CN116063298A - Wnt通路抑制剂的代谢物 - Google Patents
Wnt通路抑制剂的代谢物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116063298A CN116063298A CN202111291182.9A CN202111291182A CN116063298A CN 116063298 A CN116063298 A CN 116063298A CN 202111291182 A CN202111291182 A CN 202111291182A CN 116063298 A CN116063298 A CN 116063298A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- cancer
- wnt
- reaction
- rex
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种WNT通路抑制剂,属于调节Wnt信号通路活性的化合物,并提供了该类化合物的制备方法,及该类化合物在制备拮抗Wnt信号通路的药物中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及一种五元杂环酰胺类WNT通路抑制剂的代谢物。
背景技术
Wnt信号通路在多细胞生物体轴分化、组织器官发生、肿瘤形成等生命过程中具有重要作用。Wnt基因编码表达的蛋白是一类分泌型糖蛋白,由19个成员组成,通过与细胞膜上Frizzled(Fzd)家族蛋白及低密度脂蛋白受体相关蛋白(LDL receptor relatedprotein,LRP)受体结合,激活典型Wnt/β-catenin通路、平面极通路、Wnt/Ca2+通路等多种细胞内信号途径,调控着包括增殖、分化、死亡、迁移、极化等多种细胞功能(Nusse Roel,Varmus Harold E.(1992).Wnt genes.Cell,69(7),1073-1087.)。
经研究报道发现,神经性疾病、炎症纤维化疾病、代谢性疾病以及多种类型癌症的发病机制中都有涉及到典型Wnt/β-catenin信号通路β-catenin-TCF/LCF转录复合物的激活的失调(Kahn,M.(2014).Can we safely target the Wnt pathway?Naturereviews.Nat.Rev.Drug.Discovery,13(7),513-532.)。在癌症研究领域中,Wnt信号参与肿瘤早期证据来源于小鼠乳腺癌中分离得到因病毒插入而激活的癌基因Int1;近10%的结直肠癌、头颈癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤患者癌症发生与Wnt信号调控元件R-spondin家族和RNF43/ZNRF3的功能突变诱导相关(B Madan,Z Ke,N Harmston,et al.(2015).Wntaddiction of genetically defined cancers reversed by PORCNinhibition.Oncogene,1-11.)。
CN107056755A公开了一种WNT通路抑制剂REX-P25-9,从分子水平测定Wnt通路STF报告基因的抑制活性,发现其对Wnt通路具有显著的抑制活性;此外,还进行了斑马鱼表型筛选实验,通过对斑马鱼的剪尾再生抑制试验和体轴发育抑制试验,发现其在体内的抗肿瘤活性显著;并通过体内药效实验等,发现其在体内的抗肿瘤效果显著。
研发人员研究了REX-P25-9的代谢产物,并且分离、制备和表征了这些代谢物。经评估,这些代谢物仍然具有较强的Wnt通路抑制活性,有望成为新的治疗剂。
发明内容
本发明一方面提供了如下式所示的REX-P25-9的代谢产物:
其中,R1和R4各自独立地为H或O,R2和R3各自独立地为H或OH。
本发明第二方面提供了这些代谢产物的制备方法。
本发明第三方面提供了这些代谢产物在制备作为Wnt通路抑制剂的药物中的应用。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例,对本发明的技术方案做进一步的描述,但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
实施例1 REX-P25-9-M7的制备
单口瓶中将REX-P25-9(1g,2.38mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中,将反应液用冰水浴降温至0℃,缓慢加入m-CPBA(0.7eq,287.97mg,1.67mmol)。体系在冰水浴中反应20min,爬小板(DCM:MeOH=15:1)显示REX-P25-9原料点基本消失。将反应液倒入30mL的冰水中,用二氯甲烷(10mL)萃取三次,饱和食盐水洗涤一次,无水硫酸镁干燥,过滤除去固体,旋转蒸发除去溶液,得到白色不溶物固体。将白色不溶物固体尽量多的溶解于二氯甲烷中,用大板提纯,得到REX-P25-9-M7(510mg)。MS(ESI)m/z=436.18[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(d,J=1.7Hz,1H),8.33(d,J=6.7Hz,1H),7.95(t,J=5.9Hz,1H),7.79–7.73(m,2H),7.67(d,J=1.5Hz,1H),7.56–7.46(m,2H),7.37–7.23(m,1H),4.74(d,J=6.2Hz,2H),2.58(s,3H),2.43(s,3H)。
实施例2 REX-P25-9-M4的制备
化合物2的合成:
向三口瓶中加入化合物1(20g)、二氯甲烷(200mL)、无水甲醇(200mL)、m-CPBA(8.24g),搅拌溶清,保温20~25℃反应17h;取样检测原料未反应完,补加m-CPBA(8.24g),保温20~25℃反应23h;将反应液降温至<10℃,有白色固体析出,抽滤,滤饼减压45℃真空干燥后得到白色固体2(18.5g)。
化合物3的合成:
向三口瓶中加入化合物2(18.5g),乙酸酐(185mL),搅拌升温至60~70℃,保温反应16h;取样检测,有目标分子,将反应液降温至20~25℃,有固体析出,过滤,滤饼真空干燥后得到6.9g粗品,柱层析(PE→PE:EA→DCM:MeOH=10:1),合并层析液浓缩至干得到淡黄色固体化合物3(2.5g)。
化合物REX-P25-9-M4的合成:
向三口瓶中加入化合物3(2.5g),THF(12.5mL),纯化水(12.5mL),氢氧化钠水溶液(2.48mL,含251mg氢氧化钠),搅拌升温至75~80℃;保温反应50min,取样检测,原料反应完全;将反应液冷却至室温,用稀盐酸调pH至7~8,过滤,滤饼用少量纯化水洗涤,真空干燥后得到1.1g粗品;粗品送制备分离,得到化合物REX-P25-9-M4(759mg)。MS(ESI)m/z=436.8[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.03-10.00(t,1H),8.57-8354(m,2H),7.94-7.75(d,2H),7.74(s,1H),7.67-7.62(m,2H),7.53-7.48(m,1H),7.43-7.42(m,1H),5.50-5.47(t,1H),4.63-4.57(m,4H),2.35(s,3H)。
实施例3 REX-P25-9-M-I的制备
化合物2的合成:
向100mL单口瓶中加入化合物1(1g),乙腈(50mL),Boc胺(1.5g),TFA(2.2g),三乙基硅烷(7.4g),室温搅拌反应过夜;取样检测,大部分为原料;补加0.5g Boc胺,继续搅拌反应;取样检测,基本无变化;将反应液减压浓缩干,PE:EA=10:1柱层析,TLC点挨得较近,得不纯产物2g。直接进行下一步反应。
化合物3的合成:
向100mL单口瓶中加入化合物2(2g),DCM(20mL),m-CPBA(4g),室温搅拌反应过夜;取样检测,原料基本无剩余;向反应液加入20mL碳酸氢钠水溶液,搅拌10min;分液,水相用DCM(20mL)萃取一次;合并有机相,无水硫酸钠干燥;滤去干燥剂,滤液减压浓缩干,PE:EA=8:1爬大板,得0.7g黄色油状物。直接进行下一步反应。
化合物4的合成:
向100mL单口瓶中加入化合物3(0.7g),二氧六环(10mL),SM3(1.2g),K2CO3,(1.88g,3eq),Pd(PPh3)4(0.05g,0.01eq),氮气置换气体三次;升温至90-95℃搅拌反应;取样检测,原料基本无剩余;将反应液减压浓缩干,柱层析提纯。通过相同方法将化合物的总量合成到5g。
化合物5的合成:
向100mL三口瓶中加入化合物4(6.3g),再加入HCl/MeOH,搅拌反应;TLC检测原料基本转化完全;减压将反应液浓缩至干,直接用于下一步;
化合物REX-P25-9-M-I的合成:
50mL三口中加入化合物5(4.2g),SM4(4.18g),DIEA(4.07g),MeOH(80mL),搅拌升温至回流,搅拌过夜;将反应液降温至室温,过滤出固体,仅有量产物,滤液检测,将滤液减压浓缩至干。MS(ESI)m/z=435.5[M+H]+。
实施例4 REX-P25-9-M2的制备
单口瓶中将REX-P25-9(1g,2.38mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中,将反应液用冰水浴降温至0℃,缓慢加入m-CPBA(3eq,1.23g,7.15mmol)。体系在室温中反应2h,爬小板(DCM:MeOH=15:1)显示REX-P25-9原料点消失。将反应液倒入30mL的冰水中,用二氯甲烷(10mL)萃取三次,饱和食盐水洗涤一次,无水硫酸镁干燥,过滤除去固体,旋转蒸发除去溶液,得到白色不溶物固体REX-P25-M2(912mg)。MS(ESI)m/z=451.5[M+H]+。
实施例5 REX-P25-9-M-II的制备
化合物2的合成:
将化合物1(1.07g,7.0mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(10mL)中,分别加入NBS(1.62g,9.1mmol)和偶氮二异丁腈(92mg,0.56mmol)。将体系加热到85℃反应30mins。TLC显示反应完成。将反应液倒入30mL水中,用二氯甲烷(10mL)萃取三次,饱和食盐水洗涤一次,无水硫酸镁干燥,过滤除去固体,旋转蒸发除去溶液,使用层析柱提纯(PE/EA=80:1)得到白色固体目标产物2(750mg,3.24mmol,47%yield)。MS(ESI)m/z 230.7[M+H]+。
化合物3的合成:
向DMF(4mL)分别加入化合物2(350mg,1.5mmol),K2CO3(420mg,3.04mmol),AcOH(137mg,2.3mmol)缓慢滴加进反应液中。将体系在室温下反应2h,TLC显示反应完成。将反应液倒入30mL水中,用乙酸乙酯(10mL)萃取三次,饱和食盐水洗涤一次,无水硫酸镁干燥,过滤除去固体,旋转蒸发除去溶液,使用层析柱提纯(PE:EA=10:1)得到白色固体目标产物(300mg,95%yield)。MS(ESI)m/z 210.9[M+H]+。使用同样的方法合成化合物总量为800mg后进行下一步反应。
化合物4的合成:
将化合物3(800mg,3.79mmol),2-甲基-4-吡啶硼酸,K2CO3(1.05g,5.78mmol)和Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(155mg,0.19mmol)混合溶解在二氧六环和水的混合溶剂22mL(二氧六环:水=10:1)中。在氮气保护下于120℃反应过夜。TLC显示反应完成。将反应液倒入60mL水中,用乙酸乙酯(20mL)萃取三次,饱和食盐水洗涤一次,无水硫酸镁干燥,过滤除去固体,旋转蒸发除去溶液,使用层析柱提纯(DCM:MeOH=100:1)得到淡黄色固体目标产物(210mg,0.933mmol,25%yield)。MS(ESI)m/z 226.0[M+H]+。
化合物5的合成:
将化合物4(210mg,0.930mmol)和雷尼镍(240mg)溶解在甲醇(12mL)和四氢呋喃(3mL)的混合溶剂中,在氢气环境下室温反应过夜。TLC显示反应完成。过滤,旋转蒸发除去溶液,得到目标产物粗品(205mg),粗品目标产物直接进行下一步反应。MS(ESI)m/z 230.1[M+H]+。
化合物7的合成:
将化合物6(252mg,1.00mmol)溶解在甲醇(7.5mL)中,在0℃的冰浴条件下缓慢逐滴加入氢氧化锂水溶液(44mg,in 2.5mL H2O)。体系在0℃的冰浴条件下反应1h。旋转蒸发除去溶液,得到目标产物粗品(236mg),粗品目标产物直接进行下一步反应。MS(ESI)m/z226.0[M+H]+。
化合物REX-P25-9-M-II的合成
将化合物7(236mg,crude),HATU(570mg,1.50mmol)和Et3N(150mg,1.50mmol)混合在DMF(4mL)中,体系在室温下搅拌5mins。化合物5(205mg,crude)溶解在DMF(2mL)中逐滴加入到反应体系中。将体系在氮气保护下室温反应过夜。反应结束后使用MPLC提纯得到最终产物5-(3-fluorophenyl)-N-((3-(hydroxymethyl)-2'-methyl-[2,4'-bipyridin]-5-yl)methyl)-1,3,4-thiadiazole-2-carboxamide(57.6mg,0.132mmol,15%yield)。MS(ESI)m/z=436.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.04(t,J=6.0Hz,1H),8.6(s,1H),8.52(d,J=4.8Hz,1H),8.01(s,1H),7.93(d,J=7.6Hz,2H),7.65(dd,J=14.4,7.8Hz,1H),7.54–7.45(m,1H),7.44(s,1H),7.38(d,J=4.4Hz,1H),5.46(t,J=5.2Hz,1H),4.61(d,J=5.6Hz,2H),4.50(d,J=5.2Hz,2H),2.53(s,3H)。
实施例6 Super-Top-Flash(STF)报告基因试验
化合物采用稳定转染STF报告基因的HEK293T-STF细胞株同L-Wnt3a分泌细胞株共培养方式测定其对Wnt信号通路的抑制活性,该活性采用IC50这一指标来表示,IC50即STF报告基因表达的Luciferase活性被抑制50%时的化合物的浓度。
本发明实施例制备的化合物,利用CrownBio公司的Wnt报告基因平台进行测定,测定结果见表一。结果表明,本发明提供的化合物从分子水平上有较好的Wnt信号通路抑制活性。
表一 实施例化合物对Wnt通路STF报告基因抑制的活性测定
Compounds | <![CDATA[IC<sub>50</sub>(nM)<!-- 5 -->]]> |
<![CDATA[REX-P25-9-M<sub>7</sub>]]> | 3.563 |
<![CDATA[REX-P25-9-M<sub>4</sub>]]> | 2.11 |
Claims (6)
2.一种药物组合物,包含如权利要求1所示的化合物或其药学上可接受的盐,以及一种或多种药学上可接受的载体。
3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于拮抗Wnt信号通路的药物中的应用。
4.如权利要求2所述的药物组合物在制备用于拮抗Wnt信号通路的药物中的应用。
5.如权利要求3或4所述的应用,其特征在于其为用于治疗与异常的Wnt信号活性相关的细胞增殖性疾病、消化系统疾病的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于其为治疗癌症,包括非小细胞肺癌、间变性大细胞淋巴瘤、炎性肌纤维母细胞瘤、鼻咽癌、乳腺癌、结直肠癌、弥漫大B细胞淋巴瘤、肝癌、胃癌、食道癌、胰腺癌、卵巢癌、全身组织细胞增生症和神经母细胞瘤的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111291182.9A CN116063298A (zh) | 2021-11-02 | 2021-11-02 | Wnt通路抑制剂的代谢物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202111291182.9A CN116063298A (zh) | 2021-11-02 | 2021-11-02 | Wnt通路抑制剂的代谢物 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN116063298A true CN116063298A (zh) | 2023-05-05 |
Family
ID=86172094
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202111291182.9A Pending CN116063298A (zh) | 2021-11-02 | 2021-11-02 | Wnt通路抑制剂的代谢物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN116063298A (zh) |
-
2021
- 2021-11-02 CN CN202111291182.9A patent/CN116063298A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101335746B1 (ko) | 이치환된 프탈라진 헷지호그 경로 길항제 | |
CN112300153B (zh) | 一种杂环化合物、药物组合物和用途 | |
CN112939965B (zh) | 同时诱导egfr和parp蛋白降解的化合物及制备方法和应用 | |
WO2005080392A1 (ja) | ピラゾロキノロン誘導体およびその用途 | |
CN112851663B (zh) | 一种并杂环化合物及其用途 | |
WO2022174525A1 (zh) | 一类化合物及其制备方法和用途 | |
CN112430234A (zh) | 一种新型kras g12c蛋白抑制剂及其制备方法和用途 | |
CN112745335A (zh) | 一种三并杂环化合物及其用途 | |
CN115353508B (zh) | 5-吡啶-1h-吲唑类化合物、药物组合物和应用 | |
WO2020125759A1 (zh) | 作为wnt信号通路抑制剂的化合物及其医学应用 | |
CN115160309A (zh) | Krasg12c突变蛋白杂环类抑制剂的制备及其应用 | |
CA3056696A1 (en) | Process for making hepatitis b core protein modulators | |
CN110066281B (zh) | 多靶点抗肿瘤活性的吴茱萸碱衍生物及其制备方法与应用 | |
CN110240598B (zh) | 甲酰胺衍生物的制备方法及其中间体化合物 | |
CA2767963A1 (en) | Stereoselective synthesis of bicyclic heterocycles | |
CN116063298A (zh) | Wnt通路抑制剂的代谢物 | |
US20180362498A1 (en) | Forms and compositions of an erk inhibitor | |
CN113557236B (zh) | 一种双功能免疫调节剂及其在药学上可接受的盐、药物组合物 | |
CN114478403A (zh) | 一种含芳香胍基类化合物及其制备方法与应用 | |
WO2021213111A1 (zh) | Snail抑制剂及其衍生物,制备方法、药物组合物和应用 | |
CN114539267A (zh) | 一种吴茱萸碱衍生物及其应用 | |
CN113072550B (zh) | 一种高选择性成纤维细胞生长因子受体抑制剂和应用 | |
CN113493452A (zh) | 一种wnt通路抑制剂 | |
CN113891749A (zh) | 喹啉衍生物及其用于治疗癌症的用途 | |
CN109705117A (zh) | 三环类化合物、其制备方法及用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication |