CN116115658B - 藤梨根及提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途 - Google Patents

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Abstract

一种藤梨根及提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,所述藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果;因为藤梨根提取物具有对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果,那么作为原料的藤梨根同样也具有对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果。而且藤梨根在我国分布广泛,且陕西等地区广泛栽培;而藤梨根为传统的清热解毒类中药,其毒副作用小。而由此使用藤梨根及藤梨根提取物作为溃疡性结肠炎药物时,能大大降低治疗成本,对溃疡性结肠炎的治疗有效且长期服用毒副作用小。

Description

藤梨根及提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域,特别涉及藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途及藤梨根在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途。
背景技术
现在临床治疗溃疡性结肠炎(UC)的常用药主要包括氨基水杨酸类、免疫抑制剂、类固醇和一些生物制剂等,这些药物可以在一定程度上缓解病情,然而在长期维持缓解、促进黏膜深度愈合、预防复发等方面,疗效还不能令人满意,且通常价格昂贵,长期维持用药会耗费大量的医疗资源,还会引发诸多不良反应。
美沙拉嗪是最常用的治疗溃疡性结肠炎的药物,主要用于活动期轻、中度或缓解期维持的UC患者。美沙拉嗪主要有效成分为5-氨基水杨酸。由于溃疡性结肠炎是一种慢性难治性疾病,长期维持服用美沙拉嗪不仅会给患者及其家庭带来的经济负担,还会引发不良反应,轻则可能出现轻度的胃部不适,重则可能诱发慢性肝炎。因此,长期服用美沙拉嗪的患者需要经常检查肝脏指标-谷丙转氨酶 (ALT)等,如果该指标远远超过正常水平那么需要停止服用美沙拉嗪,否则容易引起肝炎,肝纤维化甚至肝坏死。
因此,针对现有技术不足,提供藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途及藤梨根在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途以解决现有技术不足甚为必要。
发明内容
本发明的其中一个目的在于避免现有技术的不足之处而提供一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途。该藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果。
本发明的上述目的通过以下技术措施实现:
提供藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途。
优选的,上述藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
当所述藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
当所述藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
优选的,上述藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度,抑制溃疡性结肠炎。
优选的,上述藤梨根提取物通过减少隐血产生程度,抑制溃疡性结肠炎。
优选的,上述藤梨根提取物通过降低体重减少程度,抑制溃疡性结肠炎。
本发明将所述藤梨根提取物溶于水中,且浓度为20μg/ml~300μg/ml。
本发明的用药途径为将藤梨根的中药材水煎得到藤梨根提取物,然后口服或者灌肠;
或者
本发明的用药途径为将藤梨根提取物的成品冲服或者溶解后灌肠。
本发明的另一个目的在于避免现有技术的不足之处而提供一种藤梨根在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途。该藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果。
本发明的上述目的通过以下技术措施实现:
提供藤梨根在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途。
本发明的一种藤梨根及藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果;因为藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果,那么作为原料的藤梨根同样也对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果。而且藤梨根在我国分布广泛,且陕西等地区广泛栽培;而藤梨根为传统的清热解毒类中药,其毒副作用小。而由此使用藤梨根及藤梨根提取物作为溃疡性结肠炎药物时,能大大降低治疗成本,对溃疡性结肠炎的治疗有效且长期服用毒副作用小。
附图说明
利用附图对本发明作进一步的说明,但附图中的内容不构成对本发明的任何限制。
图1为藤梨根提取物对小鼠体重的影响。
图2为藤梨根提取物对小鼠结肠长度的影响。
图3为藤梨根提取物对小鼠隐血程度的影响。
图4为藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子IL-8表达的影响。
图5为藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子IL-17表达的影响。
图6为藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子TNFα表达的影响。
具体实施方式
结合以下实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的原料、试剂材料等,如无特殊说明,均可自常规生化试剂商店或药品经营企业购买得到。
实施例1
一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其中,藤梨根为藤梨根的提取物。
本发明的藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
本发明的藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度、通过减少隐血产生或通过降低体重减少程度,从而抑制溃疡性结肠炎。
申请人进一步研究发现当藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。当藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
通过不同浓度的藤梨根提取物处理NCM460细胞株,观察藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子表达的影响,实验发现,当藤梨根提取物溶于水中,且浓度在20μg/ml~300μg/ml范围内时,抑炎效果明显。
还需要指出的是,藤梨根是猕猴桃科植物中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch)或软枣猕猴桃(A. arguta Planch)等的干燥根。藤梨根味苦、涩,性凉,无毒,属于清热解毒类中药,具有清热解毒、活血消肿、祛风、利湿、止血、抗炎、抗癌等功效,主治消化不良、呕吐、风湿痹痛、消化道肿瘤、痈疡疮疖等症。
藤梨根中的化合物种类丰富多样,根据文献报道,已经从藤梨根中分离得到的化合物超过290种,主要包括三萜类、黄酮类、酚酸类、苯丙素类、蒽醌类、生物碱类、甾体类、有机酸类等。其中主要活性成分为五环三萜类,其次为黄酮类、酚酸类、苯丙素类等,儿茶素衍生物、香豆素衍生物和酚酸衍生物是藤梨根的主要水溶性成分。
申请人也运用网络药理学对藤梨根有效成分进行了收集和筛选:通过中药系统药理学数据库与分析平台( TCMSP,https: / /old. tcmsp-e. com/tcmsp. php),在数据库内查询藤梨根的化学成分,再以口服利用度(OB)≥30% 和类药性(DL)≥0.18 条件,筛选藤梨根的主要有效成分。通过查询数据库,共收集到藤梨根的有效成分26种,以口服利用度(OB)≥30%和类药性(DL)≥0.18为条件,筛选得到6种主要化学成分,见表1。
表1 藤梨根主要有效成分表
MOL ID 分子名称 中文名称 OB(%) DL
MOL000073 ent-Epicatechin ent-表儿茶素 48.96 0.24
MOL000098 quercetin 槲皮素 46.43 0.28
MOL000358 beta-sitosterol β-谷甾醇 36.91 0.75
MOL000359 sitosterol 谷甾醇 36.91 0.75
MOL000471 aloe-emodin 芦荟大黄素 83.38 0.24
MOL000492 (+)-catechin (+)-儿茶素 54.83 0.24
上表中的6种化合物为藤梨根的主要化学成分。本发明的藤梨根水提取物是通过水对藤梨根进行提取,而藤梨根醇提取物则是通过甲醇、乙醇等醇类物质对藤梨根进行提取。藤梨根水提取物和藤梨根醇提取物,对于本领域技术人员为常见的藤梨根提取方法制备方法,因此在此不再提取方法进行赘述。对于不同有水提或醇提方法,如不同提取温度、提取溶剂性质等,均能提取到得到含有表中的这6种化合物为主要成分的藤梨根水提取物或藤梨根醇提取物,只有杂质或含量上存在偏差,而这些偏差并不影响对溃疡性结肠炎的抑炎效果。申请人通过网络药理学及生物信息学方法进行分析,分析表明藤梨根和UC的交集靶点与IL-4、IL-13、IL-18和炎症应答等UC相关分子功能及生物进程相关;同时交集靶点与PI3K-Akt、NF-κB、JAK-STAT、TGF-β和AMPK等经典UC相关信号通路密切相关,本申请效果与这6种化合物存在关系。
综上,藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果,可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。由此使用藤梨根提取物作为治疗溃疡性结肠炎药物时,能大大降低治疗成本,对溃疡性结肠炎的治疗有效且长期服用毒副作用小。
实施例2
一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,本发明的藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
本发明的藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度、通过减少隐血产生或通过降低体重减少程度,从而抑制溃疡性结肠炎。
申请人进一步研究发现当藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。当藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
通过不同浓度的藤梨根提取物处理NCM460细胞株,观察藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子表达的影响,实验发现,当藤梨根提取物溶于水中,且浓度在50μg/ml~200μg/ml范围内时,抑炎效果明显。
在实施例1中,本实施例藤梨根提取物对溃疡性结肠炎的抑炎效果较优,可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
实施例3
一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,本发明的藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
本发明的藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度、通过减少隐血产生或通过降低体重减少程度,从而抑制溃疡性结肠炎。
申请人进一步研究发现当藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。当藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
通过不同浓度的藤梨根提取物处理NCM460细胞株,观察藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子表达的影响,实验发现,当藤梨根提取物溶于水中,且浓度为20μg/ml时,抑炎效果明显。
在实施例1中,本实施例藤梨根提取物对溃疡性结肠炎的抑炎效果较优,可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
实施例4
一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,本发明的藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
本发明的藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度、通过减少隐血产生或通过降低体重减少程度,从而抑制溃疡性结肠炎。
申请人进一步研究发现当藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。当藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
通过不同浓度的藤梨根提取物处理NCM460细胞株,观察藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子表达的影响,实验发现,当藤梨根提取物溶于水中,且浓度为300μg/ml时,抑炎效果明显。
在实施例1中,本实施例藤梨根提取物对溃疡性结肠炎的抑炎效果较优,可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
实施例5
一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,本发明的藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
本发明的藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度、通过减少隐血产生或通过降低体重减少程度,从而抑制溃疡性结肠炎。
申请人进一步研究发现当藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。当藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
通过不同浓度的藤梨根提取物处理NCM460细胞株,观察藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子表达的影响,实验发现,当藤梨根提取物溶于水中,且浓度为50μg/ml时,抑炎效果明显。
在实施例1中,本实施例藤梨根提取物对溃疡性结肠炎的抑炎效果较优,可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
实施例6
一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,本发明的藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
本发明的藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度、通过减少隐血产生或通过降低体重减少程度,从而抑制溃疡性结肠炎。
申请人进一步研究发现当藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。当藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
通过不同浓度的藤梨根提取物处理NCM460细胞株,观察藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子表达的影响,实验发现,当藤梨根提取物溶于水中,且浓度为100μg/ml时,抑炎效果明显。
在实施例1中,本实施例藤梨根提取物对溃疡性结肠炎的抑炎效果较优,可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
实施例7
一种藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,本发明的藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物。
本发明的藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度、通过减少隐血产生或通过降低体重减少程度,从而抑制溃疡性结肠炎。
申请人进一步研究发现当藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。当藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
通过不同浓度的藤梨根提取物处理NCM460细胞株,观察藤梨根提取物对肠道上皮细胞炎症因子表达的影响,实验发现,当藤梨根提取物溶于水中,且浓度为200μg/ml时,抑炎效果明显。
在实施例1中,本实施例藤梨根提取物对溃疡性结肠炎的抑炎效果较优,可用于制备治疗溃疡性结肠炎药物。
实施例8
为了阐明藤梨根提取物对溃疡性结肠炎的抑制效果及机理,进行了一系列的实验研究,具体如下:
1、构建U C小鼠模型
选用6周龄的SPF级雄性BALB/c小鼠,且每只小鼠体重约20g,均健康且一般情况相仿。饲养在标准实验室条件下(无菌饮食,空气湿度50%,室内温度23℃~24℃和12 h昼夜循环),自由进食进水,动物饲养及实验过程符合动物福利和法规指南。
小鼠分组及构建硫酸葡聚糖钠盐(Dextran sulfate,DSS)诱导的UC小鼠模型:将小鼠随机平分为5组,每组8只。正常对照组连续饮用双蒸水;UC小鼠模型组使用双蒸水配置成的3%DSS溶液,让小鼠连续饮用,共4组。这5组实验具体是将装有双蒸水或3%DSS溶液的饲养瓶直接装在鼠笼上,小鼠自主饮用。
在具体的实施例条件相同下,正常对照组为第一组,该组只喂双蒸水。第二至第五组为UC小鼠模型,其中第二组只喂3%DSS;第三组小鼠喂3%DSS,并于每天同一时间段取1ml双蒸水灌胃;第四组小鼠喂3%DSS,并于每天同一时间段取1ml浓度为4mg/ml的藤梨根水提取物灌胃;第五组小鼠喂3%DSS,并于每天同一时间段取1ml浓度为4mg/ml的藤梨根醇提取物灌胃。观察并记录不同时间段小鼠体重、便血、活动指数等临床病理指标。
对于构建UC小鼠模型,分别用一定浓度的藤梨根水提取物(WE-acRoots)和藤梨根醇提取物(AE-acRoots)处理UC小鼠模型,检测不同时间段小鼠便血、体重等临床指标。参照相关文献,一般是造模10~14天结束实验,当10天后有模型小鼠自然死亡则统一脱颈处死其余小鼠,如在14天后没有小鼠死亡则在第14天统一脱颈处死小鼠,然后解剖并取出小鼠全段结直肠,测定小鼠结直肠长度,如图1至3。
从图1至3结果表明,藤梨根水提取物和藤梨根醇提取物均能显著减少小鼠的体重减轻(图1);减少结肠的缩短(图2)和减少隐血严重程度(图3),因此表明藤梨根水提取物和藤梨根醇提取物对UC具有保护作用。
2、藤梨根提取物对细胞炎症因子的影响
(1)NCM460细胞株处理
采用RPMI 1640 培养基,并在培养基中添加10%胎牛血清(FBS),在含有5% CO2的37℃恒温箱内按实验要求常规培养。将NCM460细胞株接种于12孔板,继续培养24h。
(2)不同浓度的藤梨根提取物制备
取25mg藤梨根水提取物粉末和藤梨根醇提取物粉末分别溶于500μl的DEPC水中,再用0.22μm微孔滤膜过滤以除去菌体、颗粒等杂质;滤液加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基至25ml,即藤梨根水提取物和藤梨根醇提取物的母液浓度为1mg/ml;然后再用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基分别将藤梨根水提取物和藤梨根醇提取物配制成0、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml的终浓度。
分别用不同浓度的藤梨根水提取物(WE-acRoots)和藤梨根醇提取物(AE-acRoots)处理NCM460细胞后,继续培养22h。最后用TNFα诱导细胞炎症,12孔板中每孔加入5μl浓度为10μg/ml的TNFα刺激致炎,2h后取出细胞培养板,将孔板中的上清液转移至新的灭菌1.5ml EP管中。
(3)ELISA检测炎症因子IL-8、IL-17、TNFα的表达
具体如下:
步骤3.1、取出细胞培养板,用灭菌1.5ml EP管收集细胞上清,3000rpm离心10min,转移上清至新的灭菌1.5ml EP 管中,存放于-80℃。
步骤3.2、提前20min将试剂盒平衡至室温,加入ELISA试剂盒自带的稀释液至冻干标准品中,配不同标准品浓度(如0pg/ml,7.8pg/ml,15.6pg/ml,31.25pg/ml,62.5pg/ml,125pg/ml,250pg/ml,500pg/ml),从密封袋中取出试验所需板孔,未用板孔密封好放回4℃保存。
步骤3.3、空白孔加入标准品&ELISA试剂盒的标本通用稀释液,标准品孔加入不同浓度标准品,标本孔加入待测标本,每孔100μl,然后用试剂盒自带的封板胶纸封住反应孔,37℃恒温箱避光孵育90min。
步骤3.4、提前20min用ELISA试剂盒自带的生物素化抗体稀释液将30×浓缩生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液。
步骤3.5、用双蒸水将20×ELISA试剂盒自带的浓缩洗涤液稀释成1×洗涤工作液。在洁净的厚迭吸水纸上拍干孔内液体,往孔内加入350μl 1×洗涤工作液,静置30秒后拍干液体。重复洗板5次。
步骤3.6、空白孔加生物素化抗体稀释液,其余孔加入1×生物素化抗体工作液,每孔100ul,用新封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱避光孵育60min。
步骤3.7、提前20min用ELISA试剂盒自带的酶结合物稀释液将30×浓缩酶结合物稀释成1×酶结合物工作液,避光室温放置。
步骤3.8、按步骤3.5的方法洗板。
步骤3.9、空白孔加入酶结合物稀释液,其余孔加入1×酶结合物工作液,每孔100ul,用新封板胶纸封住反应孔,37℃避光孵育30min。
步骤3.10、提前10min预热酶标仪,设置好检测程序。
步骤3.11、按步骤3.5的方法洗板。
步骤3.12、每孔加入100μl显色底物(TMB),37℃避光孵育 15min。
步骤3.13、每孔加入100μlELISA试剂盒自带的反应终止液,混匀后即刻测量OD450值(3min内)。
步骤3.14、根据标准品的浓度及对应的OD值,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,使用二次多项式方程拟合绘制标准曲线。
步骤3.15、根据标本OD值在标准曲线上计算出相应的标本浓度,得到的数据运用Graphpad prism及SPSS软件进行统计和分析,如图4至6。
从图4至6结果表明,浓度为50μg/ml、100μg/ml和200μg/ml的藤梨根水提取物处理均能显著减少肠道上皮细胞炎症因子IL-8、IL-17和TNFα的分泌;浓度为50μg/ml、100μg/ml和200μg/ml的藤梨根醇提取物处理均能显著减少肠道上皮细胞炎症因子IL-8和TNFα的分泌,因此可以证明藤梨根水提取物和藤梨根醇提取物均具有抑炎效果。
实施例9
藤梨根提取物在治疗溃疡性结肠炎药物中的应用,在实施例8验证了藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果,因此将藤梨根提取物作为原料制备成治疗溃疡性结肠炎的药物,对溃疡性结肠炎也具有相同的抑制作用。
本发明的用药途径为将藤梨根的中药材水煎得到藤梨根提取物,然后口服或者灌肠;或者用药途径为将藤梨根提取物的成品冲服或者溶解后灌肠。
实施例10
藤梨根在治疗溃疡性结肠炎药物中的应用,在实施例8验证了藤梨根提取物对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果,可以确定作为原料的藤梨根同样也对溃疡性结肠炎有明显的抑炎效果。
最后应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (8)

1.藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途;
所述藤梨根提取物为藤梨根水提取物或者藤梨根醇提取物;
所述藤梨根提取物是制备治疗溃疡性结肠炎药物的唯一活性成分。
2.根据权利要求1所述的藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其特征在于:当所述藤梨根提取物为藤梨根水提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8、炎症因子IL-17或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
3.根据权利要求1所述的藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其特征在于:当所述藤梨根提取物为藤梨根醇提取物时,通过降低肠道上皮细胞炎症因子IL-8或者炎症因子TNFα中至少一种的分泌抑制溃疡性结肠炎。
4.根据权利要求1至3任一所述的藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其特征在于:所述藤梨根提取物通过降低结直肠缩短程度,抑制溃疡性结肠炎。
5.根据权利要求1至3任一所述的藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其特征在于:所述藤梨根提取物通过减少隐血产生程度,抑制溃疡性结肠炎。
6.根据权利要求1至3任一所述的藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其特征在于:所述藤梨根提取物通过降低体重减少程度,抑制溃疡性结肠炎。
7.根据权利要求1至3任一所述的藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其特征在于:将所述藤梨根提取物溶于水中,且浓度为20μg/ml~300μg/ml。
8.根据权利要求1至3任一所述的藤梨根提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,其特征在于:用药途径为将藤梨根的中药材水煎得到藤梨根提取物,然后口服或者灌肠;
或者用药途径为将藤梨根提取物的成品冲服或者溶解后灌肠。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101757056A (zh) * 2008-12-23 2010-06-30 首都医科大学 藤梨根提取物及其制备方法与应用
CN104825507A (zh) * 2015-05-07 2015-08-12 中国医科大学附属盛京医院 一种藤梨根提取物及其在制备治疗胆管癌药物中的应用
CN104984204A (zh) * 2015-07-25 2015-10-21 孟根森 一种治疗溃疡性结肠炎的中药

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101757056A (zh) * 2008-12-23 2010-06-30 首都医科大学 藤梨根提取物及其制备方法与应用
CN104825507A (zh) * 2015-05-07 2015-08-12 中国医科大学附属盛京医院 一种藤梨根提取物及其在制备治疗胆管癌药物中的应用
CN104984204A (zh) * 2015-07-25 2015-10-21 孟根森 一种治疗溃疡性结肠炎的中药

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
中医药治疗溃疡性结肠炎的用药组方规律的文献研究;李鹤 等;广州中医药大学学报;第37卷(第01期);176-181 *
沈丕安.《中药药理与临床运用(下册)》.吉林科学技术出版社,2020,(第1版),971、953. *
猕猴桃根药理作用研究;隋艳华 等;贵阳中医学院学报(第01期);51、60-64 *

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