CN116143925A - 一种cd45重组抗体 - Google Patents
一种cd45重组抗体 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116143925A CN116143925A CN202310232585.9A CN202310232585A CN116143925A CN 116143925 A CN116143925 A CN 116143925A CN 202310232585 A CN202310232585 A CN 202310232585A CN 116143925 A CN116143925 A CN 116143925A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- variable region
- antibody
- chain variable
- seq
- recombinant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/289—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD45
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明提供一种CD45重组抗体，属于重组抗体技术领域，所述抗体重链可变区的氨基酸序列如SEQ_1所示，所示轻链可变区的氨基酸序列如SEQ_2所示，重链可变区的编码基因的核苷酸序列如SEQ_3所示，轻链可变区的编码基因的核苷酸序列如SEQ_4所示，通过使轻重链分别连接于表达载体后再共转染宿主细胞，得到的重组抗体；本发明可以产生更加稳定的抗体，克服传统抗体因非特异性（不可靠性）与批次差异性所产生的问题。
Description
技术领域
本发明涉及重组抗体技术领域，具体涉及一种CD45重组抗体。
背景技术
抗体是生物科学领域的主力，但是它的可靠性一再让研究人员处于窘境。如今，科研者最常遇到的问题主要有：购买的用于检测蛋白X的抗体优先与蛋白Y结合，甚至可能完全不与X结合；可重复性差，用新抗体重复以前的实验，发现结果无法重复。一个好项目因此搁浅，抗体的不可靠性问题非常让人警醒。同一个抗体在几次平行实验里得出的结果不同，将会产生灾难性的结果，而导致这一结果却可能与抗体的生产过程有关。特异性不足、敏感度和批次差异性等导致了错误的科研发现和大量的科研精力浪费；抗体的不可靠性造成了癌症、代谢、老化、免疫学和细胞信号转导以及任何研究复杂的生物分子领域的巨大损失；因抗体而造成的、在时间和资源方面的浪费非常巨大。
传统的抗体制备是通过免疫动物获得单抗和多抗，其中多克隆抗体是通过收集经过目标抗原刺激动物获得免疫后的血液而制成的，只要这只动物还活着，就能够一直提供多克隆抗体；单克隆抗体是通过宿主动物接受目标蛋白免疫，然后提取出能识别并对该抗原发生响应的B细胞，使其与骨髓瘤细胞发生融合，从而成为可永久培养的细胞，从而不断产生目的抗体。
相比之下，重组抗体不同于传统的单克隆抗体，因为它们的制备只需要前期免疫动物甚至不需要动物参与。可通过检测产生该抗体的基因序列，通过对动物的免疫细胞进行测序、或自己设定序列，检测产生的蛋白是否符合目标蛋白；再将该基因插入到合适的细胞株中，从而产生抗体。由于抗体是确定的，即使原始细胞株死亡或发生突变，也能通过基因插入，产生需要的细胞株。
越来越多的科学家认为，单克隆抗体和多克隆抗体最终会被“结构更明确”的重组抗体完全取代。许多蛋白质不能被现有的试剂识别，这是因为使用了结构不明确的多克隆抗体，而使用一些基因可识别或存储的试剂能够克服这一点。尽管多克隆抗体具有广泛可用性，是目前研发最便宜的抗体，适用于制备一些研究较少的抗体。但随着目标蛋白结构和功能的不断明确，以及临床转化的需求，重组克隆抗体也将大有可为。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种CD45重组抗体，通过将所需抗体的目的基因插入细胞株中，从而产生更加稳定的抗体，克服传统抗体因不可靠性与批次差异性所产生的问题。
为解决上述技术问题，本发明提供一种CD45重组抗体，包括抗体重链可变区和抗体轻链可变区，其特征在于：所述抗体重链可变区的氨基酸序列如SEQ_1所示，所示轻链可变区的氨基酸序列如SEQ_2所示。
QVKLQQSGAELARPGGSVKLSCKASGYSFTAYWMQWLRQSPGQGLEWIGVIYPGDGDARYTQKFQGKATLTADKSSSTAYMQLSSLASEDSAVYYCARWFHHDYVMDYWGQGTTVTVSS -SEQ_1；
DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHTDGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGLYFCSQNTHVPPTFGGGSRLEIK -SEQ_2。
进一步的，该重链可变区的编码基因的核苷酸序列如SEQ_3所示。
caggtgaagctgcagcagtctggggctgagctggcaagacctg
ggggttcagtgaagttgtcctgcaaggcttctggctacagctttactgcctactggatgc
agtggttaagacagagccctggacagggtctggagtggattggagttatttatcctggag
atggtgatgctaggtatactcagaagttccagggcaaggccacattgactgcagataaat
cctccagcacagcctacatgcaactcagcagcttggcatctgaggactctgcggtctatt
actgtgcaagatggttccaccatgactatgttatggactactggggccaagggaccacgg
tcaccgtctcctcaa -SEQ_3。
进一步的，该引物的核苷酸序列如下：
33331 20201016 IgVMu VH1BACK(FR1)-IgVMu-上游：
AGGTSMARCTGCAGSAGTCWGG -SEQ_5；
33336 20201016 IgVMu HindIII/MH(γ)-CONST-IgVMu下游：
GGAAGCTTAYCTCCACACACAGGRRCCAGTGGATAGAC -SEQ_6。
进一步的，该轻链可变区的编码基因的核苷酸序列如SEQ_4所示。
gatgttgtgatgacccaaactccactctccctgcctgtcagtcttggagatcaagcctccatctcctgcagatctagtcagagccttgtacacactgatggaaacacctatttacattggtacctgcagaagccaggccagtctccaaagctcctgatctacaaagtttccaaccgattttctggggtcccagacaggttcagtggcagtggatcagggacagatttcacactcaagatcagcagagtggaggctgaggatctgggactttatttctgctctcagaatacacatgttcctccgacgttcggtggaggctccaggctggaaatcaaac -SEQ_4。
进一步的，该引物的核苷酸序列如下：
33337 20201016 IgVMuEcoRI/FR1-ML(k)-IgVMu上游：
GGGAATTCGAYATTGTGMTRACMCARKMTCAA -SEQ_7；
33338 20201016 IgVMuHindIII/ML(k)-CONST-IgVMu下游：
GGAAGCTTACTGGATGGTGGGAAGATGGA -SEQ_8。
进一步的，含有权利要求2和4所述的编码基因。
进一步的，所述引物核苷酸序列如下：
Mouse-EcoRI/VH-F1(cd45-C17-2nd)上游：
CGGAATTCcaggtgaagctgcagcagtct -SEQ_9；
Mouse-Nhel/VH-R1(cd45-C17-2nd)下游：
CTAGCTAGC TGAGGAGACGGTGACCGTGGT -SEQ_10；
Mouse-EcoRI/VL-F1(cd45-C17-2nd)上游：
CGGAATTCgatgttgtgatgacccaaactc -SEQ_11；
Mouse-Xhol/VL-R1(cd45-C17-2nd)下游：
CCGCTCGAG TTTGATTTCCAGCCTGGAGCCTCCA -SEQ_12。
本发明的上述技术方案的有益效果如下：
本制备过程相较于传统的单克隆抗体与多克隆抗体，重组抗体的基因序列为确定的，相关人员在使用重组抗体时，能够进行前检测与后检测，从而确保重组抗体的稳定性，而多克隆抗体因为结构不明确，且随着目标蛋白质的结构与功能不断明确，多克隆抗体已经不适用于临床的转化，因此重组抗体在研究分析上更加完整具体，易于分析。
附图说明
图1为本发明的重组抗体表达流程图；
图2为本发明小鼠脾脏细胞和SP20融合的杂交瘤细胞总RNA（A）和cDNA 内参扩增琼脂糖凝胶电泳（B）；
图3为本发明小鼠单抗可变区基因扩增；
图4为本发明小鼠单抗可变区基因T克隆扩增图；
图5为本发明CD45重组抗体轻链可变区基因测序结果；
图6为本发明CD45重组抗体轻链可变区序列分析结果；
图7为本发明CD45重组抗体重链可变区基因测序结果；
图8为本发明CD45重组抗体重链可变区序列分析结果；
图9为本发明真核表达并纯化的抗体的SDS-PAGE检测图；
图10为本发明WB检测CD45重组抗体与重组human CD45抗原的结合活性图；
图11为本发明ELISA检测CD45重组抗体与重组humanCD45抗原的结合活性图。
图12为本发明FCM检测CD45重组抗体与PBMC的结合活性图；
图13为本发明免疫荧光检测CD45重组抗体与jurkat细胞膜上CD45的结合活性图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例的附图1-13，对本发明实施例的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于所描述的本发明的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。在下列实施例中，VH表示重链可变区，VL表示轻链可变区。
实施例一
本实施例提供了完整的CD45重组抗体的制备过程，其制备方法如下：
一、首先进行小鼠单抗可变区基因的钓取
1、杂交瘤细胞RNA提取及逆转录结果：
经过获得小鼠脾脏细胞和SP20融合的杂交瘤细胞，Trizol法提取杂交瘤细胞RNA，如图2所示，经琼脂糖凝胶电泳可见清晰的28S和18S条带，说明RNA 完整性较好。RNA浓度和纯度测定结果为D（260 nm）/D（280 nm）= 1. 85，可以满足本实验要求。
以RNA为模板反转录合成cDNA，以cDNA为模板，小鼠内参基因β-actin 为引物进行PCR扩增，扩增出长度为380 bp的目的条带，说明逆转录cDNA可用于后续实验；
2、小鼠单抗可变区PCR扩增
引物序列：
通过多序列比对和简并引物设计算法，在小鼠单抗前导肽和可变区的相对恒定区设计可扩增小鼠单抗可变区基因的引物，序列如下：
小鼠重链可变区引物序列
33331 20201016 IgVMu VH1BACK(FR1)-IgVMu-上游：
AGGTSMARCTGCAGSAGTCWGG -SEQ_5；
33336 20201016 IgVMu HindIII/MH(γ)-CONST-IgVMu下游：
GGAAGCTTAYCTCCACACACAGGRRCCAGTGGATAGAC -SEQ_6。
小鼠轻链可变区引物序列
33337 20201016 IgVMuEcoRI/FR1-ML(k)-IgVMu上游：
GGGAATTCGAYATTGTGMTRACMCARKMTCAA-SEQ_7；
33338 20201016 IgVMuHindIII/ML(k)-CONST-IgVMu下游：
GGAAGCTTACTGGATGGTGGGAAGATGGA -SEQ_8。
以cDNA为模板，用TaqDNA酶扩增McAb V区基因。将VH上游引物与VH下游引物以一定比例混合，扩增全套VH基因；将VL上游引物和VL下游引物以一定比例混合，扩增全套VL基因。如图3所示，扩增产物琼脂糖凝胶电泳结果显示: VH基因片段长度约为350-400 bp，VL基因片段长度约为350 bp，与目的片段长度一致；
3、纯化V区基因与T-载体连接：
用胶回收试剂盒纯化PCR产物，将VH基因和VL基因分别与pGEM-T载体连接，转化大肠杆菌。经蓝白筛选如图4所示，挑选白色菌落PCR鉴定。每一连接物各挑取12个单克隆，用通用引物进行菌落PCR，目的片段大小为500bp左右，如图4所示，将其中条带明亮6个阳性克隆菌送测序公司测序；
4、CD45重组抗体的可变区序列测序结果：
4.1 CD45重组抗体轻链可变区测序结果如下：
得到CD45重组抗体轻链可变区测序结果，如图5所示。利用IMGT/QUEST在线分析软件，对轻链基因进行同源性比较，分析结果参见图6，功能性轻链可变区全长为个337个碱基，结构域从第1位碱基开始，编码112个氨基酸，该有功能的轻链均属于Musmus IGKV1-110*01F家族，V区匹配率为97.96%，J区为94.29%；
轻链基因的有效序列如下：
gatgttgtgatgacccaaactccactctccctgcctgtcagtcttggagatcaagcctccatctcctgcagatctagtcagagccttgtacacactgatggaaacacctatttacattggtacctgcagaagccaggccagtctccaaagctcctgatctacaaagtttccaaccgattttctggggtcccagacaggttcagtggcagtggatcagggacagatttcacactcaagatcagcagagtggaggctgaggatctgggactttatttctgctctcagaatacacatgttcctccgacgttcggtggaggctccaggctggaaatcaaac -SEQ_4。
4.2 CD45重组抗体重链可变区测序结果如下：
得到CD45重组抗体重链可变区测序结果，如图7所示。如图7-8所示，利用IMGT/QUEST在线分析软件，对重链可变区基因进行同源性比较，分析结果参见图8，功能性重链可变区全长为个358个碱基，结构域从第1位碱基开始，编码119个氨基酸，该有单抗有功能的重链均属于Musmus IGHV1-87*01F 家族，V区匹配率为93.06%， J区为87.04%。
有效序列如下：
caggtgaagctgcagcagtctggggctgagctggcaagacctgggggttcagtgaagttgtcctgcaaggcttctggctacagctttactgcctactggatgcagtggttaagacagagccctggacagggtctggagtggattggagttatttatcctggagatggtgatgctaggtatactcagaagttccagggcaaggccacattgactgcagataaatcctccagcacagcctacatgcaactcagcagcttggcatctgaggactctgcggtctattactgtgcaagatggttccaccatgactatgttatggactactggggccaagggaccacggtcaccgtctcctcaa -SEQ_3；
反向互补序列：
ttgaggagacggtgaccgtggtcccttggccccagtagtccataacatagtcatggtggaaccatcttgcacagtaatagaccgcagagtcctcagatgccaagctgctgagttgcatgtaggctgtgctggaggatttatctgcagtcaatgtggccttgccctggaacttctgagtatacctagcatcaccatctccaggataaataactccaatccactccagaccctgtccagggctctgtcttaaccactgcatccagtaggcagtaaagctgtagccagaagccttgcaggacaacttcactgaacccccaggtcttgccagctcagccccagactgctgcagcttcacctg -SEQ_13。
二、对CD45重组抗体全长抗体构建以及真核表达纯化：
1、根据上述经测序确认正确且有功能的重链和轻链可变区基因，结合表达载体的酶切位点以及读码框，设计抗体扩增的二次扩增引物，以相应的T克隆为模板进行二次PCR，PCR产物经限制性内切酶处理后分别连入改造成功的pFUSEss_CHIg_mouseG2B和pFUSE2ss_CLIg_mouseK，完成质粒重组，重组后的质粒转入DH5a后，挑选阳性克隆送公司测序；
二次引物设计序列如下：
Mouse-EcoRI/VH-F1(cd45-C17-2nd)上游：
CGGAATTCcaggtgaagctgcagcagtct -SEQ_9；
Mouse-Nhel/VH-R1(cd45-C17-2nd)下游：
CTAGCTAGC TGAGGAGACGGTGACCGTGGT -SEQ_10；
Mouse-EcoRI/VL-F1(cd45-C17-2nd)上游：
CGGAATTCgatgttgtgatgacccaaactc -SEQ_11；
Mouse-Xhol/VL-R1(cd45-C17-2nd)下游：
CCGCTCGAG TTTGATTTCCAGCCTGGAGCCTCCA -SEQ_12；
2、将测序正确质粒对应的菌液扩大培养并提取质粒。将携带重链和轻链基因的质粒以一定比例共转染哺乳动物细胞293F细胞或者CHO-S细胞，4-5天收集培养细胞上清进行proteinL HP亲和层析纯化，纯化后的抗体SDS-PAGE电泳分析得到如图9所示的检测结果。
实施例二
本实施例通过进行WB检测重组抗体活性
WB：待测样本重组humanCD45，以1ug/mL浓度的CD45重组抗体孵育，二抗为HRP-羊抗小鼠IgG（0.5ug/mL），结果如图10表明CD45重组抗体可以很好地识别真核表达的重组蛋白（50kd）；
实施例三
本实施例通过进行ELISA效价测定检测重组抗体活性
ELISA效价测定：用重组human CD45（293F expression）抗原（1ug/m1）包板，用间接ELISA法检测，加入以梯度稀释（1：100到1：512w稀释）的CD45重组抗体，结果如图11显示，CD45重组抗体与重组human CD45蛋白可特异性结合，具有较好的量效关系，且在抗体稀释512w倍时，仍可识别human CD45抗原，预测该重组抗体效价为512w；
实施例四
本实施例通过进行流式细胞术检测重组抗体活性
流式细胞术检测CD45重组抗体与人PBMC的结合特性：取新鲜人血，ACK裂解红细胞并进行封闭处理后将细胞重悬至106个/100μL，孵育一抗CD45重组抗体（10ug/mL）和二抗APC-羊抗小鼠IgG（10ug/mL）进行流式检测，得到如图12的结果；结论：CD45重组抗体与天然样本有很好的结合活性，可以很好地用于流式检测。
实施例五
用CD45重组抗体对固定的jurkat进行免疫荧光染色。
取培养好的jurkat细胞至EP管，1000转/分离心5min，弃上清，加入4%多聚甲醛吹打均匀、固定。固定后，离心、PBS洗涤，重复三次。在EP管中加入适量去离子水制成细胞悬液，滴在多聚赖氨酸处理的载玻片上，晾干，制成jurkat细胞玻片。加0.5% Triton X-100通透处理或者不通透，PBS洗涤，重复三次，加羊血清封闭后，弃掉封闭液，滴加孵育CD45重组抗体（30ug/mL）过夜，用PBST洗三次，加二抗Alexa Fluor® 488-羊抗小鼠IgG（2ug/mL），用PBST洗三次，加入DAPI染核后，用荧光显微镜观察，得到如图13的结果；结论：CD45重组抗体与天然样本有很好的结合活性，可以很好地用于免疫荧光检测。
CD45重组抗体重链可变区氨基酸序列翻译如下：
QVKLQQSGAELARPGGSVKLSCKASGYSFTAYWMQWLRQSPGQGLEWIGVIYPGDGDARYTQKFQGKATLTADKSSSTAYMQLSSLASEDSAVYYCARWFHHDYVMDYWGQGTTVTVSS -SEQ_1；
CD45重组抗体轻链可变区氨基酸序列翻译如下：
DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHTDGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGLYFCSQNTHVPPTFGGGSRLEIK -SEQ_2。
Claims (7)
1.一种CD45重组抗体，包括抗体重链可变区和抗体轻链可变区，其特征在于：所述抗体重链可变区的氨基酸序列如SEQ_1所示，所示轻链可变区的氨基酸序列如SEQ_2所示。
2.如权利要求1所述CD45重组抗体的抗体重链可变区的编码基因，其特征在于，该重链可变区的编码基因的核苷酸序列如SEQ_3所示。
3.用于扩增权利要求2所述的抗体重链可变区的编码基因的引物，其特征在于，该引物的核苷酸序列如下：
33331 20201016 IgVMu VH1BACK(FR1)-IgVMu-上游：
AGGTSMARCTGCAGSAGTCWGG；
33336 20201016 IgVMu HindIII/MH(γ)-CONST-IgVMu下游：
GGAAGCTTAYCTCCACACACAGGRRCCAGTGGATAGAC。
4.如权利要求1所述CD45重组抗体的抗体轻链可变区的编码基因，其特征在于，该轻链可变区的编码基因的核苷酸序列如SEQ_4所示。
5.用于扩增权利要求4所述的抗体轻链可变区的编码基因的引物，其特征在于，该引物的核苷酸序列如下：
33337 20201016 IgVMuEcoRI/FR1-ML(k)-IgVMu上游：
GGGAATTCGAYATTGTGMTRACMCARKMTCAA；
33338 20201016 IgVMuHindIII/ML(k)-CONST-IgVMu下游：
GGAAGCTTACTGGATGGTGGGAAGATGGA。
6.一种重组质粒，其特征在于，含有权利要求2和4所述的编码基因。
7.用于二次扩增权利要求1所述的CD45重组抗体的引物，其特征在于，所述引物核苷酸序列如下：
Mouse-EcoRI/VH-F1(cd45-C17-2nd)上游：
CGGAATTCcaggtgaagctgcagcagtct；
Mouse-Nhel/VH-R1(cd45-C17-2nd)下游：
CTAGCTAGC TGAGGAGACGGTGACCGTGGT；
Mouse-EcoRI/VL-F1(cd45-C17-2nd)上游：
CGGAATTCgatgttgtgatgacccaaactc；
Mouse-Xhol/VL-R1(cd45-C17-2nd)下游：
CCGCTCGAG TTTGATTTCCAGCCTGGAGCCTCCA。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310232585.9A CN116143925A (zh) | 2023-03-13 | 2023-03-13 | 一种cd45重组抗体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310232585.9A CN116143925A (zh) | 2023-03-13 | 2023-03-13 | 一种cd45重组抗体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116143925A true CN116143925A (zh) | 2023-05-23 |
Family
ID=86352525
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310232585.9A Pending CN116143925A (zh) | 2023-03-13 | 2023-03-13 | 一种cd45重组抗体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116143925A (zh) |
-
2023
- 2023-03-13 CN CN202310232585.9A patent/CN116143925A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104650195B (zh) | Ev71病毒vp1重组抗原及其单克隆抗体与应用 | |
| CN115028731B (zh) | 一种抗Flag标签的抗体及其应用 | |
| CN114702578B (zh) | 新型冠状病毒Omicron突变株特异性抗体及其应用 | |
| CN114349855B (zh) | 新型冠状病毒Delta突变株特异性抗体及其应用 | |
| CN117700534B (zh) | 一种抗猴痘病毒a35r蛋白的抗体及其应用 | |
| CN109306008B (zh) | 一种猪源性抗猪瘟病毒的单链抗体及其制备方法 | |
| CN113604438B (zh) | 一种抗罗非鱼湖病毒的单克隆抗体及其细胞株和应用 | |
| CN111647081B (zh) | 一种重组小鼠抗人白介素19单克隆抗体、制备方法和应用 | |
| US20240158475A1 (en) | Ns1-binding protein | |
| KR102660061B1 (ko) | 항 열대열 말라리아 원충 hrp-ii 항체 | |
| CN110872354B (zh) | 哺乳动物细胞重组抗人tk1的鸡源的单克隆抗体、单链抗体及其制备方法和应用 | |
| CN111647086B (zh) | 一种重组小鼠抗人肌酸激酶单克隆抗体、制备方法和应用 | |
| CN116143925A (zh) | 一种cd45重组抗体 | |
| CN108484770B (zh) | 重组大鼠抗小鼠cd4单克隆抗体，制备方法和应用 | |
| CN115838416A (zh) | 针对非洲猪瘟CD2v的抗体及其应用 | |
| CN114560940B (zh) | 一种抗SIRPα兔重组单克隆抗体及其制备方法和应用 | |
| CN112679607B (zh) | 一种肌钙蛋白i e13单链抗体的制备方法 | |
| CN110894235B (zh) | 一种抗隐球菌夹膜多糖的兔源单克隆抗体及其应用 | |
| CN111647083B (zh) | 一种重组小鼠抗人血幼素单克隆抗体、制备方法和应用 | |
| CN117801099B (zh) | 一株抗蓝舌病毒vp7蛋白的重组单克隆抗体 | |
| CN114702574B (zh) | 白斑症病毒单链可变区重组抗体及其制备方法和应用 | |
| CN114773462B (zh) | 用于检测牛crp蛋白的重组单链抗体及其应用 | |
| CN110054688B (zh) | 一种抗ttc36单克隆抗体及其应用 | |
| CN114874321B (zh) | 纳米抗体及其制备方法与应用 | |
| CN116496392B (zh) | 抗新型冠状病毒n蛋白单域抗体、融合蛋白及其编码基因和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |