CN116286428A - 一种降解农药残留的复合微生物菌剂的生产方法 - Google Patents

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张六六
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Abstract

本发明属于降解农药残留技术领域，具体涉及一种复合微生物菌剂的制备方法。本发明由一株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和一株胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）的液态发酵产物按4:1的比例复配而成，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×109 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5×107 cfu/g，所述复合微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）对枯草芽孢杆菌活化并发酵培养；（2）对胶冻样芽杆菌活化并发酵培养；（3）离心浓缩，获得单一微生物菌剂；（4）高温雾化干燥；（5）混合，得到复合微生物菌剂产品。本发明可以快速地降解农药残留，达到对水体进行解毒目的；本发明使得在养殖前期降解农药残留有着显著的效果。

Description

一种降解农药残留的复合微生物菌剂的生产方法
技术领域
本发明属于降解农药残留技术领域，具体涉及一种复合微生物菌剂的制备方法。
背景技术
由于现养殖户在大量捕虾会使用农药，随着水产养殖规模的扩大和产量的不断增加，药品用量逐年增加，致使药物残留问题逐渐成为社会关注的焦点，已严重影响了水产养殖业的可持续发展，若不经过相应处理，将对环境造成危害。利用复合微生物菌剂降解农药残留，一来可以降解水体中的农药，二来，可以改善水质，保护环境，并且可大大减少养殖户劳力和经济浪费，因此配套的微生物菌剂生产成为重中之重。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种复合微生物菌剂，可适应水体中农药残留，在水体中大量繁殖来降解农药残留，对微生物的选用翻看大量书籍进行多种实验，在菌剂生产复配时需要对配比进行不断的调试，同时还需要达到资源节约目的。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种复合微生物菌剂，所述复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌的干燥产物按4:1的比例复配而成，其中高温枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×109 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5×107 cfu/g。
所述复合微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
（1）液态发酵：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌分别进行液态发酵，得到大量的微生物菌体；
（2）离心浓缩：对发酵后的产物进行高效离心，获得高含量低体积的浓缩微生物菌剂；
（3）高温雾化干燥：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌的浓缩液分别进行130℃干燥，获得含水量在10%以下的微生物菌剂产品；
（4）复配混合：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌的干燥产物按4:1的比例混合复配，并添加辅料。复混后高温枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×109 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5×107cfu/g。
所述枯草芽孢杆菌液态发酵的制备采用以下步骤：
将枯草芽孢杆菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养2-3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液，将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%-2%，pH为7.0-7.5；摇瓶培养基配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠。
所述发酵条件为温度为37-37.5℃。
所述发酵罐培养基的配方为玉米淀粉1.8kg，牛肉膏0.18kg，蛋白胨0.8kg， 酵母粉0.64kg，磷酸二氢钾0.24kg，磷酸氢二钾0.12kg，硫酸镁0.032kg，乙酸钠0.2kg，柠檬酸钠0.16kg，碳酸钙0.24kg，硫酸锰8g，硫酸亚铁16g，消泡剂0.24kg，pH 7.0-7.5，发酵条件温度为37.0-37.5℃。
所述胶冻样芽孢杆菌液态发酵的制备采用以下步骤：
将胶冻样芽孢杆菌菌株从斜面分别接种至培养基中培养2-3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液,将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；
所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%-2%，pH为7.0-7.5；摇瓶培养基配方为蔗糖20（g/L），尿素0.1（g/L），氯化钠0.2（g/L）磷酸氢二钾0.2（g/L）硫酸锰0.2（g/L）碳酸钙5（g/L）pH7.0-7.2。
所述发酵罐培养基配方为玉米淀粉10（g/L），黄豆粉5（g/L），蔗糖2（g/L），硫酸铵1.8（g/L），磷酸氢二钾2（g/L），硫酸镁0.6（g/L），酵母粉1.5（g/L），蛋白胨1（g/L），牛肉膏1（g/L），碳酸钙5（g/L），pH7.0-7.2，发酵温度为30-30.5℃。
本发明具有以下优点：
本发明所述复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）的液态发酵干燥后产物复配而成，本发明能够降解水体中农药残留、改善水质、易存储，同时，生产过程和使用过程中，可节约劳力和电能，达到资源节约的目的。
附图说明
图1为本发明所述复合微生物菌剂的制备方法流程图。
具体实施方式
下面结合具体附图和实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制。凡是根据本发明实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变化，均仍属于本发明技术方案的保护范围内。

Claims (5)

1.一种降解农药残留的复合微生物菌剂的生产方法，其特征在于，所述复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆进行菌液态发酵、离心浓缩、高温雾化干燥的产物按4:1的比例复配而成，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×109 cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5×107 cfu/g。
2.权利要求1所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）液态发酵：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌分别进行液态发酵，得到大量的微生物菌体；
（2）离心浓缩：对发酵后的产物进行高效离心，获得高含量低体积的浓缩微生物菌剂；
（3）高温雾化干燥：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌的浓缩液分别进行130℃干燥，获得含水量在10%以下的微生物菌剂产品；
（4）复配混合：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌的干燥产物按4:1的比例混合复配，并添加辅料，复混后高温枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×109 cfu/g，胶冻样的有效活菌数≥5×107 cfu/g。
3.如权利要求2所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌液态发酵的制备采用以下步骤：
将枯草芽孢杆菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养2-3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液，将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；
所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%-2%，pH为7.0-7.5；摇瓶培养基配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠；
所述发酵条件为温度为37-37.5℃；
所述发酵罐培养基的配方为玉米淀粉1.8kg，牛肉膏0.18kg，蛋白胨0.8kg， 酵母粉0.64kg，磷酸二氢钾0.24kg，磷酸氢二钾0.12kg，硫酸镁0.032kg，乙酸钠0.2kg，柠檬酸钠0.16kg，碳酸钙0.24kg，硫酸锰8g，硫酸亚铁16g，消泡剂0.24kg，pH 7.0-7.5，发酵条件温度为37.0-37.5℃。
4.如权利要求2所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述胶冻样芽孢杆菌的制备采用以下步骤：
将胶冻样芽孢杆菌菌株从斜面分别接种至培养基中培养2-3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液,将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；
所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%-2%，pH为7.0-7.5；摇瓶培养基配方为蔗糖20（g/L），尿素0.1（g/L），氯化钠0.2（g/L）磷酸氢二钾0.2（g/L）硫酸锰0.2（g/L）碳酸钙5（g/L）pH7.0-7.2；
所述发酵罐培养基配方为玉米淀粉10（g/L），黄豆粉5（g/L），蔗糖2（g/L），硫酸铵1.8（g/L），磷酸氢二钾2（g/L），硫酸镁0.6（g/L），酵母粉1.5（g/L），蛋白胨1（g/L），牛肉膏1（g/L），碳酸钙5（g/L），pH7.0-7.2，发酵温度为30-30.5℃。
5.如权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌分别离心浓缩后可得菌含量高、体积少的浓缩液，这样可大大提高高温雾化干燥效率，减少人工和电力资源的浪费，高温雾化在130℃进行干燥时不仅有效去除水分，而且能降低菌剂的损失率。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117535195A (zh) * 2023-11-20 2024-02-09 宁夏回族自治区食品检测研究院 一种降解抗生素和农药残留的复合微生物菌剂及其制备方法

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