CN116173054A

CN116173054A - 京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗肾损伤药物中的应用

Info

Publication number: CN116173054A
Application number: CN202310465759.6A
Authority: CN
Inventors: 梁爱华; 孟晶; 田婧卓
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date: 2023-04-27
Filing date: 2023-04-27
Publication date: 2023-05-30

Abstract

本发明属于生物医药领域，公开了一种京尼平苷酸在制备降尿酸、治疗高尿酸肾损伤药物中的应用，其中京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗高尿酸性肾损伤药物中作为唯一活性成分。所述的京尼平苷酸能显著降低血尿酸水平，同时能够通过降低肾脏中的尿酸沉积从而改善高尿酸性肾损伤。作为抗高尿酸血症和改善高尿酸性肾损伤的药物，京尼平苷酸显示出了重大的应用前景，市场应用广泛。

Description

京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗肾损伤药物中的应用

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体来说，涉及一种京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗肾损伤药物中的应用。

背景技术

高尿酸血症是指嘌呤代谢异常导致尿酸生成增多和/或尿酸排泄减少引起血尿酸水平异常升高的一种代谢综合征。体内尿酸浓度过高时可析出尿酸盐结晶，沉积在肾脏、关节等组织，导致尿酸性肾病或痛风。高尿酸血症还是慢性肾病、糖尿病、高血压及代谢综合征等疾病的独立危险因素，可增加死亡风险。因此，治疗高尿酸血症具有重大的临床需求。目前临床上较为常用的药物为抑制尿酸合成的黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌醇和非布司他、促进尿酸排泄的丙磺舒和苯溴马隆。尽管上述药物的疗效显著，但是存在着不同程度的不良反应，别嘌醇在部分患者可引起严重的甚至致死性的皮肤损害；非布司他存在不可预知的心血管风险，可增加患者的死亡风险；苯溴马隆会可导致严重的肝毒性。此外，高尿酸血症可以导致肾损伤，但是临床目前应用的药物非但没有肾保护作用，有的反而会加剧肾脏损伤程度，像别嘌醇。鉴于以上原因，临床上对治疗高尿酸血症且具有肾保护作用的药物的开发有着较高的需求。

京尼平苷酸是来源于植物的活性成分，在多种植物中存在，如杜仲、栀子等，来源广泛，具有丰富的资源。该化合物具有抗氧化、抗衰老、降血压等药理作用，有良好的药用用途的前景。中国专利CN110538189A公开了一种治疗肾纤维化的杜仲提取物组合物及其应用，该杜仲提取物包括桃叶珊瑚苷、京尼平苷和京尼平苷酸的混合提取物、槲皮素、绿原酸组分，经过提取、分离、提纯等步骤，制成杜仲提取物的组合物，可以进一步制剂，制备方法简单高效，制成的杜仲提取物组合物具有较好的治疗肾纤维化的效果。中国专利CN114671920A公开了一种酰胺类五乙酰京尼平苷衍生物及其制备方法、应用，该发明提供的酰胺类五乙酰京尼平苷衍生物通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性而产生降尿酸和肾脏保护作用，具有成药潜质。但是研究表明黄嘌呤氧化酶抑制剂随着剂量的提高，在降低血尿酸的同时导致了次黄嘌呤和黄嘌呤的排泄总量增加，进而加重了肾脏的工作负担，因此，该类衍生物在剂量较高的情况下可能存在诱发肾损伤的风险。

目前现有技术中并未发现京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗高尿酸性肾损害药物中的相关实验研究和应用。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种京尼平苷酸的医药新用途，具体提供了京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗高尿酸肾损伤药物中的应用，该药物还包括医学上可接受的载体。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供了京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗高尿酸性肾损伤药物中的应用，所述京尼平苷酸的给药剂量为25-75 mg/kg/天。

优选地，所述京尼平苷酸的分子式为C₁₆H₂₂O₁₀，化学结构式如式I所示：

式I 。

优选地，所述的药物包括京尼平苷酸和医学上可接受的载体，其中京尼平苷酸为唯一活性成分。

优选地，所述的载体包括稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂和表面活性剂中的至少一种。

优选地，所述降尿酸的药物包括治疗高尿酸血症的药物。

优选地，所述药物的形式为固体、液体或气体。

进一步优选地，所述固体的形式为粉末剂、片剂、颗粒剂、丸剂、硬胶囊、软胶囊、乳膏剂、软膏剂、硬膏剂、凝胶剂、糊剂、散剂或贴剂；所述液体的形式为溶液剂、混悬剂、注射剂、糖浆剂、搽剂、乳剂、酊剂或酏剂；所述气体的形式为气雾剂或喷雾剂。

优选地，所述药物的给药方式为口服、舌下、口腔粘膜、静脉内、肌肉内、腹腔内、皮下、经皮、鼻腔、直肠途径中的至少一种。

本发明还提供了一种降尿酸药物，包含上述的京尼平苷酸和医学上可接受的载体，其中京尼平苷酸作为唯一活性成分。

本发明还提供了一种治疗高尿酸性肾损伤的药物，包含上述的京尼平苷酸和医学上可接受的载体，其中京尼平苷酸作为唯一活性成分。

本发明的有益效果为：

本发明提供了京尼平苷酸的新应用，具体提供了京尼平苷酸在制备降尿酸、治疗高尿酸肾损伤药物中的应用，所述的京尼平苷酸能显著降低血尿酸水平，表现出显著的降尿酸作用；同时，所述的京尼平苷酸对高尿酸血症引起的肾损伤有明显的改善作用，相比黄嘌呤氧化酶抑制剂，在肾保护方面效果更优；京尼平苷酸作为抗高尿酸血症和改善高尿酸性肾损伤的药物，显示出了重大的应用前景，市场应用广泛。

附图说明

图1为给予京尼平苷酸后对大鼠肾脏组织中尿酸盐沉积影响的六胺银染色图，其中，A为对照组；B为模型组；C为京尼平苷25mg/kg组；D为京尼平苷衍生物75mg/kg；E为京尼平苷酸12.5mg/kg组；F为京尼平苷酸25mg/kg组；G为京尼平苷酸75mg/kg组；H为京尼平苷酸150mg/kg组。

图2为大鼠肾脏组织病理学观察图，其中，A为对照组；B为模型组；C为京尼平苷25mg/kg组；D为京尼平苷衍生物75mg/kg；E为京尼平苷酸12.5mg/kg组；F为京尼平苷酸25mg/kg组；G为京尼平苷酸75mg/kg组；H为京尼平苷酸150mg/kg组。

具体实施方式

以下实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。对所公开的实施例的下述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例中，而是可以应用于符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的更宽的范围。虽然在本发明的实施或测试中可以使用与本发明中所述相似或等价的任何方法和材料，本文在此处列举优选的方法和材料。

除非另外定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同意义。

实施例1 京尼平苷酸对高尿酸血症大鼠血尿酸水平的影响

1. 材料与方法

（1）动物分组与给药方式

雄性SPF级SD大鼠 56 只，体重为200-220g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号为SCXK（京）2016-0006。动物饲养于屏障环境动物实验室，自动控温（温度20-26℃），相对湿度为40-70%，全新风。采取人工光照，12小时明暗周期。动物适应性饲养1天后开始分组实验。动物使用标准大鼠颗粒饲料喂养，由北京科澳协力饲料有限公司提供，饮用纯净水。

将大鼠随机分为 7 组，每组8只，分别为对照组、模型组、京尼平苷25mg/kg组、京尼平苷酸12.5mg/kg组、京尼平苷酸25mg/kg组、京尼平苷酸75mg/kg组和京尼平苷酸150mg/kg组。

（2）腺嘌呤联合乙胺丁醇诱导大鼠高尿酸血症模型的建立

腺嘌呤购自Sigma-Aldrich（USA），用0.5%CMC-Na将腺嘌呤配制成浓度为20mg/mL的混悬液，现用现配，给药体积为5mL/kg，给药剂量为100mg/kg。盐酸乙胺丁醇片购自成都锦华药业有限责任公司，用0.5%CMC-Na将盐酸乙胺丁醇片配制成浓度为50mg/ml的混悬液，现用现配，给药体积为5mL/kg，给药剂量为250mg/kg。

从第1天起，除对照组外，其余各组分别灌胃给予造模药腺嘌呤100mg/kg和盐酸乙胺丁醇250mg/kg，两者均每天给予一次，共持续7天，制备高尿酸血症大鼠模型。对照组在相对时间内灌胃给予等量0.5%CMC-Na。

造模后，各组按照京尼平苷25mg/kg、京尼平苷酸12.5mg/kg、京尼平苷酸25mg/kg、京尼平苷酸75mg/kg和京尼平苷酸150mg/kg的给药剂量进行灌胃，对照组和模型组灌胃给予等体积的0.5%CMC-Na。每天上午造模1h后给药1次，持续7天。

（3）样本处理及统计方法

观察和检测指标：末次给药后禁食16 h，各组大鼠腹主动脉取血，静置后3500rpm离心15分钟，分离收集血清，利用全自动生化仪检测血清中尿酸的含量。

统计方法：数据以均数±标准差（

）表示，采用one-way ANOVA进行分析。各给药组分别与模型组进行比较。

2. 结果

结果表1显示，与对照组相比，模型组血清中尿酸水平显著升高（p<0.05），说明造模成功。给予25-75 mg/kg剂量的京尼平苷酸对高尿酸血症的动物的血尿酸水平均有显著的降低作用，而京尼平苷25mg/kg组、京尼平苷酸12.5mg/kg剂量组和京尼平苷酸150mg/kg剂量组仅表现出降低血清中的尿酸的趋势，未见显著性。结果提示，在特定剂量范围内（25-75 mg/kg），本发明中的活性成分京尼平苷酸具有极显著的降低血尿酸的作用。

表1 不同剂量京尼平苷酸对高尿酸血症大鼠血尿酸水平的影响

注：与对照组比较，

表示P<0.05；与模型组比较，^##表示P<0.01。

实施例2 京尼平苷酸对高尿酸血症大鼠肾脏损伤的改善作用

1. 材料和方法

模型的建立及给药同实施例1，实验分组较实施例1中额外增设一组为京尼平苷衍生物75 mg/kg组（CAS：49776-64-9），该组造模及给药方法均同实施例1。

（1）肾功能生化指标检测：取血和收集血清的方法同实施例1，采用全自动生化仪，利用肌氨酸氧化酶法检测血肌酐（SCr）的含量，利用脲酶法和动力法检测尿素氮（BUN）的含量。

（2）肾脏组织的病理检查：麻醉大鼠，解剖，将肾组织取出。用10%的中性福尔马林将肾组织固定。固定充分后，按照常规进行取材、梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、制备3μm石蜡切片。分别用HE（苏木素&伊红）染色和六胺银染色，光学显微镜检查肾组织病变以及肾脏组织中尿酸盐沉积情况。

2. 结果

（1）京尼平苷酸对大鼠肾脏组织中尿酸盐沉积的影响

由图1可知，对照组未观察到尿酸盐结晶沉积的现象，模型组在肾脏组织中观察到大量的尿酸盐结晶沉积。给予25-75mg/kg剂量的京尼平苷酸后沉积的尿酸盐结晶明显减少。京尼平苷组、京尼平苷酸12.5mg/kg剂量组和京尼平苷酸150mg/kg剂量组在肾脏组织中观察到一定量的尿酸盐结晶沉淀。结果提示特定剂量范围内，京尼平苷酸可明显减少高尿酸血症大鼠肾脏组织的尿酸盐结晶沉积。此外，京尼平苷衍生物75mg/kg组的肾组织中沉积的尿酸盐结晶明显减少。

（2）京尼平苷酸对大鼠肾脏损伤相关生化指标的影响

表2结果表明，与对照组相比，模型组中血清的BUN和SCr水平均显著升高（p< 0.001），提示高尿酸血症大鼠表现出一定的肾损伤，造模成功。给予25-75 mg/kg剂量的京尼平苷酸后，较模型组的血清BUN水平显著降低（p<0.01），SCr水平也显著降低（p<0.05），提示特定剂量的京尼平苷酸对高尿酸血症造成的肾损伤具有显著改善作用。给予75mg/kg的京尼平苷衍生物后，血清BUN和Scr水平较模型组均未见明显差异。

表2 各组对高尿酸性肾损伤大鼠血液BUN和SCr水平的影响

注：与对照组比较，

表示P<0.001；与模型组比较，^#表示P<0.05，^##表示P<0.01，^###表示P<0.001。

（3）京尼平苷酸对大鼠肾脏组织病理学的影响

由图2可知，对照组的肾间质、肾小管和肾小球等组织结构均基本正常，细胞排列整齐，未见肾小管扩张、变性或坏死等病理改变。

模型组的肾脏组织中肾小球形态基本正常，但可见肾小管管壁变薄、严重扩张、上皮细胞脱落及嗜酸性变性等病理改变，并可见明显的炎性细胞浸润。

京尼平苷酸25mg/kg剂量组的肾脏组织中肾小球形态基本正常，与模型组相比肾小管扩张现象有所减轻，可见少量的炎性细胞浸润，以及少量肾小管扩张和管壁变薄的现象，局部可见少量上皮细胞脱落等病理改变。

京尼平苷酸75 mg/kg剂量组的肾脏组织中肾小球形态基本正常，肾小管扩张现象明显减轻，仅偶见肾小管上皮细胞脱落和炎性细胞浸润。

而京尼平苷组（25 mg/kg）、京尼平苷衍生物组（75mg/kg）、京尼平苷酸12.5 mg/kg剂量组、京尼平苷酸150 mg/kg剂量组的肾脏中仍然可见部分肾小管明显扩张、管壁变薄以及上皮细胞脱落等病理改变，京尼平苷衍生物75mg/kg组、京尼平苷酸12.5mg/kg和150mg/kg组的肾间质可见较明显的炎性细胞浸润，其中京尼平苷衍生物75mg/kg组的肾小管扩张较为明显。

结合六胺银染色结果、生化结果和病理学结果提示，本发明中的活性成分京尼平苷酸在特定剂量范围内（25-75 mg/kg）可显著降低肾脏中的尿酸沉积，对高尿酸血症合并的肾脏损伤具有显著的保护作用。

以上是结合具体实施例对本发明进一步的描述，但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

Claims

1. 京尼平苷酸在制备降尿酸和/或治疗高尿酸性肾损伤药物中的应用，其特征在于，所述京尼平苷酸的剂量为25-75 mg/kg/天。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述京尼平苷酸的分子式为C₁₆H₂₂O₁₀，化学结构式如式I所示：

式I 。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物包括京尼平苷酸和医学上可接受的载体，其中，所述的京尼平苷酸为唯一活性成分。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的载体包括稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂和表面活性剂中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述降尿酸的药物包括治疗高尿酸血症的药物。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的形式为固体、液体或气体。

7.一种降尿酸药物，其特征在于，包含权利要求1所述的京尼平苷酸和医学上可接受的载体，其中，所述的京尼平苷酸为唯一活性成分。

8.根据权利要求7所述的降尿酸药物，其特征在于，所述的载体包括稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂和表面活性剂中的至少一种。

9.一种治疗高尿酸性肾损伤的药物，其特征在于，包含权利要求1所述的京尼平苷酸和医学上可接受的载体，其中，所述的京尼平苷酸为唯一活性成分。

10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于，所述的载体包括稀释剂、粘合剂、吸收剂、崩解剂、分散剂、湿润剂、助溶剂、缓冲剂和表面活性剂中的至少一种。