CN116270758A - 乳双歧杆菌ty-s01在控制体重方面中的新应用 - Google Patents

乳双歧杆菌ty-s01在控制体重方面中的新应用 Download PDF

Info

Publication number
CN116270758A
CN116270758A CN202211474080.5A CN202211474080A CN116270758A CN 116270758 A CN116270758 A CN 116270758A CN 202211474080 A CN202211474080 A CN 202211474080A CN 116270758 A CN116270758 A CN 116270758A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bifidobacterium lactis
mice
formulation
group
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202211474080.5A
Other languages
English (en)
Inventor
张凤
邓雅丹
王静
王玉英
祁腾
李婉竹
李嘉敏
江远智
杜庆庆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chongqing Tianyou Dairy Co Ltd
Original Assignee
Chongqing Tianyou Dairy Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chongqing Tianyou Dairy Co Ltd filed Critical Chongqing Tianyou Dairy Co Ltd
Priority to CN202211474080.5A priority Critical patent/CN116270758A/zh
Publication of CN116270758A publication Critical patent/CN116270758A/zh
Priority to NL2035197A priority patent/NL2035197B1/en
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745Bifidobacteria
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04Anorexiants; Antiobesity agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06Antihyperlipidemics
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明属于微生物应用技术领域,具体涉及一种乳双歧杆菌TY‑S01在控制体重方面中的新应用。该乳双歧杆菌TY‑S01的保藏编号为CGMCCNo.21255。该乳双歧杆菌TY‑S01可以显著降低机体的体重和腹部脂肪,显著降低肝脏组织中的甘油三酯和胆固醇水平,显著促进肠道分泌短链脂肪酸(乙酸)以及显著调节机体肠道菌群的紊乱,并且无任何毒副作用,安全性高。

Description

乳双歧杆菌TY-S01在控制体重方面中的新应用
技术领域
本发明属于微生物应用技术领域,具体涉及一种乳双歧杆菌TY-S01在控制体重方面中的新应用。
背景技术
肥胖被定义为可能损害健康的异常或过量的身体脂肪堆积。据报道,世界上大约13%的成年人口受肥胖困扰。中国肥胖症工作组把成人超重定义为BMI为24.0kg/m2-27.9kg/m2,肥胖定义为BMI为大于等于28.0kg/m2。肥胖还易引发一系列代谢性疾病,如糖尿病、高血压、高血脂、脂肪肝等。另外,随着生活条件的不断改善,人们对健康的要求也逐渐严格,对自身体重的控制也越来越重视,因此各类减肥产品相继问世,但大多减肥产品安全性方面缺乏保障。
现有研究表明,肥胖与肠道菌群息息相关,肠道菌群的变化是引起肥胖的因素之一,健康人群和肥胖人群的肠道菌群具有显著差异。而且,现有人类和动物研究表明,益生菌可修复肠道菌群失调状态,从而达到控制宿主体重的效果;此外,多数肥胖人群伴有血脂升高的症状,而脂质(如胆固醇和甘油三酯)可在肝脏代谢,现有研究表明部分益生菌可通过调控肝脏脂质水平进而达到控制体重的效果;另外,益生菌的代谢产物同样具有控制体重的效果,比如短链脂肪酸,可通过激活相关受体抑制脂肪组织中的胰岛素信号,进而抑制脂肪堆积,从而控制宿主体重。所以,现目前也可以使用安全性高的益生菌代替现有安全性低的减肥产品进行体重控制。
因而,挖掘一种具有控制体重功效的益生菌具有重要意义。
发明内容
针对以上问题,本发明目的在于提供一种乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)TY-S01在控制体重方面中的新应用,该菌种可以显著降低肝脏胆固醇和甘油三酯水平以及促进肠道分泌短链脂肪酸和调节肠道菌群紊乱从而达到控制体重的目的。
为了达到上述目的,本发明可以采用以下技术方案:
本发明提供一种乳双歧杆菌TY-S01在控制体重方面中的新应用,该乳双歧杆菌TY-S01的保藏编号为CGMCC No.21255。
本发明有益效果包括:本发明的乳双歧杆菌TY-S01可以显著降低机体的体重和腹部脂肪,显著降低肝脏组织中的甘油三酯和胆固醇水平,显著促进肠道分泌短链脂肪酸(乙酸)以及显著调节机体肠道菌群的紊乱,并且无任何毒副作用,安全性高。
附图说明
图1为各组小鼠摄食量曲线图;
图2为各组小鼠饮水量曲线图;
图3为各组小鼠体重增加量;
图4为各组小鼠腹部脂肪重量;
图5为各组小鼠饲料利用率;
图6为各组小鼠肝脏中甘油三酯水平;
图7为各组小鼠肝脏中胆固醇水平;
图8为各组小鼠粪便中丁酸水平;
图9为各组小鼠肠道菌群alpha多样性的chao指数;
图10为各组小鼠肠道菌群alpha多样性shannon指数;
图11为各组小鼠肠道菌群beta多样性;
图12为各组小鼠肠道菌群物种差异分析;
图中,实验数据以平均值±标准误(mean±SEM)表示;标有“*”、“**”、“***”、“****”均代表两组之间存在统计学差异,分别表示p<0.05、p<0.01、p<0.001、p<0.0001。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明进行说明,但并不是本发明的内容仅局限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整,仍属于本发明的保护范围。
本文中使用的术语仅用于描述特定实施例,并且无意于限制本公开。除非在上下文中具有明显不同的含义,否则单数形式的表达包括复数形式的表达。如本文所使用的,应当理解,诸如“包括”、“具有”、“包含”之类的术语旨在指示特征、数字、操作、组件、零件、元件、材料或组合的存在。在说明书中公开了本发明的术语,并且不旨在排除可能存在或可以添加一个或多个其他特征、数字、操作、组件、部件、元件、材料或其组合的可能性。如在此使用的,根据情况,“/”可以被解释为“和”或“或”。
本发明实施例提供一种乳双歧杆菌TY-S01在控制体重方面中的新应用,该乳双歧杆菌TY-S01的菌种保藏编号为CGMCC No.21255。需要说明的是,该乳双歧杆菌TY-S01来源于重庆天友股份有限公司,该菌株记载于专利202111569073.9中,该菌株的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏编号为CGMCC No.21255,保藏日期为2020年11月27日。
需要说明的是,本发明中的乳双歧杆菌TY-S01不是特指乳双歧杆菌TY-S01活菌,也包括其灭活菌形态、裂解液形态、发酵液形态或者代谢物形态或者上述形态的混合形态,具体形态本领域技术人员可以根据具体需求进行选择。
在一些具体实施例中,上述应用包括:乳双歧杆菌TY-S01在制备降低体重的制剂中的应用。需要说明的是,在一些具体实施例中,使用了本发明中的乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的体重较没有使用乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的体重减少了约37%,即本发明中的乳双歧杆菌TY-S01在控制体重方面效果显著,且该乳双歧杆菌TY-S01没有影响小鼠模型的正常饮食,无任何毒副作用;还需要说明的是,乳双歧杆菌TY-S01可以通过减少腹部脂肪降低体重,在一些具体实施例中,使用本发明中的乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的腹部脂肪重量较没有使用乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的腹部脂肪重量减少了约21.8%。
在一些具体实施例中,上述应用包括以下一种或多种组合的应用:(a)乳双歧杆菌TY-S01在制备降低肝脏甘油三酯水平的制剂中的应用;(b)乳双歧杆菌TY-S01在制备降低肝脏胆固醇水平的制剂中的应用;(c)乳双歧杆菌TY-S01在制备促进肠道中短链脂肪酸分泌的制剂中应用;(d)乳双歧杆菌TY-S01在制备调节肠道菌群紊乱的制剂中的应用。
需要说明的是,上述应用中,使用本发明中的乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的肝脏甘油三酯水平较没有使用乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的肝脏甘油三酯水平下降了约32.3%,肝脏胆固醇水平下降了约10.2%;另外,乳双歧杆菌TY-S01可以显著调节高脂高胆固醇小鼠模型的肠道菌群紊乱情况。即本发明中的乳双歧杆菌TY-S01可以通过减少机体腹部脂肪、降低机体肝脏甘油三酯和胆固醇水平、促进机体肠道中短链脂肪酸的分泌以及调整机体肠道菌群紊乱从而达到控制体重的目的。
在一些具体实施例中,上述应用(d)中,短链脂肪酸可以为丁酸。需要说明的是,丁酸是短链脂肪酸中占比比较大的一种酸,其对脂肪组织的代谢和功能、能量和底物的代谢、系统性和特定组织的炎症、胰岛素敏感度和体重控制有积极影响,丁酸还能与肝脏和大脑等器官相互作用。在一些具体实施中,使用本发明中的乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的丁酸水平提较没有使用乳双歧杆菌TY-S01的高脂高胆固醇小鼠模型的丁酸水平提高1倍以上。
在一些具体实施例中,上述应用中,制剂包括食品制剂或药物制剂。需要说明的是,本发明中的制剂不特指药物制剂,即可以将本发明中的乳双歧杆菌TY-S01添加药用载体或可食用载体制备成药物制剂或可食用食物制剂,可以根据具体临床情况,具体选择药用或者食用。
在一些具体实施例中,上述应用中,制剂包括固体剂型、液体剂型、膏状剂型或乳状剂型。需要说明的是,可以将本发明中的乳双歧杆菌TY-S01添加固体剂型辅料制备成固体剂型,比如片剂和丸剂,固体剂型辅料为本领所已知的,一般包括稀释剂(如淀粉、糊精、蔗糖或甘糖等)、吸收剂(硫酸钙、磷酸氢钙或轻质氧化镁等)、粘合剂(聚维酮、糖浆或羟丙甲纤维素等)、润湿剂(水等)或崩解剂(干淀粉、羟甲基淀粉钠或交联聚维酮等)等;在一些具体实施例中,固体剂型可以是益生菌片、益生菌丸或益生菌颗粒;同上,还可以将本发明中的乳双歧杆菌TY-S01添加液体剂型辅料(比如增容剂、助悬剂、乳化剂或着色剂等)制备成液体剂型(比如益生菌饮料);还可以添加膏状剂型辅料制备成膏状剂型(比如益生菌果冻、益生菌奶盖或凝固型酸奶等);还可以添加乳状剂型辅料(比如果胶)制备成乳状剂型(比如搅拌型酸奶)。具体的剂型,本领域技术人员可以根据具体需求进行选择。
为了更好地理解本发明,下面结合具体示例进一步阐明本发明的内容,但本发明的内容不仅仅局限于下面的示例。
以下实施例中,乳双歧杆菌TY-S01来源于重庆天友股份有限公司,该菌株记载于专利202111569073.9中,该菌株的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏编号为CGMCC No.21255,保藏日期为2020年11月27日。
以下实施例中,MRS液体培养基来自北京陆桥技术股份有限公司。
实施例
一、菌株的培养及处理
取﹣80℃冻存甘油保藏的菌株,按2%的接种量接种到5mL的添加了0.05%的半胱氨酸的MRS液体培养基中,置于37℃厌氧培养72h,菌株活化3代;活化好的菌液在4℃下,10000r/min,离心10min,弃去上清液,收集菌体。菌体用生理盐水洗涤,再次离心,重复两次,得到菌泥,再用12%的脱脂乳溶液重悬,真空冷冻干燥冻干后得菌粉,于﹣20℃保存,用于动物实验灌胃;使用前用生理盐水梯度稀释,并利用倾注法对活菌数进行计数,计算菌落形成单位(CFU)。根据计数结果用生理盐水调整菌液浓度至109CFU/mL,得灌胃用菌悬液。
二、动物验证实验
(1)实验小鼠分组及干预
选取SPF级野生型雄性C57BL/6小鼠10只和SPF级雄性ApoE-/-小鼠20只,均为8周龄;饲养于室温25±2℃、相对湿度50±5%、12h光照/12h黑暗的标准化实验室中,适应性喂养一周后开始实验;适应期结束后,C57BL/6小鼠为空白组,ApoE-/-小鼠随机分为模型组和TY-S01组,每组10只。
实验周期为42天,期间空白组小鼠摄入普通饲料,模型组、TY-S01组小鼠摄入高脂高胆固醇饲料,具体配方如表1所示;另每日对所有组别小鼠进行灌胃操作,空白组和模型组小鼠灌胃生理盐水(200μL),TY-S01组灌胃上述菌悬液(200μL),每天灌胃时间保持一致。
表1高脂高胆固醇饲料配方表
成分 千卡
酪蛋白 200 800
L-光氨酸 3 12
玉米淀粉 212 848
麦芽糖糊精 71 284
蔗糖 113 452
纤维算BW200 50 0
大豆油 25 225
可可油 155 1395
混合矿物质S10021 10 0
碳酸氢钙 13 0
碳酸钙 5.5 0
柠檬酸钾 16.5 0
混合维生素V10001 10 40
酒石酸氢胆碱 2 0
胆固醇 11.25 0
蓝色染料 0.05 0
黄色染料 0.05 0
红色染料 0 0
总量 897.35 4056
(2)实验期间小鼠生长性能监测
记录上述(1)中小鼠实验周期42天内每天小鼠的体重、摄食量及饮水量,并以周为单位按照以下公式测定饲料利用率(%),
Figure SMS_1
实验期间小鼠摄食量及饮水量变化统计图具体如图1和图2所示,在整个实验期间,模型组和TY-S01组小鼠的摄食量及饮水量与正常组相比无显著变化,小鼠的摄食量变化及饮水量变化能在一定程度上反映其健康状况,所以图1和图2可以表明高脂高胆固醇饲料未影响小鼠的正常生活及生长,且表明乳双歧杆菌TY-S01无任何毒副作用。
各组小鼠的增重量如图3所示,实验期间空白组小鼠摄入普通饲料,模型组和TY-S01组小鼠则摄入高脂高胆固醇饲料,为期42天的实验干预期,空白组小鼠增重3.52g,模型组小鼠增重5.33g,模型组较之空白组显著增重更多(p<0.001),而TY-S01组小鼠增重3.36g,较之模型组增重显著降低(p<0.0001)。
(3)小鼠样本收集及处理
实验周期持续42天,之后牺牲小鼠,牺牲小鼠前一天小鼠禁食不禁水16h,并收集小鼠粪便于离心管,立即液氮冷冻后-80℃冰箱保存;取小鼠腹部脂肪称重并记录;解剖小鼠分离肝组织和肠组织,立即液氮冷冻后-80℃冰箱保存。
各组小鼠的腹部脂肪如图4所示,实验结束时空白组小鼠腹部脂肪为0.35g,模型组小鼠腹部脂肪为0.55g,模型组较之空白组显著增加57.1%(p<0.01),而TY-S01组小鼠腹部脂肪为0.43g,较之模型组降低21.8%。
为期6周的实验周期中,所有组别小鼠饲料利用率(饲料利用率反映小鼠摄食量和体重增加量之间的比值)逐渐降低,模型组小鼠饲料利用率始终高于空白组,且两组走势相当;TY-S01组小鼠饲料利用率第1周时与空白组接近,随着实验进行TY-S01组逐渐低于空白组,且差距逐渐拉大,如图5所示。
以上结果说明,乳双歧杆菌TY-S01具有控制体重的功效。
(4)小鼠肝脏脂质水平测定
取出上述(3)中冷藏的肝脏,切取并准确称量0.5g,加入5mL甲醇与氯仿混合液(体积比2:1),用组织匀浆机(60HZ,匀浆时间10s/次,间隙30s,连续5次,在4℃下进行)充分研磨,使肝脏组织匀浆化;完全磨碎后将研磨混合液转至刻度试管内,并用4.5mL甲醇与氯仿混合液(体积比2:1)冲洗研磨器,洗涤液一并转至刻度试管,将前后两次收集的匀浆混合液定容至10mL,置于水浴锅45℃温浴1小时,然后8000g,10min,4℃离心收集上清液,用全自动生化仪检测胆固醇和甘油三酯水平(脂类可分为脂肪和类脂两类,脂肪包括甘油三脂,类脂包括胆固醇;甘油三脂易在脂肪堆积,过高甚至有患脂肪肝的风险;肝脏是脂质代谢的中心,人体内70%-80%的胆固醇由肝脏合成;因此检测肝脏脂质水平具有重要意义)。
各组小鼠的肝脏甘油三酯水平如图6所示,空白组小鼠肝脏甘油三酯水平为5.56μmol/g,模型组为7.86μmol/g,模型组较之空白组肝脏甘油三酯水平显著升高(p<0.001),而TY-S01组小鼠肝脏甘油三脂水平为5.32μmol/g,较之模型组显著降低(p<0.001)。
各组小鼠的肝脏胆固醇水平如图7所示,空白组小鼠肝脏胆固醇水平为2.24μmol/g,模型组为8.64μmol/g,模型组较之空白组肝脏胆固醇水平显著升高(p<0.0001),而TY-S01组小鼠肝脏胆固醇水平为7.76μmol/g,较之模型组有所降低。
以上结果说明,乳双歧杆菌TY-S01具有调控肝脏脂质水平的功效。
(5)气相色谱法检测小鼠粪便中的短链脂肪酸含量
取50mg小鼠粪便样品加入500μL饱和NaCl溶液,振荡至无明显块状物(组织破碎仪,60HZ,匀浆时间10s/次,间隙30s,连续5次,在4℃下进行),加入40μL 10%硫酸酸化,振荡混匀,随后加入1000μL的乙醚萃取,振荡混匀,12 000rpm、15min、4℃条件下离心,取上清加入到装有0.25g的无水硫酸钠的EP管中,静置15min,同样条件离心,取上清加入气相小瓶,上机分析,气相色谱检测条件如下表2所示。
表2气相色谱检测条件表
Figure SMS_2
利用气相色谱法检测小鼠粪便中丁酸的含量,短链脂肪酸浓度通过外标法计算。短链脂肪酸是人体自身无法消化的碳水化合物经肠道细菌发酵后产生的最终代谢产物,包括乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸等,其中90%以上的短链脂肪酸为乙酸、丙酸和丁酸。短链脂肪酸有助于进行管理健康和体重管理,例如免疫调节和排毒。有研究表明,丁酸对脂肪组织的代谢和功能、能量和底物的代谢、系统性和特定组织的炎症、胰岛素敏感度和体重控制有积极影响,丁酸还能与肝脏和大脑等器官相互作用。
各组小鼠粪便丁酸水平如图8所示,空白组小鼠粪便丁酸水平为129.8μg/g,模型组为29.0μg/g,模型组较之空白组粪便丁酸水平显著降低(p<0.0001),而TY-S01组小鼠粪便丁酸水平为62.1μg/g,较之模型组显著升高(p<0.05)。
以上结果说明,乳双歧杆菌TY-S01具有促进肠道短链脂肪酸分泌的功效。
(6)小鼠粪便菌群多样性分析
取出上述(3)中冷藏的肠组织,分离出盲肠内容物;根据
Figure SMS_3
soil DNA试剂盒的说明书进行盲肠内容物微生物群落总DNA抽提,使用1%的琼脂糖凝胶电泳检测DNA的提取质量,NanoDrop 2000用于测定DNA浓度和纯度;使用338F(5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3’)和806R(5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’)对16S rRNA基因V3-V4可变区进行PCR扩增,扩增程序如下:95℃预变性3min,25个循环(95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸45s),然后72℃稳定延伸10min,最后在4℃进行保存(PCR仪:ABI/>
Figure SMS_4
9700型);PCR反应体系为:5×TransStart FastPfu缓冲液4μL,2.5mM dNTPs 2μL,上游引物(5μM)0.8μL,下游引物(5μM)0.8μL,TransStart FastPfu DNA聚合酶0.4μL,模板DNA10ng,ddH2O补足至20μL。
将同一样本的PCR产物混合后使用2%琼脂糖凝胶回收PCR产物,利用AxyPrep DNAGel Extraction Kit进行回收产物纯化,2%琼脂糖凝胶电泳检测,并用QuantusTMFluorometer对回收产物进行检测定量;使用NEXTflexTM Rapid DNA-Seq Kit进行建库:(1)接头链接;(2)使用磁珠筛选去除接头自连片段;(3)利用PCR扩增进行文库模板的富集;(4)磁珠回收PCR产物得到最终的文库;利用Illumina公司的NovaSeq PE250平台进行测序,测序委托上海美吉生物医药科技有限公司完成。
肠道微生物群可通过与宿主之间的一系列分子相互作用促进宿主胰岛素抗性,低度炎症和脂肪沉积,间接参与宿主体重调控。人体和动物模型的研究,均已证明肠道微生物群因肥胖而改变。本发明实施例对小鼠肠道菌群进行多样性分析,进一步探究乳双歧杆菌TY-S01对肠道菌群的调节作用。
alpha多样性分析是微生物多样性分析中一个重要的组成部分,主要用于研究某一样本的菌群多样性;Chao指数是alpha多样性指数中的一种,其用chao1算法估计样品中所含OTU数目,反映群落丰富度。
各组小鼠的Chao指数如图9所示,空白组小鼠Chao指数为516.0,模型组为114.5,模型组较之空白组粪便丁酸水平显著降低(p<0.0001),而TY-S01组小鼠Chao指数为189.5,较之模型组有所升高。shannon指数则是反映样本各物种均一性的一种alpha多样性指数,反映群落多样性。
各组小鼠的Shannon指数如图10所示,空白组小鼠Shannon指数为3.68,模型组为2.32,模型组较之空白组粪便丁酸水平显著降低(p<0.0001),而TY-S01组小鼠Chao指数为2.85,较之模型组显著升高(p<0.05)。
以上结果说明,体重增重导致了小鼠肠道菌群丰富度和多样性的降低,而乳双歧杆菌TY-S01一定程度上恢复了肠道菌群的丰富度和多样性。
beta多样性分析是微生物多样性分析中一个重要的组成部分,主要用于研究不同样品间的微生物多样性。该分析将样品间的物种丰度分布差异程度通过统计学中的距离进行量化分析,使用统计算法计算两两样品间距离,获得距离矩阵,并将其进行可视化统计分析。
本发明实施中采用Bray-Curtis算法,结果如图11所示,图中不同形状的数据点代表着各组小鼠的肠道菌群样本,数据点越靠近代表两个样本的肠道菌群越相似;其中,空白组和模型组相隔甚远、完全没有重叠部分,说明较之空白组,模型组小鼠肠道菌群组成发生很大程度上的改变,而TY-S01组较之模型组同样相隔一定距离,说明乳双歧杆菌TY-S01对小鼠肠道菌群具有一定程度的调节作用。
物种差异分析利用不同的组间差异检验方法,根据得到的群落丰度数据,运用统计学方法对不同组微生物群落之间的物种进行假设检验,评估物种丰度差异的显著性水平,获得组间显著性差异物种,结果如图12所示,较之空白组,模型组属水平上Allobaculum、Coriobacteriaceae_UCG-002、Parvibacter、Escherichia-Shigella物种丰度显著上升(p<0.05),而乳双歧杆菌TY-S01显著抑制了这种上升趋势(p<0.05);Corynebacterium、Staphylococcus、Jeotgalicoccus、Lachnospiraceae_UCG-006、unclassified_c__Bacilli、unclassified_k__norank_d__Bacteria物种丰度显著降低(p<0.05),而乳双歧杆菌TY-S01显著抑制了这种下降趋势(p<0.05)。
以上结果说明,乳双歧杆菌TY-S01可以调节因体重增加导致的肠道菌群紊乱。
综上所述,乳双歧杆菌TY-S01可以同时减少腹部脂肪、降低肝脏中甘油三酯和胆固醇水平、促进肠道中短链脂肪酸分泌以及调整肠道菌群紊乱,实现协同降低体重。
最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围。

Claims (8)

1.乳双歧杆菌(Bifidobacteriumlactis)TY-S01在控制体重方面中的新应用,乳双歧杆菌TY-S01的保藏编号为CGMCCNo.21255。
2.根据权利要求1所述的新应用,其特征在于,应用包括:乳双歧杆菌TY-S01在制备降低体重的制剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的新应用,其特征在于,应用包括:乳双歧杆菌TY-S01在制备减少腹部脂肪的制剂中的应用。
4.根据权利要求1所述的新应用,其特征在于,应用包括以下一种或多种组合的应用:(a)乳双歧杆菌TY-S01在制备降低肝脏甘油三酯水平的制剂中的应用;(b)乳双歧杆菌TY-S01在制备降低肝脏胆固醇水平的制剂中的应用;(c)乳双歧杆菌TY-S01在制备促进肠道中短链脂肪酸分泌的制剂中应用;(d)乳双歧杆菌TY-S01在制备调节肠道菌群紊乱的制剂中的应用。
5.根据权利要求4所述的新应用,其特征在于,应用(c)中,短链脂肪酸为丁酸。
6.根据权利要求1至5中任一权利要求所述的新应用,其特征在于,制剂包括食品制剂或药物制剂。
7.根据权利要求1至5中任一权利要求所述的新应用,其特征在于,制剂包括固体剂型、液体剂型、膏状剂型或乳状剂型。
8.根据权利要求6中所述的新应用,其特征在于,制剂包括固体剂型、液体剂型、膏状剂型或乳状剂型。
CN202211474080.5A 2022-11-22 2022-11-22 乳双歧杆菌ty-s01在控制体重方面中的新应用 Pending CN116270758A (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211474080.5A CN116270758A (zh) 2022-11-22 2022-11-22 乳双歧杆菌ty-s01在控制体重方面中的新应用
NL2035197A NL2035197B1 (en) 2022-11-22 2023-06-28 Use of bifidobacterium lactis ty-s01 in human body weight control

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211474080.5A CN116270758A (zh) 2022-11-22 2022-11-22 乳双歧杆菌ty-s01在控制体重方面中的新应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116270758A true CN116270758A (zh) 2023-06-23

Family

ID=86815534

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211474080.5A Pending CN116270758A (zh) 2022-11-22 2022-11-22 乳双歧杆菌ty-s01在控制体重方面中的新应用

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN116270758A (zh)
NL (1) NL2035197B1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116590205A (zh) * 2023-07-14 2023-08-15 中国农业大学 一种动物双歧杆菌亚种组合菌剂在减肥制剂制备中的应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113142303A (zh) * 2021-01-18 2021-07-23 重庆市天友乳业股份有限公司 一种具有预防肥胖功效的酸奶及其制备方法
CN113142301B (zh) * 2021-01-18 2023-08-08 重庆市天友乳业股份有限公司 一种可提高机体免疫力的乳制品及其制备方法
CN114568703A (zh) * 2022-02-24 2022-06-03 重庆市天友乳业股份有限公司 一株乳双歧杆菌的新用途

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116590205A (zh) * 2023-07-14 2023-08-15 中国农业大学 一种动物双歧杆菌亚种组合菌剂在减肥制剂制备中的应用
CN116590205B (zh) * 2023-07-14 2023-10-03 中国农业大学 一种动物双歧杆菌亚种组合菌剂在减肥制剂制备中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
NL2035197A (en) 2023-07-27
NL2035197B1 (en) 2024-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240000871A1 (en) Lactobacillus gasseri capable of alleviating and treating hyperuricemia
CN112574917B (zh) 一株缓解高尿酸血症的鼠李糖乳杆菌ccfm1131
TWI673057B (zh) 新穎副乾酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei)株
TW200944215A (en) Lactobacillus isolates having anti-inflammatory activities and uses of the same
CN114181864B (zh) 一种鼠李糖乳杆菌hf01及其应用
CN114507621A (zh) 一株植物乳杆菌及在降尿酸、减重、抗炎症方面的应用
CN109593678B (zh) 长双歧杆菌yh295及其在制备降低腹型肥胖风险产品中的应用
CN111164201B (zh) 用于改善代谢症候群的副干酪乳杆菌gks6、其用途、医药组合物及可食用组合物
CN115992059B (zh) 一株产阿魏酸酯酶的约氏乳杆菌及其缓解溃疡性结肠炎的用途
WO2018112739A1 (zh) 一种假小链状双歧杆菌及其培养方法和应用
CN113797232B (zh) 具有缓解胰岛素抵抗功能的组合物及其应用
CN116270758A (zh) 乳双歧杆菌ty-s01在控制体重方面中的新应用
CN115887485A (zh) 茯苓多糖对肥胖机体肠道微生物结构及其代谢产物的调节应用
CN110810629A (zh) 益生菌制剂及其应用
CN117866798A (zh) 发酵乳杆菌glf-217及其在溃疡性结肠炎、高脂血症和降低器官损伤中的应用
CN110684682B (zh) 缓解pfoa毒害作用的多功能干酪乳杆菌ccfm1052、其发酵食品及应用
CN113249256B (zh) 一株缓解雌激素相关代谢紊乱及肥胖的植物乳杆菌及应用
CN112236154A (zh) 一种组合物及其应用
CN113215029A (zh) 一种约氏乳杆菌及其应用
CN113444669B (zh) 一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum F3-2及其应用
NL2035207B1 (en) Application of lactobacillus paracasei in preparation for reducing serum cholesterol levels
CN118028190B (zh) 发酵粘液乳杆菌bas313及其在制备降血糖产品中的应用
CN116004442A (zh) 一种发酵乳杆菌及其在改善高脂血症制剂中的应用
CN115786216B (zh) 一种酸鱼乳杆菌zjuf yj5及其应用
CN117562189B (zh) 维生素k在制备调控肉鸡肠道菌群饲料中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination