CN116075307A - 作为alk5抑制剂的吡啶并噁嗪氨基衍生物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及抑制转化生长因子‑β(TGF‑β)I型受体(ALK5)的通式(I)的化合物、制备这样的化合物的方法、含有它们的药物组合物及其治疗用途。本发明的化合物可用于治疗哺乳动物中与ALK5信号传递途径的调节异常相关的疾病或病症。
Description
发明领域
本发明总体上涉及抑制转化生长因子β(TGFβ)I型受体(ALK5)的化合物(在下文中ALK5抑制剂)、制备这样的化合物的方法、含有它们的药物组合物及其治疗用途。
本发明的化合物可以用于例如治疗与ALK5信号传递途径相关的许多疾病、障碍或病症。
发明背景
转化生长因子β(TGFβ)是属于TGFβ超家族的一种蛋白。
它参与多个过程，既有细胞过程，诸如增殖、迁移和分化，也有生物学过程，包括伤口愈合、免疫抑制、癌发生和细胞外基质产生。
TGFβ超家族尤其还包括称为激活素(Act)的其它成员(参见例如Hinck AP,FEBSLetters 586(2012)；1860-1870)。
肽的结合通过形成由两种不同的丝氨酸/苏氨酸激酶受体1型(TGFβR1/ALK5)和2型(TGFβR2)组成的异四聚体复合物，启动TGFβ信号传递级联。
TGFβR1/ALK5通过TGFβR2对其细胞内结构域的磷酸化进行募集和活化，进而导致受体活化的(R)-Smad家族的磷酸化，从而导致靶基因转录的活化(参见例如Sheppard D.,Proc Am Thorac Soc.(2006)；(3):413-417)。
类似于TGFβ信号传递，激活素的I型受体ALK4导致靶基因转录的活化(参见例如Heldin CH等人,Cold Spring Harb Perspect Biol.(2016)8月1日；8(8))。
多项研究已经将过度和/或失调的TGFβ活性与包括癌症和纤维化在内的许多疾病联系起来(参见例如Syed V,J Cell Biochem.(2016)6月；117(6):1279-87；JakowlewSB.Cancer Metastasis Rev.(2006)9月；25(3):435-57)。在纤维化障碍中，已经证实TGFβ在器官诸如肺、心脏、肝和肾中的重要作用(参见例如Alhamad EH,J Thorac Dis.(2015)；7(3):386-93)。具体地，TGFβ表达在纤维化肺病(诸如特发性肺纤维化(IPF))和慢性炎性病症(诸如慢性阻塞性肺疾病和哮喘)中增加(参见例如Thomas BJ等人,Am J Respir CellMol Biol.(2016)；(55):759-766)。
在肺中，TGFβ在几种细胞类型中表达，如上皮细胞、内皮细胞、结缔组织细胞、巨噬细胞和成纤维细胞。
这些细胞群体可能在IPF人肺组织中产生过量的TGFβ。此外，已在IPF患者的肺组织和BAL中检测到高水平的TGFβ(参见例如Bergeron A等人,Eur Respir J(2003)；22:69-76)。
已观察到TGFβ基因表达和TGFβ蛋白产生在多种由博来霉素、二氧化硅、石棉和辐射引起的肺纤维化动物模型中增加(参见例如Wei F等人,Int Immunopharmacol.(2017)7月；48:67-75；Choe JY等人,Inflamm Res.(2010)3月；59(3):177-88；Wang X等人,RespirRes(2009)；10,36)，并且还已经报道TGFβ表达如何足以诱导啮齿类动物中的进行性纤维化(参见例如Sime PJ等人,J Clin Invest(1997)；100:768-776；Kim KK等人.)。
相反，通过使用敲除(KO)动物获得的TGFβ信号传递抑制可以通过TGFβ相关机制抑制纤维化发展(参见例如Bonniaud P等人,Am J Respir Crit Care Med(2005)；171:889-898；34)。
在小鼠博来霉素疾病模型中通过TGFβR1的抑制已经获得了类似的结果(参见例如Wei Y等人,J Clin Invest.(2017)；127(10):3675-3688)。
与TGFβ类似，激活素信号传递调节异常与成纤维细胞增殖、肌成纤维细胞分化和细胞外基质(ECM)的积累有关(参见例如Yamashita等人,J.Am.Soc.Nephrol.(2004)15,91-101)。此外，激活素的过表达已经与不同器官诸如肝脏(参见例如Patella等人,Am.J.Physiol.Gastrointest.Liver Physiol.(2006)290,G137-G144)、肾脏(参见例如Agapova等人,Kidney Int.(2016)89,1231-1243)、心脏(参见例如Yndestad等人,Circulation(2004)109,1379-1385)和肺(参见例如de Kretser等人,Crit.Care(2013)17:R263)中的病理状况和纤维化发展关联。
综上所述，这些数据表明靶向ALK5受体在药理学上治疗与失调的TGF信号传递途径相关的上述疾病的重要性。
TGFβ信号传递强烈参与心血管稳态(参见例如van Meeteren LA等人,Springer(2013))。在人类和小鼠中的几项研究已经表明TGFβ在血管生成和血管形态发生中的主要作用。此外，TGFβ在心脏瓣膜的发育和功能中起关键作用。因此，选择性地调节TGFβ途径以靶向病理效应，避免正确稳态所需的信号传递的抑制的重要性是显然的。
这个关键点的答案可以通过使用吸入途径来递送抗TGFβ药物来解决。
吸入途径将允许绕过心脏暴露问题对受影响的肺隔室进行治疗。
在文献中已将多种化合物描述为ALK5和/或ALK4抑制剂。
WO2008/006583、WO2009/087212、WO2009/087224、WO2009/087225、WO2009/133070、WO2009/013335和WO2009/050183(Novartis)分别公开了用于治疗ALK4或ALK5介导的疾病的嘧啶、吡啶、咪唑并吡啶、吡咯并嘧啶和吡咯并吡啶、咪唑并哒嗪、咪唑并吡啶衍生物，它们可用于治疗炎性或阻塞性气道疾病、肺性高血压和肺纤维化。
WO00/61576和US2003/0149277(Smithkline Beecham Corp)公开了作为ALK5抑制剂的三芳基咪唑衍生物，其可用于治疗尤其是肾病、伤口愈合、肾脏疾病、充血性心力衰竭、溃疡、神经功能受损和其中纤维化是一个主要组成部分的任何疾病。
WO01/62756(Smithkline Beecham P.L.C.)公开了作为ALK5抑制剂的吡啶基咪唑衍生物，其可用于治疗尤其是肾病、伤口愈合、肾脏疾病、充血性心力衰竭、溃疡、神经功能受损和其中纤维化是一个主要组成部分的任何疾病。
WO03/087304(Biogen Inc.)公开了作为ALK5和/或ALK4抑制剂的三取代的杂芳基，其可用于治疗尤其是特发性肺纤维化、糖尿病性肾病、肝纤维化、肺纤维化、急性肺损伤、梗塞后心脏纤维化、纤维化癌症和纤维瘤。
WO2013/009140(SK Chemicals Co)公开了作为ALK5和/或ALK4受体的2-吡啶基取代的咪唑衍生物，其可用于治疗尤其是肾、肝或肺纤维化。
吡啶并噁嗪氨基衍生物已经在文献中公开，但不是作为ALK5抑制剂。
WO2018/215668(Glenmark)在其它化合物中公开了作为MAP4K1抑制剂的吡啶并噁嗪氨基衍生物，其中所述氨基基团连接至被取代的芳基环。这些化合物被公开为可用于治疗自身免疫疾病、神经变性疾病、神经学疾病、炎症性疾病、过度增殖性疾病和心血管疾病。
值得注意的是，ALK5受体的抑制可以用于治疗纤维化和由纤维化引起的疾病、障碍和病症。
在过去的几年里，人们做出了一些努力来开发可用于治疗多种疾病的新型ALK5受体抑制剂，那些化合物中的一些在人类中也显示出效力。
但是，仍有潜力开发以良好效能为特征的受体ALK5的抑制剂，其可用于治疗与ALK5信号传递途径的调节异常相关的疾病或病症，特别是纤维化。
具体地，在呼吸领域中仍有潜力开发可用于治疗与ALK5信号传递的调节异常相关的疾病或病症(特别是特发性肺纤维化(IPF))的ALK5受体抑制剂，其将通过吸入途径施用并且以良好的吸入性能为特征，这对应于在肺中的良好活性、良好的肺保留和低代谢稳定性，以最大限度地减少全身暴露和相关的安全性问题。
在这个方向上，我们已经出人意料地发现了一系列新的通式(I)的化合物，它们解决了为通过吸入施用提供有效的ALK5受体抑制剂的问题，同时显示出良好的吸入性能、低代谢稳定性、低全身暴露、提高的安全性和耐受性、以及在激酶组之间的良好选择性。
发明概述
在第一方面，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐
其中
A选自由以下成员组成的集合：A1和A2
X1和X2独立地是C或N；
R1是H或选自由以下成员组成的集合：-NR3R4、-C(O)NR3R5、-NR3C(O)R6和-C(O)OR7；
R2是H或选自由以下成员组成的集合：-C(O)OR3和-C(O)NR3R6；或当X1或X2是N时，R2不存在；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R4是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NRARB、环烷基、任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代的杂环烷基和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C1-C6)烷基和-SO2-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
RA是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
RB选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-C(O)O-(C1-C6)烷基、杂环烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
在第二方面，本发明涉及一种药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐。
在第三方面，本发明涉及式(I)的化合物和药学上可接受的盐，或涉及包含式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于用作药物。
在另一个方面，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，或涉及包含式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于预防和/或治疗哺乳动物中由ALK5信号传递途径介导的疾病、障碍或病症。
在另一个方面，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，或涉及包含式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于预防和/或治疗纤维化和/或涉及纤维化的疾病、障碍或病症。
在另一个方面，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，或涉及包含式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于预防和/或治疗特发性肺纤维化(IPF)。
发明详述
定义
除非另外指出，否则本发明的式(I)的化合物意图也包括其互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂化物。
本文中使用的术语“药学上可接受的盐”表示式(I)的化合物的衍生物，其中如下适当地修饰母体化合物：用常规地认为药学上可接受的任何碱或酸，将可能存在的任何游离的酸性或碱性基团转化成对应的加成盐。
所述盐的合适实例因此可以包括碱性残基诸如氨基基团的无机酸或有机酸加成盐以及酸性残基诸如羧基基团的无机碱或有机碱加成盐。
可以适当地用于制备盐的无机碱的阳离子包括碱金属或碱土金属(诸如钾、钠、钙或镁)的离子。
通过使作为碱起作用的主要化合物与无机酸或有机酸反应以形成盐而得到的那些盐包括，例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、樟脑磺酸、乙酸、草酸、马来酸、富马酸、琥珀酸和柠檬酸的盐。
术语“溶剂化物”是指本发明的化合物与一种或多种溶剂分子(无论是有机的还是无机的)的物理缔合。该物理缔合包括氢键合。在某些情况下，溶剂化物将能够分离，例如，当一种或多种溶剂分子掺入到结晶固体的晶格中时。溶剂化物可包含化学计量的或非化学计量的量的溶剂分子。
术语“互变异构体”表示化合物的两种或更多种异构体中的每一种，所述异构体以平衡状态一起存在并且容易通过分子内的原子或基团的迁移而互换。
本文中使用的术语“卤素”或“卤素原子”或“卤代”包括氟、氯、溴和碘原子。
术语“(Cx-Cy)烷基”(其中x和y是整数)表示具有x至y个碳原子的直链或支链烷基基团。因而，例如，当x是1且y是6时，该术语包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。
术语“(Cx-Cy)亚烷基”(其中x和y是整数)表示共具有两个不饱和价的Cx-Cy烷基残基，诸如二价亚甲基残基。
表述“(Cx-Cy)卤代烷基”(其中x和y是整数)表示上面定义的“Cx-Cy烷基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个卤素原子替代，所述卤素原子可以相同或不同。
所述“(Cx-Cy)卤代烷基”基团的实例因而可以包括卤代、多卤代和全卤代烷基基团，其中所有氢原子被卤素原子替代，例如三氟甲基。
术语“(Cx-Cy)环烷基”(其中x和y是整数)表示含有指定数目的环碳原子的饱和环状烃基。实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。
术语“芳基”表示具有6个环原子的单环碳环系统，其中所述环是芳族环。合适的芳基单环环系统的实例包括例如苯基。
术语“杂芳基”表示含有一个或多个选自S、N和O的杂原子的单环或二环芳族基团，并包括通过共同键稠合的基团，其具有两个这样的单环或一个这样的单环和一个单环芳基环。
术语“(Cx-Cy)杂环烷基”(其中x和y是整数)表示饱和的或部分不饱和的单环(Cx-Cy)环烷基基团，其中至少一个环碳原子被至少一个杂原子(例如N、S或O)替代或可以带有-氧代(＝O)取代基。所述杂环烷基可以进一步任选地在环中的可用位置上，即在碳原子上或在可用于取代的杂原子上被取代。在碳原子上的取代包括螺二取代以及在2个邻近碳原子上的取代，因而在两种情况下形成另外的稠合的5-6元杂环。
术语“(Cx-Cy)羟基烷基”(其中x和y是整数)表示上面定义的“(C1-C6)烷基”基团，其中一个或多个氢原子被一个或多个羟基(OH)基团替代。
贯穿本说明书，星号“*”在结构式的定义中的应用指示残基基团与分子的其余部分的连接点。
不是在2个字母或符号之间的破折号(“-”)意在代表取代基的连接点。
羰基基团在本文中优选地表示为-C(O)-，作为其它常见表示诸如-CO-、-(CO)-或-C(＝O)-的替代。
一般而言，在括号中的基团是侧基，不被包括在链中，并且在认为有用时使用括号来帮助消除直链化学式的歧义；例如磺酰基-SO2-可能也表示为-S(O)2-以消除例如关于亚磺酰基-S(O)O-的歧义。
本发明涉及与本领域至少关于共同的新核心骨架公开的结构不同的新化合物。事实上，本发明涉及作为[2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基衍生物的化合物，其中所述氨基基团连接至吡啶或与5元杂环稠合的吡啶，其为受体ALK5的抑制剂，其具有治疗上期望的特征，对于某些纤维化、包括特发性肺纤维化(IPF)是特别有前途的。
本发明的化合物作为ALK5受体的抑制剂是有活性的，它们是有效的并且表现出改善的性能，诸如良好的吸入性能、低代谢稳定性、低全身暴露、提高的安全性和耐受性和在激酶组之间的良好选择性。
在这方面，现有技术没有描述或暗示本发明的通式(I)的吡啶并噁嗪氨基衍生物对受体ALK5具有抑制活性，这代表对前述需要的解决方案。
更具体地，本发明涉及如下文详述的通式(I)所代表的一系列化合物，其具有对受体ALK5的抑制活性。
有利地，对受体的抑制作用可以有效治疗其中这些受体在发病机制中发挥相关作用的那些疾病，诸如纤维化和由纤维化引起的疾病、障碍和病症。
与现有技术的类似化合物不同，本发明的式(I)的化合物能够作为ALK5受体的抑制剂，在寻找可用于治疗纤维化、特别是特发性肺纤维化的合适且有效的化合物时，特别受到技术人员的关注。
如在实验部分中、特别是在表10中所示，本发明的式(I)的化合物在其对受体ALK5的抑制活性方面表现出显著的效能，在约10nM以下，证实它们能够抑制参与纤维化和由纤维化引起的疾病的ALK5受体。
如在实验部分、对比实施例、特别是在表11中所示，证实了不同于以与吡啶环直接稠合的吡啶并噁嗪环为特征的化合物C1、C2和C3，在特征在于氨基基团作为吡啶并噁嗪环和吡啶或与5元杂环缩合的吡啶之间的连接基的式(I)的化合物中，作为这两个基团之间的连接基的氨基基团的存在显著地且出乎意料地决定了对ALK5受体的抑制活性的相关增加。
有利地，本发明的化合物具有非常高的效能，它们可以与现有技术的化合物相比以更低的剂量施用给人，从而减少在施用较高剂量的药物时通常发生的不良事件。
除了就其对受体ALK5的抑制活性而言显著有效之外，本发明的化合物的特征还在于良好的吸入性能，其允许有效地作用于肺隔室并且同时具有低代谢稳定性，这允许最大限度地减少与全身暴露相关的缺点，诸如安全性和耐受性问题。
如在实验部分、表12中所详述，与血浆(即全身)暴露相比，本发明的化合物显示出更高的肺暴露。
因此，当寻找可用于治疗纤维化、特别是特发性肺纤维化的合适且有效的化合物时，本发明的化合物特别受到技术人员的关注，其通过吸入途径施用并且以良好的吸入性能为特征，其对应于对肺部的良好活性、良好的肺保留和低代谢稳定性，其使全身暴露和相关的安全性问题最小化。
因而，在一个方面，本发明涉及通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐
其中
A选自由以下成员组成的集合：A1和A2
X1和X2独立地是C或N；
R1是H或选自由以下成员组成的集合：-NR3R4、-C(O)NR3R5、-NR3C(O)R6和-C(O)OR7；
R2是H或选自由以下成员组成的集合：-C(O)OR3和-C(O)NR3R6；或当X1或X2是N时，R2不存在；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R4是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NRARB、环烷基、任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代的杂环烷基、和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C1-C6)烷基和-SO2-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
RA是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
RB选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-C(O)O-(C1-C6)烷基、杂环烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
在一个特别优选的实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，其中A是基团A1
其由式(Ia)代表
R1是H或选自由以下成员组成的集合：-NR3R4、-C(O)NR3R5、-NR3C(O)R6和-C(O)OR7；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R4是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NRARB、环烷基、任选地被-(C1-C6)烷基取代的杂环烷基、和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C1-C6)烷基和-SO2-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
RA是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
RB选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-C(O)O-(C1-C6)烷基、杂环烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
根据一个优选的实施方案，本发明涉及在下面表1中列出的式(Ia)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。
表1:优选的式(Ia)的化合物的列表
根据一个甚至更优选的实施方案，本发明涉及式(Ia)的化合物，其中
R1是H或选自由以下成员组成的集合：-C(O)NHR5、-NHC(O)R6和-C(O)OR7；
R5选自由以下成员组成的集合：甲基、2-(甲基氨基)乙基、环丙基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、2-(二甲基氨基)乙基、2-(哌嗪-1-基)乙基、(哌啶-4-基)和2-[双(2-羟基乙基)氨基]乙基；
R6选自由以下成员组成的集合：4-乙基吗啉、1-乙基-4-甲基哌嗪和N,N-二甲基乙胺。
R7是H或选自由以下成员组成的集合：甲基和2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基。
根据一个优选的实施方案，本发明涉及在下面表2中列出的式(Ia)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。这些化合物对受体ALK5特别有活性，如在表10中所示。
表2:优选的式(Ia)的化合物的列表
在一个更优选的实施方案中，本发明涉及式(Ia)的化合物，其中A是A1a
其由式(Iaa)代表
R1是H；
R8如上面所定义。
根据一个优选的实施方案，本发明涉及在下面表3中列出的式(Iaa)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。
表3：优选的式(Iaa)的化合物的列表
在一个更优选的实施方案中，本发明涉及由式(Iaa)代表的式(Ia)的化合物，其中
R1是H；
R8是被氟和氯取代的苯基。
根据一个优选的实施方案，本发明涉及在下面表4中列出的式(Iaa)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。这些化合物对受体ALK5特别有活性，如在表10中所示。
表4：优选的式(Iaa)的化合物的列表
在另一个实施方案中，本发明涉及式(Iaa)的化合物，其中
R1选自由以下成员组成的集合：-NR3R4、-C(O)NR3R5和-NR3C(O)R6；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R4是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
根据一个优选的实施方案，本发明涉及在下面表5中列出的式(Iaa)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。
表5：优选的式(Iaa)的化合物的列表
在一个进一步更优选的实施方案中，本发明涉及式(Iaa)的化合物，其中
R1是-NHC(O)R6；
R6选自由以下成员组成的集合：4-乙基吗啉、1-乙基-4-甲基哌嗪和N,N-二甲基乙胺。
根据优选的实施方案，本发明涉及在下面表6中列出的式(Iaa)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。这些化合物对受体ALK5特别有活性，如在表10中所示。
表6：优选的式(Iaa)的化合物的列表
在一个进一步优选的实施方案中，本发明涉及式(Ia)的化合物，其中A是A1b
其由式(Iab)代表
R1选自由以下成员组成的集合：-NR3R4、-C(O)NR3R5、-NR3C(O)R6和-C(O)OR7；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R4是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NRARB、环烷基、任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代的杂环烷基、和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C1-C6)烷基和-SO2-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
RA是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
RB选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-C(O)O-(C1-C6)烷基、杂环烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
根据优选的实施方案，本发明涉及在下面表7中列出的式(Iab)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。
表7：优选的式(Iab)的化合物的列表
在一个更优选的实施方案中，本发明涉及式(Iab)的化合物，其中
R1选自由以下成员组成的集合：-C(O)NR3R5和-C(O)OR7；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NRARB、环烷基、任选地被-(C1-C6)烷基取代的杂环烷基、和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
RA是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
RB选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基。在甚至更优选的实施方案中，本发明涉及式(Iab)的化合物，其中
R1选自由以下成员组成的集合：-C(O)NHR5和-C(O)OR7；
R5选自由以下成员组成的集合：甲基、2-(甲基氨基)乙基、环丙基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、2-(二甲基氨基)乙基、2-(哌嗪-1-基)乙基、(哌啶-4-基)、1-甲基哌啶-4-基和2-[双(2-羟基乙基)氨基]乙基；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：甲基和2-(哌嗪-1-基)乙基。
根据一个优选的实施方案，本发明涉及在下面表8中列出的式(Iab)的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。这些化合物对受体ALK5特别有活性，如在表10中所示。
表8：优选的式(Iab)的化合物的列表
在一个同样优选的实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，其中A是基团A2
其由式(Ib)代表
X1和X2独立地是C或N；
R2是H或选自由以下成员组成的集合：-C(O)OR3和-C(O)NR3R6；或当X1或X2是N时，R2不存在；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
根据一个甚至更优选的实施方案，本发明涉及在下面表9中列出的由式(Ib)代表的化合物及其药学上可接受的盐中的至少一种。这些化合物对受体ALK5特别有活性，如在表10中所示。
表9：优选的式(Ib)的化合物的列表
在一个甚至更优选的实施方案中，本发明涉及式(Ib)的化合物，其中A是基团A2a
其由式(Iba)代表
其中
X2是CH或N；
R2是H或选自由以下成员组成的集合：-C(O)OR3和-C(O)NR3R6；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代。
在一个甚至更优选的实施方案中，本发明涉及式(Iba)的化合物，其中
R2是H；
X2是CH。
在另一个甚至更优选的实施方案中，本发明涉及式(Iba)的化合物，其中
X2是CH；
R6选自由以下成员组成的集合：2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基和2-(二甲基氨基)乙基。
在一个进一步更优选的实施方案中，本发明涉及式(Ib)的化合物，其中A是A2b
其由式(Ibb)代表
其中
R2是H或-C(O)OR3；
R3是H或甲基。
在另一个优选的实施方案中，R8选自由以下成员组成的集合：任选地被一个或多个选自氟、氯和甲基的基团取代的苯基，和任选地被一个或多个选自甲基和氯的基团取代的吡啶基。
本发明的化合物，包括上文列出的所有化合物，可以使用下述一般方法和操作或通过使用本领域普通技术人员容易得到的略微修改的方法从容易得到的起始材料制备。尽管本文显示或描述了本发明的特定实施方案，但是本领域技术人员会认识到，使用本文所述的方法或通过使用其它已知的方法、试剂和起始材料，可以得到本发明的所有实施方案或方面。当给出典型的或优选的工艺条件(即反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压强等)时，也可以使用其它工艺条件，除非另有说明。尽管最适反应条件可以随使用的特定反应物或溶剂而改变，但是这样的条件可以由本领域技术人员通过常规优化操作容易地确定。
因此，下文描述的和在以下方案中报道的方法不应当视作限制可用于制备本发明的化合物的合成方法的范围。
在某些情况下，需要一个步骤来掩蔽或保护敏感或反应性部分，根据一般化学原理，可以采用通常已知的保护基团(PG)(Protective group in organic syntheses，第3版T.W.Greene,P.G.M.Wuts)。
已经令人惊讶地发现本发明的式(I)的化合物有效地抑制受体ALK5。有利地，ALK5的抑制可以导致其中涉及ALK5信号传递的疾病或病症的有效治疗。
在这方面，现在已经发现，如在本实验部分中所示，本发明的式(I)的化合物具有低于或等于10nM的对ALK5的以半数最大抑制浓度(IC50)表示的抑制药物效能。
优选地，本发明的化合物对ALK5具有在5至10nM之间的IC50。
甚至更优选地，本发明的化合物对ALK5具有低于1nM的IC50。
在一个方面，本发明涉及用于用作药物的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。因此，本发明涉及式(I)的化合物在药物制备中的应用，所述药物优选用于预防和/或治疗与失调的ALK5信号传递途径相关的疾病、障碍或病症。
在一个优选的实施方案中，本发明涉及用于预防和/或治疗与失调的ALK5信号传递途径相关的疾病、障碍或病症的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本发明涉及可用于预防和/或治疗纤维化和/或涉及纤维化的疾病、障碍或病症的式(I)的化合物。
本文中使用的术语“纤维化”或“纤维化障碍”表示与细胞和/或纤连蛋白和/或胶原的异常积累和/或增加的成纤维细胞募集相关的病症，并且包括但不限于各个器官或组织(诸如心脏、肾、肝、关节、肺、胸膜组织、腹膜组织、皮肤、角膜、视网膜、肌肉骨骼和消化道)的纤维化。
优选地，本发明的式(I)的化合物或包含式(I)的化合物的药物组合物可用于治疗和/或预防纤维化诸如肺纤维化、特发性肺纤维化(IPF)、肝纤维化、肾纤维化、眼纤维化、心脏纤维化、动脉纤维化和系统性硬化症。
更优选地，本发明的式(I)的化合物或包含式(I)的化合物的药物组合物可用于治疗特发性肺纤维化(IPF)。
如本文中使用的，关于式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其它药学活性剂的“安全且有效的量”是指这样的化合物的量：其足以治疗患者的病症，但是足够低以避免严重的副作用，并且它可以由熟练的技术人员常规地确定。
可以将式(I)的化合物施用一次或根据一个定量施用方案施用，其中在给定的时间段内以不同的时间间隔施用多个剂量。典型的每日剂量可能会随所选的施用途径而变化。
本发明也涉及一种药物组合物，其包含与至少一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的式(I)的化合物。
在一个实施方案中，本发明涉及与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的式(I)的化合物的药物组合物，例如在以下文献中描述的那些：Remington’sPharmaceutical Sciences Handbook,XVII编，Mack Pub.,N.Y.，美国。
可以根据患者需要完成本发明的化合物及其药物组合物的施用，例如，口服、经鼻、胃肠外(皮下、静脉内、肌肉内、胸骨内和通过输注)和通过吸入。
优选地，口服或通过吸入施用本发明的化合物。
更优选地，通过吸入施用本发明的化合物。
在一个优选的实施方案中，包含式(I)的化合物的药物组合物是固体口服剂型诸如片剂、囊形片、胶囊剂、囊片、颗粒剂、锭剂和整装粉剂。
在一个实施方案中，包含式(I)的化合物的药物组合物是片剂。
本发明的化合物可以单独施用或与各种药学上可接受的载体、稀释剂(诸如蔗糖、甘露醇、乳糖、淀粉)和已知赋形剂组合，所述赋形剂包括助悬剂、增溶剂、缓冲剂、粘合剂、崩解剂、防腐剂、着色剂、调味剂、润滑剂等。
在另一个实施方案中，包含式(I)的化合物的药物组合物是液体口服剂型诸如水性和非水性溶液、乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。这样的液体剂型还可以含有合适的已知的惰性稀释剂诸如水和合适的已知的赋形剂诸如防腐剂、润湿剂、甜味剂、调味剂、以及用于乳化和/或悬浮本发明的化合物的试剂。
在另一个实施方案中，包含式(I)的化合物的药物组合物是可吸入制品诸如可吸入的粉剂、含有抛射剂的定量气雾剂或不含抛射剂的可吸入制剂。
对于作为干粉施用，可以使用根据现有技术已知的单或多剂量吸入器。在该情况下，该粉末可以填充在明胶、塑料或其它胶囊、药芯或泡罩包装中或在储器中。
对本发明的化合物呈化学惰性的稀释剂或载体，例如乳糖或任何其它适用于改善可吸入分数的添加剂可以添加到本发明的粉状化合物中。
包含抛射剂气体(如氢氟烷烃)的吸入气雾剂可以包含溶液或分散形式的本发明的化合物。抛射剂驱动的制剂还可以包含其它成分，例如共溶剂、稳定剂或任选的其它赋形剂。
包含本发明化合物的不含抛射剂的可吸入制剂可以是在水性、醇性或水醇性介质中的溶液或悬浮液形式，并且它们可以通过现有技术已知的喷射或超声雾化器或通过软雾雾化器递送。
本发明的化合物可以作为唯一的活性剂施用，或与其它药物活性成分联合施用。
本发明的化合物的剂量取决于多种因素，尤其包括要治疗的具体疾病、症状的严重性、施用途径等。
本发明还涉及包含药物组合物的装置，所述药物组合物包含根据本发明的式(I)的化合物，所述装置呈单次剂量或多次剂量干粉吸入器或计量剂量吸入器的形式。
上文关于式(I)的化合物描述的所有优选基团或实施方案可以彼此组合且在细节上做必要的修正后同样适用。
式(I)的化合物，包括所有化合物或上文所列的至少一种化合物，通常可以根据下面所示方案中详细描述的程序使用通常已知的方法制备。
方案1
在本发明的一个实施方案中，从商购可得的化合物(II)开始，可以如在方案1中所述制备式(I)的化合物。
在有Pd催化剂存在下，通过交叉偶联反应，诸如Suzuki或Stille交叉偶联，可以从化合物(II)制备化合物(III)，其中R8如上面所定义。典型的Suzuki条件包括：在有Pd催化剂(诸如Pd(dppf)Cl2)存在下，在溶剂(诸如1,4-二氧杂环己烷和水)的混合物中，在适当的温度，诸如例如100℃下，使化合物(II)与合适的硼酸反应。典型的Stille交叉偶联条件包括：在有Pd催化剂(诸如Pd(PPh3)4)存在下，在合适的溶剂(诸如甲苯)中，和在适当的温度，例如100℃下，使化合物(II)与合适的有机锡试剂反应。在某些情况下，例如其中R8是杂芳基，在有合适的碱(诸如N,N-二异丙基乙胺)存在下，在合适的溶剂(诸如DCM)中，使用例如氯甲基甲基醚，通过OH基团作为MOM(甲氧基甲基)的保护步骤，可以进行交叉偶联。除去MOM基团的典型去保护条件包括：在合适的溶剂(诸如DCM)中，在适当的温度，诸如在室温，用酸(诸如TFA)处理。
在有甲醇钠存在下，在溶剂如例如甲醇中，在低温如例如0℃下，通过使用例如溴进行溴化，可以从化合物(III)制备化合物(IV)。
通过在作为溶剂的MeOH和干燥THF中使用例如硼氢化钠和氯化镍(II)六水合物还原硝基，可以从化合物(IV)制备化合物(V)。
使用一步程序(方法A)，借助于烷化剂例如1,2-二溴乙烷，在有碱(例如碳酸钾)存在下，在溶剂(例如DMF)中，在例如80℃的温度下，可以从式(V)的化合物制备式(VI)的化合物。供选择地，使用两步烷基化/环化顺序(方法B)可以制备式(VI)的化合物。典型的烷基化条件包括：在有碱(诸如碳酸钾)存在下，在合适的溶剂(诸如DMF)中和在适当的温度，诸如例如在室温下，使式(V)的化合物与合适的烷化剂(诸如1-溴-2-氯乙烷)反应。可以进行随后分子内环化，例如，在有氢化钠存在下，在合适的溶剂(诸如DMF)中，和在适当的温度，例如从0℃至室温进行。
在标准Buchwald-Hartwig胺化条件下，例如在有碱(例如叔丁醇钠)、配体试剂(例如Xantphos)和催化剂(例如Pd2(dba)3)存在下，在溶剂如1,4-二氧杂环己烷中，和在例如90℃的温度下，可以从式(VI)的化合物制备式(I)的化合物。
供选择地，在有碱(诸如双(三甲基甲硅烷基)氨基锂)存在下，在合适的溶剂(诸如THF)中，使用二碳酸二叔丁酯(Boc酸酐,Boc2O)保护式(VI)的化合物的氮作为叔丁氧基羰基(Boc)，提供式(VII)的化合物。使用例如上述的典型Buchwald-Hartwig条件，可以实现胺在式(VII)的化合物上的引入。最后，在酸性条件(诸如例如，HCl在1,4-二氧杂环己烷和MeOH中的溶液)下在室温除去Boc保护基团，得到式(I)的化合物。
在另一个实施方案中，可以如在方案2中所述制备式(I)的化合物。
方案2
通过在溶剂(例如干燥MeOH和干燥THF)的混合物中在例如0℃的温度下使用例如硼氢化钠和氯化镍(II)六水合物还原硝基，可以从商购可得的4,6-二溴-2-硝基吡啶-3-醇(IX)制备化合物(X)。
通过在有碱(例如碳酸钾)存在下在干燥DMF中用1-溴-2-氯乙烷烷基化化合物(X)，可以制备化合物(XI)。
在有氢化钠存在下，在溶剂(例如DMF)中，在例如从0℃至室温的温度下，通过化合物(XI)的分子内环化，可以制备化合物(XII)。
通过在有碱(例如双(三甲基甲硅烷基)氨基锂)存在下在溶剂(例如THF)中使用二碳酸二叔丁酯(Boc酸酐,Boc2O)保护氮，可以从化合物(XII)制备式(XIII)的化合物。
使用有机锡试剂，在有Pd催化剂(例如Pd(PPh3)4)存在下，在溶剂(例如甲苯)中在例如100℃的温度下，通过使化合物(XIII)在交叉偶联反应(例如Stille交叉偶联)中反应，可以制备式(VII)的化合物。在某些情况下，可以观察到位置异构体的混合物，并且通过硅胶快速色谱法或本领域技术人员众所周知的其它方法分离不希望的化合物。
在有碱(例如磷酸三钾)、配体试剂(例如Xantphos)和催化剂(例如Pd2(dba)3)存在下，在溶剂(例如1,4-二氧杂环己烷)中，在例如120℃的温度下，通过Buchwald-Hartwig胺化反应，可以从式(VII)的化合物制备式(VIII)的化合物。
在酸性条件下，例如，在HCl于1,4-二氧杂环己烷和MeOH中的溶液中，在室温下，通过除去Boc保护基团可以制备式(I)的化合物。
在有碱(例如磷酸三钾)、配体试剂(例如Xantphos)和催化剂(例如Pd2(dba)3)存在下，在溶剂(例如1,4-二氧杂环己烷)中，在例如120℃的温度下，通过在Buchwald-Hartwig胺化条件下使式(XIII)的化合物反应并分离不希望的位置异构体，可以制备式(XIV)的化合物。
通过在有Pd催化剂(例如Pd(PPh3)4)存在下在溶剂(例如1,2-二甲氧基乙烷和水)的混合物中在例如70℃的温度下与硼酸反应，通过Suzuki交叉偶联可以从式(XIV)的化合物制备式(VIII)的化合物。典型的Stille交叉偶联条件包括：在有Pd催化剂(诸如Pd(PPh3)4)存在下，在合适的溶剂或溶剂(诸如甲苯和DMF)的混合物中，在适当的温度，例如100℃下，使式(XIV)的化合物与合适的有机锡试剂反应。
可以如上所述从化合物(VIII)制备式(I)的化合物。
在某些实施方案中，可以如在方案3中所述制备通式(I)的化合物。
方案3
在有碱(例如碳酸铯)、配体试剂(例如Xantphos)和催化剂(例如Pd2(dba)3)存在下，在溶剂(例如1,4-二氧杂环己烷)中，在例如100℃的温度下，在Buchwald-Hartwig交叉偶联条件下使式(VII)的化合物与Teoc-NH2(XV，氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯)反应，可以制备式(XVI)的化合物。
通过使用氟化铯在DMF中对Teoc(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基)的选择性切割，可以制备式(XVII)的化合物。
在有碱(例如碳酸铯)、配体试剂(例如Xantphos)和催化剂(例如Pd2(dba)3)存在下，在溶剂(例如1,4-二氧杂环己烷)中，在例如100℃的温度下，在Buchwald-Hartwig交叉偶联条件下使式(XVII)的化合物与杂芳基卤反应，可以制备通式(VIII)的化合物。
通过在酸性条件(例如，HCl在1,4-二氧杂环己烷和MeOH中的溶液)下在室温下除去保护基团，可以从化合物(VIII)制备式(I)的化合物。
在另一个方面，本发明涉及式(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(XIV)、(XVI)和(XII)的化合物作为中间体在上述式(I)的化合物的制备中的用途。
通过以下实施例举例说明本申请描述的发明的各个方面，并不意图以任何方式限制本发明。
中间体和实施例的制备
使用Structure To Name Enterprise 10.0 Cambridge软件产生化合物的化学名称。
所有在实验部分中没有描述其合成的试剂是商购可得的，或是已知的化合物，或可以由本领域技术人员通过已知的方法从已知的化合物形成。
在随后的程序中，一些起始材料通过“中间体”或“实施例”编号标识，并在步骤编号上指明。这仅仅为了辅助化学技术人员而提供。
“类似”或“类似的”程序是指这样的程序可能包含微小变化，例如反应温度、试剂/溶剂量、反应时间、后处理条件或色谱纯化条件。
缩写-含义
Cs2CO3＝碳酸铯
CsF＝氟化铯
DCM＝二氯甲烷
DIPEA＝N,N-二异丙基乙胺
DME＝1,2-二甲氧基乙烷
DMF＝二甲基甲酰胺
DMSO＝二甲基亚砜
DTBPF＝1,1′-双(二叔丁基膦基)二茂铁
EtOAc＝乙酸乙酯
FC＝快速色谱法
h＝小时
hrs＝小时
HATU＝1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐
HCl＝盐酸
HCOOH＝甲酸
K2CO3＝碳酸钾
KF＝氟化钾
K3PO4＝三磷酸钾
LC-MS＝液相色谱法/质谱法
MeCN＝乙腈
MeOH＝甲醇
N2＝氮气
NaOH＝氢氧化钠
Na2SO4＝硫酸钠
Na2CO3＝碳酸钠
NH4Cl＝氯化铵
NH4OH＝氢氧化铵
NBS＝N-溴代琥珀酰亚胺
Pd/C＝钯碳
Pd2(dba)3＝三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd(dppf)Cl2 DCM＝[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷的复合物
Pd(PPh3)4＝四(三苯基膦)钯(0)
PL-HCO3＝聚合物支持的碳酸氢盐
PLS＝平行液体合成仪
PPh3＝三苯基膦
RT＝室温
Sat.＝饱和的
SCX＝强阳离子交换
SPE＝固相萃取
tBu＝叔丁基
TEA＝三乙胺
TFA＝三氟乙酸
THF＝四氢呋喃
Xantphos＝4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨
XPhos Pd G2＝氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)
一般实验细节和方法
分析方法
用于分析的器械、材料和方法
在400MHZ(质子频率)下运行的Varian MR-400波谱仪上、或在AgilentVNMRS-500上或在Bruker Avance 400波谱仪上进行1H-NMR谱，所述Varian MR-400波谱仪配有：用于反向检测的自屏蔽Z-梯度线圈5mm 1H/nX宽带探头，氘数字锁定通道单元，具有发射器偏频位移的正交数字检测单元。将化学位移报告为相对于作为内部标准品的三甲基硅烷(TMS)的以ppm为单位的δ值。将偶合常数(J值)以赫兹(Hz)为单位给出，并使用以下缩写报告多重性(br＝宽信号，s＝单峰，d＝双峰，dd＝双二重峰，ddd＝双二重峰的二重峰，t＝三重峰，dt＝双三重峰，ddt＝双三重峰的二重峰，td＝三二重峰，q＝四重峰，qd＝四二重峰，m＝多重峰)。
LC/UV/MS分析方法
估计LC/MS保留时间受+0.5分钟的实验误差影响。可以在以下条件下记录LCMS：二极管阵列DAD色谱迹线、质量色谱图和质谱图可以在与Micromass ZQTM或Waters SQD单四极杆质谱仪(以正和/或负电子喷雾ES电离模式运行)偶联的UPLC/PDA/MS AcquityTM系统和/或与ZQTM单四极杆(以正和/或负ES电离模式运行)偶联的以分析模式使用的Fractionlynx系统上获取。在低pH条件下或在高pH条件下使用的运行的质量控制方法：
方法1，低pH条件：柱:Acquity CSH C18 2.1x50mm 1.7um，柱温度为40℃；流动相溶剂A为milliQ水+0.1％ HCOOH，流动相溶剂B MeCN+0.1％ HCOOH。流速为1mL/min。
梯度表为t＝0min 97％ A 3％ B，t＝1.5min 0.1％ A 99.9％ B，t＝1.9min0.1％ A 99.9％ B和t＝2min 97％ A 3％ B。紫外检测范围为210-350nm且ES+/ES-范围为100-1500AMU。
方法2，高pH条件:柱:Acquity Kinetex 1.7um EVO C18 100A,2.1x50mm，柱温度为40℃；流动相溶剂A为10mM的NH4HCO3水溶液，用氨调至pH＝10，流动相溶剂B MeCN。流速为1mL/min。梯度表为t＝0min 97％ A 3％ B，t＝1.5min 0.1％ A 99.9％ B，t＝1.9min0.1％ A 99.9％ B和t＝2min 97％ A 3％ B。紫外检测范围为210-350nm且ES+/ES-范围为100-1500AMU。
中间体的制备
中间体1:6-(5-氯-2-氟苯基)-2-硝基吡啶-3-醇
方法A
将6-溴-2-硝基吡啶-3-醇(2.0g,9.13mmol)、5-氯-2-氟苯基硼酸(2.4g,13.7mmol)、K3PO4(5.8g,27.4mmol)和XPhos Pd G2(0.36g,0.46mmol)的混合物溶解在THF/水(48mL,3:1比率)中。将混合物脱气，然后在室温搅拌过夜。将反应物在EtOAc和酸化的盐水之间分配。将有机相分离，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至50％的DCM在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色固体的6-(5-氯-2-氟苯基)-2-硝基吡啶-3-醇(1.47g,5.49mmol,60％收率)。
方法B
将6-溴-2-硝基吡啶-3-醇(1.00g,4.57mmol)、5-氯-2-氟苯基硼酸(0.96g,5.48mmol)、Na2CO3(1.45g,13.70mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(0.56g,0.68mmol)的混合物溶解在1,4-二氧杂环己烷/水(45mL,2:1比率)中。将混合物脱气，然后在100℃加热1.5小时。将反应物用EtOAc稀释，通过
垫过滤，用EtOAc洗涤。将滤液用酸化的盐水洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下蒸发。将残余物通过FC在Biotage硅胶上(100％环己烷，然后100％的DCM作为洗脱液)纯化，提供作为黄色固体的中间体1(1.05g,3.91mmol,86％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):269.0(方法1)
中间体2:4-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2-硝基吡啶-3-醇
方法A
向中间体1(1.47g,5.48mmol)和DIPEA(1.16mL,5.23mmol)在DCM(30mL)中的溶液中加入NBS(1.17g,6.58mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。加入另外的NBS(1g,5.62mmol)并继续搅拌4.5小时。然后，将混合物在减压下浓缩，悬浮于最小量的DCM中并过滤。将固体收集并在高真空下干燥以提供作为黄色固体的4-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2-硝基吡啶-3-醇(0.536g,1.54mmol,28％收率)。将滤液在减压下浓缩并将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(0-100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。将纯级分蒸发以提供作为橙色固体的第二批标题化合物(0.8g,2.38mmol,11％)。
方法B
向冰冷却的中间体1(5.49g,20.42mmol)在干燥MeOH(100mL)中的悬浮液中加入甲醇钠(约25％在MeOH中的溶液,5.6mL,24.51mmol)，并且悬浮液变成黄色溶液。然后逐滴加入分子溴(1.26mL,24.51mmol)。溶液变成悬浮液并将混合物在0℃搅拌45min。将混合物用水淬灭，然后用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机层用10％ Na2S2O3水溶液(2x)和盐水(1x)洗涤，通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质用EtOAc溶解并将得到的沉淀物过滤并在高真空下干燥，得到作为橙色固体的4-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2-硝基吡啶-3-醇(4.03g,11.61mmol,57％收率)。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M-1):344.9(方法1)
中间体3:2-氨基-4-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)吡啶-3-醇
向冰冷却的4-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2-硝基吡啶-3-醇(中间体2,1.10g,3.17mmol)在干燥MeOH和干燥THF的混合物(30mL,1:1比率)中的溶液中，先后加入氯化镍(II)六水合物(0.15g,0.63mmol)和硼氢化钠(0.24g,6.3mmol)。将反应物在0℃搅拌30min。将混合物用水淬灭并允许达到室温。使用2N HCl水溶液将pH调至3-4，并将混合物用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，通过相分离器过滤并在真空下蒸发。将残余物溶解在MeOH中并加载到SCX柱(10g)上，用MeOH洗涤，然后用2N的氨在MeOH中的溶液洗脱。将适当的级分蒸发以提供作为棕色固体的中间体3(0.53g,1.68mmol,53％收率)。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):316.9(方法1)
中间体4:4-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-3-(2-氯乙氧基)吡啶-2-胺
向中间体3(532mg,1.68mmol)和K2CO3(463mg,3.35mmol)在干燥DMF(9.3mL)中的混合物中加入1-溴-2-氯乙烷(209μL,2.51mmol)，并将反应物在室温搅拌过夜。将混合物用EtOAc稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将残余物通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，以提供作为无色油的标题化合物(425mg,1.12mmol,67％收率)，其缓慢地固化。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):378.9(方法1)
中间体5:8-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪
方法A
将中间体3(0.53g,1.68mmol)和K2CO3(1.86g,13.43mmol)悬浮于干燥DMF(55mL)中，然后加入1,2-二溴乙烷(0.43mL,5.04mmol)，并将混合物在80℃搅拌过夜。将反应物用EtOAc稀释，并用盐水洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至100％的MeCN+0.1％ HCOOH在水中的溶液+0.1％HCOOH作为洗脱液)纯化，提供中间体5(0.16g,0.48mmol,29％收率)。
方法B
在N2气氛下，将中间体4(410mg,1.08mmol)在干燥DMF(9mL)中的溶液逐滴加入冰冷却的氢化钠(60％的在矿物油中的分散体,56mg,1.40mmol)在干燥DMF(1mL)中的悬浮液中。显示黄色。允许混合物达到室温并搅拌30min。将反应物再次冷却至0℃，用水淬灭并用EtOAc稀释。将各相分离并将有机层用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水洗涤，通过相分离器过滤并在真空下浓缩，提供作为淡黄色固体的中间体5(380mg，回收率假定定量)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):342.9(方法1)
中间体6:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯
将中间体5(70mg,0.20mmol)、Pd2(dba)3(11.2mg,0.01mmol)、叔丁醇钠(24.5mg,0.25mmol)和Xantphos(14.2mg,0.02mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(2mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后加入4-氨基吡啶-3-甲酸甲酯(37.2mg,0.24mmol)，并将混合物在封闭管形瓶中在PLS中在90℃摇动30min。进行第二次试剂添加：Pd2(dba)3(11.2mg,0.01mmol)、叔丁醇钠(245mg,0.25mmol)、Xantphos(14.2mg,0.02mmol)和4-氨基吡啶-3-甲酸甲酯(37.2mg,0.24mmol)，并将混合物在90℃在PLS中摇动另外30min。将混合物过滤，将滤液在减压下浓缩，并将残余物溶解在EtOAc中，用盐水洗涤，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至35％的MeCN+0.1％ HCOOH在水中的溶液+0.1％ HCOOH作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色固体的中间体6(30mg,0.07mmol,36％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):415.1(方法1)
中间体7:N-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]-2-硝基吡啶-4-胺
将中间体5(50mg,0.14mmol)、叔丁醇钠(32.8mg,0.34mmol)、Pd2(dba)3(19.0mg,0.04mmol)和Xantphos(15mg,0.02mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(1mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后加入2-硝基吡啶-4-胺(45.7mg,0.330mmol)，并将混合物在90℃摇动1h。将混合物在
垫上过滤，并将滤饼用EtOAc洗涤。将有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至40％的MeCN+0.1％HCOOH在水中的溶液+0.1％ HCOOH作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色固体的中间体7(19mg,0.05mmol,35％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):402.1(方法1)
中间体8:2-氨基-4,6-二溴吡啶-3-醇
向冰冷却的4,6-二溴-2-硝基吡啶-3-醇(3.50g,11.75mmol)和氯化镍(II)六水合物(0.56g,2.35mmol)在干燥MeOH和干燥THF的混合物(60mL,1:1比率)中的溶液中，分批加入硼氢化钠(1.78g,47mmol)。将反应物在0℃搅拌30min。将混合物用冷水淬灭并使用3NHCl水溶液将pH调至4-5，并用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并在真空下蒸发，提供中间体8(2.70g,10.08mmol,86％收率)，将其不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):266.9(方法1)
中间体9:4,6-二溴-3-(2-氯乙氧基)吡啶-2-胺
将K2CO3(2.27g,16.42mmol)加入中间体8(2.20g,8.21mmol)在干燥DMF中的搅拌溶液中。将混合物在室温搅拌10min，然后加入1-溴-2-氯乙烷(1.77g,12.32mmol)。将反应物在室温搅拌20小时，然后将它倒入5％冰冷的柠檬酸水溶液中，并用EtOAc萃取。将有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥并在真空下浓缩。将残余物通过FC在Biotage硅胶上(20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供标题化合物(1.95g,5.90mmol,72％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):328.9(方法1)
中间体10:6,8-二溴-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪
在N2气氛下，将中间体9(1.95g,5.67mmol)在干燥DMF(35mL)中的溶液逐滴加入冰冷却的氢化钠(60％的在矿物油中的分散体,0.30g,7.37mmol)在干燥DMF(5mL)中的搅拌混合物中。一旦加入结束，将反应物在室温温热并搅拌2小时，然后将它倒入5％冰冷的柠檬酸水溶液中，并用EtOAc萃取。将有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥并在真空下浓缩，提供中间体10(1.63g,5.55mmol,98％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):292.9(方法1)
中间体11:6,8-二溴-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在N2气氛下，将双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M的在THF中的溶液，3.5mL,3.53mmol)逐滴加入冰冷却的6,8-二溴-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪(中间体10,910mg,2.94mmol)在干燥THF(29mL)中的搅拌溶液中。5min以后，加入二碳酸二叔丁酯(770mg,3.53mmol)。使反应物达到室温并搅拌1h。将混合物倒入冰冷的NH4Cl水溶液中，并用EtOAc萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥并在减压下蒸发，提供中间体12(1.0g,2.54mmol,86％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):392.9(方法2)
中间体12:8-溴-6-(4-甲基-1,3-噻唑-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体11(300mg,0.76mmol)和4-甲基-2-(三丁基甲锡烷基)-1,3-噻唑(325mg,0.84mmol)在干燥甲苯(6mL)中的混合物通过N2鼓泡脱气，然后加入Pd(PPh3)4(88.0mg,0.08mmol)。将瓶密封并在100℃加热6小时。在真空下除去挥发物。将残余物质重新悬浮在Et2O和1N KF水溶液的混合物中并在室温剧烈搅拌2小时。将混合物通过
垫过滤，然后将有机层分离，经Na2SO4干燥并在减压下蒸发。将残余物质通过FC在Biotage硅胶上(10％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供中间体12(70mg,0.17mmol,22％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):412.0(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.96(s,1H),7.34-7.40(m,1H),4.42(t,J＝4.7Hz,2H),3.88-3.92(m,2H),2.39-2.44(m,3H),1.45-1.57(m,9H)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.93(s,1H),7.59-7.61(m,1H),4.49-4.55(m,2H),3.92-3.96(m,2H),2.47(d,J＝0.8Hz,3H),1.50(s,9H)。
中间体13:6-(4-甲基-1,3-噻唑-2-基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体12(70mg,0.17mmol)、K3PO4(73.1mg,0.34mmol)、吡啶-4-胺(17.6mg,0.19mmol)、Pd2(dba)3(15.6mg,0.02mmol)和Xantphos(14.7mg,0.03mmol)在1,4-二氧杂环己烷(3mL)中的混合物通过N2鼓泡脱气。然后将瓶密封并进行在140℃的微波循环2.5小时。冷却后，将混合物在
垫上过滤，用EtOAc洗涤。将滤液在真空下蒸发，并将残余物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供中间体13(25mg,0.06mmol,35％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):426.2(方法2)
中间体14:6-溴-3-(甲氧基甲氧基)-2-硝基吡啶
向冰冷却的6-溴-2-硝基吡啶-3-醇(5.0g,22.83mmol)在干燥DCM(125mL)中的搅拌溶液中逐滴加入DIPEA(8.0mL,57.08mmol)，随后逐滴加入氯甲基甲基醚(3.12mL,41.1mmol)。将混合物在0℃搅拌40min。将反应物用DCM稀释，转移进分液漏斗中，并用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过在Biotage silica-NH上的FC(从0％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，以产生作为黄色油的中间体14(5.98g,22.75mmol,99％收率)，其缓慢地固化。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):263.1(方法1)
中间体15:5-(甲氧基甲氧基)-6'-甲基-6-硝基-2,2'-联吡啶
将中间体14(3.0g,11.4mmol)和Pd(PPh3)4(1.3g,1.14mmol)溶解在甲苯(114mL)中并将混合物脱气(真空/N2)，然后加入2-甲基-6-(三丁基甲锡烷基)吡啶(5.2g,13.69mmol)。将反应物在100℃搅拌10小时。在真空下除去挥发物，将残余物用EtOAc(30mL)溶解并加入KF。将混合物在室温搅拌过夜。将悬浮液过滤，将滤液在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从5％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为黄色固体的中间体15(3.04g,11.04mmol,97％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):276.2(方法1)
中间体16:6'-甲基-6-硝基-[2,2'-联吡啶]-5-醇
将中间体15(3.04g,11.04mmol)在DCM/TFA混合物(110mL,9:1比率)中的溶液在室温搅拌2小时。在真空下除去挥发物，并将粗制物质通过SCX(10g，用MeOH洗涤，并用1N的氨在MeOH中的溶液洗脱)纯化，以产生作为黄色固体的标题化合物(2.48g,10.73mmol,97％收率)，将其不经进一步纯化地使用。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):232.1(方法1)
中间体17:4-溴-6'-甲基-6-硝基-[2,2'-联吡啶]-5-醇
向冰冷却的中间体16(10.73mmol)在干燥MeOH(53.6mL)中的悬浮液中加入甲醇钠(约30％在MeOH中,2.4mL,12.87mmol)，并且悬浮液变成黄色溶液。然后逐滴加入分子溴(0.66mL,12.87mmol)。将反应物在0℃搅拌30min，将混合物用10％ Na2S2O3水溶液淬灭，用水稀释，然后用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机层用盐水(1x)洗涤，通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将残余物与Et2O一起研磨，提供作为黄色固体的中间体17(2.32g,7.48mmol,70％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):310.1(方法1)
中间体18:4-溴-5-(2-氯乙氧基)-6'-甲基-[2,2'-联吡啶]-6-胺
步骤1
将中间体17(1.07g,3.44mmol)、双(频哪醇合)二硼(2.71g,10.67mmol)和叔丁醇钾(0.96g,8.6mmol)在2-丙醇(60mL)中的混合物回流3小时。在真空下除去挥发物，提供6-氨基-4-溴-6'-甲基-[2,2'-联吡啶]-5-醇(3.8g，回收率假定定量)，将其不经纯化用在下一步中。
步骤2
向6-氨基-4-溴-6'-甲基-[2,2'-联吡啶]-5-醇(理论上3.44mmol)和K2CO3(1.19g,8.6mmol)在干燥DMF(35mL)中的混合物中加入1-溴-2-氯乙烷(0.52mL,6.19mmol)，并将反应物在室温搅拌过夜。加入另外的K2CO3(0.59g,4.30mmol)和1-溴-2-氯乙烷(0.29mL,3.10mmol)。24小时以后，将反应物用EtOAc稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为淡黄色固体的中间体18(0.66g,1.92mmol,56％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):342.0(方法1)
中间体19:8-溴-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
方法A
从中间体11(400mg,1.02mmol)和2-甲基-6-(三丁基甲锡烷基)吡啶(388mg,1.02mmol)开始，如关于中间体12所述制备中间体19。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(10％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化并蒸发适当的级分，提供中间体19(170mg,0.42mmol,41％收率)。
方法B
在N2气氛下，向冰冷却的氢化钠(60％的在矿物油中的分散体,98.9mg,2.47mmol)在干燥DMF(3.4mL)中的悬浮液中，逐滴加入中间体18(651mg,1.9mmol)在干燥DMF(22.5mL)中的溶液。显示黄色-橙色颜色。将混合物在室温搅拌30min，然后将它再次冷却至0℃，并加入第二部分的氢化钠(60％的在矿物油中的分散体98.9mg,2.47mmol)。20min以后，加入二碳酸二叔丁酯(498mg,2.28mmol)并将反应物在0℃搅拌1h。将混合物用水淬灭，用EtOAc稀释并转移至分液漏斗。分离各相，将有机相用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水(1x)洗涤，然后通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至10％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的中间体19(740mg,1.82mmol,96％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):406.2(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.27(s,1H),8.07(d,J＝7.7Hz,1H),7.83(t,J＝7.8Hz,1H),7.27(d,J＝7.5Hz,1H),4.41(t,J＝4.5Hz,2H),3.93(t,J＝4.5Hz,2H),2.54(s,3H),1.50(s,9H)。
中间体20:6-(6-甲基吡啶-2-基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体19、8-溴-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(100mg,0.250mmol)开始，如关于中间体13所述制备中间体20。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化并蒸发适当的级分，提供中间体20(30mg,0.07mmol,29％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):420.2(方法2)
中间体21:4-氨基-N-甲基吡啶-2-甲酰胺
在合适的管形瓶中，将4-氨基吡啶-2-甲酸甲酯(75.0mg,0.49mmol)溶解在甲胺于MeOH中的2.0M溶液(9.9mL)中。将反应物在60℃搅拌12小时。在减压下除去挥发物，提供作为淡黄色固体的4-氨基-N-甲基吡啶-2-甲酰胺(79mg，回收率假定定量)，将其不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):152(方法2)
中间体22:N-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]-3-硝基吡啶-4-胺
从中间体5(100mg,0.29mmol)和4-氨基-3-硝基吡啶(40.5mg,0.29mmol)开始，如关于中间体7所述制备中间体22。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至50％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。将含有目标产物的级分蒸发，并通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至100％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)进一步纯化。蒸发适当级分，提供作为橙色固体的标题化合物(23mg,0.06mmol,20％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):402.1(方法2)。
中间体23:6-溴-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体11(300mg,0.76mmol)、K3PO4(327.8mg,1.52mmol)、吡啶-4-胺(78.8mg,0.84mmol)、Pd2(dba)3(69.7mg,0.08mmol)和Xantphos(66.1mg,0.11mmol)在1,4-二氧杂环己烷(3mL)中的混合物通过N2鼓泡脱气。然后将瓶密封并在120℃进行微波循环2.5小时。冷却后，将混合物在
垫上过滤，用EtOAc洗涤。将滤液在真空下蒸发，并将残余物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供中间体23(65mg,0.16mmol,21％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):407.1(方法1)
1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.50(br d,J＝5.8Hz,2H),7.21(s,1H),7.05(brd,J＝5.8Hz,2H),4.34(t,J＝4.4Hz,2H),3.93(t,J＝4.4Hz,2H),1.57(s,9H)。
中间体24:6-(2-氟-5-甲基苯基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体23(49mg,0.12mmol)、2-氟-5-甲基苯基硼酸(22.2mg,0.14mmol)、K2CO3(33.3mg,0.24mmol)和Pd(PPh3)4(7mg,0.01mmol)在DME/水(3.6mL,5:1比率)中的混合物通过N2鼓泡脱气。然后将瓶密封并在70℃搅拌7小时。冷却后，将混合物倒入水中，并用EtOAc萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥并在真空下蒸发。将残余物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供中间体24(40mg,0.09mmol,76％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):437.3(方法2)
中间体25:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸锂
向中间体6(130mg,0.31mmol)在THF(4mL)中的溶液中，加入氢氧化锂一水合物(14.5mg,0.34mmol)在水(1mL)中的溶液，并将反应物在室温搅拌过夜。将混合物在减压下浓缩并在高真空下干燥以提供作为黄色固体的中间体25(153mg，回收率假定定量)。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):201.2(方法1)
中间体26:6-(2-氟苯基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体23(55mg,0.14mmol)和2-氟苯基硼酸(22.7mg,0.16mmol)开始，如关于中间体24所述制备中间体26。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供标题化合物(43mg,0.10mmol,75％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):423.2(方法1)
中间体27:4-{2-[(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-基)甲酰氨基]乙基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向中间体25(50mg,0.12mmol)在干燥DMF(2mL)中的悬浮液中，加入TEA(0.05mL,0.37mmol)和HATU(56.92mg,0.15mmol)，并将混合物在室温搅拌10分钟。然后加入4-(2-氨基乙基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(28.6mg,0.12mmol)并将混合物在室温搅拌3小时。将混合物倒入饱和NaHCO3水溶液中，并用EtOAc萃取。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0-10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。将含有目标产物的级分收集，并通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至75％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)进一步纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色固体的标题化合物(22mg,0.04mmol,29％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):612.3(方法2)
中间体28:6-(6-氯吡啶-2-基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体23(100mg,0.20mmol)和2-氯-6-(三丁基甲锡烷基)吡啶(87mg,0.22mmol)在干燥甲苯(3.6mL)和DMF(0.6mL)中的混合物通过N2鼓泡脱气，然后加入Pd(PPh3)4(22.7mg,0.02mmol)。将瓶密封并在100℃加热24小时。在真空下除去挥发物。将残余物质重新悬浮在Et2O和1N KF水溶液的混合物中并在室温剧烈搅拌2小时。将混合物通过
垫过滤，然后将有机层分离，经Na2SO4干燥并在减压下蒸发。将残余物质通过FC在Biotage NH硅胶上(20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供中间体28(90mg,0.20mmol，定量收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):440.2(方法2)
中间体29:6-(2,5-二氟苯基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体23(50mg,0.12mmol)、2,5-二氟苯基硼酸(20.5mg,0.13mmol)、K2CO3(32.6mg,0.24mmol)、Pd(PPh3)4(6.81mg,0.01mmol)在DME/水(3.6mL,5:1比率)中的混合物通过N2鼓泡脱气。然后将瓶密封并在80℃搅拌2小时。冷却后，将混合物倒入水中，并用EtOAc萃取。将有机层分离，经Na2SO4干燥并在真空下蒸发，提供中间体29(60mg，回收率假定定量)，将其不经进一步纯化地使用。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):441.3(方法1)
中间体30:6-(3-氯苯基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体23(50mg,0.12mmol)和3-氯苯基硼酸(21.1mg,0.14mmol)开始，如关于中间体24所述制备中间体30(50mg,0.11mmol,93％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):439.2(方法2)
中间体31:6-(3-甲基苯基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体23(90mg,0.22mmol)和3-甲基苯基硼酸(30mg,0.22mmol)开始，如关于中间体24所述制备中间体31(50.0mg,0.12mmol,54％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):419.2(方法2)
中间体32:6-(3-氯-4-氟苯基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体23(90mg,0.22mmol)和3-氯-4-氟苯基硼酸(38.5mg,0.22mmol)开始，如关于中间体24所述制备中间体32(60mg,0.13mmol,59％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):457.2(方法2)
中间体33:N-(4-硝基吡啶-2-基)丙-2-烯酰胺
向冰冷却的2-氨基-4-硝基吡啶(500mg,3.59mmol)在干燥DCM(20mL)中的溶液中，加入TEA(1.5mL,10.78mmol)和丙烯酰氯(438uL,5.39mmol)。将反应物在0℃搅拌30min。加入水，分离各相，并将有机相通过相分离器过滤并在真空下蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从5％至50％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为黄色固体的中间体33(374mg,1.94mmol,54％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M-1):192.1(方法1)
中间体34:3-(吗啉-4-基)-N-(4-硝基吡啶-2-基)丙酰胺
向中间体33(80mg,0.41mmol)在THF(2mL)中的溶液中，加入吗啉(80μL,0.91mmol)，并将混合物在60℃摇动过夜。在真空下除去挥发物，并将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从5％至70％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为淡黄色固体的中间体34(112mg,0.40mmol,96％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):281.2(方法2)
中间体35:N-(4-氨基吡啶-2-基)-3-(吗啉-4-基)丙烯酰胺
向中间体34(112mg,0.40mmol)和甲酸铵(126mg,2mmol)在乙醇(3mL)中的混合物中加入Pd/C(10％负载,21.3mg,0.02mmol)，并将混合物回流30分钟。将混合物冷却至室温，通过
垫过滤并将滤液在真空下蒸发。将残余物质用DCM溶解，并将不溶物过滤并抛弃。将滤液在减压下浓缩并在高真空下干燥以提供作为灰白色固体的N-(4-氨基吡啶-2-基)-3-(吗啉-4-基)丙酰胺(92mg,0.37mmol,92％收率)。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):251.2(方法2)
中间体36:8-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
向冰冷却的中间体5(150mg,0.44mmol)在THF(5mL)中的溶液中，加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M的在THF中的溶液，0.52mL,0.52mmol)。5min以后，加入二碳酸二叔丁酯(115mg,0.52mmol)，并将混合物在0℃搅拌1h。将混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭并在EtOAc和盐水之间分配。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩以提供作为浅棕色油的中间体36(202mg,0.45mmol)，其在冷却后固化。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):443.1(方法1)
中间体37:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-({2-[3-(吗啉-4-基)丙烷酰氨基]吡啶-4-基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体36(50mg,0.11mmol)、Pd2(dba)3(6.19mg,0.01mmol)、Cs2CO3(91.8mg,0.28mmol)和Xantphos(7.82mg,0.01mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(1mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后加入中间体35(33.9mg,0.14mmol)。将瓶密封并在120℃进行微波循环30min。将混合物通过
垫过滤，将滤饼用EtOAc洗涤。将滤液在减压下浓缩并在DCM和饱和NaHCO3水溶液之间分配。将有机相分离，通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色固体的标题化合物(35mg,0.06mmol,51％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):613.4(方法2)
中间体38:N-{2-[(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-基)甲酰氨基]乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
从中间体25(33mg,0.08mmol)和N-(2-氨基乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(17mg,0.10mmol)开始，如关于中间体27所述制备中间体38。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至80％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化并蒸发适当的级分，提供作为白色固体的中间体38(34mg,0.06mmol,75％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):557.3(方法2)
中间体39:4-({4-[(叔丁氧基)羰基]-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基}氨基)吡啶-3-甲酸甲酯
将中间体36(400mg,0.90mmol)、Pd2(dba)3(43.9mg,0.05mmol)、Cs2CO3(734mg,2.25mmol)和Xantphos(55.6mg,0.10mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(8mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后加入4-氨基吡啶-3-甲酸甲酯(165mg,1.08mmol)，并将混合物在90℃摇动过夜。将混合物通过
垫过滤并将滤液在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液之间分配。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至60％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为淡黄色固体的中间体39(295mg,0.57mmol,64％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):515.4(方法1)
中间体40:锂4-({4-[(叔丁氧基)羰基]-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基}氨基)吡啶-3-甲酸酯
向中间体39(295mg,0.50mmol)在THF(8mL)中的溶液中，加入氢氧化锂一水合物(25.2mg,0.600mmol)在水(2mL)中的溶液，并将混合物在室温搅拌过夜。将溶剂蒸发并将固体在高真空下干燥以提供作为白色固体的标题化合物(304mg，回收率假定定量)。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):501.3(方法1)
中间体41:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-({3-[(丙烷-2-基)氨甲酰基]吡啶-4-基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
向中间体40(50mg,0.10mmol)在DMF(1mL)中的溶液中，加入TEA(40μL,0.30mmol)，随后加入HATU(56.3mg,0.15mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，然后加入异丙胺(12μL,0.15mmol)。将反应物在室温搅拌过夜。将混合物倒入饱和NaHCO3水溶液中，并用EtOAc萃取。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将残余物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从5％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。将适当的级分蒸发以提供作为灰白色固体的中间体41(29.5mg,0.05mmol,56％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):542.4(方法1)
中间体42:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-{[3-(环丙基氨甲酰基)吡啶-4-基]氨基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体40(50mg,0.10mmol)和环丙胺(10μL,0.15mmol)开始，如关于中间体41所述制备中间体42。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从5％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。将适当的级分蒸发以提供作为白色固体的中间体42(19mg,0.03mmol,35％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):540.4(方法1)
中间体43:4-[4-({4-[(叔丁氧基)羰基]-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基}氨基)吡啶-3-酰氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
从中间体40(50mg,0.10mmol)和4-氨基-1-哌啶甲酸叔丁酯(29.6mg,0.15mmol)开始，如关于中间体41所述制备中间体43。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从5％至70％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，并将适当的级分蒸发以提供作为黄色固体的标题化合物(37mg,0.05mmol,55％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):683.3(方法1)
中间体44:4-氯-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶
将4-氯-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(150mg,0.98mmol)和K2CO3(405mg,2.93mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌30min，然后加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(0.28mL,1.56mmol)。将反应物在室温搅拌过夜。将混合物倒入盐水中，并用EtOAc萃取。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至10％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为无色油的中间体44(145mg,0.51mmol,52％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):284.1(方法1)
中间体45:4-叠氮基-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶
向中间体44(145mg,0.51mmol)在DMF(8mL)中的溶液中加入叠氮化钠(49.8mg,0.77mmol)，并将混合物在80℃搅拌过夜。使反应物冷却至室温并倒入饱和NaHCO3水溶液中，并用EtOAc萃取。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩，提供作为黄色油的中间体45(145mg,0.50mmol,98％收率)，其在冷却后固化。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):291.3(方法1)
中间体46:1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-胺
向中间体45(145mg,0.50mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入PPh3(131mg,0.50mmol)，并将混合物在室温搅拌1.5小时。然后加入水(5mL)和乙酸(催化量)并将混合物在50℃搅拌过夜。将混合物在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液之间分配并将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩，提供作为黄色油的标题化合物(237mg，回收率假定定量)，将其不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):265.3(方法1)
中间体47:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-[(1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
将中间体36(100mg,0.22mmol)、Pd2(dba)3(12.4mg,0.01mmol)、Cs2CO3(184mg,0.56mmol)、Xantphos(15.7mg,0.03mmol)和1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-胺(中间体46,170mg,0.27mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(2.5mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后在90℃在PLS中摇动过夜。将混合物通过
垫过滤，将滤饼用EtOAc洗涤。将有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至40％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色油的标题化合物(108mg,0.17mmol,76％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):627.5(方法1)
中间体48:6-(5-氟吡啶-2-基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
步骤1
在合适的管形瓶中，向-2-溴-5-氟吡啶(200mg,1.14mmol)在1,4-二氧杂环己烷(3mL)中的溶液中，加入氯化锂(296mg,6.82mmol)、三环己基膦(31.9mg,0.11mmol)、双(三丁基锡)(0.67mL,1.36mmol)和Pd2(dba)3(52mg,0.06mmol)。将混合物通过N2鼓泡脱气，然后将瓶密封并在100℃加热6小时。在真空下除去挥发物。将残余物质通过FC在Biotage硅胶上(10％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)部分地纯化，提供5-氟-2-(三丁基甲锡烷基)吡啶(200mg,0.52mmol,46％收率)，将其不经进一步纯化用于下一步中。
步骤2
在合适的管形瓶中，将中间体23(100mg,0.20mmol)和5-氟-2-(三丁基甲锡烷基)吡啶(90.1mg,0.23mmol)在干燥甲苯(4mL)和DMF(0.4mL)中的混合物通过N2鼓泡脱气，然后加入Pd(PPh3)4(26.9mg,0.02mmol)。将瓶密封并在100℃加热7小时。在真空下除去挥发物。将残余物质重新悬浮在Et2O和1N KF水溶液的混合物中并在室温剧烈搅拌2小时。将有机层分离，经Na2SO4干燥并在减压下蒸发。将残余物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供中间体48(75mg,0.18mmol,76％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):424.5(方法2)
中间体49:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸盐酸盐
向中间体25(60mg,0.11mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中加入约1.25M的HCl在MeOH中的溶液(1.84mL,2.29mmol)，并将混合物在35℃搅拌3小时。在真空下除去挥发物，提供作为黄色固体的标题化合物(61mg，回收率假定定量)，将其不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):201.2(方法1)
中间体50:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-[(3-{[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]氨甲酰基}吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
向中间体40(100mg,0.20mmol)、1-(2-氨基乙基)-4-甲基哌嗪(42.4mg,0.30mmol)和DIPEA(0.10mL,0.60mmol)的混合物中加入HATU(112.5mg,0.30mmol)，并将反应物在室温搅拌1h。将混合物倒入饱和NaHCO3水溶液中，并用EtOAc萃取。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液，随后20％的MeOH在EtOAc中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当的级分，提供作为黄色油的标题化合物(79mg,0.13mmol,64％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):626.4(方法2)
中间体51:4-({4-[(叔丁氧基)羰基]-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基}氨基)吡啶-3-甲酸甲酯
方法A
在合适的管形瓶中，将中间体19(160mg,0.39mmol)、Cs2CO3(258mg,0.79mmol)、4-氨基吡啶-3-甲酸甲酯(71.9mg,0.47mmol)、Pd2(dba)3(18.0mg,0.02mmol)和Xantphos(22.8mg,0.04mmol)在1,4-二氧杂环己烷(7mL)中的混合物通过N2鼓泡脱气。将瓶密封并在110℃进行微波循环1h。冷却后，将混合物在
垫上过滤，用EtOAc洗涤。将滤液在真空下蒸发，并将残余物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液，0.5％的氨水作为添加剂)纯化，提供中间体51(40mg,0.08mmol,21％收率)。
方法B
在合适的管形瓶中，将中间体19(200mg,0.49mmol)、Cs2CO3(258mg,0.79mmol)、4-氨基吡啶-3-甲酸甲酯(89.9mg,0.59mmol)、Pd2(dba)3(24.0mg,0.03mmol)和Xantphos(30.3mg,0.05mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(3.6mL)中。将瓶密封，抽真空并用N2(3次)回充，然后在90℃在PLS中加热16小时。将混合物用EtOAc稀释，在
垫上过滤。将滤液用盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至35％的EtOAc在环己烷中的溶液)和在Biotage硅胶上(从0％至4％的MeOH在DCM中的溶液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(196mg,0.41mmol,84％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):478.3(方法2)
中间体52:4-硝基-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶
向冰冷却的4-硝基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(200mg,1.23mmol)在THF(10mL)中的悬浮液中加入氢化钠(60％的在矿物油中的分散体,73.6mg,1.84mmol)，并将混合物在室温搅拌30min，然后加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(0.35mL,1.96mmol)。使反应物温热至室温并搅拌过夜。将混合物倒入盐水中，并用EtOAc萃取。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至40％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色油的中间体52(283mg,0.96mmol,79％收率)，其在冷却后固化。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):294.3(方法1)
中间体53:1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-胺
向中间体52(283mg,0.96mmol)和甲酸铵(304mg,4.82mmol)在乙醇(7mL)中的混合物中加入Pd/C(10％负载,51.3mg,0.05mmol)，并将反应物回流30min。将混合物冷却至室温并通过
垫过滤。将滤液浓缩并将残余物在DCM和饱和NaHCO3水溶液之间分配。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩以提供作为淡黄色固体的中间体53(240mg,0.91mmol,94％收率)。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):264.3(方法1)
中间体54:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-[(1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体36(100mg,0.22mmol)和中间体53(71.3mg,0.27mmol)开始，按照关于中间体47描述的程序制备中间体54。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至40％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色固体的标题化合物(114mg,0.18mmol,80％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):626.5(方法1)
中间体55:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-({3-[(1-甲基哌啶-4-基)氨甲酰基]吡啶-4-基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体40(95mg,0.18mmol)和1-甲基哌啶-4-胺(31.5mg,0.27mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体55。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，并将适当的级分蒸发以提供作为灰白色固体的标题化合物(87mg,0.15mmol,81％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):597.3(方法2)
中间体56:3-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-硝基吡啶-2-基)丙酰胺
从中间体33(120mg,0.62mmol)和1-甲基哌嗪(0.15mL,1.37mmol)开始，如关于中间体34所述制备中间体56。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为淡黄色固体的3-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-硝基吡啶-2-基)丙酰胺(175mg,0.60mmol,96％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):294.2(方法2)
中间体57:N-(4-氨基吡啶-2-基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙酰胺
从中间体56(175mg,0.60mmol)开始，按照关于中间体3描述的程序制备中间体57。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为橙色固体的N-(4-氨基吡啶-2-基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙酰胺(121mg,0.46mmol,77％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):264.2(方法2)
中间体58:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-({2-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙烷酰氨基]吡啶-4-基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体36(100mg,0.22mmol)和中间体57(84.8mg,0.32mmol)开始，按照关于中间体37描述的程序制备中间体58。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液，随后20％的MeOH在EtOAc中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色油的标题化合物(68mg,0.109mmol,48％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):626.4(方法2)
中间体59:3-(二甲基氨基)-N-(4-硝基吡啶-2-基)丙酰胺
从中间体33(120mg,0.62mmol)和二甲胺(2M的在THF中的溶液，0.68mL,1.37mmol)开始，如关于中间体34所述制备中间体59。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色油的中间体59(144mg,0.60mmol,97％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):239.1(方法2)
中间体60:N-(4-氨基吡啶-2-基)-3-(二甲基氨基)丙酰胺
从中间体59(144mg,0.60mmol)开始，如关于中间体3所述制备中间体60。将粗制物质通过FC在Biotage silica-NH上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为橙色油的中间体60。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):209.1(方法2)
中间体61:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-({2-[3-(二甲基氨基)丙烷酰氨基]吡啶-4-基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体36(100mg,0.22mmol)和中间体60(65.7mg,0.32mmol)开始，按照关于中间体37描述的程序制备中间体61。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为黄色油的标题化合物(58mg,0.10mmol,45％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):571.3(方法2)
中间体62:氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯
将1,1′-羰基二咪唑(9.9g,60.9mmol)加入2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(6.0g,50.7mmol)在干燥甲苯(50mL)中的搅拌悬浮液中。将反应物在室温搅拌5小时，然后加入氢氧化铵溶液(28％ NH4OH在水中的溶液，10mL)。将该混合物剧烈搅拌过夜。将各相分离，将有机相用盐水洗涤，然后通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将残余物用EtOAc溶解，并用盐水(5x)洗涤，然后通过相分离器过滤并蒸发，提供作为无色油的氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯(7.5g,46.5mmol,92％收率)，其在冷却后固化。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 4.52(br.s.,2H),4.10-4.22(m,2H),0.93-1.07(m,2H),0.05(s,9H)。
中间体63:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-({[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]羰基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
在合适的管形瓶中，将中间体36(0.70g,1.58mmol)、Xantphos(0.11g,0.19mmol)、Cs2CO3(1.03g,3.16mmol)、Pd2(dba)3(0.09g,0.09mmol)和中间体62(0.38g,2.37mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(10.5mL)中。将瓶密封，抽真空并用N2(3次)回充，然后在100℃在PLS中摇动过夜。将混合物用EtOAc稀释，在
垫上过滤。将滤液用盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为乳白色固体的标题化合物(0.70g,1.34mmol,85％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):524.2(方法1)
中间体64:8-氨基-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
将中间体63(0.70g,1.34mmol)和CsF(0.61g,4.01mmol)在DMF(13mL)中的混合物在45℃在PLS中摇动2小时。将混合物用EtOAc稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为淡黄色固体的中间体64(0.49g,1.31mmol,98％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):380.2(方法1)
中间体65:7-氯-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶
向7-氯-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(170mg,1.11mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入氢化钠(60％的在矿物油中的分散体,66.4mg,1.66mmol)，并将混合物在室温搅拌30min，然后加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(0.31mL,1.77mmol)。将反应物在室温搅拌过夜，然后将它倒入盐水中，并用EtOAc萃取。将有机相分离，通过疏水相分离器过滤，并在减压下蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至40％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为无色油的中间体65(177mg,0.62mmol,56％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):284.3(方法1)
1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.33(d,J＝5.2Hz,1H),8.25(s,1H),7.33(d,J＝5.2Hz,1H),5.69(s,2H),3.59-3.65(m,2H),0.90-0.97(m,2H),0.08-0.00(m,9H)。
中间体66:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-[(3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
将中间体64(100mg,0.26mmol)、Pd2(dba)3(14.5mg,0.02mmol)、Xantphos(18.3mg,0.03mmol)和Cs2CO3(173mg,0.53mmol)和中间体65(89.7mg,0.32mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(2.6mL)中。将瓶密封，抽真空并用N2(3次)回充，然后在100℃加热过夜。将混合物用EtOAc稀释并在
垫上过滤。将滤液用盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至50％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，并然后通过FC在Biotage硅胶上(从10％至80％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(148mg,0.24mmol,91％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):627.4(方法2)
中间体67:4-溴-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲酸甲酯
向冰冷却的4-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲酸甲酯(1.5g,5.88mmol)在干燥THF(20mL)中的悬浮液中加入氢化钠(60％的在油中的分散体,0.28g,11.76mmol)，并将混合物在0℃搅拌30min，然后逐滴加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(1.35mL,7.64mmol)。使反应混合物达到室温并搅拌3小时。加入水和EtOAc，将产物用EtOAc萃取几次，将有机相收集，干燥并蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色蜡的标题化合物(1.05g,2.72mmol,46％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):385.0(方法1)
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.15(d,J＝5.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.48(d,J＝5.0Hz,1H),3.92(s,3H),5.70(s,2H),3.56(dd,J＝8.9,7.8Hz,2H),0.88-1.01(m,2H),-0.09--0.01(m,9H)。
中间体68:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-{[3-(甲氧基羰基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基]氨基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体64(100mg,0.26mmol)和中间体67(122mg,0.32mmol)开始，如关于中间体66所述制备中间体68。将粗制物质通过FC在Biotage silica-NH上(从0％至20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为淡黄色固体的标题化合物(162mg,0.24mmol,89％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):684.3(方法2)
中间体69:8-{[3-({2-[双(2-羟基乙基)氨基]乙基}氨甲酰基)吡啶-4-基]氨基}-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体40(150mg,0.30mmol)和2-[(2-氨基乙基)(2-羟基乙基)氨基]乙烷-1-醇(62μL,0.45mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体69。将粗制物质通过FC在BiotageNH硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当的级分，提供作为白色固体的标题化合物(58mg,0.09mmol,31％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):631.3(方法2)
中间体70:4-氯-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酸甲酯
向冰冷却的4-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酸甲酯(1.0g,4.75mmol)在干燥THF(35mL)中的悬浮液中加入氢化钠(60％的在油中的分散体,0.28g,7.12mmol)，并将混合物搅拌30min，然后加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(1.09mL,6.17mmol)。使反应混合物达到室温并搅拌3小时。将混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭，用EtOAc稀释，并用盐水(1x)洗涤。将有机相干燥并在真空下浓缩并保留为固体(黄色)在室温过夜。次日，固体的颜色为白色且UPLC检查显示完全转化以产生报告的位置异构体。将残余物通过FC在Biotage硅胶上(从0％至10％的EtOAc在环己烷中的溶液)纯化，提供中间体70(820mg,2.41mmol,51％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):341.1(方法1)
1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.38(d,J＝5.1Hz,1H),7.40(s,1H),7.20(d,J＝5.1Hz,1H),6.14(s,2H),3.97(s,3H),3.52-3.58(m,2H),0.85-0.92(m,2H),-0.11--0.05(m,9H)。
中间体71:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-{[2-(甲氧基羰基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基]氨基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体64(70mg,0.18mmol)和中间体70(75.4mg,0.22mmol)开始，如关于中间体66所述制备中间体71。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从10％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。将产物在Biotage硅胶上(从10％至60％的EtOAc在环己烷中的溶液)进一步纯化，提供作为无色油的标题化合物(110mg,0.0.16mmol,87％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):684.4(方法2)
中间体72:N-{3-[3-(二甲基氨基)丙烷酰氨基]吡啶-4-基}氨基甲酸叔丁酯
向N-(3-氨基吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(250mg,1.19mmol)和3-(二甲基氨基)丙酸(210mg,1.79mmol)在干燥DMF(3mL)中的溶液中，先后加入DIPEA(0.62mL,3.58mmol)和
在DMF中的50％溶液(1.07mL,1.79mmol)。将反应物在室温摇动1.5小时。将混合物在减压下浓缩并将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当的级分，提供作为黄色油的中间体72(396mg，回收率假定定量)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):309.1(方法2)
中间体73:N-(4-氨基吡啶-3-基)-3-(二甲基氨基)丙酰胺
将中间体72(373mg,1.21mmol)溶解在DCM(10mL)和TFA(2.8mL,36.29mmol)的混合物中。将溶液在室温摇动过夜。在减压下除去挥发物，并将残余物溶解在MeOH中，加载到SCX柱(5g)上，用MeOH洗涤并用2N的氨在MeOH中的溶液洗脱。将碱性级分蒸发以提供作为黄色油的N-(4-氨基吡啶-3-基)-3-(二甲基氨基)丙酰胺(301mg，回收率假定定量)。将该物质不经进一步纯化用在下一步中。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):209.1(方法2)
中间体74:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-({3-[3-(二甲基氨基)丙烷酰氨基]吡啶-4-基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体36(90mg,0.20mmol)和中间体73(59.1mg,0.28mmol)开始，按照关于中间体37描述的程序制备中间体74。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为淡黄色固体的标题化合物(61mg,0.11mmol,53％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):571.1(方法2)
中间体75:6-(6-甲基吡啶-2-基)-8-({[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]羰基}氨基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体19(510mg,1.26mmol)和中间体62(213mg,1.32mmol)开始，按照关于中间体63描述的程序制备中间体75。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，并然后通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至35％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为乳白色固体的中间体75(500mg,1.03mmol,82％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):487.2(方法2)
中间体76:8-氨基-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体75(500mg,1.03mmol)开始，按照关于中间体64描述的程序制备中间体76。得到作为白色固体的标题化合物(359mg，回收率假定定量)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):343.1(方法2)
中间体77:6-(6-甲基吡啶-2-基)-8-[(3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
将中间体76(70mg,0.20mmol)、Pd2(dba)3(11.23mg,0.01mmol)、Xantphos(14.2mg,0.02mmol)、Cs2CO3(134.05mg,0.41mmol)和中间体65(75.4mg,0.27mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(1.8mL)中。将瓶密封，抽真空并用N2(3次)回充，然后在120℃加热24小时。
将混合物用EtOAc稀释，在
垫上过滤。将滤液用盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至43％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，并然后通过FC在Biotage硅胶上(从0％至3％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(100mg,0.17mmol,83％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):590.3(方法1)
中间体78:6-(6-甲基吡啶-2-基)-8-[(1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体76(70mg,0.20mmol)和中间体44(69.6mg,0.25mmol)开始，按照关于中间体77描述的程序制备中间体78。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，并然后在Biotage硅胶上(从0％至3％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(100mg,0.17mmol,83％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):590.3(方法1)
中间体79:4-({4-[(叔丁氧基)羰基]-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基}氨基)吡啶-3-甲酸锂
从中间体51(96mg,0.41mmol)开始，按照关于中间体40描述的程序制备中间体79。得到作为淡黄色固体的标题化合物(190mg,0.40mmol,99％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):464.2(方法1)
中间体80:8-({3-[(1-甲基哌啶-4-基)氨甲酰基]吡啶-4-基}氨基)-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体79(70.0mg,0.150mmol)和4-氨基-1-甲基哌啶(28μL,0.220mmol)开始，按照关于中间体50描述的程序制备中间体80。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从20％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为无色油的标题化合物(69mg,0.12mmol,82％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):280.7(方法1)
中间体81:N-{2-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯
向N-(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.89mmol)在MeCN(7mL)中的溶液中加入N-甲基-3-氨基氧杂环丁烷(0.2mL,2.23mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。在减压下除去挥发物，并将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至3％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为无色油的中间体81(43mg,0.19mmol,21％收率)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 5.00(br.s.,1H),4.62-4.67(m,2H),4.56(t,J＝6.27Hz,2H),3.58(quin,J＝6.55Hz,1H),3.20(q,J＝5.72Hz,2H),2.32(t,J＝6.05Hz,2H),2.12(s,3H),1.48(s,9H)。
中间体82:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-{[3-({2-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]乙基}氨甲酰基)吡啶-4-基]氨基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
步骤1
将中间体81(43mg,0.19mmol)溶解在DCM(1.8mL)和TFA(0.21mL,2.8mmol)的混合物中并将溶液在室温摇动1h。在减压下除去挥发物，并将残余物在高真空下干燥以提供作为无色油的N-(2-氨基乙基)-N-甲基氧杂环丁烷-3-胺,2,2,2-三氟乙酸盐(48mg，回收率假定定量)。
步骤2
从中间体40(90mg,0.18mmol)和N-(2-氨基乙基)-N-甲基氧杂环丁烷-3-胺,2,2,2-三氟乙酸盐(48mg,0.19理论mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体82。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液，随后30％的MeOH在EtOAc中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当的级分，提供作为淡黄色固体的标题化合物(53mg,0.09mmol,49％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M-tBu+2):279.2(方法1)
中间体83:2-[(2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙基)(甲基)氨基]乙酸甲酯
向N-[2-(甲基氨基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(400mg,2.3mmol)和DIPEA(0.8mL,4.59mmol)在MeCN(15mL)中的溶液中加入溴乙酸甲酯(0.2mL,2.07mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。在减压下除去挥发物，并将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为无色油的标题化合物(415mg,1.68mmol,73.4％收率)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 5.14(br.s.,1H),3.73(s,3H),3.30(s,2H),3.21(q,J＝5.14Hz,2H),2.63(t,J＝5.94Hz,2H),2.39(s,3H),1.46(s,9H)。
中间体84:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-{[3-({2-[(2-甲氧基-2-氧代乙基)(甲基)氨基]乙基}氨甲酰基)吡啶-4-基]氨基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
步骤1
将中间体83(55.0mg,0.22mmol)溶解在DCM(1.8mL)和TFA(0.21mL,2.8mmol)的混合物中并将溶液在室温摇动1h。在减压下除去挥发物，并将残余物在高真空下干燥以提供作为无色油的2-[(2-氨基乙基)(甲基)氨基]乙酸甲酯,2,2,2-三氟乙酸盐(60mg，回收率假定定量)。
步骤2
从中间体40(90mg,0.18mmol)和2-[(2-氨基乙基)(甲基)氨基]乙酸甲酯,2,2,2-三氟乙酸盐(58mg,0.22理论mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体84。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从5％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当的级分，提供作为黄色固体的标题化合物(80mg,0.13mmol,71％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):629.3(方法2)
中间体85:4-氯-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶
向冰冷却的4-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(500mg,3.28mmol)在DMF(12mL)中的悬浮液中加入氢化钠(60％的在矿物油中的分散体,157mg,3.93mmol)，并将混合物在0℃搅拌30min，然后逐滴加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(0.75mL,4.26mmol)。使反应混合物达到室温并搅拌3小时。加入水和EtOAc，将产物用EtOAc萃取几次，将有机相收集，干燥并蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至6％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为油的中间体85(600mg,2.12mmol,65％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):283.2(方法1)
中间体86:6-(6-甲基吡啶-2-基)-8-[(1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体76(70mg,0.20mmol)和中间体85(69.6mg,0.25mmol)开始，按照关于中间体77描述的程序制备中间体86。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，并然后通过FC在Biotage硅胶上(从0％至7％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(115mg,0.19mmol,96％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):589.3(方法2)
中间体87:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-[(3-{[2-(4-甲磺酰基哌嗪-1-基)乙基]氨甲酰基}吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体40(80mg,0.16mmol)和2-(4-甲磺酰基哌嗪-1-基)乙烷-1-胺(49.1mg,0.24mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体87。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至1％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为无色油的标题化合物(105mg,0.152mmol,96％收率)，其缓慢地固化。
LC-MS(ESI):m/z(M-tBu+2):317.7(方法1)
中间体88:8-[(3-{[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙基]氨甲酰基}吡啶-4-基)氨基]-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体40(70mg,0.14mmol)和1-[4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-基]乙烷-1-酮(35.5mg,0.21mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体88。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为无色油的标题化合物(74mg,0.11mmol,82％收率)，其缓慢地固化。
LC-MS(ESI):m/z(M-tBu+2):299.7(方法1)
中间体89:4-({4-[(叔丁氧基)羰基]-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基}氨基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酸锂
从中间体71(1.0g,1.2mmol)开始，按照关于中间体40描述的程序制备中间体89。得到作为淡黄色固体的标题化合物(0.79mg,1.18mmol,98％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):670.3(方法1)
中间体90:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-[(2-{[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基]氨甲酰基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体89(120mg,0.18mmol)和2-(1-甲基哌啶-4-基)乙烷-1-胺(42.3μL,0.27mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体90。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从10％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(129mg,0.16mmol,91％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):397.8(方法1)
中间体91:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-[(2-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨甲酰基}-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯
从中间体89(120mg,0.18mmol)和N,N-二甲基乙二胺(29.08uL,0.27mmol)开始，如关于中间体50所述制备中间体91。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从30％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(120mg,0.16mmol,91％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):370.8(方法1)
对比化合物的中间体
中间体92:2-氯-6-(5-氯-2-氟苯基)吡啶-3-醇
在装有2-氯-6-碘吡啶-3-醇(500mg,1.96mmol)、5-氯-2-氟苯基硼酸(341mg,1.96mmol)、Pd(PPh3)4(113mg,0.10mmol)和NaHCO3(333mg,3.91mmol)的合适管形瓶中，加入甲苯、乙醇和水的混合物(16mL,6:1:1比率)。将容器密封，抽真空并用N2(3次)回充，然后在90℃加热6小时。将混合物冷却并通过
垫过滤，用EtOAc洗涤。将滤液用酸化的盐水(2x)洗涤，然后通过相分离器过滤并在真空下蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(环己烷100％，然后DCM 100％作为洗脱液)纯化，以提供作为淡橙色固体的标题化合物(367mg,1.42mmol,73％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):258.2(方法1)
中间体93:2-氯-6-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘吡啶-3-醇
向中间体92(1.47g,5.68mmol)和Na2CO3(1.32g,12.49mmol)在水(14.5mL)中的溶液中加入碘(1.44g,5.68mmol)。将混合物在室温搅拌1h。将残余的碘用10％ Na2S2O3水溶液淬灭，然后将混合物用2N HCl水溶液酸化。将得到的沉淀物通过过滤进行收集并用冷水洗涤，提供作为乳白色固体的中间体93(2.13g,5.55mmol,98％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):383.9(方法1)
中间体94:2-氯-6-(5-氯-2-氟苯基)-[4,4'-联吡啶]-3-醇
在合适的管形瓶中，将中间体93(1.0g,2.6mmol)、4-吡啶基硼酸(384mg,3.12mmol)、Pd(PPh3)4(150mg,0.14mmol)和NaHCO3(442mg,5.2mmol)溶解在甲苯/乙醇/水混合物(32mL,6:1:1比率)中。将容器密封并抽真空并用N2(3x)回充，然后在90℃剧烈搅拌过夜。加入水并将得到的沉淀物通过过滤进行收集，用水洗涤并在真空下干燥，提供中间体94(420mg,1.25mmol,48％收率)，将其不经进一步纯化地使用。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):335.0(方法1)
中间体95:2-氯-6-(5-氯-2-氟苯基)-3-(甲氧基甲氧基)-4,4'-联吡啶
向冰冷却的中间体94(420mg,1.25mmol)在干燥DMF(5mL)中的悬浮液中加入叔丁醇钾(352mg,3.13mmol)，并将混合物在0℃搅拌15min。逐滴加入氯甲基甲基醚(219μL,2.88mmol)。将混合物在0℃搅拌30min，然后加入另外的叔丁醇钾(141mg,1.25mmol)和氯甲基甲基醚(76μL,1mmol)。30min以后，将反应物用水淬灭，用EtOAc稀释并转移至分液漏斗。将有机相用饱和NaHCO3(3x)和盐水(1x)洗涤，通过相分离器过滤并在真空下蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从15％至45％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供标题化合物(253mg,0.67mmol,53％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):379.0(方法1)
中间体96:6-(5-氯-2-氟苯基)-N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(甲氧基甲氧基)-[4,4'-联吡啶]-2-胺
在合适的管形瓶中，将中间体95(250mg,0.66mmol)、叔丁醇钠(79.2mg,0.820mmol)、DTBPF(36.9mg,0.08mmol)和Pd2(dba)3(37.91mg,0.07mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(2.6mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后加入2,4-二甲氧基苄胺(198μL,1.32mmol)并将混合物加热至100℃保持30min。将混合物在
垫上过滤，将滤饼用EtOAc洗涤，然后将有机相用盐水(2x)洗涤，通过相分离器过滤并在真空下蒸发。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从25％至70％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为淡黄色油的中间体96(249mg,0.49mmol,74％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):510.2(方法1)
中间体97:2-氨基-6-(5-氯-2-氟苯基)-[4,4'-联吡啶]-3-醇
将中间体96(180mg,0.32mmol)在DCM/TFA(8mL,8:2比率)中的溶液在室温搅拌30min。加入甲苯(2mL)并将溶剂在减压下除去。将粗制物质通过SCX(5g，用MeOH洗涤，并用1N的氨在MeOH中的溶液洗脱)纯化，提供标题化合物(132mg，回收率假定定量)，将其不经进一步纯化用于下一步。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):316.1(方法1)
实施例的制备
实施例1:N-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]-吡啶-4-胺
在合适的管形瓶中，将中间体5(54mg,0.16mmol)、Xantphos(10.9mg,0.02mmol)、Pd2(dba)3(8.64mg,0.01mmol)和叔丁醇钠(18.9mg,0.20mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(1.25mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后加入吡啶-4-胺(16.3mg,0.17mmol)，并将反应物在90℃在PLS中加热30min。将混合物用EtOAc稀释并在
垫上过滤。将滤液用饱和NaHCO3水溶液洗涤，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至30％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。将含有目标产物的级分蒸发并通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至45％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)进一步纯化。蒸发适当的级分，提供作为灰白色固体的标题化合物(24mg,0.07mmol,43％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):357.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.56(s,1H),8.18-8.29(m,2H),7.94(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.38-7.50(m,1H),7.31(dd,J＝11.3,8.8Hz,1H),7.07(d,J＝1.1Hz,1H),6.98-7.03(m,2H),6.95(s,1H),4.22(t,J＝4.3Hz,2H),3.41-3.53(m,2H)。
实施例2:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-甲基吡啶-3-甲酰胺
在合适的管形瓶中，将中间体6(30mg,0.07mmol)溶解在甲胺在MeOH中的2M溶液(1.45mL,2.89mmol)中，并将混合物在60℃摇动过夜。在减压下除去挥发物，并将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至40％的MeCN+0.1％ HCOOH在水中的溶液+0.1％HCOOH作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(22mg,0.05mmol,74％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):414.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.38(s,1H),8.78(br q,J＝4.7Hz,1H),8.70(s,1H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.8Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.7,4.1,3.0Hz,1H),7.29-7.36(m,1H),7.29(d,J＝5.9Hz,1H),7.16(s,1H),7.00(br t,J＝2.1Hz,1H),4.26(t,J＝4.1Hz,2H),3.48(br s,2H),2.80(d,J＝4.5Hz,3H)。
实施例3:N4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-2,4-二胺
向冷却至0℃的中间体7(19mg,0.05mmol)和氯化镍(II)六水合物(2.27mg,0.01mmol)在THF/MeOH(0.5mL,1:1比率)中的混合物中，缓慢地加入硼氢化钠(3.58mg,0.09mmol)，并将混合物在0℃搅拌30分钟。在0℃加入几滴2N HCl，然后使混合物达到室温并搅拌30分钟。将混合物在EtOAc和盐水(用2N NaOH将pH调至约8-9)之间分配，然后将有机相分离，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至45％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为灰白色固体的标题化合物(9.5mg,0.03mmol,54％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):372.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.05(s,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.65(d,J＝5.8Hz,1H),7.38-7.44(m,1H),7.31(dd,J＝11.3,8.8Hz,1H),7.06(d,J＝0.8Hz,1H),6.83(s,1H),6.29(dd,J＝5.8,1.9Hz,1H),6.12(d,J＝1.9Hz,1H),5.60(s,2H),4.20(t,J＝4.3Hz,2H),3.46(br s,2H)。
实施例4:N-[6-(4-甲基-1,3-噻唑-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
将4N的HCl在1,4-二氧杂环己烷中的溶液(1.0mL,32.91mmol)加入中间体13(25mg,0.06mmol)在MeOH(1mL)中的搅拌溶液中。将反应物在室温搅拌3小时，然后在真空下除去挥发物。将残余物质用水溶解，并用EtOAc洗涤，将其抛弃。然后将水相通过加入氢氧化铵溶液进行碱化，并用DCM萃取。将合并的有机层通过相分离器过滤并在真空下浓缩，提供标题化合物(16mg,0.05mmol,84％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):326.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.55(s,1H),8.21-8.35(m,2H),7.33(s,1H),7.22(d,J＝0.8Hz,1H),7.00-7.06(m,2H),6.98(s,1H),4.21(t,J＝4.4Hz,2H),3.41-3.51(m,2H),2.36(s,3H)。
实施例5:N-[6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体20(30mg,0.07mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例5(15mg,0.05mmol,66％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):320.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),8.16-8.35(m,2H),7.96(d,J＝7.8Hz,1H),7.72(t,J＝7.7Hz,1H),7.65(s,1H),7.17(d,J＝7.5Hz,1H),6.88-7.05(m,2H),6.76(s,1H),4.21(t,J＝4.2Hz,2H),3.47(br d,J＝2.3Hz,2H),2.47(s,3H)。
实施例6:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-甲基吡啶-2-甲酰胺
在合适的管形瓶中，将中间体5(70mg,0.20mmol)、Pd2(dba)3(11.2mg,0.01mmol)、叔丁醇钠(24.5mg,.0.26mmol)和Xantphos(14.2mg,0.02mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷(1.8mL)中。将混合物脱气(真空/N2)，然后加入4-氨基-N-甲基吡啶-2-甲酰胺(中间体21,40mg,0.24mmol)。将瓶密封并在150℃进行微波循环30min。然后将另外的Pd2(dba)3(11.2mg,0.01mmol)、叔丁醇钠(24.5mg,.0.26mmol)、Xantphos(14.2mg,0.02mmol)和中间体21(40mg,0.24mmol)加入管形瓶，再次进行在150℃的微波循环30min。将反应混合物用EtOAc稀释并通过
垫过滤。将有机相用盐水洗涤，通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至3％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。将含有目标产物的级分通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至60％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)进一步纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(17mg,0.04mmol,20％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):414.2(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.87(s,1H),8.63(q,J＝4.6Hz,1H),8.26(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(dd,J＝6.9,2.8Hz,1H),7.64(d,J＝2.3Hz,1H),7.40-7.46(m,1H),7.32(dd,J＝11.1,8.8Hz,1H),7.07(dd,J＝5.6,2.4Hz,1H),7.05(d,J＝1.3Hz,1H),7.03(br t,J＝2.4Hz,1H),4.20(t,J＝4.3Hz,2H),3.48(br q,J＝2.3Hz,2H),2.79(d,J＝4.9Hz,3H)。
实施例7:N4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-3,4-二胺
从中间体22(23mg,0.06mmol)开始，按照如关于实施例3所述类似的程序制备实施例7。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至3％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当的级分，提供作为灰白色固体的标题化合物(10mg,0.03mmol,47％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):372.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.96(s,1H),7.92(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.70(d,J＝5.3Hz,1H),7.36-7.43(m,1H),7.27(dd,J＝11.2,8.8Hz,1H),7.13(s,1H),6.91(d,J＝5.3Hz,1H),6.83(d,J＝1.3Hz,1H),6.80(s,1H),5.04(s,2H),4.22(t,J＝4.3Hz,2H),3.47(br d,J＝2.6Hz,2H)。
实施例8:N-[6-(2-氟-5-甲基苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体24(40mg,0.09mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例8(26mg,0.077mmol,84％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):337.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(s,1H),8.15-8.31(m,2H),7.66(dd,J＝7.9,2.2Hz,1H),7.05-7.20(m,2H),6.94-7.02(m,3H),6.83(s,1H),4.20(t,J＝4.2Hz,2H),3.37-3.57(m,2H),2.31(s,3H)。
实施例9:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(吗啉-4-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺
向中间体25(50mg,0.12mmol)在干燥DMF(2mL)中的悬浮液中，加入TEA(0.05mL,0.37mmol)和HATU(56.9mg,0.15mmol)，并将混合物在室温搅拌15min。加入2-(吗啉-4-基)乙烷-1-胺(0.02mL,0.19mmol)，并将反应物搅拌1.5小时。将混合物用EtOAc稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(3x)洗涤。将有机相分离，通过相分离器过滤并在减压下浓缩。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至60％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)纯化。将含有目标产物的级分浓缩，并通过FC在Biotage硅胶上(从0％至10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)进一步纯化。蒸发适当级分，提供作为淡黄色固体的标题化合物(21mg,0.04mmol,33％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):513.2(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.25(s,1H),8.75(t,J＝5.6Hz,1H),8.71(s,1H),8.34(d,J＝5.8Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.41-7.47(m,1H),7.33(dd,J＝11.3,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝5.8Hz,1H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),4.25(t,J＝4.3Hz,2H),3.56(t,J＝4.5Hz,4H),3.47(br s,2H),3.40(q,J＝6.6Hz,2H),2.46-2.57(m,2H),2.42(br s,4H)。
实施例10:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(二甲基氨基)乙基]吡啶-3-甲酰胺
从中间体25(50mg,0.12mmol)和(2-氨基乙基)二甲胺(37.8mg,0.37mmol)开始，如关于实施例9所述制备实施例10。通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至90％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)上纯化以后，得到作为淡橙色固体的标题化合物(15.4mg,0.03mmol,26％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):471.2(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.29(s,1H),8.73(br t,J＝5.7Hz,1H),8.71(s,1H),8.33(d,J＝5.7Hz,1H),7.94(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.44(dt,J＝8.3,3.6Hz,1H),7.32(dd,J＝11.1,8.9Hz,1H),7.27(d,J＝5.9Hz,1H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),4.25(t,J＝3.9Hz,2H),3.42-3.56(m,2H),3.34-3.41(m,2H),2.42(t,J＝6.8Hz,2H),2.18(s,6H)。
实施例11:N-[6-(2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从6-(2-氟苯基)-8-[(吡啶-4-基)氨基]-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(中间体26,40mg,0.09mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例11(24mg,0.07mmol,79％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):323.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),8.23(d,J＝6.0Hz,2H),7.86(td,J＝8.0,1.8Hz,1H),7.33-7.41(m,1H),7.17-7.29(m,2H),6.96-7.05(m,3H),6.82(s,1H),4.21(t,J＝4.4Hz,2H),3.42-3.52(m,2H)。
实施例12:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(哌嗪-1-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺
向中间体27(22mg,0.04mmol)在DCM(0.4mL)中的溶液中加入TFA(0.11mL,1.44mmol)，并将反应物在室温搅拌1h。将混合物在减压下浓缩并将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为灰白色固体的标题化合物(13mg,0.03mmol,71％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):512.2(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.22-10.33(m,1H),8.64-8.78(m,2H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),7.94(dd,J＝6.8,2.6Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.7,4.1,2.9Hz,1H),7.32(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝5.9Hz,1H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),4.25(br t,J＝3.9Hz,2H),3.47(br s,2H),3.35-3.42(m,2H),2.69(t,J＝4.7Hz,4H),2.45(t,J＝6.9Hz,2H),2.36(br s,4H)。
实施例13:N-[6-(6-氯吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体28(90mg,0.20mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例13(20mg,0.06mmol,29％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):340.0(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.58(s,1H),8.23-8.30(m,2H),8.12(d,J＝7.2Hz,1H),7.92(t,J＝7.8Hz,1H),7.54(s,1H),7.43(d,J＝7.9Hz,1H),6.95-7.00(m,2H),6.85-6.91(m,1H),4.22(t,J＝4.2Hz,2H),3.44-3.52(m,2H)。
实施例14:N-[6-(2,5-二氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体29(60mg,0.14mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例14(30mg,0.09mmol,65％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):341.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.55(s,1H),8.24(d,J＝6.2Hz,2H),7.67(ddd,J＝9.8,6.3,3.3Hz,1H),7.26-7.35(m,1H),7.17-7.25(m,1H),7.08(d,J＝1.0Hz,1H),7.00(d,J＝6.4Hz,2H),6.89(br t,J＝2.5Hz,1H),4.22(t,J＝4.2Hz,2H),3.47(br q,J＝2.5Hz,2H)。
实施例15:N-[6-(3-氯苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体30(50mg,0.110mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例15。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供标题化合物(30mg,0.09mmol,78％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):339.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.48(s,1H),8.24(d,J＝6.4Hz,2H),7.95(t,J＝1.7Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.42(t,J＝7.9Hz,1H),7.35 -7.39(m,1H),7.09(s,1H),7.02(d,J＝6.2Hz,2H),6.86(br t,J＝2.5Hz,1H),4.20(t,J＝4.2Hz,2H),3.47(br q,J＝2.5Hz,2H)。
实施例16:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸锂
标题化合物也被描述为中间体25。因此，关于实施例16的合成的详细信息，参见中间体25的制备。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.68(br s,1H),8.81(s,1H),8.13(d,J＝5.7Hz,1H),7.95(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.41(ddd,J＝8.8,4.2,3.1Hz,1H),7.32(dd,J＝11.2,8.8Hz,1H),7.20(d,J＝0.9Hz,1H),7.10(d,J＝5.9Hz,1H),6.81(br s,1H),4.21(t,J＝4.2Hz,2H),3.42-3.49(m,2H)。
实施例17:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯
标题化合物也被描述为中间体6。因此，关于实施例17的合成的详细信息，参见中间体6的制备。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.84(s,1H),8.92(s,1H),8.40(d,J＝5.9Hz,1H),7.94(dd,J＝6.8,2.9Hz,1H),7.41-7.50(m,1H),7.33(dd,J＝11.1,8.7Hz,1H),7.27(d,J＝6.2Hz,1H),7.19(d,J＝0.9Hz,1H),7.11(s,1H),4.27(t,J＝4.3Hz,2H),3.91(s,3H),3.43-3.59(m,2H)。
实施例18:N-[6-(3-甲基苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体31(40mg,0.10mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例18。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供标题化合物(20mg,0.06mmol,66％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):319.2(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.45(s,1H),8.24(d,J＝6.4Hz,2H),7.69(s,1H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.13(d,J＝7.5Hz,1H),7.01(s,1H),6.98-7.03(m,2H),6.77(s,1H),4.19(t,J＝4.2Hz,2H),3.42-3.49(m,2H),2.34(s,3H)。
实施例19:N-[6-(3-氯-4-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体32(50mg,0.11mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例19。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供标题化合物(30mg,0.08mmol,77％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):357.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.47(s,1H),8.18-8.30(m,2H),8.08(dd,J＝7.5,2.2Hz,1H),7.86(ddd,J＝8.7,4.8,2.3Hz,1H),7.42(t,J＝9.0Hz,1H),7.09(s,1H),6.97-7.07(m,2H),6.86(s,1H),4.20(t,J＝4.2Hz,2H),3.40-3.54(m,2H)。
实施例20:N-(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-2-基)-3-(吗啉-4-基)丙酰胺
向中间体37,35mg,0.06mmol)在DCM(0.8mL)中的溶液中加入TFA(0.17mL,2.28mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空下除去挥发物。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至75％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(8.5mg,0.02mmol,29％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):513.2(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.40(s,1H),8.60(s,1H),7.88-8.03(m,2H),7.81(s,1H),7.35-7.51(m,1H),7.29(dd,J＝11.1,8.8Hz,1H),7.03(d,J＝0.7Hz,1H),6.94(s,1H),6.68(dd,J＝5.8,2.2Hz,1H),4.20(t,J＝4.3Hz,2H),3.56(t,J＝4.5Hz,4H),3.46(brs,2H),2.56-2.62(m,2H),2.46-2.54(m,2H),2.36-2.44(m,4H)。
实施例21:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(甲基氨基)乙基]吡啶-3-甲酰胺
从中间体38(33mg,0.06mmol)开始，如关于实施例12所述制备实施例21。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为淡黄色固体的标题化合物(28mg,0.06mmol,97％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):457.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.32(br s,1H),8.68-8.79(m,2H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),7.93(dd,J＝6.8,2.8Hz,1H),7.39-7.46(m,1H),7.32(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝5.9Hz,1H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),4.25(t,J＝4.3Hz,2H),3.45-3.50(m,2H),3.33-3.38(m,2H),2.64(t,J＝6.4Hz,2H),2.29(s,3H),1.90(br s,1H)。
实施例22:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-(丙烷-2-基)吡啶-3-甲酰胺
向中间体41(29.5mg,0.05mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中加入约1.25M的HCl在MeOH中的溶液(1.09mL,1.36mmol)，并将混合物在40℃搅拌30分钟。在真空下除去挥发物，并将残余物通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(6.6mg,0.01mmol,27％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):221.8(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.30(s,1H),8.72(s,1H),8.59(d,J＝7.6Hz,1H),8.34(d,J＝5.8Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.8Hz,1H),7.40-7.50(m,1H),7.32(dd,J＝11.1,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝5.9Hz,1H),7.15(s,1H),7.00(s,1H),4.25(t,J＝4.1Hz,2H),4.12(ddt,J＝13.6,6.7,6.6,6.6Hz,1H),3.47(br d,J＝1.6Hz,2H),1.18(d,J＝6.6Hz,6H)。
实施例23:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-环丙基吡啶-3-甲酰胺
从中间体42(18.6mg,0.mmol)开始，如关于实施例22所述制备实施例23。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至50％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为灰白色固体的标题化合物(9mg,0.02mmol,59％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):440.3(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.35(s,1H),8.78(d,J＝4.1Hz,1H),8.67(s,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.39-7.47(m,1H),7.33(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.29(d,J＝5.8Hz,1H),7.16(s,1H),7.01(s,1H),4.27(t,J＝4.3Hz,2H),3.48(br d,J＝2.5Hz,2H),2.86(td,J＝7.3,3.8Hz,1H),0.55-0.82(m,4H)。
实施例24:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-(哌啶-4-基)吡啶-3-甲酰胺
从中间体43(37mg,0.05mmol)开始，如关于实施例22所述制备实施例24。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至75％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(2.5mg,0.005mmol,9.6％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):242.1(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.28(s,1H),8.72(s,1H),8.62(d,J＝7.7Hz,1H),8.34(d,J＝5.8Hz,1H),7.93(dd,J＝6.7,2.9Hz,1H),7.38-7.50(m,1H),7.33(dd,J＝11.3,8.8Hz,1H),7.29(d,J＝6.0Hz,1H),7.15(s,1H),7.00(s,1H),4.25(t,J＝4.3Hz,2H),3.77-3.90(m,1H),3.47(br s,2H),2.95(br d,J＝12.4Hz,2H),2.44-2.56(m,2H),1.74(br d,J＝9.6Hz,2H),1.41(qd,J＝11.8,4.0Hz,2H)。
实施例25:6-(5-氯-2-氟苯基)-N-{1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺
将中间体47(104mg,0.17mmol)溶解在DCM(4mL)和TFA(1.02mL,13.27mmol)的混合物中的溶液在室温搅拌48小时。在真空下除去挥发物，并将粗制物质通过反相FC在BiotageC18柱上(从5％至100％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(9mg,0.02mmol,14％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):397.2(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 13.26(s,1H),9.00(s,1H),8.20(s,1H),8.12(d,J＝5.5Hz,1H),7.97(dd,J＝6.9,2.8Hz,1H),7.38-7.47(m,1H),7.31(dd,J＝11.2,8.8Hz,1H),7.06-7.11(m,2H),6.51(d,J＝5.5Hz,1H),4.21(t,J＝4.1Hz,2H),3.49(br q,J＝4.0Hz,2H)。
实施例26:N-[6-(5-氟吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺
从中间体48(70mg,0.14mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例26。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至3％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液，0.3％的氨水作为添加剂)纯化。蒸发适当级分，提供标题化合物(40mg,0.12mmol,89％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):324.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.55(d,J＝3.0Hz,1H),8.52(s,1H),8.25-8.29(m,2H),8.21(dd,J＝8.9,4.8Hz,1H),7.78(td,J＝8.8,3.0Hz,1H),7.61(s,1H),7.00-7.07(m,2H),6.80(s,1H),4.22(t,J＝4.4Hz,2H),3.44-3.54(m,2H)。
实施例27:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸2-(二甲基氨基)乙酯
向中间体49(61mg,0.14mmol)在干燥DMF(3.2mL)中的溶液中加入HATU(63.7mg,0.17mmol)和DIPEA(73μL,0.42mmol)，随后加入2-二甲基氨基乙醇(28μL,0.28mmol)。将反应物在室温搅拌5小时。将混合物用EtOAc稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从20％至50％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为淡黄色固体的标题化合物(15mg,0.03mmol,23％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):236.8(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.77(s,1H),8.90(s,1H),8.39(d,J＝6.0Hz,1H),7.94(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.45(ddd,J＝8.7,4.0,2.9Hz,1H),7.34(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.23(d,J＝6.0Hz,1H),7.17(d,J＝0.8Hz,1H),7.12(s,1H),4.41(t,J＝5.8Hz,2H),4.26(t,J＝4.3Hz,2H),3.48(br d,J＝2.5Hz,2H),2.60-2.71(m,2H),2.22(s,6H)。
实施例28:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺
将中间体50(79mg,0.13mmol)溶解在DCM(1.6mL)和TFA(0.39mL,5.05mmol)的混合物中，并将溶液在室温摇动过夜。在减压下除去挥发物，并将残余物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(31mg,0.06mmol,47％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):263.7(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.22(s,1H),8.72(br t,J＝5.5Hz,1H),8.69(s,1H),8.34(d,J＝6.0Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.43(ddd,J＝8.8,4.1,3.0Hz,1H),7.32(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝6.0Hz,1H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),4.25(t,J＝4.3Hz,2H),3.47(br s,2H),3.38(q,J＝6.6Hz,2H),2.47(br t,J＝6.9Hz,2H),2.15-2.59(m,8H),2.11(s,3H)。
实施例29:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酯
从中间体49(65mg,0.15mmol)和1-(2-羟基乙基)-4-甲基哌嗪(64.3μL,0.45mmol)开始，如关于实施例27所述制备实施例29。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从10％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为淡黄色固体的标题化合物(18mg,0.03mmol,23％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):264.3(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.71(s,1H),8.89(s,1H),8.38(d,J＝6.0Hz,1H),7.94(dd,J＝6.7,2.9Hz,1H),7.42-7.48(m,1H),7.33(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.22(d,J＝6.0Hz,1H),7.17(s,1H),7.13(s,1H),4.42(t,J＝5.6Hz,2H),4.26(t,J＝4.1Hz,2H),3.44-3.52(m,2H),2.71(t,J＝5.6Hz,2H),2.13-2.58(m,8H),2.09(s,3H)。
实施例30:4-{[6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯
从中间体51(35mg,0.07mmol)开始，如关于实施例4所述制备实施例30。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至3％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液，0.3％的氨水作为添加剂)纯化。蒸发适当级分，提供标题化合物(19mg,0.05mmol,69％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):378.2(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.81(s,1H),8.92(s,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,1H),7.68-7.80(m,2H),7.23(d,J＝6.0Hz,1H),7.19(d,J＝7.7Hz,1H),6.95(s,1H),4.26(t,J＝4.3Hz,2H),3.91(s,3H),3.44-3.54(m,2H),2.50(s,3H)。
实施例31:6-(5-氯-2-氟苯基)-N-{1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺
将中间体54(114mg,0.18mmol)在DCM(4mL)和TFA(1.11mL,14.56mmol)的混合物中的溶液在室温搅拌过夜。然后在真空下除去挥发物，并将残余物溶解在7N的氨在MeOH中的溶液中并在50℃搅拌1h。再次在真空下除去挥发物。将残余物与DCM一起研磨，提供作为白色固体的标题化合物(51mg,0.13mmol,71％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):396.2(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 11.40(br s,1H),8.20(s,1H),7.93-7.98(m,2H),7.38-7.44(m,1H),7.28(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.21-7.25(m,1H),7.05(s,1H),6.91(s,1H),6.63(d,J＝5.5Hz,1H),6.58(dd,J＝3.3,1.9Hz,1H),4.22(t,J＝4.3Hz,2H),3.48(brd,J＝2.5Hz,2H)。
实施例32:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-3-甲酰胺
从中间体55(87mg,0.15mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例32。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液))纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(62mg,0.12mmol,86％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):497.2(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.26(s,1H),8.72(s,1H),8.61(d,J＝7.7Hz,1H),8.34(d,J＝6.0Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.40-7.48(m,1H),7.27-7.37(m,2H),7.15(d,J＝0.8Hz,1H),7.01(s,1H),4.25(t,J＝4.4Hz,2H),3.65-3.85(m,1H),3.44-3.55(m,2H),2.77(br d,J＝11.5Hz,2H),2.16(s,3H),1.94(td,J＝11.7,1.6Hz,2H),1.71-1.84(m,2H),1.59(qd,J＝12.0,3.8Hz,2H)。
实施例33:N-(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-2-基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙酰胺
从中间体58(68mg,0.11mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例33。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液，随后20％的MeOH在EtOAc中的溶液作为洗脱液)纯化。将含有目标化合物的级分在减压下浓缩，并通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至60％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)进一步纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(34mg,0.06mmol,60％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):263.7(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.41(s,1H),8.59(s,1H),7.92-8.00(m,2H),7.81(d,J＝1.3Hz,1H),7.42(ddd,J＝8.8,4.0,2.8Hz,1H),7.29(dd,J＝11.2,8.8Hz,1H),7.03(s,1H),6.94(s,1H),6.68(dd,J＝5.7,2.0Hz,1H),4.20(t,J＝4.2Hz,2H),3.43-3.52(m,2H),2.58(t,J＝7.2Hz,2H),2.45-2.49(m,2H),2.19-2.45(m,8H),2.13(s,3H)。
实施例34:N-(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-2-基)-3-(二甲基氨基)丙酰胺
从中间体61(58mg,0.10mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例34。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从10％至100％的EtOAc在环己烷中的溶液，随后10％的MeOH在EtOAc中的溶液作为洗脱液)纯化。将含有目标化合物的级分在减压下浓缩，并通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至70％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)进一步纯化。蒸发适当级分，提供作为灰白色固体的标题化合物(27mg,0.06mmol,56％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):471.1(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.40(s,1H),8.58(s,1H),7.92-8.01(m,2H),7.81(d,J＝1.5Hz,1H),7.42(ddd,J＝8.8,4.2,2.8Hz,1H),7.29(dd,J＝11.2,8.8Hz,1H),7.03(d,J＝0.7Hz,1H),6.93(s,1H),6.68(dd,J＝5.7,2.2Hz,1H),4.20(t,J＝4.2Hz,2H),3.42-3.50(m,2H),2.42-2.55(m,4H),2.15(s,6H)。
实施例35:6-(5-氯-2-氟苯基)-N-{3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺
将中间体66(85mg,0.14mmol)悬浮于4N的HCl在1,4-二氧杂环己烷中的溶液(1.4mL)和MeOH(0.8mL)中并在室温搅拌2小时。在真空下除去挥发物。将残余物用4N的氨在MeOH中的溶液(2mL)溶解，并再次除去挥发物(3x)。将固体与MeOH和水一起研磨，提供作为白色固体的6-(5-氯-2-氟苯基)-N-{3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺(18mg,0.04mmol,33％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):397.1(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.20-13.74(m,1H),8.22(s,1H),8.09(d,J＝5.5Hz,1H),7.98-8.16(m,1H),7.94(dd,J＝6.7,2.5Hz,1H),7.38-7.47(m,1H),7.27-7.37(m,1H),7.23(s,1H),6.85-6.99(m,2H),4.25(br s,2H),3.48(br s,2H)。
实施例36:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲酸甲酯
向中间体68(71mg,0.10mmol)在DCM(2.0mL)中的溶液中加入TFA(0.32mL,4.15mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。加入甲苯(2mL)，在真空下除去挥发物。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至50％的MeCN+0.1％ HCOOH在水中的溶液+0.1％HCOOH作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(5mg,0.01mmol,11％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):454.2(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.39(br s,1H),10.12(s,1H),8.12(s,1H),8.06(d,J＝5.7Hz,1H),7.96(dd,J＝6.6,2.6Hz,1H),7.42(br dd,J＝7.2,4.2Hz,1H),7.26-7.37(m,2H),6.90-7.02(m,2H),4.27(br s,2H),3.85(s,3H),3.50(br s,2H)。
实施例37:N-{2-[双(2-羟基乙基)氨基]乙基}-4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酰胺
从中间体69(58mg,0.09mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例37。将粗制物质通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至65％的MeCN在含有氨-碳酸氢铵缓冲液的水(pH＝10)中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(33mg,0.06mmol,68％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):531.1(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.27(s,1H),8.70(s,1H),8.68(br t,J＝5.6Hz,1H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),7.94(dd,J＝6.8,2.8Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.8,4.1,2.8Hz,1H),7.32(dd,J＝11.1,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝5.8Hz,1H),7.16(s,1H),7.01(s,1H),4.37(t,J＝5.5Hz,2H),4.26(t,J＝4.0Hz,2H),3.40-3.50(m,6H),3.30-3.38(m,2H),2.68(t,J＝6.5Hz,2H),2.59(t,J＝6.2Hz,4H)。
实施例38:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酸甲酯
向中间体71(95mg,0.14mmol)在DCM(2.8mL)中的溶液中逐滴加入TFA(0.43mL,5.55mmol)。将混合物在室温搅拌5小时。将混合物使用PL-HCO3 SPE柱(5g)过滤，用DCM洗涤并将滤液在真空下浓缩。将残余物质用DMSO/水混合物溶解，并将得到的沉淀物过滤并用水彻底洗涤，提供作为白色固体的标题化合物(35mg,0.08mmol,56％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):454.1(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 12.08-12.31(m,1H),8.67(s,1H),8.08(d,J＝5.3Hz,1H),7.97(dd,J＝6.8,2.9Hz,1H),7.52(s,1H),7.43(ddd,J＝8.6,4.0,3.0Hz,1H),7.31(dd,J＝11.1,8.7Hz,1H),7.08(d,J＝1.1Hz,1H),7.03(s,1H),6.54(d,J＝5.5Hz,1H),4.21(t,J＝4.2Hz,2H),3.86(s,3H),3.47-3.53(m,2H)。
实施例39:N-(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-基)-3-(二甲基氨基)丙酰胺
从中间体74(61mg,0.11mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例39。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，然后通过制备型HPLC纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(12mg,0.02mmol,24％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):471.1(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.04(br s,1H),8.38(s,1H),8.17(d,J＝5.5Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.8Hz,1H),7.71(br s,1H),7.36-7.46(m,1H),7.29(dd,J＝11.1,8.8Hz,1H),7.09(d,J＝5.5Hz,1H),6.93(br s,1H),6.88(s,1H),4.20(t,J＝4.1Hz,2H),3.46(br t,J＝4.2Hz,2H),2.53-2.61(m,2H),2.45-2.52(m,2H),2.16(s,6H)
实施例40:N-{3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基}-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺
将中间体77(100mg,0.17mmol)悬浮于4N的HCl在1,4-二氧杂环己烷中的溶液(1.7mL,6.78mmol)和MeOH(0.94mL)中并将混合物在40℃搅拌2小时。在真空下除去溶剂。加入4N的氨在MeOH中的溶液(2mL)并在真空下除去挥发物。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(40mg,0.11mmol,66％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):180.6(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 12.04-13.54(m,1H),8.25(s,1H),8.15(d,J＝5.5Hz,1H),7.93-8.10(m,2H),7.84(br s,1H),7.74(t,J＝7.7Hz,1H),7.18(d,J＝7.5Hz,1H),6.93(d,J＝5.5Hz,1H),6.79(s,1H),4.26(t,J＝4.3Hz,2H),3.43-3.56(m,2H),2.42-2.55(m,3H)。
实施例41:6-(6-甲基吡啶-2-基)-N-{1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺
从中间体78(100mg,0.17mmol)开始，按照关于实施例40描述的程序制备实施例41。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至2％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(54mg,0.15mmol,89％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):180.6(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 13.24(s,1H),9.03(s,1H),8.19(s,1H),8.12(d,J＝5.5Hz,1H),7.99(d,J＝7.7Hz,1H),7.74(t,J＝7.7Hz,1H),7.65(s,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),6.90(s,1H),6.43(d,J＝5.5Hz,1H),4.20(t,J＝3.9Hz,2H),3.43-3.53(m,2H),2.46(s,3H)。
实施例42:N-(1-甲基哌啶-4-基)-4-{[6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酰胺
从中间体80(68mg,0.12mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例42。将粗制物质通过SCX(1g，用MeOH洗涤，用1N的氨在MeOH中的溶液洗脱)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(48.2mg,0.10mmol,86％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):230.6(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.22(s,1H),8.74(s,1H),8.61(br d,J＝7.5Hz,1H),8.37(d,J＝5.9Hz,1H),7.97(d,J＝7.7Hz,1H),7.66-7.78(m,2H),7.27(d,J＝5.7Hz,1H),7.18(d,J＝7.2Hz,1H),6.83(br s,1H),4.25(br s,2H),3.67-3.85(m,1H),3.47(brd,J＝1.1Hz,2H),2.77(br d,J＝11.8Hz,2H),2.43-2.57(m,3H),2.16(s,3H),1.95(t,J＝11.9Hz,2H),1.71-1.85(m,2H),1.50-1.67(m,2H)。
实施例43:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-{2-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]乙基}吡啶-3-甲酰胺
从中间体82(53mg,0.09mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例43。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(32mg,0.06mmol,72％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):513.2(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.25(s,1H),8.78(t,J＝5.6Hz,1H),8.71(s,1H),8.34(d,J＝5.8Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.9Hz,1H),7.39-7.48(m,1H),7.33(dd,J＝11.1,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝5.9Hz,1H),7.15(d,J＝0.7Hz,1H),7.02(s,1H),4.36-4.58(m,4H),4.25(t,J＝4.3Hz,2H),3.57(quin,J＝6.4Hz,1H),3.43-3.51(m,2H),3.34-3.39(m,2H),2.41(t,J＝6.7Hz,2H),2.13(s,3H)。
实施例44:2-({2-[(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-基)甲酰氨基]乙基}(甲基)氨基)乙酸甲酯
从中间体84(80mg,0.13mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例44。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至5％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化。蒸发适当级分，提供作为白色固体的标题化合物(57mg,0.11mmol,85％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):529.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 10.29(s,1H),8.66-8.79(m,2H),8.34(d,J＝5.7Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.44(ddd,J＝8.8,4.2,3.1Hz,1H),7.32(dd,J＝11.2,8.8Hz,1H),7.28(d,J＝5.7Hz,1H),7.15(s,1H),6.98-7.04(m,1H),4.25(t,J＝4.1Hz,2H),3.60(s,3H),3.43-3.51(m,2H),3.33-3.41(m,4H),2.68(t,J＝6.6Hz,2H),2.35(s,3H)
实施例45:6-(6-甲基吡啶-2-基)-N-{1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺
从中间体86(73mg,0.12mmol)开始，按照关于实施例40描述的程序制备实施例45。将粗制物质通过FC在Biotage NH硅胶上(从0％至10％的MeOH在DCM中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(17.8mg,0.05mmol,40％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):359.1(方法2)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 11.38(br s,1H),8.22(s,1H),7.92-8.02(m,2H),7.72(t,J＝7.7Hz,1H),7.64(s,1H),7.20-7.26(m,1H),7.15(d,J＝7.5Hz,1H),6.74(br s,1H),6.58-6.64(m,1H),6.55(d,J＝5.4Hz,1H),4.20(br t,J＝4.1Hz,2H),3.48(br s,2H),2.44(s,3H)。
实施例46:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(4-甲磺酰基哌嗪-1-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺
从中间体87(95mg,0.14mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例46。将粗制物质通过SCX(1g，用MeOH洗涤，用1N的氨在MeOH中的溶液洗脱)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(67mg,0.11mmol,83％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):295.7(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.25(s,1H),8.74(br t,J＝5.5Hz,1H),8.71(s,1H),8.34(d,J＝5.8Hz,1H),7.93(dd,J＝6.8,2.7Hz,1H),7.39-7.47(m,1H),7.32(dd,J＝11.1,8.9Hz,1H),7.28(d,J＝5.9Hz,1H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),4.25(br t,J＝3.8Hz,2H),3.47(br s,2H),3.41(q,J＝6.3Hz,2H),3.05-3.13(m,4H),2.82(s,3H),2.52-2.59(m,6H)。
实施例47:N-[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙基]-4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酰胺
从中间体88(74mg,0.11mmol)开始，如关于实施例28所述制备实施例47。将粗制物质通过SCX(1g，用MeOH洗涤，用1N的氨在MeOH中的溶液洗脱)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(52mg,0.09mmol,83％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):277.7(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.24(s,1H),8.75(t,J＝5.5Hz,1H),8.71(s,1H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),7.93(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.40-7.47(m,1H),7.24-7.36(m,2H),7.15(s,1H),7.01(s,1H),4.25(t,J＝3.9Hz,2H),3.35-3.51(m,8H),2.50-2.58(m,2H),2.33-2.47(m,4H),1.97(s,3H)。
实施例48:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酰胺
将中间体90(129mg,0.16mmol)悬浮于4N的HCl在1,4-二氧杂环己烷中的溶液(1.62mL,6.5mmol)和MeOH(1.2mL)中，并将混合物在35℃搅拌6小时。在真空下除去溶剂。将粗制物质通过SCX(1g，用MeOH洗涤，用1N的氨在MeOH中的溶液洗脱)纯化，提供作为白色固体的标题化合物(64mg,0.11mmol,70％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):282.7(方法2)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.78(br s,1H),8.41(s,1H),8.24(br t,J＝5.4Hz,1H),8.05(d,J＝5.4Hz,1H),7.94(dd,J＝6.8,2.8Hz,1H),7.40(dt,J＝8.4,3.5Hz,1H),7.27(dd,J＝10.9,8.9Hz,1H),7.18(d,J＝1.0Hz,1H),7.01(s,1H),6.94(br s,1H),6.65(d,J＝5.4Hz,1H),4.22(br t,J＝4.0Hz,2H),3.49(br s,2H),3.24-3.31(m,2H),2.66-2.86(m,2H),2.12(br s,3H),1.79(br d,J＝4.5Hz,2H),1.58-1.69(m,2H),1.37-1.52(m,2H),1.21-1.34(m,1H),1.14(qd,J＝11.9,3.3Hz,2H)。
实施例49:4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酰胺
从中间体91(120mg,0.16mmol)开始，按照关于实施例48描述的程序制备实施例49。得到作为白色固体的标题化合物(50mg,0.10mmol,61％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+2):255.6(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 11.82(s,1H),8.42(s,1H),8.17(t,J＝5.5Hz,1H),8.05(d,J＝5.4Hz,1H),7.94(dd,J＝6.9,2.8Hz,1H),7.35-7.48(m,1H),7.27(dd,J＝11.1,8.8Hz,1H),7.20(s,1H),7.02(s,1H),6.95(s,1H),6.64(d,J＝5.5Hz,1H),4.22(t,J＝4.1Hz,2H),3.49(br s,2H),3.36(q,J＝6.5Hz,2H),2.39(t,J＝6.6Hz,2H),2.17(s,6H)。
对比性的新合成的化合物，其缺乏氨基基团作为吡啶并噁嗪环和吡啶或苯基环之
间的连接基
实施例C1:4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶
向2-氨基-6-(5-氯-2-氟苯基)-[4,4'-联吡啶]-3-醇(中间体97,103mg,0.33mmol)和K2CO3(359mg,2.6mmol)在干燥DMF(6.5mL)中的搅拌悬浮液中加入1,2-二溴乙烷(84μL,0.980mmol)，并将混合物在80℃在PLS中加热5小时。将混合物用EtOAc稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(3x)和盐水(1x)洗涤。将有机相通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从20％至50％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，并然后通过反相FC在Biotage C18柱上(从5％至40％的MeCN+0.1％ HCOOH在水中的溶液+0.1％ HCOOH作为洗脱液)纯化，以产生作为淡黄色固体的4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶(23.3mg,0.07mmol,21％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):342.1(方法1)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.59-8.73(m,2H),7.95(dd,J＝6.8,2.9Hz,1H),7.56-7.65(m,2H),7.40-7.50(m,1H),7.34(dd,J＝11.0,8.8Hz,1H),7.28(s,1H),7.06(d,J＝1.5Hz,1H),4.21(t,J＝4.4Hz,2H),3.50(br d,J＝2.9Hz,2H)。
实施例C2:4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]苯酚
在合适的管形瓶中，将8-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪(中间体5,60mg,0.17mmol)、4-羟基苯基硼酸(28.9mg,0.21mmol)、Na2CO3(37mg,0.35mmol)和Pd(dppf)Cl2 DCM(7.15mg,0.01mmol)的混合物悬浮于1,4-二氧杂环己烷/水(2.2mL,3:1比率)中。将瓶密封，抽真空并用N2回充3次，然后在80℃加热45min。将混合物用EtOAc稀释，在
垫上过滤。将滤液用盐水(1x)洗涤，将有机相分离，通过相分离器过滤并在真空下浓缩。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从0％至20％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，然后加载到SCX柱上，用MeOH洗涤并用1N的氨在MeOH中的溶液洗脱。将碱性级分蒸发以提供作为白色固体的4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]苯酚(50mg,0.14mmol,80％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):357.2(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.66(br s,1H),7.94(dd,J＝6.9,2.7Hz,1H),7.38-7.51(m,3H),7.32(dd,J＝11.1,8.9Hz,1H),7.04(br s,1H),6.99(d,J＝1.4Hz,1H),6.83(d,J＝8.5Hz,2H),4.16(br t,J＝4.1Hz,2H),3.48(br s,2H)。
实施例C3:6-(5-氯-2-氟苯基)-8-(4-甲氧基苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪
按照与实施例C2类似的程序，从8-溴-6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪(中间体5,50mg,0.15mmol)和4-甲氧基苯基硼酸(26.6mg,0.17mmol)制备。将粗制物质通过FC在Biotage硅胶上(从5％至25％的EtOAc在环己烷中的溶液作为洗脱液)纯化，提供作为白色固体的6-(5-氯-2-氟苯基)-8-(4-甲氧基苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪(40mg,0.11mmol,74％收率)。
LC-MS(ESI):m/z(M+1):371.2(方法1)
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.92-7.97(m,1H),7.53-7.57(m,2H),7.40-7.46(m,1H),7.32(dd,J＝11.3,8.8Hz,1H),7.08(s,1H),6.99-7.04(m,3H),4.17(t,J＝4.5Hz,2H),3.80(s,3H),3.44-3.54(m,2H)。
本发明化合物的药理学活性
体外测定
使用ADP-GLO激酶测定法测量ADP的形成，监测本发明的化合物的酶活性。在将纯化的酶、底物和ATP温育后，产生的ADP被转化为ATP，ATP又被Ultra-Glo萤光素酶转化为光。发光信号与ADP量和激酶活性正相关。简而言之，通过温育2.6nM的纯化的商购可得的人ALK5(重组TGFβ1N-端GST-标记的,80-末端)、94.5μM终浓度的TGFβ1肽(Promega,T36-58)和超纯ATP(Promega V915B)，进行激酶反应。将ATP浓度设定为ALK5的Km值(允许酶达到半数最大速度(Vmax)的底物浓度)(5μM)。在25℃进行所有反应/温育。将化合物和ALK5激酶混合并温育15分钟。通过在测定中以0.83μM的最终浓度添加ATP来启动反应。温育150分钟后，停止反应，并根据制造商的说明使用ADP-Glo试剂盒检测ADP产生。以384孔形式进行测定，并使用在11点浓度-应答曲线中测试的一系列参考化合物进行验证。
下表10提供了各种化合物的结果，其中将化合物根据其对ALK5受体的抑制活性的效能(nM)进行分类。
表10
可以理解，表10的所有化合物都显示出作为ALK5受体拮抗剂的良好活性。
对比实施例
在与上述相同的体外测定中测试了实施例C1、C2和C3的化合物。
表11
| 实施例编号 | ALK5 IC50(nM) |
| C1 | 6500 |
| C2 | 1700 |
| C3 | 10000 |
如在表10中所示，本发明的化合物具有甚至低于1nM的效能，而对比实施例C1-C3具有高于1700nM和甚至更高得多的效能。
这些甚至不可比较的数据表明，与特征在于与吡啶环直接稠合的吡啶并噁嗪环的化合物C1、C2和C3相反，在特征在于氨基基团作为吡啶并噁嗪环和吡啶或与5元杂环缩合的吡啶之间的连接基的本发明化合物中，氨基基团作为这两个基团之间的连接基的存在出乎意料地且显著地决定了对ALK5受体的抑制活性的相关增加。
体内测定
将本发明的一些化合物以0.5mg/kg(30μL/小鼠，0.2％吐温80作为媒介物)的浓度鼻内滴注到C57BL6/J雌性小鼠中。
将肺/血浆比率(L/P)计算为在滴注后获得的肺和血浆(即全身)最大浓度之间的比率。
L/P代表化合物在肺和血浆之间重新分配的程度；
1的L/P比率对应于相等的肺和血浆；
L/P>1指示与血浆暴露相比更高的肺暴露。
在下表12中提供了一些化合物的结果。
表12
| 实施例编号 | L/P(Cmax) |
| 1 | 388 |
| 17 | 643 |
可以理解，表12的化合物表现出与血浆暴露相比的高肺暴露，表明与低全身暴露相关的良好吸入性能。
Claims (15)
1.式(I)的化合物及其药学上可接受的盐
其中
A选自由以下成员组成的集合：A1和A2
X1和X2独立地是C或N；
R1是H或选自由以下成员组成的集合：-NR3R4、-C(O)NR3R5、-NR3C(O)R6和-C(O)OR7；
R2是H或选自由以下成员组成的集合：-C(O)OR3和-C(O)NR3R6；或当X1或X2是N时，R2不存在；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R4是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NRARB、环烷基、任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代的杂环烷基、和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C1-C6)烷基和-SO2-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个或多个-(C1-C6)烷基取代；
RA是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
RB选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-C(O)O-(C1-C6)烷基、杂环烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
2.根据权利要求1所述的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，其中A是基团A1
其由式(Ia)代表
R1是H或选自由以下成员组成的集合：-NR3R4、-C(O)NR3R5、-NR3C(O)R6和-C(O)OR7；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R4是H或-(C1-C6)烷基；
R5是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NRARB、环烷基、任选地被-(C1-C6)烷基取代的杂环烷基、和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被一个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、-C(O)-(C1-C6)烷基和-SO2-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
RA是H或选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
RB选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亚烷基-C(O)O-(C1-C6)烷基、杂环烷基和-(C1-C6)羟基烷基；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
3.根据权利要求2所述的式(Ia)的化合物，所述化合物选自以下至少一种：
N-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-甲基吡啶-3-甲酰胺；
N4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-2,4-二胺；
N-[6-(4-甲基-1,3-噻唑-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
N-[6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-甲基吡啶-2-甲酰胺；
N4-[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-3,4-二胺；
N-[6-(2-氟-5-甲基苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(吗啉-4-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(二甲基氨基)乙基]吡啶-3-甲酰胺；
N-[6-(2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(哌嗪-1-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺；
N-[6-(6-氯吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
N-[6-(2,5-二氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
N-[6-(3-氯苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸酯；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯；
N-[6-(3-甲基苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
N-[6-(3-氯-4-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
N-(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-2-基)-3-(吗啉-4-基)丙烯酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(甲基氨基)乙基]吡啶-3-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-(丙烷-2-基)吡啶-3-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-环丙基吡啶-3-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-(哌啶-4-基)吡啶-3-甲酰胺；
N-[6-(5-氟吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]吡啶-4-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸2-(二甲基氨基)乙酯；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酯；
4-{[6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-3-甲酰胺；
N-(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-2-基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙烯酰胺；
N-(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-2-基)-3-(二甲基氨基)丙烯酰胺；
N-{2-[双(2-羟基乙基)氨基]乙基}-4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(二甲基氨基)乙基]吡啶-3-甲酰胺；
N-(1-甲基哌啶-4-基)-4-{[6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-{2-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]乙基}吡啶-3-甲酰胺；
2-({2-[(4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-基)甲酰氨基]乙基}(甲基)氨基)乙酸甲酯；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(4-甲磺酰基哌嗪-1-基)乙基]吡啶-3-甲酰胺；
N-[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙基]-4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}吡啶-3-甲酰胺。
4.根据权利要求2所述的式(Ia)的化合物，其中A是A1a
其由式(Iaa)代表
R1是H；
R8是被氟和氯取代的苯基。
5.根据权利要求2所述的式(Ia)的化合物，其中A是A1a
其由式(Iaa)代表
R1是-NHC(O)R6；
R6选自由以下成员组成的集合：4-乙基吗啉、1-乙基-4-甲基哌嗪和N,N-二甲基乙胺。
6.根据权利要求2所述的式(Ia)的化合物，其中A是A1b，其由式(Iab)代表
R1选自由以下成员组成的集合：-C(O)NHR5和-C(O)OR7；
R5选自由以下成员组成的集合：甲基、2-(甲基氨基)乙基、环丙基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基、2-(二甲基氨基)乙基、2-(哌嗪-1-基)乙基、(哌啶-4-基)、1-甲基哌啶-4-基和2-[双(2-羟基乙基)氨基]乙基；
R7是H或选自由以下成员组成的集合：甲基和2-(哌嗪-1-基)乙基。
7.根据权利要求1所述的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，其中A是基团A2
其由式(Ib)代表
X1和X2独立地是C或N；
R2是H或选自由以下成员组成的集合：-C(O)OR3和-C(O)NR3R6；或当X1或X2是N时，R2不存在；
R3是H或-(C1-C6)烷基；
R6选自由以下成员组成的集合：-(C1-C6)亚烷基-NR3R4和-(C1-C6)亚烷基-杂环烷基，其中所述杂环烷基任选地被-(C1-C6)烷基取代；
R8选自由以下成员组成的集合：芳基和杂芳基，其中所述芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自卤素原子、-(C1-C6)烷基和-(C1-C4)卤代烷基，且所述杂芳基任选地被一个或多个基团取代，所述基团选自-(C1-C6)烷基、卤素原子和-O-(C1-C6)烷基。
8.根据权利要求7所述的式(Ib)的化合物，所述化合物选自以下至少一种：
6-(5-氯-2-氟苯基)-N-{1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺；
6-(5-氯-2-氟苯基)-N-{1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺；
6-(5-氯-2-氟苯基)-N-{3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲酸甲酯；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酸甲酯；
N-{3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基}-6-(6-甲基吡啶-2-基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺；
6-(6-甲基吡啶-2-基)-N-{1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺；
6-(6-甲基吡啶-2-基)-N-{1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基}-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酰胺；
4-{[6-(5-氯-2-氟苯基)-2H,3H,4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-8-基]氨基}-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酰胺。
9.一种药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合的根据权利要求1-8中的任一项所述的式(I)的化合物。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其用于通过吸入施用。
11.用于用作药物的根据权利要求1-8中的任一项所述的式(I)的化合物或根据权利要求9和10所述的药物组合物。
12.根据权利要求11用于所述用途的式(I)的化合物或药物组合物，其用于预防和/或治疗哺乳动物中由ALK5信号传递途径介导的疾病、障碍或病症。
13.根据权利要求11和12用于所述用途的式(I)的化合物或药物组合物，其用于预防和/或治疗纤维化和/或涉及纤维化的疾病、障碍或病症。
14.根据权利要求13用于所述用途的式(I)的化合物或药物组合物，其用于预防和/或治疗纤维化，包括肺纤维化、特发性肺纤维化(IPF)、肝纤维化、肾纤维化、眼纤维化、心脏纤维化、动脉纤维化和系统性硬化症。
15.根据权利要求14用于所述用途的式(I)的化合物或药物组合物，其用于预防和/或治疗特发性肺纤维化(IPF)。
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