CN116057069A - 用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗或预防SARS-CoV-2感染和COVID-19的方法 - Google Patents
用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗或预防SARS-CoV-2感染和COVID-19的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116057069A CN116057069A CN202180043533.6A CN202180043533A CN116057069A CN 116057069 A CN116057069 A CN 116057069A CN 202180043533 A CN202180043533 A CN 202180043533A CN 116057069 A CN116057069 A CN 116057069A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cov
- sars
- amino acid
- antibody
- antigen binding
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 title claims abstract description 287
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 223
- 208000037847 SARS-CoV-2-infection Diseases 0.000 title claims abstract description 151
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 title claims description 277
- 101710114810 Glycoprotein Proteins 0.000 title claims description 186
- 101710167605 Spike glycoprotein Proteins 0.000 title claims description 186
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 260
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 234
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 234
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 234
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 claims abstract description 206
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims abstract description 149
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 35
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims description 275
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims description 275
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 217
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 169
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 134
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 113
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 100
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 97
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 93
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 90
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 87
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 71
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 60
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 54
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 49
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 claims description 40
- 230000034994 death Effects 0.000 claims description 39
- 231100000517 death Toxicity 0.000 claims description 39
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 38
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 38
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 38
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 38
- 238000005399 mechanical ventilation Methods 0.000 claims description 34
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 34
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 31
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 29
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 26
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 25
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 25
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 claims description 20
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 19
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 claims description 16
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 claims description 15
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 claims description 15
- 238000002640 oxygen therapy Methods 0.000 claims description 15
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 claims description 14
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 claims description 12
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 claims description 12
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 11
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 11
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 11
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 10
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 10
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 8
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 8
- 229960001997 adefovir Drugs 0.000 claims description 7
- WOZSCQDILHKSGG-UHFFFAOYSA-N adefovir depivoxil Chemical compound N1=CN=C2N(CCOCP(=O)(OCOC(=O)C(C)(C)C)OCOC(=O)C(C)(C)C)C=NC2=C1N WOZSCQDILHKSGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 claims description 6
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 claims description 6
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 claims description 6
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 claims description 6
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 claims description 6
- 239000003154 D dimer Substances 0.000 claims description 4
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 claims description 4
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 claims description 4
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 claims description 4
- 108010052295 fibrin fragment D Proteins 0.000 claims description 4
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 claims description 2
- 108040006858 interleukin-6 receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- 125000002345 steroid group Chemical group 0.000 claims 1
- 101710198474 Spike protein Proteins 0.000 abstract description 69
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 abstract description 68
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 195
- 229940125677 REGEN-COV Drugs 0.000 description 188
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 108
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 81
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 59
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 58
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 57
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 53
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 49
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 48
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 46
- 230000007485 viral shedding Effects 0.000 description 44
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 42
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 31
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 31
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 31
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 31
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 30
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 30
- 101000629318 Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 Spike glycoprotein Proteins 0.000 description 29
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 29
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 27
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 27
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 24
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 24
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 23
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 22
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 22
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 22
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 20
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 20
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 20
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 206010051792 Infusion related reaction Diseases 0.000 description 16
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 16
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 16
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 15
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 15
- 230000004044 response Effects 0.000 description 15
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 14
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 13
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 13
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 12
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 12
- 238000013461 design Methods 0.000 description 12
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 12
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 12
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 11
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 11
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 11
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 11
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 11
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 11
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 10
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 10
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 238000011160 research Methods 0.000 description 10
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 9
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 9
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 9
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 9
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 9
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 9
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 9
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 9
- 238000012552 review Methods 0.000 description 9
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 9
- 238000007879 vasectomy Methods 0.000 description 9
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 8
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 8
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 8
- 206010068319 Oropharyngeal pain Diseases 0.000 description 8
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 8
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 8
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 8
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 8
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 8
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 8
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 8
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 8
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 8
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 7
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- 241001112090 Pseudovirus Species 0.000 description 7
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 7
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 7
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 7
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000008354 sodium chloride injection Substances 0.000 description 7
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 7
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 7
- 208000010470 Ageusia Diseases 0.000 description 6
- 206010002653 Anosmia Diseases 0.000 description 6
- 206010008479 Chest Pain Diseases 0.000 description 6
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 description 6
- 101710139375 Corneodesmosin Proteins 0.000 description 6
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 6
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 235000019666 ageusia Nutrition 0.000 description 6
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 6
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000009802 hysterectomy Methods 0.000 description 6
- 229940008228 intravenous immunoglobulins Drugs 0.000 description 6
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 6
- 230000008518 non respiratory effect Effects 0.000 description 6
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 5
- 108010062427 GDP-mannose 4,6-dehydratase Proteins 0.000 description 5
- 102000002312 GDPmannose 4,6-dehydratase Human genes 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 5
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical class C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 5
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 5
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 5
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N hydroxychloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CCO)CC)=CC=NC2=C1 XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960004171 hydroxychloroquine Drugs 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 210000003300 oropharynx Anatomy 0.000 description 5
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 5
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 5
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 5
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 5
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 5
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- CMXXUDSWGMGYLZ-XRIGFGBMSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydron;chloride;hydrate Chemical compound O.Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 CMXXUDSWGMGYLZ-XRIGFGBMSA-N 0.000 description 4
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical group ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000000736 Amenorrhea Diseases 0.000 description 4
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 4
- 102100035765 Angiotensin-converting enzyme 2 Human genes 0.000 description 4
- 108090000975 Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 description 4
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 4
- 238000000959 Cochran–Mantel–Haenszel (CMH) test Methods 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N GDP-L-fucose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N GDP-beta-L-fucose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 4
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 4
- 231100000540 amenorrhea Toxicity 0.000 description 4
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 4
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 4
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 4
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 4
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 4
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 4
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 4
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 4
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 4
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 4
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- 238000013439 planning Methods 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 4
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 4
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 4
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 4
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 4
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 4
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 4
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 4
- LVXLCZPTUBQNHH-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-[[1-(carboxymethylamino)-3-(2-chloro-1,1,2-trifluoroethyl)sulfanyl-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCC(=O)NC(CSC(F)(F)C(F)Cl)C(=O)NCC(O)=O LVXLCZPTUBQNHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 3
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 3
- 208000034657 Convalescence Diseases 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 3
- 108700008242 S-(2-chloro-1,1,2-trifluoroethyl)glutathione Proteins 0.000 description 3
- 102220599400 Spindlin-1_D1118H_mutation Human genes 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 201000010276 collecting duct carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 3
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 3
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 3
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 3
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 3
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000011985 exploratory data analysis Methods 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 3
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 3
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 3
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 3
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 3
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 231100000546 inhibition of ovulation Toxicity 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 3
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 210000004914 menses Anatomy 0.000 description 3
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 3
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 3
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M phenethicillin potassium Chemical compound [K+].N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 238000013105 post hoc analysis Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000012414 sterilization procedure Methods 0.000 description 3
- 238000009810 tubal ligation Methods 0.000 description 3
- 239000012855 volatile organic compound Substances 0.000 description 3
- 102100030988 Angiotensin-converting enzyme Human genes 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- AIRYAONNMGRCGJ-FHFVDXKLSA-N CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@@H]2NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc3c[nH]cn3)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc3ccccc3)C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc3c[nH]cn3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc3ccc(O)cc3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](Cc3ccc(O)cc3)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](Cc3ccc(O)cc3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](Cc2ccccc2)C(=O)N[C@@H](Cc2ccccc2)C(=O)N[C@@H](Cc2ccc(O)cc2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)NC1=O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@@H]2NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc3c[nH]cn3)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc3ccccc3)C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc3c[nH]cn3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc3ccc(O)cc3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](Cc3ccc(O)cc3)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](Cc3ccc(O)cc3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](Cc2ccccc2)C(=O)N[C@@H](Cc2ccccc2)C(=O)N[C@@H](Cc2ccc(O)cc2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)NC1=O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC AIRYAONNMGRCGJ-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 2
- 229940022962 COVID-19 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 206010008531 Chills Diseases 0.000 description 2
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 2
- 238000000729 Fisher's exact test Methods 0.000 description 2
- 102000006471 Fucosyltransferases Human genes 0.000 description 2
- 108010019236 Fucosyltransferases Proteins 0.000 description 2
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 2
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 101000638154 Homo sapiens Transmembrane protease serine 2 Proteins 0.000 description 2
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 2
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 2
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 2
- 206010022095 Injection Site reaction Diseases 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 2
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- 229920012266 Poly(ether sulfone) PES Polymers 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 description 2
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 102100031989 Transmembrane protease serine 2 Human genes 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- -1 and the like (Tomer Proteins 0.000 description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 2
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- 238000012550 audit Methods 0.000 description 2
- 238000013475 authorization Methods 0.000 description 2
- 229940090047 auto-injector Drugs 0.000 description 2
- 238000009811 bilateral tubal ligation Methods 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000000546 chi-square test Methods 0.000 description 2
- 230000005796 circulatory shock Effects 0.000 description 2
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 2
- 229940124301 concurrent medication Drugs 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 2
- 101150023212 fut8 gene Proteins 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 101150106565 gmd gene Proteins 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000001325 log-rank test Methods 0.000 description 2
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 2
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 239000000820 nonprescription drug Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 2
- 235000015927 pasta Nutrition 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 2
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 description 2
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- 230000007502 viral entry Effects 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N (2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 102100021266 Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 208000028185 Angioedema Diseases 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031504 Asymptomatic Infections Diseases 0.000 description 1
- 241001302652 Bassiana Species 0.000 description 1
- 208000009079 Bronchial Spasm Diseases 0.000 description 1
- 208000014181 Bronchial disease Diseases 0.000 description 1
- 206010006482 Bronchospasm Diseases 0.000 description 1
- 208000009458 Carcinoma in Situ Diseases 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000002330 Congenital Heart Defects Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 208000028399 Critical Illness Diseases 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 201000011001 Ebola Hemorrhagic Fever Diseases 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010045674 Fucose-1-phosphate guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100039835 Galactoside alpha-(1,2)-fucosyltransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000819490 Homo sapiens Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101000885616 Homo sapiens Galactoside alpha-(1,2)-fucosyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102100040648 L-fucose kinase Human genes 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010023644 Lacrimation increased Diseases 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000699673 Mesocricetus auratus Species 0.000 description 1
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000127282 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus Species 0.000 description 1
- 208000034486 Multi-organ failure Diseases 0.000 description 1
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 description 1
- 238000002944 PCR assay Methods 0.000 description 1
- 101150050331 PGIC gene Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 102100033075 Prostacyclin synthase Human genes 0.000 description 1
- 101710179550 Prostacyclin synthase Proteins 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 238000003559 RNA-seq method Methods 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091006197 SARS-CoV-2 Nucleocapsid Protein Proteins 0.000 description 1
- 108091005634 SARS-CoV-2 receptor-binding domains Proteins 0.000 description 1
- 206010039897 Sedation Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000629313 Severe acute respiratory syndrome coronavirus Spike glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 208000032023 Signs and Symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000032140 Sleepiness Diseases 0.000 description 1
- 206010041349 Somnolence Diseases 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010043395 Thalassaemia sickle cell Diseases 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 206010043521 Throat irritation Diseases 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N [3-[hydroxy(2-hydroxyethoxy)phosphoryl]oxy-2-[(e)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000002820 assay format Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229940126587 biotherapeutics Drugs 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 206010008129 cerebral palsy Diseases 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000032798 delamination Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000013504 emergency use authorization Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000026502 entry into host cell Effects 0.000 description 1
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 229940015979 epipen Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 108010083136 fucokinase Proteins 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 229960000578 gemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229950009614 gimsilumab Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000011553 hamster model Methods 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 229940038661 humalog Drugs 0.000 description 1
- 229940048921 humira Drugs 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000004317 lacrimation Effects 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000013465 muscle pain Diseases 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100001079 no serious adverse effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 201000005111 ocular hyperemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- 230000000624 ovulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 230000007030 peptide scission Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 230000002064 post-exposure prophylaxis Effects 0.000 description 1
- 230000000136 postovulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000013639 protein trimer Substances 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- QHGVXILFMXYDRS-UHFFFAOYSA-N pyraclofos Chemical compound C1=C(OP(=O)(OCC)SCCC)C=NN1C1=CC=C(Cl)C=C1 QHGVXILFMXYDRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000007859 qualitative PCR Methods 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000012959 renal replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004153 renaturation Methods 0.000 description 1
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 102200118205 rs33990858 Human genes 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000036280 sedation Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000010206 sensitivity analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 201000008261 skin carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000934 spermatocidal agent Substances 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical group 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000011421 subcutaneous treatment Methods 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 238000003239 susceptibility assay Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000014599 transmission of virus Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/215—Coronaviridae, e.g. avian infectious bronchitis virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1002—Coronaviridae
- C07K16/1003—Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 [SARS‐CoV‐2 or Covid-19]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
- A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了用于预防和治疗SARS‑CoV‑2感染、COVID‑19或其症状的方法。本发明方法的特征在于施用一种或多种结合SARS‑CoV‑2的表面蛋白(例如，刺突蛋白)的抗原结合分子(例如，抗体)。
Description
相关申请的交叉引用
本专利申请按照美国法典第35卷第119条(e)款要求以下美国临时专利申请号的权益：2020年6月3日提交的63/034,348、2020年6月9日提交的63/036,956、2020年6月12日提交的63/038,274、2020年6月24日提交的63/043,336、2020年8月3日提交的63/060,592、2020年8月7日提交的63/062,961、2020年8月14日提交的63/065,799、2020年9月29日提交的63/084,881、2020年9月29日提交的63/085,066、2020年10月8日提交的63/089,399、2020年10月12日提交的63/090,690、2020年10月20日提交的63/094,133、2020年10月26日提交的63/105,779、2020年10月28日提交的63/106,696、2020年11月10日提交的63/112,140、2020年11月20日提交的63/116,773、2020年11月30日提交的63/119,593、2020年12月1日提交的63/120,065、2020年12月14日提交的63/124,980、2020年12月29日提交的63/131,627、2021年1月25日提交的63/141,423、2021年1月26日提交的63/141,952、2021年1月27日提交的63/142,471、2021年2月2日提交的63/144,789、2021年2月18日提交的63/150,978、2021年3月17日提交的63/162,504、2021年3月18日提交的63/162,996、2021年3月22日提交的63/164,488、2021年3月24日提交的63/165,654、2021年3月25日提交的63/166,187、2021年4月11日提交的63/173,468、2021年5月6日提交的63/185,301和2021年5月7日提交的63/186,029，这些美国临时专利申请中的每一者全文以引用方式并入本文用于所有目的。
联邦政府资助的研究或开发
本发明是在美国卫生与公众服务部授予的协议HHSO100201700020C的政府支持下进行的。政府对本发明享有一定权利。
对序列表的参考
本专利申请以引用方式并入于2021年6月2日创建并含有72,328个字节的以计算机可读形式作为文件10807WO01-Sequence提交的序列表。
技术领域
本发明属于医学领域，并且涉及用于经由施用结合SARS-CoV-2的表面蛋白的抗原结合分子(例如，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和其抗原结合片段，或此类抗体或抗原结合片段的组合)来治疗SARS-CoV-2感染和COVID-19的方法和药物组合物。
背景技术
冠状病毒是包膜的单链RNA病毒家族。近几十年来，在人中鉴定出两种高度致病的冠状病毒菌株：严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)。据发现，这些病毒会引起严重的，并且有时致命的呼吸道疾病。
2019年12月，在中国武汉市的患者簇中鉴别出不明原因的肺炎。在这些患者中鉴定出新型包膜的RNA乙型冠状病毒—严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)—并且这种由SARS-CoV-2感染引起的疾病后来被世界卫生组织命名为冠状病毒疾病2019(COVID-19)。截至2020年5月，全球已报告超过550万例COVID-19确认病例。迅速蔓延的全球疫情促使世界卫生组织宣布COVID-19为国际关注的大流行病和公共卫生紧急情况。
患有COVID-19的患者处于发展多种呼吸道病症的风险，范围从相对轻度的呼吸道症状到严重的呼吸衰竭和死亡。在住院患者中，经常需要重症监护和/或氧气补充(例如，机械通气)，并且报告的死亡率很高。在中国疾病预防控制中心的一份包括44,500例确认感染的报告中，近20％的患者出现晚期呼吸道症状(14％的患者出现呼吸困难、缺氧或影像学上>50％的肺部受累；5％的患者出现呼吸衰竭、休克或多器官衰竭)。另一项对中国COVID-19患者的分析发现，在1,099名住院患者中，5％的患者被送入重症监护室(ICU)，2.3％的患者需要有创机械通气，并且1.4％的患者死亡。在中国报告的入院时患有晚期疾病(定义为肺炎、低氧血症和呼吸急促)的患者中，这些阴性结果分别上升至19％、14.5％和8.1％。一份对美国2,634名COVID-19住院患者的报告确定了相似的临床结果：14.2％的患者被送入ICU，12.2％的患者需要有创机械通气，并且21％的患者死亡。其他报告发现，大约20％至30％的COVID-19和肺炎住院患者需要重症监护以获得呼吸支持。
冠状病毒具有被包裹在由外包膜包围的核衣壳(N)蛋白中的RNA基因组。该包膜由膜(M)蛋白和包膜(E)蛋白(这些蛋白参与病毒组装)以及刺突(S)蛋白(该蛋白介导进入宿主细胞)构成。S蛋白形成大的三聚体突起，从而提供冠状病毒标志性的冠状外观。S蛋白三聚体与宿主受体结合，并且在由细胞蛋白酶引发之后，介导宿主-病毒膜融合。S蛋白似乎是SARS-CoV-2病毒感染的核心。SARS-CoV-2S蛋白以高亲和力结合宿主受体血管紧张素转化酶2(ACE2)，并且在细胞分析和动物模型中可利用ACE2作为宿主细胞进入的功能性受体。
鉴于S蛋白在SARS-CoV-2发病机制中的可能的关键作用，正在进行大量努力来开发靶向该蛋白的抗体和疫苗。
发明内容
本公开提供了用于改善COVID-19的一个或多个临床参数的方法。在一些情况下，该方法包括向对其有需要的受试者施用治疗性组合物，其中该治疗性组合物包含结合SARS-CoV-2的表面蛋白的至少一种抗原结合分子。在一些实施方案中，受试者是患有实验室确认的SARS-CoV-2和一种或多种COVID-19症状的人患者。在一些情况下，该一种或多种COVID-19症状包括发烧、咳嗽或气短。
在一些实施方案中，受试者选自由以下组成的组：(a)需要低流量氧气补充的人COVID-19患者；(b)需要高强度氧气疗法但不需要机械通气的人COVID-19患者；和(c)需要机械通气的人COVID-19患者。在一些情况下，受试者由于一种或多种COVID-19症状而住院。在一些情况下，受试者是门诊患者(即，在门诊基础上进行治疗)。
本公开还提供了用于预防受试者中SARS-CoV-2感染或COVID-19的方法。在一些情况下，该方法包括向受试者施用预防性组合物，其中该预防性组合物包含结合SARS-CoV-2的表面蛋白(例如SARS-CoV-2刺突蛋白)的至少一种抗原结合分子。
在一些实施方案中，受试者是处于SARS-CoV-2感染的高风险下未感染的个体。在一些实施方案中，处于SARS-CoV-2感染的高风险下的受试者是医护人员、现场急救员或SARS-CoV-2感染检测呈阳性的个体的家庭成员。
在一些实施方案中，该治疗性或预防性组合物包含第一抗原结合分子和第二抗原结合分子，该第一抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第一表位，该第二抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第二表位，其中该第一表位和该第二表位在结构上不重叠。
在一些实施方案中，该治疗性或预防性组合物还包含第三抗原结合分子，该第三抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第三表位，其中该第三表位与该第一表位和该第二表位在结构上不重叠。
在一些实施方案中，该治疗性或预防性组合物包含第一抗原结合分子和第二抗原结合分子，该第一抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第一表位，该第二抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第二表位，其中该第一抗原结合分子和该第二抗原结合分子能够同时结合SARS-CoV-2的表面蛋白。在一些实施方案中，该治疗性或预防性组合物还包含第三抗原结合分子，该第三抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第三表位，其中该第一抗原结合分子、该第二抗原结合分子和该第三抗原结合分子能够同时结合SARS-CoV-2的表面蛋白。在一些实施方案中，a)该第一抗原结合分子包含三个重链互补决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，这些CDR包含在包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内，和三个轻链互补决定区(CDR)(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，这些CDR包含在包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内；b)该第二抗原结合分子包含三个重链互补决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，这些CDR包含在包含SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内，和三个轻链互补决定区(CDR)(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，这些CDR包含在包含SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内；并且c)该第三抗原结合分子包含三个重链互补决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，这些CDR包含在包含SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内，和三个轻链互补决定区(CDR)(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，这些CDR包含在包含SEQ ID NO:81所示的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内。
在各种实施方案中的任一者中，SARS-CoV-2的表面蛋白是包含受体结合结构域的刺突(S)蛋白，该受体结合结构域包含与SEQ ID NO:59有至少80％同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，该抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区包含在包含选自由选自以下组成的组的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区分别包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:4-6-8-12-14-16、24-26-28-32-34-36、44-46-48-52-34-54和75-77-79-83-85-87。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含人IgG重链恒定区。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含选自由以下组成的组的重链和轻链氨基酸序列对：SEQ ID NO:18/20、38/40、56/58和89/91。
在一些实施方案中，该抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。在一些实施方案中，该抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含重链和轻链氨基酸序列对，该重链和轻链氨基酸序列对选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:18/20、38/40、56/58和89/91。
在一些实施方案中，该第一抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区包含在包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，并且该第二抗原结合分子是第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区包含在包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内。在一些情况下，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区分别包含SEQ ID NO:4-6-8-12-14-16的氨基酸序列，并且该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区分别包含SEQ ID NO:24-26-28-32-34-36的氨基酸序列。在一些情况下，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，并且该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ IDNO:22/30的氨基酸序列。在一些实施方案中，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含人IgG重链恒定区。在一些情况下，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。在一些情况下，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含重链和轻链，该重链包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列，该轻链包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列，并且该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含重链和轻链，该重链包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列，该轻链包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列。
在一些实施方案中，该第一抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，并且该第二抗原结合分子是第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包括SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列。在一些实施方案中，该第一抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含重链和轻链对，该重链和轻链对包含SEQ ID NO:18/20的氨基酸序列，并且该第二抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含重链和轻链对，该重链和轻链对包含SEQ ID NO:38/40的氨基酸序列。
在一些实施方案中，该抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区包含在包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区分别包含SEQ ID NO:44-46-48-52-34-54的氨基酸序列。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR和LCVR，该HCVR包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列，该LCVR包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列。在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含人IgG重链恒定区。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。在一些情况下，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含重链和轻链，该重链包含SEQ ID NO:56的氨基酸序列，该轻链包含SEQ ID NO:58的氨基酸序列。
在一些实施方案中，该抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:42/50的氨基酸序列。在一些实施方案中，该抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，该参考抗体包含重链和轻链对，该重链和轻链对包含SEQ ID NO:56/58的氨基酸序列。
在上文或本文讨论的方法的各种实施方案中的任一者中，该治疗性或预防性组合物包含1mg至10g的抗原结合分子。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约1.2g的mAb10933和约1.2g的mAb10987。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约1.2g的mAb10985。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约4.0g的mAb10933和约4.0g的mAb10987。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约150mg的mAb10933和约150mg的mAb10987。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约150mg的mAb10985。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约300mg的mAb10933和约300mg的mAb10987。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约300mg的mAb10985。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约600mg的mAb10933和约600mg的mAb10987。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约600mg的mAb10985。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含150mg至1200mg的mAb10933和150mg至1200mg的mAb10987。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物还包含150mg至1200mg的mAb10985。在一些情况下，该治疗性或预防性组合物包含约1.2g的mAb10989。
在一些实施方案中，通过静脉内输注或皮下注射向受试者施用该治疗性或预防性组合物。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗感染有SARS-CoV-2的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用1.2g的mAb10987和1.2g的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有COVID-19的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用1.2g的mAb10987和1.2g的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗感染有SARS-CoV-2的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用600mg的mAb10987和600mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有COVID-19的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用600mg的mAb10987和600mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗感染有SARS-CoV-2的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用4g的mAb10987和4g的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有COVID-19的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用4g的mAb10987和4g的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗感染有SARS-CoV-2的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用300mg的mAb10987和300mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有COVID-19的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用300mg的mAb10987和300mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗感染有SARS-CoV-2的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用150mg的mAb10987和150mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有COVID-19的受试者的方法，该方法包括经由静脉内输注施用150mg的mAb10987和150mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗感染有SARS-CoV-2的受试者的方法，该方法包括经由皮下注射施用600mg的mAb10987和600mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有COVID-19的受试者的方法，该方法包括经由皮下注射施用600mg的mAb10987和600mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗感染有SARS-CoV-2的受试者的方法，该方法包括经由皮下注射施用300mg的mAb10987和300mg的mAb10933。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有COVID-19的受试者的方法，该方法包括经由皮下注射施用300mg的mAb10987和300mg的mAb10933。在以上实施方案中，mAb10987和mAb10933可同时共同施用，例如，通过在单次输注之前将抗体组合在IV袋中，或通过在单次注射之前将抗体组合到注射器中。可替代地，这两种抗体可作为两种单独的皮下注射施用。在以上实施方案中，受试者可处于临床并发症的高风险下。
在各种实施方案中的任一者中，受试者在施用该治疗性组合物后表现出一个或多个疗效参数，该一个或多个疗效参数选自由以下组成的组：(a)SARS-CoV-2病毒脱落自基线的降低；(b)使用7分顺序量表，临床状态至少改善1分；(c)减少或消除对氧气补充的需要；(d)减少或消除对机械通气的需要；(e)预防COVID-19相关死亡；(f)预防全因死亡；和(g)一种或多种疾病相关生物标志物的血清浓度的变化。在一些情况下，7分顺序量表是：[1]死亡；[2]住院，需要有创机械通气或体外膜肺氧合；[3]住院，需要无创通气或高流量氧气装置；[4]住院，需要补充供氧；[5]住院，不需要补充供氧—需要持续的医疗护理(COVID-19相关或其他)；[6]住院，不需要补充供氧—不再需要持续的医疗护理；和[7]不住院。在一些情况下，在施用第一剂量的该治疗性组合物之后21天测量一个或多个疗效参数。在一些情况下，通过鼻咽拭子样本、鼻腔样本或唾液样本的实时定量PCR(RT-qPCR)来确定SARS-CoV-2病毒脱落自基线的降低。在一些情况下，一种或多种疾病相关生物标志物的血清浓度的变化是c反应蛋白、乳酸脱氢酶、D-二聚体或铁蛋白的变化。
在各种实施方案中的任一者中，在施用该治疗性组合物后，受试者表现出少于5次的COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。在一些情况下，受试者在施用第一剂量的该治疗性组合物后29天内表现出少于5次的COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。在一些情况下，受试者表现出少于4次、少于3次、少于2次或少于1次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。
在一些实施方案中，受试者在第一次施用该治疗性组合物后2天至3周内SARS-CoV-2检测呈阴性。在一些情况下，在鼻咽拭子样本、鼻腔样本或唾液样本中通过RT-qPCR来确定SARS-CoV-2检测呈阴性。
在一些实施方案中，这些方法还包括向受试者施用另外的治疗剂。在一些情况下，该另外的治疗剂是抗病毒化合物。在一些实施方案中，该抗病毒化合物是瑞德西韦。在一些情况下，该另外的治疗剂是IL-6或IL-6R阻断剂。在一些实施方案中，该另外的治疗剂是托珠单抗或沙利鲁单抗。在一些情况下，该另外的治疗剂是甾体化合物。在一些实施方案中，在该治疗性组合物之前施用该另外的治疗剂。在一些实施方案中，在该治疗性组合物之后或同时施用该另外的治疗剂。在上文或本文讨论的方法的各种实施方案中的任一者中，受试者可以是SARS-CoV-2感染血清阴性的。
在一个方面，本公开提供了一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，该方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中该治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，该三个HCDR和该三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，该三个HCDR和该三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与施用安慰剂的可比血清阴性受试者群体相比，所述治疗性组合物在施用给血清阴性受试者群体时更快速地缓解了SARS-CoV-2感染的至少一个症状。
在一个方面，本公开提供了一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，其中该方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中该治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，该三个HCDR和该三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，该三个HCDR和该三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与可比血清阳性受试者群体相比，所述治疗性组合物在施用给血清阴性受试者群体时更快速地缓解了SARS-CoV-2感染的至少一个症状。
在一个方面，本公开提供了一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，该方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中该治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，该三个HCDR和该三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，该三个HCDR和该三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与施用当天(第0天)相比，所述治疗性组合物在施用后7天(第7天)降低了受试者群体的病毒载量。
在一些实施方案中，与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用0.6g第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，血清阴性受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的时间加权平均变化多至少0.86log10拷贝/mL的降低(p＜0.0001)。
在一些实施方案中，与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用1.2g第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，血清阴性受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的变化多至少1.04log10拷贝/mL的降低(p<0.0001)。
在一些实施方案中，与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用0.6g第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的平均变化多至少0.71log10拷贝/mL的降低(p<0.0001)。
在一些实施方案中，与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用1.2g第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的平均变化多0.86log10拷贝/mL的降低(p＜0.0001)。
在一个方面，本公开提供了一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，该方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中该治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，该三个HCDR和该三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，该三个HCDR和该三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中所述治疗性组合物降低了受试者群体的病毒载量。
在上文或本文讨论的方法的一些实施方案中，所述治疗性组合物的施用包括施用0.6g第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，并且其中与施用前第0天测量的基线病毒载量相比，所述施用在施用后第7天产生了至少3.00log10拷贝/mL的平均病毒载量降低。在一些情况下，所述降低为至少3.50log10拷贝/mL。在一些情况下，所述降低为至少3.90log10拷贝/mL。
在一些实施方案中，所述治疗性组合物的施用包括施用1.2g第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，并且其中与施用前第0天测量的基线病毒载量相比，所述施用在施用后第7天产生了至少3.50log10拷贝/mL的平均病毒载量降低。在一些情况下，所述降低为至少3.75log10拷贝/mL。在一些情况下，所述降低为至少4.09log10拷贝/mL。
在一个方面，本公开提供了一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，该方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中该治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，该三个HCDR和该三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，该三个HCDR和该三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，该HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用0.6g第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g第二SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或1.2g第一SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g第二SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的受试者群体中所述治疗性组合物将症状缓解(定义为症状变得轻微或消失)的时间缩短了中值4天。在一些实施方案中，受试者和/或受试者群体包括患有COVID-19的未住院的受试者。
上文或本文讨论的各种方法中的任一者可重新格式化为(i)抗原结合分子或抗体(和抗原结合片段)用于治疗和/或预防SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的方法中，以及/或者用于治疗、预防和降低SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的严重程度或进展或它们的症状，或(ii)抗原结合分子或抗体(和抗原结合片段)在制备用于治疗和/或预防SARS-CoV-2感染和/或COVID-19，以及/或者治疗、预防和降低SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的严重程度或进展或它们的症状的药物中的用途。具体地，本公开包括结合SARS-CoV-2的表面蛋白的抗原结合分子(包括本文讨论的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段)用于预防和治疗SARS-CoV-2感染和COVID-19以及/或者治疗、预防和降低SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的严重程度或进展或它们的症状的用途。本公开还包括结合SARS-CoV-2的表面蛋白的抗原结合分子(包括本文讨论的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段)在制备用于预防和治疗SARS-CoV-2感染和COVID-19以及/或者治疗、预防和降低SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的严重程度或进展的药物中的用途。当本文参考两种抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体的组合来讨论方法时，此类组合包括第一种此类抗体或其抗原结合片段在制备与第二种此类抗体或其抗原结合片段(或第三种或第四种等此类抗体或抗原结合片段)组合使用的药物中的用途，以及第二种此类抗体或其抗原结合片段(或第三种或第四种等此类抗体或抗原结合片段)在制备与第一种此类抗体组合使用的药物中的用途。
在各个实施方案中，上文或本文所讨论的实施方案的特征或组分中的任何特征或组分可以组合，并且此类组合涵盖在本公开的范围内。上文或本文所讨论的任何特定值可以与上文或本文所讨论的另一个相关值组合以列举具有表示范围的上端和下端的值的范围，并且此类范围涵盖在本公开的范围内。
通过阅读随后的具体实施方式，其他实施方案将变得显而易见。
附图说明
图1A和图1B示出了评价抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在SARS-CoV-2感染的恒河猴模型中的预防性疗效的研究设计的概述(图1A)，以及抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体预防对鼻咽拭子和支气管肺泡灌洗(BAL)液中病毒基因组RNA(gRNA)和亚基因组RNA(sgRNA)的影响(图1B)。
图2A、图2B、图2C和图2D示出了评价抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在SARS-CoV-2感染的恒河猴模型中的预防性和治疗性疗效的研究设计的概述(图2A)，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体预防对鼻咽拭子和口腔拭子中的病毒gRNA和sgRNA的影响(图2B)，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗对鼻咽拭子和口腔拭子中的病毒gRNA和sgRNA的影响(图2C)以及治疗动物和安慰剂动物肺组织病理学的代表性图像(图2D)。
图3A和图3B示出了来自图2A至图2D所示研究的病毒RNA的RNA序列分析的结果。图3A示出了在所有病毒序列中在刺突蛋白中识别的所有氨基酸变化的频率；每个点表示特定病毒样本中对应氨基酸变化的频率，并且样本基于治疗方案分组：同种型对照(安慰剂)、在病毒攻击之前(预防性)或之后(治疗性)施用的治疗性抗体。图3B示出了在所有样本内在刺突蛋白序列内识别的所有氨基酸变化的详细基因组信息；对于每个样本，已计算所有突变的频率，并且这些频率被示出为输入病毒中具有氨基酸变化的病毒群体的百分比，或者显示为从安慰剂组、预防性组和治疗性组分离的病毒群体中的频率百分比范围(最低％至最高％)。
图4A、图4B和图4C示出了评价抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在SARS-CoV-2感染的叙利亚金仓鼠模型中的治疗性和预防性疗效的研究设计的概述(图4A)，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗或预防对体重减轻的影响(图4B)，以及抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体疗法对肺中gRNA和sgRNA水平的影响。
图5是实施例2中讨论的研究设计的示意性概述。
图6示出了示出实施例2中讨论的研究中受试者的筛选、随机化和治疗的CONSORT图。
图7示出了实施例2中讨论的研究的安慰剂组中基线血清抗体状态和基线病毒载量之间的关系。
图8示出了实施例2中讨论的研究中的安慰剂组中病毒载量随时间的变化，按基线血清抗体状态细分。
图9示出了在实施例2中讨论的研究中到第29天安慰剂组中有≥1次COVID-19相关医疗护理访视(MAV)的患者比例。
图10A和图10B示出了在实施例2中讨论的研究中用REGEN-COV治疗时病毒载量自基线的时间加权平均(TWA)每日变化(log10拷贝/mL)(森林图)。
图11示出了在实施例2中讨论的研究中用REGEN-COV治疗时病毒载量自基线的TWA每日变化(log10拷贝/mL)(曲线图)。示出的是在总体群体(修改的全分析集，其排除了在基线时通过定性逆转录聚合酶链反应检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)呈阴性的患者)和根据基线抗体状态和基线病毒载量定义的组中，每次访视时平均病毒载量自基线到第7天的变化(以log10拷贝/毫升为单位)。分图C中的条表示标准误差。检测下限(虚线)为714个拷贝/毫升(2.85log10拷贝/毫升)。IV，静脉内(地)；SE，标准误差。
图12示出了实施例2中讨论的研究中按基线病毒载量类别分类的RT-qPCR持续呈阴性的时间。
图13示出了实施例2中讨论的研究中每次访视时具有高病毒载量的患者比例。
图14A、图14B和图14C示出了实施例2中讨论的研究中有COVID-19相关MAV的患者比例。
图15A、图15B和图15C示出了实施例2中讨论的研究中到第29天有和没有≥1次COVID-19相关MAV的患者的病毒载量。
图16示出了血清阴性患者(n＝217)比那些在随机化时已经产生了自身的SARS-CoV-2抗体(血清阳性)的患者具有高得多的病毒载量。
图17示出，在接受低流量补充供氧的COVID-19住院患者中，与血清阴性患者相比，血清阳性患者具有较低的死亡或机械通气累积发生率。
图18按血清状态和病毒载量分类示出了队列1中的临床结果。基线时血清阴性或基线时病毒载量高的患者临床结果更差。
图19示出了在患有COVID-19的住院患者中的无缝1/2/3期研究设计。
图20示出了在全分析集(FAS)、修改的全分析集(mFAS)、病毒载量>106或病毒载量>107中，血清阴性、血清阳性或具有临界结果或缺失数据(“其他”)的患者的数量。
图21示出了血清阴性患者(圆圈)、血清阳性患者(正方形)和其他患者(临界结果或缺失数据；三角形)的平均病毒载量。TWA，时间加权平均值；CI，置信区间。
图22示出了用安慰剂(圆圈)、1.2g mAb10933+1.2g mAb10987(共计2.4g；正方形)或4g mAb10933+4g mAb10987(共计8g；三角形)静脉内治疗的患者的平均病毒载量。
图23示出了用安慰剂(圆圈)、1.2g mAb10933+1.2g mAb10987(共计2.4g；正方形)或4g mAb10933+4g mAb10987(共计8g；三角形)静脉内治疗的患者的平均病毒载量自基线的变化。曲线图按以下病毒载量将患者分类：>104拷贝/mL、>105拷贝/mL、>106拷贝/mL和>107拷贝/mL。
图24示出了用安慰剂(圆圈)、1.2g mAb10933+1.2g mAb10987(共计2.4g；正方形)或4g mAb10933+4g mAb10987(共计8g；三角形)静脉内治疗的患者的平均病毒载量随时间的变化。曲线图按以下基线病毒载量将患者分类：>104拷贝/mL、>105拷贝/mL、>106拷贝/mL和>107拷贝/mL。
图25示出了用安慰剂(圆圈)、1.2g mAb10933+1.2g mAb10987(共计2.4g；正方形)或4g mAb10933+4g mAb10987(共计8g；三角形)静脉内治疗的患者的平均病毒载量随时间的变化。曲线图按血清状态和以下临床试验将患者分类：2066(住院研究；实施例1)和2067(非卧床/门诊研究；实施例2)。
图26示出了用安慰剂(圆圈)、1.2g mAb10933+1.2g mAb10987(共计2.4g；正方形)或4g mAb10933+4g mAb10987(共计8g；三角形)静脉内治疗的患者的平均病毒载量自基线的变化。曲线图按血清状态和以下临床试验将患者分类：2066(住院研究；实施例1)和2067(非卧床/门诊研究；实施例2)。
图27示出了用安慰剂(圆圈)、1.2g mAb10933+1.2g mAb10987(共计2.4g；正方形)或4g mAb10933+4g mAb10987(共计8g；三角形)静脉内治疗的患者的平均病毒载量随时间的变化。曲线图按基线病毒载量和以下临床试验将患者分类：2066(住院研究；实施例1)和2067(非卧床/门诊研究；实施例2)。
图28示出了用安慰剂(圆圈)、1.2g mAb10933+1.2g mAb10987(共计2.4g；正方形)或4g mAb10933+4g mAb10987(共计8g；三角形)静脉内治疗的患者的平均病毒载量自基线的变化。曲线图按基线病毒载量和以下临床试验将患者分类：2066(住院研究；实施例1)和2067(非卧床/门诊研究；实施例2)。
图29示出了单独的mAb10933(REGN10933)、单独的mAb10987(REGN10987)和mAb10933+mAb10987(REGN10933+REGN10987)的组合对表达B.1.1.7SARS-CoV-2变体(也称为“UK变体”)的假型VSV的中和％。抗体单独或组合两者均能中和病毒。
图30示出了在安慰剂和mAb10933+mAb10987(也统称为REGEN-COVTM)两个治疗组中，单个有症状受试者(实心符号)和无症状受试者(空心符号)的每周病毒载量。REGEN-COVTM组中的感染持续不超过1周，而安慰剂组的大约40％的感染持续3周至4周，如通过测量病毒载量所评估的。
图31示出了用REGEN-COV或安慰剂治疗的非住院患者的3期研究示意图。
图32示出了对3期队列招募的修正，修改该试验以包括2400mg和1200mg剂量。
图33示出了REGEN-COV的临床疗效，比较了安慰剂、2400mg和1200mg静脉内治疗组的治疗效果。治疗显著降低了
COVID-19相关住院或全因死亡和症状持续时间，并且在两个剂量水平下具有类似的治疗效果(由于事件规模较大，因此2400mg剂量的点估计置信度较高)。
图34示出了用8000mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、1200mg REGEN-COV或安慰剂(PBO)治疗的门诊患者的3期队列1mFAS(基线时SARS-CoV-2PCR阳性且具有≥1种严重covid-19风险因素的≥18岁患者)的平衡基线人口统计数据。3期患者比1/2期高风险患者具有更高的基线病毒载量和更高的基线血清阴性。
图35示出了在具有≥1种严重COVID-19风险因素的受试者中，在1200mg mAb10933+_1200mg mAb10987(静脉内)施用后到第29天，COVID-19相关住院或全因死亡的时间的Kaplan-Meier曲线。与安慰剂相比，在整个修改的全分析集(mFAS)群体中，COVID-19住院或全因死亡的风险降低了71％。
图36示出了在具有≥1种严重COVID-19风险因素的受试者中，在600mg mAb10933+_600mg mAb10987(静脉内)施用后到第29天，COVID-19相关住院或全因死亡的时间的Kaplan-Meier曲线。与安慰剂相比，在整个修改的全分析集(mFAS)群体中，COVID-19住院或全因死亡的风险降低了71％。
图37示出了在具有≥1种严重COVID-19风险因素的受试者中，在1200mg mAb10933+_1200mg mAb10987(静脉内)或600mg mAb10933+_600mg mAb10987(静脉内)施用后到第29天，COVID-19相关住院或全因死亡的数量。两个治疗组之间的结果一致。
图38示出了在具有≥1种严重COVID-19风险因素的受试者中，符合COVID-19的症状消退的时间的Kaplan-Meier曲线。HR：风险比。安慰剂组症状消退的中值时间为14天，并且1.2g和2.4g治疗组中的每一组症状消退的中值时间为10天。
图39示出了具有≥1种严重COVID-19风险因素的门诊患者的症状消退的时间。在修改的全分析集(mFAS)群体和基线时高病毒载量或血清阴性的群体之间，症状消退的改善是一致的。
图40示出了在用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂(PBO)静脉内治疗的3期队列1门诊患者中的严重不良事件(SAE)和特别关注的不良事件(SAEI)。所有治疗组的安全性均可接受，并且未发现严重的安全性问题。具体地，与任何REGEN-COV治疗组相比安慰剂组的SAE和AESI发生频率更高，在不同REGEN-COV剂量组之间未发现安全性失衡，在安全性实验室(化学，血液学)中未观察到安全性信号，与任何REGEN-COV治疗组相比安慰剂组中有更多患者出现具有致命后果的治疗期不良事件(TEAE)，并且REGEN-COV剂量组中极少患者出现输注相关反应(IRR)和超敏反应的AESI。
图41示出了用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂(PBO)静脉内治疗的3期队列1门诊患者的严重不良事件(SAE)，在任何治疗组中均有>1名患者发生了SAE。与任何REGEN-COV剂量组相比，安慰剂组的SAE发生频率更高，更频繁报告的事件与COVID-19和相关并发症一致，并且REGEN-COV剂量组的较低事件频率与治疗益处一致。
图42示出了用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂(PBO)静脉内治疗的3期队列1门诊患者的特别关注的不良事件(AESI)(例如，输注相关反应或超敏反应)，在任何治疗组中均有>1名患者发生了AESI。在所有剂量组中，输注相关反应或超敏反应的发生率较低。
图43示出了在具有1种或多种严重COVID-19风险因素的门诊患者中，用mAb10933和mAb10987治疗后第7天病毒载量自基线的变化(log10拷贝/mL)。
图44示出了在具有1种或多种严重COVID-19风险因素的门诊患者中，用mAb10933和mAb10987治疗后第7天病毒载量自基线的变化(log10拷贝/mL)。N：受试者的数量；SD：标准偏差；D7：第7天；mFAS：修改的全分析集；PA6：方案第6次修正，其修改了临床试验方案以去除8g剂量并引入1.2g剂量。
图45示出了血清阴性IV患者(血清阴性mFAS)的人口统计学和基线特征。这些组是良好平衡的。
图46示出了血清阴性
皮下注射患者(血清阴性mFAS)的人口统计学和基线特征。这些组是良好平衡的。
图47示出了在用mAb10933+mAb10987静脉内(IV)或皮下(SC)治疗的患者中病毒载量自基线随时间变化的最小二乘平均值。
图48示出了在血清阴性患者中2067(实施例2；门诊患者)的1/2期和3期试验以及20145(实施例7；剂量范围发现)的试验中病毒载量自基线的变化。研究之间病毒载量自基线的变化是相当的。
图49示出了实施例7中所述的临床试验的安全性数据。所有治疗组均耐受良好，没有识别出安全性信号。
图50示出了在实施例7中所述的临床试验中在接受皮下治疗的患者中出现的治疗期不良事件。所有剂量均耐受良好，几乎没有治疗期不良事件。在观察到的事件中，这些事件并不严重。
图51示出了实施例2中所述的临床试验(“2067分析集”)和实施例7中所述的临床试验(“20145分析集”)之间的比较。在将剂量组从2400mg和8000mg更改为1200mg和2400mg的修正前后(分别为原始Ph3和修正的Ph3)，均提供了2067的数据。对病毒载量自基线到第7天的变化(log10拷贝/mL)的分析示出，在修正变化前后和所有剂量中，病毒载量降低相似。
图52示出了有住院/死亡结果和没有住院/死亡结果的患者的平均病毒载量。在PA6之前示出用安慰剂(PBO)、2.4g REGEN-COV或8.0g REGEN-COV治疗的患者的病毒载量。在PA 6或稍后示出用PBO、1.2g REGEN-COV或2.4g REGEN-COV治疗的患者的病毒载量。
图53示出了有住院/死亡结果和没有住院/死亡结果的个体患者的病毒载量的意大利面条图(安慰剂、1.2g REGEN-COV和2.4g REGEN-COV)。
图54示出了有住院/死亡结果和没有住院/死亡结果的个体患者的病毒载量的意大利面条图(安慰剂、2.4g REGEN-COV和8.0g REGEN-COV)。
图55示出了有住院/死亡结果和没有住院/死亡结果的个体患者的在基线和治疗后第7天的病毒载量的箱线图(安慰剂、1.2g REGEN-COV和2.4g REGEN-COV)。
图56示出了有住院/死亡结果和没有住院/死亡结果的个体患者的在基线和治疗后第7天的病毒载量的箱线图(安慰剂、2.4g REGEN-COV和8.0g REGEN-COV)。
图57示出了实施例7中所述的临床试验的概述。
图58示出了在所有患者、血清阴性患者和血清阳性患者(分为有和没有COVID-19相关事件的患者)中治疗后第7天病毒载量的变化。接受安慰剂并发生事件的患者具有较高的基线病毒，并且清除病毒的速度较慢，而发生事件的血清阳性患者具有类似的高基线病毒水平和延迟清除，这表明他们可能具有无效的抗体应答。
图59示出了实施例4中所述的3期预防试验中假设检验的层级，以及每个终点的治疗效果。REGEN-COV显著预防了感染，改善了疾病进展，并且降低了病毒负荷。
图60示出了实施例4中所述的3期预防试验中的有症状感染终点。REGEN-COV显著降低了所有三种定义的有症状COVID-19。
图61示出了实施例4中所述的3期预防试验中有症状感染的累积发生率。REGEN-COV预防了给药后1天开始的有症状感染的发作。
图62示出了在实施例4中所述的3期预防试验中按周的有症状感染的发作。REGEN-COV将有症状感染的风险总体降低了81％，在第一周降低了72％，并且在第2周至第4周降低了93％。
图63示出了在实施例4中所述的3期预防试验中，REGEN-COV显著减少了有症状感染的周数。
图64示出了在实施例4中所述的3期预防试验中，REGEN-COV显著减少了有症状感染的周数。
图65示出了在实施例4中所述的3期预防试验中，REGEN-COV显著减少了总感染的周数。
图66示出了在实施例4中所述的3期先发疗法试验中假设检验的层级。REGEN-COV显著阻止了
无症状感染向疾病的进展，并降低了病毒负荷。前三天后，治疗效果更强。
图67示出了与实施例2(2067)的修正的3期试验中的有症状患者相比，在实施例4(2069)中所述的3期先发疗法试验中的无症状患者中病毒载量的平均值随时间的变化。用REGEN-COV的早期治疗提供了随时间更大的病毒载量降低。
图68示出了在实施例4所述的3期先发疗法试验中，在单次1200mg剂量之后，前哨队列和安全队列的血清中mAb10933和mAb10987的平均浓度随时间的变化。
图69示出了在实施例4的3期试验中，REGEN-COV具有可接受且良好耐受的安全性，没有重度或严重的安全性问题。
图70示出了在实施例4的3期试验中，治疗期不良事件在任何治疗组中以≥2％发生。
图71示出，严重不良事件很少见，在接受REGEN-COV治疗的患者中没有与COVID相关的严重不良事件。
图72示出了在评估REGEN-COV预防COVID-19症状的能力的临床试验中，按研究日统计的有症状感染的累积发生率。在皮下施用REGEN-COV后，有症状SARS-CoV-2感染的风险降低了81.4％。
图73示出了在评估REGEN-COV预防COVID-19症状的能力的临床试验中，按研究日统计的有症状感染的累积发生率。在疗效评估期期间，用1200mg REGEN-COV皮下(SC)治疗导致无症状感染进展为有症状感染的相对风险降低31.5％(29/100[29.0％]，而安慰剂组为44/104[42.3％]；p＝0.0380)，在REGEN-COV施用3天或更长时间后具有更显著的效果(相对风险降低76.4％)。
图74示出了在实施例7所述的临床试验中，在基线时PCR阳性和血清阴性的患者中平均病毒载量随时间的变化。
图75示出了在实施例7中所述的临床试验中招募的非卧床PCR阳性患者中单次静脉内(IV)和皮下(SC)注射后血清中总REGEN-COV的平均浓度。
图76示出了在设计用于研究非住院患者的REGEN-COV治疗的临床试验中，被分配到不同治疗组的患者数。
图77A、图77B和图77C：图77A示出了1200mg IV剂量的REGEN-COV对住院或全因死亡的临床疗效。治疗显著降低了住院或全因死亡。图77B示出了2400mg IV剂量的REGEN-COV对住院或全因死亡的临床疗效。治疗显著降低了住院或全因死亡。图77C示出了1200mg IV剂量和2400mg IV剂量的REGEN-COV对症状消退时间的临床疗效。治疗将症状消退的中值天数减少了4天。
图78示出了在设计用于研究非住院患者的REGEN-COV治疗的临床试验中，被分配到不同治疗组的患者的人口统计学和基线医学特征。
图79示出了不同治疗组对患有COVID-19的非住院成年患者的3期临床试验终点中的每一者的效果。
图80示出了在用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂静脉内治疗的患者中严重不良事件和特别关注的不良事件的概述。
图81示出了评价在患有COVID-19的成年非住院患者中用REGEN-COV的治疗的研究设计的示意性概述。
图82示出了安慰剂组中病毒载量随时间的变化，按基线血清抗体状态细分。
图83A、图83B和图83C：图83A示出了显示在具有一种或多种严重COVID-19风险因素的成年未住院成人中到第29天的COVID-19相关住院或全因死亡的森林图。图83B按方案定义的风险因素细分这些数据，并且图83C按其他风险因素组合细分这些数据。
图84A和图84B：图84A示出了在用1200mg REGEN-COV单次静脉内剂量治疗的患者中，第4天至第29天COVID-19相关住院或全因死亡的患者比例。图84B示出了在用2400mgREGEN-COV单次静脉内剂量治疗的患者中，第4天至第29天COVID-19相关住院或全因死亡的患者比例。
图85示出了用1200mg REGEN-COV或2400mg REGEN-COV静脉内治疗的具有1种或多种严重COVID-19风险因素的门诊患者症状消退的时间。
图86A、图86B和图86C：图86A示出了用1200mg REGEN-COV或2400mg REGEN-COV静脉内治疗的具有1种或多种严重COVID-19风险因素的门诊患者中病毒载量随时间的变化。与安慰剂相比，两种剂量显著降低了病毒载量。图86B示出了这些患者的病毒载量随时间的变化，按基线血清抗体状态(血清阴性与血清阳性)细分。图86C示出了这些患者的病毒载量随时间的变化，按基线病毒载量类别(>104拷贝/mL、>105拷贝/mL、>106拷贝/mL和>107拷贝/mL)细分。
图87示出了用1200mg REGEN-COV或2400mg REGEN-COV静脉内治疗的具有1种或多种严重COVID-19风险因素的门诊患者第7天病毒载量自基线的变化(log10拷贝/mL)。
图88A、图88B和图88C：图88A示出了用2400mg REGEN-COV或8000mg REGEN-COV静脉内治疗的具有1种或多种严重COVID-19风险因素的门诊患者病毒载量随时间的变化。与安慰剂相比，两种剂量显著降低了病毒载量。图88B示出了这些患者的病毒载量随时间的变化，按基线血清抗体状态(血清阴性与血清阳性)细分。图88C示出了这些患者的病毒载量随时间的变化，按基线病毒载量类别(>104拷贝/mL、>105拷贝/mL、>106拷贝/mL和>107拷贝/mL)细分。
图89示出了主要层级分析检验顺序，指示了主要终点和次要终点的评估顺序。
图90示出了在评估非住院患者的REGEN-COV的临床试验中方案定义的严重COVID-19的风险因素。
图91示出了接受8000mg REGEN-COV或安慰剂的患者的人口统计学和基线医学特征。
图92示出了按基线病毒载量类别分类的安慰剂组中有至少1次COVID-19相关住院或全因死亡的患者比例。
图93示出了安慰剂组中的病毒载量(有住院/死亡，没有住院/死亡，以及按基线血清抗体状态细分)。
图94示出了有一次或多次COVID-19相关住院和/或全因死亡的患者比例。
图95示出了在用REGEN-COV治疗后有一次或多次医疗护理访视或全因死亡的患者比例。
图96示出了在具有1种或多种严重COVID-19风险因素的门诊患者的临床试验过程期间住院患者的结果。
图97示出了在用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV或安慰剂治疗的患者中有一次或多次COVID-19相关住院、急诊室访视或全因死亡的患者比例。
图98示出了在用8000mg REGEN-COV或安慰剂治疗的患者中有一次或多次COVID-19相关住院和/或全因死亡的患者比例。
图99示出了在用8000mg REGEN-COV或安慰剂治疗的患者中有一次或多次COVID-19相关的医疗护理访视或全因死亡的患者比例。
图100示出了在用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂治疗的患者中导致死亡的治疗期不良事件。
图101示出了在用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂治疗的患者中治疗期严重不良事件和特别关注的不良事件的概述。
图102示出了需要在保健机构进行医疗护理的在用1200mg REGEN-COV、2400mgREGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂治疗的患者中特别关注的不良事件。
图103示出了在用1200mg REGEN-COV、2400mg REGEN-COV、8000mg REGEN-COV或安慰剂治疗的患者中血清中mAb10933和mAb10987的平均药代动力学参数。
具体实施方式
在描述本发明之前，应当理解，本发明不限于所描述的特定方法和实验条件，因为此类方法和条件可以变化。还应理解，本文所使用的术语仅出于描述具体实施方案的目的，而不旨在是限制性的，因为本发明的范围仅受所附权利要求书限制。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术术语和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。如本文所使用的，当用于提及具体所列举的数值时，术语“约”意指数值可以与所列举的值相差不超过1％。例如，如本文所使用的，表述“约100”包含99和101以及其之间的所有值(例如，99.1、99.2、99.3、99.4等)。
尽管在本发明的实践或测试中可以使用类似于或等同于本文所描述的方法和材料的任何方法和材料，但现在描述优选的方法和材料。本说明书中提及的所有专利、申请和非专利出版物均通过引用整体并入本文。
预防和治疗SARS-CoV-2感染和COVID-19的方法
本发明提供了用于经由施用结合SARS-CoV-2的表面蛋白的一个或多个抗原结合分子来预防和治疗对其有需要的受试者的SARS-CoV-2感染和COVID-19的方法，这些方法包括本文讨论的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段。在一些情况下，受试者是住院的COVID-19患者。在一些情况下，受试者是SARS-CoV-2感染检测呈阳性的门诊患者(即，非卧床患者)。在一些情况下，受试者是患有实验室确认的SARS-CoV-2和一种或多种COVID-19症状(诸如发烧、咳嗽或气短)的人患者。在一些情况下，受试者是(a)需要低流量氧气补充的人COVID-19患者；(b)需要高强度氧气疗法但不需要机械通气的人COVID-19患者；或(c)需要机械通气的人COVID-19患者。在一些情况下，受试者是非住院的有COVID-19症状的人。在一些情况下，受试者是未感染的人，例如，处于高暴露风险组中的未感染的人(诸如医护人员或现场急救员)或与已被SARS-CoV-2感染的受试者密切接触的未感染的人(诸如已感染COVID-19的室友或家庭成员)。在一些情况下，受试者处于COVID-19并发症的高风险，或者更有可能被SARS-CoV-2感染，诸如老年人、免疫失能的人和经常对疫苗应答不佳的人。在一些实施方案中，本发明提供用于治疗、预防和降低SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的严重程度或进展的方法。
本发明还包括结合SARS-CoV-2的表面蛋白的抗原结合分子(包括本文讨论的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段)用于预防和治疗SARS-CoV-2感染和COVID-19以及/或者治疗、预防和降低SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的严重程度或进展或它们的症状的用途。本发明还包括结合SARS-CoV-2的表面蛋白的抗原结合分子(包括本文讨论的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段)在制备用于预防和治疗SARS-CoV-2感染和COVID-19以及/或者治疗、预防和降低SARS-CoV-2感染和/或COVID-19的严重程度或进展的药物中的用途。当本文参考两种抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体的组合来讨论方法时，此类组合包括第一种此类抗体或其抗原结合片段在制备与第二种此类抗体或其抗原结合片段组合使用的药物中的用途，以及第二种此类抗体或其抗原结合片段在制备与第一种此类抗体组合使用的药物中的用途。
如本文所用，“预防”障碍或病症的治疗剂或预防剂(例如，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体)是指在统计样本中，相对于未治疗的对照样本，降低了经治疗的样本中障碍或病症的发生，或者相对于未治疗的对照样本，延迟了障碍或病症的发作的化合物。如本文所用，术语“治疗”包括改善或消除已经确定的病症。在任一情况下，预防或治疗可在由医师或其他卫生保健提供者提供的诊断和施用治疗剂或预防剂的预期结果中辨别。
通常，通过以有效量施用一种或多种抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段来实现如本公开中所述的疾病或病症的治疗或预防。有效量的试剂是指在所需剂量和时间段有效实现期望的治疗或预防结果的量。本公开的治疗有效量的试剂可根据因素诸如个体的疾病状态、年龄、性别和重量以及试剂在个体中引发期望应答的能力而变化。预防有效量是指在所需剂量和时间段有效实现期望的预防结果的量。
在一些实施方案中，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段可用于治疗、预防或降低SARS-CoV-2感染或COVID-19的进展。在一些情况下，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段阻断与血管紧张素转化酶2(ACE2)的刺突蛋白受体结合结构域(RBD)相互作用，从而导致宿主细胞的感染性降低。阻断病毒进入导致SARS-CoV-2 RNA复制的减少，以及受影响组织中对应的病毒脱落。因此，在一些实施方案中，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段将减少上呼吸道中的病毒脱落。在一些实施方案中，在开始给药后7天至29天(例如，开始给药后1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天或29天)从患者上呼吸道收集的样本中测量病毒脱落。在一些情况下，在鼻咽拭子样本、鼻腔样本或唾液样本中通过RT-qPCR来确定SARS-CoV-2病毒脱落自基线的降低。
在一些情况下，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段改善了患者(例如，诊断患有SARS-CoV-2感染或COVID-19的患者)的临床状态。在一些实施方案中，临床状态的改善基于用于评估临床状态变化的7分顺序量表(从死亡[1]到未住院[7]评定临床状态)。利用将多个所关注的临床结果(例如，死亡、机械通气等)按照其临床重要性进行排序的顺序量表是评估患有COVID-19的严重和/或危重患者试验的疗效的适当方法。在一些情况下，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段的施用将患者的临床状态改善了至少1分或2分。在一些情况下，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段的施用导致死亡率和/或氧气疗法使用的降低，并且/或者增加了此类患者的无通气机天数。如上讨论，可使用以下顺序量表评估临床状态的改善：
[1]死亡
[2]住院，需要有创机械通气或ECMO
[3]住院，需要无创通气或高流量氧气装置
[4]住院，需要补充供氧
[5]住院，不需要补充供氧—需要持续的医疗护理
(COVID-19相关或其他)
[6]住院，不需要补充供氧—不再需要持续的医疗护理
[7]不住院。
在一些情况下，在施用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段后，受试者表现出少于5次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。在一些情况下，在施用第一剂量的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段后，受试者在7天至42天(例如，21天至42天)的时间段内表现出少于5次(例如，少于5次、少于4次、少于3次、少于2次或少于1次)COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。在一些实施方案中，在施用第一剂量后29天的时间段，受试者表现出少于5次COVID-19相关访视。在一些情况下，受试者表现出少于4次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。在一些情况下，受试者表现出少于3次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。在一些情况下，受试者表现出少于2次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。在一些情况下，受试者表现出不超过1次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。
在一些情况下，在施用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段后，受试者在第一次施用治疗性组合物后2天至3周内SARS-CoV-2检测呈阴性。在一些情况下，在鼻咽拭子样本、鼻腔样本或唾液样本中通过RT-qPCR来确定SARS-CoV-2检测呈阴性。
在上文或本文讨论的各种实施方案的任一者中(例如，mAb10933和mAb10987的组合预防性或治疗性施用)，一种或多种抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体的施用结果可以是以下中的任一者或多者：
(a)时间加权平均病毒脱落自基线的降低(log10拷贝/mL)，如在鼻咽(NP)拭子中通过RT-qPCR测量的；
(b)时间加权平均病毒脱落自基线的降低(log10拷贝/mL)，如在鼻腔拭子中通过RT-qPCR测量的；
(c)时间加权平均病毒脱落自基线的降低(log10拷贝/mL)，如在唾液样本中通过RT-qPCR测量的；
(d)使用7分顺序量表，临床状态相对于基线至少改善1分；
(e)相对于对照，COVID-19相关医疗护理访视次数降低(COVID-19相关医疗护理访视定义如下：住院、急诊室(ER)访视、紧急护理访视、医生诊室访视或远程医疗访视，其中访视的主要原因是COVID-19)；
(f)相对于对照，NP拭子中RT-qPCR呈阴性且随后RT-qPCR没有变成阳性的时间降低；
(g)相对于对照，住院发生率或住院天数降低；
(h)相对于对照，入住ICU的发生率或在ICU的天数降低；
(i)相对于对照，机械通气的发生率或机械通气的时间降低；
(j)相对于对照，COVID-19症状的持续时间降低；
(k)相对于对照，所有检测样本中RT-qPCR呈阴性并且随后任何检测样本(鼻咽拭子、鼻腔拭子、唾液)中RT-qPCR没有变成阳性的时间降低；
(l)随后出现SARS-CoV-2感染的体征或症状(狭义或广义)的发生率降低；
(m)时间加权平均每日病毒载量降低(例如，到第7天降低0.4或更多log10拷贝/mL，到第7天降低0.5或更多log10拷贝/mL，或到第7天降低0.6或更多log10拷贝/mL，或到第11天降低0.5或更多log10拷贝/mL，到第11天降低0.6或更多log10拷贝/mL，或到第11天降低0.7或更多log10拷贝/mL)；以及
(n)时间加权平均病毒载量自基线的降低(log10拷贝/mL)。
在一些实施方案中，施用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体对血液中不存在有效量的抗SARS-CoV-2抗体的受试者(“血清阴性”受试者)比对血液中存在有效量的抗SARS-CoV-2抗体的受试者(“血清阳性”受试者)具有更大的效果。在本文提供的实施例中，通过评估血清抗SARS-CoV-2抗体的存在来确定血清状态(即，血清阴性、血清阳性或未确定)：抗刺突[S1]IgA(Euroimmun IgA检测)、抗刺突[S1]IgG(Euroimmun IgG检测)和抗核衣壳IgG(Abbot IgG检测)。将研究参与者分组为血清阴性(如果所有可用检测均为阴性)、血清阳性(如果这些检测中的任一者为阳性)或血清未确定(缺失或不确定的结果)进行分析。如果样本中的抗体低于检测的定量下限，则该检测被归类为阴性。如本文所述，本文所述的方法可在血清阴性受试者中具有与可比血清阳性受试者群体不同的效果(例如，病毒载量的更大降低、症状缓解的更快时间、施用后更少的医疗护理访视)。
抗原结合分子和抗SARS-Cov-2刺突糖蛋白抗体
本发明的方法和用途利用结合SARS-CoV-2的表面蛋白的抗原结合分子。在一些实施方案中，抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段。
与SARS-CoV-2刺突蛋白结合的示例性抗体的可变区、CDR以及重链和轻链的氨基酸和核苷酸序列示于下表1和表2中。与SARS-CoV-2刺突蛋白结合并可用于本文所述方法的示例性抗体和抗原结合片段的可变区、CDR以及重链和轻链的其他氨基酸和核苷酸序列可见于美国专利号10,787,501，该专利据此全文以引用方式并入。
表1：氨基酸序列标识符
表2：核酸序列标识符
在各种实施方案中，用于本文讨论的方法或用途的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段是包含表1中列出的抗体中的任一者或多者的六个CDR(HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)的抗体或抗原结合片段。在一些情况下，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含CDR，该CDR属于重链可变区(HCVR)和轻链可变区对，该对包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。用于识别HCVR和LCVR氨基酸序列内的CDR的方法和技术是本领域熟知的，并且可以用于识别本文公开的特定HCVR和/或LCVR氨基酸序列内的CDR。可以用于识别CDR的边界的示例性规约包含例如，Kabat定义、Chothia定义和AbM定义。一般而言，Kabat定义基于序列可变性，Chothia定义基于结构环区域的位置，并且AbM定义是Kabat方式与Chothia方式之间的折衷。参见例如，Kabat，“具有免疫学意义的蛋白质序列(Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest)”，国立卫生研究院，贝塞斯达(Bethesda)，马里兰州，1991年；Al-Lazikani等人，J Mol Biol，第273卷：第927-948页，1997年；以及Martin等人，PNAS(USA)，第86卷：第9268-9272页，1989年。公共数据库也可用于识别抗体内的CDR序列。
在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3结构域，这些结构域分别包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:4-6-8-12-14-16、24-26-28-32-34-36、44-46-48-52-34-54和75-77-79-83-85-87。
在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，该HCVR/LCVR氨基酸序列对包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。
在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含重链(HC)和轻链(LC)对，该HC和LC对包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:18/20、38/40、56/58和89/91。
在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体与SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合结构域(RBD)(NCBI登录号(MN908947.3)的氨基酸1-1273，SEQ ID NO:59)内的表位结合。在一些情况下，抗体(例如，mAb10989)结合RBD的残基467-513(DISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVL)(SEQ ID NO:60)。在一些情况下，抗体(例如，mAb10987)结合RBD的残基432-452(CVIAWNSNNLDSKVGGNYNYL)(SEQ ID NO:61)。在一些情况下，抗体(例如，mAb10933)结合RBD的残基467-510(DISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRV)(SEQ ID NO:62)。
在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是mAb10933。在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是mAb10987。在一些实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是mAb10989。在各种实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10933的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体。在各种实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10987的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体。在各种实施方案中，该抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10989的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体。本文提供的抗体可互换地被标识为“mAb”后跟数字或“REGN”后跟数字。例如，mAb10933和REGN10933是指相同的抗体(表1中提供的氨基酸序列和表2中提供的核酸序列)。类似地，mAb10987和REGN10987是等效的，mAb10989和REGN10989是等效的，并且mAb10985和REGN10985是等效的。另外，mAb10933可称为卡西瑞单抗，并且mAb10987可称为伊德维单抗。卡西瑞单抗和伊德维单抗的组合称为REGEN-COV。
在一些实施方案中，本文讨论的方法和用途包含组合物，该组合物包含第一抗原结合分子(例如，抗体)和第二抗原结合分子(例如，抗体)，该第一抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第一表位，该第二抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第二表位，其中该第一表位和该第二表位在结构上不重叠。在一些实施方案中，本文讨论的方法和用途包括两种或更多种抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段的组合。在一些情况下，组合使用的两种抗体或抗原结合片段结合RBD的结构不重叠表位。在一些实施方案中，该组合包括mAb10987和mAb10933。在一些实施方案中，该组合包括mAb10987和mAb10989。在一些实施方案中，该组合包括mAb10933和mAb10987和mAb10985。在各种实施方案中，该组合包括第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体以及任选的第三抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10933的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体，该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10987的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体，该第三抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10985的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体。在各种实施方案中，该组合包括第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，该第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10989的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体，该第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是包含mAb10987的CDR、HCVR和LCVR或重链和轻链(例如，表1中所示的氨基酸序列)的抗体。在一些实施方案中，抗原结合分子(例如，抗体，诸如mAb10987和mAb10933、mAb10987和mAb10989或mAb10987和mAb10933和mAb10985)的组合可降低逃逸突变体的频率(例如，在S蛋白中具有一个或多个突变的SARS-CoV-2病毒以便降低治疗的疗效，例如通过减少抗体与S蛋白的结合)。在分别存在mAb10933(卡西瑞单抗)或mAb10987(伊德维单抗)的情况下，在编码SARS-CoV-2刺突蛋白的重组VSV的细胞培养物中传代两次后，识别出逃逸变体，但是在卡西瑞单抗和伊德维单抗共同存在的情况下传代两次后，没有识别出逃逸变体。这种抗体组合也对变体SARS-CoV-2病毒有效。例如，评价mAb10933和mAb10987的组合中和假型VSV的能力，该假型VSV表达称为B.1.1.7的SARS-CoV-2变体，也称为“UK变体”这种变体正在迅速增加，并且可能具有与野生型SARS-CoV-2不同的影响，包括比野生型病毒更严重的症状和对疫苗和/或治疗剂的潜在耐药性。它部分地通过刺突蛋白中的以下突变来分类：HV 69-70缺失、Y144缺失、N501Y、A570D、P681H、T716I、S982A和D1118H。卡西瑞单抗和伊德维单抗组合使用示出了会有效中和病毒(图29)。实际上，卡西瑞单抗和伊德维单抗单独和一起保留了针对在B.1.1.7谱系(英国来源)中发现的表达所有刺突蛋白取代的假病毒和针对在B.1.1.7和其他循环谱系中发现的仅表达N501Y的假病毒的中和活性。卡西瑞单抗和伊德维单抗一起保留了针对在B.1.1351谱系(南非来源)中发现的表达所有刺突蛋白取代或单个取代K417N、E484K或N501Y的假病毒和针对在P.1谱系(巴西来源)中发现的K417T+E484K取代的中和活性，尽管如上所述，单独的卡西瑞单抗而不是伊德维单抗降低了针对表达K417N或E484K的假病毒的活性。E484k取代也在B.1.526谱系(纽约来源)中发现。
表3A：卡西瑞单抗和伊德维单抗单独和一起保留了针对在B.1.427/B.1.429谱系 (加利福尼亚来源)中发现的L452R取代的中和活性。
表3B：用卡西瑞单抗和伊德维单抗一起对SARS-CoV-2变体取代的假病毒中和数据
a检测表达整个变体刺突蛋白的假病毒。在变体中发现野生型刺突蛋白的以下变化：del69-70、del145、N501Y、A570D、D614G、P681H、T716I、S982A、D1118H。
b检测表达整个变体刺突蛋白的假病毒。在变体中发现野生型刺突蛋白的以下变化：D80Y、D215Y、del241-243、K417N、E484K、N501Y、D614G、A701V。
c无变化：易感性降低<2倍。
d并非纽约谱系的所有分离株都具有E484K取代(截至2021年2月)。
某些变体显示出对单独的卡西瑞单抗的易感性降低，包括具有刺突蛋白氨基酸取代K417E(182倍)、K417N(7倍)、K417R(61倍)、Y453F(>438倍)、L455F(80倍)、E484K(25倍)、F486V(>438倍)和Q493K(>438倍)的那些。显示出对单独的伊德维单抗的易感性降低的变体包括取代K444N(>755倍)、K444Q(>548倍)、K444T(>1,033倍)和V445A(548倍)。卡西瑞单抗和伊德维单抗一起显示出对具有K444T(6倍)和V445A(5倍)取代的变体的易感性降低。在使用用循环SARS-CoV-2中识别的39种不同刺突蛋白变体进行假型化的VSV的中和测定中，对单独的卡西瑞单抗易感性降低的变体包括具有Q409E(4倍)、G476S(5倍)和S494P(5倍)取代的变体，对单独的伊德维单抗易感性降低的变体包括具有N439K(463倍)取代的变体。在假病毒测定中检测的并且对单独的卡西瑞单抗具有降低活性的其他取代包括E484Q(9倍)和Q493E(446倍)。卡西瑞单抗和伊德维单抗一起保留了针对所检测的所有变体的活性。在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗SARS-CoV-2感染的方法，该方法包括施用mAb10933和mAb10987，其中SARS-CoV-2是变体SARS-CoV-2，其例如包含HV 69-70缺失、Y144缺失、Q409E、K417E、K417N、K417R、N439K、Y453F、L455F、G476S、E484K、E484Q、F486V、Q493K、Q493E、S494P、N501Y、A570D、P681H、T716I、S982A或D1118H或它们的任何组合。在实施例2的临床试验中，中期数据表明只有一种变体(G446V)出现在等位基因分数≥15％的情况下，在具有核苷酸测序数据的66名受试者中的3名中检测到该变体，每名受试者在单个时间点检测到(安慰剂组和2400mg卡西瑞单抗和伊德维单抗组的受试者中有2名在基线时检测到，8000mg卡西瑞单抗和伊德维单抗组的受试者中有1名在第25天检测到)。在VSV假颗粒中和测定中，G446V变体对伊德维单抗的易感性与野生型相比降低为1/135，但保留了对单独的卡西瑞单抗以及卡西瑞单抗和伊德维单抗一起的易感性。
在一些实施方案中，本文所论述的方法和用途包括组合物，该组合物包含第一抗原结合分子(例如，抗体)和第二抗原结合分子(例如，抗体)，该第一抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第一表位，该第二抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第二表位，其中该第一抗原结合分子和该第二抗原结合分子能够同时结合SARS-CoV-2的表面蛋白。
在某些实施方案中，一个、两个、三个、四个或更多个抗体或其抗原结合片段可组合(例如，同时或顺序地)施用。示例性组合包括mAb10933和mAb10987、mAb10989和mAb10987、mAb10933和mAb10989、mAb10933和mAb10987和mAb10985。
如本文所用，“结合SARS-CoV-2刺突蛋白的抗体”或“抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体”或“抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体”包括结合SARS-CoV-2刺突蛋白的可溶性片段的抗体和其抗原结合片段，并且还可结合刺突蛋白的受体结合结构域(RBD)内的表位。可单独使用或与彼此组合使用或与本文所公开的抗体中的一者或多者一起使用以用于本公开的方法的上下文的其他抗体包括例如LY-CoV555(Eli Lilly)；47D11(Wang等人，NatureCommunications，文章号2251)；B38、H4、B5和/或H2(Wu等人，10.1126/science.abc 2241，2020年)；STI-1499(Sorrento Therapeutics)；VIR-7831和VIR-7832(VirBiotherapeutics)。
如本文所用，术语“抗体”意指包括至少一个与特定抗原(例如，SARS-CoV-2刺突蛋白)特异性结合或相互作用的互补性决定区(CDR)的任何抗原结合分子或分子复合物。术语“抗体”包含包括四条多肽链、通过二硫键相互连接的两条重(H)链和两条轻(L)链以及其多聚体(例如，IgM)的免疫球蛋白分子。每条重链包括重链可变区(本文缩写为HCVR或VH)和重链恒定区。重链恒定区包括三个结构域CH1、CH2和CH3。每条轻链包括轻链可变区(本文缩写为LCVR或VL)和轻链恒定区。轻链恒定区包括一个结构域(CL1)。可以将VH区和VL区进一步细分为被称作互补决定区(CDR)的高变区，其间散布着更保守的被称作框架区(FR)的区域。每个VH和VL由三个CDR和四个FR构成，按以下顺序从氨基端到羧基端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在本发明的不同实施方案中，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体(或其抗原结合部分)的FR可以与人种系序列相同，或者可以是天然的或人工修饰的。可以基于两个或更多个CDR的并列分析来定义氨基酸共有序列。
如本文所使用的，术语“抗体”还包含完整抗体分子的抗原结合片段。如本文所使用的，术语抗体的“抗原结合部分”、抗体的“抗原结合片段”等包含任何天然存在的、可酶促获得的、合成的或经基因工程化的多肽或糖蛋白，其特异性结合抗原以形成复合物。抗体的抗原结合片段可以例如使用任何合适的标准技术从完整抗体分子衍生，如蛋白水解消化或涉及操纵和表达编码抗体可变以及任选地恒定结构域的DNA的重组基因工程技术。此类DNA是已知的和/或易于从例如商业来源、DNA文库(包含例如噬菌体-抗体文库)获得，或可以合成。可以通过化学方法或通过分子生物学技术对DNA进行测序和操作，例如，将一个或多个可变结构域和/或恒定结构域排列成合适的构型、或引入密码子、产生半胱氨酸残基、修饰、添加或缺失氨基酸等。
抗原结合片段的非限制性示例包括：(i)Fab片段；(ii)F(ab′)2片段；(iii)Fd片段；(iv)Fv片段；(v)单链Fv(scFv)分子；(vi)dAb片段；和(vii)最小识别单元，这些最小识别单元由模拟抗体高变区的氨基酸残基(例如，分离的互补决定区(CDR)，诸如CDR3肽)或受限FR3-CDR3-FR4肽组成。其它工程化的分子，如结构域特异性抗体、单结构域抗体、结构域缺失抗体、嵌合抗体、CDR嫁接抗体、双抗体、三抗体、四抗体、微抗体、纳米抗体(例如单价纳米抗体、二价纳米抗体等)、小型模块化免疫药物(SMIP)和鲨鱼可变IgNAR结构域也涵盖在如本文所用的表述“抗原结合片段”内。
抗体的抗原结合片段通常包括至少一个可变结构域。可变结构域可以具有任何大小或氨基酸组成，并且将通常包括与一个或多个框架序列相邻或在所述框架内的至少一个CDR。在具有与VL结构域相关联的VH结构域的抗原结合片段中，VH结构域和VL结构域可以以任何合适的布置相对于彼此定位。例如，可变区可以是二聚体，并且含有VH-VH、VH-VL或VL-V二聚体。可替代地，抗体的抗原结合片段可以含有单体VH或VL结构域。
在某些实施方案中，抗体的抗原结合片段可以含有共价连接到至少一个恒定结构域的至少一个可变结构域。可在本发明的抗体的抗原结合片段中发现的可变和恒定结构域的非限制性示例性构型包括：(i)VH-CH1；(ii)VH-CH2；(iii)VH-CH3；(iv)VH-CH1-CH2；(v)VH-CH1-CH2-CH3；(vi)VH-CH2-CH3；(vii)VH-CL；(viii)VL-CH1；(ix)VL-CH2；(x)VL-CH3；(xi)VL-CH1-CH2；(xii)VL-CH1-CH2-CH3；(xiii)VL-CH2-CH3；和(xiv)VL-CL。在可变结构域和恒定结构域的任何构型(包含上文所列的任何示例性构型)中，可变结构域和恒定结构域可以彼此直接连接或可以通过完整或部分铰链或接头区连接。铰链区可以由至少2个(例如，5个、10个、15个、20个、40个、60个或更多个)氨基酸组成，所述氨基酸导致单个多肽分子中相邻可变结构域和/或恒定结构域之间的柔性或半柔性连接。此外，本发明的抗体的抗原结合片段可以包括上文所列出的任何可变结构域和恒定结构域构型的同二聚体或异二聚体(或其它多聚体)，其彼此非共价缔合和/或与一个或多个单体VH或VL结构域共价缔合(例如，通过一个或多个二硫键)。
与完整抗体分子一样，抗原结合片段可以是单特异性的或多特异性的(例如，双特异性的)。抗体的多特异性抗原结合片段通常包括至少两个不同的可变结构域，其中每个可变结构域能够特异性地结合单独的抗原或同一抗原上的不同表位。可以使用本领域可用的常规技术将任何多特异性抗体形式(包含本文公开的示例性双特异性抗体形式)适用于本发明抗体的抗原结合片段背景下。
在本发明的某些实施方案中，本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体是人抗体。如本文所用，术语“人抗体”旨在包括具有衍生自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本发明的人抗体可包括并非由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)，例如在CDR中，特别是在CDR3中。然而，如本文所使用的，术语“人抗体”并非旨在包含以下抗体，在这些抗体中衍生自另一个哺乳动物物种(如小鼠)的种系的CDR序列已经被移植于人类构架区序列上。
在一些实施方案中，本发明的抗体可以是重组人抗体。如本文所用，术语“重组人抗体”旨在包含通过重组方式制备、表达、产生或分离的所有人抗体，诸如使用转染到宿主细胞内的重组表达载体表达的抗体(以下进一步描述)、从重组组合人抗体库中分离的抗体(以下进一步描述)、从对于人免疫球蛋白基因而言为转基因的动物(例如，小鼠)中分离的抗体(参见例如，Taylor等人，Nucl Acids Res，第20卷：第6287-6295页，1992年)或通过涉及将人免疫球蛋白基因序列剪接到其他DNA序列的任何其他方法制备、表达、产生或分离的抗体。此类重组人抗体具有衍生自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区。然而，在某些实施方案中，此类重组人抗体经历体外诱变(或，当使用转基因人Ig序列的动物时，经历体内体细胞诱变)，并且因此重组抗体的VH区和VL区的氨基酸序列是如下序列：虽然衍生自人种系VH序列和VL序列并与之相关，但可能并非天然体内存在于人抗体种系库中。
人抗体可以以与铰链异质性相关的两种形式存在。在一种形式中，免疫球蛋白分子包括约150-160kDa的稳定四链构建体，其中二聚体通过链间重链二硫键保持在一起。在第二种形式中，二聚体不通过链间二硫键连接，并且形成约75-80kDa的分子，其由共价偶联的轻链和重链(半抗体)构成。即使在亲和纯化之后，这些形式也极难分离。
以各种完整IgG同种型形式出现第二种形式的频率基于但不限于与抗体的铰链区同种型相关的结构差异。人IgG4铰链的铰链区中的单个氨基酸取代可将第二种形式的出现(Angal等人，Molecular Immunology，第30卷：第105页，1993年)显著降低到通常使用人IgG1铰链所观察到的水平。本发明涵盖在铰链、CH2区或CH3区具有一个或多个突变的抗体，其可能是例如，在生产中所期望的，以提升所期望的抗体形式的产量。
本发明的抗体可以是分离的抗体。如本文所使用的，“分离的抗体”意指已经从其天然环境的至少一种组分中鉴定和分离和/或回收的抗体。例如，已经从生物体的至少一种组分，或从抗体天然存在或天然产生的组织或细胞中分离或除去的抗体是用于本发明的目的的“分离的抗体”。分离的抗体还包含重组细胞内的原位抗体。分离的抗体是已经经历至少一个纯化或分离步骤的抗体。根据某些实施方案，分离的抗体可以基本上不含其他细胞物质和/或化学品。
本发明包括中和和/或阻断抗SARS-CoV-2刺突蛋白质抗体。如本文所用，“中和”或“阻断”抗体旨在指与SARS-CoV-2刺突蛋白结合的抗体：(i)抑制SARS-CoV-2刺突蛋白的活性至任何可检测的程度，例如，抑制SARS-CoV-S与受体诸如ACE2结合的能力，被蛋白酶诸如TMPRSS2切割的能力，或介导病毒进入宿主细胞或在宿主细胞中病毒复制的能力。
如与衍生抗体的对应种系序列相比，本文公开的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体可在重链和轻链可变结构域的框架和/或CDR区中包括一个或多个氨基酸取代、插入和/或缺失。通过将本文所公开的氨基酸序列与可从例如公共抗体序列数据库获得的种系序列进行比较，可以容易地确定此类突变。本发明包含衍生自本文所公开的任何氨基酸序列的抗体和其抗原结合片段，其中一个或多个框架和/或CDR区内的一个或多个氨基酸突变为衍生抗体的种系序列的一个或多个对应的残基、或突变为另一种人种系序列的一个或多个对应的残基、或突变为一个或多个对应的种系残基的保守氨基酸取代(此类序列变化在本文中统称为“种系突变”)。从本文所公开的重链和轻链可变区序列开始，本领域普通技术人员可以容易地产生包括一个或多个个体种系突变或其组合的许多抗体和抗原结合片段。在某些实施方案中，VH结构域和/或VL结构域内的框架和/或CDR残基的全部突变回在衍生抗体的原始种系序列中所发现的残基。在其它实施方案中，仅将某些残基突变回原始种系序列，例如，仅在FR1的前8个氨基酸内或在FR4的最后8个氨基酸内所发现的突变后的残基，或仅在CDR1、CDR2或CDR3中发现的突变后的残基。在其它实施方案中，一个或多个框架和/或CDR残基中的一个或多个突变为不同种系序列(即，与最初衍生抗体的种系序列不同的种系序列)的一个或多个对应的残基。此外，本发明的抗体可以含有框架和/或CDR区内的两个或更多个种系突变的任何组合，例如其中某些个体残基突变为特定种系序列的对应残基，而与原始种系序列不同的某些其它残基可以维持或突变为不同种系序列的对应残基。一旦获得，可容易地检测含有一个或多个种系突变的抗体和抗原结合片段的一种或多种所期望的特性，如经改善的结合特异性、增加的结合亲和力、经改善或增强的拮抗或激动的生物学特性(视情况而定)、降低的免疫原性等。以这种通用方式获得的抗体和抗原结合片段涵盖在本发明内。
本发明还包括抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体，其包括具有一个或多个保守取代的本文公开的HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列中的任一个的变体。例如，本发明包括具有HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体，相对于本文公开的HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列中的任一者，这些HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列具有例如，10个或更少、8个或更少、6个或更少、4个或更少等的保守氨基酸取代。
术语“表位”是指与被称为互补位的抗体分子的可变区中的特定抗原结合位点相互作用的抗原决定簇。单一抗原可以具有多于一个表位。因此，不同的抗体可以与抗原上的不同区域结合，并且可以具有不同的生物学效应。表位可以是构象的或线性的。构象表位通过来自线性多肽链的不同区段的空间并列的氨基酸产生。线性表位是由多肽链中的相邻氨基酸残基产生的表位。在某些情况下，表位可以包含抗原上的糖、磷酰基或磺酰基的部分。
当提及核酸或其片段时，术语“基本同一性”或“基本上相同”表示当通过适当的核苷酸插入或缺失与另一个核酸(或其互补链)进行最佳比对时，核苷酸序列同一性为核苷酸碱基的至少约95％，并且更优选地，至少约96％、97％、98％或99％，如通过如FASTA、BLAST或Gap等任何众所周知的序列同一性算法所测量的，如以下所讨论的。在某些情况下，具有与参考核酸分子基本同一性的核酸分子可以编码具有与由参考核酸分子编码的多肽相同或基本上类似的氨基酸序列的多肽。
当应用于多肽时，术语“基本相似性”或“基本上类似”意指当如通过使用默认间隙权重的程序GAP或BESTFIT进行最佳比对时，两个肽序列共享至少95％的序列同一性，甚至更优选地，至少98％或99％的序列同一性。优选地，不相同的残基位置因保守氨基酸取代而不同。“保守氨基酸取代”是一个氨基酸残基被具有化学特性(例如，电荷或疏水性)类似的侧链(R基团)的另一个氨基酸残基取代的氨基酸取代。总体而言，保守氨基酸取代不会实质上改变蛋白质的功能特性。在两个或更多个氨基酸序列因保守取代而彼此不同的情况下，可以向上调整序列同一性百分比或相似性程度，以校正取代的保守性质。作出此调整的方法是本领域技术人员所熟知的。参见例如，Pearson,W.R.，Methods Mol Biol，第24卷：第307-331页，1994年，以引用方式并入本文。具有相似化学性质的侧链的氨基酸的组的示例包括(1)脂肪族侧链：甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；(2)脂肪族-羟基侧链：丝氨酸和苏氨酸；(3)含酰胺的侧链：天冬酰胺和谷氨酰胺；(4)芳香族侧链：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；(5)碱性侧链：赖氨酸、精氨酸和组氨酸；(6)酸性侧链：天冬氨酸和谷氨酸，并且(7)含硫侧链是半胱氨酸和甲硫氨酸。优选的保守氨基酸取代基是：缬氨酸-亮氨酸-异亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、赖氨酸-精氨酸、丙氨酸-缬氨酸、谷氨酸-天冬氨酸和天冬酰胺-谷氨酰胺。可替代地，保守替代是在以引用方式并入本文的Gonnet等人，Science，第256卷：第1443-1445页，1992年中公开的PAM250对数似然矩阵中具有正值的任何变化。“适度保守”替代是PAM250对数似然矩阵中具有非负值的任何变化。
通常使用序列分析软件来测量多肽的序列相似性，也被称为序列同一性。蛋白质分析软件使用分配给各种取代、缺失和其它修饰(包含保守氨基酸取代)的类似性的度量来匹配类似的序列。例如，GCG软件含有如Gap和Bestfit等程序，所述程序可以与默认参数一起使用，以确定紧密相关的多肽，如来自不同生物体物种的同源多肽之间或野生型蛋白质与其突变蛋白之间的序列同源性或序列同一性。参见例如，6.1版GCG。还可以使用使用默认的或推荐的参数的FASTA来比较多肽序列，所述FASTA为6.1版GCG中的程序。FASTA(例如，FASTA2和FASTA3)提供了询问序列与搜索序列之间的最佳重叠区域的比对和序列同一性百分比(参见例如，Pearson,W.R.，Methods Mol Biol，第132卷：第185-219页，2000年，以引用方式并入本文。)。当比较本发明的序列与含有大量来自不同生物体的序列的数据库时，另一个优选的算法是使用默认参数的计算机程序BLAST，尤其是BLASTP或TBLASTN。参见例如，Altschul等人，J Mol Biol，第215卷：第403-410页，1990年，以及Altschul等人，NucleicAcids Res，第25卷：第3389-3402页，1997年，这些文献各自以引用方式并入本文。
特异性结合
如本文所用，术语“特异性结合”等意指抗原特异性结合蛋白或抗原特异性结合结构域与特定抗原形成复合物，该特定抗原的特征在于解离常数(KD)为50nM或更小，并且在普通检测条件下不结合其他无关抗原。“无关抗原”是彼此具有小于95％氨基酸同一性的蛋白、肽或多肽。用于确定两个分子是否彼此特异性结合的方法是本领域公知的，并且包括，例如，平衡透析、表面等离子体共振等。例如，如本发明的上下文中所用，抗原特异性结合蛋白或抗原特异性结合结构域包括结合特定抗原(例如，SARS-CoV-2刺突蛋白、SARS-CoV-2刺突蛋白RBD或SARS-CoV-2刺突蛋白RBD的特定表位)或其一部分的分子，该特定抗原或其一部分的KD小于约50nM、小于约40nM、小于约30nM、小于约20nM、小于约10nM、小于约5nM、小于约4nM、小于约3nM、小于约2nM或小于约1nM，如在表面等离子体共振测定中所测量的。
如本文所用，术语“表面等离子体共振”是指允许通过检测生物传感器基质内蛋白浓度的改变来分析实时相互作用的光学现象，例如使用BIAcoreTM系统(Biacore LifeSciences division of GE Healthcare，Piscataway，NJ)。
如本文所用，术语“KD”意指特定蛋白-蛋白相互作用(例如，抗体-抗原相互作用)的平衡解离常数。除非另有说明，否则本文所公开的KD值是指在25℃下通过表面等离子体共振测定确定的KD值。
包含重链恒定区变体的抗体
根据本发明的某些实施方案，提供了包含Fc结构域的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体，该Fc结构域包含例如如与中性pH相比在酸性pH下增强或减弱抗体与FcRn受体的结合的一个或多个突变。例如，本发明包括在Fc结构域的CH2区或CH3区中包含突变的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体，其中该突变增加Fc结构域在酸性环境中(例如，在pH范围为约5.5至约6.0的核内体中)对FcRn的亲和力。当施用于动物时，此类突变可以导致抗体的血清半衰期增加。此类Fc修饰的非限制性示例包括，例如，位置250处的修饰(例如，E或Q)；位置250和428处的修饰(例如，L或F)；位置252处的修饰(例如，L/Y/F/W或T)、位置254处的修饰(例如，S或T)和位置256处的修饰(例如，S/R/Q/E/D或T)；或位置428和/或433处的修饰(例如，H/L/R/S/P/Q或K)和/或位置434处的修饰(例如，A、W、H、F或Y[N434A、N434W、N434H、N434F或N434Y])；或位置250和/或428处的修饰；或位置307或308处的修饰(例如，308F、V308F)和位置434处的修饰。在一个实施方案中，修饰包括428L(例如，M428L)和/或434S(例如，N434S)修饰；428L、259I(例如，V259I)和308F(例如V308F)修饰；433K(例如，H433K)和434(例如，434Y)修饰；252、254和256(例如，252Y、254T和256E)修饰；250Q和428L修饰(例如，T250Q和M428L)；以及307和/或308修饰(例如，308F或308P)。在另一个实施方案中，修饰包括265A(例如，D265A)和/或297A(例如，N297A)修饰。
例如，本发明包括抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体，其包含Fc结构域，该Fc结构域包含选自由以下组成的组的一对或多对突变或突变组：250Q和248L(例如，T250Q和M248L)；252Y、254T和256E(例如，M252Y、S254T和T256E)；428L和434S(例如，M428L和N434S)；257I和311I(例如，P257I和Q311I)；257I和434H(例如，P257I和N434H)；376V和434H(例如，D376V和N434H)；307A、380A和434A(例如，T307A、E380A和N434A)；以及433K和434F(例如，H433K和N434F)。前述Fc结构域突变的所有可能的组合和本文公开的抗体可变结构域内的其它突变都在本发明的范围内。
在各种实施方案中，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体包含结合衍生自多于一种免疫球蛋白同种型的序列的重链恒定区。例如，嵌合重链恒定区可包括衍生自人IgG1、人IgG2或人IgG4 CH2区的CH2序列的部分或全部以及衍生自人IgG1、人IgG2或人IgG4的CH3序列的部分或全部。嵌合重链恒定区还可含有嵌合铰链区。例如，嵌合铰链可以包括衍生自人IgG1、人IgG2或人IgG4铰链区的“上铰链”序列，其与衍生自人IgG1、人IgG2或人IgG4铰链区的“下铰链”序列组合。可包含在本文中所示的抗体中的任一者中的嵌合重链恒定区的具体示例包括，从N端到C端：[IgG4 CH1]-[IgG4上铰链]-[IgG2下铰链]-[IgG4 CH2]-[IgG4 CH3]。可包含在本文中所示的抗体中的任一者中的嵌合重链恒定区的另一种示例包括，从N端到C端：[IgG1 CH1]-[IgG1上铰链]-[IgG2下铰链]-[IgG4 CH2]-[IgG1 CH3]。可包含在本发明的抗体中的任一者中的嵌合重链恒定区的这些和其他示例描述于WO 2014/121087(8550-WO)中。具有这些通用结构排列的嵌合重链恒定区及其变体可具有改变的Fc受体结合，其反过来影响Fc效应子功能。
在各种实施方案中，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体包含重链恒定区，该重链恒定区包括铰链结构域，在该铰链结构域中，铰链结构域内的位置233-236可以是G、G、G和未占用；G、G、未占用和未占用；G、未占用、未占用和未占用；或全部未占用，其中位置按EU编号进行编号。任选地，重链恒定区从N端到C端包括铰链结构域、CH2结构域和CH3结构域。任选地，重链恒定区从N端到C端包括CH1结构域、铰链结构域、CH2结构域和CH3结构域。任选地，CH1区(如果存在的话)、铰链区的其余部分(如果有的话)、CH2区和CH3区是相同的人同种型。任选地，CH1区(如果存在的话)、铰链区的其余部分(如果有的话)、CH2区和CH3区是人IgG1。任选地，CH1区(如果存在的话)、铰链区的其余部分(如果有的话)、CH2区和CH3区是人IgG2。任选地，CH1区(如果存在的话)、铰链区的其余部分(如果有的话)、CH2区和CH3区是人IgG4。任选地，恒定区具有被修饰成减少与蛋白A的结合的CH3结构域。可包含在本发明的抗体中的任一者中的修饰的重链恒定区的这些和其他示例描述于WO 2016/161010(10140WO01)中。
表位作图和相关技术
本发明包括与在SARS-CoV-2刺突蛋白内(例如，在刺突蛋白RBD内)发现的一个或多个氨基酸相互作用的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体。抗体结合的表位可由位于刺突蛋白RBD内的3个或更多个(例如，3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个或更多个)氨基酸的单一连续序列组成。可替代地，该表位可由刺突蛋白RBD内的多个非连续氨基酸(或氨基酸序列)组成。
可使用本领域普通技术人员已知的各种技术来确定抗体是否在多肽或蛋白质内“与一个或多个氨基酸相互作用”。示例性技术包括例如，常规交叉阻断测定(如在Antibodies、Harlow和Lane(Cold Spring Harbor Press，Cold Spring Harb.，NY)中描述的交叉阻断测定)、丙氨酸扫描突变分析、肽印迹分析(Reineke，Methods Mol Biol，第248卷：第443-463页，2004年)和肽切割分析。另外，可采用方法诸如表位切除、表位提取及抗原的化学修饰等(Tomer，Protein Science，第9卷：第487-496页，2000年)。可以用于鉴定与抗体相互作用的多肽内的氨基酸的另一种方法是通过质谱法检测的氢/氘交换。一般而言，氢/氘交换方法涉及对感兴趣的蛋白质进行氘标记，然后将抗体与氘标记的蛋白质结合。接下来，将蛋白质/抗体复合物转移到水中，以允许在除抗体保护的残基(其保持为经氘标记的)之外的所有残基处发生氢-氘交换。在解离抗体后，对靶蛋白进行蛋白酶切割和质谱分析，从而揭示对应于与抗体相互作用的特定氨基酸的经氘标记的残基。参见例如，Ehring，Analytical Biochemistry，第267卷第2期：第252-259页，1999年；Engen和Smith，Anal.Chem.第73卷：第256A-265A页，2001年。
本发明还包括抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体，其与上述任何示例性抗体(例如，mAb10933、mAb10987或mAb10989)结合相同的表位。同样，本发明还包括抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体，其与本文所述的特定示例性抗体(例如，mAb10933、mAb10987或mAb10989)中的任一者竞争结合SARS-CoV-2刺突蛋白。
通过使用本领域已知的和本文举例说明的常规方法，可容易地确定抗体是否结合与参考抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体相同的表位或与其竞争结合。例如，为了确定测试抗体是否结合与本文讨论的参考抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体相同的表位，允许参考抗体结合SARS-CoV-2刺突蛋白。接下来，评估测试抗体与SARS-CoV-2刺突蛋白结合的能力。如果测试抗体能够在与参考抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体饱和结合后结合SARS-CoV-2刺突蛋白，则可得出结论，测试抗体结合与参考抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体不同的表位。另一方面，如果测试抗体在与参考抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体饱和结合后不能够结合SARS-CoV-2刺突蛋白，则测试抗体可结合与由本文讨论的参考抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体限定的表位相同的表位。然后可以进行另外的常规实验(例如，肽突变和结合分析)，以确认所观察到的测试抗体的结合缺乏是否实际上是由于结合与参考抗体相同的表位或者是否是空间阻断(或其它现象)导致所观察到的结合缺乏。可以使用ELISA、RIA、Biacore、流式细胞术或本领域可获得的任何其它定量或定性抗体结合测定来进行这种实验。根据本发明的某些实施方案，如果例如，一种抗体的1倍、5倍、10倍、20倍或100倍过量将另一种抗体的结合抑制至少50％，但是优选地75％、90％或甚至99％，则两个抗体结合到同一(或重叠)表位，如在竞争性结合测定中所测量(参见例如，Junghans等人，Cancer Res.，第50卷：第1495-1502页，1990年)。可替代地，如果抗原中基本上所有减少或消除一种抗体的结合的氨基酸突变减少或消除另一种抗体的结合，则认为两种抗体结合到同一表位。如果仅减少或消除一种抗体的结合的氨基酸突变的子集减少或消除另一种抗体的结合，则认为两种抗体具有“重叠表位”。
人抗体的制备
用于产生单克隆抗体(包括完全人单克隆抗体)的方法是本领域已知的。可将任何此类已知方法用于本发明中用于制备与SARS-CoV-2刺突蛋白特异性结合的人抗体的上下文。
例如，使用VELOCIMMUNETM技术或用于产生完全人单克隆抗体的任何其他已知方法，最初分离具有人可变区和小鼠恒定区的SARS-CoV-2刺突蛋白的高亲和力嵌合抗体。对抗体进行表征并选择期望的特性，包含亲和力、选择性、表位等。如果需要的话，用期望的人恒定区(例如野生型或经修饰的IgG1或IgG4)替代小鼠恒定区，以产生完全人抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体。虽然所选择的恒定区可以根据具体用途而变化，但高亲和力抗原结合和靶特异性特性存在于可变区中。在某些情况下，完全人抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体直接从抗原阳性B细胞中分离。
生物等效物
本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体和抗体片段涵盖具有不同于所述抗体的氨基酸序列但保留结合SARS-CoV-2刺突蛋白的能力的蛋白。当与亲本序列比较时，此类变体抗体或抗体片段包含氨基酸的一个或多个添加、缺失或取代，但表现出与所述抗体的生物活性基本上等效的生物活性。同样，当与所公开的序列比较时，本发明的编码抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体的DNA序列涵盖包含核苷酸的一个或多个添加、缺失或取代的序列，但编码与本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体或抗体片段基本上生物等效的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体或抗体片段。
如果，例如，两种抗体是在相似的实验条件下以相同的摩尔剂量施用(单次剂量或多次剂量)时吸收速率和程度不显示出显著差异的药物等效物或药物替代物，则认为所述两种抗体是生物等效的。如果一些抗体在其吸收程度上等效但在其吸收速率上不等效，则认为所述抗体是等效物或药物替代物，并且可以认为所述抗体是生物等效的，因为有意的并且反映在标记上的这种吸收速率差异在例如长期使用时对于达到有效的身体药物浓度并非是必需的并且对于所研究的特定药物产品而言被认为是医学上无关紧要的。
在一个实施方案中，如果两种抗体的安全性、纯度和效力没有临床上有意义的差异，则所述两种抗体是生物等效的。
在一个实施方案中，与没有这种转换的持续治疗相比，如果患者可以在参考产品与生物产品之间转换一次或多次而没有预期的副作用风险增加，包括免疫原性的临床显著变化或有效性降低，则两种抗体是生物等效的。
在一个实施方案中，如果两种抗体均通过针对一个或多个使用条件的一种或多种共同作用机制起作用(只要这些机制是已知的)，则所述两种抗体是生物等效的。
生物等效性可以通过体内和体外方法来证明。生物等效性测量包括，例如，(a)在人或其他哺乳动物中的体内试验，其中测量血液、血浆、血清或其他生物流体中抗体或其代谢物的浓度作为时间的函数；(b)与人体内生物利用度数据相关并能合理预测人体内生物利用度数据的体外试验；(c)在人或其他哺乳动物中进行的体内试验，其中抗体(或其靶标)的适当急性药理学效果作为时间函数进行测量；以及(d)在建立抗体的安全性、疗效或生物利用度或生物等效性的良好控制的临床试验中。
可通过例如对残基或序列进行各种取代或缺失非生物活性所必需的末端或内部残基或序列来构建本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体的生物等效变体。例如，可以缺失非生物活性所必需的半胱氨酸残基或用其它氨基酸替代，以防止在复性时形成不必要的或不正确的分子内二硫键。在其他上下文中，生物等效抗体可包括抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体变体，这些抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体变体包含修饰抗体的糖基化特性的氨基酸变化，例如消除或去除糖基化的突变。
在一些实施方案中，本文所公开的抗体在其恒定区糖基化中缺乏岩藻糖。在本领域中已经描述了在抗体组合物中测量岩藻糖的方法，例如美国专利号8,409,838(Regeneron Pharmaceuticals)，该专利以引用方式并入本文。在一些实施方案中，在包含抗体分子群体的组合物中，没有检测到岩藻糖。在一些实施方案中，缺乏岩藻糖的抗体具有增强的ADCC活性。
在一些实施方案中，缺乏岩藻糖的抗体可使用细胞系产生，这些细胞系缺乏岩藻糖基化蛋白的能力，即，降低或消除岩藻糖基化蛋白的能力。聚糖的岩藻糖基化需要经由从头途径或补救途径合成GDP-岩藻糖，这均涉及若干酶的依序功能，从而导致将岩藻糖分子添加到聚糖还原端的第一N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)部分。负责产生GDP-岩藻糖的从头途径的两个关键酶是GDP-D-甘露糖-4,6-脱水酶(GMD)和GDP-酮-6-脱氧甘露糖-3,5-表异构酶，4-还原酶(FX)。在不存在岩藻糖的情况下，这两种从头途径酶(GMD和FX)将甘露糖和/或葡萄糖转化为GDP-岩藻糖，然后将GDP-岩藻糖转运到高尔基复合体中，在高尔基复合体中，九种岩藻糖基转移酶(FUT1-9)协同作用，将聚糖的第一个GlcNAc分子岩藻糖基化。然而，在岩藻糖的存在下，补救途径的酶，岩藻糖激酶和GDP-岩藻糖焦磷酸化酶，将岩藻糖转化为GDP-岩藻糖。
在本领域中已经描述了缺乏岩藻糖基化蛋白的能力的细胞系。在一些实施方案中，缺乏岩藻糖基化蛋白的能力的细胞系是哺乳动物细胞系(例如，CHO细胞系，诸如CHOK1、DXB-11CHO、Veggie-CHO)，其在内源FUT1至9基因中的一者或多者中包含突变或遗传修饰，从而导致缺乏一种或多种功能性岩藻糖基转移酶。在一些实施方案中，哺乳动物细胞系包含内源FUT8基因的突变(例如，FUT8敲除细胞系，其中FUT8基因已被破坏，从而导致细胞系中缺乏功能性α1,6-岩藻糖基转移酶，如在以引用方式并入本文的以下专利中描述：美国专利号7,214,775(Kyowa Hakko Kogyo Co.,Ltd.)和美国专利7,737,725(Kyowa HakkoKirin Co.,Ltd)。在一些实施方案中，哺乳动物细胞系包含内源GMD基因的突变或遗传修饰，从而导致细胞系中缺乏功能性GMD，例如，其中GMD基因已被破坏的GMD敲除细胞系，该细胞系描述于例如以引用方式并入本文的美国专利7,737,725(Kyowa Hakko Kirin Co.,Ltd)中。在一些实施方案中，哺乳动物细胞系包含内源Fx基因的突变或基因修饰，从而导致缺乏功能性Fx蛋白。在一些实施方案中，哺乳动物细胞系是Fx敲除细胞系，其中内源Fx基因已被破坏(参见例如美国专利7,737,725(Kyowa Hakko Kirin Co.,Ltd)，其以引用方式并入本文)。在一些实施方案中，哺乳动物细胞系包含赋予温度敏感表型的内源Fx突变的突变(如美国专利号8,409,838(Regeneron Pharmaceuticals)中所述，其以引用方式并入本文)。在一些实施方案中，缺乏岩藻糖基化蛋白能力的哺乳动物细胞系是基于对某些凝集素(例如，扁豆凝集素)的抗性而选择的细胞系。参见例如美国专利号8,409,838(RegeneronPharmaceuticals)，其以引用方式并入本文。
治疗性制剂和施用
在本发明的方法和用途中使用的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体或抗原结合片段可被配制成与一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂一起施用的药物组合物。这些药物组合物与合适的载体、赋形剂和提供经改善的转移、递送、耐受性等的其他药剂一起配制。在所有药物化学家已知的处方集中可以找到许多适当的制剂：《雷明顿氏药物科学(Remington′s Pharmaceutical Sciences)》，宾夕法尼亚州伊斯顿的马克出版公司(MackPublishing Company,Easton,PA)。这些制剂包含例如，粉末、糊剂、软膏、凝胶、蜡、油、脂质、含有囊泡的脂质(阳离子或阴离子)(如LIPOFECTINTM，生命科技(Life Technologies)，卡尔斯巴德，加利福尼亚州)、DNA缀合物、无水吸收膏、水包油和油包水乳液、乳液聚乙二醇(各种分子量的聚乙二醇)、半固体凝胶和含有聚乙二醇的半固体混合物。还参见Powell等人“Compendium of excipients for parenteral formulations”，PDA，J Pharm SciTechnol，第52卷：第238-311页，1998年。
mAb10933和mAb10987是人IgG1 mAb，它们同时结合严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突(S)糖蛋白上不同的不重叠表位。mAb10933和mAb10987，其组合可在名为REGN-COV2或REGEN-COV的抗体混合物中发现，可通过重组DNA技术在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞悬浮培养物中产生，并分别具有大约145.23kDa和144.14kDa的分子量。本文所述的抗体(例如，mAb10933和mAb10987)可单独配制或共同配制。例如，共同配制的组合物可用于简化施用(例如，静脉内或皮下)，而单独的制剂在给药方面提供更大的灵活性。在特定实施方案中，组合物中称为REGEN-COV的两种抗体(mAb10933和mAb10987)可共同配制，或者这两种抗体可单独配制和在施用前组合。
在一些实施方案中，mAb10933和mAb10987注射液是无菌的、不含防腐剂的、澄清至微乳白色并且无色至淡黄色溶液，pH为6.0。在一些实施方案中，mAb10933和mAb10987中的每一者可配制为：120mg/mL抗体、10mM组氨酸、8％(w/v)蔗糖和0.1％(w/v)聚山梨醇酯80，pH 6.0。每种抗体可用两个浓度：300mg/2.5mL和1332mg/11.1mL。在一些实施方案中，mAb10933和mAb10987各自可作为具有300mg抗体(例如，在2.5mL溶液中)的小瓶或1332mg抗体(例如，在11.1mL溶液中)的小瓶获得。每个小瓶的示例性内容物如下所示：
300mg的小瓶
·mAb10933：每个2.5mL溶液含有300mg的mAb10933、L-组氨酸(1.9mg)、L-组氨酸单盐酸盐一水合物(2.7mg)、聚山梨醇酯80(2.5mg)、蔗糖(200mg)和注射用水，USP。pH为6.0。
·mAb10987：每个2.5mL溶液含有300mg的mAb10987、L-组氨酸(1.9mg)、L-组氨酸单盐酸盐一水合物(2.7mg)、聚山梨醇酯80(2.5mg)、蔗糖(200mg)和注射用水，USP。pH为6.0。
1332mg的小瓶
·mAb10933：每个11.1mL溶液含有1332mg的mAb10933、L-组氨酸(8.3mg)、L-组氨酸单盐酸盐一水合物(12.1mg)、聚山梨醇酯80(11.1mg)、蔗糖(888mg)和注射用水，USP。pH为6.0。
·mAb10987：每个11.1mL溶液含有1332mg的mAb10987、L-组氨酸(8.3mg)、L-组氨酸单盐酸盐一水合物(12.1mg)、聚山梨醇酯80(11.1mg)、蔗糖(888mg)和注射用水，USP。pH为6.0。
施用于患者的抗体的剂量可以根据患者的年龄和体型、病症、施用途径等而变化。通常根据体重或体表面积计算优选的剂量。当本发明的抗体用于治疗成年患者时，通常以约0.01mg/kg至约20mg/kg体重、更优选地约0.02mg/kg至约7mg/kg体重、约0.03mg/kg至约5mg/kg体重或约0.05mg/kg至约3mg/kg体重的单剂量静脉内施用本发明的抗体可能是有利的。根据病状的严重程度，可以调整治疗的频率和持续时间。施用抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体的有效剂量和方案可凭经验确定；例如，可通过定期评估来监测患者的进展，并相应地调整剂量。此外，剂量的种间缩放可以使用本领域熟知的方法进行(例如，Mordenti等人，Pharmaceut Res，第8卷：第1351页，1991年)。
各种递送系统是已知的并且可用于施用本发明的药物组合物，例如，在脂质体、微粒、微胶囊内包封、能够表达本发明的抗体或其他治疗性蛋白的重组细胞、受体介导的胞吞作用(参见例如，Wu等人，J Biol Chem，第262卷：第4429-4432页，1987年)。本发明的抗体和其他治疗活性组分也可通过基因疗法技术递送。引入的方法包含但不限于皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外和口服途径。可以通过任何方便的途径施用组合物，例如通过输注或快速浓注、通过上皮或皮肤粘膜内层(例如，口腔粘膜、直肠和肠道粘膜等)吸收，并且可以与其它生物活性剂一起施用。施用可以是全身的或局部的。
可用标准针头和注射器皮下或静脉内递送药物组合物。另外，就皮下递送而言，笔递送装置易于应用于递送本发明的药物组合物。这种笔递送装置可以是可重复使用的或一次性的。可重复使用的笔递送装置通常利用含有药物组合物的可更换药筒。一旦已经施用了药筒内的全部药物组合物，并且药筒是空的，就可以轻易地丢弃空药筒，并且用含有药物组合物的新药筒更换。然后可以重复使用笔递送装置。在一次性笔递送装置中，没有可更换的药筒。相反，一次性笔递送装置预装有固持在装置内的贮存器中的药物组合物。一旦贮存器中的药物组合物清空，就丢弃整个装置。
许多可重复使用的笔递送装置和自动注射器递送装置应用于皮下递送本文讨论的药物组合物。实例包含但不限于AUTOPENTM(Owen Mumford公司(Owen Mumford,Inc.)，伍德斯托克，UK)、DISETRONICTM笔(Disetronic Medical Systems，波道夫，瑞士)、HUMALOGMIX 75/25TM笔、HUMALOGTM笔、HUMALIN 70/30TM笔(礼来公司(Eli Lilly and Co.,)，印第安纳波利斯，印第安纳州)、NOVOPENTMI、II和III(诺和诺德(Novo Nordisk)，哥本哈根，丹麦)、NOVOPEN JUNIORTM(诺和诺德，哥本哈根，丹麦)、BDTM笔(贝迪医疗(Becton Dickinson)，富兰克林湖，新泽西州)、OPTIPENTM、OPTIPEN PROTM、OPTIPEN STARLETTM以及OPTICLIKTM(赛诺菲(sanofi-aventis)，法兰克福市，德国)，仅举几例。应用于皮下递送的本发明的药物组合物的一次性笔递送装置的实例包含但不限于SOLOSTARTM笔(赛诺菲)、FLEXPENTM(诺和诺德)以及KWIKPENTM(礼来)、SURECLICKTM自我注射器(安进(Amgen)，千橡市，加利福尼亚州)、PENLETTM(Haselmeier，斯图加特，德国)、EPIPEN(Dey公司(Dey,L.P.))以及HUMIRATM笔(雅培实验室(Abbott Labs)，雅培科技园IL)，仅举几例。
在某些情况下，可以在控释系统中递送药物组合物。在一个实施方案中，可使用泵(参见Langer，同上；Sefton,CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.，第14卷：第201页，1987年)。在另一个实施方案中，可使用聚合物材料；参见Medical Applications of ControlledRelease，Langer和Wise(编辑)，1974年，CRC Pres.，Boca Raton，Florida。在又另一个实施方案中，控释系统可以放置在组合物靶标附近，因此仅需要全身剂量的一小部分(参见例如，Goodson,1984,《控释医学应用》，同上，第2卷，第115-138页)。其他受控释放系统在以下综述中讨论：Langer，Science，第249卷：第1527-1533页，1990年。
可注射制剂可以包含用于静脉内、皮下、皮内和肌内注射、滴注等的剂型。可以通过已知的方法制备这些可注射制剂。例如，可注射制剂可以通过例如，将上述抗体或其盐溶解、悬浮或乳化在无菌水性介质或常规用于注射的油性介质中来制备。作为注射用水性介质，存在例如生理盐水、含有葡萄糖和其他助剂的等渗溶液。
组合疗法
在一些情况下，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体可与另外的治疗剂一起施用。在一些实施方案中，所述另外的治疗剂是抗病毒药或疫苗。在一些实施方案中，所述另外的治疗剂选自由以下组成的组：抗炎剂、抗疟疾剂、特异性结合TMPRSS2的抗体或其抗原结合片段以及与SARS-CoV-2刺突蛋白特异性结合的抗体或抗原结合片段。在一些情况下，所述抗疟疾剂是氯喹或羟化氯喹。在一些情况下，所述抗炎剂是抗体，如沙利鲁单抗、托珠单抗或吉西鲁单抗(gimsilumab)。在一些实施方案中，所述另外的治疗剂是包括表1的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的第二抗体或抗原结合片段。
另外的治疗剂可施用给受试者或在施用本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体之前使用。例如，如果在施用/使用第二组分之前1周、之前72小时、之前60小时、之前48小时、之前36小时、之前24小时、之前12小时、之前6小时、之前5小时、之前4小时、之前3小时、之前2小时、之前1小时、之前30分钟、之前15分钟、之前10分钟、之前5分钟或之前不到1分钟施用/使用第一组分，则可认为第一组分在第二组分“之前”施用/使用。在其他实施方案中，另外的治疗剂可施用给受试者或在施用本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体之后使用。例如，如果第一组分在第二组分施用/使用之后1分钟、之后5分钟、之后10分钟、之后15分钟、之后30分钟、之后1小时、之后2小时、之后3小时、之后4小时、之后5小时、之后6小时、之后12小时、之后24小时、之后36小时、之后48小时、之后60小时、之后72小时后施用/使用，则可认为第一组分是在第二组分“之后”施用/使用。在其他实施方案中，另外的治疗剂可施用给受试者或在施用本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体同时使用。出于本发明的目的，“同时”施用包括，例如，以单一剂型向受试者施用抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体和另外的治疗活性组分，或者以彼此间隔约30分钟或更短时间向受试者施用的单独剂型。如果以单独剂型施用，则每种剂型可经由相同的途径施用(例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白和另外的治疗活性组分可静脉内、皮下等施用)。在任何情况下，出于本公开的目的，以单独剂型、以通过相同途径的单独剂型或以通过不同途径的单独剂型施用组分均被认为是“同时施用”。出于本公开的目的，施用抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体“之前”、“同时”或“之后”(如上文所定义的那些术语)施用另外的治疗剂被认为是与另外的治疗剂“组合”施用抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体。
剂量
可施用给受试者的活性成分(例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体或与抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体组合施用的其他治疗剂)的量通常为治疗有效量，如本文其他地方所讨论的。
在一些实施方案中，治疗有效量可以是约0.05mg至约20g；例如，0.05mg、约0.1mg、约1.0mg、约1.5mg、约2.0mg、约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg、约120mg、约130mg、约140mg、约150mg、约160mg、约170mg、约180mg、约190mg、约200mg、约210mg、约220mg、约230mg、约240mg、约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg、约300mg、约310mg、约320mg、约330mg、约340mg、约350mg、约360mg、约370mg、约380mg、约390mg、约400mg、约410mg、约420mg、约430mg、约440mg、约450mg、约460mg、约470mg、约480mg、约490mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg、约600mg、约610mg、约620mg、约630mg、约640mg、约650mg、约660mg、约670mg、约680mg、约690mg、约700mg、约710mg、约720mg、约730mg、约740mg、约750mg、约760mg、约770mg、约780mg、约790mg、约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg、约900mg、约910mg、约920mg、约930mg、约940mg、约950mg、约960mg、约970mg、约980mg、约990mg、约1g、约1.1g、约1.2g、约1.3g、约1.4g,1.5g、约1.6g、约1.7g、约1.8g、约1.9g、约2g、约2.1g、约2.2g、约2.3g、约2.4g、约2.5g、约2.6g、约2.7g、约2.8g、约2.9g、约3g、约3.1g、约3.2g、约3.3g、约3.4g、约3.5g、约3.6g、约3.7g、约3.8g、约3.9g、约4g、约4.1g、约4.2g、约4.3g、约4.4g、约4.5g、约4.6g、约4.7g、约4.8g、约4.9g、约5g、约5.1g、约5.2g、约5.3g、约5.4g、约5.5g、约5.6g、约5.7g、约5.8g、约5.9g、约6g、约6.1g、约6.2g、约6.3g、约6.4g、约6.5g、约6.6g、约6.7g、约6.8g、约6.9g、约7g、约7.1g、约7.2g、约7.3g、约7.4g、约7.5g、约7.6g、约7.7g、约7.8g、约7.9g、约8g、约8.1g、约8.2g、约8.3g、约8.4g、约8.5g、约8.6g、约8.7g、约8.8g、约8.9g、约9g、约9.1g、约9.2g、约9.3g、约9.4g、约9.5g、约9.6g、约9.7g、约9.8g、约9.9g、约10g、约11g、约12g、约13g、约14g、约15g、约16g、约17g、约18g、约19g或约20g的相应抗体。在一些情况下，治疗有效量为0.1g至3.5g。在一些情况下，治疗有效量为0.5g至2g。在一些情况下，治疗有效量为0.8g至1.6g。在一些情况下，治疗有效量为1.0g至1.4g。在一些情况下，治疗有效量为1g至7g。在一些情况下，治疗有效量为3g至5g。在一些情况下，治疗有效量为3.5g至4.5g。在上述这些实施方案中的任一者中，剂量可表示单一抗体的剂量，或者抗体组合的总剂量。例如，可共同施用两种不同的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其中每种抗体的剂量表示施用总剂量的一半。
在一些实施方案中，mAb10933和mAb10987的组合以300mg至2400mg的总剂量静脉内或皮下共同施用。在一些情况下，总剂量为100mg至5000mg。在一些实施方案中，总剂量为200mg至400mg、500mg至700mg、1000mg至1400mg或2000mg至2800mg。在一些实施方案中，总剂量为250mg至350mg、550mg至650mg、1150mg至1250mg或2300mg至2500mg。在一些情况下，总剂量为300mg、600mg、1200mg或2400mg。在一些情况下，总剂量为100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、750mg、800mg、850mg、900mg、1000mg、1050mg、1100mg、1150mg、1200mg、1250mg、1300mg、1350mg、1400mg、1450mg、1500mg、1550mg、1600mg、1650mg、1700mg、1750mg、1800mg、1850mg、1900mg、1950mg、2000mg、2050mg、2100mg、2150mg、2200mg、2250mg、2300mg、2350mg、2400mg、2450mg、2500mg、2550mg、2600mg、2650mg、2700mg、2750mg、2800mg、2850mg、2900mg、2950mg或3000mg。在一些实施方案中，总剂量为2400mg，并且mAb10933和mAb10987中的每一者以1200mg的剂量静脉内施用。在一些实施方案中，总剂量为1200mg，并且mAb10933和mAb10987中的每一者以600mg的剂量静脉内施用。在一些实施方案中，总剂量为600mg，并且mAb10933和mAb10987中的每一者以300mg的剂量静脉内施用。在一些实施方案中，总剂量为300mg，并且mAb10933和mAb10987中的每一者以150mg的剂量静脉内施用。在一些实施方案中，总剂量为1200mg，并且mAb10933和mAb10987中的每一者以600mg的剂量皮下施用。在一些实施方案中，总剂量为600mg，并且mAb10933和mAb10987中的每一者以300mg的剂量皮下施用。在一些实施方案中，每个单独的抗体以100mg至200mg、200mg至400mg、500mg至700mg或2300mg至2500mg的剂量施用。在一些情况下，每个单独的抗体以124mg至175mg、250mg至350mg、550mg至650mg或1150mg至1250mg的剂量施用。
各剂量中包含的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体或其他治疗剂的量可以用每千克患者体重的抗体毫克数(即mg/kg)来表示。例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体可以约0.0001mg/kg至约200mg/kg患者体重的剂量施用给患者(例如0.1mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg、1.5mg/kg、2.0mg/kg、2.5mg/kg、3.0mg/kg、3.5mg/kg、4.0mg/kg、4.5mg/kg、5.0mg/kg、5.5mg/kg、6.0mg/kg、6.5mg/kg、7.0mg/kg、7.5mg/kg、8.0mg/kg、8.5mg/kg、9.0mg/kg、9.5mg/kg、10.0mg/kg、10.5mg/kg、11.0mg/kg、11.5mg/kg、12.0mg/kg、12.5mg/kg、13.0mg/kg、13.5mg/kg、14.0mg/kg、14.5mg/kg、15.0mg/kg、15.5mg/kg、16.0mg/kg、16.5mg/kg、17.0mg/kg、17.5mg/kg、18.0mg/kg、18.5mg/kg、19.0mg/kg、19.5mg/kg、20.0mg/kg、20.5mg/kg、21.0mg/kg、21.5mg/kg、22.0mg/kg、22.5mg/kg、23.0mg/kg、23.5mg/kg、24.0mg/kg、24.5mg/kg、25.0mg/kg、25.5mg/kg、26.0mg/kg、26.5mg/kg、27.0mg/kg、27.5mg/kg、28.0mg/kg、28.5mg/kg、29.0mg/kg、29.5mg/kg、30.0mg/kg、30.5mg/kg、31.0mg/kg、31.5mg/kg、32.0mg/kg、32.5mg/kg、33.0mg/kg、33.5mg/kg、34.0mg/kg、34.5mg/kg、35.0mg/kg、35.5mg/kg、36.0mg/kg、36.5mg/kg、37.0mg/kg、37.5mg/kg、38.0mg/kg、38.5mg/kg、39.0mg/kg、39.5mg/kg、40.0mg/kg、40.5mg/kg、41.0mg/kg、41.5mg/kg、42.0mg/kg、42.5mg/kg、43.0mg/kg、43.5mg/kg、44.0mg/kg、44.5mg/kg、45.0mg/kg、45.5mg/kg、46.0mg/kg、46.5mg/kg、47.0mg/kg、47.5mg/kg、48.0mg/kg、48.5mg/kg、49.0mg/kg、49.5mg/kg、50.0mg/kg、50.5mg/kg、51.0mg/kg、51.5mg/kg、52.0mg/kg、52.5mg/kg、53.0mg/kg、53.5mg/kg、54.0mg/kg、54.5mg/kg、55.0mg/kg、55.5mg/kg、56.0mg/kg、56.5mg/kg、57.0mg/kg、57.5mg/kg、58.0mg/kg、58.5mg/kg、59.0mg/kg、59.5mg/kg、60.0mg/kg、60.5mg/kg、61.0mg/kg、61.5mg/kg、62.0mg/kg、62.5mg/kg、63.0mg/kg、63.5mg/kg、64.0mg/kg、64.5mg/kg、65.0mg/kg、65.5mg/kg、66.0mg/kg、66.5mg/kg、67.0mg/kg、67.5mg/kg、68.0mg/kg、68.5mg/kg、69.0mg/kg、69.5mg/kg、70.0mg/kg、70.5mg/kg、71.0mg/kg、71.5mg/kg、72.0mg/kg、72.5mg/kg、73.0mg/kg、73.5mg/kg、74.0mg/kg、74.5mg/kg、75.0mg/kg、75.5mg/kg、76.0mg/kg、76.5mg/kg、77.0mg/kg、77.5mg/kg、78.0mg/kg、78.5mg/kg、79.0mg/kg、79.5mg/kg、80.0mg/kg、80.5mg/kg、81.0mg/kg、81.5mg/kg、82.0mg/kg、82.5mg/kg、83.0mg/kg、83.5mg/kg、84.0mg/kg、84.5mg/kg、85.0mg/kg、85.5mg/kg、86.0mg/kg、86.5mg/kg、87.0mg/kg、87.5mg/kg、88.0mg/kg、88.5mg/kg、89.0mg/kg、89.5mg/kg、90.0mg/kg、90.5mg/kg、91.0mg/kg、91.5mg/kg、92.0mg/kg、92.5mg/kg、93.0mg/kg、93.5mg/kg、94.0mg/kg、94.5mg/kg、95.0mg/kg、95.5mg/kg、96.0mg/kg、96.5mg/kg、97.0mg/kg、97.5mg/kg、98.0mg/kg、98.5mg/kg、99.0mg/kg、99.5mg/kg、100.0mg/kg、100.5mg/kg、101.0mg/kg、101.5mg/kg、102.0mg/kg、102.5mg/kg、103.0mg/kg、103.5mg/kg、104.0mg/kg、104.5mg/kg、105.0mg/kg、105.5mg/kg、106.0mg/kg、106.5mg/kg、107.0mg/kg、107.5mg/kg、108.0mg/kg、108.5mg/kg、109.0mg/kg、109.5mg/kg、110.0mg/kg、110.5mg/kg、111.0mg/kg、111.5mg/kg、112.0mg/kg、112.5mg/kg、113.0mg/kg、113.5mg/kg、114.0mg/kg、114.5mg/kg、115.0mg/kg、115.5mg/kg、116.0mg/kg、116.5mg/kg、117.0mg/kg、117.5mg/kg、118.0mg/kg、118.5mg/kg、119.0mg/kg、119.5mg/kg、120.0mg/kg、120.5mg/kg、121.0mg/kg、121.5mg/kg、122.0mg/kg、122.5mg/kg、123.0mg/kg、123.5mg/kg、124.0mg/kg、124.5mg/kg、125.0mg/kg、125.5mg/kg、126.0mg/kg、126.5mg/kg、127.0mg/kg、127.5mg/kg、128.0mg/kg、128.5mg/kg、129.0mg/kg、129.5mg/kg、130.0mg/kg、130.5mg/kg、131.0mg/kg、131.5mg/kg、132.0mg/kg、132.5mg/kg、133.0mg/kg、133.5mg/kg、134.0mg/kg、134.5mg/kg、135.0mg/kg、135.5mg/kg、136.0mg/kg、136.5mg/kg、137.0mg/kg、137.5mg/kg、138.0mg/kg、138.5mg/kg、139.0mg/kg、139.5mg/kg、140.0mg/kg、140.5mg/kg、141.0mg/kg、141.5mg/kg、142.0mg/kg、142.5mg/kg、143.0mg/kg、143.5mg/kg、144.0mg/kg、144.5mg/kg、145.0mg/kg、145.5mg/kg、146.0mg/kg、146.5mg/kg、147.0mg/kg、147.5mg/kg、148.0mg/kg、148.5mg/kg、149.0mg/kg、149.5mg/kg、150.0mg/kg、150.5mg/kg、151.0mg/kg、151.5mg/kg、152.0mg/kg、152.5mg/kg、153.0mg/kg、153.5mg/kg、154.0mg/kg、154.5mg/kg、155.0mg/kg、155.5mg/kg、156.0mg/kg、156.5mg/kg、157.0mg/kg、157.5mg/kg、158.0mg/kg、158.5mg/kg、159.0mg/kg、159.5mg/kg、160.0mg/kg、160.5mg/kg、161.0mg/kg、161.5mg/kg、162.0mg/kg、162.5mg/kg、163.0mg/kg、163.5mg/kg、164.0mg/kg、164.5mg/kg、165.0mg/kg、165.5mg/kg、166.0mg/kg、166.5mg/kg、167.0mg/kg、167.5mg/kg、168.0mg/kg、168.5mg/kg、169.0mg/kg、169.5mg/kg、170.0mg/kg、170.5mg/kg、171.0mg/kg、171.5mg/kg、172.0mg/kg、172.5mg/kg、173.0mg/kg、173.5mg/kg、174.0mg/kg、174.5mg/kg、175.0mg/kg、175.5mg/kg、176.0mg/kg、176.5mg/kg、177.0mg/kg、177.5mg/kg、178.0mg/kg、178.5mg/kg、179.0mg/kg、179.5mg/kg、180.0mg/kg、180.5mg/kg、181.0mg/kg、181.5mg/kg、182.0mg/kg、182.5mg/kg、183.0mg/kg、183.5mg/kg、184.0mg/kg、184.5mg/kg、185.0mg/kg、185.5mg/kg、186.0mg/kg、186.5mg/kg、187.0mg/kg、187.5mg/kg、188.0mg/kg、188.5mg/kg、189.0mg/kg、189.5mg/kg、190.0mg/kg、190.5mg/kg、191.0mg/kg、191.5mg/kg、192.0mg/kg、192.5mg/kg、193.0mg/kg、193.5mg/kg、194.0mg/kg、194.5mg/kg、195.0mg/kg、195.5mg/kg、196.0mg/kg、196.5mg/kg、197.0mg/kg、197.5mg/kg、198.0mg/kg、198.5mg/kg、199.0mg/kg、199.5mg/kg或200.0mg/kg)。
施用方案
根据本发明的某些实施方案，多剂量的活性成分(例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体)可在规定的时间过程中施用给受试者。根据本发明的这个方面的方法包括向受试者依次施用多个剂量的本发明的活性成分。如本文所使用的，“依次施用”意指每个剂量的活性成分在不同时间点施用于受试者，例如，在隔开预定间隔(例如，数小时、数天、数周或数月)的不同日期。本发明包括这样的方法，该方法包括对患者顺序施用单一初始剂量的活性成分，随后施用一种或多种第二剂量的活性成分，并且任选地随后施用一种或多种第三剂量的活性成分。
术语“初始剂量”、“第二剂量”和“第三剂量”是指施用活性成分(例如本发明的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体)或本发明的组合疗法(例如两种不同的抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体)的时间顺序。因此，“初始剂量”是在治疗方案开始时施用的剂量(也称为“基线剂量”)；“第二剂量”是在初始剂量之后施用的剂量；并且“三级剂量”是在第二剂量之后施用的剂量。初始剂量、第二剂量和第三剂量都可含有相同量的活性成分(例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体)，但是在施用频率方面通常可能彼此不同。然而，在某些实施方案中，在治疗过程期间初始剂量、第二剂量和/或第三剂量中含有的活性成分(例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体)的量彼此不同(例如，适当地调高或降低)。在某些实施方案中，在治疗方案开始时施用两个或更多个(例如，2个、3个、4个或5个)剂量作为“负荷剂量”，然后是在较不频繁的基础上施用后续剂量(例如，“维持剂量”)。
在本发明的一个示例性实施方案中，每个第二剂量和/或第三剂量在前一剂量后施用1周至26周(例如，1、1 1/2、2、2 1/2、3、3 1/2、4、4 1/2、5、5 1/2、6、6 1/2、7、7 1/2、8、8 1/2、9、9 1/2、10、10 1/2、11、11 1/2、12、12 1/2、13、13 1/2、14、14 1/2、15、15 1/2、16、16 1/2、17、17 1/2、18、18 1/2、19、19 1/2、20、20 1/2、21、21 1/2、22、22 1/2、23、23 1/2、24、24 1/2、25、25 1/2、26、26 1/2或更多周)。如本文使用，短语“前一剂量”意指在多次施用的序列中，在没有中间剂量的情况下在所述序列中的下一个剂量之前施用给患者的活性成分(例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体)的剂量。
根据本发明的该方面的方法可包括向患者施用任何数量的第二剂量和/或第三剂量的本发明的活性成分，例如，抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体。例如，在某些实施方案中，仅向患者施用单个第二剂量。在其它实施方案中，向患者施用两个或更多个(例如，2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个或更多个)第二剂量。同样地，在某些实施方案中，仅向患者施用单个第三剂量。在其它实施方案中，向患者施用两个或更多个(例如，2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个或更多个)第三剂量。
在涉及多个第二剂量的实施方案中，每个第二剂量可以按与其他第二剂量相同的频率施用。例如，可以在前一剂量后1到2周或1到2个月对患者施用每个第二剂量。类似地，在涉及多个第三剂量的实施方案中，每个第三剂量可以按与其它第三剂量相同的频率施用。例如，可以在前一剂量后2到12周对患者施用每个第三剂量。可替代地，对患者施用第二剂量和/或第三剂量的频率可以在治疗方案的过程中变化。施用频率也可以在医师的治疗过程中根据临床检查后个体患者的需要进行调整。
本发明包括施用方案，其中以第一频率(例如，每周一次，每两周一次，每三周一次，每个月一次，每两个月一次等)向患者施用2至6个负荷剂量，然后在较不频繁的基础上给患者施用两次或更多次维持剂量。例如，根据本发明的这个方面，如果以每月一次的频率施用负荷剂量，则可以每六周一次，每两个月一次，每三个月一次向患者施用维持剂量，等等。)。在某些实施方案中，将单剂量作为预防性或治疗性治疗过程的一部分施用给受试者。在一些实施方案中，施用一种或多种剂量以治疗诊断为轻度至中度冠状病毒疾病(COVID-19)的高风险成人或儿童患者。
在一些实施方案中，成人和儿童患者的剂量(12岁及以上，体重至少40kg)是：
o 600mg mAb10933(卡西瑞单抗)和600mg mAb10987(伊德维单抗)经由泵或重力以单次静脉内输注(参见4A表)或单次皮下注射或两次皮下注射的方式一起施用；或
ο1,200mg卡西瑞单抗和1,200mg伊德维单抗经由泵或重力以单次静脉内输注(参见4B表)方式一起施用；mAb10933+mAb10987(分别为卡西瑞单抗和伊德维单抗)的示例性制备说明如下：
1.从冷藏储存中取出卡西瑞单抗和伊德维单抗的小瓶，并在制备前平衡至室温约20分钟。请勿直接暴露在高温下。请勿摇动小瓶。
2.在施用前，目视检查卡西瑞单抗和伊德维单抗的小瓶是否有颗粒物和变色。如果观察到任一种情况，必须丢弃该溶液，并制备新溶液。每个小瓶的溶液应该是澄清至微乳白色，无色至淡黄色。
3.获取预装的IV输注袋，其中装有50mL、100mL、150mL或250mL的0.9％氯化钠注射液。
4.如果施用600mg/600mg剂量：
ο则使用两个单独的注射器从每个小瓶中分别抽取5mL卡西瑞单抗和5mL伊德维单抗(参见表4A)，并将所有10mL注射到含有0.9％氯化钠注射液的预装输注袋中(参见表4A)。丢弃小瓶中剩余的任何产品。
或
如果施用替代的1,200mg/1,200mg剂量：
ο则使用两个单独的注射器从每个小瓶中分别抽取10mL卡西瑞单抗和10mL伊德维单抗(参见表4B)，并将所有20mL注射到含有0.9％氯化钠注射液的预装输液袋中(参见表4B)。丢弃小瓶中剩余的任何产品。
5.用手轻轻翻转输液袋大约10次。请勿摇动。
6.本品不含防腐剂，因此应立即施用稀释的输注液。
·如果无法立即施用，则请将稀释的卡西瑞单抗与伊德维单抗输注液一起储存在2℃至8℃(36℉至46℉)的冰箱中，储存时间不超过36小时，或在室温至25℃(77℉)下储存不超过4小时。如果冷藏，则在施用前让输注液平衡至室温约30分钟。
示例性施用说明如下：
1.收集推荐的输注材料：
a.聚氯乙烯(PVC)、聚乙烯(PE)衬里的PVC或聚氨酯(PU)输注器
b.在线或附加0.2微米聚醚砜(PES)过滤器
2.将输注器附接到IV袋。
3.灌注输注器。
4.通过含有无菌、在线或附加0.2微米聚醚砜(PES)过滤器的静脉管线，经由泵或重力以IV输注施用至少60分钟(参见表4A或表4B)。
5.所制备的输注液不应与任何其他药物同时施用。除0.9％氯化钠注射液外，mAb10933和mAb10987注射液与IV溶液和药物的相容性尚不清楚。
6.在输注完成之后，用0.9％氯化钠注射液冲洗。
7.丢弃未使用的产品。
8.在施用期间对患者进行临床监测，并在输注完成之后对患者进行至少1小时的观察。
表4A：用于IV输注600mg卡西瑞单抗和600mg伊德维单抗的推荐剂量、稀释和施用
说明
a将600mg卡西瑞单抗和600mg伊德维单抗添加到同一输注袋中，并且作为单次静脉内输注一起施用。
b在输注完成之后，用0.9％氯化钠注射液冲洗。
c使用50mL预装0.9％氯化钠输注袋给患者同时施用卡西瑞单抗和伊德维单抗时，最小输注时间必须为至少20分钟，以确保安全使用。
表4B：用于IV输注1,200mg卡西瑞单抗和1,200mg伊德维单抗的推荐剂量、稀释和
施用说明
a将1,200mg卡西瑞单抗和1,200mg伊德维单抗添加到同一输注袋中，并且作为单次静脉内输注一起施用。
b在输注完成之后，用0.9％氯化钠注射液冲洗。
c使用50mL预装0.9％氯化钠输注袋给患者同时施用卡西瑞单抗和伊德维单抗时，最小输注时间应该为至少20分钟，以确保安全使用。
试剂盒
本发明进一步提供了一种制品或试剂盒，其包括包装材料、容器和容纳在该容器内的药剂，其中该药剂包含至少一种抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，并且其中该包装材料包含显示适应症和使用说明的标签或包装说明书。在一个实施方案中，该试剂盒可包括两种抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，并且这两种抗体可包含在单独的容器中。
实施例
提出以下实例，以向本领域普通技术人员提供关于如何制备和使用本发明的方法和组合物的完整公开和描述，并且不旨在限制发明人认为是其发明的范围。已经努力确保关于所使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但是应该考虑一些实验误差和偏差。除非另外指明，否则份数是重量份，分子量是平均分子量，温度是摄氏度，并且压力是或接近大气压。
实施例1.患有COVID-19的住院成年患者中抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体的临床 评价。
下述临床研究是一项适应性、1/2/3期、随机、双盲、安慰剂对照的主要方案，用于评价mAb10933+mAb10987在患有COVID-19的住院成年患者中的疗效、安全性和耐受性。mAb10989的安全性、耐受性和疗效也将在本研究的1期部分中评价，以实现在其他临床环境中的进一步研究。
研究目标：下文阐述了研究的每一期的主要目标和次要目标。
主要目标：
1期
部分A
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987在减少SARS-CoV-2的病毒脱落方面的病毒学疗效
部分B
·评价与安慰剂相比，mAb10989的安全性和耐受性
·评价与安慰剂相比，mAb10989在减少SARS-CoV-2的病毒脱落方面的病毒学疗效
2期
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987在减少SARS-CoV-2的病毒脱落方面的病毒学疗效
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987在改善临床状态方面的临床疗效
3期
3期的主要目标是评价和确认与安慰剂相比，
mAb10933+mAb10987在改善临床状态方面的临床疗效。
次要目标：
1期
部分A
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的病毒学疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987在改善临床结果方面的临床疗效
·表征血清中mAb10933和mAb10987的药代动力学(PK)特征
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
部分B
·评价与安慰剂相比，mAb10989的病毒学疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10989在改善临床结果方面的临床疗效
·比较用不同样本类型(鼻咽、鼻腔和唾液)获得的定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)结果
·表征血清中mAb10989的PK特征
·评估mAb10989的免疫原性
2期
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的病毒学疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的临床疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·表征血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
3期
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的临床疗效
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·表征血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
研究设计：本研究是一项适应性、1/2/3期、随机、双盲、安慰剂对照的主要方案，用于评价mAb10933+mAb10987在患有COVID-19的住院成年患者中的疗效、安全性和耐受性。mAb10989的安全性、耐受性和疗效在本研究的1期部分中评价，以实现在其他临床环境中的进一步研究。在筛选时住院≤72小时的有资格的患者在随机化时基于疾病严重程度被招募到4个队列中的1个队列中。在独立数据监测委员会(IDMC)批准了1期哨点安全组后，开始2期，并在开始后与1期同时招募。一旦2期激活，1期继续招募直到完成，但2期招募不要求完成1期招募。
研究持续时间：本研究的1期部分持续达170天。本研究的2期部分持续达58天。本研究的3期部分持续达58天。
研究群体：为了评价住院
COVID-19患者谱中的潜在差异治疗效果，该研究在四个患有COVID-19的住院成人患者队列中进行和分析：队列1A(患有COVID-19症状但不需要补充供氧的患者)；队列1(低流量氧气补充的患者)；队列2(需要高强度氧气疗法但不需要机械通气的患者)；和队列3(需要机械通气的患者)。
队列—有资格的患者基于随机化时的疾病严重程度被招募到4个队列中的1个队列中：队列1A(有COVID-19症状但不需要补充供氧的患者)；队列1(经由鼻插管、简易面罩或其他类似装置的低流量氧气的O2饱和度>93％)；队列2(高强度氧气疗法*但不需要机械通气—*高强度氧气疗法被定义为使用氧气流速至少为10L/min的非再呼吸面罩；使用具有至少50％FiO2的高流量装置，或使用无创通气来治疗低氧血症)；和队列3(机械通气)。
样本量—本研究的1期部分仅包括来自队列1的多达100名患者：针对mAb10933+mAb10987的部分A：每组大约20名患者，3个治疗组共60名患者；针对mAb10989的部分B：每组大约20名患者，2个治疗组共40名患者。本研究的2期部分包括大约1560名患者：队列1A：每组大约130名患者，3个治疗组共390名患者；队列1：每组大约130名患者，3个治疗组共390名患者；队列2：每组大约130名患者，3个治疗组共390名患者；和队列3：每组大约130名患者，3个治疗组共390名患者。3期的样本量估计为大约1350名(3个队列中的每一个队列有3个治疗组，每组150名患者)。3期的样本量和患者群体的最终确定可能会发生变化，并且将在全面审查2期数据之后确定。
入选标准：患者必须符合以下标准才有资格入选研究：
1.提供(研究患者或法定代理人签署的)知情同意书；
2.在随机化时，男性或女性成人≥18岁(或国家法定成年年龄)；
3.在随机化前≤72小时进行了SARS-CoV-2阳性分子诊断检测(通过经验证的SARS-CoV-2 RT-PCR或其他分子诊断测定，使用适当的样本，诸如NP、鼻腔、口咽[OP]或唾液)，且对当前临床症状没有替代解释。在随机化前≤72小时进行的检测的阳性结果历史记录是可接受的；
4.具有与COVID-19一致的症状，发作在随机化前≤10天内；以及
5.因COVID-19病住院＜72小时，且在随机化时至少出现以下1种情况—符合一个以上标准的患者将被归类为受影响最严重的类别：
a.队列1A：有COVID-19症状但不需要补充供氧
b.队列1：经由鼻插管、简易面罩或其他类似装置在低流量氧气下维持O2饱和度>93％
c.队列2：无机械通气的高强度氧气疗法，其中高强度被定义为接受由以下装置中的1者递送的补充供氧：
-非再呼吸面罩(SpO2≤96％，同时接受至少10L/min的氧气流速)
-具有至少50％ FiO2的高流量装置(例如，AIRVOTM或OptiflowTM)
-无创通气机，包括持续气道正压通气(CPAP)，用于治疗低氧血症(不包括单独用于睡眠呼吸障碍)
d.队列3：机械通气。
排除标准：满足以下标准中的任何标准的患者将被排除在这项研究之外：
1.仅1期：患者在室内空气中维持O2饱和度>94％；
2.在研究者看来，筛选后不太可能存活>48小时；
3.接收体外膜肺氧合(ECMO)；
4.住院期间新发中风或癫痫；
5.因COVID-19而开始肾替代疗法；
6.在随机化时患有需要升压药的循环性休克(因镇静相关低血压或循环性休克以外的原因需要升压药的患者可能有资格入选本研究)；
7.在过去5个月内接受过恢复期血浆或IVIG或计划在研究期间接受任何适应症治疗的患者；
8.参与临床研究，包括任何双盲研究，在筛选访视前30天内评价研究药物，且研究药物半衰期少于5天(允许在当地护理标准或开放标签研究或同情使用方案的背景下，使用用于COVID-19治疗的瑞德西韦、羟氯喹或其他治疗(COVID-19恢复期血浆或IVIG除外)；
9.任何体检结果、疾病史和/或伴随药物，在研究的研究者看来，可能会混淆研究结果或因患者参与研究而对其造成额外风险；
10.对研究药物组分具有已知的过敏或超敏反应；
11.孕妇或母乳喂养妇女；或
12.不愿意在第一次治疗的初始剂量/开始之前、研究期间以及最后一个剂量后至少6个月内进行高效避孕的有生育能力的妇女(WOCBP)*或性活跃男性持续进行性行为。
针对妇女的高效避孕措施包括：
稳定使用组合的(含雌性激素和孕激素的)激素避孕(口服、阴道内、经皮)或仅含孕激素的激素避孕(口服、可注射、可植入)以及在筛选前抑制开始2个或更多个月经周期的排卵
·宫内节育器(IUD)
·宫内激素释放系统(IUS)
·双侧输卵管结扎
·输精管切除术后的伴侣
和/或
·性禁欲
有WOCBP伴侣的男性研究参与者被要求使用避孕套，除非他们进行输精管结扎
或性禁欲
*WOCBP被定义为在初潮后直到绝经后仍具有生育能力的妇女，除非永久不育。绝经后状态被定义为12个月没有月经而没有其他医疗原因。绝经后范围内的高促卵泡激素(FSH)水平可用于确认未使用激素避孕或激素替代疗法的女性的绝经后状态。然而，在没有12个月的闭经的情况下，单次FSH测量不足以确定绝经后状态的发生。上述定义根据临床试验促进组(CTFG)指南。文件记录有子宫切除或输卵管结扎术的妇女无需进行妊娠测试和避孕。永久性绝育方法包括子宫切除术、双侧输卵管切除术和双侧卵巢切除术。
§定期禁欲(日历、排卵期、排卵后方法)、戒断(性交中断)、仅用杀精子剂和哺乳性闭经方法(LAM)是不可接受的避孕方法。女用避孕套和男用避孕套不应一起使用。
研究治疗：在1期部分A中，患者接受共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法2.4g(1.2g mAb10933加1.2g mAb10987)静脉内(IV)单剂量，共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法8.0g(4.0g mAb10933加4.0g mAb10987)IV单剂量，或安慰剂IV单剂量。在I期部分B中，患者接受mAb10989单一疗法1.2g IV单剂量或安慰剂IV单剂量。在2期中，患者接受共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法2.4g(1.2g mAb10933加1.2g mAb10987)IV单剂量，共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法8.0g(4.0g mAb10933加4.0g mAb10987)IV单剂量，或安慰剂IV单剂量。在审查2期数据之后确定3期的治疗组。
终点：针对每期指定主要终点、次要终点和探索性终点，如下文所定义。
主要终点
1期(仅队列1)
1期的主要终点(部分A和部分B)为：
·到第169天出现治疗期严重不良事件(SAE)的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如通过定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)在鼻咽(NP)拭子样本中测量的(病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化将针对每个患者使用梯形法则计算，作为每个时间点自基线变化的曲线下面积除以观察期的时间间隔)。
2期
每个队列中2期的主要终点为：
队列1A和队列1
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在鼻咽(NP)拭子中通过RT-qPCR测量的
·从第1天(随机化时间)到第8天，使用7分顺序量表，临床状态改善至少1分的患者比例
队列2和队列3
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在NP拭子中通过RT-qPCR测量的
·从第1天(随机化时间)到第22天，使用7分顺序量表，临床状态改善至少1分的患者比例
3期
每个队列中3期的主要终点为：
队列1A和队列1
·从第1天(随机化时间)到第8天，使用7分顺序量表，临床状态改善至少1分的患者比例
队列2和队列3
·从第1天(随机化时间)到第22天，使用7分顺序量表，临床状态改善至少1分的患者比例
在审查2期数据之后，将最终确定3期的患者群体(队列1A、队列1、队列2和/或队列3)和主要临床疗效终点。
次要终点
1期(仅队列1)
1期的次要终点为：
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在唾液样本中通过RT-qPCR测量的
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在鼻腔样本中通过RT-qPCR测量的
·所有检测样本中RT-qPCR呈阴性并且随后任何检测样本(NP拭子、唾液或鼻腔拭子)中RT-qPCR没有变成阳性的时间
·每次访视时SARS-CoV-2病毒脱落自基线到第29天的变化，如在NP拭子中通过RT-qPCR测量的
·每次访视时SARS-CoV-2病毒脱落自基线到第29天的变化，如在唾液样本中通过RT-qPCR测量的
·每次访视时SARS-CoV-2病毒脱落自基线到第29天的变化，如在鼻腔拭子中通过RT-qPCR测量的
·不同样本类型(NP、鼻腔和唾液)间RT-qPCR结果随时间的相关性和一致性
·病毒脱落自基线(第1天)到基线后研究日(例如，第5天、第7天、第15天和第29天)的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，从第1天(随机化时间)到第8天，使用7分顺序量表，临床状态至少改善1分的患者比例
·从第1天(随机化时间)到第8天，使用7分顺序量表，临床状态改善至少2分的患者比例
·从第1天(随机化时间)到第29天或出院时，使用7分顺序量表，临床状态改善至少1分的患者比例
·从第1天(随机化时间)到第29天或出院时，使用7分顺序量表，临床状态改善至少2分的患者比例
·到第29天不再需要补充供氧的时间
·截至第29天的补充供氧使用的天数
·截至第29天或出院时开始高强度氧气疗法的患者比例
·截至第29天的高强度氧气疗法的天数
·截至第29天或出院时开始机械通气的患者比例
·截至第29天的机械通气的天数
·截至第29天无通气机的天数
·截至第29天的住院的天数
·到研究结束时出院后再次入院的患者比例
·截至第29天入住重症监护室(ICU)的患者比例
·截至第29天ICU停留天数
·截至第29天的全因死亡率
·到研究结束时的全因死亡率
·总体生存期
·到第29天具有治疗期SAE的患者比例
·血清中mAb10987、mAb10933和mAb10989的浓度以及对应PK参数
·免疫原性，如通过针对mAb10933、mAb10987和mAb10989的抗药物抗体(ADA)测量的
2期
2期的次要终点为：
仅队列1A和队列1
·从第1天(随机化时间)到第8天，使用7分顺序量表，临床状态改善至少2分的患者比例
仅队列2和队列3
·从第1天(随机化时间)到第22天，使用7分顺序量表，临床状态改善至少2分的患者比例
队列1A、队列1、队列2和队列3
·NP拭子中RT-qPCR呈阴性且随后RT-qPCR没有变成阳性的时间
·每次访视时病毒脱落自基线到第29天的变化，如在NP拭子中通过RT-qPCR测量的
·病毒脱落自基线(第1天)到基线后研究日(例如，第5天、第7天、第15天和第29天)的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)
·从第1天(随机化时间)到第29天或出院时，使用7分顺序量表，临床状态改善至少1分的患者比例
·从第1天(随机化时间)到第29天或出院时，使用7分顺序量表，临床状态改善至少2分的患者比例
·到第29天不再需要补充供氧的时间(仅队列1、队列2和队列3)
·截至第29天的补充供氧使用的天数
·截至第29天开始高强度氧气疗法的患者比例
·截至第29天的高强度氧气疗法的天数
·截至第29天或出院时开始机械通气的患者比例
·截至第29天的机械通气的天数
·截至第29天无通气机的天数
·截至第29天的住院的天数
·到研究结束时出院后再次入院的患者比例
·截至第29天入住ICU的患者比例
·截至第29天ICU停留天数
·截至第29天的全因死亡率
·到研究结束时的全因死亡率
·总体生存期
·到第29天具有治疗期SAE的患者比例
·到第57天具有治疗期SAE的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
·血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
·免疫原性，如通过针对mAb10933和mAb10987的ADA测量的
3期
在审查完成2期数据之后，最终确定3期的患者群体(队列1A、队列1、队列2和/或队列3)和次要临床疗效终点。
3期的其他可能的次要终点包括：
·到第57天具有治疗期SAE的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
·血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
·免疫原性，如通过针对mAb10933和mAb10987的ADA测量的
探索性终点
探索性终点包括：
·到第29天治疗失败的患者中编码SARS-CoV-2S蛋白的基因发生突变的比例
·每次访视时中性粒细胞-淋巴细胞比率(NLR)到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时D-二聚体到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时铁蛋白到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时C反应蛋白(CRP)到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时乳酸脱氢酶(LDH)到第29天的变化和百分比变化
程序和评估：疗效—鼻咽(所有期)、唾液(仅1期)和/或鼻拭子(仅1期)用于SARS-CoV-2 RT-PCR，以及临床和氧气状态；安全性—记录了严重不良事件和特别关注的不良事件。使用鼻腔拭子、唾液样本和(在1期中)鼻咽样本从患者收集分泌物以确定SARS-CoV-2病毒的存在或不存在，并测量病毒脱落。样本用于RT-qPCR分析。样本还可用于探索性病毒RNA测序(鼻咽、鼻腔拭子、唾液)和/或病毒培养(鼻咽、鼻腔拭子)。
统计计划：
1期—样本量为1期部分A的60名患者和部分B的40名患者的总和。样本量允许初步估计治疗组相对于安慰剂的SAE、AESI和3或4级TEAE的发生率。
1期的主要疗效终点是NP拭子样本中病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)。假设标准偏差为2.1log10拷贝/mL，使用双侧显著性为α＝0.05的双样本t检验，在1期中，每组20名患者的样本量应具有至少80％的影响力检测到治疗组和安慰剂组之间存在1.91log10拷贝/mL的差异。
2期—2期的样本量基于NP拭子样本中病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)。假设约23％的退出率(包括基线时的缺失数据)和2.1log10拷贝/mL的标准偏差，使用双侧显著性为α＝0.05的双样本t检验，在3个队列中的每一个队列中的3个治疗组中，每组130名患者(即每组100名患者有可用数据)的样本量应具有80％的影响力检测到队列中每个治疗组和安慰剂组之间存在0.84log10拷贝/mL的差异。如果假设标准偏差为3.8log10拷贝/mL，则在80％的影响力下可检测的差异为1.51log10拷贝/mL。
对于从基线到第22天临床状态改善至少1分的患者比例的临床终点，对于样本量为每组100名(假设退出率约为23％，每组130人)，治疗组和安慰剂组之间的最小可检测差异(MDD)基于等比卡方检验将如下：
·在队列1A和1中，假设安慰剂组的应答率为51％，MDD将为13.7％(即抗SARS-CoV-2S蛋白mAb为64.7％，安慰剂为51％)。安慰剂组的假设应答率与观察到的瑞德西韦的应答率相似。
在队列2和3中，假设安慰剂组的应答率为57.1％，MDD将为13.3％(即抗SARS-CoV-2S蛋白mAb为70.4％，安慰剂为57.1％)。安慰剂组的假设应答率与沙利鲁单抗COVID-19 2/3期研究(6R88-COV-2040)中观察到的应答率相似，该研究中的进展人群与队列2和3相似。
3期—该研究将继续招募另外的患者无缝地进入该研究的3期部分，直到基于完整的2期数据分析对3期的主要终点和最终样本量做出适应性决定。该研究的3期部分的初始样本量估计为总共1350名患者(3个队列中的3个治疗组，每组150名)。例如，对于队列3，450名患者的样本量(每组150名患者)将使用卡方检验提供90％的影响力，以检测第22天存活和脱离机械通气的患者比例的15.9％的治疗差异，假设安慰剂组的比率为68.2％。
结果—在需要低流量氧气的住院COVID-19患者中进行的抗体混合物卡西瑞单抗和伊德维单抗(分别为mAb10933和mAb10987)的1/2/3期临床试验(参见图19)的分析旨在关注尚未对SARS-CoV-2产生自身免疫应答的患者(即，在基线时没有抗体：血清阴性)，因为证据(参见实施例2)表明这些患者处于更高的风险中。另外，在用安慰剂治疗的受试者中，基线时产生免疫应答的患者(血清阳性患者)与基线时未产生免疫应答的患者(血清阴性患者)相比，基线时的病毒水平低得多，并且即使不进行治疗，也能更快地达到低于定量下限(“LLQ”)的病毒载量。参见图16。另外，在接受低流量补充供氧的COVID-19住院患者中，与血清阴性患者相比，血清阳性患者具有较低的死亡或机械通气累积发生率。参见图17。在队列1中，基线时血清阴性或基线时病毒载量高的患者临床结果更差。参见图18。该初步分析的主要临床目标是确定这些患者是否有足够的疗效来保证继续进行试验(即无效性分析)。结果通过了无效性分析(p＜0.3单侧)，因为用抗体混合物治疗的血清阴性患者具有较低的死亡或接受机械通气风险(风险比(HR)：0.78；80％ CI：0.51-1.2)。基于事后分析，这种益处是由治疗后一周开始的结果驱动的，此时死亡或接受机械通气的风险在抗体混合物治疗中减少了大约一半。
对队列1在全分析集(FAS；随机化和给药的患者)和修改的全分析集(mFAS；在基线时经由鼻咽定性检测进行的SARS-CoV-2检测呈阳性的患者)中分析了血清阴性的发生率，并且血清阴性的发生率在FAS组和mFAS组中是相似的。参见图20。血清阴性患者(n＝217)比那些在随机化时已经产生了自身的SARS-CoV-2抗体(血清阳性)的患者具有高得多的病毒载量。参见图16。正如假设的那样，在没有产生自身免疫应答(基线时血清阴性)的患者中，抗体混合物比安慰剂具有更强的抗病毒效果，与安慰剂相比，用抗体混合物治疗的患者具有更快的病毒减少，并且在所有基线病毒载量阈值上，该混合物比安慰剂更快地减少病毒载量。参见图21至图24。在血清阴性患者中，到第7天抗体混合物将时间加权平均每日病毒载量降低了-0.54log10拷贝/mL，并且到第11天降低了-0.63log10拷贝/mL(组合剂量的名义p＝0.002)。在第5天，与安慰剂相比，相对减少了-1.1log10拷贝(组合剂量的名义p＝0.002)。在血清阳性患者(n＝270)中，抗体混合物的临床和病毒学益处有限(临床终点HR：0.98；对于组合剂量，第7天的时间加权平均病毒载量减少-0.20log10拷贝/mL)。用混合物治疗在住院患者和门诊患者中导致类似的病毒载量减少，并且在血清阴性患者中，在用混合物治疗的患者和接受安慰剂的患者之间观察到最显著的差异，这与实施例2的数据一致(图25至图28)。
临床和病毒学分析包括来自使用低流量氧气(定义为通过鼻插管、简易面罩或类似装置维持氧饱和度>93％)的住院患者的数据，包括217名进入试验时血清阴性的患者和270名血清阳性的患者；尽管血清阴性患者不到试验群体的一半，但基于安慰剂比率，在不存在抗体混合物治疗的情况下，他们大约占死亡人数的三分之二。患者随机接受抗体混合物(8000mg高剂量或2400mg低剂量)或安慰剂，以及标准护理疗法，其中67％接受瑞德西韦，并且74％接受全身皮质类固醇。对于高剂量和低剂量的抗体混合物，观察到相似的临床和病毒学疗效。
两种抗体混合物剂量均耐受良好。在整个试验群体中，严重不良事件的发生率高剂量组为21％，低剂量组为20％，并且安慰剂组为24％。输注反应在高剂量抗体混合物中更常见(2.7％高剂量，0.9％低剂量，1.4％安慰剂)，并且存在两例因输注相关反应而停药，这两例均发生在高剂量组。
实施例2.患有COVID-19的非卧床患者中抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体的临床评 价。
下述临床研究是一项适应性、1/2/3期、随机、双盲、安慰剂对照的主要方案，旨在评价mAb10933+mAb10987组合疗法(统称为REGN-COV2或REGEN-COV)或mAb10989单药疗法在患有COVID-19或无症状SARS-CoV-2感染的成年门诊患者(即非卧床患者)中的疗效、安全性和耐受性。
研究目标：下文阐述了研究的每一期的主要目标和次要目标。
示例性用途：基于该实施例的结果(包括中期结果)可被授权的示例性用途如下：
该示例性用途适用于静脉内输注REGEN-COV，其中mAb10933和mAb10987一起施用。应在SARS-CoV-2病毒检测呈阳性后尽快施用REGEN-COV，并在12岁及以上、体重至少40kg的成人和儿童患者症状发作的7天内使用，这些患者具有发展为严重COVID-19和/或住院的高风险。COVID-19疾病可以从非常轻度(包括一些未报告的症状)到严重的范围，包括导致死亡的疾病。尽管迄今为止的信息表明，大多数COVID-19疾病是轻度的，但严重的疾病可能发生，并且可能导致其他医学病症中的一些医学病症变得更差。例如患有严重、长期(慢性)医学病症(如心脏病、肺病和糖尿病)以及包括肥胖的其他病症的所有年龄段的人们，似乎都有更高的风险因COVID-19而住院。无论是否患有其他病症，年龄越大，人们因COVID-19而住院的风险也越高。
该示例性授权用于使用REGEN-COV治疗成人和儿童患者的轻度至中度冠状病毒疾病2019(COVID-19)，这些患者的直接SARS-CoV-2病毒检测结果为阳性，年龄为12岁及以上，体重至少为40kg，并且具有发展为严重COVID-19和/或住院的高风险。
以下医学病症或其他因素可能会使成人和
儿童患者(年龄12岁至17岁，并且体重至少40kg)处于发展
为严重COVID-19的较高风险中：
ο较大的年龄(例如年龄≥65岁)
ο肥胖或超重(例如，BMI>25kg/m2的成人，或者如果年龄为12岁至17岁，则基于CDC生长图表，其年龄和性别的BMI≥85％，https://www.cdc.gov/growthcharts/clinical_charts.htm)
ο怀孕
ο慢性肾病
ο糖尿病
ο免疫抑制疾病或免疫抑制治疗
ο心血管疾病(包括先天性心脏病)或高血压
ο慢性肺病(例如慢性阻塞性肺病、哮喘[中度到重度]、间质性肺病、囊性纤维化和肺动脉高血压)
ο镰形细胞病
ο神经发育障碍(例如，大脑性麻痹)或其他导致医学复杂性的症状(例如，遗传或代谢综合征和严重的先天性异常)
ο具有医疗相关的技术依赖性(例如，气管造口术、胃造口或正压通气(与COVID-19无关))
其他医学病症或因素(例如，种族或民族)也可能使个体患者处于进展为严重COVID-19的高风险中，并且EUA下的REGEN-COV授权不限于上述条件。有关医学病症和与进展为严重COVID-19风险增加相关的因素的更多信息，参见CDC网站：www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/need-extra-precautions/people-with-medical-conditions.html。医疗服务提供者应该考虑个体患者的效益风险。
授权用途的限制：
·在该示例性用途中，REGEN-COV不应用于以下患者中：
-因COVID-19而住院，或
-因COVID-19需要氧气疗法，或
-因潜在的非COVID-19相关的共病而接受长期氧气疗法的患者中的COVID-19，需要增加基线氧气流速。
然而，替代的授权用途考虑将REGEN-COV用于以下患者：因COVID-19而住院；和/或因COVID-19需要氧气疗法；和/或因潜在的非COVID-19相关的共病而接受长期氧气疗法的患者中的COVID-19，需要增加基线氧气流速。
主要目标：
1期
部分A
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987在减少SARS-CoV-2病毒脱落方面的病毒学疗效
部分B
·评价与安慰剂相比，mAb10989的安全性和耐受性
·评价与安慰剂相比，mAb10989在减少SARS-CoV-2病毒脱落方面的病毒学疗效
2期
评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987和mAb10989在减少SARS-CoV-2病毒脱落方面的病毒学疗效。
3期
评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987和mAb10989的临床疗效。
次要目标：
1期
部分A
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的病毒学疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的临床疗效
·比较用不同样本类型(鼻咽[NP]、鼻腔和唾液)获得的定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)结果
·表征血清中mAb10933和mAb10987的药代动力学(PK)特征
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
部分B
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的病毒学疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10989的临床疗效
·比较用不同样本类型(NP、鼻腔和唾液)获得的RT-qPCR结果
·表征血清中mAb10989的PK特征
·评估mAb10989的免疫原性
2期
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的病毒学疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987和mAb10989的临床疗效
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987和mAb10989的安全性和耐受性
·表征血清中mAb10933、mAb10987和mAb10989的浓度
·评估mAb10933、mAb10987和mAb10989的免疫原性
3期
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987和mAb10989在减少SARS-CoV-2病毒脱落方面的病毒学疗效
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987和mAb10989的安全性和耐受性
·表征血清中mAb10933、mAb10987和mAb10989的浓度
·评估mAb10933、mAb10987和mAb10989的免疫原性
研究设计：这是一项适应性、1/2/3期、随机、双盲、安慰剂对照的主要方案，旨在评价mAb10933+mAb10987组合疗法以及mAb10989单药疗法在患有COVID-19或无症状SARS-CoV-2感染的成年门诊患者(即非卧床患者)中的疗效、安全性和耐受性。为了有资格，成年患者必须有实验室确认的SARS-CoV-2和COVID-19症状，但必须以前没有住院或目前未住院。在1期中，仅招募患有COVID-19的患者。在2期中，将有症状患者和无症状患者招募到单独的队列中。
1期
在1期部分A中，将随机化限于mAb10933+mAb10987低剂量，mAb10933+mAb10987高剂量和安慰剂。在部分B中，将随机化限于mAb10989和安慰剂。在第1天，将部分A中的有资格的患者随机化到单次静脉内(IV)施用mAb10933+mAb10987(低剂量)、mAb10933+mAb10987(高剂量)、mAb10989或安慰剂。
然后在给药后的前48小时隔离患者，在此期间密切监测严重不良事件(SAE)和特别关注的不良事件(AESI)。在第3天，如果医学上合适，则患者可在完成当天的评估后回家。在第7天完成评估之后，如果医学上合适，则所有患者都被送回家。在整个研究中，收集安全性信息(SAE和AESI)，以及任何与COVID-19相关的医学护理访视的相关信息。收集鼻咽(NP拭子)、鼻腔拭子和唾液样本以评估病毒脱落。该研究在第29天结束，当时患者亲自进行了最终评估，包括NP拭子、鼻腔拭子和/或唾液样本采集(如可行)，并抽血进行PK、抗药物抗体(ADA)和探索性分析。
2期
在第1天，将有资格的患者以1:1:1:1随机化到单剂量mAb10933+mAb10987(低剂量)、mAb10933+mAb10987(高剂量)、mAb10989或安慰剂。在输注研究药物之后，观察患者2小时，并且如果未观察到SAE或AESI，则将其送回家。在最初的2周内，每隔一天收集一次鼻咽拭子，之后每周收集两次。定期采集血液样本。在整个研究中，记录了与COVID-19相关的治疗期SAE、AESI和医疗护理信息。在第29天，患者进行了最终评估，包括鼻咽拭子采集并抽血以进行PK、ADA和探索性分析。
研究持续时间：本研究的持续时间为每个患者30天。
研究群体：本研究招募了SARS-CoV-2诊断检测呈阳性的成年非住院患者。
样本量—1期，招募直到100名患者被随机化。2期，招募直到大约1300名患者被随机化。据估计，3期将需要704名患者(每组176名患者)。
入选标准：患者必须符合以下标准才有资格入选研究：
1.在随机化时，男性或女性是否≥18岁(或国家法定成年年龄)；
2.在随机化前≤72小时进行了SARS-CoV-2阳性分子诊断检测(通过经验证的SARS-CoV-2 RT-PCR或其他分子诊断测定，使用适当的样本，诸如NP、鼻腔、口咽[OP]或唾液)。在随机化前≤72小时进行的检测的阳性结果历史记录是可接受的；
3.符合以下两个标准中的一者：
a.有症状队列(所有期)：具有研究者确定的符合COVID-19的症状，发作在随机化前≤7天内
或
b.无症状队列(2期)：符合以下所有：
·没有符合COVID-19的症状(如研究者所确定)，在随机化前<2个月内的任何时间发生
·在随机化前>7天收集的样本的SARS-CoV-2检测结果未呈阳性
·在随机化前>14天，与确诊为COVID-19或确诊为SARS-COV-2检测阳性的个人没有已知的接触(任何持续时间)
4.保持室内空气中O2饱和度≥93％；
5.愿意并且能够提供研究患者或法定代理人签署的知情同意书；以及
6.在出院后愿意并且能够遵守研究程序，包括提供用于病毒脱落检测的样本。
排除标准：满足以下标准中的任何标准的患者将被排除在这项研究之外：
1.在随机化前因COVID-19已入院，或在随机化时住院(住院患者)；
2.在筛选访视前的3个月内或少于研究产品的5个半衰期内(以较长者为准)，已经或正在参与评价COVID-19恢复期血浆、抗SARS-CoV-2的单克隆抗体或静脉注射免疫球蛋白(IVIG)的临床研究；
3.在筛选访视前的过去30天或少于研究药品的5个半衰期内(以较长者为准)，以前、现在或计划将来使用COVID-19恢复期血浆、抗SARS-CoV-2的mAb、静脉注射免疫球蛋白(IVIG)(任何适应症)、全身性皮质类固醇(任何适应症)或任何紧急使用授权(EUA)批准的治疗；
4.对研究药物组分具有已知的过敏或超敏反应；
5.已出院或计划出院至检疫中心；
6.孕妇或母乳喂养妇女；或
7.不愿意在第一次治疗的初始剂量/开始之前、研究期间以及最后一个剂量后至少6个月内进行高效避孕的有生育能力的妇女(WOCBP)*或性活跃男性持续进行性行为。
包括输注相关反应的超敏体征和症状可包括：发热、发冷、恶心、头痛、支气管痉挛、低血压、血管性水肿、喉咙刺激、皮疹(包括荨麻疹)、瘙痒、肌痛和头晕。
针对妇女的高效避孕措施包括：
·稳定使用组合的(含雌性激素和孕激素的)激素避孕(口服、阴道内、经皮)或仅含孕激素的激素避孕(口服、可注射、可植入)以及在筛选前抑制开始2个或更多个月经周期的排卵，
·宫内节育器(IUD)，
·宫内激素释放系统(IUS)，
·双侧输卵管结扎，
·输精管切除术后的伴侣
和/或
·性禁欲
有WOCBP伴侣的男性研究参与者被要求使用避孕套，除非他们进行输精管结扎
或性禁欲
*WOCBP被定义为在初潮后直到绝经后仍具有生育能力的妇女，除非永久不育。绝经后状态被定义为12个月没有月经而没有其他医疗原因。绝经后范围内的高促卵泡激素(FSH)水平可用于确认未使用激素避孕或激素替代疗法的女性的绝经后状态。然而，在没有12个月的闭经的情况下，单次FSH测量不足以确定绝经后状态的发生。上述定义根据临床试验促进组(CTFG)指南。文件记录有子宫切除或输卵管结扎术的妇女无需进行妊娠测试和避孕。
永久性绝育方法包括子宫切除术、双侧输卵管切除术和双侧卵巢切除术。
研究治疗：共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法，2.4g(mAb10933和mAb10987各自1.2g)IV单剂量，共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法，8.0g(mAb10933和mAb10987各自4.0g)IV单剂量，mAb10989单一疗法，1.2g IV单剂量，或安慰剂IV单剂量。
终点：针对每期指定主要终点、次要终点和探索性终点，如下文所定义。
主要终点
1期
1期的主要终点为：
部分A和B
·到第29天出现治疗期严重不良事件(SAE)的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如通过定量逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)在鼻咽(NP)拭子样本中测量的。
2期
2期的主要终点是病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在NP拭子样本中通过RT-qPCR测量的。
3期
3期的主要终点是到第29天有≥1次COVID-19医疗护理访视的患者比例。
次要终点
1期
病毒学
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在唾液样本中通过RT-qPCR测量的
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在鼻腔拭子样本中通过RT-qPCR测量的
·所有检测样本中RT-qPCR呈阴性并且随后任何检测样本(NP拭子、唾液或鼻腔拭子)中RT-qPCR没有变成阳性的时间
·每次访视时SARS-CoV-2病毒脱落自基线到第29天的变化，如在NP拭子中通过RT-qPCR测量的
·每次访视时SARS-CoV-2病毒脱落自基线到第29天的变化，如在唾液样本中通过RT-qPCR测量的
·每次访视时SARS-CoV-2病毒脱落自基线到第29天的变化，如在鼻腔拭子中通过RT-qPCR测量的
·不同样本类型(NP、鼻腔和唾液)间RT-qPCR结果的相关性和一致性
·病毒脱落自基线(第1天)到基线后研究日(例如，第5天、第7天、第15天和第29天)的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)
临床
·到第29天有≥1次COVID-19相关医疗护理访视的患者比例；COVID-19相关医疗护理访视将被定义为：主要因COVID-19住院，或主要因COVID-19而门诊访视(包括ER、UCC、医生办公室或远程医疗的访视)的访视
·到第29天有≥2次COVID-19相关医疗护理访视的患者比例
·到第29天COVID-19相关医疗护理访视的总数
·截至第29天因COVID-19而入住医院的患者比例
·截至第29天因COVID-19有≥1次门诊或远程医疗访视的患者比例
PK/ADA
·血清中mAb10933、mAb10987和mAb10989的浓度以及对应PK参数
·如通过针对mAb10933、mAb10987和mAb10989的抗药物抗体(ADA)测量的免疫原性
2期
2期的次要终点为：
病毒学
·NP拭子中RT-qPCR呈阴性且随后RT-qPCR没有变成阳性的时间
·每次访视时病毒脱落自基线到第29天的变化，如在NP拭子中通过RT-qPCR测量的
·病毒脱落自基线(第1天)到基线后研究日(例如，第5天、第7天、第15天和第29天)的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)
临床
·到第29天有≥1次COVID-19相关医疗护理访视的患者比例
·到第29天有≥2次COVID-19相关医疗护理访视的患者比例
·到第29天COVID-19相关医疗护理访视的总数
·截至第29天因COVID-19而入住医院的患者比例
·截至第29天因COVID-19而入住ICU的患者比例
·截至第29天因COVID-19有≥1次门诊或远程医疗访视的患者比例
·截至第29天因COVID-19需要机械通气的患者比例
·因COVID-19而住院的天数
·到第29天全因死亡的患者比例
·到第29天具有治疗期SAE的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
·COVID-19任何症状首次发作的时间
·与COVID-19症状一致的持续时间
PK/ADA
·血清中mAb10933、mAb10987和mAb10989的浓度
·如通过针对mAb10933、mAb10987和mAb10989的抗药物抗体(ADA)测量的免疫原性
3期
3期的次要终点为：
病毒学
·病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)，如在NP拭子中通过RT-qPCR测量的
·NP拭子中RT-qPCR呈阴性且随后RT-qPCR没有变成阳性的时间
·每次访视时SARS-CoV-2病毒脱落自基线到第29天的变化，如在NP拭子中通过RT-qPCR测量的
·病毒脱落自基线(第1天)到基线后研究日(例如，第5天、第7天、第15天和第29天)的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)
临床
·到第29天有≥2次COVID-19相关医疗护理访视的患者比例
·到第29天COVID-19相关医疗护理访视的总数
·截至第29天因COVID-19有≥1次门诊或远程医疗访视的患者比例
·截至第29天因COVID-19而入住医院的患者比例
·截至第29天因COVID-19而入住ICU的患者比例
·截至第29天因COVID-19需要机械通气的患者比例
·因COVID-19而住院的天数
·到第29天全因死亡的患者比例
·到第29天具有治疗期SAE的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
PK/ADA
·血清中mAb10933、mAb10987和mAb10989的浓度
·如通过针对mAb10933、mAb10987和mAb10989的抗药物抗体测量的免疫原性
探索性终点
1期和2期的探索性终点为：
·到第29天治疗失败的患者中编码SARS-CoV-2S蛋白的基因发生突变的比例
·每次访视时中性粒细胞-淋巴细胞比率(NLR)到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时D-二聚体到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时铁蛋白到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时C反应蛋白(CRP)到第29天的变化和百分比变化
·每次访视时乳酸脱氢酶(LDH)到第29天的变化和百分比变化
·SE-C19条目分数随时间的变化
·PGIS分数随时间的变化
·在第29天的PGIC分数
·截至第29天因COVID-19而入住ICU的患者比例(仅1期)
·截至第29天因COVID-19需要机械通气的患者比例
程序和评估：疗效—鼻咽拭子(所有期)、鼻腔拭子(仅1期)和/或唾液样本(仅1期)用于SARS-CoV-2 RT-qPCR，以及医疗护理COVID-19访视的细节；安全性—记录严重不良事件和特别关注的不良事件、安全实验室的血液采集和生命体征。使用鼻腔拭子和唾液样本从患者收集分泌物以确定SARS-CoV-2病毒的存在或不存在，并测量病毒脱落。
统计计划：
主要疗效分析—1期和2期的主要疗效变量是病毒脱落自基线(第1天)到第22天的时间加权平均变化，如在NP拭子样本中通过RT-qPCR测量的。对主要假设的估计是抗SSARS-CoV-2mAb治疗中的每一者和安慰剂之间对FAS中主要疗效变量的均值差异。基于观察到的数据，使用梯形法则计算主要疗效变量，并使用协方差分析(ANCOVA)模型将治疗组和随机分层变量作为固定效应并将基线病毒脱落作为协变量进行分析。对于2期，分别对每个队列(有症状和无症状)以及两个队列的组合进行分析。每个治疗组的病毒脱落自基线时间加权平均均值变化的最小二乘均值估计值，以及每个抗刺突mAb治疗组和安慰剂之间的差异(在2期，分别针对每个队列和两个队列的组合)，与对应p值、标准误差和相关的95％置信区间一起显示。3期主要疗效变量是由于COVID-19症状和体征恶化而接受医疗护理访视的患者比例，并使用双侧0.05水平的分层Cochran-Mantel-Haenszel检验在组间进行比较。治疗差异的P值和95％置信区间如下所示。
安全性分析—治疗组列出并总结了安全性数据，包括严重不良事件和特别关注的不良事件、生命体征和实验室检测。
结果—上述无缝1/2/3期试验显示，当用mAb10933和mAb10987(REGN-COV-2)组合治疗时，患有COVID-19的非住院患者的SARS-CoV-2病毒载量和缓解症状的时间显著减少。REGEN-COV还显著减少了COVID-19相关医疗护理访视。这项随机双盲试验测量了在常规标准护理中加入REGEN-COV的效果，并与在标准护理中加入安慰剂进行了比较。
1/2期部分的最终分析包括799名患者：275名(第1组)和524名(第2组)。患者被随机化(1:1:1)到安慰剂组、2.4g mAb10933+mAb10987抗体化合物(也称为REGEN-COV)或8.0gREGEN-COV，并在基线时对针对SARS-CoV-2的内源性免疫应答进行表征(血清抗体阳性/阴性)。对基线RT-qPCR结果呈阳性的患者进行疗效评估；在所有患者中评估安全性。对第2组的病毒学终点进行了预先指定的层级分析，以确认之前报告的第1组的描述性分析。在第1+2组中评估了到第29天有≥1次COVID-19相关医疗护理访视(MAV)的患者比例。
到第7天，在基线病毒载量>107拷贝/mL(预先指定的主要终点)的患者中，REGEN-COV(组合的2.4g+8.0g剂量组)的病毒载量(log10拷贝/mL)的时间加权平均减少量显著高于安慰剂：-0.68(95％ CI，-0.94至-0.41；P<0.0001)。在所有基线病毒载量中，这种变化在血清抗体阴性患者中为-0.73(P<0.0001)，并且在整个群体中为-0.36(P＝0.0003)。有≥1次COVID-19相关MAV的患者比例REGEN-COV为2.8％(12/434)，安慰剂组为6.5％(15/231)(P＝0.024；相对风险降低率＝57％)，具有≥1种住院风险因素的患者(72％)或血清抗体阴性的患者(65％)MAV的相对风险降低率更大。各组间的不良事件相似。
试验设计总结：患者被随机分配(1:1:1)接受安慰剂、2.4g REGEN-COV(卡西瑞单抗和伊德维单抗各自1.2g)或8.0g REGEN-COV(卡西瑞单抗和伊德维单抗各自4.0g)(图5)。为期29天的2期试验包括筛选/基线期(第-1天至第1天)、随访期(第2天至第25天)和研究结束访视(第29天)。该试验的1期和2期部分是相同的，除了1期的额外药代动力学分析。
患者：有资格的患者年龄≥18岁且未住院，确诊的SARS-CoV-2阳性鼻咽(NP)PCR检测结果≤72小时，并且症状发作在随机化前≤7天内。按国家和是否存在≥1种严重COVID-19风险因素进行随机化分层：年龄>50岁、肥胖(BMI>30)、免疫抑制和慢性心血管、代谢、肝脏、肾脏或肺疾病。评估所有患者是否存在抗SARS-CoV-2抗体：抗刺突[S1]IgA、抗刺突[S1]IgG和抗核衣壳IgG。因为这些结果在随机化时不可用，所以患者接受随机化而不考虑他们的基线血清抗体状态，然后分组为血清抗体阴性(如果所有可用的检测都是阴性)、血清抗体阳性(如果任何检测都是阳性)或未知状态(缺失或不确定的结果)。以下表5A中示出了患者的人口统计学和基线医疗特征。
表5A.人口统计学和基线医学特征*(N＝799；全分析集)
SD标准偏差
*正负值是平均值±SD。由于四舍五入，因此百分比总和可能不等于100。IQR表示四分位数范围，并且RT-PCR表示逆转录聚合酶链反应。
§肥胖的定义是身体质量指数大于30。
干预：在基线时(第1天)，静脉注射mAb10933(卡西瑞单抗)和mAb10987(伊德维抗体)(稀释在250mL生理盐水溶液中用于共同施用)或生理盐水安慰剂，持续1小时。
终点
主要病毒学终点和两个关键的次要临床终点在1期+2期(统称为1/2期)分析中预先指定，并按层级进行检验，如表5B所示。主要病毒学终点被定义为病毒载量自基线(第1天)到第7天的时间加权平均变化(log10拷贝/毫升)。关键次要临床终点是到第29天有至少一次COVID-19相关医疗护理访视(MAV)的患者比例，以及有至少一次COVID-19相关MAV(仅包括住院或急诊室(ER)就诊或紧急护理访视)的患者比例。MAV被定义为经研究者确认
与COVID-19相关的住院或ER、紧急护理或医师办公室/远程医疗访视。
表5B.2期病毒学和临床终点的初步分析
mFAS，修改的全分析集；MAV，医疗护理访视
试验1/2期部分的安全性终点包括在观察期期间发生或恶化的不良事件(仅在1期；仅等级3和等级4)、严重不良事件(SAE)和特别关注的不良事件(AESI)：等级≥2的超敏或输注相关反应。
统计分析
本分析的统计分析计划在数据库
锁定和额外的524名患者2期数据集揭盲之前完成。全分析集(FAS)包括随机化的有COVID-19症状的患者。随机化(基线)时SARS-CoV-2鼻咽(NP)PCR测试呈阳性≤72小时但基线时中心实验室定性PCR检测呈阴性(检测限，714拷贝/毫升)的患者被排除在修改的全分析集(mFAS)的病毒学和临床终点分析之外。按血清学状态和基线病毒载量进行的亚组分析在统计分析计划中预先指定。在接受研究药物(活性的或安慰剂)的FAS患者中评估安全性。
为了证实在分析组1(患者1至275)中观察到的病毒学疗效，使用来自患者276至799(包括524名患者；分析组2)的数据进行病毒学终点分析。然而，临床终点和安全性的分析利用了所有可用患者的数据，包括前275名患者(患者1至799；分析组1+2)。
如下所述计算病毒学疗效终点。使用Fisher精确检验分析关键次要临床终点。病毒学和临床终点的分析利用层级检验策略控制I型错误在双侧α＝0.05下进行。使用SAS软件版本9.4或更高版本(SAS Institute)进行统计分析。
基线特征
799名患者在试验的1/2期进行了随机化。在汇集的799名患者组中，分别有266名、267名和266名患者被分配接受低剂量REGEN-COV、高剂量REGEN-COV或安慰剂(图6)。在799名患者(分析组1+2)中，87名(10.9％)在中心实验室SARS-CoV-2NP RT-qPCR试验中检测呈阴性，并且47名(5.9％)没有中心实验室基线病毒载量数据；因此，修改的全分析(mFAS)集包括665名患者。类似地，在分析组2(主要病毒学疗效分析)的524名患者中，mFAS集包括437名患者。
在799名随机化患者中，中值年龄为42.0岁，47％为男性，9％识别为黑人或非裔美国人，50％识别为西班牙裔或拉丁裔(表5A)。483名(60.5％)患者具有≥1种因COVID-19的住院风险因素，包括肥胖(37.3％)、年龄>50岁(29.3％)、心血管疾病(20.5％)或慢性代谢疾病(13.1％)。275名患者的分析组1和524名患者分析组2之间的基线特征相似(表5C)。
表5C.1/2期人口统计学和基线医学特征*(N＝524；全分析集)
SD，标准偏差。
*正负值是平均值±SD。由于四舍五入，因此百分比总和可能不等于100。IQR表示四分位数范围，并且RT-PCR表示逆转录聚合酶链反应。
§肥胖的定义是身体质量指数大于30。
在随机化时，408名(51.1％)患者血清抗体阴性，304名(38.0％)血清抗体阳性，并且87名(10.9％)血清抗体未知。平均基线病毒载量为5.48log10拷贝/mL(799个中有47个缺少基线数据)；256名(32.0％)患者的基线病毒载量>107拷贝/mL。从症状发作到随机化的平均时间在整个试验群体中为3.4天：在血清抗体阴性患者中为3.2天；血清抗体阳性患者为3.6天；病毒载量>107拷贝/mL的患者为2.9天；并且病毒载量≤107拷贝/mL的患者为3.8天。在408名具有≥1种住院风险因素的患者中，336名(82.3％)血清抗体阴性或病毒载量>104拷贝/mL。
自然病史
在这项分析中，安慰剂治疗患者的COVID-19自然病史证实，基线时内源性抗SARS-CoV-2抗体的存在是病毒和临床结果的重要指标。与血清抗体阳性的患者相比，基线时血清抗体阴性的安慰剂组患者基线时的中值病毒载量更高(7.73log10拷贝/mL与3.88log10拷贝/mL)，并且他们需要更长的时间使其病毒水平达到LLQ或检测不到(图7和图8)。类似地，就临床结果而言，基线时血清抗体阴性的安慰剂患者的COVID-19相关MAV发生率(9.7％；12/124)高于基线时血清抗体阳性的安慰剂患者(2.4％；2/83)。由于内源性免疫应答与基线病毒滴度相关，因此COVID-19相关MAV风险与基线病毒载量以及风险因素的存在有预期的相关性：基线病毒载量≤104拷贝/mL的患者中MAV发生率为0％(0/55)，而基线病毒载量>104拷贝/mL的患者中MAV发生率为8.5％(15/176)，并且无风险因素的患者中MAV发生率为2.2％(2/89)，具有≥1种风险因素的患者中MAV发生率为9.2％(13/142)(图9)。
病毒学疗效
在第2组分析的524名患者中，对病毒学疗效终点的预先指定比较进行了层级评估，这些患者在基线时通过NP RT-qPCR确认为SARS-CoV-2阳性(mFAS；n＝437)(表5B和表5D)。在所有预先指定的病毒学疗效比较中，与安慰剂相比，REGEN-COV治疗显著降低了到第7天的病毒载量(表5D；图10A、图10B和图11)。在第一次比较中，在基线病毒载量>107拷贝/mL的患者中，就到第7天病毒载量的时间加权平均(TWA)每日变化而言，REGEN-COV治疗(组合的2.4g和8.0g剂量)与安慰剂之间的最小二乘均值差异为-0.68log10拷贝/mL(95％CI，-0.94至-0.41；P<0.0001)(表5D)。类似地，在基线时血清抗体阴性的患者(n＝256)中，REGEN-COV治疗与安慰剂的TWA每日变化自基线的最小二乘均值差异为-0.73log10拷贝/mL(95％ CI，-0.97至-0.48；P<0.0001)，而在整个修改的全分析集(n＝437)中为-0.36log10拷贝/mL(95％ CI，-0.56至-0.16；P＝0.0003)。这些数据表明，用抗体化合物治疗观察到的病毒载量的降低主要是由在血清抗体阴性患者中的作用驱动的，如先前观察到的(表5D；图10A、图10B和图11)。在所有病毒学疗效终点比较中，低剂量和高剂量抗体化合物的治疗效果相似(表5D)。表5E、图12和图13提供了来自其他关键病毒学终点的结果。
表5D.关键病毒学和临床终点
*病毒载量的时间加权平均变化基于协方差模型的分析，其中治疗组、风险因素和基线抗体状态为固定效应，并且基线病毒载量和治疗组-基线病毒载量为协变量。置信区间没有针对多重性进行调整。
表5E.无住院风险因素或具有≥1种住院风险因素的患者每次访视时病毒载量
(log10拷贝/mL)自基线的变化
P值基于MMRM模型，其中基线血清学状态、国家、治疗、访视、按访视治疗、按基线治疗和按基线访视相互作用作为固定效应，并且受试者作为随机效应
CI置信区间；LS，最小二乘；SE，标准误差。
使用线性梯形法则(自基线变化的曲线下面积除以观察期的时间间隔)计算每个患者自基线(第1天)到第7天的时间加权平均(TWA)每日变化的病毒学疗效终点，并使用协方差模型分析进行分析，其中将治疗组、国家和风险因素(无风险因素对至少一个风险因素)作为固定效应，并且将基线病毒载量和按基线相互作用治疗作为协变量。
临床疗效
为层级检验预先指定了两个临床疗效终点：有至少一次COVID-19相关医疗访视(MAV)的患者比例，以及有至少一次COVID-19相关MAV(仅包括住院或ER或紧急护理访视)的患者比例(表5B和表5D)。到第29天对汇集的799名患者组(分析组1+2)的两个终点进行评估，这些患者在基线时通过NP RT-qPCR确认为SARS-CoV-2阳性(mFAS；n＝665)。总体而言，67％的COVID-19相关MAV为住院或急诊室(ER)访视(分别为30％和37％)，26％为医师办公室访视/远程医疗，并且7％为紧急护理访视。表5F中包括COVID-19相关MAV的描述。
表5F.COVID-19-相关MAV的描述*
*分析组1+2；修改的全分析集。
与安慰剂组的6.5％(231名中的15名)相比，REGEN-COV治疗组(组合2.4g和8.0g剂量)中有≥1次COVID-19-相关MAV的患者比例为2.8％(434名中的12名)，表示相对降低了57％(与安慰剂相比，-3.7个百分比点的绝对差异；95％ CI，-7.9％至-0.3％；P＝0.024)(表5D)。在基线血清抗体阴性患者中观察到的REGEN-COV治疗效果更明显(3.4％与9.7％安慰剂；65％的相对降低)(表5G)。对于最终的层级终点，REGENCOV组(与安慰剂相比)中与COVID-19相关的住院或ER或紧急护理就诊的患者比例在数字上较低，但差异没有达到统计学显著性(表5D)。事后分析表明，接受抗体混合物治疗的患者(组合剂量组)住院或死亡的比例降低(0.7％[434名中的3名]与2.2％[231名中的5名]；68％的相对降低)，并且住院或ER访视得到比例降低(1.8％[434名中的8名]与4.3％[231名中的10名])；58％的相对降低)(表5H)。
表5G.有≥1次COVID-19相关MAV的患者比例，按基线血清抗体状态细分
*COVID-19相关MAV包括住院。ER访视、紧急护理门诊访视和患者/医师办公室/远程医疗访视。
CI，置信区间；ER，急诊室；MAV，医疗护理访视。
表5H.住院、访视ER和/或死亡的患者比例
*95％ CI和p值基于精确的方法。
CI，置信区间。
额外的事后分析调查了抗体混合物治疗对不同高风险亚组中MAV的影响。在REGEN-COV组(组合剂量)与安慰剂组中，具有≥1种住院风险因素的患者(n＝408)发生COVID-19相关MAV的比例为：2.6％与9.2％(与安慰剂相比的绝对差异，-6.5个百分点；95％CI，-17至4；72％的相对减少)(图14A、图14B和图14C；表5I)。在REGEN-COV组(组合剂量)与安慰剂组中，基线血清抗体阴性且病毒载量>104拷贝/mL(n＝217)的具有≥1种风险因素的患者发生COVID-19相关MAV的比例为：2.1％与13.2％(与安慰剂相比的绝对差异，-11.0个百分点；95％ CI，-21至-3；84％的相对降低)(表5J)。大多数(59％)出现MAV的患者在医疗护理访视时病毒载量≥4log10拷贝/mL(表5F；图15A、图15B和图15C)。与病毒学终点一样，在低剂量和高剂量治疗之间没有观察到有意义的临床结果差异。
表5I.有≥1次COVID-19相关MAV的患者在没有住院风险因素或具有≥1种住院风
险因素的患者中的比例
*COVID-19相关MAV包括住院、ER访视、紧急护理门诊访视和患者/医师办公室/远程医疗访视。
CI，置信区间；ER，急诊室；MAV，医疗护理访视。
表5J.血清抗体阴性且高风险且病毒载量>104的患者中，有≥1次COVID-19相关
MAV的患者比例
*COVID-19相关MAV包括住院。ER访视、紧急护理门诊访视和患者/医师办公室/远程医疗访视。
CI，置信区间；ER，急诊室；MAV，医疗护理访视。
在0.05的双侧α水平下，使用Fisher精确检验比较了REGEN-COV组合剂量组和安慰剂组之间以及每个REGEN-COV治疗组和安慰剂组之间因COVID-19恶化而接受医疗护理访视的患者比例。对有COVID-19相关住院或急诊室或紧急护理访视的患者比例以及每种类型的医疗护理访视的患者比例进行了类似的分析。
安全性
REGEN-COV 2.4g组的258名患者中有4名(1.6％)出现了严重不良事件(SAE)，REGEN-COV 8.0g组的260名患者中有2名(0.8％)出现了SAE，并且安慰剂组更多数量的患者出现了SAE(即262名患者中有6名[2.3％])(表5K和表5L)。所有严重不良事件都被认为是由于晚期或进展性COVID-19病和/或相关的伴随临床状况引起的，并且被评估为与研究药物治疗无关。
在安全性观察期期间发生或恶化的特别关注的不良事件(AESI)—2级输注相关反应和超敏反应—在2.4g组中无患者报告，在8.0g组中有4名(1.5％)患者报告，并且在安慰剂组中有2名(0.8％)患者报告(表5K和5L)。
表5K.安全性群体中的严重不良事件和特别关注的不良事件概述
*事件是2级或更高级别的超敏反应或输注相关反应。
表5L.接受REGEN-COV治疗的受试者中报告的治疗期严重不良事件和特别关注的
不良事件
*仅收集了严重不良事件和特别关注的不良事件(2级或更高级别的输注相关反应和超敏反应)。
IV，静脉内(地)。
药代动力学：卡西瑞单抗和伊德维单抗的平均浓度以剂量比例的方式增加，并与单次静脉给药的线性药代动力学一致(表5M)。血清中的卡西瑞单抗和伊德维单抗第29天的平均±SD浓度，对于低(1.2g)剂量组分别为79.7±34.6mg/L和65.2±28.1mg/L，并且对于高(4.0g)剂量组分别为250±97.4mg/L和205±82.7mg/L(表5M)。
表5M.血清中REGN10933和REGN10987的平均浓度
*平均值(SD)[N]，其中N是观察次数
§给药后28天(即，第29天)观察到的浓度
在给药前(在筛选或基线访视时)、输注结束后第1天和第29天从所有患者中收集用于药物浓度分析的血清。仅在1期患者的第3天、第5天、第7天和第15天收集了额外的血清。REGN10933(卡西瑞单抗)和REGN10987(伊德维单抗)的人血清浓度使用经验证的免疫测定进行测量，该免疫测定使用来自Meso Scale Discovery(MSD，美国马里兰州盖瑟斯堡(Gaithersburg,MD,USA))的链霉亲和素微孔板。该方法利用两种抗独特型单克隆抗体作为捕获抗体，每种抗体对mAb10933或mAb10987具有特异性。使用两种不同的非竞争性抗独特型单克隆抗体检测捕获的mAb10933和mAb10987，每种抗体也对mAb10933或mAb10987具有特异性。生物分析方法单独对每种抗SARS-CoV-2刺突mAb的水平进行特异性定量，而没有来自其他抗体的干扰。对于未稀释的血清样本中的每种分析物，测定的定量下限(LLOQ)为0.156μg/mL。
讨论
本次对治疗患有确认的COVID-19的门诊患者的REGEN-COV抗体混合物治疗的最终1/2期分析发现证实并扩展了最初275名患者的发现。为了更好地了解门诊患者的COVID-19自然病史，描述了本试验中来自安慰剂患者的数据。这些数据确认了先前的发现，即在基线时尚未产生自身免疫应答的患者(即，在基线时血清抗体阴性)在基线时的中值病毒载量比血清抗体阳性的患者几乎高3log拷贝/mL，并且需要更长的时间达到低水平或检测不到的水平。与其他病毒感染类似，诸如HIV、埃博拉病毒疾病和流感，高病毒载量似乎是COVID-19疾病进展的预测因素，这一点由以下事实证明：基线病毒载量>104拷贝/mL的安慰剂患者中出现较多COVID-19相关MAV。该数据还表明，严重疾病的风险因素，诸如老年和肥胖，可能有助于预测最有可能随后发生COVID-19相关MAV的门诊患者。例如，与2.2％(2/89)没有任何风险因素的安慰剂患者相比，9.2％(13/142)具有≥1种风险因素的安慰剂患者有MAV。在这项试验中，>80％有风险因素的患者血清抗体阴性或病毒载量>104拷贝/mL。在缺乏快速血清学检测或定量PCR测定来识别高危患者的情况下，识别有住院风险因素的患者可能有助于识别最有可能受益于抗体混合物早期治疗的门诊患者。
本文所述的预期的且具有高度统计学意义的预先指定的层级分析确认了REGEN-COV的病毒学疗效，并揭示了2.4g和8.0g剂量的抗体混合物具有相似的病毒学疗效。在血清抗体阴性或基线时病毒载量高的患者中，病毒载量的降低在治疗后的前5天最大。对于已经对感染产生有效内源性抗体应答(血清抗体阳性)的患者，治疗没有明显的额外病毒学益处。在用任一剂量的REGEN-COV治疗后，病毒载量的降低伴随着需要随后进行COVID-19相关医疗护理访视的患者比例的显著降低，其中大多数(67％)是住院或ER访视。REGEN-COV抗体混合物导致MAV的相对降低为57％(安慰剂中6.5％与组合剂量组中2.8％；P＝0.0240)。有趣的是，与安慰剂相比，REGEN-COV治疗的有MAV的患者比例仅在治疗的第一周出现下降。对这一发现的一个可能的解释是，尽管加速了病毒的清除，但第一周发生的医疗访视是不可改变的。例如，在用抗体混合物治疗的患者中，当病毒载量仍然≥4log10拷贝/mL时，所有三次住院都发生在治疗后的前三天，但是在第7天之后没有住院发生(表5F；图15A、图15B和图15C)。相比之下，在接受安慰剂治疗的患者中，5例住院中有3例发生在第7天之后，此时病毒载量仍然很高(≥4log10拷贝/mL)。这些数据支持对COVID-19门诊患者的早期识别和快速治疗，以便优化REGEN-COV治疗的疗效。
观察到严重不良事件、输注相关反应和超敏反应的发生率较低。类似于先前报道的结果，第29天血清中每种抗体的浓度远高于基于体外和临床前数据预测的中和目标浓度。
该试验的临床证据表明，当给予在诊断后早期出现症状的高危患者治疗时，治疗具有最大益处，此时他们最有可能具有高病毒载量，并且可能尚未产生自身的免疫应答。此外，在基线时血清抗体阳性的患者中没有观察到不良发现。COVID-19门诊患者的早期治疗至关重要，并且如果不能快速确定病毒载量或血清抗体状态，则风险效益评估支持治疗以预防高危患者的MAV。
3期试验计划
队列1的患者群体—本研究3期部分队列1的患者群体为成年(≥18岁)男性和女性患者，他们具有：
·随机化前≤72小时的SARS-CoV-2阳性抗原或分子诊断检测(通过有效的SARSCoV-2抗原、RT-PCR或其他分子诊断测定)，以及
·由研究者确定的符合COVID-19的症状，发作在随机化前≤7天内，以及
·≥1种严重COVID-19风险因素
风险因素定义如下：
a.年龄>50岁
b.肥胖，定义为身体质量指数(BMI)>30kg/m2
c.心血管疾病，包括高血压
d.慢性肺病，包括哮喘
e.1型或2型糖尿病
f.慢性肾病，包括进行透析的那些
g.慢性肝病
h.怀孕
i.免疫抑制(例如包括癌症治疗、骨髓或器官移植、免疫缺陷、HIV(如果控制不佳或有AIDS)、镰状细胞贫血、地中海贫血和长期使用免疫减弱药物)。
队列1的主要和关键次要终点：
对于队列1，主要终点是到第29天的COVID-19相关医学护理访视(MAV)。COVID-19相关医疗护理访视定义如下：住院、急诊室(ER)访视、紧急护理访视、医师诊室访视或远程医疗访视，访视的主要原因为COVID-19。患者进行多次医疗护理访视被视为发生了1起事件。
关键的预先指定的次要终点是到第29天COVID-19相关住院或急诊室访视的累计发生率。
其他关键的预先指定的次要终点包括各种类型的COVID-19相关MAV和相关的结果。
病毒学数据共同提供了明确的证据，表明mAb10933+mAb10987显著提高了SARS-CoV-2病毒的清除率。此外，来自1/2期汇集分析的数据表明，病毒载量的降低通过显著减少COVID-19相关MAV转化为临床益处，这些MAV定义为由于COVID-19的住院、ER访视、紧急护理访视或医生办公室或远程医疗访视。具体地，对1/2期汇集数据(n＝799)的预先指定和多重对照分析显示，与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987治疗组的MAV在统计学上显著降低(2.8％组合剂量组与6.5％安慰剂；p＝0.0240)。大多数MAV发生在有较高风险的患者中，这些患者在基线时被定义为血清阴性，具有较高的基线病毒载量，或具有至少1种先前存在的严重COVID-19风险因素(例如，年龄>50岁，肥胖，共病状况)。在探索性分析中，用mAb10933+mAb10987治疗在这些高危组中显示出最大的益处，与安慰剂相比，基线病毒载量>104拷贝/mL的有MAV的患者比例降低了62％(3.2％组合治疗与8.5％安慰剂)，基线时血清阴性的患者比例降低了65％(3.4％组合治疗与9.7％安慰剂)，并且具有至少1种严重COVID-19风险因素的患者比例降低了72％(2.6％组合治疗与9.2％安慰剂)。考虑到在2期观察到的临床益处，3期将重点确认mAb10933+mAb10987在减少高危患者MAV方面的临床益处，从而证明减少病毒负荷的临床益处。
3期队列1的样本量估计大约为5400名患者。队列1持续直至在主要分析群体中招募的患者(具有至少1种风险因素的mFAS的患者)中观察到至少80名患者住院或ER访视，并且在主要分析群体的研究期间住院或ER访视的患者总数超过120。
3期队列1的主要疗效终点是mFAS中到第29天COVID 19相关MAV的累积发生率(随机化且治疗的PCR阳性患者，基线时至少有1种风险因素)。
基于第一次住院/ER访视的时间，对3期队列1关键次要终点，即到第29天COVID-19相关住院/ER访视的累计发生率进行分析。
对于3期，计划的病毒学分析是描述性的。使用与2期主要病毒学终点相同的方法，基于血清阴性患者和血清阳性患者的mFAS，分别针对接受强化采样方案的患者，分析病毒载量自基线(第1天)到基线后访视时间点的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)。基于观察到的病毒学数据的比例终点使用与比例临床终点相似的方法进行组间比较。对血清阴性mFAS以及mFAS进行分析。
为了评估病毒载量治疗效果的时间过程，使用重复测量的混合效应模型(MMRM)分析了血清阴性mFAS和mFAS每次访视时病毒载量自基线的变化(log10拷贝/mL)，包括基线、随机分层变量、治疗、访视、按基线相互作用治疗、按访视相互作用基线和按访视相互作用治疗。
该研究的3期部分以1:1的比例评估了2个剂量水平的mAb10933+mAb10987，即1200mg和2400mg(分别为600mg/mAb和1200mg/mAb)。在1期和2期结果中，MAV评估显示，2400mg和8000mg剂量的mAb10933+mAb10987具有相似的病毒学和临床疗效，并且两种剂量具有相似且可接受的安全性。鉴于2400mg和8000mg剂量之间的相似性，该3期研究将2400mg剂量作为最高剂量进行研究，同时研究较低剂量。
0至<18岁的儿童患者可作为单独的队列(队列2)纳入在该研究的3期部分，以评估mAb10933+mAb10987的安全性、PK、免疫原性和疗效。有COVID-19症状的患者或基线时SARS-CoV-2阳性的无症状患者均可纳入该队列。有严重COVID-19风险因素的儿童患者可纳入队列2。
队列2中的儿童患者可以1:1:1的分配比例随机接受单次静脉(IV)剂量的低剂量、高剂量的mAb10933+mAb10987组合疗法或安慰剂。然而，mAb10933+mAb10987治疗组可根据体重进行分级，如下表6所定义。
儿童群体(<18岁的年龄)中的剂量选择可利用高剂量和低剂量两者的体重分级固定剂量方法。对于针对成人较高剂量(2400mg)的每个体重分级剂量，目标是选择通过群体PK模型预测的剂量，以确保给药后28天血清中浓度的第五百分位(C28)类似于或大于2400mg剂量下观察到的成人C28的第五百分位。额外的考虑是确保每个体重分级剂量的预测Cmax和AUC0-28不超过以前在成人中达到的值。mAb10933和mAb10987均显示出线性PK，因此，在3期选择较低成人剂量(2400mg至1200mg)时采用的50％降低同样适用于目标为1200mg成人剂量的每个儿童体重分级固定剂量(表6)。
表6：每个重量组的mAb10933±mAb10987IV剂量，3期队列2(年龄0至<18岁)
1剂量值表示IV单剂量共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法的总量。
队列2中患者的主要目标是安全性，MAV是描述性的次要目标。
队列2的主要终点是安全性/耐受性和血清中药物浓度随时间的变化：
·到第29天出现治疗期严重不良事件(SAE)的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
·血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
·如通过抗药物抗体(ADA)和中和抗体(NAb)所测量的mAb10933和mAb10987的免疫原性
队列2中多达大约180名儿童患者(每个治疗组60名)将允许45名患者被随机化到每个PK-ADA采样方案。
3期成人数据：总结
验证性3期试验(图31和图32)的目标是前瞻性地证明COVID-19住院或全因死亡风险对高危门诊患者的临床显著影响，并确认安全性。该试验还对症状持续时间的潜在益处进行了前瞻性评价。无缝设计开始8000mg和2400mg与安慰剂的对比，并基于1/2期部分的最终分析修改为评价2400mg和1200mg与安慰剂的对比，该分析显示，8000mg和2400mg剂量在抗病毒和临床终点方面没有区别(并且临床事件主要发生在高危患者中)。将8000mg与安慰剂进行比较的数据被转换为描述性分析。一项正式的层级分析首先评价了2400mg剂量与同时服用安慰剂(在原始和修正部分中风险因素≥1种的患者中，n＝约2700)的对比，然后评价了1200mg剂量与同时服用安慰剂(在具有≥1种风险因素的患者中，n＝约1500)的对比。在门诊患者中进行的伴随剂量范围病毒学研究进一步评价了2400mg至300mg IV(和1200mg至600mg皮下)的REGEN-COV剂量的抗病毒疗效(实施例7)。关键结果如下所示。
表7：3期门诊试验的关键结果1-3
1.基于修改的全分析集(mFAS)群体，包括随机化时鼻咽拭子SARS-CoV-2 RT-qPCR检验呈阳性和具有≥1种严重COVID-19风险因素的所有随机患者。
2.正式的层级分析首先评价了2400mg剂量与同时服用安慰剂的对比，然后评价了1200mg剂量与同时服用安慰剂的对比。
3.基于1/2期分析显示8,000mg和2,400mg剂量不可区分，修改了3期方案以进行2,400mg和1,200mg与安慰剂的对比，并且将8,000mg数据转换为描述性分析。
在4567名高危患者的3期试验中，mAb10933+mAb10987(REGEN-COV)显著降低了COVID-19住院或全因死亡，并将症状消退时间缩短了4天，从而证实了1/2期的临床益处。另外，在基线时SARS-CoV-2PCR+且具有≥1种严重COVID-19风险因素的患者中，以1200mg或2400mg单次IV输注REGEN-COV显著降低了COVID-19相关住院或全因死亡的患者比例。两个剂量水平有相似的治疗效果：2400mg与安慰剂(PBO)，71.3％的降低(1.3％与4.6％；p<0.0001)；1200mg与PBO，70.4％的降低(1.0％与3.2％；p＝0.0024)。在研究第3天后，COVID-19住院或全因死亡的发生率显著降低(89.2％，2400mg与PBO，p<0.0001；71.7％，1200mg与PBO，p＝0.0101)；早期事件不太可修改。参见图35、图36和图37。在基线时病毒载量高和/或血清阴性的患者中效果更明显，但在血清阳性患者中观察到有意义的风险降低率。在第7天，各亚组的病毒载量也显著降低，在2400mg和1200mg剂量之间具有一致性(图43、图44、图52、图53、图54、图55、图56和图58)。施用REGEN-COV在两个剂量下都导致了更快的症状消退：2400mg与PBO，中值10天与14天；p<0.0001；1200mg与PBO，中值10天与14天；p<0.0001(图38、图39)。这些数据的总结在图33中示出。此外，与REGEN-COV剂量组相比，安慰剂(PBO)组的严重不良事件(包括致命事件)更频繁(4.0％ PBO与1.4％组合的REGEN-COV组)(图40、图41、图42)。本研究的人口统计学在图34中示出。
3期成人数据：完整的结果和讨论
在该自适应1至3期随机安慰剂对照主方案的1/2期部分中，REGEN-COV在门诊患者中表现出疗效，显示其可快速降低病毒载量和与COVID-19相关的医疗看护需求。事实上，2021年2月19日，独立数据监测委员会(IDMC)建议停止将患者纳入本主方案3期部分的安慰剂组，因为REGEN-COV具有明确的疗效。
该自适应、随机、主方案的3期部分包括4,057名具有一种或多种严重疾病风险因素的COVID-19门诊患者。患者被随机化到静脉注射安慰剂或不同剂量的REGEN-COV的单一治疗组，并随访29天。预先指定的层级分析进行了REGEN-COV 2400mg剂量与同时服用安慰剂的对比，然后是1200mg剂量与同时服用安慰剂的对比，作为评估住院或死亡风险和症状消退时间的终点。在所有治疗的患者中评价安全性。
与安慰剂相比，REGEN-COV 2400mg和1200mg显著降低了COVID-19相关住院或全因死亡(分别为71％的降低，1.0％与3.2％，p<0.0024；70％的降低，1.3％与4.6％，p＜0.0001)。与安慰剂相比，两个剂量组的COVID-19症状消退的中值时间缩短了4天(10天与14天；p＜0.0001)。REGEN-COV的疗效在各个亚组中是一致的，包括血清抗体阳性患者。REGEN-COV比安慰剂更快地降低了病毒载量。严重不良事件在安慰剂组更频繁发生(1200mg组和2400mg组分别为4.0％与1.1％和1.3％)，并且输注相关反应很少发生(所有组均＜2名患者)。
用REGEN-COV治疗耐受性良好，并显著降低了COVID-19相关住院或全因死亡，快速缓解症状，并降低了病毒载量。
试验设计—这是一项针对COVID-19门诊患者的自适应、多中心、随机、双盲、安慰剂对照、1/2/3期主方案(NCT04425629)。3期部分包括3个队列：队列1(≥18岁)、队列2(＜18岁)和队列3(随机化时怀孕)。最初，3期患者以1:1:1的比例随机接受安慰剂、REGEN-COV2400mg(卡西瑞单抗和伊德维单抗各自1200mg)IV或REGEN-COV 8000mg(每种抗体4000mg)IV(图81)。基于1/2期结果显示8000mg和2400mg剂量具有相似的抗病毒和临床疗效，并且大多数临床事件发生在高危患者中，该试验随后于2020年11月14日进行了修改，以修订群体和剂量。作为修改的结果，随后招募的患者具有≥1种严重COVID-19的风险因素，并以1:1:1的比例随机接受安慰剂、1200mg(每种抗体600mg)IV REGEN-COV或2400mg(每种抗体1200mg)IV REGEN-COV。2021年2月19日，根据IDMC的建议，患者不再随机接受安慰剂。此处呈现的3期分析包括队列1患者(≥18岁)，这些患者被随机化服用2400mg或1200mg的REGEN-COV，同时服用的安慰剂组作为对照组。
有资格的患者(队列1)年龄≥18岁且未住院，有经确认的当地SARS-CoV-2阳性诊断检测结果≤72小时且任何COVID-19症状的发作在随机化前≤7天内。按国家和严重COVID-19风险因素的存在对初始3期部分进行随机化。在修正的3期部分中，只有具有≥1种严重COVID-19风险因素的患者有资格。所有患者均在基线时评估抗SARS-CoV-2抗体：抗刺突[S1]IgA、抗刺突[S1]IgG和抗核衣壳IgG。因为随机化时无法获得测定结果，因此出于病毒学和亚组分析的目的，随后将患者分组为血清抗体阴性(如果所有可用检测均为阴性)、血清抗体阳性(如果任何可用检测为阳性)或其他(不确定/未知结果)。
在基线时(第1天)，静脉注射REGEN-COV(稀释在生理盐水溶液中用于共同施用)或生理盐水安慰剂。研究者评估住院与COVID-19相关。COVID-19症状演变(SE-C19)仪器是一种电子日记，每天评估23种COVID-19症状。鼻咽(NP)拭子样本的定量病毒学分析和血清抗体检测在中心实验室进行，并且如前所述。
对预先指定的主要终点和两个关键次要终点进行了层级检验(图89)。主要终点是到第29天有≥1次COVID-19相关住院或全因死亡的患者比例。两个关键的次要临床终点是：(1)从第4天到第29天有≥1种COVID-19相关住院或全因死亡的患者比例；(2)COVID-19症状消退的时间。COVID-19症状消退的时间定义为从随机化到第一天的时间，在此期间，受试者对除咳嗽、疲劳和头痛之外的所有症状评分为“无症状”(0分)，这些症状可能是“轻度/中度症状”(1分)或“无症状”(0分)。该试验3期部分的安全性终点包括在观察期期间发生或恶化的严重不良事件(SAE)和特别关注的不良事件(AESI)：等级≥2的超敏反应和输注相关反应，以及在医疗机构需要医疗看护的治疗期不良事件。
本分析的统计分析计划在3期队列1的数据库锁定和揭盲之前完成；主要分析不包括先前报告的该试验的1/2期的患者。全分析集(FAS)包括所有随机有症状的患者。基于修正的FAS(mFAS)进行疗效分析，该mFAS定义为基线时SARS-CoV-2中心实验室确定的RT-qPCR检验呈阳性且具有≥1种严重COVID-19风险因素的所有随机患者。在FAS中对治疗的患者进行安全性评估。使用分级Cochran-Mantel-Haenszel(CMH)检验，以国家作为分级因素，比较各剂量组和安慰剂组中有≥1种COVID-19相关住院或全因死亡的患者比例。使用Farrington-Manning方法呈现了分级CMH检验的P值和相对风险降低率的95％置信区间(CI)。对基线总严重度评分>3分的患者进行COVID-19症状消退时间评估，并使用分级对数秩检验(以国家作为分级因素)进行分析。中值时间和相关95％ CI源自Kaplan-Meier方法。通过Cox回归模型估计风险比和95％ CI。主要和关键临床终点的分析利用层级检验策略控制I型错误在双侧α＝0.05下进行(图89)。使用SAS软件版本9.4或更高版本(SASInstitute)进行统计分析。
结果(试验群体)
3期患者招募于2020年9月24日和2021年1月17日之间。最初，在最初的3期部分，共有3088名有或没有严重COVID-19风险因素的患者接受了随机接受单剂量安慰剂、REGEN-COV 8000mg或REGEN-COV2400mg。随后，在修改的3期部分中，另外2519名具有≥1种风险因素的患者被随机接受单剂量安慰剂、REGEN-COV 2400mg或REGEN-COV1200mg(图76)。患者的中值随访时间为45天，96.6％的患者随访时间>28天。
主要疗效群体包括具有≥1种严重COVID-19风险因素且基线中心实验室检测SARS-CoV-2呈阳性的群体(mFAS)(图76)。在mFAS群体中(n＝4057)，安慰剂组和REGEN-COV组的人口统计学和基线医学特征是平衡的(图78)。中值年龄为50岁(四分位区间[IQR，38-59])，52％为男性，14％≥65岁，28％为西班牙裔，并且61％为肥胖。最常见的风险因素是肥胖(58％)，年龄≥50岁(52％)和心血管疾病(36％)；3％的患者处于免疫抑制状态或正在接受免疫抑制药物(图90)。在总体全分析集(n＝5607)和REGEN-COV 8000mg组中观察到相似的人口统计学和基线医学特征(图91)。
中值NP病毒载量为6.98log10拷贝/mL(IQR 5.45-7.85)，并且大多数患者(69％)在基线时为SARS-CoV-2血清抗体阴性(图78)；这些高病毒载量和基线时内源性免疫应答的缺乏表明被招募的个体处于其感染过程的早期。在治疗组中，NP病毒载量和血清抗体阴性状态相似。患者在随机化时出现COVID-19症状的中值为3天(IQR 2-5)，并且这在各治疗组之间非常均衡。
结果(自然病史)
COVID-19相关住院或全因死亡风险与基线病毒载量之间存在关联：与基线时病毒载量较低的患者相比，有高病毒载量的患者的住院/死亡比例更高(基线病毒载量>106拷贝/mL：同时服用2400mg和1200mg的安慰剂组分别为6.3％[55/876]和4.2％[20/471]；基线病毒载量≤106拷贝/mL：同时服用2400mg和1200mg的安慰剂组的患者分别为1.3％[6/457]和1.5％[4/273])(图92)。
与血清抗体阳性的患者相比，基线时血清抗体阴性的安慰剂组患者基线时的中值病毒载量更高(7.45log10拷贝/mL与4.96log10拷贝/mL)，并且他们需要更长的时间使其病毒水平低于定量下限(LLQ)(图82)。
安慰剂患者的基线血清抗体状态不能预测随后的COVID-19相关住院或全因死亡，因为这些比率在血清抗体阴性和抗体阳性的患者中相似(抗体阴性：同时服用2400mg和1200mg的安慰剂组的患者分别为5.3％[49/930]和3.5％[18/519]；抗体阳性：同时服用2400mg和1200mg的安慰剂组的患者分别为4.0％[12/297]和3.7％[6/164])。然而，血清抗体阳性并随后需要住院或死亡的安慰剂患者在基线和第7天具有高病毒载量，类似于需要住院或死亡的血清抗体阴性患者，这表明一些血清抗体阳性患者可能具有无效的先天抗体应答(图93)。
疗效(主要终点)
REGEN-COV 2400mg和1200mg相似地将COVID-19相关住院或全因死亡分别减少了71.3％(1.3％对比4.6％安慰剂；95％ CI：51.7％,82.9％；p＜0.0001)和70.4％(1.0％对比3.2％安慰剂；95％ CI：31.6％,87.1％；p＜0.0024)，(图79、图77A、图77B、图94)。在亚组(包括在基线时为血清抗体阳性的患者)中观察到COVID-19相关住院或全因死亡的相似减少(图79、图83A、图83B和图83C)。
疗效(关键次要终点)
在用REGEN-COV治疗后约1至3天，观察到COVID-19相关住院或死亡的患者比例降低(图77A、图77B、图79)。在这前1至3天之后，安慰剂组中的患者在研究期间继续经历COVID-19相关住院或死亡事件(46/1340[3.4％])，而在2400mg或1200mg REGEN-COV治疗组中发生的事件非常少(分别为5/1351[0.4％]和5/735[0.7％])(图79、图84A、图84B)。
在两个REGEN-COV剂量组中，COVID-19症状消退的中值时间均比安慰剂早4天(10天对比14天；p＜0.0001，针对2400mg和1200mg中的每一者)(图79和图77C)。到第3天，很明显任一剂量的REGEN-COV均使COVID-19症状更快地消退。两种REGEN-COV剂量均与亚组中的症状消退的相似改善相关(图85)。
与安慰剂相比，所有REGEN-COV剂量水平(1200mg、2400mg和8000mg)均导致病毒载量相似且快速的下降(图86A、图86B、图86C、图87、图88A、图88B和图88C)。
疗效(其他次要终点)
REGEN-COV治疗与COVID-19相关住院的患者比例较低相关(图95)。在因COVID-19而住院的患者中，REGEN-COV组的患者住院时间较短，入住重症监护室的比率较低(图96)。
REGEN-COV治疗与到29日时COVID-19相关住院、急诊室访视或全因死亡的患者比例较低(图97)，以及因COVID-19恶化而需要任何医疗护理访视(住院、急诊室访视、紧急护理访视或医生诊室/远程医疗访视)或全因死亡(图95、图98和图99)的比例较低相关。
安全性
与以下REGEN COV剂量组相比，安慰剂组中更多患者(4.0％)经历了严重不良事件(SAE)：1200mg组1.1％、2400mg组1.3％和8000mg组1.7％(图80)。与以下REGEN-COV剂量组相比，安慰剂组中更多患者(5名患者，0.3％)经历了导致死亡的治疗期不良事件(TEAE)：1200mg组中1名(0.1％)、2400mg组中1名(＜0.1％)和8000mg组中0名(图80和图100)。大多数不良事件与COVID-19的并发症一致(图101和图102)，并且大多数被认为与研究药物无关。很少有患者经历了输注相关反应(安慰剂组中为0名；1200mg组、2400mg组和8000mg组中为2、1和3名患者)和超敏反应(安慰剂组中1名和2400mg组中1名)(图91)。在REGEN-COV剂量之间观察到相似的安全性，在安全事件中没有可识别的失衡。在直到第29天收集的安全性实验室参数中未观察到安全性信号。
药代动力学
第29天血清中卡西瑞单抗和伊德维单抗的平均浓度以剂量比例方式增加，并且与线性药代动力学一致(图103)。血清中的卡西瑞单抗和伊德维单抗的第29天平均浓度，对于1200mg剂量分别为46.4±SD22.5mg/L和38.3±SD19.6mg/L，对于2400mg剂量分别为73.2±SD27.2mg/L和60.0±SD22.9mg/L；卡西瑞单抗的平均估计半衰期为28.8天，伊德维单抗的平均估计半衰期为25.5天(图103)。
讨论
先前的1/2期数据表明，在COVID-19的门诊患者中，REGEN-COV稳健地降低了病毒载量，减少了对医疗护理的需求，并且尽管有少量事件，但高度暗示住院风险降低。这些临床结果数据现在明确地证明，在具有严重COVID-19风险因素的门诊患者中使用REGEN-COV进行早期治疗可显著降低住院或全因死亡的风险。1200mg IV剂量和2400mg IV剂量的REGEN-COV在治疗后28天内均使COVID-19住院或全因死亡减少了约70％(对比安慰剂)。在住院的那些患者中，REGEN-COV治疗还使住院持续时间缩短，并且使需要重症监护的患者比例降低。此外，两种剂量的REGEN-COV均可使COVID-19症状更快消退，消退的中值时间为4天。因此，对COVID-19的门诊患者采用单剂量的REGEN-COV有可能通过降低发病率和死亡率来改善患者的预后，并显著减轻疫情期间的医疗负担(包括住院和重症监护)。此外，REGEN-COV可大大加快从COVID-19恢复的速度，这对患者而言是额外的好处，因为有越来越多的证据表明，一些患者(包括那些有轻微症状的患者)将有不同程度延长的恢复过程。
不希望受到理论的束缚，我们先前假设，虽然宿主因素在疾病过程中起作用，但SARS-CoV-2的发病率和死亡率由高病毒负荷引起，并且用抗刺突单克隆抗体混合物进行早期治疗可能显著改善这种风险。在安慰剂组中，我们发现住院或全因死亡的患者在基线时病毒载量明显较高，清除病毒较慢，与基线血清学状态无关。与血清抗体阴性患者相比，安慰剂组中自身对SARS-CoV-2产生内源性抗体反应(血清抗体阳性)的患者具有相似的住院率或死亡率，这表明一些血清抗体阳性的患者具有无效的免疫反应。此外，血清抗体阳性且有COVID-19相关住院或死亡的安慰剂患者也具有与血清抗体阴性且也有这些事件的患者相似的高基线病毒载量水平，证实高病毒载量是严重COVID-19的关键驱动因素。另外，本研究还表明，不论基线血清抗体状态如何，REGEN-COV均具有临床益处，这使得在COVID-19诊断时的血清学检测对于临床治疗决策的重要性降低。考虑到疫苗使用的普遍性这一结论很重要，因为疫苗使用的普遍性将导致基线血清抗体阳性状态，而这可能无法有效预防某些患者的严重感染(如本试验中某些天然免疫无效的患者的情况)或由于出现令人担心的变体(VOC)引起的严重感染。
1200mg和2400mg剂量的REGEN-COV均具有相似的抗病毒和临床疗效，这表明我们远高于最低有效剂量。与安慰剂相比，两种剂量均快速降低病毒载量，病毒清除时间更快。除了向接受REGEN-CoV的个体患者提供临床益处之外，快速的抗病毒作用很可能通过降低病毒传播的风险并抑制SARS-CoV-2VOC而与公共健康益处相关。
观察到严重不良事件、超敏反应和输注相关反应的发生率较低。第29天血清中每种抗体的浓度远高于基于体外和临床前数据预测的中和目标浓度。
在用抗病毒剂治疗期间或在全球社区内流通的SARS-CoV-2耐药变体的出现将继续对COVID-19治疗剂和疫苗的成功进行挑战。尽管使用重组病毒的体外研究或体内动物研究表明，非竞争性抗体的组合(诸如REGEN-COV)能够抑制耐药变体的出现，但这些研究与人体自然感染的相关性仍然存在问题。因此，我们最近研究并报告了来自1000名门诊患者样本的整个刺突蛋白的遗传多样性，这些门诊患者要么参加了本实施例中描述的门诊患者REGEN-COV试验，要么参加了单独的住院COVID-19REGEN-COV试验(如实施例1所述)。来自这1,000名患者的用REGEN-COV或安慰剂治疗的4,882个样本的分析证实了REGEN-COV防止耐药变体的选择，如通过在安慰剂治疗的患者中发现的受体结合结构域(RBD)变体数量与用1200mg和2400mg剂量的REGEN-COV治疗的那些患者相比类似(安慰剂组中15个RBD变体对比REGN-COV治疗组中的1200mg剂量12个RBD变体和2400mg剂量12个RBD变体)所证明的。这些RBD变体中的三种仅在REGEN-COV治疗组中发现，但在基线时或治疗后不久(＜5天)就被鉴定，并且随着时间的推移频率没有增加，这表明这些变体的发生不是由于治疗压力引起。
2400mg剂量的REGEN-COV抗体混合物于2020年11月从美国FDA获得紧急使用授权(EUA)，用于治疗轻度至中度的COVID-19。在2021年4月8日，NIH治疗指南推荐使用2400mgREGEN-COV来治疗COVID-19高风险门诊患者，并在VOC常见的地区优先使用REGEN-COV。这项临床结果试验是迄今为止最大的随机对照3期COVID-19门诊患者治疗试验，其临床证据表明，1200mg的REGEN-COV耐受性良好，可显著减少COVID-19相关住院或死亡，可加快恢复时间，并且不太可能促进抗治疗SARS-CoV-2变体的出现。根据这一明确的3期数据表明住院或全因死亡的风险显著降低，以及可接受的安全性，医生应考虑治疗每个高风险SARS-CoV-2阳性个体。
补充详细信息
COVID-19症状演变(SE-C19)工具是从第1天至第29天每天完成的电子日记。SE-C19最初是基于CDC症状列表和针对患有COVID-19患者的可用出版文献开发的。它包括列举的23种症状：发烧、发冷、喉咙痛、咳嗽、气短或呼吸困难、恶心、呕吐、腹泻、头痛、眼睛发红或流泪、身体疼痛、味觉或嗅觉丧失、疲劳、食欲不振、意识模糊、头晕、胸部受压或胸闷、胸痛、胃痛、皮疹、打喷嚏、痰或粘液、流鼻涕。患者指出他们在过去24小时内经历的23种症状中的哪些症状，然后将选择的在此期间最糟糕时刻的每种症状按轻度、中度或重度进行评级。与主要临床试验并行地进行对患者和临床医生的访谈，以确认新开发的SE-C19的内容有效性，并使用盲法1/2期数据进行心理测量验证，以探究该测量的可靠性和有效性并细化症状终点。结果表明，原始的23个项目中有19个项目的结果是最有效的、可靠的且与患有COVID-19的患者相关的(即，排除打喷嚏、皮疹、呕吐和意识模糊)，并将反应选项细化为三个类别(0-无、1-轻度/中度、2-严重)。这些额外研究的详细、严格的科学实施方法和结果将独立发表。
病毒学终点的缺失数据处理如下：将低于714拷贝/ml(2.85log10拷贝/ml)的定量下限(LLOQ)的分析阳性聚合酶链反应(PCR)结果估算为LLOQ的一半(357拷贝/ml)，并且将阴性PCR结果估算为0log10拷贝/ml(1拷贝/ml)。在症状消退终点的分析中不包括缺失基线症状评估的患者。检查未经历症状消退的患者将在最后一个观察时间点接受审查。第29天前死亡或有COVID-19相关住院的患者在第29天接受审查。
在方案第6次修正之前，给药前(筛选或基线访视时)、输注结束后第1天和第29天，从随机化到2.4g IV、8.0g IV或安慰剂的所有患者中收集用于药物浓度分析的血清。在方案第6次修正之后，在PK亚研究中给药前(筛选或基线访视时)、第29天和第120天，从随机化到1.2g IV、2.4g IV或安慰剂的患者中收集用于药物浓度分析的血清。REGN10933(卡西瑞单抗)和REGN10987(伊德维单抗)的人血清浓度使用经验证的免疫测定进行测量，该免疫测定使用来自Meso Scale Discovery(MSD，美国马里兰州盖瑟斯堡(Gaithersburg,MD,USA))的链霉亲和素微孔板。该方法利用两种抗独特型单克隆抗体作为捕获抗体，每种抗体对REGN10933或REGN10987具有特异性。使用两种不同的非竞争性抗独特型单克隆抗体检测捕获的REGN10933和REGN10987，每种抗体也对REGN10933或REGN10987具有特异性。生物分析方法单独对每种抗SARS-CoV-2刺突单克隆抗体的水平进行特异性定量，而没有来自其他抗体的干扰。对于未稀释的血清样本中的每种分析物，该测定具有0.156μg/ml的LLOQ。
实施例3.抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体预防风险受试者的SARS-CoV-2感染和 COVID-19的临床评价。
下述临床研究是一项随机、双盲、安慰剂对照的3期研究，用于评估抗刺突SARS-CoV-2单克隆抗体在COVID-19持续爆发的地理区域有暴露于SARS-CoV-2风险的现场急救员、医护人员和其他成年个体中的安全性和疗效。
研究目标：对于终点的分析，如通过中心实验室SARS-CoV-2 RT-qPCR(定量逆转录聚合酶链反应)测量的，基于受试者在基线时的SARS-CoV-2感染状态存在2个定义队列：阴性(队列A)或阳性(队列B)。
COVID-19体征和症状的严格定义(即，狭义)用于主要终点，包括：发烧(≥38℃)加上≥1种呼吸道症状(喉咙痛、咳嗽、气短)、或≥2种呼吸道症状、或1种呼吸道症状加上≥2种非呼吸道症状(发冷、恶心、呕吐、腹泻、头痛、结膜炎、肌痛、关节痛、味觉或嗅觉丧失、疲劳或全身不适)。更广泛的定义(即，广义)用于次要终点，包括严格定义中的体征和症状和另外的非特异性症状(发烧、喉咙痛、咳嗽、气短、发冷、恶心、呕吐、腹泻、头痛、眼睛发红或流泪、身体疼痛、味觉/嗅觉丧失、疲劳、食欲不振、意识模糊、头晕、胸部受压/胸闷、胸痛、胃痛、皮疹、打喷嚏、流鼻涕或痰/粘液)。
除非另有说明，否则目标针对基线时血清阴性的受试者。
队列A：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阴性
队列A主要疗效目标
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(狭义)方面的疗效
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的有症状(狭义或广义)和无症状SARS-CoV-2感染方面的疗效
队列A主要安全目标
·在皮下(SC)施用后评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比的安全性和耐受性
队列A次要目标
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(广义)方面的疗效
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的无症状SARS-CoV-2感染方面的疗效
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染的受试者的体征和症状的持续时间的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对SARS-CoV-2 RT-qPCR检测结果的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对SARS-CoV-2感染的影响：
ο医疗服务利用
ο日常工作的缺勤
·表征血清中mAb10933和mAb10987的药物浓度-时间曲线和选定的药代动力学(PK)参数
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
·在SC施用后评价血清阳性受试者中mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·评价mAb10933+mAb10987治疗的血清阴性受试者和血清阳性受试者与安慰剂治疗受试者相比有症状SARS-CoV-2感染随时间(包括研究药物治疗后的时期)的发生率和严重程度
队列B：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阳性
队列B次要目标
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防以下感染发生方面的疗效：
ο有症状SARS-CoV-2感染(狭义)
ο有症状SARS-CoV-2感染(广义)
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染的受试者的体征和症状的持续时间的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对SARS-CoV-2 RT-qPCR检测结果的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对SARS-CoV-2感染的影响：
ο医疗服务利用
ο日常工作的缺勤
·表征血清中mAb10933和mAb10987的浓度-时间曲线和选定的PK参数
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
·在SC施用后评价血清阴性受试者和血清阳性受试者中mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·评价mAb10933+mAb10987治疗的血清阴性受试者和血清阳性受试者与安慰剂治疗受试者相比有症状SARS-CoV-2感染的随时间(包括研究药物治疗后的时期)的发生率和严重程度
研究设计：这是一项随机、双盲、安慰剂对照的3期研究，对象为在COVID-19持续爆发的地理区域有暴露于SARS-CoV-2风险的现场急救员、医护人员和其他成年个体中。大约招募了6000名受试者。将受试者以1:1:1的比率随机分配到3个治疗组之一中。随机化按地点进行，并按来自呼吸道样本的SARS-CoV-2的局部分子诊断测定(阴性、阳性或未确定)、SARS-CoV-2的现场LFIA血清学检测(血清阳性、血清阴性或未确定)和年龄≥50岁(是与否)进行样本分层。
队列分配基于用于数据分析的中心实验室基线SARS-CoV-2 RT-qPCR：队列A(阴性)和队列B(阳性)。队列A招募了大约5000名受试者，而队列B招募最多1000名受试者。出于研究分析的目的，队列A和队列B是独立的。由于这是事件驱动的研究，一旦队列A完全招满和/或队列A中积累了用于主要疗效分析的必要数量的事件，资助方可能会决定停止队列B的招募。
本研究的招募分两个阶段进行：
1.由大约30名受试者组成的前哨组，不考虑是分配到队列A还是队列B：受试者在接受第一剂量的研究药物施用后将接受至少4小时的现场安全性监测，然后在前4天(96小时)每天通过对研究现场的访视或电话呼叫接受监测。由于mAb10933+mAb10987已在IV施用更高剂量时清除了前哨安全组，因此本研究中的前哨组将重点关注注射部位反应和超敏反应的安全性评价。在继续招募额外的研究受试者之前，审查了来自在SC施用mAb10933+mAB10987预防计划中招募的合并的约30名受试者(来自本研究或与对家庭接触者的伴随暴露后预防研究(实施例4)合并，包括前哨安全性队列)的多达4天评估中的盲法安全性数据。
2.在盲法安全数据审查得出研究可继续进行的结论后，研究恢复招募。
研究持续时间：对于每个受试者，研究包括3个阶段：多达3天的筛选/基线期、4个月的疗效增强期(EAP)和EAP结束后7个月的随访期。
研究群体：研究群体包括无症状的健康成年现场急救员、医护人员和其他有暴露于SARS-CoV-2风险的个体。有SARS-CoV-2感染风险的“其他个体”的招募应仅在COVID-19广泛存在且发病率高的地理区域进行。在研究中包括此类受试者群体的决定将基于对流行病学资料的审查。
队列和样本量—队列A：基线快速SARS-CoV-2 RT-PCR呈阴性的大约5000名受试者；队列B：基线快速SARS-CoV-2 RT-PCR呈阳性的至多1000名受试者。
入选标准—受试者必须符合以下标准才有资格入选研究：
1.签署知情同意书时在18岁及以上；
2.暴露于SARS-CoV-2的高风险人群包括但不限于以下人群：
a.积极的现场急救员和/或医护人员，包括但不限于有暴露于SARS-CoV-2的风险的医生、护士、护士助手、呼吸治疗师和执法人员、消防员、急救医疗技术人员或护理人员；
或
b.被认为有SARS-CoV-2感染风险的其他个体(包括但不限于在COVID-19爆发活跃的地理区域中的行业工作者；肉类包装工；疗养院居民和工人；聚集在礼拜场所的人们；大学生、教师和工人)。在研究中包括此类受试者群体的决定将基于资助方和其他合作伙伴对流行病学资料的审查；
3.经研究者基于病史和筛选/基线时的体检判断其健康状况良好；
4.愿意并且能够遵守研究访视和研究相关程序；
5.提供已签署的知情同意书。
排除标准：满足以下标准中的任何标准的受试者将被排除在这项研究之外：
1.受试者在筛选访视前的任何时间报告了先前SARS-CoV-2 RT-PCR检测阳性或SARS-CoV-2血清学检测阳性的病史；
2.暗示或符合COVID-19的活动性呼吸道或非呼吸道症状；
3.研究者认为，筛选前一个月内有COVID-19体征/症状的呼吸道疾病史；
4.临床上显著的疾病病史或存在任何问题，如由研究者评估可能会混淆研究结果或因受试者参与研究而对其造成额外风险；
5.筛选访视后30天内因任何原因住院(即，>24小时)；
6.目前或过去1年需要治疗的癌症，非黑色素瘤皮肤癌或宫颈癌/肛门原位癌除外；
7.有明显的多次和/或严重过敏(例如，胶乳手套)史，或者对处方或非处方药物或食物有过敏反应。这是为了避免安全数据的潜在混淆，而不是由于特定的安全风险；
8.在筛选访视前的最后30天内或在研究药物的5个半衰期内(以较长者为准)使用另一种研究药物进行治疗；
9.接受研究或批准的SARS-CoV-2疫苗；
10.接受用于SARS-CoV-2感染预防的研究或批准的被动抗体(例如，恢复期血浆或血清、单克隆抗体、超免疫球蛋白)；
11.筛选前2个月内使用羟氯喹/氯喹、瑞德西韦、静脉注射免疫球蛋白(IVIG)或其他抗SARS病毒剂；
12.临床现场研究团队成员和/或直系亲属；
13.孕妇或母乳喂养妇女；
14.有生育能力的妇女(WOCBP)*，不愿意在第一次治疗的初始剂量/开始之前、研究期间和最后一个剂量后至少8个月内进行高效避孕的妇女。高效避孕措施包括：
a.稳定使用组合的(含雌性激素和孕激素的)激素避孕(口服、阴道内、经皮)或仅含孕激素的激素避孕(口服、可注射、可植入)以及在筛选前抑制开始2个或更多个月经周期的排卵；
b.宫内节育器(IUD)；宫内激素释放系统(IUS)；
c.双侧输卵管结扎；
*WOCBP被定义为在初潮后直到绝经后仍具有生育能力的妇女，除非永久不育。永久性绝育方法包括子宫切除术、双侧输卵管切除术和双侧卵巢切除术。
绝经后状态被定义为12个月没有月经而没有其他医疗原因。绝经后范围内的高促卵泡激素(FSH)水平可用于确认未使用激素避孕或激素替代疗法的女性的绝经后状态。然而，在没有12个月的闭经的情况下，单次FSH测量不足以确定绝经后状态的发生。上述定义根据临床试验促进组(CTFG)指南。文件记录有子宫切除或输卵管结扎术的妇女无需进行妊娠测试和避孕。
15.在研究药物随访期间和最后一剂研究药物后的6个月内，不愿意使用以下形式的医学上可接受的节育措施的性活跃男性：经医学评估手术成功的输精管切除术或坚持使用避孕套。在研究期间以及最后一剂研究药物后的6个月内，禁止捐献精子。
研究治疗：患者在第1天、第29天、第57天和第85天，接受mAb10933+mAb10987600mg(300mg+300mg)/皮下(SC)/每4周一次(Q4W)；在第1天接受mAb10933+mAb109871200mg(600mg+600mg)负荷剂量/SC，然后在第29天、第57天和第85天接受600mg(300mg+300mg)/SC/Q4W；或在第1天、第29天、第57天和第85天接受匹配量的安慰剂/SC/Q4W。
终点：针对每个队列指定主要终点和次要终点，如下文所定义。
主要终点
队列A：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阴性
主要疗效终点：
·在EAP期间经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(狭义)的发生率
·在EAP期间经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染(有症状或无症状)的发生率
主要安全终点：
治疗期不良事件(TEAE)的发生率和严重程度
次要终点
队列A：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阴性
队列A次要疗效终点：
·在EAP期间经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(广义)的发生率
·在EAP期间SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性且不存在体征和症状(狭义)的发生率
·在EAP期间SARS-CoV-2RT-qPCR阳性且不存在体征和症状(广义)的发生率
·从与EAP期间出现的第一次SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性相关的第一个体征或症状的第一天到最后一个体征或症状的最后一天的有症状SARS-CoV-2感染(狭义)的天数
·从与EAP期间出现的第一次SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性相关的第一个体征或症状的第一天到最后一个体征或症状的最后一天的有症状SARS-CoV-2感染(广义)的天数
·从第一个SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性鼻拭子样本(在EAP期间出现)到阳性检测后22天的病毒脱落的时间加权平均值(log10拷贝/mL)
·从第一个SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性唾液样本(在EAP期间出现)到阳性检测后22天的病毒脱落的时间加权平均值(log10拷贝/mL)
·在EAP期间出现的RT-qPCR阳性结果≥1的个体中，鼻拭子样本中的最大SARS-CoV-2 RT-qPCR log10病毒拷贝/mL
·在EAP期间出现的RT-qPCR阳性结果≥1的个体中，唾液样本中的最大SARS-CoV-2 RT-qPCR log10病毒拷贝/mL
·从EAP期间出现的鼻拭子样本中第一次SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性到第一次确认阴性检测的病毒脱落(log10拷贝/mL)的曲线下面积(AUC)
·从EAP期间出现的唾液样本中第一次SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性到第一次确认阴性检测的病毒脱落(log10拷贝/mL)的曲线下面积(AUC)
·与EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视次数
·与EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的需要急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视的受试者比例
·与EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的住院受试者的比例
·因在EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而住院的受试者的住院和ICU入住天数
·因在EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而造成的日常工作(包括工作(就业成人)或学校(入学学生)或家庭义务/责任(儿童保育或老人护理))缺勤的天数
队列A药代动力学和免疫原性次要终点：
·血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)的血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度以及选定的PK参数
·在血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中，如通过针对mAb10933和mAb10987的抗药物抗体(ADA)随时间变化所测量的免疫原性
队列A安全次要终点：
·基线血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中TEAE的发生率和严重程度
·在EAP和随访期中，血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中有症状SARS-CoV-2感染的发生率和严重程度
队列B：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阳性
队列B次要疗效终点：
·在RT-qPCR阳性的14天和28天内随后出现有症状SARS-CoV-2感染的体征和症状(狭义)的受试者比例
·在RT-qPCR阳性的14天和28天内随后出现有症状SARS-CoV-2感染的体征和症状(广义)的受试者比例
·有症状SARS-CoV-2感染(狭义)的天数
·有症状SARS-CoV-2感染(广义)的天数
·鼻拭子样本中病毒脱落自基线到第23天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)。
·唾液样本中病毒脱落自基线到第23天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)
·到第一次确认阴性检测时鼻拭子样本中病毒脱落(log10拷贝/mL)的曲线下面积(AUC)
·到第一次确认阴性检测时唾液样本中病毒脱落(log10拷贝/mL)的曲线下面积(AUC)
·鼻拭子样本中的最大SARS-CoV-2 RT-qPCR log10病毒拷贝/mL
·唾液样本中的最大SARS-CoV-2 RT-qPCR log10病毒拷贝/mL
·与经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视次数
·与经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的需要急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视的受试者比例
·与经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的住院受试者的比例
·因经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而住院的受试者的住院和ICU入住天数
·因经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而造成的日常工作(包括工作(就业成人)或学校(入学学生)或家庭义务/责任(儿童保育或老人护理))缺勤的天数
队列B药代动力学和免疫原性次要终点：
·血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)的血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度以及选定的PK参数
·在血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中，如通过针对mAb10933和mAb10987的ADA随时间变化所测量的免疫原性
队列B安全次要终点：
·血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中均出现TEAE的发生率和严重程度
·在EAP和随访期中，血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中有症状SARS-CoV-2感染的发生率和严重程度
程序和评估：疗效程序和评估包括以下内容：
·鼻拭子和唾液SARS-CoV-2 RT-qPCR检测(中心实验室)
·COVID-19症状学(广义和狭义)：
在每个预定或未预定的访视/接触期间，主要研究者或辅助研究者或指定人员(即，当地法律允许的国家/地区的护士从业人员)询问受试者正在经历或自上次访视/接触以来已经历的不良事件(例如，如果是每周一次的预定访视，则在上周内)，并且询问与这些不良事件相关的所有体征和症状，包括每个不良事件的开始日期、结束日期和严重程度。研究者应避免按照体征和症状的列表进行核对来询问受试者，而是允许受试者自发报告他们所呈现的一切。
与AE相关的所有体征和症状以及对应的开始日期、结束日期和严重程度都记录在受试者的医疗记录(源文档)中。由于体征和症状可能在不同的日期出现和消退，并且可能在收集用于SARS-CoV-2 RT-qPCR检测的鼻拭子和唾液样本之前或之后出现，因此在源文档中记录此类详细信息非常重要。
独立于在每周一次或未预定的访视期间对从研究受试者收集的样本进行的SARS-CoV-2 RT-qPCR检测的结果(阳性或阴性)，必须在AE CRF中记录所有不良事件。与AE CRF中报告的不良事件有关且经确认与从受试者鼻拭子和/或唾液样本中收集的SARS-CoV-2 RT-qPCR检测呈阳性暂时相关的体征和症状在单独的CRF上报告(单独的体征或症状，包括开始日期和结束日期以及相关的严重程度)。
ο狭义的COVID-19体征和症状，定义为：
·发烧(≥38℃)加上≥1种呼吸道症状(喉咙痛、咳嗽、气短)；
或
·≥2种呼吸道症状(喉咙痛、咳嗽、气短)；
或
·1种呼吸道症状(喉咙痛、咳嗽、气短)加上≥2种非呼吸道症状(发冷、恶心、呕吐、腹泻、头痛、结膜炎、肌痛、关节痛、味觉或嗅觉丧失、疲劳或全身不适)。
ο广义的COVID-19体征和症状：定义为在方案中列出的23种症状中的任何症状或发烧(≥38℃)。
·医疗护理访视：从SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性的时间点开始直到EAP结束，与SARS-CoV-2感染有关的急诊科(ED)、紧急护理中心(UCC)或住院的医疗护理访视。收集的数据包括访视的性质(ED、UCC、住院)、访视日期、住院时间和访视主要原因
·日常工作的缺勤：数据包括缺勤，定义为因经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2而造成的日常工作(包括工作(就业成人)或学校(入学学生)或家庭义务/责任(儿童保育或老人护理))缺勤的天数。
·内源性抗SARS-CoV-2抗体测定(中心实验室)
安全程序和评估包括生命体征、目标体检、临床实验室检查、ADA评估和临床评价。将要求受试者报告从知情同意到最后一次研究访视期间经历的所有不良事件(AE)。
药代动力学：将在指定的时间点收集血清样本，用于测定mAb10933和mAb10987的浓度。
统计计划：
主要疗效分析(队列A)—在队列A中观察到总计157例阳性SARS-CoV-2 RT-qPCR有症状感染时，发生主要数据库锁定。
分层对数秩检验将使用年龄(<50岁，≥50岁)作为分层因子，以比较每个剂量的mAb10933+mAB10987和安慰剂。Kaplan-Meier法用于估计实验室确认的有症状SARS-CoV-2感染的累积概率，并且将报告每个治疗组的相关95％ CI。使用Cox比例风险模型来估计风险比及其95％ CI。模型包括治疗组和年龄作为先前指定的分层因子。
完成EAP且在EAP期间未发生事件的受试者将在其EAP完成的最后一天接受审查。未完成EAP且未发生事件的受试者将在数据截止日期接受审查。没有基线后信息的受试者的数据将在随机化日期后1天进行审查。对于SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阳性之前在EAP中失访的受试者，对其最后一次可用SARS CoV-2 RT-qPCR评估中的数据进行审查。在统计分析计划(SAP)中提供了分析的额外细节以及敏感性分析。
实施类似的分析方法来比较mAb10933+mAb10987和安慰剂对SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性发生率的影响，而不考虑症状如何。
作为敏感性分析，排除了在接受第一剂研究药物后72小时内出现无症状或有症状SARS-CoV-2感染的受试者。SAP中描述了另外的敏感性和支持性分析。
次要疗效分析(队列A)—下文描述了用于次要疗效终点的分析方法。为了对疗效进行全面评估，即使对某些次要终点的分析需要非随机比较，也可以报告名义p值。使用如针对主要疗效分析指定的分析方法来分析以下次要终点。
·在EAP期间经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(广义)的发生率
·在EAP期间SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性且不存在体征和症状(狭义)的发生率
·在EAP期间SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性且不存在体征和症状(广义)的发生率
其他次要终点的分析—使用描述性统计量(平均值、中值、标准偏差和四分位数)总结了连续或计数终点(例如，病毒脱落的时间加权平均值、症状天数、医疗护理访视次数)。分析方法要么使用按年龄(<50岁，≥50岁)分层的非参数Van-Elteren检验，要么使用在模型中包括治疗和年龄(<50岁，≥50岁)的ANOVA。
二元终点(诸如与经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染相关的住院受试者比例)将使用频率、百分比、绝对差或比值比进行总结，并使用通过年龄(<50岁，≥50岁)分层因子调整的Cochran-Mantel-Haenszel(CMH)检验或Fisher精确检验进行分析。
次要疗效分析(队列B)—通过年龄(<50岁，≥50岁)分层因子调整的Cochran-Mantel-Haenszel(CMH)检验将用于分析在疗效评估期间出现有症状SARS-CoV-2感染的体征和症状(狭义)的受试者的比例。在最终分析时仍然无症状但未确认SARS-CoV-2 RT-qPCR阴性的受试者被认为是有症状的。
结果—本研究表明，预防了通过每周一次鼻拭子和唾液样本的SARS-CoV-2 RT-qPCR检测结果所评价的有高暴露风险的成人的有症状和无症状SARS-CoV-2感染，并且预防了通过每天收集与COVID-19相关的常见临床体征/症状所评价的有症状SARS-CoV-2感染。
实施例4.抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体预防SARS-CoV-2感染个体的家庭接触者
的SARS-CoV-2感染的临床评价
下述临床研究是一项随机、双盲、安慰剂对照的3期研究，评估了抗刺突SARS-CoV-2单克隆抗体在预防SARS-CoV-2感染个体的家庭接触者的SARS-CoV-2感染中的疗效和安全性。
研究目的：为了进行终点分析，基于受试者年龄和基线时的SARS-CoV-2感染状态(如通过中心实验室SARS CoV-2 RT-qPCR(定量逆转录聚合酶链反应)测量的)定义了4个队列：阴性(队列A[成人和青少年受试者≥12岁]和队列A1[儿童受试者<12岁])或阳性(队列B[成人和青少年受试者≥12岁]和队列B1[儿童受试者<12岁])。COVID-19体征和症状的严格定义用于次要终点，包括：发烧(≥38℃)加上≥1种呼吸道症状(喉咙痛、咳嗽、气短)、或2种呼吸道症状、或1种呼吸道症状加上≥2种非呼吸道症状(发冷、恶心、呕吐、腹泻、头痛、结膜炎、肌痛、关节痛、味觉或嗅觉丧失、疲劳或全身不适)。包括严格定义中的体征和症状和另外的症状的更广泛的定义用于另外的次要终点(24项：发烧、喉咙痛、咳嗽、气短/呼吸困难[儿童受试者鼻翼扇动]、发冷、恶心、呕吐、腹泻、头痛、眼睛发红或流泪、身体疼痛诸如肌肉疼痛或关节疼痛、味觉/嗅觉丧失、疲劳[儿童受试者出现疲劳或全身不适或嗜睡]、食欲不振或进食/喂食不良、意识模糊、头晕、胸部受压/胸闷、胸痛、腹痛、胃痛、皮疹、打喷嚏、流鼻涕、痰/粘液)。除非另有说明，否则目标针对基线时血清阴性(通过中心实验室检测)的受试者。
队列A：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阴性
队列A主要疗效目标
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的无症状或有症状SARS-CoV-2感染方面的疗效
队列A和队列A1主要安全目标
·在皮下(SC)施用后评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比的安全性和耐受性
队列A和队列A1次要目标
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(广义)方面的疗效
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的无症状SARS-CoV-2感染方面的疗效
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(狭义)方面的疗效
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染的受试者的体征和症状的持续时间的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对SARS-CoV-2 RT-qPCR检测结果的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对以下各项的影响：
-医疗服务利用
-日常工作的缺勤
·表征血清中mAb10933和mAb10987的药物浓度-时间曲线和选定的药代动力学(PK)参数。
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
·在皮下(SC)施用后评价血清阳性受试者中mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·估计mAb10933+mAb10987治疗的血清阴性受试者和血清阳性受试者与安慰剂治疗受试者相比有症状SARS-CoV-2感染随时间(包括研究药物治疗后的时期)的发生率和严重程度
附加队列A1次要目标
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防经RT-qPCR确认的无症状或有症状SARS-CoV-2感染方面的疗效
队列B：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阳性
队列B和队列B1次要目标—队列B和队列B1的目标是针对所有受试者，无论他们在基线(通过中心实验室检测)时的血清学状态如何(阳性或阴性)。
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比在预防以下感染发生方面的疗效：
-有症状SARS-CoV-2感染(狭义)
-有症状SARS-CoV-2感染(广义)
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染的受试者的体征和症状的持续时间的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对SARS-CoV-2 RT-qPCR检测结果的影响
·评价mAb10933+mAb10987与安慰剂相比对SARS-CoV-2感染的影响：
-医疗服务利用
-日常工作的缺勤
·表征血清中mAb10933和mAb10987的药物浓度-时间曲线和选定的PK参数
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
·在SC施用后评价mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·估计mAb10933+mAb10987治疗的血清阴性受试者和血清阳性受试者与安慰剂治疗受试者相比有症状SARS-CoV-2感染随时间(包括研究药物治疗后的时期)的发生率和严重程度
研究设计：这是一项随机、双盲、安慰剂对照的3期研究，对象为与SARS-CoV-2感染个体有家庭接触的成人、青少年和儿童。研究中的所有受试者都是与已知感染SARS-CoV-2的第一个家庭成员(指示病例)有密切接触的家庭接触者，但他们在筛选时本身无症状(没有符合COVID-19的活动性呼吸道或非呼吸道症状)。该指示病例已使用诊断检测(例如，RT-PCR、抗原检测或其他检测形式)进行了SARS-CoV-2感染的诊断。随机化按单独的研究受试者进行，而不是按家庭进行。招募了大约2200名成人和青少年(≥12岁)加上100名儿童患者(<12岁)。
筛选/基线(第1天)—随机化按单独的受试者进行，但是，如果同一家庭的多名成员被招募并接受研究药物，则随机分配的所有受试者都被给予家庭识别号。这确保在统计分析中可以考虑同一家庭内受试者之间的相关性。随机化按地点进行，并且按来自适当样本(鼻咽(NP)、口咽(OP)、鼻腔或唾液以及年龄组(≥12岁至<18岁、≥18岁至<50岁或≥50岁)(是与否))的SARS-CoV-2局部诊断测定(例如，分子测定诸如SARS-CoV-2的RT-PCR测定，或SARS-CoV-2抗原检测)的检测结果(阳性、阴性或不可用)对治疗组的分配进行分层。对于儿童受试者(<12岁)，体重组(≥20kg、≥10kg至<20kg和<10kg)用作额外的分层因子。SARS-COV-2的局部诊断测定必须被认为是按照当地标准是临床使用可接受的。
基于中心实验室确定的病毒阳性和血清学状态，在每个队列中分别进行统计分析。将受试者以1:1的分配比随机化到2个治疗组之一(安慰剂或mAB10933+mAb10987[1200mg(每种mAb 600mg，皮下注射(SC)])。在本研究之前，对来自其他研究的数据进行了安全性审查：在用mAb10933+mAb10987治疗COVID-19患者的领先1期研究中，用mAb10933+mAb10987 2400mg IV、mAb10933+mAb10987 8000mg IV或安慰剂对前哨安全组的30名患有COVID-19的患者进行给药。
前哨组(第1天至第4天)—本研究的招募分两个阶段进行：由大约30名成人受试者组成的前哨组，不考虑是分配到队列A还是队列B。
受试者在接受第一剂量的研究药物施用后将接受至少4小时的现场安全性监测，然后在前4天(96小时)每天通过对研究现场的访视或电话呼叫接受监测。由于mAb10933+mAb10987已在IV施用更高剂量时清除了成人前哨安全组，因此本研究中的前哨组重点关注注射部位反应和超敏反应的安全性评价，并在继续招募额外的研究受试者之前审查数据。盲法安全性数据审查由Regeneron临床团队的指定成员(通常为医学监查员或临床试验经理)负责。在盲法安全数据审查得出研究可继续进行的结论后，研究恢复招募。
儿童前哨受试者和交错招募/给药—招募大约100名跨所有体重分层剂量范围的儿童受试者。然而，由于儿童受试者(<12岁)的招募在成人和青少年受试者的招募完成后结束，因此儿童受试者的数量可能会有所调整。本研究中儿童受试者的招募分两个阶段进行：
前哨组包括12名儿童受试者(按IWRS指定的受试者编号；不考虑是分配到队列A1还是队列B1)，在3个体重组中(≥20kg；10kg至20kg；<10kg)。每个体重组具有按1:1随机化的4名受试者。在体重组中的所有4名受试者完成前哨审查后，该体重组中受试者的招募继续进行。儿童受试者在接受研究药物施用后将接受至少2小时的现场安全性监测，然后在前4天(96小时)每天通过对研究现场的访视或电话呼叫接受监测。由于REGN10933+REGN10987已在先前研究中IV施用更高剂量时清除了成人前哨安全队列并且在本研究中清除了成人前哨安全队列，因此本研究中的儿童前哨组重点关注注射部位反应和超敏反应的安全性评价。在继续招募额外的儿童受试者之前对数据进行审查。盲法安全性数据审查由Regeneron临床团队的指定成员(通常为医学监查员或临床试验经理)负责。在盲法安全数据审查得出研究可针对体重组继续进行的结论后，该体重组中的儿童受试者的招募恢复，直到每个体重组(<10kg、10kg至20kg、≥20kg)招募大约25名受试者。
评价来自每个体重组的大约前20名个受试者的PK数据，以确认该重量组的剂量提供了预期的暴露。一旦确认剂量，该体重组的超过25名受试者的招募就继续进行。如果需要调整特定组的给药，则对该体重组应用新剂量，并且检查该重量组的接受新剂量的接下来20名受试者的暴露。
在受试者提供知情同意后，对他们进行研究资格评估。筛选访视和随机化访视应在同一天进行。如果需要的话，在研究药物施用前一天但在24小时内进行远程访视，以签署知情同意书(ICF)并收集病史和伴随用药，这样，出于COVID-19的考虑，可简化亲自筛选和随机化访视。研究药物施用必须在收集指示病例的阳性SARS-CoV-2诊断检测样本后96小时内进行。在第1天，在随机化前，对适当样本进行SARS-CoV-2局部分子诊断测定。这些测定的结果用作治疗组(安慰剂或mAb10933+mAb10987)随机化的分层因子。当预期结果无法以及时方式用于随机化时，放弃对SARS-COV-2进行局部诊断测定的要求。还收集了用于中心实验室SARS-CoV-2 RT-qPCR检测的鼻咽(NP)拭子样本(通过两个鼻孔擦拭)和用于中心实验室血清学检测的血液样本，并于收集当天送到中心实验室。在第1天，在完成基线评估和样本收集之后，所有受试者接受单剂量的研究药物。
疗效评估期(第1天至第29天)—在整个疗效评估期(EAP)的指定时间点进行疗效、安全性、样本收集和其他研究评估。如果受试者能够出行并且可在这样做的同时维持社交距离指南，则进行后续现场访视；可替代地，可利用远程医疗访视、电话呼叫、移动设备或家庭保健护士。在整个研究过程中，生物样本由经过充分培训和授权的研究人员在可使用适当个人防护设备(PPE)的研究地点获取。
指示受试者与研究现场人员联系，以获取可能与COVID-19相关的任何新的或改变的症状或体征，包括发烧。研究者建议受试者(他们自己或他们的父母/监护人)在EAP期间每天大约在同一时间以及每次受试者感到发烧、发冷或恶心时测量其体温。受试者和/或他们的父母/监护人可能已经接收到自动提醒(例如，到移动电话的文本消息；只要技术上可行且受试者确认选择加入时便实施)，以提示他们在需要时联系研究现场的工作人员。
在每周访视时，收集NP拭子样本用于在中心实验室检测的SARS-CoV-2 RT-qPCR。研究者或指定人员每周联系一次每位受试者(现场访视或远程医疗)，以评估受试者的总体健康状况，并记录总体的所有AE，以及自上次联系以来与SARS-CoV-2感染相关的任何体征和症状。
任何出现发烧、急性呼吸道疾病或其他他们认为可能与COVID-19相关的症状的受试者应立即通知研究人员。如果研究者或指定人员怀疑SARS-CoV-2感染，应该收集NP拭子样本并送到中心实验室进行检测。如果血液样本对应于预定的访视，也可以要求受试者提供血液样本。
在EAP期间有经实验室确认的SARS-CoV-2感染的受试者应被尽快通知，并且应进行医学隔离以防止与其他人接触以降低进一步传播的风险。由于受试者很可能被分离，因此研究访视、评估和样本收集通过多种方法进行。
对于已确认SARS-CoV-2感染的所有受试者，他们继续接受检测(每周收集样本)，直到间隔≥24小时连续2次SARS-CoV-2 RT-qPCR检测结果确认为阴性。此检测可能会持续整个EAP并进入随访期。
根据主治医生的判断，患有急性疾病的受试者应根据当地护理标准接受医疗管理。如果受试者因疑似SARS-CoV-2感染而住院，则现场人员应尽一切努力尽快收集鼻拭子和/或唾液样本，用于中心实验室SARS-CoV-2RT-qPCR检测。
随访期(第30天至第225天)—在整个EAP期间保持SARS-CoV-2RT-qPCR阴性的受试者完成EAP结束，并进入随访期，为期7个月。
在EAP期间变成SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性的受试者继续每周采集NP拭子样本进行SARS-CoV-2 RT-qPCR检测，直到至少相隔24小时获得2次确认阴性的SARS-CoV-2 RT-qPCR检测结果，即使在他们完成EAP并进入为期7个月的研究随访期之后。在这种情况下，对样本收集的这些访视应被表征为未预定的访视。在每次预定访视时，研究者或指定人员联系每位受试者(现场访视或远程医疗)以评估和记录受试者的总体健康状况、总体的AE以及自上次联系以来与SARS-CoV-2感染相关的体征和症状，如针对EAP所述。
研究持续时间：对于每个受试者，存在3个研究阶段：1天的筛选/基线期、1个月的EAP和EAP结束后7个月的随访期。
研究群体：研究群体包括无症状健康成人(≥18岁)、青少年(≥12岁至<18岁)和儿童(<12岁)，他们是被诊断为SARS-CoV-2感染的第一个家庭成员(指示病例)的家庭接触者。
队列和样本量—队列A：招募了基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阴性的大约1980年成人和青少年受试者。队列B：招募了基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阳性的大约220名成人和青少年受试者。队列A1：招募了基线时SARS-CoV-2RT-qPCR呈阴性的大约90名儿童受试者(<12岁)。队列B1：招募了基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阳性的大约10名儿童受试者(<12岁)。
入选标准—受试者必须符合以下标准才有资格入选研究：
1.签署知情同意书时18岁及以上的成人受试者(不考虑体重)，或签署同意书时≥12岁至<18岁的青少年受试者或<12岁的儿童受试者(父母/监护人签署知情同意书)；
2.与SARS-CoV-2 RT-PCR测定呈阳性的个体(指示病例)持续接触的无症状家庭接触者。为了纳入研究，受试者必须在收集到指示病例的阳性SARS-COV-2诊断检测样本的96小时内进行随机化；
3.受试者预期在研究第29天之前与指示病例生活在同一家庭中；
4.经研究者基于病史和筛选/基线时的体检判断其健康状况良好，包括健康或患有慢性、稳定医学病症的受试者；
5.愿意并且能够遵守研究访视和研究相关程序/评估；
6.提供研究受试者或法定代理人签署的知情同意书。
排除标准：满足以下标准中的任何标准的受试者将被排除在这项研究之外：
1.受试者在筛选前的任何时间报告了先前SARS-CoV-2 RT-PCR检测阳性或SARS-CoV-2血清学检测阳性的病史；
2.受试者曾与以前感染过SARS CoV-2的人一起生活过，或目前与感染SARS CoV-2的人一起生活，但指示病例除外，该病例是家庭中已知的第一个受感染的人；
3.符合COVID-19的活动性呼吸道或非呼吸道症状；
4.研究者认为，筛选前6个月内有SARS CoV-2感染体征/症状的呼吸道疾病史；
5.疗养院居民；
6.任何体检结果和/或任何疾病史、伴随药物或最近的活疫苗，在研究的研究者看来，可能会混淆研究结果或因受试者参与研究而对其造成额外风险；
7.目前住院或筛选访视后30天内因任何原因住院(即，>24小时)；
8.有明显的多次和/或严重过敏(例如，胶乳手套)史，或者对处方或非处方药物或食物有过敏反应。这是为了避免安全性分析的可能混淆，而不是因为这些个体对研究药物反应的任何假定风险增加；
9.在筛选访视前的最后30天内或在研究药物的5个半衰期内(以较长者为准)使用另一种研究药剂进行治疗；
10.接受研究或批准的SARS-CoV-2疫苗；
11.接受用于SARS-CoV-2感染预防的研究或批准的被动抗体(例如，恢复期血浆或血清、单克隆抗体、超免疫球蛋白)；
12.在筛选后60天内，使用羟氯喹/氯喹预防/治疗SARS-COV-2，或使用抗SARS病毒剂(例如，瑞德西韦)(允许将羟氯喹/氯喹用于其他目的)；
13.临床现场研究团队成员和/或直系亲属；
研究治疗：成人和青少年受试者(≥12岁)在第1天接受mAb10987和mAb109331200mg(每种mAb 600mg)/SC/单剂量，或在第1天接受匹配溶液/SC/单剂量。儿童受试者(<12岁)在第1天按体重分层组接受SC/单剂量(肌肉注射剂可用于<10kg的儿童受试者)：
表8：儿童受试者体重分层组
终点：针对每个队列指定主要终点和次要终点，如下文所定义。在EAP期间，通过中心实验室SARS-CoV-2 RT-qPCR结果阳性确定有症状SARS-CoV-2感染，其中在RT-qPCR阳性的±14天内出现体征/症状。上文提到了SARS-CoV-2感染的“狭义”和“广义”体征/症状的定义。除非另有说明，否则终点针对基线时血清阴性(基于中心实验室检测)的受试者。
主要终点
队列A和队列A1：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阴性
队列A主要疗效终点
·在疗效评估期(EAP)期间，有经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染(无症状或有症状)的受试者的比例。
队列A和队列A1主要安全终点
·治疗期不良事件(TEAE)的受试者的比例以及TEAE的严重程度
次要终点
队列A和队列A1：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阴性
队列A和队列A1次要疗效终点
·在EAP期间有经RT-qPCR确认的有症状SARS-CoV-2感染(广义)的受试者的比例
·在EAP期间SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性且不存在体征和症状(狭义)的受试者的比例
·在EAP期间SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性且不存在体征和症状(广义)的受试者的比例
·从与EAP期间出现的第一次SARS-CoV-2 RT-PCR阳性相关的第一个体征或症状的第一天到最后一个体征或症状的最后一天的有症状SARS-CoV-2感染(狭义)的天数
·从与EAP期间出现的第一次SARS-CoV-2 RT-PCR阳性相关的第一个体征或症状的第一天到最后一个体征或症状的最后一天的有症状SARS-CoV-2感染(广义)的天数
·从鼻咽(NP)拭子样本中第一次SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性(在EAP期间出现)到在包括EAP期间阳性检测后22天的窗口内的访视的病毒脱落的时间加权平均值(log10拷贝/mL)
·在EAP期间出现的RT-qPCR阳性结果≥1的个体中，NP拭子样本中的最大SARS-CoV-2 RT-qPCR log10病毒拷贝/mL
·从EAP期间出现的NP拭子样本中第一次SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性到第一次确认阴性检测的病毒脱落(log10拷贝/mL)的曲线下面积(AUC)
·与EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视次数
·与EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的需要急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视的受试者比例
·与EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的住院受试者的比例
·因在EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而住院的受试者的住院和重症监护室(ICU)入住天数
·因在EAP期间出现的经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而造成的日常工作(包括工作(就业成人)或学校(学生)、日托或家庭义务/责任(儿童保育或老人护理))缺勤的天数
附加队列A1次要疗效终点
·在EAP期间有经RT-qPCR确认的阳性SARS-CoV-2感染(基于中心实验室检测)的受试者的比例
队列A和队列A1次要安全终点
·出现TEAE的基线血清阳性受试者(基于中心实验室检测)的比例以及TEAE的严重程度
·在EAP和随访期中，血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中有症状SARS-CoV-2感染的发生率和严重程度
队列A和队列A1药代动力学和免疫原性终点
·血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)的血清中mAb10933+mAb10987随时间变化的浓度以及选定的PK参数
·在血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中，如通过针对mAb10933+mAb10987的抗药物抗体(ADA)和中和抗体(Nab)随时间变化所测量的免疫原性
队列B和队列B1：基线时SARS-CoV-2 RT-qPCR呈阳性
队列B次要疗效终点
·在EAP期间RT-qPCR阳性的14天和28天内随后出现有症状SARS-CoV-2的体征和症状(狭义)的受试者比例
·在EAP期间RT-qPCR阳性的14天和28天内随后出现有症状SARS-CoV-2感染的体征和症状(广义)的受试者比例
·有症状SARS-CoV-2感染(狭义)的天数
·有症状SARS-CoV-2感染(广义)的天数
·NP拭子样本中病毒脱落自基线到第23天的时间加权平均变化(log10拷贝/mL)。
·到第一次确认阴性检测为止NP拭子样本中病毒脱落(log10拷贝/mL)的曲线下面积(AUC)
·NP拭子样本中的最大SARS-CoV-2 RT-qPCR log10病毒拷贝/mL
·与经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视次数
·与经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的需要急诊室或紧急护理中心的医疗护理访视的受试者比例
·与经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染有关的住院受试者的比例
·因经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而住院的受试者的住院和ICU入住天数
·因经RT-qPCR确认的SARS-CoV-2感染而造成的日常工作(包括工作(就业成人)或学校(学生)或家庭义务/责任(儿童保育或老人护理))缺勤的天数
队列B和队列B1次要安全终点
·血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中均出现治疗期不良事件(TEAE)的受试者比例以及TEAE的严重程度
·在EAP和随访期中，血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中作为监测ADE证据的有症状SARS-CoV-2感染的发生率
队列B和队列B1药代动力学和免疫原性终点
·血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)的血清中mAb10933+mAb10987随时间变化的浓度以及选定的PK参数；在血清阴性和血清阳性受试者(基于中心实验室检测)中，如通过针对mAb10933+mAb10987的抗药物抗体(ADA)和中和抗体(Nab)随时间变化所测量的免疫原性
程序和评估：
疗效程序：
鼻咽拭子SARS-CoV-2 RT-qPCR检测(中心实验室)：从受试者收集鼻咽拭子样本以确定SARS-CoV-2病毒的存在或不存在，并确定病毒RNA脱落的相对定量。
COVID-19症状学(广义和狭义)：在每个预定或未预定的访视/接触期间，研究者询问受试者和/或受试者的父母或监护人有关受试者正在经历或自上次访视/接触以来已经历的不良事件(例如，如果是每周一次的预定访视，则在上周内)，并且询问与这些不良事件相关的所有体征和症状，包括每个不良事件的开始日期、结束日期和严重程度。
医疗护理访视：向变成SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性的受试者和/或其父母/监护人(视情况)询问任何SARS-CoV-2感染相关的ED、UCC或住院的医疗护理访视。从受试者首次变成SARS-CoV-2 RT-qPCR阳性或出现疑似COVID-19症状(随后通过RT-qPCR阳性结果确认)开始，直到受试者出现2次阴性检测结果或COVID-19相关症状消退(以持续时间较长者为准)或直到研究访视结束，对ED、UCC或住院的医疗护理访视进行评估。
缺勤评估：向在EAP期间SARS-CoV-2 RT-PCR呈阳性或变成阳性的受试者和/或他们的父母/监护人询问任何SARS-CoV-2感染相关的缺勤。数据包括缺勤，定义为因COVID-19而造成的日常工作(包括工作(就业成人)或学校(入学学生)、日托或家庭义务/责任(儿童保育或老人护理))缺勤的天数。
安全程序：
有针对性的体检和生命体征：有针对性的体检和生命体征包括温度、血压(在受试者安静休息至少5分钟后测量，并且可从坐位或仰卧位置获得)、脉冲速率和呼吸速率的测量，以及口咽、皮肤、心脏、肺和任何其他系统的检查，具体取决于受试者表达的任何抱怨或担忧。
实验室检测：收集并分析血液化学、血液学和尿液分析样本。对于有生育能力的所有女性，在现场进行尿液妊娠检测，并在中心实验室用血清妊娠检测确认尿液妊娠检测。
其他程序：
药物浓度和免疫原性测量：在受试者的子集中进行了用于药物浓度测量的致密样本和稀疏样本收集。在整个研究过程中的不同时间收集用于抗药物抗体(ADA)评估的样本。
内源性抗SARS-CoV-2抗体的血清学测定：为了评估SARS-CoV-2基线体液免疫/抗体反应对mAb10933+mAb10987疗效的影响以预防SARS-CoV-2感染，测量基线时的血清抗SARS-CoV-2，包括但不限于检测针对S蛋白和/或N蛋白质和/或中和测定的抗体的那些血清抗SARS-CoV-2。从成人和儿童受试者(<18岁)收集样本。
用于研究的探索性药效动力学/生物标志物和血清/血浆样本：从成人和青少年受试者收集用于评估药效动力学和探索性研究的样本。
药物基因组学分析(可选)：成人和青少年受试者可能已经参与了任选的基因组学亚研究(需要单独的知情同意书)。收集RNA和DNA的血液样本用于该亚研究。
统计计划：
主要疗效分析(队列A)—在FAS-A群体中分析主要疗效终点。为了说明家庭内受试者之间的相关性并控制相关的1型错误膨胀，使用广义线性模型，以通过使用广义估计方程(GEE)方法来估计治疗组之间的比值比。此模型估计了单一的家庭内相关系数。
如果他们的任何结果为阳性，则认为受试者为RT-qPCR阳性。否则，他们被认为是阴性的。如果由于所有缺失的RT-qPCR结果而无法确定受试者的感染状态，则以下规则适用于主要分析。如果所有基线后RT-qPCR结果缺失，则该受试者被视为RT-qPCR阳性。如果受试者在计划访视的±14天内至少出现1次COVID-19体征和症状(狭义)并且RT-qPCR结果缺失，则该受试者被视为RT-qPCR阳性。
安全性分析—通过对治疗期不良事件(TEAE)列表总结了安全性和耐受性。
结果—对试验中招募的首批409名可评估受试者进行了探索性分析，这些受试者随机接受采用mAb10933和mAb10987(此处统称为REGEN-COVTM)(通过皮下注射1200mg)或安慰剂的被动疫苗接种。这409名在试验早期招募的可评估参与者在基线时没有COVID-19并且是“血清阴性的”，这意味着他们的血液中没有针对SARS-CoV-2的现有抗体。如果个体有患有COVID-19的家庭成员，则该个体有资格参与试验。参与者每周接受鼻咽拭子检测。结果证实了REGEN-COV预防无症状和有症状的COVID-19感染作为主要终点的能力。
初步结果：
·用REGEN-COVTM进行的被动疫苗接种得到100％预防RT-PCR阳性有症状感染(8/223安慰剂对比0/186REGEN-COVTM；比值比0.00(置信区间0.00,0.69))，以及降低48％的总体感染率(有症状和无症状)(23/223安慰剂对比10/186REGEN-COVTM；比值比0.49(置信区间0.20,1.12))(下表9)。
表9：初步结果
ND：未确定。
·采用REGEN-COVTM疗法发生的感染数量较低，均无症状，病毒峰值水平降低，病毒脱落持续时间短。
ο安慰剂组中发生的感染具有平均超过100倍的峰值病毒载量。
οREGEN-COVTM组中的感染持续不超过1周，而安慰剂组的大约40％的感染持续3-4周(图30)。
ο没有感染的REGEN-COVTM组病毒载量很高(>10^4拷贝/mL)，而感染的安慰剂组的病毒载量仅为其62％(13/21安慰剂对比0/9REGEN-COVTM)。
οREGEN-COVTM与可评估受试者中总体感染的减少和高病毒载量感染(>104)的完全消除相关
·安慰剂组和REGEN-COVTM组之间感染时的RT-qPCR水平降低(下表10)。
表10：RT-qPCT的水平
·REGEN-COVTM与较低的疾病负担相关：
ο总体病毒脱落周数减少(安慰剂组44周对比REGEN-COVTM组9周)
ο总体高病毒脱落周数减少(>10^4拷贝/mL)(安慰剂组22周对比REGEN-COVTM组0周)
ο总体症状周数减少(安慰剂组21周对比REGEN-COVTM组0周)。
·REGEN-COVTM耐受良好，其中类似比例的参与者经历至少一种严重不良事件：安慰剂组4/286，REGEN-COVTM组3/267。没有事件被认为与研究治疗相关。注射位点反应类似：安慰剂组，1.4％；REGEN-COVTM组，2.6％。
在首批409名参与者中，大约49％是西班牙裔，13％是非裔美国人。参与者平均年龄为43岁，大约46％为男性，54％为女性。
结果：3期预防试验(2069A)—此试验显示，在皮下施用REGEN-COVTM(卡西瑞单抗与伊德维单抗)的情况下，有症状SARS-CoV-2感染风险降低了81.4％(图72)。REGEN-COV起效迅速，在第一周对有症状感染有72％的保护，在随后的几周上升到93％。在仍然经历有症状感染的个体中，接受REGEN-COV治疗的个体清除病毒更快，症状持续时间明显更短(接受REGEN-COV治疗的症状总周数减少93.1％，对应于每个有症状感染参与者的平均症状持续时间减少2周)。采用REGEN-COV的任何感染(有症状或无症状)风险相对降低了66.4％，采用REGEN-COV的任何感染的总周数减少了82.3％，对应于每个受感染参与者的任何感染的平均持续时间减少了大约1周。采用REGEN-COV的高病毒载量感染发生率的风险相对降低了85.8％。采用REGEN-COV的高病毒载量感染的总周数减少了89.6％，对应于每个受感染参与者的高病毒载量感染持续时间平均减少了大约6天。
此试验符合其主要终点和关键次要终点，表明REGEN-COV将那些进入试验时未感染的人的有症状感染风险降低了81％。具体地，双盲、安慰剂对照的3期试验评估了REGEN-COV对与在前4天内SARS-CoV-2检测呈阳性的个体生活在同一家庭但没有任何COVID-19症状的个体的影响。该试验包括1,505名基线时未感染SARS-COV-2的人，他们接受了1剂皮下注射方式施用的REGEN-COV(1,200mg)或安慰剂。
数据表明，REGEN-COV保留了其对新出现的COVID-19变体的效力，可补充广泛的疫苗接种策略，特别是对那些感染风险高的人。尽管采取了标准预防措施来减少传播，但如果与感染个体一起生活的人没有接受REGEN-COV治疗，则他们中的近10％出现有症状感染。方便的皮下施用REGEN-COV可有助于控制在个体尚未接种疫苗的高风险环境(包括个体家庭和集体生活环境)中的疫情爆发。此外，仍有大量的人尚未接种疫苗，并且由于高风险暴露而需要立即得到保护，而传统疫苗在如此晚的阶段无法使用。本研究中提供的数据表明，REGEN-COV在这种情况下可能非常有效。此外，存在许多可能对疫苗没有反应的个体，例如免疫功能低下的个体，包括已有实体器官移植物和正在接受实体器官移植治疗的个体，以及患有某些癌症和免疫性疾病的个体。REGEN-COV的快速保护以及它可用于慢性预防的可能性，也可在这种情况下提供重要的解决方案。
表11：总结：有症状SARS-CoV-2感染中来自3期预防试验的关键结果1
1.基于血清阴性的修改的全分析集群体，包括SARS-CoV-2 RT-qPCR检测呈阴性并且在随机化时SARS-CoV-2抗体检测呈阴性的所有随机化受试者。
表12：详细的主要疗效终点和关键次要疗效终点*
*关键次要终点，按层级检验序列的顺序呈现
§基于分层Wilcoxon秩和检验(Van Elteren检验)，以地区(美国与美国以外)和年龄组(12岁至<50岁与≥50岁)为分层变量。
||基于每1000名参与者的归一化周数。
SC，皮下；SD，标准偏差。
在20％(n＝265)的REGEN-COV参与者和29％(n＝379)的安慰剂参与者中出现不良事件(AE)，并且在1％(n＝10)的REGEN-COV参与者和1％(n＝15)的安慰剂参与者中出现严重AE。有0名REGEN-COV参与者和4名安慰剂参与者经历COVID-19住院或急诊室访视。各组均无个体因AE退出试验，试验中的死亡(2例为REGEN-COV，2例为安慰剂)不是由COVID-19或研究药物造成。
表13.在总体研究期间≥2％的参与者发生治疗期不良事件
SC，皮下。
为了符合REGEN-COV联合Regeneron/NIAID计划的资格，所有参与者在没有任何COVID-19症状(无症状)的情况下进入该计划，并与在前4天内SARS-CoV-2检测呈阳性的个体生活在同一家庭。使用来自鼻咽拭子的RT-qPCR检测对所有参与者进行基线时SARS-CoV-2检测。具有阴性检测结果的参与者加入3期预防试验(2069A)，并且具有阳性检测结果的参与者加入3期治疗试验(2069B)，如下文所述。
然后所有参与者随机(1:1)接受1剂REGEN-COV(1,200mg)或安慰剂，通过4次SC注射施用。在试验招募的参与者中，31％是拉丁裔/西班牙裔，9％是黑人/非洲裔美国人。总的来说，31％的参与者至少有一个已知因素使他们处于遭受COVID-19严重后果的高风险中，如REGEN-COV资料单中所定义的。此外，33％的参与者为肥胖的并且38％的参与者年龄为350岁(中值年龄：43岁；范围：12-92岁)。
扩展结果：最近感染的无症状患者的3期治疗试验(2069B)—该试验显示显著减少了向有症状COVID-19的进展。该第二个3期试验的结果评估了最近感染的无症状患者，评价了通过皮下(SC)施用进行施用1,200mg REGEN-COVTM(卡西瑞单抗与伊德维单抗)。REGEN-COV将进展为有症状COVID-19的总体风险降低了31％(主要终点)，并且在第三天后降低了75％。试验还表明，REGEN-COV缩短了症状持续时间并显著降低了病毒水平。这项试验是由美国国立卫生研究院(NIH)下属的国家过敏和传染病研究所(NIAID)联合进行的。试验招募了207名没有任何COVID-19症状且在基线时SARS-COV-2检测呈阳性的个体，并且这些个体随机接受1剂REGEN-COV(1,200mg)或安慰剂。
因为COVID-19传播经常发生在尚未出现症状的人群中，所以本研究的结果表明，REGEN-COV可以更方便的皮下施用方式用于此类患者。
该第二个3期试验符合所有主要终点和关键次要终点。除了降低有症状感染的风险之外，使用REGEN-COV的患者出现症状的总周数几乎减少了一半(45％)，并且病毒负荷降低了90％以上。研究人员还发现，接受REGEN-COV治疗的参与者中没有人需要COVID-19相关的住院或急诊室访视，相比之下，安慰剂组则有6人。在疗效评估期期间，用1200mg REGEN-COV皮下(SC)治疗导致无症状感染进展为有症状感染的相对风险降低31.5％(29/100[29.0％]，而安慰剂组为44/104[42.3％]；p＝0.0380)，在REGEN-COV施用3天或更长时间后具有更显著的效果(相对风险降低76.4％)(图73)。在出现症状感染的73名家庭接触者中，与安慰剂组相比，REGEN-COV组有症状的周数减少了45.3％(每1000名参与者)；这对应于每名有症状参与者的症状的平均周数减少了大约1周。高病毒载量的周数减少了39.7％，这相当于每名参与者减少了大约2天。与REGEN-COV组的参与者相比，安慰剂组中有更高比例的参与者发生≥1次治疗期不良事件，这与接受安慰剂的参与者中有更高数量的COVID-19相关事件一致。
数据建立在实施例2和7中讨论的非住院COVID-19患者的结果上。在高风险有症状的门诊患者中进行的3期结果试验表明，REGEN-COV(2,400mg和1,200mg静脉内[IV]施用)将住院或死亡减少了70％(实施例2)。在低风险门诊患者中进行的2期病毒学试验表明，所有研究的REGEN-COV剂量在快速降低病毒载量方面具有相似的疗效(IV：2,400mg、1,200mg、600mg和300mg；SC：1,200mg和600mg)(实施例7)。
这些3期数据提供了甚至更多证据，表明这次通过方便注射给予无症状患者的REGEN-COV可改变非住院患者的COVID-19感染过程，预防无症状患者变成有症状，并快速降低其病毒载量。
表14：主要疗效终点和关键次要疗效终点的总结
*主要终点。
§基于分层Wilcoxon秩和检验(van Elteren检验)，以地区(美国与美国以外)和年龄组(12岁至<50岁与≥50岁)为分层变量。
CI，置信区间；EAP，疗效评估期；NP，鼻咽；RT-qPCR，定量逆转录聚合酶链反应；
SC，皮下；SD，标准偏差。
O不包括第1-3天的结果，此时治疗组之间的事件相似
X不是统计层级的一部分，因此p值是名义值
在33％(n＝52)的REGEN-COV患者和48％(n＝75)的安慰剂患者中出现不良事件(AE)，并且在0％(n＝0)的REGEN-COV患者和3％(n＝4)的安慰剂患者中出现严重AE。各组均无患者因AE退出试验，并且没有死亡。
表15：总体研究期间的治疗期不良事件的概述
*等级≥3的注射部位反应或超敏反应。
AESI，特别关注的不良事件；SC，皮下；TEAE，治疗期不良事件。
为了符合该临床试验的资格，所有参与者在没有任何COVID-19症状(无症状)的情况下进入该计划，并与在前4天内SARS-CoV-2检测呈阳性的个体生活在同一家庭。使用来自鼻咽拭子的RT-qPCR检测对所有参与者进行基线时SARS-CoV-2检测。具有阴性检测结果的参与者加入如上文所述的3期预防试验(2069A)，并且具有阳性检测结果的参与者加入3期治疗试验(2069B)。
然后所有参与者随机(1:1)接受1剂REGEN-COV(1,200mg)或安慰剂，通过4次SC注射施用。在试验招募的参与者中，35％是拉丁裔/西班牙裔，5％是黑人/非洲裔美国人。总的来说，32％的参与者至少有一个已知因素使他们处于遭受COVID-19严重后果的高风险中，如REGEN-COV资料单中所定义的。此外，32％的参与者为肥胖的并且34％的参与者年龄为≥50岁(中值年龄：41岁；范围：12-87岁)。
这两个3期试验(2069A和2069B)的结果也在图59、图60、图61、图62、图63、图64、图65、图66、图67、图68、图69、图70和图71中示出。
实施例5.抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在SARS-CoV-2感染的恒河猴和金仓鼠中
的疗效
由于COVID-19的动物模型仍在积极开发中，还没有出现一个与人类疾病更相关的模型。实际上，基于COVID-19在人类中的不同表现，可能需要多种动物模型来模拟人SARS-CoV-2感染的各种情况。在以下研究中，使用了两种不同的模型来获取SARS-CoV-2感染的多种病理学。恒河猴模型广泛用于评估治疗剂和疫苗的疗效，并显示短暂的轻度病程。相反，金仓鼠模型则表现出严重得多的疾病形式，并伴有严重的肺部病变。在这两种模型中评估抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体的疗效，允许比较抗体在多种疾病环境中的表现，从而更全面地了解抗体疗法可限制受感染个体的病毒载量和病理学的机制。
在本实施例讨论的研究中，施用于动物的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体是由靶向SARS-CoV-2刺突蛋白上非重叠残基的两种有效中和抗体(mAb10987+mAb10933)构成的组合治疗剂，并且使用以下测定和程序：
(I)SARS-CoV-2 RNA的定量RT-PCR测定。使用qRT-PCR测定确定每毫升体液或每克组织的RNA拷贝的量。qRT-PCR测定利用引物和专门设计的探针来扩增并结合冠状病毒核衣壳基因的保守区域。将信号与已知的标准曲线进行比较，并计算得出拷贝/mL。对于qRT-PCR测定，首先使用Qiagen MinElute病毒旋转试剂盒(目录号57704)从鼻洗液中分离出病毒RNA。对于组织，用RNA-STAT 60(Tel-test”B”)/氯仿提取，沉淀并重悬于不含RNA酶的水中。为了产生扩增反应的对照，使用相同的程序从适用的SARS-CoV-2原液中分离RNA。用Applied Biosystems 7500序列检测器进行qPCR测定，并且使用以下程序进行扩增：48℃30分钟，95℃10分钟，然后95℃15秒进行40个循环，55℃1分钟。通过从标准曲线外推并乘以0.2mL提取体积的倒数来计算RNA拷贝数/mL。这给出了对于鼻洗液或每克组织为50至5×108个RNA拷贝/mL的实际范围。
引物/探针序列：
2019-nCoV_N1-F:5’-GAC CCC AAA ATC AGC GAA AT-3’(SEQ ID NO:63)
2019-nCoV_N1-R:5’-TCT GGT TAC TGC CAG TTG AAT CTG-3’(SEQ ID NO:64)
2019-nCoV_N1-P:5’-FAM-ACC CCG CAT TAC GTT TGG TGG ACC-BHQ1-3’(SEQ IDNO:65)。
(II)SARS-CoV-2亚基因组RNA的定量RT-PCR测定。使用本领域已知的引物和探针通过RT-PCR评估SARS-CoV-2E基因亚基因组mRNA(sgRNA或sgmRNA)。简而言之，为了产生标准曲线，将SARS-CoV-2E基因sgRNA克隆到pcDNA3.1表达质粒中；使用AmpliCap-Max T7高产量MessageMaker试剂盒(Cellscript)转录该插入物，以获得标准品的RNA。在RT-PCR之前，根据制造商的说明，使用Superscript III VILO(Invitrogen)逆转录从受攻击的动物或标准品收集的样本。使用靶向E基因sgRNA20的序列设计Taqman定制基因表达测定(ThermoFisher Scientific)。根据制造商的说明书，在QuantStudio 6和7Flex实时PCR系统(Applied Biosystems)上进行反应。标准曲线用于计算sgRNA，单位为每毫升或每个拭子的拷贝数；定量测定灵敏度为每毫升或每个拭子50个拷贝。这给出了对于鼻洗液为50至5×10^7个RNA拷贝/mL的实际范围，对于组织则单位为病毒载量/克。
亚基因组RNA引物：
SG-F：CGATCTTGTAGATCTGTTCCTCAAACGAAC(SEQ ID NO:66)
SG-R：ATATTGCAGCAGTACGCACACACA(SEQ ID NO:67)
探针：FAM-ACACTAGCCATCCTTACTGCGCTTCG-BHQ(SEQ ID NO:68)
(III)细胞和病毒。将Vero E6细胞(VERO C1008，目录号NR-596，BEI resources)在37℃和5％ CO2下在Dulbecco改良基础培养基(DMEM；Gibco)中培养，该培养基含有10％加热灭活的胎牛血清(FBS；Gibco)。SARS-CoV-2分离株USA-WA1/2020(BEI resources NR-52281，GenBank登录号MN985325.1)用于产生动物暴露原液。获得SARS-CoV-2的第四代细胞培养物(P4)并繁殖。将从BEI获得的第四代细胞培养物(P4)原种病毒通过以下方式传代一次以产生主原液：在含有2％FBS的DMEM中以大约0.001的感染复数(MOI)感染Vero E6细胞；在感染后3天收获病毒上清液。P5原液用于通过如下方式产生暴露原液：在含有2％ FBS的DMEM中以0.02的MOI感染Vero E6细胞；在感染后3天收获病毒上清液。通过深度测序确认该原液是SARS-CoV-2并且确认不含外源因子。病毒滴度被确定为2.1×106PFU/mL。
(IV)用于通过RT-qPCR进行病毒载量测定的RNA提取。使用TRIzol LS分离试剂(Invitrogen)使样本失活：将250μL检测样本与750μL TRIzol LS混合。用每批样本制备灭活对照。在提取之前，将1×103pfu的MS2噬菌体(大肠杆菌噬菌体MS2，ATCC)加入到每个样本中以评估提取效率。使用EpMotion M5073c液体处理器(Eppendorf)和NucleoMag病原体试剂盒(Macherey-Nagel)进行RNA提取。用每批样本制备提取对照。处理后，确认洗脱液的存在并将提取的RNA储存在-80℃±10℃下。
(V)通过RT-qPCR进行病毒载量测定。在双重RT-qPCR反应中使用5μL RNA样本，检测SARS-CoV-2和MS2噬菌体两者。两种测定用于评估样本中存在的SARS-CoV-2。CDC开发的2019-nCoV_N1测定用于靶向N基因的区域。SARS-CoV-2_N1探针(ACCCCGCATTACGTTTGGTGGACC；SEQ ID NO:69)用6-FAM荧光染料标记。所使用的正向引物序列为：GACCCCAAAATCAGCGAAAT(SEQ ID NO:63)，并且所使用的反向引物序列为：TCTGGTTACTGCCAGTTGAATCTG(SEQ ID NO:64)。还进行了用于测量亚基因组RNA的二级qPCR测定以靶向E(包膜)基因的区域。
探针也用6-FAM荧光染料(ACACTAGCCATCCTTACTGCGCTTCG；SEQ ID NO:68)标记。正向引物序列为：CGATCTCTTGTAGATCTGTTCTC(SEQ ID NO:70)，并且反向引物序列为：ATATTGCAGCAGTACGCACACA(SEQ ID NO:71)。用VIC荧光染料标记MS2探针。两种测定均使用TaqPathTM 1步RT-qPCR主混合物CG(ThermoFisher)，并在QuantStudio 3仪器(AppliedBiosystems)上进行。QuantStudio设计和分析软件(Applied Biosystems)用于运行和分析结果。循环参数设置如下：保持阶段，25℃下2分钟，50℃下15分钟，95℃下2分钟。PCR阶段：45个循环(N1测定)或40个循环(E测定)，在95℃3秒，60℃下30秒。针对所有经处理样本和SARS-CoV-2定量计算MS2噬菌体的平均Ct值，其中SARS-CoV-2定量仅在MS2 Ct值低于平均MS2+5％的样本中进行。
(VI)组织病理学。进行尸检并收集选定的组织样本(气管支气管淋巴结、鼻腔、气管、心脏、肝、脾、肾和所有4个右肺叶)。通过在10％中性缓冲福尔马林中浸泡至少14天来固定组织，然后修整、常规处理并包埋在石蜡中。将石蜡包埋组织的切片切成5μm厚，对组织学载玻片进行脱蜡，用苏木精和伊红(H&E)染色，盖上盖玻片并贴上标签。由委员会认证的兽医病理学家对载玻片进行盲法评估。
(VII)病毒RNA测序。通过PureBeads(Roche Sequencing)纯化10μl与25ng人通用参考RNA(Agilent)组合的RNA。按照供应商的方案，使用SuperScriptTMIV第一链合成系统(Thermal Fisher)进行cDNA合成。然后，按照供应商的方案，一半cDNA(10ul)用于使用Swift NormalaseTM Amplicon Panel(SNAP)SARS-CoV-2面板(Swift Biosciences)生成文库。测序在NextSeq(Illumina)上进行，采用2×150个循环的多重配对读段运行。
(VIII)RNAseq数据分析。使用Array Studio软件包平台(Omicsoft)进行RNAseq分析。使用“RNA-Seq数据套件的原始数据QC”评估配对末端RNA Illumina读段的质量。计算最小和最大读段长度、总核苷酸数量和GC％。生成总体质量报告，总结了每个样本中沿着每个碱基对的所有读段的质量。使用Omicsoft序列比对器(OSA)第4版，将Swift扩增子批量RNA-seq读段与SARS-COV-2参考基因组Wuhan-Hu-1(MN908947)进行比对。比对按读段名称排序，并且引物通过互补Swiftbiosciences primerclip软件(V0.3.8)剪切。使用默认参数通过质量分数来修整读段(当比对器在读段中遇到质量分数为2或更低的核苷酸时，它会修整读段的剩余部分)。使用总结变体数据包和注释变体数据包(Omicsoft)分析和注释OSA输出。分析的其余部分集中于编码刺突蛋白的基因组部分。使用自定义脚本，对每个样本的目标覆盖率进行总结，并计算SNP调用。如果突变读段相对于总数读段高于1％，则计算从测序读段推断的病毒突变频率。
部分A—抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在SARS-CoV-2感染的恒河猴中的疗效
为了确定刺突抗体保护恒河猴免受SARS-CoV-2攻击的能力，评估了对用病毒攻击之前施用高剂量抗体的影响。在这项研究中，总共使用了12只印度血统的幼稚恒河猴(目的育种，恒河猴(Macaca mulatta))。基于年龄分布将动物分配到处理组。通过静脉内施用向动物给药50mg/kg剂量的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，并且在抗体给药后3天通过鼻内和气管内途径用1×10^5PFU的病毒进行攻击。由于恒河猴模型中SARS-CoV-2感染的相对短暂性，该研究的活体部分限制为5天。为了确定抗体预防对上气道和下气道中病毒载量的影响，每天收集鼻咽拭子，以及攻击后第1、3和5天的支气管肺泡灌洗(BAL)液(图1A)。测量基因组和亚基因组RNA两者以评估抗体预防对病毒复制动力学的影响。在安慰剂处理的动物中病毒复制的动力学反映了之前报道的那些，在攻击后第2天病毒载量达到峰值，随后迅速下降，尽管大多数动物在第5天的鼻拭子中病毒RNA仍呈阳性。鼻拭子和BAL中sgRNA的动力学类似于gRNA的动力学，表明这两种形式的RNA都可能与这种模型中的病毒复制相关，尽管sgRNA水平显著低于gRNA水平，相差约2个对数。在接受抗体预防的动物中，观在包括鼻拭子和BAL在内的所有测量中观察到病毒载量降低，这表明预防性施用的抗体可减少上气道和下气道中的病毒载量(图1B)。这与先前报道的在瑞德西韦处理的动物中对病毒载量的影响形成对比，其中仅可在下气道中观察到降低的病毒载量，而鼻病毒RNA水平没有差异。
部分B—抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在SARS-CoV-2感染的恒河猴中的疗效和推
定的逃逸突变体的评估
包括高剂量组和低剂量组两者的第二预防研究确认了高剂量抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体的如下能力：即使当用更高剂量(1.05×10^6PFU)的病毒攻击动物时也能够最小化病毒复制(图2A和图2B)。在本研究中使用二十四(24)只恒河猴(13只雌性和11只雄性)，并且随机分配到六个组之一。动物获自西南国家灵长类动物研究中心(SNPRC)聚居地，并且在研究登记时年龄在2.5岁至6岁之间，并且体重为大约3kg至10kg。在研究的第0天，将每只动物暴露于动物生物安全级别4(ABSL-4)实验室中，目标剂量为500μl总体积中的1.05×106PFU的SARS-CoV-2(通过鼻内途径为250μl中的5.25×105PFU，通过气管内途径为250μl中的5.25×105PFU)。鼻内递送通过粘膜雾化装置(Teleflex鼻内粘膜雾化装置LMA MAD鼻用装置)进行，该装置允许递送30-100微米大小的雾化颗粒，这模拟了液滴传递。气管内递送使用气管粘膜雾化装置(Teleflex喉镜-气管粘膜雾化装置LMA MADGIC)。在暴露前3天，预防组动物被镇静并接受处理。在第1天(病毒暴露后)，处理组动物被镇静并接受处理。在大约90秒的过程中通过静脉内注射施用处理。
在本研究中，观察到与鼻咽拭子相比，抗体处理对口腔拭子中病毒载量的影响增加，这表明抗体处理可能不同地影响病毒复制的多种生理来源。在0.3mg/kg的低剂量下，未观察到抗体的保护作用，其中经抗体处理的动物在鼻拭子和口腔拭子两者中均显示与安慰剂动物相似的病毒动力学。
此外，通过对感染后1天用1×10^6PFU的SARS-CoV-2病毒攻击的动物给药，评估抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在处理环境中的影响(图2A)。在攻击后第1天，动物已经达到如通过基因组RNA和亚基因组RNA两者所测量的峰值病毒载量，这模拟了可能的临床情况，因为已经显示大多数SARS-CoV-2感染的个体在疾病过程中相对早期就达到峰值病毒载量，并且通常在症状发作之前或刚刚开始时。相对于安慰剂处理的动物，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体处理的动物在鼻咽和口腔拭子样本(包括基因组和亚基因组RNA样本)中显示出更快的病毒清除(图2C)。类似于预防组，与NP拭子相比，口腔拭子的病毒载量下降更显著。由于150mg/kg组的小组规模较小且第1天病毒载量较高，因此无法得出有关本研究中剂量反应的统计结论。在抗体施用时，150mg/kg组中的动物在第1天表现出大约高1个对数的滴度，因此潜在地掩盖了较高剂量抗体的增强效果。在NP样本和口腔样本两者的基因组和亚基因组RNA上观察到抗体处理的类似影响，表明抗体处理直接限制了这些动物中的病毒复制(图2C)。
受感染动物的肺病理学分析显示，所有四只安慰剂猴子都显示出肺损伤的证据，其中三只猴子的特征为间质性肺炎(图2D)，在隔膜、血管周围间隙和/或胸膜中有极少量至轻度的单核细胞(淋巴细胞和巨噬细胞)浸润。在这三只动物中，病变的分布是多灶性的，涉及4个肺叶中的2-3个。伴随这些变化的是淋巴细胞的肺泡浸润、增加的肺泡巨噬细胞和合体细胞。在偶见的肺泡中也观察到II型肺细胞增生。在第四只安慰剂猴子中，肺损伤限于II型肺细胞增生，表明继发于炎症的修复过程。总的来说，在安慰剂动物中观察到的组织学病变与急性SARS-CoV-2感染一致。
在预防组中，低剂量组合组中4只动物中的3只和高剂量组合组中4只动物中的1只显示出间质性肺炎的证据(表16)，与安慰剂组相比，间质性肺炎通常很少，且组织学特征较少。在一只受感染的高剂量组合组动物中，4个肺叶中的仅1个肺叶具有微小病变。在治疗性处理组中，4只低剂量组合动物中的2只和4只高剂量组合动物中的2只显示出间质性肺炎的证据。在所有受感染的低剂量动物和高剂量动物中，4个肺叶中的仅1个肺叶具有病变。与安慰剂相比，这种间质性肺炎在预防性和治疗性处理方式中的发生率(动物数量以及受感染肺叶的数量)和严重程度降低。下表16示出了用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或安慰剂处理的个体动物中的病理学分数。
表16.恒河猴肺的病理学分析。
表16.续
已证明使用两种靶向刺突蛋白上非重叠位点的抗体可防止选择逃逸突变体，这些突变体很容易通过单一抗体处理检测到。为了评估在真实SARS-CoV-2病毒的体内环境中是否可以观察到任何推定的逃逸突变体迹象，对从本研究中的所有动物获得的所有RNA样本进行了RNAseq分析。对刺突基因序列的分析鉴定了动物样本中不存在于接种病毒中的突变(图3A和图3B)，进一步表明病毒在这些动物中主动复制。未观察到处理的动物特有的突变，因为所有鉴定的突变要么存在于接种物中，要么存在于处理的动物和安慰剂动物中，这表明它们可能被选择作为动物中病毒复制的一部分并且不与抗体处理特异性相关。
部分C—抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在SARS-CoV-2感染的金仓鼠中的疗效
在本研究中使用了总共50只金仓鼠、雄性和雌性，6-8周龄。在研究开始之前对动物进行称重。在研究期间，每天两次监测动物的COVID-19疾病的迹象(皮毛起皱、弯腰驼背、呼吸困难等)。在研究期间每天测量体重一次。抗体通过腹膜内(IP)注射给药。通过将0.05ml病毒接种物逐滴施用到每个鼻孔中，用5.6×10^4PFU的(USA-WA1/2020(NR-52281；BEI Resources))攻击动物。通过从肺中收集两小片(每片0.1-0.2克)(总共4片，每个组织2片)对组织进行取样以进行病毒载量测定。
与感染SARS-CoV-2时出现轻度临床病程并可模拟轻度人类疾病的恒河猴不同，金仓鼠模型更为严重，其中动物表现出易于观察到的临床疾病，包括体重迅速减轻，伴随着非常高的肺部病毒载量，以及严重的肺部病变。因此，此模型可更接近地模拟人类的更严重的疾病。在使用5.6×10^4PFU剂量的SARS-CoV-2病毒攻击之前2天对仓鼠进行预防，在给予的所有剂量的抗体(从50mg/kg到0.5mg/kg)下都产生了显著的防止体重减轻的保护作用。这种保护伴随着研究结束时肺部中的病毒载量降低。观察到几种经处理的动物的肺部中的高gRNA和sgRNA水平；然而，与病毒载量低得多的动物相比，这些个体动物并没有表现出任何减少的防止体重减轻的保护作用。一种解释可以是抗体处理可在该模型中提供与病毒载量降低不直接相关的额外治疗益处。可替代地，增加的病毒RNA可能不一定与感染性病毒相关。由于仓鼠模型中的病毒复制和肺部病变发生得非常迅速，因此处理环境代表了证明治疗疗效的高标准。在病毒攻击后1天用50mg/kg和5mg/kg剂量的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体处理的动物中，观察到明显的治疗益处(图4B)。尽管5mg/kg处理组在研究结束时显示出最快的恢复率，但是这可能是由于这组动物的第1天体重减轻较少，而不是较低剂量的真正增强益处(图4B)。
结果
在这些研究中评估了抗SARS-CoV-2抗体组合在两种动物模型(一种轻度和一种重度)在预防和处理环境中的体内疗效。在两种模型中都证明了疗效，这通过上气道和下气道中病毒载量的减少以及仓鼠模型中有限的体重减轻来衡量。抗体预防对鼻拭子和口腔拭子中病毒RNA水平的影响可能表明不仅可以预防暴露个体的疾病，还可以限制传播。
重要的是，在任一动物模型中，无论是在高剂量还是低剂量的抗体存在下，都没有观察到病毒载量或病变恶化的迹象。疾病的抗体依赖性增强(ADE)的可能性是基于抗体的治疗剂和疫苗的关注点。病毒感染的ADE可在抗体与病毒颗粒结合时发生，并由于通过抗体Fc结构域与Fcγ受体(FCGR)的相互作用内化抗体/病毒复合物而增加感染性。抗体依赖性增强可能导致表达FCGR的细胞类型受到感染，从而可能导致增强的病毒复制、增加的炎症或更严重的疾病。体外ADE研究表明，mAb10987单独或与mAb10933联合介导pVSV SARS-CoV-2S假颗粒进入FCGR2+Raji和FCGR1+/FCGR2+THP1细胞，但不进入任何其他FCGR+测试细胞系(FCGR2+IM9和K562，以及FCGR1+/FCGR2+U937)或FCGR阴性对照细胞系(Ramos)。单独的mAb10933不能介导pVSV SARS-CoV-2S假颗粒进入任何测试细胞系(R10933-PH-20101)。这些数据表明，mAb10987可具有在体外增强病毒进入某些FCGR+细胞的能力。然而，在体内，循环IgG可与抗SARS-CoV-2S蛋白mAb竞争结合到FCGR，使得抗体介导的病毒进入可被抑制。这得到体内动物模型研究的支持，其中没有显示疾病增强的证据。总之，本实施例中提供的数据提供了令人信服的证据，表明基于抗体的疗法(例如，使用mAb10987+mAb10933的抗体混合物)在COVID-19疾病的预防和治疗环境中都提供了临床益处。
实施例6.在成年志愿者中临床评价重复剂量的抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体。
下述临床研究是一项随机、双盲、安慰剂对照的1期研究，旨在评估成年志愿者的重复皮下注射剂量的抗刺突(S)SARS-CoV-2单克隆抗体(mAb10933+mAb10987)的安全性、耐受性、药代动力学和免疫原性。
研究目标：下文阐述了研究的主要目标和次要目标。
主要目标—主要目标是：
·评估与安慰剂相比，用重复皮下注射(SC)剂量的mAb10933+mAb10987治疗的受试者中特别关注的不良事件(AESI)的发生率(在本研究中，AESI定义为3级或更高等级(NCI-CTCAE分级v5.0)注射部位反应或超敏反应，包括但不限于过敏反应、喉/咽水肿、严重的支气管痉挛、胸痛、癫痫发作和严重的低血压)
·评估在单次和重复SC施用后血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
次要目标—次要目标是：
·评估与安慰剂相比，重复SC剂量的mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·评估在单次和重复SC施用后血清中mAb10933和mAb10987的目标浓度的达到情况
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
探索性目标—探索性目标是：
·评估与安慰剂相比，接受重复SC剂量的mAb10933+mAb10987的受试者中的COVID-19发生率
·评估SARS-CoV-2血清转化的发生率
·确定与mAb10933+mAb10987和/或SARS-CoV-2感染的安全性和暴露相关的生物标志物和基因组因素
研究设计：本研究是一项对成年志愿者的随机、双盲、安慰剂对照的1期研究，设计用于评估多次皮下注射(SC)剂量的mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性。受试者以3:1的比率随机接受最多6次SC剂量的mAb10933+mAb10987组合治疗或安慰剂。
研究持续时间：研究包括3个阶段：多达7天的筛选/基线期、24周的治疗期(或者如果受试者出现有症状SARS-CoV-2感染，则更短)和28周的随访期(如果受试者出现有症状COVID-19，则可能更长)。
研究群体：研究包括大约940名受试者。受试者包括18岁至90岁的男性和女性成年志愿者，他们是健康的或患有慢性但稳定且良好控制的医学病症，并且在筛选SARS-CoV-2感染时呈阴性。
入选标准：受试者符合以下标准才有资格入选研究：
1.签署知情同意书时为18岁至90岁(包括端值)
2.研究者认为，受试者健康或具有稳定且良好控制的慢性医学病状并且在研究结束时不太可能需要医疗干预
3.在筛选前至少6个月稳定用药治疗合并症
4.愿意并且能够遵守研究访视和研究相关程序，包括遵守与SARS-CoV-2感染和传播相关的现场预防要求
5.愿意并且能够提供已签署的知情同意书
排除标准：满足以下标准中的任何标准的受试者将被排除在这项研究之外：
1.在随机化前≤72小时的SARS-CoV-2感染的阳性诊断检测(该检测作为筛选的一部分进行。样本应在随机化前≤72小时内收集，并且结果应在给药前审查并确认为阴性)。
2.由研究者确定的受试者报告的COVID-19临床病史
3.受试者报告的先前SARS-CoV-2感染阳性诊断检测病史
4.暗示或符合COVID-19的活动性呼吸道或非呼吸道症状
5.筛选前30天内因任何原因接受医疗护理的急性疾病、全身性抗生素使用或住院(即，>24小时)
6.筛选时有临床意义的异常实验室结果，如通过以下的1项或多项定义(可重复一次)：
·HbA1c≥8.0％
·血红蛋白＜10g/dL
·绝对中性粒细胞计数＜1.5×109/L
·血小板计数＜75×109/L
·血清肌酸酐>1.5倍正常上限(ULN)或估计肾小球滤过率≤60mL/min/1.73m2
·肝功能异常定义为以下的1项或多项：
-天冬氨酸转氨酶(AST)和/或丙氨酸转氨酶(ALT)和/或碱性磷酸酶(ALP)>2倍ULN
-总胆红素>1倍ULN
7.在筛选前的过去6个月中，慢性肺部病症(例如，慢性阻塞性肺病[COPD]、哮喘恶化)的急性恶化
8.筛选时血压(BP)异常，如通过舒张BP>100mm Hg和/或收缩BP>160mm Hg所定义的。筛选时可重复一次血压测量。
9.筛选前12个月内有心力衰竭住院史、心肌梗死诊断、中风、短暂性脑缺血发作、不稳定型心绞痛、经皮或外科血管重建手术(冠状动脉、颈动脉或外周血管)或心脏内装置(例如，起搏器)
10.目前或过去5年需要治疗的癌症，非黑色素瘤皮肤癌或宫颈癌/肛门原位癌除外
11.有明显的多次和/或严重过敏(例如，胶乳手套)史，或者对处方或非处方药物或食物有过敏反应。这是为了避免安全数据的潜在混淆，而不是由于特定的安全风险。
12.在筛选前的最后30天内或在研究药物的5个半衰期内(以较长者为准)使用另一种研究药物进行治疗
13.接受研究或批准的SARS-CoV-2疫苗
14.接受用于SARS-CoV-2感染预防的研究或批准的被动抗体(例如，恢复期血浆或血清、单克隆抗体、超免疫球蛋白)
15.筛选前2个月内使用瑞德西韦、静脉注射免疫球蛋白(IVIG)或其他抗SARS病毒剂
16.每周定期饮酒≥21杯
17.临床现场研究团队成员和/或直系亲属
18.孕妇或母乳喂养妇女
19.有生育能力的妇女(WOCBP)*，不愿意在第一次治疗的初始剂量/开始之前、研究期间和最后一个剂量后至少8个月内进行高效避孕的妇女。高效避孕措施包括：
a.稳定使用组合的(含雌性激素和孕激素的)激素避孕(口服、阴道内、经皮)或仅含孕激素的激素避孕(口服、可注射、可植入)以及在筛选前抑制开始2个或更多个月经周期的排卵
b.宫内节育器(IUD)或宫内激素释放系统(IUS)
c.双侧输卵管结扎
*WOCBP被定义为在初潮后直到绝经后仍具有生育能力的妇女，除非永久不育。永久性绝育方法包括子宫切除术、双侧输卵管切除术和双侧卵巢切除术。
绝经后状态被定义为12个月没有月经而没有其他医疗原因。绝经后范围内的高促卵泡激素(FSH)水平可用于确认未使用激素避孕或激素替代疗法的女性的绝经后状态。然而，在没有12个月的闭经的情况下，单次FSH测量不足以确定绝经后状态的发生。上述定义根据临床试验促进组(CTFG)指南。文件记录有子宫切除或输卵管结扎术的妇女无需进行妊娠测试和避孕。
20.在研究药物随访期间和最后一剂研究药物后的8个月内，不愿意使用以下形式的医学上可接受的节育措施的性活跃男性：经医学评估手术成功的输精管切除术或坚持使用避孕套。在研究期间以及最后一剂研究药物后的8个月内，禁止捐献精子。
研究治疗：在研究中，治疗包括共同施用的mAb10933+mAb109871200mg(600mg+600mg)/皮下(SC)/Q4W(每月一次)或安慰剂/SC/Q4W(每月一次)。
终点：主要、次要和探索性终点定义如下。
主要终点—主要终点是：
·在基线时和第29、57、85、113和141天SC施用mAb10933+mAb10987或安慰剂后4天内发生的AESI的发生率
·血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
次要终点—次要终点是：
·到研究结束时出现治疗期不良事件(TEAE)的受试者的比例以及TEAE的严重程度
·在mAb109333+mAb10987的每4周给药间隔结束时达到或超过mAb10933和mAb10987的血清中目标浓度(20μg/mL)的受试者的比例
·如通过针对mAb10933和mAb10987的抗药物抗体(ADA)随时间变化所测量的免疫原性
探索性终点—探索性终点是：
·在治疗期和随访期期间有症状SARS-CoV-2感染的发生率和严重程度
·基线抗SARS-CoV-2血清阴性受试者到研究结束时基线后血清学呈阳性(抗N蛋白)的比例
程序和评估：
仅在筛选时执行的程序—筛选程序包括病史(包括慢性医学病症)、人口统计学(包括年龄、性别、种族、体重、身高)和对SARS-CoV-2感染的评估(通过鼻咽[NP]拭子的中心实验室RT-PCR或根据现场标准和程序进行的经批准或授权的诊断测定)。
在基线时执行的程序—受试者通过中心实验室NP拭子进行SARS-CoV-2感染的基线时RT-PCR评估。
安全程序和评估—将要求受试者报告从知情同意到最后一次研究访视期间经历的所有不良事件(AE)和伴随用药。进行有针对性的体检、生命体征、临床实验室检查和临床评价。在治疗期期间，在每次研究药物施用后约24小时和2周后对受试者进行AE随访。在治疗期或随访期期间出现COVID-19症状/体征的受试者中，进行SARS-CoV-2感染的评估(通过NP拭子的中心实验室RT-PCR或根据现场标准和程序进行的经批准或授权的诊断测定)。
药代动力学、免疫原性和血清学—收集血液样本以评估血清中mAb10933和mAb10987的浓度、mAb10933和mAb10987的免疫原性和抗SARS-CoV-2血清学。
统计计划：
到研究结束时将招募大约940名受试者(mAb10933+mAb10987组中的705名受试者和安慰剂组中的235名受试者)。假设大约80％的先前招募的受试者再次同意根据方案第3次修正的延长治疗期，预计大约856名受试者在6个月治疗计划表中随机化(mAb10933+mAb10987组中的642名受试者和安慰剂组中的214名受试者)。
根据先前皮下(SC)施用单克隆抗体(mAb)的经验，预计注射部位反应(ISR)和超敏反应的发生率分别为大约10％和＜1％。如果观察到患有ISR的受试者数量≤54，mAb10933+mAb10987组中的样本量为705名受试者，则将排除ISR>10％的风险。类似地，如果在研究中少于2名受试者发生超敏反应(等级≥3)，则将排除此类事件≥1％的风险。
结果—本研究证明了多种皮下(SC)剂量的mAb10933+mAb10987是安全且耐受良好的。
实施例7.在患有SARS-CoV-2感染的门诊患者中，抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体在
不同剂量方案中的病毒疗效的临床评价
下文所述的临床研究是随机、双盲、安慰剂对照的2期平行组研究，以评估在患有SARS-CoV-2感染的门诊患者中单个静脉内(IV)或单个皮下(SC)剂量的mAb10933+mAb10987的剂量反应特征。
研究目标：下文阐述了研究的主要目标和次要目标。
主要目标—主要目标是评估与安慰剂相比，不同静脉内和皮下剂量的mAb10933+mAb10987的病毒学疗效。
次要目标—次要目标是：
评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的病毒学疗效的其他指标
·评价与安慰剂相比，mAb10933+mAb10987的安全性和耐受性
·评估血清中mAb10933和mAb10987随时间变化的浓度
·评估mAb10933和mAb10987的免疫原性
探索性目标—探索性目标是：
·探究与安慰剂组相比，接受mAb10933+mAb10987治疗的患者全因住院、急诊室(ER)访视或死亡的发生率
·探究与用安慰剂治疗的患者相比，用mAb10933+mAb10987治疗的患者的COVI D-19相关医疗护理访视(MAV)的发生率(COVID-19相关医疗护理访视将被定义如下：住院、ER访视、紧急护理访视、医生诊室访视或远程医疗访视，其中访视的主要原因是COVID-19)
·评估具有阳性SARS-CoV-2定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)的患者的病毒遗传变异
·探究mAb10933+mAb10987暴露和选择的疗效终点、安全终点和/或生物标志物之间的关系
研究设计：本研究是随机、双盲、安慰剂对照的平行组研究，以评估在患有SARS-CoV-2感染的门诊患者中单个静脉内(IV)或单个皮下(SC)剂量的REGN10933+REGN10987的剂量反应特征。研究的概述在图57中示出。
有资格的患者随机通过IV或SC途径接受单剂量的mAb10933+mAb10987或安慰剂。在给药当天，患者抽取NP拭子进行SARS-CoV-2RT-qPCR检测，并抽取血液进行安全性、药物浓度、免疫原性和血清学分析。在施用研究药物之后，对患者进行给药后血液收集(在静脉内输注结束时或在皮下施用后至少1小时)。在施用研究药物后至少1小时监测患者，然后在医学上合适的情况下，让患者离开研究地点。
在计划的研究访视期间，记录了与安全性和COVID-19相关的医疗护理访视的相关信息。患者也被要求尽快通知研究人员任何医疗护理访视。在研究期间收集的TEAE可根据研究计划的不同时期而不同。有关报告TEAE和治疗期出现的实验室异常的更多信息，请参考方案中的安全性报告部分。
患者在研究的第一周中每隔一天收集NP拭子和血液样本。每周一次收集额外的NP拭子样本，再进行2周，以评估病毒载量的潜在持久性。在第四周进行电话访视，以收集安全性信息。
第一个月后，患者大约每月接受一次访视，再进行4个月。倒数第二次访视是亲自收集血液样本以检测药物浓度和免疫原性。最终访视(EOS)是电话呼叫。
研究持续时间：本研究的持续时间为每个患者170天。
研究群体：本研究招募了SARS-CoV-2诊断检测呈阳性的成年非住院患者。方案要求在研究结束时招募多达大约1400名患者。
入选标准：患者必须符合以下标准才有资格入选研究：
14.在随机化时，男性或女性是否≥18岁(或国家法定成年年龄)
注意：可能有年龄上限；参考其他入选标准。
15.使用经验证的SARS-CoV-2抗原、RT-PCR或其他分子诊断测定以及适当的样本诸如鼻咽(NP)、鼻、口咽(OP)或唾液，对随机化前≤72小时采集的样本进行SARS-CoV-2阳性诊断检测。
注意：只要在随机化前≤72小时收集样本，阳性结果的历史记录就是可接受的。
16.低风险有症状患者：具有符合COVID-19的症状(如研究者所确定)，发作在随机化前≤7天，并符合所有以下8项标准：
a.年龄≤50岁
b.不肥胖，肥胖定义为BMI≥30kg/m2
c.没有心血管疾病或高血压
d.没有慢性肺病或哮喘
e.没有1型或2型糖尿病
f.没有慢性肾病，有或没有透析
g.没有慢性肝病
h.没有怀孕
或
无症状患者：没有符合COVID-19的症状(如研究者所确定)，在随机化前<2个月内的任何时间发生
17.保持室内空气中O2饱和度≥93％
18.愿意并且能够提供研究患者或法定代理人签署的知情同意书
19.愿意并且能够遵守研究程序，包括提供用于病毒脱落检测的样本
排除标准：满足以下标准中的任何标准的患者将被排除在这项研究之外：
1.在随机化前因COVID-19入院，或随机化时因任何原因住院(住院患者)
2.已知SARS-CoV-2血清学检测呈阳性
3.在随机化前>72小时收集的样本的SARS-CoV-2抗原或分子诊断检测呈阳性
4.基于研究者的评估是免疫抑制的
注意：示例包括癌症治疗、骨髓或器官移植、免疫缺陷、HIV(如果控制不良或有AIDS迹象)、镰状细胞性贫血、地中海贫血和免疫减弱药物的长期使用。
5.在筛选访视前的3个月内或研究产品的5个半衰期内(以较长者为准)，已经或正在参与评价COVID-19恢复期血浆、抗SARS-CoV-2的mAb或静脉注射免疫球蛋白(IVIG)的临床研究
6.先前、现在或计划将来使用以下任何治疗：COVID-19恢复期血浆、抗SARS-CoV-2的mAb(例如，bamlanimab)、IVIG(任何适应症)、全身性皮质类固醇(任何适应症)或COVID-19治疗(授权、批准或研究)
注意：先前使用定义为从筛选开始的过去30天或在研究产品的5个半衰期内(以较长者为准)。
7.在用于SARS-CoV-2的任何经授权或批准的先前使用(随机化前)、当前使用(随机化时)或计划使用(在根据CDC指南给出的时间段内，但不得早于研究药物施用的22天)
8.已知患有流感或其他非SARS-CoV-2呼吸道病原体的活动性感染，并经诊断检测确认
9.对研究药物组分具有已知的过敏或超敏反应
10.已出院或计划出院至检疫中心
11.已经参与、正在参与或计划参与评价任何经授权、批准或研究中的SARS-CoV-2疫苗的临床研究
12.是临床现场研究团队的成员或者是现场研究团队的直系亲属成员
研究治疗：在研究中，治疗包括通过静脉内或皮下施用作为选自以下的单剂量共同施用的mAb10933+mAb10987：
IV单剂量共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法静脉内(IV)
单剂量：
·2400mg(1200mg/单克隆抗体[mAb])
·1200mg(600mg/mAb)
·600mg(300mg/mAb)
·300mg(150mg/mAb)
·安慰剂IV单剂量
SC单剂量共同施用的mAb10933+mAb10987组合疗法皮下(SC)单
剂量
·1200mg(600mg/mAb)
·600mg(300mg/mAb)
·安慰剂SC单剂量
终点：主要、次要和探索性终点定义如下。
主要终点—主要终点是病毒载量自基线(第1天)到第7天的时间加权平均每日变化(log10拷贝/mL)，如在患者的NP拭子样本中通过RT-qPCR测量的，这些患者接受中心实验室确定的RT-qPCR阳性检测，并且在基线时为血清阴性的次要终点—次要终点是：
·病毒载量自基线(第1天)到第5天的时间加权平均每日变化(log10拷贝/mL)
·具有高病毒载量(>104拷贝/mL、>105拷贝/mL、>106拷贝/mL、>107拷贝/mL)的患者的病毒载量自基线(第1天)到第7天的时间加权平均每日变化(log10拷贝/mL)。
·具有高病毒载量(>104拷贝/mL、>105拷贝/mL、>106拷贝/mL、>107拷贝/mL)的患者的病毒载量自基线(第1天)到第5天的时间加权平均每日变化(log10拷贝/mL)。
·每次访视时具有高病毒载量(>104拷贝/mL、>105拷贝/mL、>106拷贝/mL、>107拷贝/mL)的患者比例
·每次访视时病毒载量低于检测限的患者比例
·每次访视时病毒载量低于定量下限的患者比例
·周期阈值(Ct)自基线(第1天)到第7天的时间加权平均每日变化，如在NP样本中通过RT-qPCR测量的
·Ct自基线(第1天)到第5天的时间加权平均每日变化，如在NP样本中通过RT-qPCR测量的
·每次访视时Ct自基线的变化，如在NP样本中通过RT-qPCR测量的
·每次访视时病毒载量自基线的变化，如在NP样本中通过RT-qPCR测量的
·到第29天具有治疗期SAE的患者比例
·到第4天出现输注相关反应(等级≥2)的患者比例
·到第4天出现注射部位反应(等级≥3)的患者比例
·到第29天出现超敏反应(等级≥2)的患者比例
·血清中mAb10933和mAB10987随时间变化的浓度
·如通过针对mAb10933和mAb10987的抗药物抗体(ADA)和中和抗体(NAb)所测量的免疫原性
探索性终点—探索性终点是：
·COVID-19相关医疗护理访视或全因死亡的累积发生率(到第29天和第169天)
·COVID-19相关住院、急诊室访视或全因死亡的累积发生率(到第29天和第169天)
·COVID-19相关住院或全因死亡的累积发生率(到第29天和第169天)
·COVID-19相关急诊室访视或全因死亡的累积发生率(到第29天和第169天)
·具有≥1例COVID-19相关医疗护理访视或全因死亡的患者比例(到第29天和第169天)
·具有≥1次按访视类型(住院、急诊室访视、紧急护理、医生诊室访视和/或远程医疗访视)划分的COVID-19相关医疗护理访视的患者比例(到第29天和第169天)
·具有≥2例COVID-19相关医疗护理访视或全因死亡的患者比例(到第29天和第169天)
·因COVID-19而住院的天数
·因COVID-19而被送入重症监护室(ICU)的患者比例(到第29天和第169天)
·因COVID-19需要补充氧气的患者比例(到第29天和第169天)
·因COVID-19需要机械通气的患者比例(到第29天和第169天)
·到第29天和第169天COVID-19相关MAV的总数
·全因住院、急诊室访视或死亡的累积发生率(到第29天和第169天)
·到第29天和第169天的全因死亡率
·到第169天具有治疗期SAE的患者比例
程序和评估：
程序和评估包括：
·用于SARS-CoV-2 RT-qPCR的NP拭子
·COVID-19相关医疗护理访视
·TEAE、治疗期SAE和治疗期AESI(等级≥2的输注相关反应，等级≥3的注射部位反应，等级≥2的超敏反应，以及导致住院或急诊室访视的任何TEAE，无论访视是否与COVID-19有关)
·有针对性的伴随用药、安全实验室、生命体征和怀孕状态
统计计划：
主要的病毒学疗效变量是病毒载量自基线(第1天)到第7天的时间加权平均变化，如在NP拭子样本中通过RT-qPCR测量的。在血清阴性的修改的全分析集(mFAS)群体中进行主要分析。
mFAS包括来自随机化时的NP拭子样本的经中心实验室确定的SARS-CoV-2 RT-qPCR结果为阳性的所有随机患者，并基于所接受的治疗(如所治疗的)。血清阴性mFAS是mFAS群体中在基线时为血清阴性的患者子集。
结果—本研究证明，不同静脉内和皮下剂量的mAb10933+mAb10987提供了与安慰剂相比的病毒学疗效(图74)。所有检测剂量均符合主要终点，与安慰剂相比，快速且显著地降低了患者的病毒载量(log10拷贝/mL)(p≤0.001)。在816名患者的初始队列中，本研究显示，在检测的所有6个REGEN-COV剂量水平中，在基线时为SARS-CoV-2PCR+和血清阴性的患者到第7天时出现显著和相当的病毒减少。尽管2400mg组与其他治疗组之间的平均病毒减少量存在微小的数字差异，但这些差异被认为既无统计学差异，也无临床意义。实际上，REGEN-COV在所有检测的剂量水平上显著且实质上减少了病毒载量，低至单剂量300mg静脉注射或600mg皮下注射(图47)。此外，尽管在本研究中的剂量较低，但这些结果与实施例2的结果相当(图48和图51；标记为“2067”的实施例2研究和标记为“20145”的本研究)。IV和SC患者中REGEN-COV血清浓度也存在按剂量比例的增加(图75)。该治疗通常耐受性良好，没有死亡，只有两例严重不良事件，均被评估为与COVID-19或REGEN-COV无关(图49和图50)。图45和图46分别显示了血清阴性静脉内和皮下注射患者(修改的全分析集)的人口统计学和基线特征的总结。
表17：在基线时PCR阳性和血清阴性的患者中病毒载量自基线(第1天)到第7天的
时间加权平均每日变化(log10拷贝/mL)
CI，置信区间；IV，静脉内；LS，最小二乘；PCR，聚合酶链反应；SC，皮下。
本发明不限于本文所描述的具体实施例的范围。事实上，除了本文所描述的那些之外，本发明的各种修改对于本领域技术人员来说将从前面的描述中变得显而易见。此类修改旨在落入所附权利要求书的范围内。
序列表
<110> 再生元制药公司（Regeneron Pharmaceuticals, Inc.）
<120> 用抗SARS-COV-2刺突糖蛋白抗体治疗或预防SARS-COV-2感染和COVID-19的方法
<130> 10807WO01
<150> 63/034,348
<151> 2020-06-03
<150> 63/036,956
<151> 2020-06-09
<150> 63/038,274
<151> 2020-06-12
<150> 63/043,336
<151> 2020-06-24
<150> 63/060,592
<151> 2020-08-03
<150> 63/062,961
<151> 2020-08-07
<150> 63/065,799
<151> 2020-08-14
<150> 63/084,881
<151> 2020-09-29
<150> 63/085,066
<151> 2020-09-29
<150> 63/089,399
<151> 2020-10-08
<150> 63/090,690
<151> 2020-10-12
<150> 63/094,133
<151> 2020-10-20
<150> 63/105,779
<151> 2020-10-26
<150> 63/106,696
<151> 2020-10-28
<150> 63/112,140
<151> 2020-11-10
<150> 63/116,773
<151> 2020-11-20
<150> 63/119,593
<151> 2020-11-30
<150> 63/120,065
<151> 2020-12-01
<150> 63/124,980
<151> 2020-12-14
<150> 63/131,627
<151> 2020-12-29
<150> 63/141,423
<151> 2021-01-25
<150> 63/141,952
<151> 2021-01-26
<150> 63/142,471
<151> 2021-01-27
<150> 63/144,789
<151> 2021-02-02
<150> 63/150,978
<151> 2021-02-18
<150> 63/162,504
<151> 2021-03-17
<150> 63/162,996
<151> 2021-03-18
<150> 63/164,488
<151> 2021-03-22
<150> 63/165,654
<151> 2021-03-24
<150> 63/166,187
<151> 2021-03-25
<150> 63/173,468
<151> 2021-04-11
<150> 63/185,301
<151> 2021-05-06
<150> 63/186,029
<151> 2021-05-07
<160> 91
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 360
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 1
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac attacttata gtggtagtac catatactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagag ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatcgc 300
ggtacaacta tggtcccctt tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
<210> 2
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 2
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Thr Tyr Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Thr Thr Met Val Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 3
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 3
ggattcacct tcagtgacta ctac 24
<210> 4
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 4
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr
1 5
<210> 5
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 5
attacttata gtggtagtac cata 24
<210> 6
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 6
Ile Thr Tyr Ser Gly Ser Thr Ile
1 5
<210> 7
<211> 39
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 7
gcgagagatc gcggtacaac tatggtcccc tttgactac 39
<210> 8
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 8
Ala Arg Asp Arg Gly Thr Thr Met Val Pro Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 9
<211> 321
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 9
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc aggcgagtca ggacattacc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctacgct gcatccaatt tggaaacagg ggtcccatca 180
aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcgg cctgcagcct 240
gaagatattg caacatatta ctgtcaacag tatgataatc tccctctcac tttcggcgga 300
gggaccaagg tggagatcaa a 321
<210> 10
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 10
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 11
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 11
caggacatta ccaactat 18
<210> 12
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 12
Gln Asp Ile Thr Asn Tyr
1 5
<210> 13
<211> 9
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 13
gctgcatcc 9
<210> 14
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 14
Ala Ala Ser
1
<210> 15
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 15
caacagtatg ataatctccc tctcact 27
<210> 16
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 16
Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Leu Thr
1 5
<210> 17
<211> 1353
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 17
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac attacttata gtggtagtac catatactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagag ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatcgc 300
ggtacaacta tggtcccctt tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 660
aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720
ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780
gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840
tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 900
agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960
gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020
aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 1080
ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140
gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200
ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260
cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320
cagaagtccc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1353
<210> 18
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 18
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Thr Tyr Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Thr Thr Met Val Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 19
<211> 645
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 19
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc aggcgagtca ggacattacc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctacgct gcatccaatt tggaaacagg ggtcccatca 180
aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcgg cctgcagcct 240
gaagatattg caacatatta ctgtcaacag tatgataatc tccctctcac tttcggcgga 300
gggaccaagg tggagatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360
tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420
cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480
gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600
ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645
<210> 20
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 20
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 21
<211> 360
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 21
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt aactatgcta tgtactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag aactgaggac acggctgtgt attactgtgc gagtggctcc 300
gactacggtg actacttatt ggtttactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
<210> 22
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 22
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Gly Ser Asp Tyr Gly Asp Tyr Leu Leu Val Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 23
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 23
ggattcacct tcagtaacta tgct 24
<210> 24
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 24
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 25
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 25
atatcatatg atggaagtaa taaa 24
<210> 26
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 26
Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 27
<211> 39
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 27
gcgagtggct ccgactacgg tgactactta ttggtttac 39
<210> 28
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 28
Ala Ser Gly Ser Asp Tyr Gly Asp Tyr Leu Leu Val Tyr
1 5 10
<210> 29
<211> 330
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 29
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacaa 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
cagtctgagg acgaggctga ttattactgc aactctttga caagcatcag cacttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330
<210> 30
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 30
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Leu Thr Ser Ile
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 31
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 31
agcagtgacg ttggtggtta taactat 27
<210> 32
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 32
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 33
<211> 9
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 33
gatgtcagt 9
<210> 34
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 34
Asp Val Ser
1
<210> 35
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 35
aactctttga caagcatcag cacttgggtg 30
<210> 36
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 36
Asn Ser Leu Thr Ser Ile Ser Thr Trp Val
1 5 10
<210> 37
<211> 1353
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 37
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt aactatgcta tgtactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag aactgaggac acggctgtgt attactgtgc gagtggctcc 300
gactacggtg actacttatt ggtttactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 660
aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720
ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780
gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840
tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 900
agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960
gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020
aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag 1080
ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140
gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200
ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260
cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320
cagaagtccc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1353
<210> 38
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 38
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Gly Ser Asp Tyr Gly Asp Tyr Leu Leu Val Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 39
<211> 651
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 39
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacaa 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
cagtctgagg acgaggctga ttattactgc aactctttga caagcatcag cacttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggccagccca aggccgcccc ctccgtgacc 360
ctgttccccc cctcctccga ggagctgcag gccaacaagg ccaccctggt gtgcctgatc 420
tccgacttct accccggcgc cgtgaccgtg gcctggaagg ccgactcctc ccccgtgaag 480
gccggcgtgg agaccaccac cccctccaag cagtccaaca acaagtacgc cgcctcctcc 540
tacctgtccc tgacccccga gcagtggaag tcccaccggt cctactcctg ccaggtgacc 600
cacgagggct ccaccgtgga gaagaccgtg gcccccaccg agtgctcctg a 651
<210> 40
<211> 216
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 40
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Leu Thr Ser Ile
85 90 95
Ser Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 41
<211> 369
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 41
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggata catcttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacagg ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cgcaaactat 180
gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccctg accagggaca cgtccatcac cacagtctac 240
atggaactga gcaggctgag atttgacgac acggccgtgt attactgtgc gagaggatcc 300
cggtatgact ggaaccagaa caactggttc gacccctggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctca 369
<210> 42
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 42
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Arg Asp Thr Ser Ile Thr Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Arg Tyr Asp Trp Asn Gln Asn Asn Trp Phe Asp Pro
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 43
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 43
ggatacatct tcaccggcta ctat 24
<210> 44
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 44
Gly Tyr Ile Phe Thr Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 45
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 45
atcaacccta acagtggtgg cgca 24
<210> 46
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 46
Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ala
1 5
<210> 47
<211> 48
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 47
gcgagaggat cccggtatga ctggaaccag aacaactggt tcgacccc 48
<210> 48
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 48
Ala Arg Gly Ser Arg Tyr Asp Trp Asn Gln Asn Asn Trp Phe Asp Pro
1 5 10 15
<210> 49
<211> 330
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 49
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt acttataact atgtctcctg gtaccaacaa 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tttgatgtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180
tctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcattta caaccagcag cactgtggtt 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330
<210> 50
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 50
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Thr Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Phe Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Phe Thr Thr Ser
85 90 95
Ser Thr Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 51
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 51
agcagtgacg ttggtactta taactat 27
<210> 52
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 52
Ser Ser Asp Val Gly Thr Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 53
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 53
agctcattta caaccagcag cactgtggtt 30
<210> 54
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 54
Ser Ser Phe Thr Thr Ser Ser Thr Val Val
1 5 10
<210> 55
<211> 1362
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 55
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggata catcttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacagg ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cgcaaactat 180
gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccctg accagggaca cgtccatcac cacagtctac 240
atggaactga gcaggctgag atttgacgac acggccgtgt attactgtgc gagaggatcc 300
cggtatgact ggaaccagaa caactggttc gacccctggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctcag cctccaccaa gggcccatcg gtcttccccc tggcaccctc ctccaagagc 420
acctctgggg gcacagcggc cctgggctgc ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg 480
acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta 540
cagtcctcag gactctactc cctcagcagc gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc 600
acccagacct acatctgcaa cgtgaatcac aagcccagca acaccaaggt ggacaagaaa 660
gttgagccca aatcttgtga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc 720
ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 780
cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 840
ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 900
cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 960
aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa 1020
accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 1080
cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 1140
agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 1200
cctcccgtgc tggactccga cggctccttc ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag 1260
agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac 1320
cactacacgc agaagtccct ctccctgtct ccgggtaaat ga 1362
<210> 56
<211> 453
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 56
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Arg Asp Thr Ser Ile Thr Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Arg Tyr Asp Trp Asn Gln Asn Asn Trp Phe Asp Pro
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 57
<211> 651
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 57
cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt acttataact atgtctcctg gtaccaacaa 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tttgatgtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180
tctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcattta caaccagcag cactgtggtt 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggccagccca aggccgcccc ctccgtgacc 360
ctgttccccc cctcctccga ggagctgcag gccaacaagg ccaccctggt gtgcctgatc 420
tccgacttct accccggcgc cgtgaccgtg gcctggaagg ccgactcctc ccccgtgaag 480
gccggcgtgg agaccaccac cccctccaag cagtccaaca acaagtacgc cgcctcctcc 540
tacctgtccc tgacccccga gcagtggaag tcccaccggt cctactcctg ccaggtgacc 600
cacgagggct ccaccgtgga gaagaccgtg gcccccaccg agtgctcctg a 651
<210> 58
<211> 216
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 58
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Thr Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Phe Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Phe Thr Thr Ser
85 90 95
Ser Thr Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 59
<211> 1273
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 59
Met Phe Val Phe Leu Val Leu Leu Pro Leu Val Ser Ser Gln Cys Val
1 5 10 15
Asn Leu Thr Thr Arg Thr Gln Leu Pro Pro Ala Tyr Thr Asn Ser Phe
20 25 30
Thr Arg Gly Val Tyr Tyr Pro Asp Lys Val Phe Arg Ser Ser Val Leu
35 40 45
His Ser Thr Gln Asp Leu Phe Leu Pro Phe Phe Ser Asn Val Thr Trp
50 55 60
Phe His Ala Ile His Val Ser Gly Thr Asn Gly Thr Lys Arg Phe Asp
65 70 75 80
Asn Pro Val Leu Pro Phe Asn Asp Gly Val Tyr Phe Ala Ser Thr Glu
85 90 95
Lys Ser Asn Ile Ile Arg Gly Trp Ile Phe Gly Thr Thr Leu Asp Ser
100 105 110
Lys Thr Gln Ser Leu Leu Ile Val Asn Asn Ala Thr Asn Val Val Ile
115 120 125
Lys Val Cys Glu Phe Gln Phe Cys Asn Asp Pro Phe Leu Gly Val Tyr
130 135 140
Tyr His Lys Asn Asn Lys Ser Trp Met Glu Ser Glu Phe Arg Val Tyr
145 150 155 160
Ser Ser Ala Asn Asn Cys Thr Phe Glu Tyr Val Ser Gln Pro Phe Leu
165 170 175
Met Asp Leu Glu Gly Lys Gln Gly Asn Phe Lys Asn Leu Arg Glu Phe
180 185 190
Val Phe Lys Asn Ile Asp Gly Tyr Phe Lys Ile Tyr Ser Lys His Thr
195 200 205
Pro Ile Asn Leu Val Arg Asp Leu Pro Gln Gly Phe Ser Ala Leu Glu
210 215 220
Pro Leu Val Asp Leu Pro Ile Gly Ile Asn Ile Thr Arg Phe Gln Thr
225 230 235 240
Leu Leu Ala Leu His Arg Ser Tyr Leu Thr Pro Gly Asp Ser Ser Ser
245 250 255
Gly Trp Thr Ala Gly Ala Ala Ala Tyr Tyr Val Gly Tyr Leu Gln Pro
260 265 270
Arg Thr Phe Leu Leu Lys Tyr Asn Glu Asn Gly Thr Ile Thr Asp Ala
275 280 285
Val Asp Cys Ala Leu Asp Pro Leu Ser Glu Thr Lys Cys Thr Leu Lys
290 295 300
Ser Phe Thr Val Glu Lys Gly Ile Tyr Gln Thr Ser Asn Phe Arg Val
305 310 315 320
Gln Pro Thr Glu Ser Ile Val Arg Phe Pro Asn Ile Thr Asn Leu Cys
325 330 335
Pro Phe Gly Glu Val Phe Asn Ala Thr Arg Phe Ala Ser Val Tyr Ala
340 345 350
Trp Asn Arg Lys Arg Ile Ser Asn Cys Val Ala Asp Tyr Ser Val Leu
355 360 365
Tyr Asn Ser Ala Ser Phe Ser Thr Phe Lys Cys Tyr Gly Val Ser Pro
370 375 380
Thr Lys Leu Asn Asp Leu Cys Phe Thr Asn Val Tyr Ala Asp Ser Phe
385 390 395 400
Val Ile Arg Gly Asp Glu Val Arg Gln Ile Ala Pro Gly Gln Thr Gly
405 410 415
Lys Ile Ala Asp Tyr Asn Tyr Lys Leu Pro Asp Asp Phe Thr Gly Cys
420 425 430
Val Ile Ala Trp Asn Ser Asn Asn Leu Asp Ser Lys Val Gly Gly Asn
435 440 445
Tyr Asn Tyr Leu Tyr Arg Leu Phe Arg Lys Ser Asn Leu Lys Pro Phe
450 455 460
Glu Arg Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln Ala Gly Ser Thr Pro Cys
465 470 475 480
Asn Gly Val Glu Gly Phe Asn Cys Tyr Phe Pro Leu Gln Ser Tyr Gly
485 490 495
Phe Gln Pro Thr Asn Gly Val Gly Tyr Gln Pro Tyr Arg Val Val Val
500 505 510
Leu Ser Phe Glu Leu Leu His Ala Pro Ala Thr Val Cys Gly Pro Lys
515 520 525
Lys Ser Thr Asn Leu Val Lys Asn Lys Cys Val Asn Phe Asn Phe Asn
530 535 540
Gly Leu Thr Gly Thr Gly Val Leu Thr Glu Ser Asn Lys Lys Phe Leu
545 550 555 560
Pro Phe Gln Gln Phe Gly Arg Asp Ile Ala Asp Thr Thr Asp Ala Val
565 570 575
Arg Asp Pro Gln Thr Leu Glu Ile Leu Asp Ile Thr Pro Cys Ser Phe
580 585 590
Gly Gly Val Ser Val Ile Thr Pro Gly Thr Asn Thr Ser Asn Gln Val
595 600 605
Ala Val Leu Tyr Gln Asp Val Asn Cys Thr Glu Val Pro Val Ala Ile
610 615 620
His Ala Asp Gln Leu Thr Pro Thr Trp Arg Val Tyr Ser Thr Gly Ser
625 630 635 640
Asn Val Phe Gln Thr Arg Ala Gly Cys Leu Ile Gly Ala Glu His Val
645 650 655
Asn Asn Ser Tyr Glu Cys Asp Ile Pro Ile Gly Ala Gly Ile Cys Ala
660 665 670
Ser Tyr Gln Thr Gln Thr Asn Ser Pro Arg Arg Ala Arg Ser Val Ala
675 680 685
Ser Gln Ser Ile Ile Ala Tyr Thr Met Ser Leu Gly Ala Glu Asn Ser
690 695 700
Val Ala Tyr Ser Asn Asn Ser Ile Ala Ile Pro Thr Asn Phe Thr Ile
705 710 715 720
Ser Val Thr Thr Glu Ile Leu Pro Val Ser Met Thr Lys Thr Ser Val
725 730 735
Asp Cys Thr Met Tyr Ile Cys Gly Asp Ser Thr Glu Cys Ser Asn Leu
740 745 750
Leu Leu Gln Tyr Gly Ser Phe Cys Thr Gln Leu Asn Arg Ala Leu Thr
755 760 765
Gly Ile Ala Val Glu Gln Asp Lys Asn Thr Gln Glu Val Phe Ala Gln
770 775 780
Val Lys Gln Ile Tyr Lys Thr Pro Pro Ile Lys Asp Phe Gly Gly Phe
785 790 795 800
Asn Phe Ser Gln Ile Leu Pro Asp Pro Ser Lys Pro Ser Lys Arg Ser
805 810 815
Phe Ile Glu Asp Leu Leu Phe Asn Lys Val Thr Leu Ala Asp Ala Gly
820 825 830
Phe Ile Lys Gln Tyr Gly Asp Cys Leu Gly Asp Ile Ala Ala Arg Asp
835 840 845
Leu Ile Cys Ala Gln Lys Phe Asn Gly Leu Thr Val Leu Pro Pro Leu
850 855 860
Leu Thr Asp Glu Met Ile Ala Gln Tyr Thr Ser Ala Leu Leu Ala Gly
865 870 875 880
Thr Ile Thr Ser Gly Trp Thr Phe Gly Ala Gly Ala Ala Leu Gln Ile
885 890 895
Pro Phe Ala Met Gln Met Ala Tyr Arg Phe Asn Gly Ile Gly Val Thr
900 905 910
Gln Asn Val Leu Tyr Glu Asn Gln Lys Leu Ile Ala Asn Gln Phe Asn
915 920 925
Ser Ala Ile Gly Lys Ile Gln Asp Ser Leu Ser Ser Thr Ala Ser Ala
930 935 940
Leu Gly Lys Leu Gln Asp Val Val Asn Gln Asn Ala Gln Ala Leu Asn
945 950 955 960
Thr Leu Val Lys Gln Leu Ser Ser Asn Phe Gly Ala Ile Ser Ser Val
965 970 975
Leu Asn Asp Ile Leu Ser Arg Leu Asp Lys Val Glu Ala Glu Val Gln
980 985 990
Ile Asp Arg Leu Ile Thr Gly Arg Leu Gln Ser Leu Gln Thr Tyr Val
995 1000 1005
Thr Gln Gln Leu Ile Arg Ala Ala Glu Ile Arg Ala Ser Ala Asn Leu
1010 1015 1020
Ala Ala Thr Lys Met Ser Glu Cys Val Leu Gly Gln Ser Lys Arg Val
1025 1030 1035 1040
Asp Phe Cys Gly Lys Gly Tyr His Leu Met Ser Phe Pro Gln Ser Ala
1045 1050 1055
Pro His Gly Val Val Phe Leu His Val Thr Tyr Val Pro Ala Gln Glu
1060 1065 1070
Lys Asn Phe Thr Thr Ala Pro Ala Ile Cys His Asp Gly Lys Ala His
1075 1080 1085
Phe Pro Arg Glu Gly Val Phe Val Ser Asn Gly Thr His Trp Phe Val
1090 1095 1100
Thr Gln Arg Asn Phe Tyr Glu Pro Gln Ile Ile Thr Thr Asp Asn Thr
1105 1110 1115 1120
Phe Val Ser Gly Asn Cys Asp Val Val Ile Gly Ile Val Asn Asn Thr
1125 1130 1135
Val Tyr Asp Pro Leu Gln Pro Glu Leu Asp Ser Phe Lys Glu Glu Leu
1140 1145 1150
Asp Lys Tyr Phe Lys Asn His Thr Ser Pro Asp Val Asp Leu Gly Asp
1155 1160 1165
Ile Ser Gly Ile Asn Ala Ser Val Val Asn Ile Gln Lys Glu Ile Asp
1170 1175 1180
Arg Leu Asn Glu Val Ala Lys Asn Leu Asn Glu Ser Leu Ile Asp Leu
1185 1190 1195 1200
Gln Glu Leu Gly Lys Tyr Glu Gln Tyr Ile Lys Trp Pro Trp Tyr Ile
1205 1210 1215
Trp Leu Gly Phe Ile Ala Gly Leu Ile Ala Ile Val Met Val Thr Ile
1220 1225 1230
Met Leu Cys Cys Met Thr Ser Cys Cys Ser Cys Leu Lys Gly Cys Cys
1235 1240 1245
Ser Cys Gly Ser Cys Cys Lys Phe Asp Glu Asp Asp Ser Glu Pro Val
1250 1255 1260
Leu Lys Gly Val Lys Leu His Tyr Thr
1265 1270
<210> 60
<211> 47
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 60
Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln Ala Gly Ser Thr Pro Cys Asn Gly
1 5 10 15
Val Glu Gly Phe Asn Cys Tyr Phe Pro Leu Gln Ser Tyr Gly Phe Gln
20 25 30
Pro Thr Asn Gly Val Gly Tyr Gln Pro Tyr Arg Val Val Val Leu
35 40 45
<210> 61
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 61
Cys Val Ile Ala Trp Asn Ser Asn Asn Leu Asp Ser Lys Val Gly Gly
1 5 10 15
Asn Tyr Asn Tyr Leu
20
<210> 62
<211> 44
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 62
Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln Ala Gly Ser Thr Pro Cys Asn Gly
1 5 10 15
Val Glu Gly Phe Asn Cys Tyr Phe Pro Leu Gln Ser Tyr Gly Phe Gln
20 25 30
Pro Thr Asn Gly Val Gly Tyr Gln Pro Tyr Arg Val
35 40
<210> 63
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 63
gaccccaaaa tcagcgaaat 20
<210> 64
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 64
tctggttact gccagttgaa tctg 24
<210> 65
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 65
accccgcatt acgtttggtg gacc 24
<210> 66
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 66
cgatcttgta gatctgttcc tcaaacgaac 30
<210> 67
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 67
atattgcagc agtacgcaca caca 24
<210> 68
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 68
acactagcca tccttactgc gcttcg 26
<210> 69
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 69
accccgcatt acgtttggtg gacc 24
<210> 70
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 70
cgatctcttg tagatctgtt ctc 23
<210> 71
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 71
atattgcagc agtacgcaca ca 22
<210> 72
<211> 384
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 72
gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120
ccagggaagg gcctggagtg ggtctcaggt attagttgga ataggggtag cataggctat 180
gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga gcagtctgag agctgaggac acggccttgt attactgcgc aaaagatggc 300
gagagatggg atagtgtagt agtaccatct gctaggaacg gtatggacgt ctggggccaa 360
gggaccacgg tcaccgtctc ctca 384
<210> 73
<211> 128
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 73
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Arg Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Gly Glu Arg Trp Asp Ser Val Val Val Pro Ser Ala Arg
100 105 110
Asn Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 74
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 74
ggattcacct ttgatgatta tgcc 24
<210> 75
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 75
Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Ala
1 5
<210> 76
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 76
attagttgga ataggggtag cata 24
<210> 77
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 77
Ile Ser Trp Asn Arg Gly Ser Ile
1 5
<210> 78
<211> 63
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 78
gcaaaagatg gcgagagatg ggatagtgta gtagtaccat ctgctaggaa cggtatggac 60
gtc 63
<210> 79
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 79
Ala Lys Asp Gly Glu Arg Trp Asp Ser Val Val Val Pro Ser Ala Arg
1 5 10 15
Asn Gly Met Asp Val
20
<210> 80
<211> 336
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 80
cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacattg gtaccagcag 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca gcaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct gagtggctct 300
tatgtcttcg gaactgggac caaggtcacc gtccta 336
<210> 81
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 81
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Ser Gly Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 82
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 82
agctccaaca tcggggcagg ttatgat 27
<210> 83
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 83
Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp
1 5
<210> 84
<211> 9
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 84
ggtaacagc 9
<210> 85
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 85
Gly Asn Ser
1
<210> 86
<211> 36
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 86
cagtcctatg acagcagcct gagtggctct tatgtc 36
<210> 87
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 87
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Ser Gly Ser Tyr Val
1 5 10
<210> 88
<211> 1377
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 88
gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120
ccagggaagg gcctggagtg ggtctcaggt attagttgga ataggggtag cataggctat 180
gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga gcagtctgag agctgaggac acggccttgt attactgcgc aaaagatggc 300
gagagatggg atagtgtagt agtaccatct gctaggaacg gtatggacgt ctggggccaa 360
gggaccacgg tcaccgtctc ctcagcctcc accaagggcc catcggtctt ccccctggca 420
ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca gcggccctgg gctgcctggt caaggactac 480
ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc 540
ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc 600
tccagcagct tgggcaccca gacctacatc tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc 660
aaggtggaca agaaagttga gcccaaatct tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc 720
ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac 780
accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 840
gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 900
aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 960
caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 1020
gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 1080
accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 1140
aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 1200
aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 1260
ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 1320
gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag tccctctccc tgtctccggg taaatga 1377
<210> 89
<211> 458
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 89
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Arg Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Gly Glu Arg Trp Asp Ser Val Val Val Pro Ser Ala Arg
100 105 110
Asn Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
130 135 140
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
145 150 155 160
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
165 170 175
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
180 185 190
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
195 200 205
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
210 215 220
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
225 230 235 240
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
245 250 255
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
260 265 270
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
275 280 285
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
290 295 300
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
305 310 315 320
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
325 330 335
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
340 345 350
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
355 360 365
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
370 375 380
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
385 390 395 400
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
405 410 415
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
420 425 430
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
435 440 445
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450 455
<210> 90
<211> 657
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 90
cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacattg gtaccagcag 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca gcaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct gagtggctct 300
tatgtcttcg gaactgggac caaggtcacc gtcctaggcc agcccaaggc cgccccctcc 360
gtgaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420
ctgatctccg acttctaccc cggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga ctcctccccc 480
gtgaaggccg gcgtggagac caccaccccc tccaagcagt ccaacaacaa gtacgccgcc 540
tcctcctacc tgtccctgac ccccgagcag tggaagtccc accggtccta ctcctgccag 600
gtgacccacg agggctccac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg ctcctga 657
<210> 91
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成
<400> 91
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Ser Gly Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
115 120 125
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
130 135 140
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro
145 150 155 160
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
165 170 175
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
180 185 190
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
195 200 205
Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
Claims (86)
1.一种用于改善COVID-19的一个或多个临床参数的方法，所述方法包括向对其有需要的受试者施用治疗性组合物，其中所述治疗性组合物包含结合SARS-CoV-2的表面蛋白的至少一种抗原结合分子。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者是患有实验室确认的SARS-CoV-2和一种或多种COVID-19症状的人患者。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述一种或多种COVID-19症状包括发烧、咳嗽或气短。
4.根据权利要求2或权利要求3所述的方法，其中所述受试者选自由以下组成的组：(a)需要低流量氧气补充的人COVID-19患者；(b)需要高强度氧气疗法但不需要机械通气的人COVID-19患者；和(c)需要机械通气的人COVID-19患者。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述受试者由于一种或多种COVID-19症状而住院。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述受试者是门诊患者。
7.一种用于预防受试者的SARS-CoV-2感染或COVID-19的方法，所述方法包括向所述受试者施用预防性组合物，其中所述预防性组合物包含至少一种结合SARS-CoV-2的表面蛋白的抗原结合分子。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述受试者是处于SARS-CoV-2感染的高风险下未感染的个体。
9.根据权利要求8所述的方法，其中处于SARS-CoV-2感染的高风险下的所述受试者是医护人员、现场急救员或SARS-CoV-2感染检测呈阳性的个体的家庭成员。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述治疗性或预防性组合物包含第一抗原结合分子和第二抗原结合分子，所述第一抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第一表位，所述第二抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第二表位，其中所述第一表位和所述第二表位在结构上不重叠。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述治疗性或预防性组合物还包含第三抗原结合分子，所述第三抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第三表位，其中所述第三表位与所述第一表位和所述第二表位在结构上不重叠。
12.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述治疗性或预防性组合物包含第一抗原结合分子和第二抗原结合分子，所述第一抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第一表位，所述第二抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第二表位，其中所述第一抗原结合分子和所述第二抗原结合分子能够同时结合SARS-CoV-2的所述表面蛋白。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述治疗性或预防性组合物还包含第三抗原结合分子，所述第三抗原结合分子结合SARS-CoV-2的表面蛋白上的第三表位，其中所述第一抗原结合分子、所述第二抗原结合分子和所述第三抗原结合分子能够同时结合SARS-CoV-2的所述表面蛋白。
14.根据权利要求10至13中任一项所述的方法，其中：
a)所述第一抗原结合分子包含三个重链互补决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述CDR包含在包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内；和三个轻链互补决定区(CDR)(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述CDR包含在包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内；
b)所述第二抗原结合分子包含三个重链互补决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述CDR包含在包含SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内；和三个轻链互补决定区(CDR)(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述CDR包含在包含SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内；并且
c)所述第三抗原结合分子包含三个重链互补决定区(CDR)(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述CDR包含在包含SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)内；和三个轻链互补决定区(CDR)(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述CDR包含在包含SEQ ID NO:81所示的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内。
15.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中SARS-CoV-2的所述表面蛋白是包含受体结合结构域的刺突(S)蛋白，所述受体结合结构域包含与SEQ ID NO:59有至少80％同一性的氨基酸序列。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在包含选自由以下组成的组的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，其分别包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ IDNO:4-6-8-12-14-16、24-26-28-32-34-36、44-46-48-52-34-54和75-77-79-83-85-87。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。
19.根据权利要求16至18中任一项所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含人IgG重链恒定区。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。
21.根据权利要求19所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含选自由以下组成的组的重链和轻链氨基酸序列对：SEQ ID NO:18/20、38/40、56/58和89/91。
22.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2/10、22/30、42/50和73/81。
23.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含重链和轻链氨基酸序列对，所述重链和轻链氨基酸序列对选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQID NO:18/20、38/40、56/58和89/91。
24.根据权利要求10或权利要求12所述的方法，其中所述第一抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区包含在包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，并且所述第二抗原结合分子是第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区包含在包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内。
25.根据权利要求24所述的方法，其中所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区分别包含SEQ ID NO:4-6-8-12-14-16的氨基酸序列，并且所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区分别包含SEQ ID NO:24-26-28-32-34-36的氨基酸序列。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，并且所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列。
27.根据权利要求24至26中任一项所述的方法，其中所述第一和所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含人IgG重链恒定区。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述第一和所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。
29.根据权利要求27所述的方法，其中所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列，所述轻链包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列，并且所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQID NO:38的氨基酸序列，所述轻链包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列。
30.根据权利要求10或12所述的方法，其中所述第一抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:2/10的氨基酸序列，并且所述第二抗原结合分子是第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列。
31.根据权利要求10或12所述的方法，其中所述第一抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含重链和轻链对，所述重链和轻链对包含SEQ ID NO:18/20的氨基酸序列，并且所述第二抗原结合分子是第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含重链和轻链对，所述重链和轻链对包含SEQ ID NO:38/40的氨基酸序列。
32.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，其包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区包含在包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)内。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含六个互补决定区HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3，这六个互补决定区分别包含SEQ ID NO:44-46-48-52-34-54的氨基酸序列。
34.根据权利要求33所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或抗原结合片段包含HCVR和LCVR，所述HCVR包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列，所述LCVR包含SEQ IDNO:50的氨基酸序列。
35.根据权利要求32至34中任一项所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含人IgG重链恒定区。
36.根据权利要求35所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。
37.根据权利要求35所述的方法，其中所述抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体包含重链和轻链，所述重链包含SEQ ID NO:56的氨基酸序列，所述轻链包含SEQ ID NO:58的氨基酸序列。
38.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:42/50的氨基酸序列。
39.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述抗原结合分子是抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，其具有与参考抗体相同的结合和/或阻断性质，所述参考抗体包含重链和轻链对，所述重链和轻链对包含SEQ ID NO:56/58的氨基酸序列。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的方法，其中所述治疗性组合物包含1mg至10g的所述抗原结合分子。
41.根据权利要求1至21或24至29中任一项所述的方法，其中所述治疗性组合物包含约1.2g的mAb10933和约1.2g的mAb10987。
42.根据权利要求41所述的方法，其中所述治疗性组合物还包含约1.2g的mAb10985。
43.根据权利要求1至21或24至29中任一项所述的方法，其中所述治疗性组合物包含约150mg的mAb10933和约150mg的mAb10987。
44.根据权利要求43所述的方法，其中所述治疗性组合物还包含约150mg的mAb10985。
45.根据权利要求1至21或24至29中任一项所述的方法，其中所述治疗性组合物包含约300mg的mAb10933和约300mg的mAb10987。
46.根据权利要求45所述的方法，其中所述治疗性组合物还包含约300mg的mAb10985。
47.根据权利要求1至21或24至29中任一项所述的方法，其中所述治疗性组合物包含约600mg的mAb10933和约600mg的mAb10987。
48.根据权利要求47所述的方法，其中所述治疗性组合物还包含约600mg的mAb10985。
49.根据权利要求1至21或24至29中任一项所述的方法，其中所述治疗性组合物包含150mg至1200mg的mAb10933和150mg至1200mg的mAb10987。
50.根据权利要求49所述的方法，其中所述治疗性组合物还包含150mg至1200mg的mAb10985。
51.根据权利要求1至50中任一项所述的方法，其中通过静脉内输注或皮下注射向所述受试者施用所述治疗性或预防性组合物。
52.根据权利要求1至6或10至51中任一项所述的方法，其中在施用所述治疗性组合物之后，所述受试者表现出选自由以下组成的组的一个或多个疗效参数：
(a)SARS-CoV-2病毒脱落自基线的降低；
(b)使用7分顺序量表，临床状态至少改善1分；
(c)减少或消除对氧气补充的需要；
(d)减少或消除对机械通气的需要；
(e)预防COVID-19相关死亡；
(f)预防全因死亡；以及
(g)一种或多种疾病相关生物标志物的血清浓度的变化。
53.根据权利要求52所述的方法，其中所述7分顺序量表是：
[1]死亡；
[2]住院，需要有创机械通气或体外膜肺氧合；
[3]住院，需要无创通气或高流量氧气装置；
[4]住院，需要补充供氧；
[5]住院，不需要补充供氧—需要持续的医疗护理(COVID-19相关或其他)；
[6]住院，不需要补充供氧—不再需要持续的医疗护理；以及
[7]不住院。
54.根据权利要求52或53所述的方法，其中在施用第一剂量的所述治疗性组合物之后21天测量所述一个或多个疗效参数。
55.根据权利要求52至54中任一项所述的方法，其中通过鼻咽拭子样本、鼻腔样本或唾液样本的实时定量PCR(RT-qPCR)来确定SARS-CoV-2病毒脱落自基线的降低。
56.根据权利要求52至54中任一项所述的方法，其中所述一种或多种疾病相关生物标志物的血清浓度的变化是c反应蛋白、乳酸脱氢酶、D-二聚体或铁蛋白的变化。
57.根据权利要求6所述的方法，其中，在施用所述治疗性组合物之后，所述受试者表现出少于5次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。
58.根据权利要求57所述的方法，其中所述受试者在施用第一剂量的所述治疗性组合物后29天内表现出少于5次的COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。
59.根据权利要求57或58所述的方法，其中所述受试者表现出少于4次、少于3次、少于2次或少于1次COVID-19相关医疗护理访视、远程医疗访视、入院和/或入住重症监护室(ICU)。
60.根据权利要求52至59中任一项所述的方法，其中所述受试者在第一次施用所述治疗性组合物后2天至3周内SARS-CoV-2检测呈阴性。
61.根据权利要求60所述的方法，其中在鼻咽拭子样本、鼻腔样本或唾液样本中通过RT-qPCR来确定所述SARS-CoV-2的阴性检测。
62.根据权利要求1至6或10至62中任一项所述的方法，还包括向所述受试者施用另外的治疗剂。
63.根据权利要求62所述的方法，其中所述另外的治疗剂是抗病毒化合物。
64.根据权利要求63所述的方法，其中所述抗病毒化合物是瑞德西韦。
65.根据权利要求62所述的方法，其中所述另外的治疗剂是IL-6或IL-6R阻断剂。
66.根据权利要求65所述的方法，其中所述另外的治疗剂是托珠单抗或沙利鲁单抗。
67.根据权利要求62所述的方法，其中所述另外的治疗剂是类固醇。
68.根据权利要求62至67中任一项所述的方法，其中所述另外的治疗剂在所述治疗性组合物之前施用。
69.根据权利要求62至67中任一项所述的方法，其中所述另外的治疗剂在所述治疗性组合物之后或同时施用。
70.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者对SARS-CoV-2感染呈血清阴性。
71.一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，所述方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中所述治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ IDNO:2/10的氨基酸序列，所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与施用安慰剂的可比血清阴性受试者群体相比，所述治疗性组合物在施用给血清阴性受试者群体时更快速地缓解了SARS-CoV-2感染的至少一个症状。
72.一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，所述方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中所述治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ IDNO:2/10的氨基酸序列，所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与可比血清阳性受试者群体相比，所述治疗性组合物在施用给血清阴性受试者群体时更快速地缓解了SARS-CoV-2感染的至少一个症状。
73.一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，所述方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中所述治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ IDNO:2/10的氨基酸序列，所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与施用当天(第0天)相比，所述治疗性组合物在施用后7天(第7天)降低了受试者群体的病毒载量。
74.根据权利要求73所述的方法，其中与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用0.6g所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，血清阴性受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的时间加权平均变化多至少0.86log10拷贝/mL的降低(p<0.0001)。
75.根据权利要求73所述的方法，其中与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用1.2g所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，血清阴性受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的变化多至少1.04log10拷贝/mL的降低(p<0.0001)。
76.根据权利要求73所述的方法，其中与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用0.6g所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，所述受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的平均变化多至少0.71log10拷贝/mL的降低(p<0.0001)。
77.根据权利要求73所述的方法，其中与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，在用1.2g所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的患者中，所述受试者群体鼻咽(NP)病毒载量自基线到第7天的平均变化多0.86log10拷贝/mL的降低(p<0.0001)。
78.一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，所述方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中所述治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ IDNO:2/10的氨基酸序列，所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中所述治疗性组合物降低了受试者群体的病毒载量。
79.根据权利要求78所述的方法，其中施用所述治疗性组合物包括施用0.6g的所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g的所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，并且其中与施用前第0天测量的基线病毒载量相比，所述施用在施用后第7天产生了至少3.00log10拷贝/mL的平均病毒载量降低。
80.根据权利要求79所述的方法，其中所述降低为至少3.50log10拷贝/mL。
81.根据权利要求79所述的方法，其中所述降低为至少3.90log10拷贝/mL。
82.根据权利要求78所述的方法，其中施用所述治疗性组合物包括施用1.2g的所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g的所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体，并且其中与施用前第0天测量的基线病毒载量相比，所述施用在施用后第7天产生了至少3.50log10拷贝/mL的平均病毒载量降低。
83.根据权利要求79所述的方法，其中所述降低为至少3.75log10拷贝/mL。
84.根据权利要求79所述的方法，其中所述降低为至少4.09log10拷贝/mL。
85.一种用于改善SARS-CoV-2感染的一个或多个临床参数的方法，所述方法包括向患有SARS-CoV-2感染的受试者施用治疗性组合物，其中所述治疗性组合物包含第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段和第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段，所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个重链互补决定区(HCDR)和三个轻链互补决定区(LCDR)，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ IDNO:2/10的氨基酸序列，所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或其抗原结合片段包含三个HCDR和三个LCDR，所述三个HCDR和所述三个LCDR包含在HCVR和LCVR氨基酸序列对内，所述HCVR和LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:22/30的氨基酸序列，其中与用安慰剂治疗的可比受试者群体相比，所述治疗性组合物将在用0.6g所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和0.6g所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体或1.2g所述第一抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体和1.2g所述第二抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗的受试者群体中将症状缓解(定义为症状变得轻微或消失)的时间缩短了中值4天。
86.根据权利要求78至85中任一项所述的方法，其中所述受试者和/或受试者群体包括没有因COVID-19住院的受试者。
Applications Claiming Priority (67)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US202063034348P | 2020-06-03 | 2020-06-03 | |
| US63/034,348 | 2020-06-03 | ||
| US202063036956P | 2020-06-09 | 2020-06-09 | |
| US63/036,956 | 2020-06-09 | ||
| US202063038274P | 2020-06-12 | 2020-06-12 | |
| US63/038,274 | 2020-06-12 | ||
| US202063043336P | 2020-06-24 | 2020-06-24 | |
| US63/043,336 | 2020-06-24 | ||
| US202063060592P | 2020-08-03 | 2020-08-03 | |
| US63/060,592 | 2020-08-03 | ||
| US202063062961P | 2020-08-07 | 2020-08-07 | |
| US63/062,961 | 2020-08-07 | ||
| US202063065799P | 2020-08-14 | 2020-08-14 | |
| US63/065,799 | 2020-08-14 | ||
| US202063084881P | 2020-09-29 | 2020-09-29 | |
| US202063085066P | 2020-09-29 | 2020-09-29 | |
| US63/084,881 | 2020-09-29 | ||
| US63/085,066 | 2020-09-29 | ||
| US202063089399P | 2020-10-08 | 2020-10-08 | |
| US63/089,399 | 2020-10-08 | ||
| US202063090690P | 2020-10-12 | 2020-10-12 | |
| US63/090,690 | 2020-10-12 | ||
| US202063094133P | 2020-10-20 | 2020-10-20 | |
| US63/094,133 | 2020-10-20 | ||
| US202063105779P | 2020-10-26 | 2020-10-26 | |
| US63/105,779 | 2020-10-26 | ||
| US202063106696P | 2020-10-28 | 2020-10-28 | |
| US63/106,696 | 2020-10-28 | ||
| US202063112140P | 2020-11-10 | 2020-11-10 | |
| US63/112,140 | 2020-11-10 | ||
| US202063116773P | 2020-11-20 | 2020-11-20 | |
| US63/116,773 | 2020-11-20 | ||
| US202063119593P | 2020-11-30 | 2020-11-30 | |
| US63/119,593 | 2020-11-30 | ||
| US202063120065P | 2020-12-01 | 2020-12-01 | |
| US63/120,065 | 2020-12-01 | ||
| US202063124980P | 2020-12-14 | 2020-12-14 | |
| US63/124,980 | 2020-12-14 | ||
| US202063131627P | 2020-12-29 | 2020-12-29 | |
| US63/131,627 | 2020-12-29 | ||
| US202163141423P | 2021-01-25 | 2021-01-25 | |
| US63/141,423 | 2021-01-25 | ||
| US202163141952P | 2021-01-26 | 2021-01-26 | |
| US63/141,952 | 2021-01-26 | ||
| US202163142471P | 2021-01-27 | 2021-01-27 | |
| US63/142,471 | 2021-01-27 | ||
| US202163144789P | 2021-02-02 | 2021-02-02 | |
| US63/144,789 | 2021-02-02 | ||
| US202163150978P | 2021-02-18 | 2021-02-18 | |
| US63/150,978 | 2021-02-18 | ||
| US202163162504P | 2021-03-17 | 2021-03-17 | |
| US63/162,504 | 2021-03-17 | ||
| US202163162996P | 2021-03-18 | 2021-03-18 | |
| US63/162,996 | 2021-03-18 | ||
| US202163164488P | 2021-03-22 | 2021-03-22 | |
| US63/164,488 | 2021-03-22 | ||
| US202163165654P | 2021-03-24 | 2021-03-24 | |
| US63/165,654 | 2021-03-24 | ||
| US202163166187P | 2021-03-25 | 2021-03-25 | |
| US63/166,187 | 2021-03-25 | ||
| US202163173468P | 2021-04-11 | 2021-04-11 | |
| US63/173,468 | 2021-04-11 | ||
| US202163185301P | 2021-05-06 | 2021-05-06 | |
| US63/185,301 | 2021-05-06 | ||
| US202163186029P | 2021-05-07 | 2021-05-07 | |
| US63/186,029 | 2021-05-07 | ||
| PCT/US2021/035556 WO2021247779A1 (en) | 2020-06-03 | 2021-06-02 | METHODS FOR TREATING OR PREVENTING SARS-CoV-2 INFECTIONS AND COVID-19 WITH ANTI-SARS-CoV-2 SPIKE GLYCOPROTEIN ANTIBODIES |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116057069A true CN116057069A (zh) | 2023-05-02 |
Family
ID=78829987
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202180043533.6A Pending CN116057069A (zh) | 2020-06-03 | 2021-06-02 | 用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗或预防SARS-CoV-2感染和COVID-19的方法 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP4161960A1 (zh) |
| JP (1) | JP2023528441A (zh) |
| KR (1) | KR20230019166A (zh) |
| CN (1) | CN116057069A (zh) |
| AU (1) | AU2021283349A1 (zh) |
| BR (1) | BR112022024662A2 (zh) |
| CA (1) | CA3181026A1 (zh) |
| CL (1) | CL2022003390A1 (zh) |
| CR (1) | CR20220660A (zh) |
| IL (1) | IL298425A (zh) |
| MX (1) | MX2022014852A (zh) |
| TW (1) | TW202210506A (zh) |
| WO (1) | WO2021247779A1 (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PE20221893A1 (es) | 2020-04-02 | 2022-12-13 | Regeneron Pharma | Anticuerpos contra glicoproteina de espicula anti-sars-cov-2 y fragmentos de union al antigeno |
| WO2023122211A2 (en) * | 2021-12-21 | 2023-06-29 | Duke University | Coronavirus antibodies and uses thereof |
| US20240156947A1 (en) * | 2022-11-01 | 2024-05-16 | RNAimmune, Inc. | Composition and methods for mrna vaccines against novel omicron coronavirus infections |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2568899T3 (es) | 1999-04-09 | 2016-05-05 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Procedimiento para controlar la actividad de una molécula inmunofuncional |
| US7737725B1 (en) | 2008-04-04 | 2010-06-15 | Xilinx, Inc. | Device control register for a processor block |
| ES2661074T3 (es) | 2009-06-02 | 2018-03-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Células deficientes de fucosilación |
| TWI682941B (zh) | 2013-02-01 | 2020-01-21 | 美商再生元醫藥公司 | 含嵌合恆定區之抗體 |
| AU2016242866B2 (en) | 2015-03-30 | 2021-06-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Heavy chain constant regions with reduced binding to FC gamma receptors |
| CN111088283B (zh) * | 2020-03-20 | 2020-06-23 | 苏州奥特铭医药科技有限公司 | mVSV病毒载体及其病毒载体疫苗、一种基于mVSV介导的新冠肺炎疫苗 |
| PE20221893A1 (es) | 2020-04-02 | 2022-12-13 | Regeneron Pharma | Anticuerpos contra glicoproteina de espicula anti-sars-cov-2 y fragmentos de union al antigeno |
-
2021
- 2021-06-02 BR BR112022024662A patent/BR112022024662A2/pt unknown
- 2021-06-02 CN CN202180043533.6A patent/CN116057069A/zh active Pending
- 2021-06-02 JP JP2022574373A patent/JP2023528441A/ja active Pending
- 2021-06-02 CR CR20220660A patent/CR20220660A/es unknown
- 2021-06-02 EP EP21736418.1A patent/EP4161960A1/en active Pending
- 2021-06-02 MX MX2022014852A patent/MX2022014852A/es unknown
- 2021-06-02 IL IL298425A patent/IL298425A/en unknown
- 2021-06-02 CA CA3181026A patent/CA3181026A1/en active Pending
- 2021-06-02 KR KR1020227046432A patent/KR20230019166A/ko unknown
- 2021-06-02 AU AU2021283349A patent/AU2021283349A1/en active Pending
- 2021-06-02 WO PCT/US2021/035556 patent/WO2021247779A1/en unknown
- 2021-06-03 TW TW110120301A patent/TW202210506A/zh unknown
-
2022
- 2022-11-30 CL CL2022003390A patent/CL2022003390A1/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL298425A (en) | 2023-01-01 |
| MX2022014852A (es) | 2023-02-01 |
| EP4161960A1 (en) | 2023-04-12 |
| KR20230019166A (ko) | 2023-02-07 |
| CA3181026A1 (en) | 2021-12-09 |
| WO2021247779A1 (en) | 2021-12-09 |
| JP2023528441A (ja) | 2023-07-04 |
| CL2022003390A1 (es) | 2023-05-26 |
| TW202210506A (zh) | 2022-03-16 |
| US20210395345A1 (en) | 2021-12-23 |
| BR112022024662A2 (pt) | 2023-04-04 |
| CR20220660A (es) | 2023-02-17 |
| AU2021283349A1 (en) | 2023-02-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20240150439A1 (en) | Neutralizing Anti-SARS-CoV-2 Antibodies and Methods of Use Thereof | |
| ES2789348T3 (es) | Anticuerpos neutralizantes para GP120 y sus usos | |
| CN116057069A (zh) | 用抗SARS-CoV-2刺突糖蛋白抗体治疗或预防SARS-CoV-2感染和COVID-19的方法 | |
| TW201517917A (zh) | 使用ｉｌ-１７拮抗劑治療類風濕性關節炎之方法 | |
| US11919945B2 (en) | Neutralizing anti-SARS-CoV-2 antibodies | |
| WO2013059524A2 (en) | Antibodies directed against influenza | |
| TW202207983A (zh) | 用於sars-cov-2感染的抗體療法 | |
| CA3199594A1 (en) | Antibodies against sars-cov-2 and uses thereof | |
| US20220227844A1 (en) | Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies | |
| CN108690134A (zh) | 用于治疗乙肝感染及相关疾病的抗体 | |
| CN114630680A (zh) | 用于治疗乙型肝炎病毒感染的抗体组合物和方法 | |
| US11932681B2 (en) | Hepatitis B antibodies | |
| EP3253787B1 (en) | Human neutralizing antibodies binding to influenza neuraminidase | |
| US11999777B2 (en) | Methods for treating or preventing SARS-CoV-2 infections and COVID-19 with anti-SARS-CoV-2 spike glycoprotein antibodies | |
| TW202337896A (zh) | 以抗SARS-CoV-2棘醣蛋白抗體治療或預防SARS-CoV-2感染及COVID-19之方法 | |
| WO2024053719A1 (ja) | コロナウイルス変異株に対するヒト抗体またはその抗原結合断片 | |
| TW202346344A (zh) | 以tl1a抑制劑及il23抑制劑的組合治療發炎疾病之方法 | |
| CN117042797A (zh) | 用于治疗乙型肝炎病毒感染的组合物和方法 | |
| WO2023034871A1 (en) | High concentration antibody therapies for sars-cov-2 infection | |
| CA3230613A1 (en) | Antibody therapies for sars-cov-2 infection in pediatric subjects | |
| WO2022235867A2 (en) | Neutralizing anti-sars- cov-2 antibodies and methods of use thereof | |
| WO2024036313A2 (en) | Anti-sars-cov-2 antibodies and methods of use thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |