化的碱衍生物等。其他前药衍生物可以与本文公开的其他特征组合以增加生物利用度。因此，本领域技术人员将理解，目前公开的某些具有例如游离氨基或羟基的化合物可以转化为前药。前药包括具有氨基酸残基或两个或更多个(例如，两个、三个或四个)氨基酸残基的多肽链的化合物，所述氨基酸残基通过肽键与目前公开的化合物的游离氨基、羟基或羧酸基团共价接合。所述氨基酸残基包括通常由三个字母符号指定的20种天然存在的氨基酸，并且还包括4-羟脯氨酸、羟赖氨酸、锁链赖氨酸(demosine)、异锁链赖氨酸、3-甲基组氨酸、正缬氨酸(norvalin)、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、同型半胱氨酸、同型丝氨酸、鸟氨酸和甲硫氨酸砜。前药还包括具有与本文公开的以上任何取代基共价键合的碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺或烷基酯部分的化合物。

如本文所用，术语“药学上可接受的盐”意指当前公开的化合物的药学上可接受的酸加成盐或药学上可接受的碱加成盐，所述盐可以被施用而不产生任何一种或多种实质性不希望的生物作用或不产生与可能含有它的药物组合物的任何其他组分的任何一种或多种有害相互作用。

如本文所用，术语“游离碱”意指本身所提及的化合物，例如不是盐或前药的形式。提及“……5mg(按等效量的游离碱测量)的剂量”时意指存在一定量的以游离碱或盐或前药的形式存在的化合物，所述量对应于5mg游离碱的相同摩尔量，即呈盐形式的化合物将具有大于5mg的质量。除非另有指示，否则用于施用的活性化合物的量(无论是以游离碱还是盐形式施用)是指或者基于呈游离碱形式的化合物的量。

如本文所用，术语“C_1-6-烷基”意指基本上由1至6个碳原子和相应数量的氢原子组成的饱和直链或支链自由基。示例性C_1-6-烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基等。考虑到本公开文本的有益效果，其他C_1-6-烷基对于本领域技术人员来说将是清楚的。术语“C_1-3-烷基”、“C_1-4-烷基”等具有等同的含义，即基本上由1至3个(或4个)碳原子和相应数量的氢原子组成的饱和直链或支链自由基。

如本文所用，术语“C_2-6-烯基”意指基本上由2至6个碳原子和相应数量的氢原子组成的不饱和直链或支链自由基，所述自由基包含至少一个碳-碳双键。示例性C_2-6-烯基包括乙烯基、丙-1-烯基、丙-2-烯基、异丙烯基、丁-1-烯基、2-甲基-丙-1-烯基、2-甲基-丙-2-烯基等。考虑到本公开文本的有益效果，其他C_2-6-烯基对于本领域技术人员来说将是清楚的。

如本文所用，术语“C_2-6-炔基”意指基本上由2至6个碳原子和相应数量的氢原子组成的不饱和直链或支链自由基，所述自由基包含至少一个碳-碳三键。示例性C_2-6-炔基包括乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、3-甲基-丁-1-炔基等。考虑到本公开文本的有益效果，其他C_2-6-炔基基对于本领域技术人员来说将是清楚的。

如本文所用，术语“C_1-6-烷氧基”意指基本上由1至6个碳原子(和相应数量的氢原子)和氧原子组成的饱和直链或支链自由基。C_1-6-烷基氧基经由氧原子附接。示例性C_1-6-烷基氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基等。考虑到本公开文本的益处，其他C_1-6-烷氧基对于本领域技术人员来说将是清楚的。术语“C_1-3-烷基氧基”、“C_1-4-烷基氧基”等具有等同的含义，即基本上由1至3个(或4个)碳原子(和相应数量的氢原子)和氧原子组成的饱和直链或支链自由基，其中所述自由基经由氧原子附接。

如本文所用，术语“C_2-6-烯基氧基”意指基本上由2至6个碳原子(和相应数量的氢原子)和氧原子组成的不饱和直链或支链自由基，所述自由基包含至少一个碳-碳双键。C_2-6-烯基氧基经由氧原子附接。示例性的C_2-6-烯基氧基是乙烯基氧基；考虑到本公开文本的有益效果，其他的对于本领域技术人员来说将是清楚的。

如本文所用，术语“C_2-6-炔基氧基”意指基本上由2至6个碳原子(和相应数量的氢原子)和氧原子组成的不饱和直链或支链自由基，所述自由基包含至少一个碳-碳三键。C_2-6-烯基氧基经由氧原子附接。示例性的C_2-6-烯基氧基是乙炔基氧基；考虑到本公开文本的有益效果，其他的对于本领域技术人员来说将是清楚的。

如本文所用，术语“杂芳基”意指具有形成环的5或6个原子(即，环原子)的芳族自由基，其中1至5个环原子是碳并且剩余的1至5个环原子(即，一个或多个杂环原子)独立地选自氮、硫和氧。示例性5元杂芳基包括呋喃基、噻吩基、噻唑基(例如噻唑-2-基)、吡唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡咯基、三唑基、咪唑基、噁二唑基和噻二唑基。示例性6-元杂芳基包括吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、1,2,4-三嗪基、苯并噁唑基、苯并异噻唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基等。考虑到本公开文本的有益效果，其他杂芳基对于本领域技术人员来说将是清楚的。通常，杂芳基典型地经由碳原子附接至主要结构。然而，本领域技术人员将意识到某些其他原子(例如，杂环原子)可以附接至主结构。

如本文所用，术语“芳基”意指具有形成环的5或6个原子(即环原子)的芳族自由基，其中所有环原子都是碳。示例性芳基是苯基。

如本文所用，术语“脂肪族”意指含有碳和氢原子(例如含有1至9个碳原子)的非芳族化合物。脂肪族化合物可以是直链或支链的，可以含有一个或多个环结构，并且可以含有一个或多个碳-碳双键(条件是所述化合物不含有具有芳族特征的不饱和环结构)。脂肪族化合物的例子包括乙烷、丙烯、环丁烷、环己二烯等。

如本文所用，术语“卤代基”和“卤素”意指氟、氯、溴或碘。这些术语可互换使用，并且可以指卤素自由基或卤素原子本身。在本公开文本中使用此术语的上下文的情况下本领域技术人员将能够容易地确定其身份。

如本文所用，术语“氰基”意指具有经由三键与氮原子连接的碳原子的自由基。氰基自由基经由其碳原子附接。

如本文所用，术语“硝基”意指经由其氮原子附接的NO₂自由基。

如本文所用，术语“羟基”(“hydroxy”和“hydroxyl”)意指经由其氧原子附接的OH自由基。术语“硫代基”意指经由其硫原子附接的SH自由基。

如本文所用，术语“氨基”意指具有氮原子和1或2个氢原子的自由基。因此，术语“氨基”通常是指伯胺和仲胺。在这方面，如本文所用，叔胺由通式RR'N-表示，其中R和R'是可以相同或可以不相同的碳自由基。然而，术语“氨基”通常可以在本文中用于描述伯胺、仲胺、或叔胺，并且在本公开文本中使用此术语的上下文的情况下本领域技术人员将能够容易地确定所述氨基的身份。

如本文所用，术语“氧代基”意指经由双键附接的氧自由基。在与此氧键合的原子是碳原子的情况下，所述键是碳-氧双键，其可以表示为-(C＝O)-，并且可以称为羰基(例如，酮)。

本文使用的术语“任选经取代的”是指特定基团被取代(例如，其中与碳原子键合的氢自由基可以被适当化合价的非氢自由基取代)或未被取代(即，氢自由基不被非氢自由基取代)。

在本文对变量的任何定义中的化学基团列表的引用包括该变量作为任何单个基团或所列基团的组合的定义。本文中对于变量或方面的实施方案的引用包括作为任何单个实施方案或与任何其他实施方案或其部分的组合的该实施方案。

本文提供的任何组合物或方法可以与本文提供的任何其他组合物和方法中的一种或多种组合。

本文使用以下缩写：

AE 不良事件

AESI 特别关注的不良事件

AMTS 简明心理测验得分

BDI-II 贝克抑郁量表-II

br 宽信号

CDI 羰基二咪唑

cDNA 互补脱氧核糖核酸

CNS 中枢神经系统

CSF 脑脊液

CV％几何变异系数

d 双峰

DAT 多巴胺转运蛋白

dd 双二重峰

DLB 路易体痴呆

DMF 二甲基甲酰胺

DNA 脱氧核糖核酸

DOPA 二羟基苯丙氨酸

equiv. 当量

fMRI 功能磁共振成像

GBA1 葡糖脑苷脂酶1基因

GBA-PD GBA相关的帕金森病

GCase 葡糖脑苷脂酶

GCS 葡糖神经酰胺合酶

GD 戈谢病

GL-1 葡糖神经酰胺

GlcSph 葡糖鞘氨醇(也称为lyso-GL1)

HPLC 高压/高效液相色谱

IPA 异丙醇

IQCODE 老年人认知衰退的知情调查问卷

IQR 四分位距

J 耦合常数

LCMS 液相色谱质谱

LC/MS/MS 液相色谱串联质谱

LC/ESI/DMS 液相色谱电喷雾电离差分离子淌度谱

LLOQ 定量下限

LP 腰椎穿刺

LRRK2 富亮氨酸重复序列激酶2基因

lyso-GL1 葡糖鞘氨醇(也称为GlcSph)

m 多重峰

MDS 运动障碍学会

MDS-UPDRS 运动障碍学会-统一帕金森病评定量表

M-EDL 日常生活体验的运动方面(MDS-UPDRS第II部分)

MedDRA 国际医学用语词典

MMSE 简明精神状态检查

MoCA 蒙特利尔认知评估

mRNA 信使核糖核酸

PD 帕金森病

PET 正电子发射体层摄影

PO 经口(口服施用)

ppm 百万分率

qd 每天一次

RB 圆底

RBD 快速眼动睡眠行为障碍

ROW 世界其他地区(这里指除日本以外的任何国家)

s 单峰

SD 标准差

SPECT 单光子发射计算机体层摄影

TBME 叔丁基甲基醚

THF 四氢呋喃

TMT 连线试验

ULN 正常上限

UPDRS 统一帕金森病评定量表

UPLCMS 超高效液相色谱质谱法

将本文提到或提及的参考作品、专利、专利申请和科学文献以及其他印刷出版物通过引用以其整体特此并入。

具体实施方式

本文所述的奎宁环化合物和含有它们的药物组合物可用于这样的疗法，其中降低人类受试者脑组织中的鞘糖脂浓度可以恢复正常的鞘糖脂环境，或者可以预防或减慢原本促进疾病状态发病的异常(例如，毒性)鞘糖脂环境的发展。这可以通过经由本文公开的方法抑制鞘糖脂和/或其底物的生物合成来实现。不受任何特定理论的束缚，假定抑制底物积累使生物合成与受损的分解代谢达到平衡，所述受损的分解代谢与葡糖脑苷脂酶相关，例如由于GBA1突变所致。

治疗方法

因此，在第一方面，本发明提供了一种治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少约30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病；所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文所定义的奎宁环化合物(例如，化合物2)。在实施方案中，所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)选自戈谢病、法布里病和克拉伯病的溶酶体贮积病。特别地，所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)戈谢病。可以确定受试者患有由临床体征和症状定义的戈谢病，所述临床体征和症状可能包括肝脾肿大、血细胞减少和骨骼疾病中的一种或多种。另外地或可替代地，可以确定受试者患有如通过GCase活性的显著缺乏所定义的戈谢病。

在一些实施方案中，所述受试者不是GBA1突变的纯合携带者和/或不是复合杂合携带者。在其他实施方案中，所述受试者是一个或多个GBA1突变的杂合携带者。例如，所述一个或多个基因(GBA1)突变可以选自严重突变(例如，在表1中表示为“严重GBA突变”的那些，如L444P)和其他(即非严重)GBA1突变(例如，在表1中表示为“其他GBA突变”的那些，如N370S)。在实施方案中，所述一个或多个GBA1突变选自L444P、84GG、A456P、R120W、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。例如，所述受试者是L444P突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。在另一个例子中，所述受试者是N370S突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。

在第二方面，本发明提供了一种治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少约30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者；所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文所定义的奎宁环化合物(例如，化合物2)。在实施方案中，所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病，例如戈谢病。

例如，所述一个或多个基因(GBA1)突变可以选自严重突变(例如，在表1中表示为“严重GBA突变”的那些，如L444P)和其他(即非严重)GBA1突变(例如，在表1中表示为“其他GBA突变”的那些，如N370S)。在实施方案中，所述一个或多个GBA1突变选自L444P、84GG、A456P、R120W、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。例如，所述受试者是L444P突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。在另一个例子中，所述受试者是N370S突变和任选地一个或多个另外的GBA1突变的携带者。

在第三方面，本发明提供了一种降低有需要的人类受试者脑组织中的鞘糖脂浓度的治疗方法，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度由于所述方法而降低，其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病；所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文所定义的奎宁环化合物(例如，化合物2)。在实施方案中，所述方法导致CSF中的GL-1浓度降低至少约30％。

本发明进一步的方面提供了如本文所定义的奎宁环化合物(例如，化合物2)用于本发明方法中。又进一步的方面提供了如本文所定义的奎宁环化合物(例如，化合物2)在制备用于本发明方法的药剂中的用途。

待治疗的受试者

本发明提供了用于降低有需要的人类受试者脑组织中的鞘糖脂浓度的治疗方法，由此所述受试者CSF中的GL-1浓度由于所述方法而降低。设想降低脑组织中的鞘糖脂浓度的作用可用于维持或恢复正常的鞘糖脂环境，或者避免、中止或逆转脑组织中与异常的(例如升高的)鞘糖脂浓度相关的疾病发病机制。

在特定的方面和实施方案中，所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病，例如像戈谢病、法布里病、克拉伯病、G_M1-神经节苷脂贮积症、G_M2激活剂缺乏症、泰-萨克斯病或桑德霍夫病。在特定的实施方案中，所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)戈谢病。在实施方案中，所述受试者不携带富亮氨酸重复序列激酶2基因(LRRK2)G2019S突变。

GBA突变

在特定的方面和实施方案中，所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者，并且因此未患溶酶体贮积病，例如像戈谢病。溶酶体贮积病的特征可以在于双等位基因突变(纯合或复合杂合)，例如双等位基因GBA1突变。

GBA1突变是患上帕金森病(PD)的最常见的遗传风险因素。已知的严重GBA1突变包括L444P、84G>GG和A456P，而其他已知的非严重GBA1突变包括D409H、P409V、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。

在实施方案中，将要通过本发明方法治疗的受试者具有选自表1中的列表的GBA1中的一个或多个突变。在一个实施方案中，所述突变是表1中表示为“严重GBA突变”的突变。在另一个实施方案中，所述突变是表1中表示为“其他GBA突变”的突变。严重GBA突变的特定例子是L444P。“其他GBA突变”(即非严重GBA突变)的特定例子是N370S。

在实施方案中，所述待治疗的受试者具有选自以下的GBA1中的一个或多个突变：L444P、84G>GG、A456P、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。在其他实施方案中，所述待治疗的受试者具有选自以下的GBA1中的一个或多个突变：84G>GG、A456P、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。在其他实施方案中，所述待治疗的受试者具有选自以下的GBA1中的一个或多个突变：84G>GG、A456P、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。在其他实施方案中，所述待治疗的受试者具有选自L444P、N370S和E326K的GBA1中的一个或多个突变。在其他实施方案中，所述待治疗的受试者具有L444P突变。在其他实施方案中，所述待治疗的受试者具有N370S突变。在其他实施方案中，所述待治疗的受试者具有E326K突变。

在实施方案中，所述待治疗的受试者具有选自E326K和T369M的GBA1中的突变，并且所述受试者还具有RBD史，例如，如通过记录的多导睡眠图的历史或通过RBD筛查问卷确定的。在其他实施方案中，所述待治疗的受试者具有选自E326K和T369M的GBA1中的突变，并且所述受试者还具有GBA1中的至少一个进一步的突变，任选地其中所述进一步的突变选自L444P、84G>GG、A456P、D409H、E235A、E340A、N370S、R496C、G193W、R496H和S271G。在特定的实施方案中，所述进一步的突变选自L444P和N370S。

在一个实施方案中，所述待治疗的受试者不具有L444处的突变，例如所述受试者不具有GBA1中的L444P突变。在一个实施方案中，所述受试者不具有D409处的突变，例如所述受试者不具有GBA1中的D409V突变。

在某些其他实施方案中，所述受试者不具有有害的GBA1突变，例如，所述基因功能基本上正常，因为它编码的蛋白质具有与野生型基因编码的蛋白质基本上相同的结构、活性和/或组织水平和分布。野生型GBA1序列是本领域已知的并且包括GenBank登录号NM_000157.3(mRNA)。

具有预先存在的病症、药物治疗或治疗史的受试者

本文公开的方法可能被认为不适合某些患者组，例如患有某些预先存在的病症的那些患者、当前或过去用一些药物治疗的那些患者以及具有治疗(如手术治疗)史的那些患者，如本文所评估和描述的。处方医师将有资格决定受试者的一种或多种特定病症和/或当前或过去的一种或多种药物治疗是否会影响其根据本文所公开方法经历治疗方法的合适性。

在实施方案中，待治疗的受试者没有过去的深部脑刺激的手术史。

在实施方案中，待治疗的受试者未患严重的抑郁症，例如如通过BDI-II大于28所测量的。另外或可替代地，待治疗的受试者在治疗之前没有重度情感障碍史(例如，尚未被诊断为患有重度情感障碍)。在实施方案中，待治疗的受试者在治疗之前没有药物或酒精滥用史。优选地，待治疗的受试者在治疗前1年内没有任何此类重度情感障碍史或者药物或酒精滥用史。

在实施方案中，待治疗的受试者在治疗前30天或5个半衰期(以较长者为准)内没有服用或被施用专门用于治疗记忆功能障碍的任何药剂(例如，胆碱酯酶抑制剂或美金刚)。在实施方案中，待治疗的受试者在治疗前6个月内没有服用或被施用选自以下的任何药剂：抗精神病药、莫达非尼、阿莫非尼、甲氧氯普胺、α-甲基多巴、哌甲酯、利血平或安非他明衍生物(包括具有安非他明代谢物的药剂，例如MAOB抑制剂，如司来吉兰)。在实施方案中，待治疗的受试者在治疗前30天或5个半衰期(以较长者为准)内没有服用或被施用CYP3A4的一种或多种强或中度诱导剂或抑制剂。在实施方案中，待治疗的受试者在治疗时并非正在经历使用抗凝药(例如华法林(香豆定)或肝素)的治疗。在实施方案中，待治疗的受试者在治疗前3个月或5个半衰期(以较长者为准)内没有服用或被施用临床试验用药物，例如氨溴索。

在实施方案中，待治疗的受试者不具有如通过ECG测量的QT/QTc间期的显著基线延长，例如男性受试者大于450msec的QTc间期以及女性受试者大于470msec的QTc间期。在实施方案中，待治疗的受试者并非正在服用或被施用延长QT/QTc间期的药剂。QT/QTc间期是从ECG Q波到对应于电收缩的T波或校正的T波结束的时间。

在实施方案中，待治疗的受试者在治疗时没有大于ULN 2倍的肝酶(ALT/AST)或总胆红素。在实施方案中，待治疗的受试者未患吉尔伯特病。在实施方案中，待治疗的受试者在治疗时未患肾功能不全，例如如通过肌酐大于ULN的1.5倍所定义。在实施方案中，待治疗的受试者未患(例如，尚未被诊断为患有)乙型肝炎、丙型肝炎和人类免疫缺陷病毒1或2中的任一种。

在实施方案中，待治疗的受试者没有选自以下的医学障碍和/或临床相关发现(例如，通过体格检查、病史或实验室评估)：心力衰竭、低钾血症、禁止性腰椎疾病、出血体质或临床上显著的凝血病或血小板减少症。

在实施方案中，待治疗的受试者未患根据世界卫生组织分级大于晶状体周长四分之一的皮质性白内障(皮质性白内障2级)或大于2mm的后囊下白内障(后囊下白内障2级)。在实施方案中，待治疗的受试者没有服用或被施用潜在的致白内障药物治疗，或者在治疗时并非正在服用或被施用潜在的致白内障药物治疗。致白内障药物治疗包括任何剂量或途径的皮质类固醇的慢性治疗方案(例如，比每2周更频繁)，以及根据处方信息可能引起白内障或使患有白内障的受试者的视力变差的任何药物治疗(例如，青光眼药物治疗)。

帕金森病和路易体痴呆

本文公开的方法尤其可用于选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)的神经系统变性疾病的治疗性治疗，其中异常的鞘糖脂环境可能导致溶酶体功能受损、神经元蛋白α-突触核蛋白的错误加工和神经元功能障碍，从而促进发病。

在特定的方面和实施方案中，受试者患有(例如，已经被诊断为患有)或已经被确定有风险患上帕金森病(PD)或路易体痴呆(DLB)。在一个实施方案中，受试者患有(例如，已经被诊断为患有)或已经被确定有风险患上PD。在特定的实施方案中，受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或尚未被确定有风险患上)继发性或非典型PD。因此，在一个实施方案中，受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或尚未被确定有风险患上)由一种或多种药物导致的PD。在可替代的实施方案中，受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或尚未被确定为有风险患上)由一种或多种毒素导致的PD。在进一步的实施方案中，受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或尚未被确定为有风险患上)由一种或多种药物和一种或多种毒素导致的PD。在特定的实施方案中，待治疗的受试者不具有确诊的结构异常(例如，如通过无造影剂MRI所确定)，所述结构异常是PD相关体征和症状的可能病因。在另一个实施方案中，受试者患有(例如，已经被诊断为患有)或已经被确定有风险患上DLB。

患有帕金森病和路易体痴呆的受试者可能表现出神经功能(例如，认知功能、自主神经功能和/或运动功能)受损，根据疾病进展阶段而定。在受试者中，例如在展现出认知损害(作为例如帕金森病或路易体痴呆疾病病理的一部分)的受试者中，施用如本文所述的奎宁环化合物可能导致神经功能的改善。因此，在本发明方法的某些实施方案中，将如本文所述的奎宁环化合物施用于神经(例如，神经学)功能受损的受试者。在特定的实施方案中，在受试者已经被诊断为神经(例如，神经学)功能受损之后，开始施用所述奎宁环化合物。诊断认知损害在医学从业者的常规技能范围内。认知测试是本领域已知的，并且可以包括诸如以下的测试：简明心理测验得分(AMTS)、简明精神状态检查(MMSE)、老年人认知衰退的知情调查问卷(IQCODE)和测试认知损害的全科医师认知评估。这些测试可以评估例如记忆、推理能力、解决问题的能力、决策能力、注意广度和语言能力受损。

一种这样的测试是连线试验(TMT)，它可用于评价患者的认知功能。TMT是使用最广泛的神经心理学测试之一，并且是评估一般智力和认知功能障碍的诊断工具。在TMT的A部分中，要求受试者将一组数字按升序连接。此任务是视觉搜索以及一般视觉和运动处理速度的组合。B部分呈现一个数字与字母交替的序列。受试者必须在将它们以升序和交替顺序连接时主动在两个类别之间切换。因此，此任务被认为包括执行功能组分，因为受试者必须在连接符号的同时在类别之间主动切换。

可用于评估轻度认知损害的另一种熟知的筛查工具是蒙特利尔认知评估(MoCA)(Nasreddine等人,J Am Geriatr Soc 2005；53:695-9)。

在受试者明确地具有帕金森病的诊断的情况下，用于评估和报告疾病进展的熟知的量表是Hoehn和Yahr分期量表(Hoehn MM,Yahr MD.Parkinsonism:onset,progressionand mortality.Neurology 1967；17:427-42)，所述量表鉴定疾病进展的5个时期，并且可用于区分早期、中期和晚期帕金森病患者。例如，早期/轻度帕金森病通常被认为对应于Hoehn和Yahr分期≤2期(仅单侧受累，通常具有最小功能性失能或无功能性失能(1期)，或者双侧或中线受累且平衡未受损(2期))。

在研究中以及在与帕金森病进展明确相关的临床环境中使用的另一种值得注意的研究工具是MDS-UPDRS，它被广泛用于支持PD临床试验的终点并且旨在评估PD对患者日常生活的功能性影响。MDS-UPDRS是统一帕金森病评定量表(UPDRS)的修订版，所述量表最初在20世纪80年代开发的，由MDS(运动障碍学会)审查任务组完成。MDS-UPDRS被开发用于评价帕金森病的各个方面，包括日常生活的非运动和运动体验以及运动并发症(Goetz等人,Mov Disord 2007；22:41-7，和Goetz等人,Mov Disord 2008；23:2129-70)。它包括不同群体的运动评价，并且表征疾病程度和负荷。

已经研究了MDS-UPDRS与Hoehn和Yahr分期量表之间的相关性(Skorvanek M等人,Mov Disord Clin Pract 2017；4:536-544)。MDS-UPDRS设计为尤其区分所述疾病的轻度症状而不是严重症状，而原始UPDRS更好地区分严重症状和非常严重症状。MDS-UPDRS的第II部分测量日常生活体验的运动方面(M-EDL)。MDS-UPDRS的第III部分是运动检查。早期/轻度PD患者的MDS-UPDRS第II部分+第III部分的范围典型地可以是例如从10至80、或从20至70、或从20至60、或从25至65、或从30至70、或从35至65、或从35至60、或从20至45、或从35至55、或从35至50。

成像方法也可用于诊断认知衰退。例如，单光子发射计算机体层摄影(SPECT)和正电子发射体层摄影(PET)的功能性神经成像模式可用于评估认知功能障碍。也可以使用功能磁共振成像(fMRI)评价神经学功能。在一些方面，通过评价患者的认知功能来测量神经功能的改善。也可以通过监测不同的认知领域来评估认知衰退，例如与轻度认知损害相关的认知衰退。认知领域包括例如注意力和专注力、执行功能、记忆、语言、视觉构造技能、概念思维、计算和定向。诊断与帕金森病相关的其他损害也在医学从业者的常规技能范围内。例如，诊断帕金森病的临床标准涉及评估运动和/或自主神经功能的损害，例如运动缓慢(运动迟缓)，加上强直、静止性震颤或姿势不稳定。基底神经节中对多巴胺(对症治疗)的反应性和多巴胺能活性降低也可能有助于诊断帕金森病。

因此，本发明提供了用于治疗或预防受试者中的帕金森病的方法，如本文所述。本发明的方法对于如下受试者是有益的：所述受试者由于例如已知会引起帕金森病的受试者的突变或受试者的家族谱系而已经被诊断为有风险患上帕金森病，但尚未经历与疾病状态相关的典型症状(例如认知损害的体征)。在一个实施方案中，所述受试者已经被诊断为有风险患上帕金森病，并且所述方法预防或延迟所述受试者中的帕金森病的发作和/或发展。

在一个实施方案中，所述受试者具有帕金森病的诊断，并且所述方法预防、减少或逆转运动功能障碍(例如，震颤)、运动迟缓、强直、姿势不稳定和/或平衡受损。

在一个实施方案中，所述受试者具有帕金森病的诊断，并且所述受试者具有至少一个以下特征：i)帕金森病的家族史；ii)基线蒙特利尔认知评估(MoCA)得分≤26(例如，从20至25)；以及iii)运动障碍学会-统一帕金森病评定量表(MDS-UPDRS)(第II部分+第III部分)得分为至少35(例如，至少40或至少45)。在实施方案中，待治疗的受试者没有小于20的MoCA得分。

在另一个实施方案中，所述受试者具有特征在于以下的早期帕金森病的诊断：i)至少两种以下病症：静止性震颤、姿势不稳定、运动不能/运动减少和肌强直；ii)在基线时Hoehn和Yahr量表分期≤2期；和/或iii)帕金森病诊断≥2年。

本文所述的治疗方法可以与用于治疗帕金森病症状的常规对症疗法同时应用或代替所述常规对症疗法。在一个实施方案中，所述受试者在过去已经用选自以下的药物治疗：二羟基苯丙氨酸(DOPA)或其衍生物(例如，左旋多巴/卡比多巴)、单胺氧化酶B抑制剂(例如，雷沙吉兰或司来吉兰)、多巴胺激动剂(例如，罗匹尼罗、溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索或阿朴吗啡)、儿茶酚-O-甲基转移酶抑制剂(例如，恩他卡朋、托卡朋)、抗胆碱药(例如，安坦、苯甲托品)、金刚烷衍生物和/或乙酰胆碱酯酶抑制剂(例如，他克林、利斯的明、加兰他敏、多奈哌齐或美金刚)，任选地其中，当同时应用时，在开始本文所述的治疗方法之前，所述受试者已经用对症PD药物治疗的稳定方案治疗≥30天(如≥60天，例如，当对症PD药物治疗选自单胺氧化酶B抑制剂如雷沙吉兰或司来吉兰时)。

本文所述的方法可以预防、减少或逆转痴呆的进展，包括与帕金森病相关的痴呆(帕金森病痴呆)或路易体痴呆。因此，本发明提供了一种治疗或预防路易体痴呆的方法，如本文所述。

可以预防、减少或逆转的痴呆的症状包括痴呆的早期症状，如难以记住最近的对话、姓名或事件，以及情感淡漠和抑郁，以及较晚期症状，如沟通障碍、判断力差、定向障碍、意识错乱、行为改变以及说话、吞咽和/或行走困难。

本文所述的方法可以预防、减少或逆转受试者中与帕金森病或路易体痴呆相关的认知功能、自主神经功能和/或运动功能的丧失。在一个实施方案中，神经功能的丧失包括认知功能的丧失。在某些实施方案中，所述方法预防、减少或逆转受试者的认知领域的衰退，例如，所述方法预防、减少或逆转注意力和专注力、执行功能、记忆(例如，工作记忆)、语言、视觉构造技能、概念思维、计算、定向、决策、问题解决等方面的衰退。在一个实施方案中，神经功能的丧失包括自主神经功能的丧失。

在一个实施方案中，本文所述的方法有效改善所述受试者的认知能力或减少认知缺陷，如通过以下测量的：完成连线试验(TMT)所花费的时间TMT-A和/或TMT-B的减少、TMT-A时间与TMT-B时间之间的差(TMT-A-TMT-B)的减少，例如，减少至少10％、或至少20％、或至少30％、或至少40％、或至少50％(例如，其中TMT-A减少5％-20％，和/或TMT-B减少25％-30％，和/或[TMT-A-TMT-B]减少25％-30％)。

降低CNS中的鞘糖脂水平

在恢复正常的鞘糖脂环境，或者减少或避免与疾病发病机制相关的异常(例如，毒性)鞘糖脂环境的发展时，本发明方法降低了脑组织中的鞘糖脂浓度，由此降低了CSF中的GL-1浓度。因此，CSF中的GL-1浓度可以是受试者脑组织中一般脂质失调和底物积累的指示物，以及用于评估脑组织中鞘糖脂浓度降低的生物标记物。CSF中的GL-1水平还以剂量依赖性方式反映化合物(例如，化合物2)的水平。

作为本文公开的方法的一部分，受试者脑组织中的鞘糖脂浓度降低，例如，通过受试者CSF中的GL-1浓度降低至少约30％(即开始治疗后)所观察到的。在实施方案中，受试者CSF中的GL-1浓度相对于治疗前水平(基线)降低至少约35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％或70％。CSF中的GL-1降低程度越大，可能对调节受试者脑组织中的鞘糖脂环境的影响就越大。因此，实现使CSF中的GL-1浓度降低至少约30％可能需要延长暴露于奎宁环化合物，例如作为可以无限期持续的长期治疗计划的一部分。因此，考虑本发明方法将涉及在至少约1周(例如至少约2、3或4周)或至少约1、2、3、4、6或12个月的时间段内施用奎宁环化合物。在实施方案中，治疗持续超过12个月，例如，无限期。

在实施方案中，在开始治疗的约3个月内，例如在开始治疗的约2个月、1个月、3周、2周或1周内，所述治疗方法导致前述的CSF中的GL-1浓度的降低。

应当理解，由于底物积累途径可能继续在患者中占主导地位，因此希望维持如本文所述的奎宁环化合物(例如化合物2)在CNS(特别是脑组织)中的暴露水平，如可以通过监测CSF水平来验证。因此，本公开文本考虑，通过奎宁环化合物的定期给药(例如每天、每隔一天、每周等)以便维持其暴露(例如处于稳态)来实现指定时间段内GL-1浓度的降低。在受试者的CSF中维持的如本文所述的奎宁环化合物(例如化合物2)的浓度可以是例如至少约0.1ng/ml，例如至少约0.5、1、1.5、2、3、4、5、8或10ng/ml。例如，在受试者的CSF中维持的奎宁环化合物(例如，化合物2)的稳态水平可以例如在约0.1与约15ng/ml之间，例如在约1与10ng/ml之间、或在约2与8ng/ml之间。

奎宁环化合物的施用

本发明人已经发现，当口服施用时，如本文所述的奎宁环化合物，特别是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯(化合物2)在人类患者中具有有利的安全性和耐受性。诸位发明人已经发现的此化合物和本文所述的其他奎宁环化合物的优势药效学特性意味着，此类化合物可以作为规律剂量方案的一部分并且在延长的时间段内施用。此外，诸位发明人发现，如本文所述的奎宁环化合物(特别是化合物2)在口服施用于人类患者时在血浆和CSF中的暴露以与剂量成比例的方式增加，并且还发现CSF中的GL-1水平以剂量依赖性方式降低。

因此，在实施方案中，将如本文所述的奎宁环化合物(例如，化合物2)作为本文所述的治疗方法的一部分每日施用于受试者。考虑到诸位发明人已经发现的与奎宁环化合物(例如化合物2)相关的有利的安全性和耐受性特性，根据疾病的严重程度以及例如患者脑组织中优势鞘糖脂环境的异常程度(如例如通过测量所述患者CSF中的GL-1水平所确定)，可以在本公开文本的方法中使用宽范围的每日剂量。这些剂量可以由熟练从业者根据本文的公开内容确定。

在实施方案中，所述奎宁环化合物(例如，化合物2)是每天施用的。在其他实施方案中，将所述奎宁环化合物(例如，化合物2)每天施用多于一次，例如，每天施用两次。在又其他实施方案中，将所述奎宁环化合物(例如化合物2)每天施用少于一次，例如每隔一天、每隔两天或每周施用一次。

在实施方案中，将奎宁环化合物(例如化合物2)以约0.5mg至约30mg(或等效量的其前药或药学上可接受的盐)的剂量施用于受试者。例如，可以将奎宁环化合物(例如，化合物2)以从约2mg至约20mg、或从约2mg至约10mg、或从约4mg至约8mg、或从约10至约20mg、或从约4mg至约15mg的剂量施用。在其他实施方案中，将奎宁环化合物(例如化合物2)以从约4mg至约18mg、从约8mg至约16mg、或从约10mg至约15mg的剂量(例如选自从约4mg、约8mg和约15mg的剂量)施用。在一个实施方案中，将化合物2以约15mg(或等效量的其前药或药学上可接受的盐)的每日剂量施用。

在实施方案中，如本文所述的奎宁环化合物(例如，化合物2)的施用是经由非肠胃外途径的，例如经由口服途径的。

在一个实施方案中，在本公开文本的方法中使用(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯的苹果酸加成盐(例如，其结晶性苹果酸盐)，并且将其以从约5至约20mg(例如约15mg)(按等效量的游离碱测量)的每日剂量口服施用。

评估CSF中化合物水平的方法和评估治疗有效性的方法

本发明人已经发现，监测被施用如本文定义的奎宁环化合物(例如，化合物2)的受试者的CSF中的GL-1浓度变化是用于评估所述化合物在CNS内的暴露的便捷手段；它还可以代表用于评估对帕金森病(PD)或路易体痴呆(DLB)的治疗是否有效(例如，在调节受试者脑组织中的优势鞘糖脂环境以实现积极的治疗或生理结局方面)的便捷手段。

因此，在进一步的方面，本发明提供了一种评估奎宁环化合物在已经被施用如本文定义的奎宁环化合物(例如化合物2)的人类受试者的CNS内(例如CSF内)的暴露的方法；所述方法包括确定i)在施用所述化合物之前；和ii)在施用所述化合物之后所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度；以及确定所述受试者CSF中的GL-1浓度是否存在降低以及降低至何种程度。

在又进一步的方面，本发明提供了一种评估对人类受试者中的PD或DLB的治疗的有效性的方法；所述方法包括确定i)在所述治疗开始之前；ii)在所述治疗开始之后所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度；以及确定所述受试者CSF中的GL-1浓度是否存在由于所述治疗引起的降低以及降低至何种程度。在实施方案中，对PD或DLB的治疗是通过施用葡糖神经酰胺合酶(GCS)抑制剂，特别是如本文所定义的奎宁环化合物。在一个实施方案中，对PD或DLB的治疗是口服施用如本文所定义的化合物2。

被施用所述化合物或接受所述治疗的受试者可以是如本文结合前述治疗方法所定义的受试者。

可以使用熟练的技术人员已知的方法确定受试者CSF中的GL-1浓度。典型地，通过腰椎穿刺获得CSF，并且样品可以直接使用或进行纯化(例如通过柱色谱)以富集GL-1级分和/或去除原本会干扰测定的组分。可直接测量CSF样品中的GL-1，或者可替代地，可以在测量之前将其转化成另一种化合物(例如，通过脱乙酰化或用荧光部分衍生化)。

用于测量临床样品中的鞘糖脂(如GL-1)的方法包括LC-MS/MS方法(Zheng等人,Mol Gen Metabol Rep 2016；8:77-79；和Ji Ji等人,Bioanalysis 2015；7(12):1483-1496)。一种适用于对人CSF中的GL-1进行直接定量(例如用于本发明的方法)的方法描述于Xu等人(J Lipid Res 2019；60:200-211)。Xu等人采用LC/ESI/DMS/MS/MS方法，其具有用于检测人CSF中的nM浓度的GL-1的定量性能。用于对CSF中的GL-1水平进行定量的另一种选择依赖于水解CSF样品中的GL-1(其具有低残余lyso-GL1水平)以及使用检测生物流体中的nM浓度的lyso-GL1的熟知方法检测形成的lyso-GL1的量。举例来说，Taketomi等人(JBiochem 1996；120:573-579)描述了一种微波介导的皂化方法，所述方法可以以高收率从相应的鞘糖脂(包括GL-1)制备lyso-化合物。

化合物

通过本文公开的方法实现脑组织中鞘糖脂浓度的降低需要使CNS暴露于药理学化合物。本文所述的奎宁环化合物具有作为葡糖神经酰胺合酶(“GCS”)的抑制剂的活性，并且它们具有穿透血脑屏障的适当特征。因此，它们被称为“脑渗透剂”奎宁环化合物，并且它们可以便捷地经由非肠胃外途径(例如口服)施用。根据本公开文本的尤其有用的脑渗透剂奎宁环化合物是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯(化合物2)。

用于根据本发明使用的奎宁环化合物是式(I)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中：

R¹选自氢；

卤素、氰基、硝基、羟基、硫代基或氨基、C_1-6-烷基、C_2-6-烯基、C_2-6-炔基、C_1-6-烷基氧基、C_2-6-烯基氧基或C_2-6-炔基氧基，其中所述烷基、烯基、炔基、烷基氧基、烯基氧基或炔基氧基任选地被独立地选自卤素、氰基、硝基、羟基、硫代基或氨基的一个或多个(例如，1、2或3个)基团取代；

R²和R³各自独立地选自C_1-3-烷基，所述烷基任选地被一个或多个(例如，1、2或3个)卤素取代；或者

R²和R³一起形成环丙基或环丁基，所述环丙基或环丁基任选地被一个或多个(例如1或2个)卤素取代；

A是5元或6元芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基任选地被独立地选自卤素、羟基、硫代基、氨基、硝基、C_1-6烷基氧基和C_1-6烷基的1、2或3个基团取代。

在一个实施方案中，R¹是氢；卤素；或C_1-4-烷基或C_1-4-烷基氧基，所述烷基或烷基氧基任选地被独立地选自卤素；和氰基、硝基、羟基、硫代基或氨基的一个或两个基团取代。在另一个实施方案中，R¹是氢；氟；或任选被卤素、或羟基、硫代基或氨基取代的甲基或乙基。在进一步的实施方案中，R¹是氢；或任选地被一个或多个(例如，1、2或3个)卤素取代的甲基。在又进一步的实施方案中，R¹是氢。在一个实施方案中，R¹不附接至奎宁环部分的氮原子。

在一个实施方案中，R²和R³各自独立地选自C_1-3-烷基，所述烷基任选地被一个或多个卤素取代。在另一个实施方案中，R²和R³各自独立地选自甲基和乙基，所述甲基和乙基任选地被一个或多个氟原子取代。在进一步的实施方案中，R²和R³各自是甲基，所述甲基任选地被一至三个氟原子取代。在又进一步的实施方案中，R²和R³两者均是甲基，或者R²和R³一起形成环丙基。在仍进一步的实施方案中，R²和R³两者均是甲基。

在一个实施方案中，R⁶是氢。在另一个实施方案中，R⁵和R⁶两者均是氢。在另一个实施方案中，R⁴、R⁵和R⁶中的至少一个不是氢。在进一步的实施方案中，R⁴选自卤素；和C_1-3-烷基或C_1-3-烷基氧基，所述烷基或烷基氧基任选地被选自卤素；和氰基或C_1-3-烷基氧基的一个或多个基团取代。在另一个实施方案中，R⁴选自卤素；C_1-3-烷基或C_1-3-烷基氧基，所述烷基或烷基氧基任选地被选自卤素；和C_1-3-烷基氧基的一个或多个基团取代。在又进一步的实施方案中，R⁴选自氟；和C_1-3-烷基氧基，所述烷基氧基任选地被选自卤素；和氰基或C_1-3-烷基氧基的一个或多个基团取代。在仍进一步的实施方案中，R⁴选自氟；和C_1-3-烷基氧基，所述烷基氧基任选地被选自卤素；和氰基或C_1-3-烷基氧基的一个或多个基团取代；并且R⁵和R⁶各自是氢。例如，在R⁵和R⁶两者均是氢去情况下，R⁴可以是氟或2-甲氧基乙氧基，例如，氟。

在所有R⁴、R⁵和R⁶均不是氢的情况下，这三个基团可以附接至苯环，例如，在位置2、4和6处(相对于附接至位置1的基团A)。在R⁴、R⁵和R⁶中只有一个是氢的情况下，其他两个基团可以附接至苯环，例如，在位置2和3、位置3和4或位置3和5处，例如在位置3和5处(相对于附接至位置1的基团A)。在R⁴、R⁵和R⁶中的两个是氢的情况下，另一个基团可以在位置2、3或4处附接至苯环，例如在位置4处(即在基团A的对位位置处)。在一个实施方案中，R⁴位于苯环上基团A的对位的位置。

在一个实施方案中，A是6元芳基或5元杂芳基。6元芳基或5元杂芳基的非限制性例子包括苯基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡咯基、三唑基、咪唑基、噁二唑基和噻二唑基。在一个实施方案中，6-元芳基或5元杂芳基选自苯基、噻吩基、噻唑基、吡咯基和咪唑基。在另一个实施方案中，6-元芳基或5元杂芳基选自苯基和噻唑基。

在一个实施方案中，A是苯基，其任选地被独立地选自卤素；和羟基、硫代基、氨基、硝基、氧基或甲基的1、2或3个基团取代。在另一个实施方案中，A是苯基，其任选地被1或2个卤素取代。在进一步的实施方案中，A是苯基，其任选地被卤素例如氟取代。在又进一步的实施方案中，A是未经取代的苯基。

在A是6元芳基或杂芳基的情况下，所附接的基团-C(R²R³)-和-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)可以呈1,2-或1,3-或1,4-关系，即互为邻位、间位或对位。在一个实施方案中，所附接的基团-C(R²R³)-和-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)呈1,3-关系。在另一个实施方案中，所附接的基团呈1,4-关系。

在一个实施方案中，A是5元杂芳基，其含有选自N、O和S的1、2或3个杂原子。在另一个实施方案中，A是5元杂芳基，其含有选自N和S的1或2个杂原子。在进一步的实施方案中，A是5元杂芳基，其含有选自N和S的2个杂原子。在又进一步的实施方案中，A是5元杂芳基，其含有2个杂原子，其中一个杂原子是N并且另一个杂原子是S。在仍进一步的实施方案中，A是噻唑基。

在A是5元杂芳基的情况下，所附接的基团-C(R²R³)-和-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)中的至少一个可以与杂芳基的碳原子直接键合。在一个实施方案中，所附接的基团-C(R²R³)-和-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)两者均与杂芳基的碳原子直接键合。在一个实施方案中，所附接的基团-C(R²R³)-和-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)彼此呈1,3-关系，例如，它们与杂芳基中由单个中间原子(例如杂原子)隔开的碳原子直接键合。在A是噻唑基的实施方案中，所附接的基团-C(R²R³)-和-(C₆H₂R⁴R⁵R⁶)可以分别直接键合在4-位置和2-位置处。

因此，在一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(II)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中R⁴、R⁵、R⁶和A是如本文所定义的。

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(III)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中R¹至R⁴和A是如本文所定义的。

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(IV)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中R⁴和A是如本文所定义的。

在一个实施方案中，R⁴是卤素，例如，氟。因此，所述奎宁环化合物可以是式(V)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中A是如本文所定义的。

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(VI)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中R¹至R⁶是如本文所定义的。

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(VII)的化合物，

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(VIII)的化合物，

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(IX)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中R⁴是如本文所定义的。

在一个实施方案中，R⁴是卤素，例如，氟。因此，所述奎宁环化合物可以是式(X)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(XI)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中R⁴是如本文所定义的。

在一个实施方案中，R⁴是卤素，例如，氟。因此，所述奎宁环化合物可以是式(XII)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

在一个实施方案中，所述奎宁环化合物选自化合物1至化合物23：

及其药学上可接受的盐和前药。

在一个实施方案中，所述奎宁环化合物选自化合物1、化合物2和化合物3及其药学上可接受的盐和前药。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物选自化合物1和化合物3及其药学上可接受的盐和前药。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是化合物1或其药学上可接受的盐或前药。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是化合物2或其药学上可接受的盐或前药。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是化合物3或其药学上可接受的盐或前药。

在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物选自化合物1、化合物2和化合物3。在一个实施方案中，所述奎宁环化合物是化合物1。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是化合物2。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是化合物3。

盐

目前公开的在自然界中为碱性的化合物通常能够与各种无机酸和/或有机酸形成众多种不同的盐。虽然此类盐对于施用至动物和人而言通常是药学上可接受的，但在实践中往往希望首先从反应混合物分离化合物为药学上不可接受的盐，然后通过用碱性试剂处理简单地将后者转化回为游离碱化合物，并随后将游离碱转化为药学上可接受的酸加成盐。可以使用常规技术容易地制备碱化合物的酸加成盐，例如通过在水性溶剂介质中或在合适的有机溶剂(例如像甲醇或乙醇)中用基本等效量的所选的矿物酸或有机酸处理碱化合物。小心蒸发溶剂后，获得所需的固体盐。目前公开的带正电荷的化合物(例如含有季铵)还可以与各种无机酸和/或有机酸的阴离子组分形成盐。

可用于制备奎宁环化合物的药学上可接受的盐的酸是可以形成无毒酸加成盐的那些，所述无毒酸加成盐是例如含有药理学上可接受的阴离子的盐，如氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸盐或硫酸氢盐、磷酸盐或酸性磷酸盐、乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐或酸性柠檬酸盐、酒石酸盐或酒石酸氢盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、糖酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐和帕莫酸盐[即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐)]盐。

本发明公开的在自然界中为酸性的化合物(例如含有四唑部分的化合物)通常能够与各种无机碱和/或有机碱形成多种不同的盐。虽然此类盐对于施用至动物和人而言通常是药学上可接受的，但在实践中往往希望首先从反应混合物分离化合物为药学上不可接受的盐，然后通过用酸性试剂处理简单地将后者转化回为游离酸化合物，并随后将游离酸转化为药学上可接受的碱加成盐。可以使用常规技术容易地制备这些碱加成盐，例如通过用含有所需的药理学上可接受的阳离子的水溶液处理相应的酸性化合物，然后将所得溶液例如在减压下蒸发至干。可替代地，也可以通过以下方法来制备它们：将酸性化合物的低级烷醇溶液和所需的碱金属醇盐混合在一起，然后以与之前相同的方式将所得溶液蒸发至干。在任何一种情况下，为了确保反应的完成和所需固体盐的最大产物产率，都可以使用化学计量量的试剂。

可用于制备奎宁环化合物的药学上可接受的碱加成盐的碱是可形成无毒碱加成盐的那些，所述无毒碱加成盐是例如含有药理学上可接受的阳离子(如碱金属阳离子(例如钾和钠)、碱土金属阳离子(例如钙和镁))的盐、铵盐或其他水溶性胺加成盐(如N-甲基葡糖胺(葡甲胺)、低级烷醇铵和其他此类有机胺碱)。

在一个实施方案中，所述药学上可接受的盐是琥珀酸盐。在另一个实施方案中，所述药学上可接受的盐是羟基琥珀酸盐，例如(S)-2-羟基琥珀酸盐。在另一个实施方案中，所述药学上可接受的盐是盐酸盐(即与HCl形成的盐)。在另一个实施方案中，所述药学上可接受的盐是苹果酸盐。在一个实施方案中，所述奎宁环化合物是化合物2的苹果酸盐。

前药

本文公开的药学上可接受的前药是奎宁环化合物的衍生物，其可以在体内转化为本文所述的奎宁环化合物。本身可能具有一些活性的前药在它们经历例如生理条件下的溶剂分解或经历酶促降解时在体内变得具有药学活性。基于本公开文本，用于制备如本文所述的化合物的前药的方法对于本领域技术人员而言将是清楚的。

在一个实施方案中，所述奎宁环化合物的氨基甲酸酯部分被修饰。例如，可以通过添加水和/或一种或两种脂肪族醇来修饰奎宁环化合物的氨基甲酸酯部分。在这种情况下，氨基甲酸酯部分的碳-氧双键采用的是可被认为是半缩醛或缩醛官能团的官能团。在一个实施方案中，可以通过添加脂肪族二醇(如1,2-乙二醇)来修饰奎宁环化合物的氨基甲酸酯部分。

在一个实施方案中，所述奎宁环化合物上的羟基、硫代基或氨基中的一个或多个被修饰。例如，所述奎宁环化合物上的羟基、硫代基和/或氨基中的一个或多个可以被修饰以形成酸衍生物，例如酯、硫酯(或硫醇酯)和/或酰胺。所述酸衍生物可以例如通过使包含一个或多个羟基、硫代基或氨基的奎宁环化合物与乙酰化剂反应而形成。乙酰化剂的例子包括酸酐(如乙酸酐)、酰基氯(如苄基氯)和二碳酸酯(如二碳酸二叔丁酯)。

立体化学

目前公开的化合物的立体异构体(例如，顺式和反式异构体)和所有光学异构体(例如，R-和S-对映异构体)以及此类异构体的外消旋、非对映异构和其他混合物都在本公开文本的范围内。

在一个实施方案中，如本文所定义的奎宁环化合物的奎宁环-3-基具有R-构型。因此，所述奎宁环化合物可以选自式(Ia)至(XIIa)的化合物：

(Ia)

(IIa)

(IIIa)

(IVa)

(Va)

(VIa)

(VIIa)

(VIIIa)

(IXa)

(Xa)

(XIa)

(XIIa)

及其药学上可接受的盐和前药。

在另一个实施方案中，如本文所定义的奎宁环化合物的奎宁环-3-基具有S-构型。因此，所述奎宁环化合物可以选自式(Ib)至(XIIb)的化合物：

(Ib)

(IIb)

(IIIb)

(IVb)

(Vb)

(VIb)

(VIIb)

(VIIIb)

(IXb)

(Xb)

(XIb)

(XIIb)

及其药学上可接受的盐和前药。

在一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(Xb)的化合物或其药学上可接受的盐或前药。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物是式(XIIb)的化合物或其药学上可接受的盐或前药。

在一个实施方案中，如本文所定义的奎宁环化合物的奎宁环-3-基存在于具有R-和S-构型的异构体的混合物中。例如，所述奎宁环化合物可以是选自以下的化合物的混合物：式(Ia)和(Ib)、(IIa)和(IIb)、(IIIa)和(IIIb)、(IVa)和(IVb)、(Va)和(Vb)、(VIa)和(VIb)、(VIIa)和(VIIb)、(VIIIa)和(VIIIb)、(IXa)和(IXb)、(Xa)和(Xb)、(XIa)和(XIb)、以及(XIIa)和(XIIb)的化合物及其药学上可接受的盐和前药。在一个实施方案中，所述奎宁环化合物以外消旋混合物的形式存在，例如奎宁环-3-基的R-和S-异构体以大致相等的量存在。在另一个实施方案中，所述奎宁环化合物以具有R-和S-构型的异构体的混合物存在，其中所述R-和S-异构体以不同的量存在。在一个实施方案中，所述S-异构体以至少约5％、10％、25％、40％、70％、80％、90％、95％、97％、98％或99％(例如，约100％)的对映异构过量存在。在另一个实施方案中，所述R-异构体以至少约5％、10％、25％、40％、70％、80％、90％、95％、97％、98％或99％(例如，约100％)的对映异构过量存在。

基于本公开文本，用于制备对映异构体富集和/或对映异构体纯的奎宁环化合物的方法对于本领域技术人员将是清楚的。

目前公开的化合物可以以若干种互变异构体形式存在，包括烯醇和亚胺形式、以及酮和烯胺形式以及几何异构体及其混合物。互变异构体以溶液中互变异构体集合的混合物形式存在。在固体形式中，通常一种互变异构体占主导地位。即使可以描述一种互变异构体，但所有互变异构体都在本公开文本的范围内。

阻转异构体也在本公开文本的范围内。阻转异构体是指可以分离为旋转受限异构体的化合物。

其他形式

本文所述的奎宁环化合物的药学上可接受的水合物、溶剂化物、多晶型物等在本公开文本的范围内。如本文所述的奎宁环化合物可以呈无定形的形式和/或一种或多种结晶形式。在一个实施方案中，(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯(化合物2)的结晶盐形式可用于本文公开的方法中，诸如，如公开于例如US 2016/0039805(将其内容通过引用以其整体特此并入)的结晶苹果酸盐形式A，特别参考该文件的段落[0005]至[0010]和图1。

同位素标记的化合物也在本公开文本的范围内。如本文所用，“同位素标记的化合物”是指目前公开的化合物，包括其药学盐和前药，各自如本文所述，其中一个或多个原子被原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的原子质量或质量数的原子替代。可以掺入目前公开的化合物中的同位素的例子包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别如²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F和³⁶Cl。

药物组合物

本公开文本还提供了包含至少一种如本文所述的奎宁环化合物(例如，化合物2)和至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物，例如其用于根据本文公开的方法中。所述药学上可接受的赋形剂可以是本领域已知的任何这种赋形剂，包括在例如Remington'sPharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.(A.R.Gennaro编辑1985)中所述的那些。可以通过本领域已知的常规手段制备目前公开的化合物的药物组合物，包括例如将至少一种目前公开的化合物与药学上可接受的赋形剂混合。

因此，在实施方案中，如本文所述的奎宁环化合物(例如化合物2)与药学上可接受的赋形剂一起被包括在药物剂型中，其中所述剂型被配制成当施用时(例如当口服施用时)提供足以降低人类受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此降低所述受试者CSF中的GL-1浓度(例如降低至少约30％)的量的所述化合物。在一个实施方案中，所述受试者患有帕金森病(PD)。在另一个实施方案中，所述受试者患有路易体痴呆(DLB)。

用于本发明的方法中的药物组合物或剂型可以包含惰性或活性的药剂和另一种载体(例如化合物或组合物)，如可检测试剂、标记、佐剂、稀释剂、粘合剂、稳定剂、缓冲液、盐、亲脂性溶剂、防腐剂、佐剂等。载体还包括药物赋形剂和添加剂，例如蛋白质、肽、氨基酸、脂质和碳水化合物(例如糖，包括单糖、二糖、三糖、四糖和寡糖；衍生糖，如糖醇、醛糖酸、酯化糖等；和多糖或糖聚合物)，其可以单独或组合存在，包含单独或按重量或体积计以1％至99.99％组合。示例性的蛋白质赋形剂包括血清白蛋白，如人血清白蛋白(HSA)、重组人白蛋白(rHA)、明胶、酪蛋白等。也可以以缓冲能力起作用的代表性氨基酸/抗体组分包括丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、甜菜碱、组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、阿斯巴甜等。碳水化合物的例子包括但不限于单糖，如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖等；二糖，如乳糖、蔗糖、海藻糖、纤维二糖等；多糖，如棉子糖、松三糖、麦芽糊精、葡聚糖、淀粉等；以及糖醇，如甘露糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇、山梨糖醇(葡萄糖醇)和肌醇。

可以使用的载体包括缓冲液或pH调节剂；典型地，所述缓冲液是由有机酸或碱制备的盐。代表性缓冲液包括有机酸盐，如柠檬酸、抗坏血酸、葡萄糖酸、碳酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸或邻苯二甲酸的盐；Tris、氨基丁三醇盐酸盐或磷酸盐缓冲液。另外的载体包括聚合物赋形剂/添加剂，如聚乙烯吡咯烷酮、ficoll(一种聚合糖)、dextrate(例如环糊精，如2-羟丙基-β-环糊精)、聚乙二醇、调味剂、抗菌剂、甜味剂、抗氧化剂、抗静电剂、表面活性剂(例如聚山梨醇酯，如“TWEEN 20”和“TWEEN 80”)、脂质(例如磷脂质、脂肪酸)、类固醇(例如胆固醇)和螯合剂(例如EDTA)。

本公开文本还考虑了药物组合物和包含所述组合物的试剂盒，所述组合物包含至少一种如本文所述的奎宁环化合物(例如化合物2)和至少一种其他药学活性剂，所述组合物和试剂盒例如用于本文所述的方法中。可以调整这些药物组合物和试剂盒以允许同时、随后和/或单独施用所述奎宁环化合物和所述其他活性剂。例如，所述奎宁环化合物和所述其他活性剂可以被配制在单独剂型中，例如在单独片剂、胶囊、冻干物或液体中，或者它们可以被配制在同一剂型中，例如在同一片剂、胶囊、冻干物或液体中。在所述奎宁环化合物和所述其他活性剂被配制在同一剂型中的情况下，所述奎宁环化合物和所述其他活性剂可以基本上存在于混合物中，例如在片剂的核心内，或者它们可以基本上存在于所述剂型的离散区域中，例如在同一片剂的单独层中。在实施方案中，所述其他活性剂能够治疗或预防帕金森病或路易体痴呆。

在实施方案中，包含以下的药物组合物可以用于本文所述的方法中：(i)a如本文所述的奎宁环化合物；(ii)其他活性剂；和(iii)药学上可接受的赋形剂。在实施方案中，所述其他活性剂是当口服施用于受试者时能够治疗或预防帕金森病或路易体痴呆的药剂。

能够治疗帕金森病的其他药剂的例子包括例如多巴胺前体(例如，左旋多巴/卡比多巴)、多巴胺激动剂(例如，罗匹尼罗、溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索和阿朴吗啡)、MAO-B抑制剂(例如，雷沙吉兰和司来吉兰)、抗胆碱药(例如，安坦、苯甲托品)、金刚烷衍生物和乙酰胆碱酯酶抑制剂如他克林、利斯的明、加兰他敏、多奈哌齐和美金刚。

尽管本公开文本的特定的实施方案现在将参考制备进行描述，但是应当理解，此类实施方案仅通过举例的方式，并且仅对可以代表本公开文本原理的应用的许多可能的特定实施方案中的少量进行说明。考虑到本公开文本的有益效果，多种变化和修饰对于本领域技术人员来说将是清楚的，并且如在所附权利要求中进一步定义的，所述多种变化和修饰被认为是在本公开文本的精神和范围内。

实施例

实施例1：奎宁环化合物的制备

可以根据公开的合成程序(例如如WO 2016/145046中所述)制备本文公开的奎宁环化合物。举例来说，下文描述用于制备化合物2及其盐形式的合成方法：

(S)-奎宁环-3-基2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基氨基甲酸酯(化合物2)

向4-氟硫代苯甲酰胺(8.94g，57.6mmol)在乙醇(70mL)中的搅拌溶液中添加4-氯乙酰乙酸乙酯(7.8mL，58mmol)。将反应在回流下加热4小时，用另一等份的4-氯乙酰乙酸乙酯(1.0mL，7.4mmol)进行处理，并且再回流3.5小时。然后将反应浓缩并将残余物在乙酸乙酯(200mL)与NaHCO₃水溶液(200mL)之间分配。将有机层与水层的反萃取物(乙酸乙酯，1x75mL)合并，干燥(Na₂SO₄)并且浓缩。将所得的琥珀色油状物使用己烷/乙酸乙酯梯度通过快速色谱纯化以提供呈低熔点的几乎无色的固体的2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)乙酸乙酯(13.58g，89％)。

向2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)乙酸乙酯(6.28g，23.7mmol)在DMF(50mL)中的搅拌溶液中添加氢化钠[在矿物油中的60％分散液](2.84g，71.0mmol)。将泡沫状混合物搅拌15分钟，然后在冰浴中冷却并添加碘甲烷(4.4mL，71mmol)。将反应搅拌过夜，使冷却浴缓慢升温至室温。然后将混合物浓缩，并将残余物在乙酸乙酯(80mL)与水(200mL)之间分配。将有机层用第二部分的水(1x200mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将所得的琥珀色油状物使用己烷/乙酸乙酯梯度通过快速色谱纯化以提供呈无色油状物的2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸乙酯(4.57g，66％)。

向2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸乙酯(4.56g，15.5mmol)在1:1:1THF/乙醇/水(45mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂一水合物(2.93g，69.8mmol)。将反应搅拌过夜，浓缩并再溶解于水(175mL)中。将溶液用醚(1x100mL)洗涤，通过添加1.0N HCl(80mL)酸化，并用乙酸乙酯(2x70mL)萃取。将合并的萃取物干燥(Na₂SO₄)并浓缩以得到呈白色固体的2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸(4.04g，98％)。将此物质不经纯化即用于下一步骤。

向2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)-2-甲基丙酸(4.02g，15.2mmol)在THF(100mL)中的搅拌并冷却(0℃)的溶液中添加三甲胺(4.2mL，30mmol)，接着添加氯甲酸异丁酯(3.0mL，23mmol)。将反应再冷搅拌1小时，然后添加叠氮化钠(1.98g，30.5mmol)在水(20mL)中的溶液。将反应搅拌过夜，使冷却浴缓慢升温至室温。然后将混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(2x60mL)萃取。将合并的萃取物用NaHCO₃水溶液(1x150mL)和盐水(1x100mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。在与甲苯(2x50mL)共蒸发后，将所得的白色固体溶于甲苯(100mL)中并回流4小时。然后添加(S)-3-奎宁醇(3.87g，30.4mmol)并继续回流过夜。将反应浓缩并将残余物在乙酸乙酯(100mL)与NaHCO₃水溶液(150mL)之间分配。将有机层用水(1x150mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将所得的灰白色固体使用氯仿/甲醇/氨梯度通过快速色谱纯化以提供作为白色固体的标题化合物(4.34g，73％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.96-7.88(m,2H),7.16-7.04(m,3H),5.55(br s,1H),4.69-4.62(m,1H),3.24-3.11(m,1H),3.00-2.50(m,5H),2.01-1.26(m,11H)ppm。¹³C NMR(400MHz,CDCl₃)δ166.4,165.1,163.8(d,J＝250.3Hz),162.9,155.0,130.1(d,J＝3.3Hz),128.4(d,J＝8.5Hz),115.9(d,J＝22.3Hz),112.5,71.2,55.7,54.2,47.5,46.5,28.0,25.5,24.7,19.6ppm。纯度：100％ UPLCMS(210nm和254nm)；保留时间：0.83min；(M+1)390。

(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯盐的结晶形式

可以例如通过在室温下将游离碱在IPA(140ml)中溶解形成(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯的结晶盐并且将其过滤。将滤液添加至配备有顶置搅拌器和氮气进/出口的1L r.b.烧瓶中。将L-苹果酸(约50mmol)在室温下溶解在IPA(100+30ml)中并过滤。将滤液添加至上述1升烧瓶中。将所得的溶液在室温下(加或不加晶种)在氮下搅拌4至24小时。在此时间段期间，晶体形成。通过过滤收集产物并将其用少量IPA(30ml)洗涤。将结晶固体在55℃下在真空烘箱中干燥72小时以产生所需的苹果酸盐。

其他盐(例如与琥珀酸或HCl的酸加成盐)的晶型可以以类似的方式来制备。

实施例2：化合物2在人类PD患者中的临床研究

研究设计和参与者

此临床试验是一项在携带GBA突变的患有早期PD的参与者中进行的化合物2的3年、2期、随机化、双盲、安慰剂对照的多中心研究。此试验分为2个连续部分：第1部分是使用3个顺序群组的3个剂量的安全性、药代动力学和药效学的剂量递增研究(如下文所述)；第2部分是进行中的化合物2的功效和安全性的2组研究。

在已经完成的研究的第1部分中，化合物2的剂量在顺序群组中递增；只有在当所有参与者完成第一个4周疗程时的数据审查后证明安全性和耐受性时，才可以在下一个群组中递增至下一个更高的水平。

入选标准

合格参与者的年龄为18-80岁，具有PD的诊断，定义为以下体征中的≥2个：静止性震颤、姿势不稳定、运动不能/运动减少和肌强直；PD症状≥2年，在基线时按照Hoehn和Yahr量表(Hoehn等人,Neurology 1967；17:427-42；Goetz等人,Mov Disord 2004；19:1020-8)处于2期或以下，并且是GBA突变的杂合携带者。筛查的GBA突变的综合列表示于表1中，并且包括已知会引起2型和3型戈谢病(GD)的严重突变，以及其他非严重突变(包括存在于1型GD患者中的轻度GBA突变)。

对于携带与GBA-PD相关的已知序列变体(例如E326K或T369M)的参与者，需要快速眼动睡眠行为障碍史和/或与所列任何突变共现。

表1：进行筛查以确定入组合格性的常见GBA突变的列表^a

^a需要咨询以确定具有此列表中未出现的GBA突变的参与者的合格性。cDNA＝互补脱氧核糖核酸；GBA＝葡糖脑苷脂酶(葡糖神经酰胺酶β)基因；RBD＝快速眼动睡眠行为障碍

如果随机化前方案稳定≥30天(雷沙吉兰≥60天)，参与者可以继续进行伴随对症PD药物治疗。

排除标准

关键排除标准包括继发性或非典型帕金森症(由于药物或毒素导致的帕金森症的表现)，富亮氨酸重复序列激酶2基因(LRRK2)G2019S突变的存在，携带双等位基因GBA突变(即GD诊断)，患有如通过临床体征和症状(即肝脾肿大、血细胞减少、骨骼疾病)定义的GD和/或与GD相容的明显缺乏GCase活性的患者，基线时蒙特利尔认知评估[MoCA]得分<20(Nasreddine ZS等人,J Am Geriatr Soc 2005；53:695-9)，过去深部脑刺激手术史，以及可能干扰研究相关程序的任何医学障碍和/或临床相关发现(例如妨碍常规腰椎穿刺(LP)的安全操作的病症，如禁止性腰椎疾病、出血体质或临床上显著的凝血病或血小板减少症)的存在。

进一步的排除标准包括：当前用可能会妨碍LP的安全完成的抗凝药(例如，香豆定、肝素)治疗；在体格检查、病史或实验室评估中，研究者认为可能干扰研究相关程序的任何医学障碍和/或临床相关发现(例如心力衰竭、低钾血症等)；筛查检查1年内如通过BDI-II>28测量的严重抑郁症和/或重度情感障碍史的存在；在第一次筛查访视之前的过去一年内有药物和/或酒精滥用史；基线无造影剂MRI显示结构异常，它可能是PD相关体征和症状的病因；当前参与另一项研究性干预研究；有记录的乙型肝炎、丙型肝炎、人类免疫缺陷病毒1或2中任一种的诊断；在随机化前30天或5个半衰期(以较长者为准)内，使用专门用于治疗记忆功能障碍的任何药剂(例如胆碱酯酶抑制剂或美金刚)，或者使用CYP3A4的强或中度诱导剂或抑制剂；在DAT神经成像评价前6个月内使用抗精神病药、莫达非尼、阿莫非尼、甲氧氯普胺、α-甲基多巴、哌甲酯、利血平或安非他明衍生物；在研究入选前3个月或5个半衰期(以较长者为准)内使用临床试验用药物(包括氨溴索)；使用延长从ECG Q波到对应于电收缩的T波或校正T波结束的时间(QT/QTc间期)的伴随药物治疗；筛查ECG上QT/QTc间期的明显基线延长(如男性受试者QTc间期>450msec，女性受试者>470msec)；筛查时肝酶(ALT/AST)或总胆红素>2倍ULN(患有吉尔伯特病的参与者仅不参与第1部分)；筛查访视时如通过肌酐>1.5倍ULN定义的肾功能不全；在随机化之前，使用一种或多种伴随对症PD药物治疗(如多巴胺前体(例如左旋多巴/卡比多巴)、多巴胺激动剂(例如，罗匹尼罗、溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索和阿朴吗啡)、MAO B抑制剂(例如，雷沙吉兰和司来吉兰)、抗胆碱药(例如，安坦、苯甲托品)、金刚烷衍生物和乙酰胆碱酯酶抑制剂)，其中使用所述一种或多种对症PD药物治疗的治疗方案不稳定≥30天，或者在MAO B抑制剂(特别是雷沙吉兰)的情况下不稳定≥60天；根据世界卫生组织分级，>晶状体周长的四分之一的皮质性白内障(皮质性白内障-2级)或>2mm的后囊下白内障(后囊下白内障-2级)的存在；当前接受潜在的致白内障药物治疗，包括任何剂量或途径的皮质类固醇的慢性方案(比每2周更频繁)，或者根据处方信息可能引起白内障或使患有白内障的参与者的视力变差的任何药物治疗(例如，青光眼药物治疗)；以及怀孕、授乳或母乳喂养。

临床试验

在试验的第1部分，来自13个地点(包括4个日本地点和日本以外5个国家(德国、葡萄牙、西班牙、瑞典和美国)的9个地点)的29名参与者入组。由于GBA突变导致的PD风险在日本高于在其他国家(Sidransky等人,N Engl J Med 2009；361:1651-61；Mitsui J等人,Arch Neurol 2009；66:571-6)，根据日本医药品医疗器械综合机构的要求，单独评价日本参与者(n＝12)，以将这个群体中的化合物2的药代动力学和药效学以及功效和安全性结局与在世界其他地区(ROW)群体(17名参与者)中观察到的那些进行比较。

在顺序群组设计中，将参与者随机化至3个剂量的每日一次口服施用化合物2或安慰剂，并且跟踪直至36周(对于日本参与者，52周)。低剂量组的参与者接受每日一次口服剂量的4mg化合物2；中剂量组的参与者接受每日一次口服剂量的8mg化合物2；并且高剂量组的参与者接受每日一次口服剂量的15mg化合物2。

主要终点是化合物2与安慰剂相比的安全性和耐受性。此外，还评价了化合物2的药代动力学和药效学。

将第1部分中招募的总共9名日本(低剂量：n＝3；中剂量：n＝3；高剂量：n＝3)和13名ROW(低剂量：n＝4；中剂量：n＝5；高剂量：n＝4)参与者随机化以接受化合物2，其中3名日本参与者和4名行参与者被随机化至安慰剂(图1和图2)。

在日本组与ROW组之间，自从运动症状发作以来的平均时间和自从诊断以来的平均时间是相似的。在其他基线和疾病特征方面，在各组之间观察到数值差异(表2)。

表2：试验第1部分中的基线特征

DOPA＝二羟基苯丙氨酸；GBA＝葡糖脑苷脂酶(葡糖神经酰胺酶β)基因；max＝最大值；MDS-UPDRS＝运动障碍学会-统一帕金森病评定量表；min＝最小值；MoCA＝蒙特利尔认知评估；PD＝帕金森病；ROW＝世界其他地区；y＝岁。^a第II部分(日常生活的运动体验[13项])和第III部分(运动检查[18项])。^b将严重GBA突变归类为引起2型和3型戈谢病的那些。^c其他非严重GBA突变包括与1型GD相关的轻度GBA突变。

相比于ROW参与者，更多的日本参与者表现出强直/运动迟缓，并且更少的日本参与者具有震颤。相比于ROW参与者，更少的日本参与者具有PD家族史。在日本群组与ROW群组之间，平均基线MoCA得分是相似的。日本参与者和ROW参与者在基线时的平均(标准差[SD])MDS-UPDRS(第II部分和第III部分)得分分别为45·9(12·7)和44·6(21·9)。在ROW参与者中，7/17(41·2％)具有严重GBA突变，包括L444P(4名参与者)、84GG(3名参与者)和A456P(1名参与者)，并且10/17(58·8％)携带其他GBA突变，包括N370S(7名参与者)和变体E326K(3名参与者)。在日本群组中，具有严重突变的参与者的比例较高(9/12[75·0％]，包括L444P[5名参与者]、R120W[3名参与者]、A456P[2名参与者]和D409H[1名参与者])，而较少的日本参与者具有其他突变(3/12[25·0％]，包括R496C[2名参与者]和G193W[1名参与者])。在所有化合物2治疗的参与者中，在低、中、高剂量下，中值(四分位间距[IQR])暴露持续时间分别为35·7(32·0；40.1)周、20·3(17·5；24.1)周和8·3(8·0；12.1)周。

所述试验允许参与者继续或按需接受伴随的对症PD药物治疗，并且在筛查访视时及在研究期间进行记录(表3)。所有日本参与者和15/17(88·2％)的ROW参与者接受了表3中总结的伴随对症药物治疗。

表3：伴随对症PD药物治疗列表

DOPA＝二羟基苯丙氨酸；PD＝帕金森病；ROW＝世界其他地区。^a可以将药物治疗计入多于1个治疗类别，并且单个参与者可以接受多于1种伴随对症PD药物治疗。

DOPA和DOPA衍生物包括左旋多巴、卡比多巴、苄丝肼、ledopsan、madopar、sinemet和stalevo。多巴胺激动剂包括普拉克索、罗匹尼罗、罗替戈汀、阿朴吗啡和卡麦角林。单胺氧化酶B抑制剂包括司来吉兰、雷沙吉兰和沙芬酰胺。叔胺包括苯海索和波那普令。其他多巴胺能药物包括恩他卡朋和奥匹卡朋。金刚烷衍生物包括金刚烷胺。

研究参与者在首次摄入化合物2之前长达3个月使用的其他先前药物治疗包括催乳素抑制剂(例如，卡麦角林)、用于勃起功能障碍的药物(例如，阿朴吗啡)和解毒剂(例如，阿朴吗啡)。

统计分析

分析是基于来自如下参与者的所有可获得的数据，所述参与者在试验的第1部分入组，并且被随机化以接受化合物2或安慰剂，对于日本参与者持续长达52周，对于ROW群体持续长达36周。由于第1部分是一项探索性的剂量递增研究，因此样品量并非基于统计检力计算。主要安全性分析中包括的参与者是被随机化并且接受至少一剂化合物2或安慰剂的那些参与者。在整个研究中，数据监控委员会负责监督患者的安全性和风险/收益比。根据顺序群组设计，化合物2的暴露持续时间在剂量之间是不同的，其中低剂量群组和高剂量群组分别首先和最后开始所述研究。对于药代动力学，使用非房室方法从单一剂量施用后获得的血浆化合物2浓度计算血浆参数。分别在24小时或48小时的预定义时间段内使用梯形法计算AUC_0-24和AUC_0-48。使用以下等式计算CL_ss/F：CL_ss/F＝剂量/AUCτ，其中τ是给药间隔。对于药效学，血浆或CSF GL-1相对于基线的降低百分比计算为(值-基线)/基线×100。没有对MDS-UPDRS量表评估进行正式的统计学检验。

实施例3：化合物2在PD患者中耐受良好

试验的第1部分的主要结局是口服施用的化合物2相比于安慰剂一直到第4周(每个顺序群组的主要分析期)的安全性和耐受性的评估。此外，每4周记录安全性评估，直至完成。通过以下评估安全性：体格检查；神经系统检查；在中央实验室进行的临床实验室评价，包括血液学、生物化学、尿液分析和血清学测试；生命体征；AE和伴随药物治疗的评估；眼科检查；和心电图。在整个研究过程中记录了AE、严重AE和特别关注的AE(AESI)。严重AE被定义为致命的、或危及生命的、需要或延长住院病人住院的、或致残/使人失能的、先天性异常或医学上重要的事件(例如恶性肿瘤或慢性神经系统变性疾病)。AESI包括新发或恶化的晶状体混浊和白内障(如通过在筛查时以及在第4、12、28、36周[对于日本参与者，第4、12、36、52周]的眼科评价所评估的)、妊娠事件、丙氨酸氨基转移酶升高或症状性研究药物过量。

研究期间，将29名参与者随机化至化合物2(日本，n＝9；ROW，n＝13)或安慰剂(n＝3；n＝4)。化合物2治疗的八名(89％)日本参与者和12名(92％)ROW参与者经历≥1次不良事件(AE)，相比之下，相应安慰剂组各有2名(67％)和4名(100％)参与者如此。大多数AE为轻度或中度，未发生严重AE或死亡。两名化合物2治疗的ROW参与者因AE(意识错乱状态和惊恐发作)而中止。表4示出了在治疗紧急期(定义为从第一次摄入治疗至最后一次摄入治疗+6周的时间段)期间收集的AE数据。

表4：所述试验的整个第1部分中的AE^a

^a在第1天、第2天、第3天、第2周、第4周评估安全性结局，然后每4周评估直至36周(对于日本参与者，直至52周)。此表中包括的AE是在治疗紧急期(定义为第一次摄入治疗至最后一次摄入治疗+6周的时间段)期间发生的那些。AE＝不良事件；MedDRA＝国际医学用语词典。

安慰剂治疗的参与者和化合物2治疗的参与者两者都经常发生神经系统障碍和胃肠道事件，与常见的PD症状一致(DeMaagd等人,P T 2015；40:504-32；Poirier等人,Parkinsons Dis 2016；2016:6762528)。在化合物2治疗的患者中观察到高频率的精神障碍(表5)。这些障碍包括在PD患者中具有高患病率的已知精神临床表现，如失眠、焦虑、抑郁和幻觉(Grover S等人,J Neurosci Rural Pract 2015；6:65-76)。第1部分参与者中神经障碍、精神障碍和胃肠道障碍的相对高频率可能部分归因于伴随PD药物治疗的使用，包括多巴胺激动剂(Ceravolo R等人,Expert Opin Drug Saf 2016；15:181-98)。

表5：参与者的精神障碍^a

^a每4周评估安全性结局，持续最长36周(对于日本参与者，长达52周)，直到第1部分完成；^b按照MedDRA主系统器官分类。MedDRA＝国际医学用语词典。

这些发现表明化合物2在PD患者中耐受良好。

实施例4：化合物2在血浆和CSF中的药代动力学

次要结局是在4周时间段内评价化合物2在血浆和脑脊液(CSF)中的药代动力学谱。血浆药代动力学参数包括最大血浆浓度(C_max)、达到C_max的时间(t_max)以及从0至24h的血浆浓度与时间曲线的曲线下面积(AUC_0-24)。所有参数均在第0周和治疗后第4周进行评估。此外，在第0周评估AUC_0-48，在第2、4和8周评估在重复给药期间紧接在治疗施用前观察到的谷血浆浓度(C_谷)(图3)，并且在第4周评估稳态下血浆的总全身清除率(CL_SS/F)。在给药前1小时和给药后1、2、4、8、24和48小时收集血浆样品。使用液相色谱串联质谱方法确定血浆中化合物2的浓度，其中定量下限为0·500ng/mL。在筛查期期间(随机化前14天内)或在随机化当天，以及在第4周，在给药后2至4小时内，通过腰椎穿刺收集CSF样品。使用液相色谱串联质谱方法确定CSF中的化合物2浓度，其中定量下限为0·100ng/mL。

化合物2治疗后第1天和第4周的药代动力学数据报告于表6a和表6b中。

表6a：第1天化合物2的血浆药代动力学参数

AUC_0-24＝0至24h血浆浓度与时间曲线的曲线下面积；AUC_0-48＝0至48h血浆浓度与时间曲线的曲线下面积；C_max＝最大观察浓度；CV％＝变异系数；h＝小时；t_max＝达到最大浓度的时间。

^a在给药前和给药后1、2、4、8、24、48小时收集血浆样品。

表6b：第4周时化合物2的血浆和CSF药代动力学浓度

AUC_0-24＝0至24h血浆浓度与时间曲线的曲线下面积；C_max＝最大观察浓度；CL_SS/F＝稳态时的总全身清除率；CSF＝脑脊液；CV％＝几何变异系数；h＝小时；NA＝不适用；ROW＝世界其他地区；t_max＝达到最大浓度的时间。

^a在给药前1h和给药后1、2、4、8和24h收集血浆样品；^bn＝1；^cn＝2；^d3名参与者(1名来自低剂量组，2名来自中剂量组)不包括在CSF药代动力学分析中，因为第4周CSF样品是在给药前收集的而不是在方案规定的给药后时间收集的；^e未收集1名参与者的第4周CSF样品。

在日本和ROW群组二者中，血浆和CSF中的化合物2浓度以接近与剂量成比例的方式增加(表6b)。在第4周，在所有测试的剂量中，化合物2在血浆中被吸收的中值t_max值在日本参与者中为2·10-4·33小时，在ROW参与者中为1·96-3·55小时。低剂量治疗的参与者与高剂量治疗的参与者之间的化合物2剂量增加导致日本参与者群组中血浆的几何平均C_max增加2·56倍，而ROW参与者中增加3·29倍。还观察到血浆几何平均AUC_0-24和CL_ss/F的增加。在低剂量治疗的参与者与高剂量治疗的参与者之间，第4周化合物2的平均CSF浓度在日本参与者中增加了4·79倍，并且在ROW参与者中增加了3·22倍。在第2、4和8周，C_谷以与剂量成比例的方式增加(图3)。在高剂量化合物2治疗的ROW参与者(在4周的每天一次给药后，平均(SD)C_max为136(13·4)ng/mL，并且AUC_0-24为2510(369)ng·h/mL)与健康个体(142(40.0)ng/mL，并且AUC_0-24为2420(705.0)ng·h/mL)之间，稳态暴露药代动力学参数是相似的。

实施例5：在用化合物2治疗的患者中血浆和CSF GL-1水平相对于基线以剂量依赖性方式降低

在探索性分析中，通过GL-1水平从基线至第4周的平均变化百分比来评估血浆和CSF中的化合物2药效学。在随机化当天和第4周收集的血浆和CSF样品中评估GL-1水平，还在第2周评估血浆GL-1水平。还在血浆和CSF中测量葡糖基鞘氨醇(GlcSph，lyso-GL1)(GL-1的一种代谢产物)的水平，但是发现大多数值低于测定的定量限，这反映了这样的事实，即入组的参与者是GBA突变的杂合携带者，并且他们没有GD诊断。

使用液相色谱串联质谱方法确定血浆和CSF中GL-1的浓度。在每日一次化合物2给药的4周时间段内评价次要药代动力学结局(表7)。

表7：从基线至第4周的血浆和CSF葡糖神经酰胺水平

^a未收集1名参与者的CSF样品。

在化合物2治疗的患者中，血浆和CSF GL-1水平在4周内相对于基线以剂量依赖性方式降低(图4；图5)。对于低、中和高剂量的化合物2，血浆GL-1在第4周的相应平均降低对于日本群组为66·1％、70·7％和79·3％，并且对于ROW参与者为59·0％、71·0％和77·7％；在两个群组中，在第2周均观察到血浆GL-1水平的相似降低。对于低、中和高剂量的化合物2，CSF GL-1在第4周的相应平均减少对于日本群组为21·7％、67·0％和72·0％，并且对于ROW参与者为41·0％、58·0％和74·3％。

化合物2的药效学反应的探索性分析表明，相同时间段内血浆和CSF样品中GL-1水平的剂量依赖性降低。在最高剂量下，观察到CSF GL-1水平相对于基线降低72·0％-74·3％，这表明化合物2在口服施用时是脑渗透剂，并且可以改良脑和CSF中的鞘糖脂谱。此研究中的参与者CSF中GL-1水平的持续降低反映了化合物2的足够的靶接合，首次示出了对PD患者中枢神经系统中的脂质谱的改良。

另一个探索性结局是评估化合物2对所选量表和问卷的影响。

实施例6：化合物2对MDS-UPDRS(第II部分和第III部分)的影响

MDS-UPDRS是最初在20世纪80年代开发的统一帕金森病评定量表(UPDRS)的修订版本。它解决了由MDS审查任务组确定的原始量表的几个有问题的领域。MDS-UPDRS被开发用于评价帕金森病的各个方面，包括日常生活的非运动和运动体验以及运动并发症(Goetz等人,Mov Disord 2007；22:41-7，和Goetz等人,Mov Disord 2008；23:2129-70)。它包括不同群体的运动评价，并且表征疾病程度和负荷。所述量表可用于临床环境以及研究(https://www.movementdisorders.org/MDS/MDS-Rating-Scales/MDS-Unified- Parkinsons-Disease-Rating-Scale-MDS-UPDRS.htm)。

报告一直到第8周的MDS-UPDRS(第II部分[日常生活的运动体验；13项]和第III部分[运动检查；18项])得分。在OFF状态(其中之前≥12小时未服用PD药物治疗)期间评估MDS-UPDRS量表。

对于实施例2中所述临床研究的第1部分中的参与者，在第8周评估MDS-UPDRS(第II部分和第III部分)得分相对于基线的变化。结果示于下表8中。

表8：MDS-UPDRS(第II部分和第III部分)得分在第8周相对于基线的变化

一直到第8周，在化合物2治疗的日本参与者和ROW参与者中，在OFF状态下进行的MDS-UPDRS(第II部分和第III部分)得分相对于基线的平均值(SD)变化分别为-0·7(10·7)和-4·5(13·3)，相比之下，在相应的安慰剂组中观察到+0·3(2·5)分和-3·0(9·6)分。

Claims

1.一种治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病；所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(I)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药，其中：

2.根据权利要求1所述的方法，其中R¹选自氢、氟、甲基和乙基，其中所述甲基或乙基任选地被选自卤素、羟基、硫代基或氨基的1或2个基团取代。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中R²和R³各自独立地选自甲基和乙基，所述甲基和乙基任选地被一个或多个氟取代。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中R⁴选自卤素(例如，氟)、C_1-3-烷基(例如，甲基)和C_1-3-烷基氧基(例如，甲氧基或乙氧基)，其中所述烷基或烷基氧基任选地被选自卤素和C_1-3-烷基氧基(例如，甲氧基或乙氧基)的一个或多个(例如1、2或3个)基团取代。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中R⁵和R⁶各自是氢。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中R⁴是氟或2-甲氧基乙氧基，并且R⁵和R⁶是氢。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中R⁴位于其所附接的苯环的4位(即，A取代基的对位)。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中A是苯基，其任选地被独立地选自卤素、羟基、硫代基、氨基、硝基、C_1-6烷基氧基和C_1-6烷基(例如，甲基)的1、2或3个基团取代。

9.根据权利要求8所述的方法，其中附接至所述A取代基的两个基团彼此的位置呈1,3-或1,4-关系(即，间位或对位)。

10.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中A是5元杂芳基，其含有选自N和S的1或2个杂原子。

11.根据权利要求10所述的方法，其中附接至所述A取代基的两个基团彼此的位置呈1,3-关系(即，间位)。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述化合物是式(II)、(III)或(IV)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

13.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述化合物是式(V)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

14.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述化合物是式(VI)、(VII)或(VIII)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

15.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述化合物是式(IX)或(XI)的化合物，

或其药学上可接受的盐或前药。

16.根据权利要求15所述的方法，其中R⁴是氟。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述化合物选自：奎宁环-3-基(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；(S)-奎宁环-3-基(2-(4'-(2-甲氧基乙氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯；及其药学上可接受的盐和前药。

18.根据权利要求1所述的方法，其中所述化合物是奎宁环-3-基(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸酯。

19.根据权利要求1所述的方法，其中所述化合物是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯。

20.根据权利要求1所述的方法，其中所述化合物是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯的酸加成盐形式，选自盐酸盐、羟基琥珀酸盐和苹果酸盐。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述一个或多个GBA1突变选自L444P、84GG、A456P、R120W、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。

23.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述脑组织是(或包含)神经元。

24.一种治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者；所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至20中任一项所定义的式(I)的化合物。

25.根据权利要求24所述的方法，其中所述一个或多个GBA1突变选自L444P、84GG、A456P、R120W、D409H、E235A、E340A、N370S、E326K、R496C、G193W、T369M、R496H和S271G。

26.根据权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述方法导致CSF中的GL-1浓度降低至少40％(例如，至少50％、至少60％或至少70％)。

27.根据权利要求1至26中任一项所述的方法，其中在开始治疗的3个月内(例如在开始治疗的2个月、4周、2周或1周内)，所述方法导致所述CSF中的GL-1浓度降低。

28.根据权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述受试者已经被诊断为患有帕金森病(例如，早期帕金森病)。

29.根据权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述受试者已经被诊断为有风险患上帕金森病，并且其中所述方法预防或延迟所述受试者中的帕金森病的发作和/或发展。

30.根据权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述受试者具有帕金森病的诊断，并且其中所述方法预防、减少或逆转运动功能障碍(例如，震颤)、运动迟缓、强直、姿势不稳定和/或平衡受损。

31.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者具有帕金森病的诊断，并且其中所述受试者具有至少一个以下特征：i)帕金森病的家族史；ii)基线蒙特利尔认知评估(MoCA)得分≤26(例如，从20至25)；以及iii)运动障碍学会-统一帕金森病评定量表(MDS-UPDRS)(第II部分+第III部分)得分为至少35。

32.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者具有特征在于以下的早期帕金森病的诊断：i)至少两种以下病症：静止性震颤、姿势不稳定、运动不能/运动减少和肌强直；ii)在基线时Hoehn和Yahr量表分期≤2期；和/或iii)帕金森病诊断≥2年。

33.根据权利要求28至31中任一项所述的方法，其中所述受试者在过去已经用选自以下的药物治疗：二羟基苯丙氨酸(DOPA)或其衍生物(例如，左旋多巴/卡比多巴)、单胺氧化酶B抑制剂(例如，雷沙吉兰或司来吉兰)、多巴胺激动剂(例如，罗匹尼罗、溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索或阿朴吗啡)、儿茶酚-O-甲基转移酶抑制剂(例如，恩他卡朋、托卡朋)、抗胆碱药(例如，安坦、苯甲托品)、金刚烷衍生物和/或乙酰胆碱酯酶抑制剂(例如，他克林、利斯的明、加兰他敏、多奈哌齐或美金刚)。

34.根据权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述受试者具有路易体痴呆(DLB)的诊断。

35.根据权利要求34所述的方法，其中所述方法预防、减少或逆转所述受试者中的痴呆的进展。

36.一种降低有需要的人类受试者脑组织中的鞘糖脂浓度的治疗方法，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度由于所述方法而降低，其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病；所述方法包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1至20中任一项所定义的式(I)的化合物。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述方法导致CSF中的GL-1浓度降低至少30％(例如，至少40％、至少50％、至少60％或至少70％)。

38.根据权利要求37所述的方法，其中在开始治疗的3个月内(例如在开始治疗的2个月、1个月、3周、2周或1周内)，所述方法导致所述CSF中的GL-1浓度降低。

39.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述脑组织是所述受试者的黑质、大脑皮层、海马、额叶和/或颞叶的神经元。

40.根据权利要求1至39中任一项所述的方法，其中将所述化合物或其药学上可接受的盐或前药通过全身施用来施用，例如经由非肠胃外途径施用。

41.根据权利要求40所述的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐或前药是口服施用的。

42.根据权利要求1至41中任一项所述的方法，其中向所述受试者施用约2mg至约30mg的每日剂量的所述化合物或其药学上可接受的盐或前药(例如从2mg至20mg、或从2mg至10mg、或从4mg至8mg、或从10至20mg、从4mg至15mg或选自4、8和15mg的剂量)。

43.根据权利要求1至42中任一项所述的方法，其中所述方法预防、减少或逆转所述受试者的认知领域中的衰退。

44.根据权利要求1至42中任一项所述的方法，其中所述方法有效改善所述受试者的认知能力或减少认知缺陷，如通过以下测量的：完成连线试验(TMT)所花费的时间TMT-A和/或TMT-B的减少、TMT-A时间与TMT-B时间之间的差(TMT-A-TMT-B)的减少，例如，减少至少10％、或至少20％、或至少30％、或至少40％、或至少50％(例如，其中TMT-A减少5％-20％，和/或TMT-B减少25％-30％，和/或[TMT-A-TMT-B]减少25％-30％)。

45.根据权利要求43所述的方法，其中所述方法预防、减少或逆转注意力和专注力、执行功能、记忆(例如，工作记忆)、语言、视觉构造技能、概念思维、计算、定向、决策和/或问题解决方面的衰退。

46.根据权利要求1、权利要求24或权利要求36所述的方法，其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者，并且所述化合物是(S)-奎宁环-3-基(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸酯的苹果酸加成盐，并且以约15mg(按等效量的游离碱测量)的每日剂量口服施用。

47.根据权利要求46所述的方法，其中在开始治疗的3个月内(例如在开始治疗的2个月、1个月、3周、2周或1周内)，所述化合物在所述受试者CSF中的浓度(按等效量的游离碱测量)为至少4ng/ml(例如，至少8ng/ml或至少10ng/ml)。

48.根据权利要求46或权利要求47所述的方法，其中所述方法导致脑中(例如额叶、枕叶、顶叶或颞叶中的一个或多个中)的血流量增加，例如如通过fMRI成像所示；和/或脑中(例如，在脑的后部与前部之间，和/或在枕叶-顶叶结构与额叶、颞叶和/或边缘结构之间，例如如通过fMRI成像所示)的结节连通性增加。

49.一种如权利要求1至20中任一项所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法中，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病。

50.根据权利要求49所述的用于所述用途的化合物，其中所述治疗或预防方法是如权利要求21至23、26至35或39至48中任一项所定义的。

51.如权利要求1至20中任一项所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药在制造用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法的药剂中的用途，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者未患(例如，尚未被诊断为患有或有风险患上)溶酶体贮积病。

52.根据权利要求51所述的用途，其中所述治疗或预防方法是如权利要求21至23、26至35或39至48中任一项所定义的。

53.一种如权利要求1至20中任一项所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法中，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者。

54.根据权利要求53所述的用于所述用途的化合物，其中所述治疗或预防方法是如权利要求25至35或39至48中任一项所定义的。

55.如权利要求1至20中任一项所定义的化合物或其药学上可接受的盐或前药在制造用于治疗或预防人类受试者中的神经系统变性疾病的方法的药剂中的用途，所述方法通过降低所述受试者脑组织中的鞘糖脂浓度，由此所述受试者脑脊液(CSF)中的葡糖神经酰胺(GL-1)的浓度降低至少30％，其中所述神经系统变性疾病选自帕金森病(PD)和路易体痴呆(DLB)，并且其中所述受试者是一个或多个葡糖脑苷脂酶1基因(GBA1)突变的杂合携带者。

56.根据权利要求55所述的用途，其中所述治疗或预防方法是如权利要求25至35或39至48中任一项所定义的。