CN116217650A - 一种c端为水杨醛酯前体的多肽制备方法及其在蛋白合成中的应用 - Google Patents

一种c端为水杨醛酯前体的多肽制备方法及其在蛋白合成中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法及其在蛋白合成中的应用。本发明通过下列步骤将C端为酰肼基团的多肽转化为C端为水杨醛酯前体的多肽：将所述的C端为酰肼的多肽与NaNO2在低温、酸性条件下反应，以便将所述多肽的酰肼基团转化为酰基叠氮得到第一反应混合物；向所得第一反应混合物中添加水杨醛衍生物(3‑(2，6‑二噻烷基)‑4‑羟基苯甲酸)并调节pH至中性，以便将所述多肽C端的酰基叠氮基团转化为水杨醛酯前体。通过本发明制备的多肽C端水杨醛酯前体，可用于多肽连接，助力蛋白质的化学合成。

Description

一种C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法及其在蛋白合成中 的应用
技术领域
本发明涉及多肽/蛋白质合成制备技术领域，具体涉及一种C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法及其在蛋白合成中的应用。
技术背景
在过去的几十年里，蛋白质的化学合成已经取得了巨大的进步，逐渐突破蛋白质重组表达系统的限制。其中，多肽连接提供了将固相多肽合成(SPPS)中获得的短肽片段组装成长肽和蛋白质的有效策略。迄今为止，已有多种多肽连接方法被开发和应用，包括但不限于天然化学连接及其衍生方法，α-酮酸-羟胺连接，Ser/Thr连接(STL)和Cys/Pen连接(CPL)。其中，STL及CPL是通过多肽C端水杨醛(SAL)酯与另一多肽N端的Ser/Thr、Cys/Pen进行化学选择性连接形成稳定的缩醛中间体，经过进一步的酸解形成天然肽键。STL及CPL为多肽连接提供了更多的位点选择，近年来已被应用于多种蛋白质和环肽天然产物的合成，有效补充了多肽连接的技术库。
实现STL或CPL的一个关键步骤是在多肽C端构建具有反应活性的SAL酯，迄今，研究者们已开发了多种基于SPPS的多肽SAL酯的合成方法。基于Fmoc-SPPS的多肽SAL酯的合成方法主要有以下三种：方法一是基于N-肽基苯并咪唑烷酮(Nbz)进行的树脂上的酚解反应；方法二利用从2-Cl-三甲基树脂上切割获得的侧链保护的多肽与水杨醛二甲基缩醛直接耦合，该方法仅适用于C端为Gly或(伪)Pro残基的多肽；方法三利用侧链保护的多肽“n”与含有缩氨基脲掩蔽醛的氨基酸“1”进行“n+1”反应。而基于Boc-SPPS多肽SAL酯的合成方法有以下两种：方法一在2-乙烯基苯酚修饰的AM树脂上通过Boc-SPPS合成多肽，在侧链脱保护后，通过臭氧分解从树脂上切割下C端为SAL酯的多肽；方法二将缩氨基脲掩蔽的水杨醛固定在AM树脂上，作为Boc-SPPS的连接臂，并可通过丙酮酸从树脂上释放SAL酯。这些方法的开发为多肽SAL酯的合成提供了多种可供选择的途径，然而，这些策略都是基于SPPS合成的多肽进行的，操作较为繁琐且限制了多肽片段的尺寸，进一步限制了STL/CPL的应用范围。研究者们认为，将STL/CPL应用于蛋白质化学半合成中对于最大限度地提高蛋白质合成效率具有重要意义，但在表达蛋白C端构建SAL酯仍是一个挑战。因此，亟需一种更加高效、通用的方法用于构建多肽及表达蛋白C端SAL酯，以促进STL/CPL的更广泛应用，助力蛋白质的化学合成。
参考文献：
1.Tan,Y.；Wu,H.；Wei,T.；Li,X.,Chemical Protein Synthesis:Advances,Challenges,and Outlooks.J.Am.Chem.Soc.2020,142,20288-20298.
2.Liu,H.；Li,X.,Serine/Threonine Ligation:Origin,Mechanistic Aspects,and Applications.Acc.Chem.Res.2018,51(7),1643-1655.
3.Li,X.；Lam,H.Y.；Zhang,Y.；Chun,C.,Salicylaldehyde Ester-InducedChemoselective Peptide Ligations:Enabling Generation of Natural PeptidicLinkages at the Serine/Threonine Sites.Org.Lett.2010,12(8),1724-1727.
4.Zhang,Y.；Xu,C.；Lam,H.Y.；Lee,C.L.；Li,X.,Protein chemical synthesisby serine and threonine ligation.Proc.Natl.Acad.Sci.2013,110(17),6657-6662.
5.Lee,C.L.；Liu,H.；Wong,C.T.；Chow,H.Y.；Li,X.,Enabling N-to-C Ser/ThrLigation for Convergent Protein Synthesis via Combining Chemical LigationApproaches.J.Am.Chem.Soc.2016,138(33),10477-84.
6.Wong,C.T.；Lam,H.Y.；Song,T.；Chen,G.；Li,X.,Synthesis of constrainedhead-to-tail cyclic tetrapeptides by an imine-induced ring-closing/contraction strategy.Angew.Chem.Int.Ed.2013,52(39),10212-10215.
7.Ma,W.；Wu,H.；Liu,S.；Wei,T.；Li,X.D.；Liu,H.；Li,X.,Chemical Synthesisof Proteins with Base-Labile Posttranslational Modifications Enabled by aBoc-SPPS Based General Strategy Towards Peptide C-Terminal SalicylaldehydeEsters.Angew.Chem.Int.Ed.2023,62(1),e202214053.
8.Huang,D.L.；Li,Y.；Liang,J.；Yu,L.；Xue,M.；Cao,X.X.；Xiao,B.；Tian,C.L.；Liu,L.；Zheng,J.S.,The New Salicylaldehyde S,S-Propanedithioacetal EsterEnables N-to-C Sequential Native Chemical Ligation and Ser/Thr Ligation forChemical Protein Synthesis.J.Am.Chem.Soc.2020,142(19),8790-8799.
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有方法的缺点与不足，提供一种C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法。该方法基于多肽/蛋白酰肼，所获取的产物可用于STL/CPL，可有效地提升蛋白质的化学合成效率。
本发明的另一目的在于提供上述C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法在蛋白合成中的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，是将C端为酰肼基团的多肽转化为C端为水杨醛酯前体的多肽，包括如下步骤：
S1、将C端为酰肼的多肽溶于酸性缓冲液中，加入NaNO2，反应，得到第一反应混合物；
S2、在步骤S1所得第一反应混合物中添加3-(2，6-二噻烷基)-4-羟基苯甲酸(简称SAL(–COOH)PDT)并调节至中性条件，反应，得到C端为水杨醛酯前体的多肽。
进一步地，步骤S1中所述的酸性缓冲液的配方如下：5～7mol/L盐酸胍，0.1～0.3mol/L磷酸盐，pH 3.0～4.0；优选为6mol/L盐酸胍，0.2mol/L磷酸盐，pH 3.0。
进一步地，步骤S1中所述的酸性缓冲液的用量按C端为酰肼的多肽的浓度为1～5mol/L计；优选按5mol/L计。
进一步地，步骤S1中所述的NaNO2的用量为C端为酰肼的多肽的5～10倍当量；优选为5倍当量。
进一步地，步骤S1中所述的反应在冰盐浴条件下进行，温度为-10～-20℃，时间为10～15分钟。
进一步地，步骤S2中所述的3-(2，6-二噻烷基)-4-羟基苯甲酸的用量按其在体系中的最终浓度为0.08～0.12mol/L计；优选按0.1mol/L计。
进一步地，步骤S2中所述的3-(2，6-二噻烷基)-4-羟基苯甲酸在使用前先以1.5mol/L的浓度预先溶解于2mol/L NaOH水溶液中。
进一步地，步骤S2中所述的中性条件是指pH为6.5～7.0。
进一步地，步骤S2中所述的反应的时间为3～5分钟。
本发明中所述的C端为酰肼的多肽可以通过固相多肽合成方法获取，也可利用重组表达获取多肽后，通过进一步肼解反应获取。
上述C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法在蛋白合成中的应用，包括如下步骤：
(1)按照所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法得到C端为水杨醛酯前体的多肽；
(2)将步骤(1)所得C端为水杨醛酯前体的多肽置于N-氯代丁二酰亚胺/硝酸银反应体系中活化，得到醛基激活的C端为水杨醛酯前体的多肽；
(3)以步骤(2)所得醛基激活的C端为水杨醛酯前体的多肽为原料进行STL或CPL连接反应，得到目的多肽/蛋白。
进一步地，步骤(2)的具体操作为：配制含有4mmol/L N-氯代丁二酰亚胺和4.5mmol/LAgNO3的80％乙腈水溶液，冰浴预冷；将步骤(1)所得C端为水杨醛酯前体的多肽溶解于上述溶液中，在冰浴中持续搅拌，反应3～5min。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
本发明通过NaNO2氧化多肽C端酰肼基团，形成酰基叠氮，利用SAL(–COOH)PDT的酚羟基进行亲核取代反应，实现了将C端为酰肼基团的多肽转化为C端为水杨醛酯前体的多肽。反应时间短，操作简便，所获得的产物可用于STL/CPL。
本发明基于氨基酸侧链无保护的多肽出发，克服了原有技术的限制。C端为酰肼基团的多肽可通过SPPS获取，也可通过生物表达蛋白进一步肼解获取，将大大扩充STL/CPL的底物范围，助力蛋白质的化学合成。
附图说明
图1为本发明方法的反应流程示意图。
图2为MPS-SAL(–COOH)PDT的合成过程的HPLC及LC–MS示意图(1为多肽酰肼原料，2为产物)。
图3为MPL-SAL(–COOH)PDT的合成过程的HPLC及LC–MS示意图(1为多肽酰肼原料，2为产物)。
图4为MPV-SAL(–COOH)PDT的合成过程的HPLC及LC–MS示意图(1为多肽酰肼原料，2为产物)。
图5为MPY-SAL(–COOH)PDT的合成过程的HPLC及LC–MS示意图(1为多肽酰肼原料，2为产物)。
图6为MPA-SAL(–COOH)PDT的合成过程的HPLC及LC–MS示意图(1为多肽酰肼原料，2为产物)。
图7为MPA-SAL(–COOH)PDT的激活过程的HPLC及LC–MS示意图(1为MPA-SAL(–COOH)PDT，2为激活产物)。
图8为MPA-SAL(–COOH)与多肽SFIGGIR连接过程的HPLC及LC–MS示意图(1为MPA-SAL(–COOH)，1*为水解副产物，2为SFIGGIR，3为连接后的缩醛中间体产物，4为最终连接产物)。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述。然而，除了在下面实施例中描述和给出的特定实施选择之外，还可以使用多样的替代方法，应当进一步理解本发明不限于这里描述的特定方法、多肽/蛋白序列。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中使用的SAL(–COOH)PDT结构式如下：
Figure BDA0004153764610000041
下述实施例中反相高效液相色谱(RP-HPLC)使用的仪器为安捷伦1260，色谱柱为Phenomenex C18柱，流动相为水和乙腈(含0.1％三氟乙酸)。
下述实施例中用到的试剂名称及缩写：
ACN：乙腈
NCS：N-氯代丁二酰亚胺
Py：吡啶
AcOH：乙酸
下述实施例1–5中以C端为酰肼基团的模型肽Fmoc–RPGKVTEQGX–NHNH2作为底物，X表示其氨基酸序列中C末端的氨基酸，分别为丝氨酸(Ser)，亮氨酸(Leu)，缬氨酸(V al)，酪氨酸(Tyr)，丙氨酸(Ala)。模型肽均通过SPPS获取，分别命名为MPX(MPS，MPL，MPV，MPY，MPA)；其转化产物(即C端转化为水杨醛酯前体)相应命名为MPX-SAL(–COOH)PDT。
下述实施例5展示了通过本发明制备的C端为水杨醛酯前体的多肽在STL中的应用。其中，N端为Ser的多肽SFIGGIR通过SPPS获取。
实施例1：MPS-SAL(–COOH)PDT的合成
将酰肼多肽MPS溶于酸性缓冲液(6M盐酸胍,0.2M磷酸盐，pH 3.0)，至MPS在体系中的浓度为5mM。将反应体系置于冰盐浴(-15℃)中持续搅拌，加入5倍当量的NaNO2水溶液(0.5M)，低温下反应10分钟。
氧化结束后，加入0.1M SAL(–COOH)PDT(以1.5M的浓度预先溶解于2M NaOH水溶液中)，撤去冰盐浴，取NaOH溶液(2M)小心调节反应液的pH至中性(pH6.8)，室温下反应5分钟。使用HPLC监测反应，质谱确认为目标产物，结果如图2所示。
实施例2：MPL-SAL(–COOH)PDT的合成
参照实施例1的方法，结果如图3所示。
实施例3：MPV-SAL(–COOH)PDT的合成
参照实施例1的方法，结果如图4所示。
实施例4：MPY-SAL(–COOH)PDT的合成
参照实施例1的方法，结果如图5所示。
实施例5：MPA-SAL(–COOH)PDT的合成及其与多肽SFIGGIR的连接
(1)MPA-SAL(–COOH)PDT的合成
将酰肼多肽MPS溶于酸性缓冲液(6M盐酸胍,0.2M磷酸盐，pH 3.0)，至MPS在体系中的浓度为5mM。将反应体系置于冰盐浴(-15℃)中持续搅拌，加入5倍当量的NaNO2水溶液(0.5M)，低温下反应10分钟。
氧化结束后，加入0.1M SAL(–COOH)PDT(以1.5M的浓度预先溶解于2M NaOH水溶液中)，撤去冰盐浴，取NaOH溶液(2M)小心调节反应液的pH至中性(pH6.8)，室温下反应5分钟。使用HPLC监测反应，质谱确认为目标产物，结果如图6所示。使用半制备柱分离出目标产物，经冷冻干燥后以41％的产率获得MPA-SAL(–COOH)PDT。
(2)MPA-SAL(–COOH)PDT醛基的激活
配制含有4mM NCS、4.5mM AgNO3的80％ ACN/H2O溶液，在冰浴中(0℃)预冷。将MPA-SAL(–COOH)PDT溶解于上述溶液中，至其在体系中的浓度为1mM。在冰浴中(0℃)持续搅拌，反应5分钟。使用HPLC监测反应，质谱确认为目标产物，结果如图7所示。使用半制备柱分离出目标产物，经冷冻干燥后以76％的产率获得激活后的产物MPA-SAL(–COOH)。
(3)MPA-SAL(–COOH)与SFIGGIR的连接
将多肽MPA-SAL(–COOH)与N端为Ser的多肽片段SFIGGIR溶解于Py/AcOH(1/14，v/v)溶液中，MPA-SAL(–COOH)在体系中的浓度为20mM，SFIGGIR的浓度为40mM。在37℃下震荡反应3小时，使用HPLC监测反应，质谱确认为连接产物。使用半制备柱分离出目标产物，经冷冻干燥后以54％的产率获得连接后的缩醛中间体产物。将连接后的产物溶解于TFA/H2O(95/5，v/v)中，在30℃下反应15分钟以脱除缩醛基团，形成天然肽键。反应结束后，使用冷冻的乙醚萃取两次，通过离心收集并在室温下吹干乙醚，获得最终产物。使用HPLC监测反应，并通过质谱确认最终连接产物，结果如图8所示。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受所述的实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1、将C端为酰肼的多肽溶于酸性缓冲液中，加入NaNO2，反应，得到第一反应混合物；
S2、在步骤S1所得第一反应混合物中添加3-(2，6-二噻烷基)-4-羟基苯甲酸并调节至中性条件，反应，得到C端为水杨醛酯前体的多肽。
2.根据权利要求1所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：
步骤S1中所述的酸性缓冲液的配方如下：5～7mol/L盐酸胍，0.1～0.3mol/L磷酸盐，pH3.0～4.0。
3.根据权利要求1所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：
步骤S1中所述的酸性缓冲液的用量按C端为酰肼的多肽的浓度为1～5mol/L计；
步骤S1中所述的NaNO2的用量为C端为酰肼的多肽的5～10倍当量。
4.根据权利要求1所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：
步骤S1中所述的酸性缓冲液的配方如下：6mol/L盐酸胍，0.2mol/L磷酸盐，pH 3.0；
步骤S1中所述的酸性缓冲液的用量按C端为酰肼的多肽的浓度为5mol/L计；
步骤S1中所述的NaNO2的用量为C端为酰肼的多肽的5倍当量。
5.根据权利要求1所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：
步骤S1中所述的反应在冰盐浴条件下进行，温度为-10～-20℃，时间为10～15分钟。
6.根据权利要求1-5任一项所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：
步骤S2中所述的3-(2，6-二噻烷基)-4-羟基苯甲酸的用量按其在体系中的最终浓度为0.08～0.12mol/L计。
7.根据权利要求1-5任一项所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：
步骤S2中所述的3-(2，6-二噻烷基)-4-羟基苯甲酸在使用前先以1.5mol/L的浓度预先溶解于2mol/L NaOH水溶液中。
8.根据权利要求1-5任一项所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法，其特征在于：
步骤S2中所述的中性条件是指pH为6.5～7.0；
步骤S2中所述的反应的时间为3～5分钟。
9.权利要求1-8任一项中所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法在蛋白合成中的应用，其特征在于：包括如下步骤：
(1)按照所述的C端为水杨醛酯前体的多肽制备方法得到C端为水杨醛酯前体的多肽；
(2)将步骤(1)所得C端为水杨醛酯前体的多肽置于N-氯代丁二酰亚胺/硝酸银反应体系中活化，得到醛基激活的C端为水杨醛酯前体的多肽；
(3)以步骤(2)所得醛基激活的C端为水杨醛酯前体的多肽为原料进行STL或CPL连接反应，得到目的多肽/蛋白。
10.根据权利要求9所述的的应用，其特征在于：
步骤(2)的具体操作为：配制含有4mmol/L N-氯代丁二酰亚胺和4.5mmol/L AgNO3的80％乙腈水溶液，冰浴预冷；将步骤(1)所得C端为水杨醛酯前体的多肽溶解于上述溶液中，在冰浴中持续搅拌，反应3～5min。
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