CN116218002A - 一种葡聚糖改性pdms、制备方法及微流控芯片 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及微流控芯片技术领域,具体提供一种葡聚糖改性PDMS、制备方法及微流控芯片。本申请的葡聚糖改性PDMS由表层和底层组成,底层为交联PDMS,表层为交联葡聚糖,通过表面接枝环氧基团的PDMS与葡聚糖反应后再进行交联反应获得。本申请的葡聚糖改性PDMS具有较好的亲水性和亲水稳定性,而且表层的交联葡聚糖具有多孔性质,对于微球、蛋白质具有较好的分离效果,在微流控芯片中可替代现有的PDMS材料。
Description
技术领域
本申请涉及微流控芯片技术领域,具体地,涉及一种葡聚糖改性PDMS、制备方法及微流控芯片。
背景技术
聚二甲基硅氧烷(PDMS)透明度高、生物相容性好、柔韧性佳、较高的气体渗透率、易加工等特点,已成为微流控芯片最主要的主体材料之一。但PDMS也存在表面疏水的缺点,而微流控芯片通常用于含有生物活性的物质的分析和处理,一般采用水作为溶剂,因此存在润湿不好的问题,影响了分离效果。现有技术中已经提出了多种方法对PDMS表面进行亲水处理。这些方法主要是解决PDMS表面疏水的问题,形成了亲水性的表面,但缺乏额外的性能。
发明内容
葡聚糖具有较好的生物相容性。由葡聚糖交联制成的凝胶由于具有多孔结构,常用于进行生化分离,比如柱层析。
为了解决现有技术中PDMS表面亲水处理性能单一等问题,本申请发明人经过大量分析、试验和研究,采用交联的葡聚糖对PDMS进行表面改性获得葡聚糖改性PDMS,作为微流控芯片的主体材料具有更多的性能。为此,本申请提供一种葡聚糖改性PDMS、制备方法及微流控芯片。
本申请采用如下的技术方案:
一种葡聚糖改性PDMS,由表层和底层组成,所述底层为交联PDMS,所述表层为交联葡聚糖。
优选的,所述底层的厚度为30μm-2mm。
优选的,所述表层的厚度为1-300μm。
一种上述任一技术方案所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,包括以下步骤,
S1、将葡聚糖溶解于第一溶剂中,获得葡聚糖溶液;
S2、将环氧基团表面修饰的交联PDMS浸泡入步骤S1所述的葡聚糖溶液中,加入碱性催化剂,反应12-120小时,清洗,干燥,获得第一改性PDMS;
S3、将步骤S2所述第一改性PDMS浸泡于第二溶剂中,加入交联剂进行交联反应,清洗,干燥,获得所述葡聚糖改性PDMS。
优选的,步骤S1中所述葡聚糖溶液的浓度为0.5-10wt%。
优选的,步骤S2中所述碱性催化剂选自4-二甲氨基吡啶、三乙胺、N-甲基二乙胺、N-正丙基二乙胺、N-异丙基二乙胺和N,N-二甲基苯胺中的一种或几种。
优选的,步骤S1中所述第一溶剂和步骤S3中所述第二溶剂独自的选自水、DMSO、DMF和DMAc中的一种或几种。
优选的,步骤S3中所述交联剂选自环氧氯丙烷、多丙烯酸酯化合物和多巯基化合物中的一种或几种。
优选的,步骤S3中所述第一改性PDMS和所述交联剂的重量比为1:0.0005-0.1。
一种微流控芯片,采用上述任一技术方案所述的葡聚糖改性PDMS或者上述任一技术方案所述的制备方法获得的葡聚糖改性PDMS作为主体材料或者主体材料中的一种。
综上所述,本申请具有以下有益效果:
1、本申请的葡聚糖改性PDMS为双层结构,表层为交联葡聚糖,底层为交联PDMS,结合了交联葡聚糖和PDMS两种材料的特点,在微流控芯片中应用,既可以使得PDMS表面由疏水变为亲水,又可以发挥出交联葡聚糖多孔结构、大比表面积的特点,可以将抗体固定在其中,增大捕捉荧光微球的机率,提高检测的灵敏度。
2、本申请的葡聚糖改性PDMS,交联葡聚糖与交联PDMS之间通过化学接枝方法结合,结合力强、稳定性高。
3、本申请通过葡聚糖与环氧基团表面修饰的交联PDMS反应,将葡聚糖大分子接枝在交联PDMS的表面,再对葡聚糖进行交联,获得葡聚糖凝胶,再经过干燥,即获得葡聚糖改性PDMS,制备方法简单。
4、本申请的葡聚糖改性PDMS应用于微流控芯片中,交联的葡聚糖与检测流体接触,可能由于交联葡聚糖多孔结构、大比表面积的特点,发现相比未交联的葡聚糖,交联葡聚糖所显示的亲水性更好,而且具有亲水性更为持久。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明的技术方案进行详细描述。
在整个说明书中,除非另有特别说明,本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此,除非另有定义,本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾,本说明书优先。
本申请第一方面提出一种葡聚糖改性PDMS,由表层和底层组成,所述底层为交联PDMS,所述表层为交联葡聚糖。
本申请中,表层和底层是一个相对概念,不代表从方位上表层一定在上面、底层一定在下面。本申请中,当葡聚糖改性PDMS与介质(比如液体或固体)接触时,表层与介质直接接触,而底层不与介质直接接触,或者从另一方面讲,表层位于介质与底层之间。
本申请优选的技术方案中,底层的厚度为30μm-2mm。更进一步的,底层的厚度为50μm-1.5mm。本申请中,底层的厚度可根据需要进行设置,是本领域的常规操作。
本申请优选的技术方案中,表层的厚度为1-300μm。更进一步的,表层的厚度为5-150μm。再进一步的,表层的厚度为5-100μm。
再进一步优选的,表层的厚度不超过底层的厚度,比如表层的厚度可以是底层厚度的1/10、1/20、1/30、1/40或1/50。
本申请第二方面提出一种上述任一技术方案所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,包括以下步骤,
S1、将葡聚糖溶解于第一溶剂中,获得葡聚糖溶液;
S2、将环氧基团表面修饰的交联PDMS浸泡入步骤S1所述的葡聚糖溶液中,加入碱性催化剂,反应12-120小时,清洗,干燥,获得第一改性PDMS;
S3、将步骤S2所述第一改性PDMS浸泡于第二溶剂中,加入交联剂进行交联反应,清洗,干燥,获得上述葡聚糖改性PDMS。
本申请优选的技术方案中,步骤S1中葡聚糖溶液的浓度为0.5-10wt%。进一步优选的,葡聚糖溶液的浓度为1-5g/L。
环氧基团修饰的交联PDMS已经有诸多的报道。一般是先通过等离子体或氧化等方法在交联PDMS表面引入羟基、羧基等极性基团,再与环氧基团硅烷偶联剂(比如KH-560、KH-186等)发生反应,即在交联PDMS表面接枝上环氧基团。
本申请优选的技术方案中,步骤S2中碱性催化剂选自4-二甲氨基吡啶、三乙胺、N-甲基二乙胺、N-正丙基二乙胺、N-异丙基二乙胺和N,N-二甲基苯胺中的一种或几种。碱性催化剂可以催化葡聚糖结构中葡萄糖单元上的羟基与交联PDMS表面的环氧基团发生开环反应,使得葡聚糖接枝到交联PDMS的表面。
本申请中,葡聚糖的平均相对分子量无特别的限制,可以是1000-100000,或者进一步的,平均相对分子量为5000-50000。葡聚糖的分子量太低,形成的表层交联葡聚糖的强度会偏低,葡聚糖的分子量太大,与交联PDMS表面的反应活性会差一些。另外,本申请中,葡聚糖可以是未改性的葡聚糖,或者是碳碳不饱和双键改性的葡聚糖,比如(甲基)丙烯酸酯改性葡聚糖、乙烯基改性葡聚糖。(甲基)丙烯酸酯改性葡聚糖和乙烯基改性葡聚糖可以由对应的含有环氧基团的改性剂与葡聚糖的羟基反应获得。比如,(甲基)丙烯酸酯改性葡聚糖可以采用甲基丙烯酸缩水甘油醚与葡聚糖在碱性物质催化下反应获得。乙烯基改性葡聚糖可以采用烯丙基缩水甘油醚或烯丙基聚乙二醇缩水甘油醚与葡聚糖在碱性物质催化下反应获得。
本申请优选的技术方案中,步骤S1中第一溶剂和步骤S3中所述第二溶剂独自的选自水、DMSO、DMF和DMAc中的一种或几种。当第一溶剂为水时,环氧基团表面修饰的交联PDMS的亲水性不足,会影响步骤S2中葡聚糖溶液对环氧基团表面修饰的交联PDMS的润湿性,进而影响环氧基团与葡聚糖的反应活性,因此可以在葡聚糖溶液中加入少量的表面活性剂,表面活性剂无特别的限制,比如十二烷基苯磺酸钠、十二烷基磺酸钠、十二烷基羧酸钠、十二烷基醇聚氧乙烯醚硫酸钠等,用量可以为葡聚糖重量的0.5-1%,再比如氟表面活性剂,用量可以为葡聚糖重量的0.01-0.05%,再比如有机硅表面活性剂,用量可以为葡聚糖重量的0.1-0.5%。
步骤S3中,当交联剂为水溶性时,可以采用水作为溶剂,当交联剂为非水溶性或者在水中的溶解度较低、在有机溶剂中的溶解度较高时,可以采用有机溶剂,比如DMSO、DMF等。
本申请中,步骤S2中的清洗可以采用去离子水,洗去未反应的葡聚糖,而不会对交联PDMS有影响。去离子水洗完可以继续用无水乙醇清洗,以洗去水,利于干燥。步骤S3中的清洗可以采用无水乙醇、异丙醇等较为环保的有机溶剂。
本申请优选的技术方案中,步骤S3中交联剂选自环氧氯丙烷、多丙烯酸酯化合物和多巯基化合物中的一种或几种。本申请步骤S1中的葡聚糖为未改性时,可以采用环氧氯丙烷作为交联剂;当葡聚糖为(甲基)丙烯酸酯改性葡聚糖,可以直接加入光引发剂,并在紫外线光照下进行交联,也可以加入交联剂多丙烯酸酯化合物,然后在光引发剂和紫外光照射下进行交联;当葡聚糖为乙烯基改性葡聚糖,可以加入交联剂多巯基化合物,并在光引发剂和紫外光照射下进行交联。
本申请中,多丙烯酸酯化合物是指1个化合物分子结构中含有两个或两个以上(甲基)丙烯酸酯结构,比如二甲基丙烯酸1,6-己二醇酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯、二甲基丙烯酸1,4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸聚乙二醇酯、三羟甲基丙烷三丙烯酸酯、乙氧基(3)化三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、乙氧基(9)化三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、乙氧基(15)化三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、季戊四醇四甲基丙烯酸酯等。
本申请中,多巯基化合物是指1个化合物分子结构中含有两个或两个以上巯基基团,比如二巯基丙醇、1,3-二巯基丙烷、1,4-二巯基丁烷、1,6-二巯基己烷、1,8-二巯基辛烷、巯丙基硅油、巯丙基聚醚硅油、双(2-巯基乙基)醚、双(2-乙氧基乙基)醚、二(4-巯基苯基)醚、端巯基聚醚等。
本申请优选的技术方案中,步骤S3中第一改性PDMS和交联剂的重量比为1:0.0005-0.1。更进一步的,第一改性PDMS和交联剂的重量比为1:0.001-0.005。第一改性PDMS和交联剂的重量比不同,会导致葡聚糖的交联度不同。第一改性PDMS和交联剂的重量比相同,所用的交联剂不同,葡聚糖的交联度也不同。
本申请第三方面提出一种微流控芯片,采用上述任一技术方案所述的葡聚糖改性PDMS或者上述任一技术方案所述的制备方法获得的葡聚糖改性PDMS作为主体材料或者主体材料中的一种。
本申请的葡聚糖改性PDMS作为主体材料应用于微流控芯片时,可直接在成型好的交联PDMS表面修饰交联的葡聚糖,液体流经的路径由PDMS变为交联葡聚糖,由于交联葡聚糖的亲水性,不会存在PDMS的疏水现象。
下面将结合实施例、对比例及实验数据对本申请的葡聚糖改性PDMS、制备方法及微流控芯片进行详细说明。
如无特别指明,以下各实施例和对比例的份数都为重量份数。
制备例1
将5份平均相对分子量30000的葡聚糖和和2份4-二甲氨基吡啶溶解于100份DMSO中,加入甲基丙烯酸缩水甘油酯(甲基丙烯酸缩水甘油酯与葡聚糖中呋喃葡聚糖单元的摩尔比为1:6),室温下搅拌反应50小时;反应溶液滴加到800份无水乙醇中进行沉淀,收集固体,干燥,获得丙烯酸酯改性葡聚糖。
制备例2
制备例1中,将甲基丙烯酸缩水甘油酯与葡聚糖中呋喃葡聚糖单元的摩尔比由1:6调整为1:4,其余步骤保持不变。
制备例3
将4份平均相对分子量10000的葡聚糖和和2份4-二甲氨基吡啶溶解于100份DMSO中,加入烯丙基缩水甘油醚(烯丙基缩水甘油醚与葡聚糖中呋喃葡聚糖单元的摩尔比为1:5),室温下搅拌反应48小时;反应溶液滴加到800份无水乙醇中进行沉淀,收集固体,干燥,获得乙烯基改性葡聚糖。
制备例4
将4份平均相对分子量10000的葡聚糖和和2份4-二甲氨基吡啶溶解于100份DMSO中,加入缩水甘油醚基烯丙基聚氧乙烯醚-200(200代表聚氧乙烯相对分子量)(水甘油醚基烯丙基聚氧乙烯醚与葡聚糖中呋喃葡聚糖单元的摩尔比为1:3),室温下搅拌反应48小时;反应溶液滴加到800份无水乙醇中进行沉淀,收集固体,干燥,获得乙烯基改性葡聚糖。
制备例5
制备例4中,水甘油醚基烯丙基聚氧乙烯醚与葡聚糖中呋喃葡聚糖单元的摩尔比由1:3调整为1:6,其余步骤保持不变。
实施例1
将4份制备例1的丙烯酸酯改性葡聚糖、1份三乙胺和0.8份十二烷基苯磺酸钠加入94.2份
水中,配制成葡聚糖溶液。
在容积为1000mL广口瓶中加入100mL 1mol/L NaOH水溶液和400mL 30wt%H2O2,将1片平均厚度200μm的PDMS微流控芯片基片放入广口瓶中,固定在液面以上,用装有三通的橡胶塞塞好瓶口,保持三通打开2小时,之后关闭三通,将广口瓶放置在避光处3d。取出,将基片与盖片封接,通道中通入浓度为5wt%的KH-560的乙醇溶液,室温下反应4小时,用去离子水冲洗通道2次,再通入上述葡聚糖溶液,反应48小时,清洗2次,无水乙醇清洗1次,50℃干燥,获得第一改性PDMS。
将100份上述第一改性PDMS浸泡入300份DMSO中,加入0.15份二甲基丙烯酸酯1,6-己二醇酯和0.005份安息香二甲醚,在主波长365nm、强度10mW/cm2紫外光下照射30s,无水乙醇清洗2次,50℃干燥,获得葡聚糖改性PDMS。
实施例2
实施例1中,制备例1的丙烯酸酯改性葡聚糖替换为等浓度的制备例2的丙烯酸酯改性葡聚糖,其余步骤保持不变。
实施例3
将5份制备例3的乙烯基改性葡聚糖、1份4-二甲氨基吡啶和0.8份十二烷基苯磺酸钠加入93.2份水中,配制成葡聚糖溶液。
在容积为1000mL广口瓶中加入100mL 1mol/LNaOH水溶液和400mL 30wt%H2O2,将1片平均厚度100μm的PDMS微流控芯片基片放入广口瓶中,固定在液面以上,用装有三通的橡胶塞塞好瓶口,保持三通打开2小时,之后关闭三通,将广口瓶放置在避光处3d。取出,将基片与盖片封接,通道中通入浓度为3wt%的KH-560的乙醇溶液,室温下反应5小时,用去离子水冲洗通道2次,再通入上述葡聚糖溶液,反应54小时,清洗2次,无水乙醇清洗1次,50℃干燥,获得第一改性PDMS。
将100份上述第一改性PDMS浸泡入250份水中,加入0.5份双(2-乙氧基乙基)醚和0.005份光引发剂LAP,在主波长405nm、强度10mW/cm2紫外光下照射30s,无水乙醇清洗2次,50℃干燥,获得葡聚糖改性PDMS。
实施例4
实施例3中,将制备例3的乙烯基改性葡聚糖替换为等浓度的制备例4的乙烯基改性葡聚糖,其余步骤保持不变。
实施例5
实施例3中,将制备例3的乙烯基改性葡聚糖替换为等浓度的制备例5的乙烯基改性葡聚糖,其余步骤保持不变。
实施例6
将4份制备例2的丙烯酸酯改性葡聚糖、1份4-二甲氨基吡啶和0.8份十二烷基硫酸钠加入94.2份水中,配制成葡聚糖溶液。
在容积为1000mL广口瓶中加入100mL 1mol/LNaOH水溶液和400mL 30wt%H2O2,将1片平均厚度300μm的PDMS微流控芯片基片放入广口瓶中,固定在液面以上,用装有三通的橡胶塞塞好瓶口,保持三通打开2小时,之后关闭三通,将广口瓶放置在避光处3d。取出,将基片与盖片封接,通道中通入浓度为5wt%的KH-560的乙醇溶液,室温下反应4小时,用去离子水冲洗通道2次,再通入上述葡聚糖溶液,反应48小时,清洗2次,无水乙醇清洗1次,50℃干燥,获得第一改性PDMS。
将100份上述第一改性PDMS浸泡入300份水中,加入0.1份二甲基丙烯酸聚乙二醇酯-400(400代表聚乙二醇的分子量)和0.005份安息香二甲醚,在主波长365nm、强度10mW/cm2紫外光下照射30s,无水乙醇清洗2次,50℃干燥,获得葡聚糖改性PDMS。
实施例7
实施例6中,二甲基丙烯酸聚乙二醇酯-400的重量由0.1份调整为0.2份,其余步骤保持不变。
实施例8
实施例6中,二甲基丙烯酸聚乙二醇酯-400的重量由0.1份调整为0.3份,其余步骤保持不变。
实施例9
实施例6中,二甲基丙烯酸聚乙二醇酯-400的重量由0.1份调整为0.4份,其余步骤保持不变。
实施例10
实施例6中,二甲基丙烯酸聚乙二醇酯-400的重量由0.1份调整为0.5份,其余步骤保持不变。
对比例1
未改性PDMS微流控芯片基片。
对比例2
实施例8中第一改性PDMS。
对比例3
实施例8中氧化后未与KH-560反应的PDMS。
对比例4
实施例8中,二甲基丙烯酸聚乙二醇酯-400的重量由0.3份调整为0.03份,其余步骤保持不变。
对比例5
实施例8中,不加入二甲基丙烯酸聚乙二醇酯-400,其余步骤保持不变。
性能测试
亲水性测试:采用水滴角测试待测样品的水滴角,记为初始水滴角。沿着通道方向,取前面、中间、后面三个部位测试。三个部位的水滴角取平均值。
亲水稳定性测试。将待测样品在50℃烘箱中分别烘烤7天和1个月,取出,按照上述亲水性测试方法进行测试,记为烘烤水滴角。水滴角保持率=烘烤后水滴角/初始水滴角×100%。水滴角保持率越低,亲水稳定性越好。
结果如表1所示。
表1
因此,由表1的数据可知,本申请的葡聚糖改性PDMS具有较好的亲水性和持久的亲水性,在微流控芯片中可以替代现有的PDMS材料。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释,其并不是对本申请的限制,本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改,但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。
Claims (10)
1.一种葡聚糖改性PDMS,其特征在于:由表层和底层组成,所述底层为交联PDMS,所述表层为交联葡聚糖。
2.根据权利要求1所述的葡聚糖改性PDMS,其特征在于:所述底层的厚度为30μm-2mm。
3.根据权利要求1所述的葡聚糖改性PDMS,其特征在于:所述表层的厚度为1-300μm。
4.一种权利要求1-3任一项所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,
S1、将葡聚糖溶解于第一溶剂中,获得葡聚糖溶液;
S2、将环氧基团表面修饰的交联PDMS浸泡入步骤S1所述的葡聚糖溶液中,加入碱性催化剂,反应12-120小时,清洗,干燥,获得第一改性PDMS;
S3、将步骤S2所述第一改性PDMS浸泡于第二溶剂中,加入交联剂进行交联反应,清洗,干燥,获得所述葡聚糖改性PDMS。
5.根据权利要求4所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,其特征在于:步骤S1中所述葡聚糖溶液的浓度为0.5-10wt%。
6.根据权利要求4所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,其特征在于:步骤S2中所述碱性催化剂选自4-二甲氨基吡啶、三乙胺、N-甲基二乙胺、N-正丙基二乙胺、N-异丙基二乙胺和N,N-二甲基苯胺中的一种或几种。
7.根据权利要求4所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,其特征在于:步骤S1中所述第一溶剂和步骤S3中所述第二溶剂独自的选自水、DMSO、DMF和DMAc中的一种或几种。
8.根据权利要求4所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,其特征在于:步骤S3中所述交联剂选自环氧氯丙烷、多丙烯酸酯化合物和多巯基化合物中的一种或几种。
9.根据权利要求4所述的葡聚糖改性PDMS的制备方法,其特征在于:步骤S3中所述第一改性PDMS和所述交联剂的重量比为1:0.0005-0.1。
10.一种微流控芯片,其特征在于:采用权利要求1-3任一项所述的葡聚糖改性PDMS或者权利要求4-9任一项所述的制备方法获得的葡聚糖改性PDMS作为主体材料或者主体材料中的一种。
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