CN116115817A - 一种纤维蛋白生物医用胶的研制 - Google Patents
一种纤维蛋白生物医用胶的研制 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116115817A CN116115817A CN202210766301.XA CN202210766301A CN116115817A CN 116115817 A CN116115817 A CN 116115817A CN 202210766301 A CN202210766301 A CN 202210766301A CN 116115817 A CN116115817 A CN 116115817A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- fibrinogen
- fibrin
- thrombin
- biomedical
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 title claims abstract description 75
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 title claims abstract description 75
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 75
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 title claims abstract description 75
- 239000003292 glue Substances 0.000 title claims description 35
- 238000011161 development Methods 0.000 title description 3
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims abstract description 94
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims abstract description 94
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims abstract description 94
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims abstract description 75
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims abstract description 75
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims abstract description 57
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims abstract description 56
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 51
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 15
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 claims description 4
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 claims description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims 2
- 108010071289 Factor XIII Proteins 0.000 claims 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims 1
- 229940012444 factor xiii Drugs 0.000 claims 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 abstract description 28
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 abstract description 28
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 9
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 8
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 8
- 239000003364 biologic glue Substances 0.000 abstract description 5
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 abstract description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 94
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 26
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 14
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 13
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 12
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YTLYLLTVENPWFT-UPHRSURJSA-N (Z)-3-aminoacrylic acid Chemical compound N\C=C/C(O)=O YTLYLLTVENPWFT-UPHRSURJSA-N 0.000 description 5
- -1 amino acrylic ester Chemical class 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 208000033809 Suppuration Diseases 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 238000011056 performance test Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
- A61L24/10—Polypeptides; Proteins
- A61L24/106—Fibrin; Fibrinogen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/001—Use of materials characterised by their function or physical properties
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/001—Use of materials characterised by their function or physical properties
- A61L24/0015—Medicaments; Biocides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/001—Use of materials characterised by their function or physical properties
- A61L24/0042—Materials resorbable by the body
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
- A61L24/10—Polypeptides; Proteins
- A61L24/108—Specific proteins or polypeptides not covered by groups A61L24/102 - A61L24/106
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/252—Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/252—Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
- A61L2300/254—Enzymes, proenzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/418—Agents promoting blood coagulation, blood-clotting agents, embolising agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Surgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
本发明公开一种用于替代传统手术缝合的生物医用胶及其制备方法，该纤维蛋白生物医用胶的主要特征是由纤维蛋白原与凝血酶反应生成的，纤维蛋白原与凝血酶主要来自动物血液。本发明的纤维蛋白生物医用胶具有较高的粘合力、较快的固化速度、极好的生物相容性与组织相容性，可用于替代传统的手术缝合，减少抗生素的滥用；此外，由于本发明的生物胶具有良好的固化速度，也能用于一般情况下伤口的快速止血。本发明提供一种具有良好的粘合力与组织相容性、生物相容性的生物医用胶来代替传统的手术缝合。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物医用胶的制备方法，尤其涉及一种用于替代传统手术缝合的纤维蛋白生物医用胶的制备方法。
背景技术
如今对于伤口预防感染的处理使用的更多的是抗生素。而抗生素的滥用已经成为人类医学面临的一个公共难题，尤其是抗生素的耐药性问题，更有甚者，过敏体质的患者因为无法使用抗生素而导致伤口处理的巨大困难。而伤口缝合的过程，首先必须使用抗生素进行伤口的预处理。这就增加了抗生素的耐药性问题，以及患者因过敏而无法使用抗生素的情况。
因此一种能够替代传统缝合技术，并能具有自身抗菌消炎功能的生物医用胶，是临床上十分渴求的。近三十年来，医疗界出现了一些医用胶，但是都因为毒性过大或者粘合力过小，而不被广泛应用。本发明旨是一种以纤维蛋白原和凝血酶为原料的安全、高效、环保全新一代生物医用胶，替代传统伤口缝合技术以及传统的医用胶。
发明内容
本发明要解决的技术问题是解决传统手术缝合存在的诸多问题，如：操作费时；会出现炎症反应，使伤口感染、增生、破裂、愈合时间长，甚至出现化脓、坏死和不愈合的情况，及导致的抗生素滥用问题。所以本发明提供了一种以纤维蛋白原和凝血酶为原料制备的纤维蛋白生物医用胶，该纤维蛋白生物医用胶能够用于代替传统的手术缝合，一定程度上解决抗生素的滥用问题。
本发明解决上述技术问题的方案如下：
一种用于替代传统手术缝合的纤维蛋白生物医用胶的研制，该生物医用胶由纤维蛋白原溶液与凝血酶溶液反应而得，其中：
1)所述的纤维蛋白原溶液由以下方式制得：制备0.9％的氯化钠溶液。将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液；
2)所述的凝血酶溶液由以下方式制得：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3)按不同比例混合上述两种溶液：使用滴管将纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到纤维蛋白生物医用胶。
上述纤维蛋白生物医用胶中，最佳配比为纤维蛋白原溶液与凝血酶溶液的比例为1:3。所述的混合方式为将凝血酶溶液缓缓滴入纤维蛋白原溶液。所使用的冻干纤维蛋白原和冻干凝血酶均来自于牛的血液。
本发明所述的生物医用胶可采取常规的方法制得，本发明人推荐的方法如下：
1)制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2)制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3)混合所述的纤维蛋白原溶液、凝血酶溶液：使用滴管将纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
附图说明
附图1说明：本纤维蛋白生物医用胶的粘度随着凝血酶溶液比例的增大而升高。
附图2说明：本纤维蛋白生物医用胶具有较高的粘合力，能轻松粘合住两个小烧杯。
附图3说明：本纤维蛋白生物医用胶具有较好的吸水性能，其中纤维蛋白原溶液与凝血酶比例为1:3的纤维蛋白生物医用胶吸水性能最好。
附图4说明：本纤维蛋白生物医用胶降解速度较快，能在七天内几乎完全降解。
附图5说明：本纤维蛋白生物医用胶具有较好的促进血栓形成的能力，而且由于
附图6～9说明：与传统氨基丙烯酸酯类生物医用胶作为阳性对照，本纤维蛋白生物医用胶具有促进小鼠创口愈合的能力。
附图10说明：为本发明申请的纤维蛋白生物医用胶。
具体实施方式
实施例1
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:1的比例混合：使用滴管将10滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入10滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例2
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:1.5的比例混合：使用滴管将10滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入15滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例3
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:2的比例混合：使用滴管将10滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入20滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例4
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，
缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:2.5的比例混合：使用滴管将6滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入15滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例5
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:3的比例混合：使用滴管将5滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入15滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例6
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:3.5的比例混合：使用滴管将6滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入21滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例7
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:4的比例混合：使用滴管将5滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入20滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例8
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:4.5的比例混合：使用滴管将4滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入18滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
实施例9
1.制备所述的纤维蛋白原溶液：制备0.9％的氯化钠溶液，将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液。
2.制备所述的凝血酶溶液：制备40mmol/L的氯化钙溶液，将冻干凝血酶置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡，以免产生气泡，影响成胶的品质)，使其充分溶解，得到凝血酶溶液；
3.按1:5的比例混合：使用滴管将5滴纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入25滴凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。正交实验相关表征：
1.理化性质表征
表1生物医用胶的物理性质
由说明书附图1可知，流动性随着纤维蛋白原溶液和凝血酶溶液比例的增大而增大，凝血酶溶液的比例越高，流动性越高。
2.溶胀度/吸水性能表征
表2 1:1的纤维蛋白生物医用胶溶胀度测试结果
| 组别 | W1(mg) | W2(mg) | 溶胀度 |
| 1 | 426.3 | 6.1 | 68.88 |
| 2 | 387.5 | 5.5 | 69.45 |
| 3 | 402.6 | 5.9 | 67.24 |
| 平均值 | 68.5233±1.1474 |
表3 1:3的纤维蛋白生物医用胶溶胀度测试结果
| 组别 | W1 | W2 | 溶胀度 |
| 1 | 362.2 | 3.6 | 99.61 |
| 2 | 301.8 | 2.9 | 103.07 |
| 3 | 298.2 | 2.7 | 109.44 |
| 平均值 | 104.04±4.9863 |
表4 1:5的纤维蛋白生物医用胶溶胀度测试结果
| 组别 | W1 | W2 | 溶胀度 |
| 1 | 180.2 | 2.1 | 84.81 |
| 2 | 163.5 | 2 | 80.75 |
| 3 | 215.6 | 2.7 | 78.85 |
| 平均值 | 81.47±3.0445 |
表5氨基丙烯酸酯类生物胶溶胀度测试
| 组别 | W1 | W2 | 溶胀度 |
| 1 | 180.2 | 4.1 | 45.65 |
| 2 | 163.5 | 4 | 43.75 |
| 3 | 215.6 | 4.7 | 48.65 |
| 平均值 | 46.47±2.0441 |
本试验选取1:1，1：3,1:5三种比例的纤维蛋白生物医用胶作为三组实验组，传统的氨基丙烯酸酯类生物医用胶作为对照组，测试各组的溶胀度，比较各组的吸水性能。
与传统的氨基丙烯酸酯类生物胶相比，1:1、1:3、1:5三种比例的纤维蛋白生物医用胶的溶胀度相对来说都大很多，由此分析可得，本纤维蛋白生物医用胶相较于传统的氨基丙烯酸酯类生物医用胶具有更好的吸水性能。能更好地吸收伤口表面的渗出液，有助于伤口的愈合。
3.纤维蛋白生物医用胶降解时间表征
表6纤维蛋白生物医用胶的降解记录
理论上，纤维蛋白医用生物胶的降解时间，相较于其它类别的胶降解速度较快，对环境造成的影响较小，不会像传统的生物粘合剂一样造成环境的污染；且对人体的毒性小、有助于后续伤口的恢复。
实验表明，本纤维蛋白生物医用胶在空气中放置会慢慢降解。其降解时间适中，既可以达到代替手术缝合的效果，又不会对患者的身体造成毒性，还不会导致环境的污染。
而且，与传统的氨基丙烯酸酯类相比较，本纤维蛋白生物医用胶具有极高的溶胀度，极佳的吸水性能。理论上来说，其可以更好的吸收手术缝合处和伤口渗出的体液，更有助于患者的伤口恢复。
4.纤维蛋白生物医用胶活性表征实验表征
4.1纤维蛋白生物医用胶对于静态全血血栓形成影响的实验
实验目的：利用静态全血实验的方法，观察样品表面血栓形成的结果，客观合理地评价纤维蛋白生物医用胶的凝血效果。
实验方法：从小鼠尾部动脉取血，按体积比9：1与柠檬酸钠溶液在离心管中混合均匀；用一次性滴管在每个样品表面滴加等量全血(样品置于载玻片表面)。将样品静置一小时。静置完成后，取出样品，用生理盐水轻轻冲洗2-3遍；观察并记录样品表面血栓的形成情况。
表7静态血栓试验结果
初步分析静态血栓实验的结果可以得知，该纤维蛋白生物医用胶可以促进血栓的形成。而且，凝血酶溶液的比例越高，越有助于促进血栓的形成。制备好的纤维蛋白生物医用胶有助于止血，而且本纤维蛋白生物医用胶不依赖与人体本身的凝血酶，因此对某些凝血功能障碍的患者也适用。其凝血效果使其可用于外科手术中的止血和替代传统的针线进行伤口的缝合。
而氨基丙烯酸酯类医用胶未能形成血栓，可以证明其没有使静态全血形成血栓的能力，止血效果弱。通过分析可以得知，与传统的氨基丙烯酸酯类生物胶相比，本纤维蛋白生物医用胶能够促进创口表面血栓的形成，有助于伤口表面血栓的形成，有助于止血。
4.2纤维蛋白生物医用胶对小鼠创伤模型伤口愈合的影响
实验目的：本专利采用模型小鼠，建立小鼠的创口模型，检测本纤维蛋白生物医用胶对于促进小鼠伤口愈合的效果。
模型建立：10只SPF级雌雄各半昆明小鼠(体重18–22g)，并以自由饮食和饮用水适应性喂养了一周。饲喂环境受到控制(光照/黑暗周期12小时；湿度40-70％；环境温度21-26℃)。所有动物实验均经南方医科大学大学动物中心批准并在动物中心进行，所有动物都具有相应的合格证。
将其随机分为两组，剔除小鼠臀部的毛，在每只小鼠的臀部割一道大小基本相同的伤口；对一周内小鼠的伤口愈合情况进行分析。
其中A组作为实验组，使用本发明制备的纤维蛋白生物医用胶；B组作为阳性对照，使用传统的氨基丙烯酸酯类生物医用胶，对比一周内两组小鼠的伤口愈合情况。
实验结果及分析：
从第一天到第七天，对比阳性对照组与实验组的伤口状况。第一天时两组的伤口状况接近。第三天时，就可以看出实验组相较于阳性对照组的小鼠伤口愈合更好，且已经有结痂的趋势。第五天，实验组的小鼠的伤口已经基本结痂，而阳性对照组的才刚出现结痂的趋势。第七天时，使用本纤维蛋白生物医用胶的小鼠伤口已经基本愈合，而阳性对照组使用氨基丙烯酸酯类生物医用胶的小鼠伤口才刚开始结痂。
5.纤维蛋白生物医用胶的抑菌性能测试
取活化并稀释为1.5×108/ml的金黄色葡萄球菌100μl，均匀推涂至固态LBL培养基表面，等距离排布打6个孔，分别加入1:1的纤维蛋白生物医用胶、1:3的纤维蛋白生物医用胶、1:5的纤维蛋白生物医用胶、普通凝胶基质、传统氨基丙烯酸酯类粘合剂、生理盐水按上法分别接种另2种创伤易感菌种：大肠杆菌和铜绿假单胞杆菌并同法加入样品。每种菌液做3只培养皿。37℃培养箱倒置培养12h。以游标卡尺测量各抑菌圈直径。
三种比例的纤维蛋白生物医用胶与普通凝胶基质相比，3种菌的抑菌圈直径都有显著增大(P＜0.05)；传统氨基丙烯酸酯类生物胶组与生理盐水组存在一定抑菌圈，但较本纤维蛋白生物医用胶，其抗菌性能极弱。
与氨基丙烯酸酯类医用胶相比，本纤维蛋白生物医用胶，具有良好的抑菌性能，理论上来说，投入使用后，可以减少伤口的发炎感染，并减少抗生素的使用，可以一定程度上解决如今抗生素滥用的难题。
6.纤维蛋白生物医用胶的总体分析
本专利从现如今传统手术缝合存在的问题出发，制备了一种纤维蛋白生物医用胶，并测试了其溶胀度、粘合力，并进行了静态全血实验以及乳鼠创伤实验。实验表明，该纤维蛋白生物医用胶具有较好的溶胀度；较高的粘合力，其粘合力基本可以满足外科手术缝合及普通伤口愈合的要求。静态全血实验表明，该纤维蛋白生物医用胶可以促进血栓的形成，有助于伤口的止血。小鼠创伤实验也能证明该纤维蛋白凝胶有促进伤口愈合的作用。
Claims (9)
1.一种用于代替传统手术缝合的纤维蛋白生物医用胶的研制，该纤维蛋白生物医用胶具有可以粘合伤口的纤维蛋白，所述生物胶由纤维蛋白溶液、凝血酶溶液组成，其中，
纤维蛋白原溶液与凝血酶溶液的比例为1:3。
其中纤维蛋白原溶液与凝血酶溶液的制备方法如下：
1)分别制备0.9％的氯化钠溶液和40mmol/L的氯化钙溶液。
2)将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液；同样的操作将冻干凝血酶溶于氯化钙溶液，得到凝血酶溶液。
3)使用滴管将纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入凝血酶溶液，使其充分混合。
4)静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
2.根据权利要求1所述的纤维蛋白生物医用胶，其特征在于，该纤维蛋白生物医用胶由以下方法得到：
分别制备0.9％的氯化钠溶液和40mmol/L的氯化钙溶液。将冻干纤维蛋白原置于离心管中，加入生理盐水，缓慢旋转离心管(不能上下震荡)，使纤维蛋白原充分溶解，得到纤维蛋白原溶液；同样的操作将冻干凝血酶溶于氯化钙溶液，得到凝血酶溶液。使用滴管将纤维蛋白原缓缓滴于细胞板上，晃动细胞板使得纤维蛋白原溶液均匀分散于细胞板底部。往其中缓缓滴入凝血酶溶液，使其充分混合。静置过夜，得到本纤维蛋白生物医用胶。
3.根据权利要求1或2所述的用于替代传统手术缝合的生物医用胶制品，其特征在于，该纤维蛋白生物医用胶由以下原理制得，用凝血酶激活纤维蛋白酶原，模拟人体凝血反应的最后阶段，形成纤维蛋白单体，纤维蛋白单体在XIII因子的作用下再交联，最后再形成纤维蛋白生物医用胶。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，纤维蛋白原溶液的浓度。
5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，凝血酶溶液的浓度。
6.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，纤维蛋白原溶液与凝血酶溶液的比例。
7.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，先在细胞板上均匀地铺上纤维蛋白原溶液，再滴入凝血酶溶液。
8.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，滴入凝血酶溶液时要均匀缓慢地滴入，使得凝血酶能与纤维蛋白原溶液充分反应。
9.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，混合两种溶液后静置过夜，使其充分反应。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210766301.XA CN116115817A (zh) | 2022-07-01 | 2022-07-01 | 一种纤维蛋白生物医用胶的研制 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210766301.XA CN116115817A (zh) | 2022-07-01 | 2022-07-01 | 一种纤维蛋白生物医用胶的研制 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116115817A true CN116115817A (zh) | 2023-05-16 |
Family
ID=86297843
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210766301.XA Pending CN116115817A (zh) | 2022-07-01 | 2022-07-01 | 一种纤维蛋白生物医用胶的研制 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116115817A (zh) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992013495A1 (en) * | 1991-02-07 | 1992-08-20 | Fibratek, Inc. | Fibrinogen based adhesive |
| US5290552A (en) * | 1988-05-02 | 1994-03-01 | Matrix Pharmaceutical, Inc./Project Hear | Surgical adhesive material |
| US5464471A (en) * | 1994-11-10 | 1995-11-07 | Whalen Biomedical Inc. | Fibrin monomer based tissue adhesive |
| US20050095235A1 (en) * | 2000-06-22 | 2005-05-05 | Spinal Restoration, Inc. | Biological bioadhesive compositions and methods of preparation and use |
| US20090232790A1 (en) * | 2005-08-08 | 2009-09-17 | Kieu Hoang | Kit of Lyophilized Thrombin and Lyophilized Fibrinogen Used to Compound Fibrin Membrane, and Its Application |
| CN107080857A (zh) * | 2017-03-29 | 2017-08-22 | 西南交通大学 | 一种基于纤维蛋白凝胶的止血材料的制备方法 |
| CN112843326A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-05-28 | 上海利康瑞生物工程有限公司 | 一种纤维蛋白粘合剂速效止血复合粉及其制备方法 |
-
2022
- 2022-07-01 CN CN202210766301.XA patent/CN116115817A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5290552A (en) * | 1988-05-02 | 1994-03-01 | Matrix Pharmaceutical, Inc./Project Hear | Surgical adhesive material |
| WO1992013495A1 (en) * | 1991-02-07 | 1992-08-20 | Fibratek, Inc. | Fibrinogen based adhesive |
| US5464471A (en) * | 1994-11-10 | 1995-11-07 | Whalen Biomedical Inc. | Fibrin monomer based tissue adhesive |
| US20050095235A1 (en) * | 2000-06-22 | 2005-05-05 | Spinal Restoration, Inc. | Biological bioadhesive compositions and methods of preparation and use |
| US20090232790A1 (en) * | 2005-08-08 | 2009-09-17 | Kieu Hoang | Kit of Lyophilized Thrombin and Lyophilized Fibrinogen Used to Compound Fibrin Membrane, and Its Application |
| CN107080857A (zh) * | 2017-03-29 | 2017-08-22 | 西南交通大学 | 一种基于纤维蛋白凝胶的止血材料的制备方法 |
| CN112843326A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-05-28 | 上海利康瑞生物工程有限公司 | 一种纤维蛋白粘合剂速效止血复合粉及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Deng et al. | A natural biological adhesive from snail mucus for wound repair | |
| CN1167366C (zh) | 壳聚糖、胶原和海藻酸钙复合海绵生物敷料及其制备工艺 | |
| CN110665050B (zh) | 一种生物粘合剂及其制备方法 | |
| JPS63501689A (ja) | 液体吸収組成物の製造方法 | |
| CN101559235A (zh) | 一种复方微孔淀粉粉体止血剂及其制备方法 | |
| CN102108211B (zh) | 一种壳聚糖胶原蛋白凝胶及应用 | |
| CN101879324A (zh) | 壳聚糖复合医用敷料的制备方法 | |
| CN107823699B (zh) | 止血防粘连膜及其制备方法 | |
| CN102105177B (zh) | 治疗皮肤损伤的药物组合物、敷料和方法,用于制备所述敷料的中间组合物和方法,以及与胶原基质缔合的铈盐的用途 | |
| CN101597381A (zh) | 一种用于针后贴的海藻酸钙复合膜医用敷料及其制备方法和应用 | |
| CN102108138B (zh) | 一种壳聚糖胶原蛋白凝胶的制备方法 | |
| CN100384485C (zh) | 处理慢性创伤的微生物纤维素创伤敷料 | |
| CN116115817A (zh) | 一种纤维蛋白生物医用胶的研制 | |
| CN110755674B (zh) | 一种止血粉及其制备方法 | |
| US10376610B2 (en) | Regenerated oxidized celulose based hemostatic materialcontaining antifibrolytic agents | |
| CN115887732B (zh) | 一种医用明胶敷料及其制备方法 | |
| CN108653718B (zh) | 一种可吸收促愈合止血组合物及敷料 | |
| CN108434507B (zh) | 离子介导敷料及其制备方法和应用 | |
| CN105999368A (zh) | 表皮生长因子复合湿性创伤敷料及其制备方法 | |
| CN109847097A (zh) | 天然生物修复膜、其制备方法和应用 | |
| CN1237883C (zh) | 具有抑菌功效的胶原－DNA－Ag复合物及其制备方法 | |
| CN112535761A (zh) | 一种抗菌止血促愈凝胶、制备方法及其应用 | |
| CN1759841A (zh) | 一种用于促进伤口愈合的生物膜的制剂及其制备方法 | |
| RU2789304C1 (ru) | Биоразлагаемая ранозаживляющая пленка | |
| RU2806724C1 (ru) | Ранозаживляющая пленка пролонгированного действия |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |