CN116019149B - 一种特殊医学用途配方食品脂肪组件 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种特殊医学用途配方食品脂肪组件及其制备方法,属于食品加工技术领域,所述脂肪组件中,中碳链脂肪酸占总脂肪酸的20%‑50wt%,中链脂肪酸与长链脂肪酸的质量比为1:1‑1:3;饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸含量分别占总脂肪酸的35%‑60wt%、15%‑27.5wt%、30%‑55wt%;所述脂肪组件的甘油三酯组成上,中长碳链甘油三酯占总甘油三酯的30%‑85wt%,sn‑1,3位中碳链脂肪酸占sn‑1,3位总脂肪酸的30‑60wt%,sn‑2位长碳链脂肪酸占sn‑2位总脂肪酸的65%‑90wt%。本发明所提供的脂肪组件甘油三酯结构具有更高的消化吸收率,且提高EPA和DHA的生物可及性,有助于改善肝癌患者化疗期间营养状态,也能为术后肝癌患者提供即时能量,减少炎症反应,提高免疫能力。
Description
技术领域
本发明涉及一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件及其制备方法,属于食品加工技术领域。
背景技术
肝癌是常见的消化系统恶性肿瘤。在我国,肝癌是发病率居第4位,死亡率居第2位的恶性肿瘤。肝脏是体内糖、脂肪和蛋白质能量代谢的中枢器官,具有感知环境和代谢刺激的能力,并提供最佳的适应性反应。肝癌合并肝功能不全的患者常出现食欲减退和进食不足,80%以上患者存在不同程度的营养不良。营养不良可引起患者器官功能与系统功能不同程度的减退,降低患者对手术、放疗和化疗等治疗的耐受性,最终影响预后及生存期。同时,放化疗和手术创伤也会引起患者消化道症状如食欲下降、恶心、呕吐、腹痛腹泻等,从而导致或加重患者的摄入不足及吸收障碍,使患者的营养状态进一步恶化。越来越多的循证医学证据表明,短期营养不良可增加患者疾病相关并发症、术后病死率,降低抗肿瘤治疗的反应性及耐受性,延长住院时间等。长期营养不良会严重影响患者生活质量和活动能力,缩短患者生存时间。由此可见,在肝癌的治疗过程中必须高度重视营养不良状态,对肝癌患者进行科学、合理的营养治疗已成为肝癌综合治疗中的一个重要措施。
肝癌患者对碳水化合物的利用能力有限,仅为正常人的35%。15%~30%的肝癌患者可发生肝源性糖尿病,因此,葡萄糖供给量宜小于150~180g/d(600~720kcal/d),以免过多葡萄糖转化为脂肪沉积于肝脏。因此,对于营养不良的肝癌患者,脂质成为临床治疗中重要的营养物质。脂肪作为肝癌患者所需能量的重要来源(约30~50%),其脂肪酸组成和甘油三酯结构对肝癌患者的营养补充起到非常重要的作用。目前临床营养治疗中,常用的脂质营养为中/长链脂肪乳注射液,适用于需要高热量的肝癌患者和不能经胃肠道摄取营养的肝癌患者,以补充适当的能量和必需脂肪酸。然而,中/长链脂肪乳注射液(MCT/LCT)存在一些明显的副作用,由于物理混合的MCT/LCT中MCT首先被水解,抢占了血管内皮的脂蛋白脂酶,导致LCT水解障碍,血清TG维持在较高水平。此外,MCT/LCT注射与术后淋巴细胞和中性粒细胞凋亡有关,导致术后患者免疫功能损失。因此,在临床上要根据患者的实际情况考虑使用MCT/LCT,并密切关注患者的耐受情况,以避免呕吐、腹泻、甚至死亡等副作用的发生。
肠内营养是临床营养支持的重要手段,有助于维持肠粘膜细胞结构与功能的完整。当患者需要营养支持且具有完整或者部分胃肠道功能时,应首选肠内营养途径。然而,目前市场上大多数用于癌症营养治疗的营养补充剂没有考虑肝癌患者特殊的脂质营养需求,产品中脂防酸组成及甘油三酯结构不能很好的为肝癌患者提供能量和营养物质。为此,以肝癌患者的代谢特点及其对脂质营养的需求为依据,通过循证医学手段,开发一种更符合肝癌患者营养需求的脂肪组件以应用于肝癌患者特殊医学用途配方食品中,对于解决目前肝癌患者临床营养治疗中存在的问题具有重要意义。
肝癌患者常伴有肝损伤,患者常出现食欲减退和进食不足,80%以上患者存在不同程度的营养不良。肝功能异常时,肝脏的脂质代谢功能较弱,造成脂质代谢异常,正常的脂肪合成和分泌平衡被打破,血浆中游离脂肪酸以及甘油三酯出现升高。需要特定的脂质提供即时能量和必需脂肪酸。
发明内容
基于此,本发明的目的之一在于提供了一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,该脂肪组件脂肪酸组成更符合肝癌患者的脂质营养需求,即同时包含中链脂肪酸和长链脂肪酸,含有一定量的单不饱和脂肪酸和n-3脂肪酸,且n-6/n-3比值较低;此外,其独特的甘油三酯结构提高了脂肪组件的消化吸收率。该脂肪组件既可以为存在脂质消化吸收障碍的肝癌患者提供必需的能量,又可以提供必需脂肪酸,同时,n-3脂肪酸可以减少患者的炎症因子,改善患者的免疫指标,更有助于肝癌患者的营养治疗。
所述一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件的脂肪酸组成具有以下特点,
中碳链脂肪酸占总脂肪酸质量的20%-50%,
中链脂肪酸与长链脂肪酸的质量比为1∶1-1∶3,
饱和脂肪酸含量占总脂肪酸质量的35%-60%,
单不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸质量的15%-27.5%,
多不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸质量的30%-55%,
所述脂肪组件的甘油三酯组成上,中长碳链甘油三酯占总甘油三酯质量的30%-85%,sn-1,3位中碳链脂肪酸占sn-1,3位总脂肪酸的30-60%,sn-2位长碳链脂肪酸占sn-2位总脂肪酸的65%-90%;
所述中碳链脂肪酸为碳原子6-12的脂肪酸;所述长链脂肪酸为碳原子14-24的脂肪酸。
在一种实施方式中,所述中碳链脂肪酸占总脂肪酸质量的25%-40%。
在一种实施方式中,所述中链脂肪酸与长链脂肪酸的质量比为1∶1-1∶2。
在一种实施方式中,所述饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的35%-50%。
在一种实施方式中,所述单不饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的15%-22%。
在一种实施方式中,所述多不饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的35%-45%。
在一种实施方式中,所述中长碳链甘油三酯占总甘油三酯质量的65%-85%。
在一种实施方式中,所述脂肪组件的甘油三酯组成上,sn-2位长碳链脂肪酸占总脂肪酸的75%-90%。
中长链甘油三酯(MLCT)是一种新型的合成脂类,通过化学或生物酶催化合成,在甘油骨架中同时含有中链脂肪酸(MCFAs)和长链脂肪酸(LCFAs)。它结合了LCT和MCT的优点,可以快速提供能量,克服了LCT在代谢及免疫功能上的缺陷,同时弥补了MCT不含必需脂肪酸的不足,实现脂肪酸的同步运输,避免了酮体过量中毒。大量的临床试验表明,在改善肿瘤病人术后效果上,MLCT更具优势:如减少体重损失、降低血清甘三酯、胆固醇含量、减轻炎症反应、提高免疫功能、减轻免疫系统并发症等。因此,对于需要营养治疗的患者,MLCT是MCT/LCT的替代品。
在一种实施方式中,所述甘油三酯组成中包括含有EPA和/或DHA的MLCT结构脂。
在一种实施方式中,所述含有EPA和/或DHA的MLCT结构脂,占总甘油三酯质量的5%-30%,优选地占总甘油三酯质量的15%-30%。
在一种实施方式中,所述多不饱和脂肪酸为C18:2n-6,C18:3n-3,C20:5:n-3,C22:6n-3。
在一种实施方式中,所述油脂组合物的多不饱和脂肪酸组成上,
C18:2n-6占总脂肪酸质量的10%-30%;
C18:3n-3占总脂肪酸质量的2%-20%;
C20:5n-3占总脂肪酸质量的5%-20%;
C22:6n-3占总脂肪酸质量的2%-10%。
在一种实施方式中,所述C18:2n-6占总脂肪酸质量的16%-25%。
在一种实施方式中,所述C18∶3n-3占总脂肪酸质量的4%-15%。
在一种实施方式中,所述C20:5n-3占总脂肪酸质量的10%-18%。
在一种实施方式中,所述C22:6n-3占总脂肪酸质量的2%-8%。
在一种实施方式中,所述脂肪组件的脂肪酸组成上,n-6脂肪酸与n-3脂肪酸的质量比为1∶1-5∶1。
在一种实施方式中,所述脂肪组件的脂肪酸组成上,n-6脂肪酸与n-3脂肪酸的质量比为1∶1-2∶1。
在一种实施方式中,中碳链脂肪酸和长碳链脂肪酸来源于植物油或动物油或其分提物中的一种或多种油脂。
在一种实施方式中,所述中碳链脂肪酸来源包括MCT、棕榈仁油、椰子油等结构脂和动植物油脂;
所述长碳链脂肪酸的来源包括大豆油、棕榈油、菜籽油、葵花籽油、棕榈油、亚麻籽油、鱼油、藻油等动植物油脂、微生物油脂以及这些油脂分提获得的改性油脂。
在一种实施方式中,所述脂肪组件以质量百分数计,包括25%-50%中链甘油三酯以及50%-75%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-60%大豆油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-60%大豆油,1%-15%亚麻籽油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-40%大豆油,10-20%葵花籽油,1%-15%亚麻籽油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-40%大豆油,10-20%菜籽油,1%-15%亚麻籽油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-35%大豆油,5-15%葵花籽油,5%-15%棕榈油,1%-5%亚麻籽油,15%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-35%大豆油,5-15%葵花籽油,5%-15%棕榈油,1%-5%亚麻籽油,15%-20%鱼油;
本发明的另一个目的在于提供一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件的制备方法,此方法操作简单,成本较低,适合于规模化生产。
一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件的制备方法,中碳链甘油三酯和长碳链甘油三酯按质量比1∶1-1∶3混合,无溶剂体系下,加入反应底物质量比4-14%的脂肪酶,温度50-70℃,进行酯酯交换反应3-12h。
在一种实施方式中,所述脂肪酶包括固定化酶NS 40086、Lipozyme TL IM、Lipozyme RM、Lipozyme 435、Novozym 435中的一种或几种。
本发明的第三个目的在于,提供一种肝癌患者特殊医学用途配方食品,所述含有上述适用于肝癌患者特殊医学用途食品脂肪组件,并且所述油脂组合物含量为30-50g/L,优选含量为35-45g/L。
有益效果
肝癌患者对碳水化合物的利用能力有限,仅为正常人的35%。无法满足患者的能量需求。此外,肝癌患者常伴随肝损伤,肝脏的脂质代谢功能较弱,需要特定的脂质提供即时能量和必需脂肪酸。本发明所设计的脂肪组件是基于肝癌患者的代谢特点及其对脂质营养的需求,与现有市售癌症患者的营养补充剂相比,能更有效的为患者提供营养支持。本发明提供了一种油脂组件的制备方法,所得产物其甘油三酯结构,与中链甘油三酯和长链甘油三酯的物理混合物相比,更有利于具有营养不良的肝癌患者体内脂肪的消化吸收和代谢。同时可提高脂肪酸,尤其是EPA和DHA的生物可及性,有利于存在脂质消化吸收障碍的肝癌患者对EPA和DHA的利用,更符合肝癌营养不良特殊人群的营养需求。
此外,本制备方法高效,原料的利用率高,所得产物杂质少,甘油三酯含量高达95%以上,其中中长碳链甘油三酯含量达80%以上;无溶剂体系以及常温反应的选择,同时保证了制备方法绿色以及产品的品质,操作简单,适合于规模化生产。
附图说明
图1为实施例1-3中脂肪组件和物理混合物的脂解程度图
图2为脂肪组件3与其对应物理混合物消化前后脂质分子组成对比
图3为实施例1-3中脂肪组件和物理混合物体外消化过程游离脂肪酸释放水平
图4为脂肪组件3与其对应物理混合物体外消化过程游离脂肪酸释动力学常数
具体实施方式
下面将结合本说明书中的附图,对本说明书提供的实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施方式仅仅是一部分实施方式,而不是全部的实施方式。基于本说明书提供的实施方式,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式,都属于本发明保护的范围。
实施例1脂肪组件-1和物混-1的制备
将中链甘油三酯、大豆油、和鱼油(0.40∶0.30∶0.30wt%)混合得到物混-1。
将中链甘油三酯、大豆油、和鱼油(0.40∶0.30∶0.30wt%)混合后加入到反应釜中,加入8wt%(反应底物质量比)固定化脂肪酶Lipozyme RM,温度保持在60℃,300r/min搅拌条件下反应5h后,将油转入离心管,4000r/min离心5min,将脂肪酶和油分离,碱法中和除去油中的游离脂肪酸,纯化得到脂肪组件-1。
实施例2脂肪组件-2和物混-2的制备
将中链甘油三酯、大豆油、菜籽油、棕榈油、亚麻籽油和鱼油(0.33∶0.33∶0.05∶0.09∶0.02∶0.18wt%)混合得到物混-2。
将中链甘油三酯、大豆油、菜籽油、棕榈油、亚麻籽油和鱼油(0.33∶0.33∶0.05∶0.09∶0.02∶0.18wt%)混合后加入到反应釜中,加入10%(反应底物质量比)脂肪酶Lipozyme RM,温度保持在60℃,300r/min搅拌条件下反应8h后,将油转入离心管,4000r/min离心5min,将脂肪酶和油分离,碱法中和除去油中的游离脂肪酸,得到脂肪组件-2。
实施例3脂肪组件-3和物混-3的制备
将中链甘油三酯、大豆油、葵花籽油、亚麻籽油和鱼油(0.34∶0.31∶0.16∶0.01∶0.18wt%)混合得到物混-3。
将中链甘油三酯、大豆油、葵花籽油、亚麻籽油和鱼油(0.34∶0.31∶0.16∶0.01∶0.18wt%)混合后加入到反应釜中,加入8%(反应底物质量比)脂肪酶Lipozyme RM,温度保持在60℃,500r/min搅拌条件下反应4h后,将油转入离心管,4000r/min离心5min,将脂肪酶和油分离,碱法中和除去油中的游离脂肪酸,得到脂肪组件-3。
实施例4脂肪组件及物混的检测
测定所得的脂肪组件1、2、3及其对应的物理混合物(简称为物混)的脂肪酸组成和甘油三酯组成。脂肪酸组成采用GC-FID进行测定。甘油三酯的组成采用UPLC-Q-TOF-MS(超高压液相色谱飞行时间质谱仪)进行测定。
3种脂肪组件脂肪酸组成如表1所示。3种组合物的甘油三酯组成如表2表示。
表1三种脂肪组件及其对应物理混合物的脂肪酸组成
由表1中结果可知,经过酯交换反应后,与对应的物理混合物相比,脂肪组件的脂肪酸组成变化不显著,然而,sn-2脂肪酸变化较大。
脂肪组件1中:
长链脂肪酸占总脂肪酸质量的60.13%,
中链脂肪酸占总脂肪酸质量的39.87%,
MCFA∶LCFA=1∶1.50;
饱和脂肪酸总脂肪酸质量的43.68%,
单不饱和脂肪酸总脂肪酸质量的17.05%,
多不饱和脂肪酸含量为39.27%;其中n6/n3为1.58∶1,
Sn-2位上的中链脂肪酸含量与物理混合相比有所减少,仅占14.76%,sn-1,3位中链脂肪酸比物理混合增加,占45.06%,
Sn-2位上的长链脂肪酸含量较物理混合有所增加,占85.24%,尤其是C20:5和C22:6。
脂肪组件2中:
中链脂肪酸占总脂肪酸质量的30.51%,
长链脂肪酸占总脂肪酸质量的69.49%,
MCFA∶LCFA=1∶2.27;
饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的41.42%,
单不饱和脂肪酸总占脂肪酸质量的17.11%,
多不饱和脂肪酸含量为41.47%;其中n6/n3为1.17∶1,
Sn-2位上的中链脂肪酸含量与物理混合相比有所减少,仅占11.25%,sn-1,3位中链脂肪酸比物理混合增加,占40.14%,
Sn-2位上的长链脂肪酸含量较物理混合有所增加,占88.75%,尤其是C20:5和C22:6。
脂肪组件3中:
中链脂肪酸占总脂肪酸质量的27.08%,
长链脂肪酸占总脂肪酸质量的72.92%,
MCFA∶LCFA=1∶2.69;
饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的35.52%,
单不饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的25.91%,
多不饱和脂肪酸含量为38.57%;其中n6/n3为1.13∶1,
Sn-2位上的中链脂肪酸含量与物理混合相比有所减少,仅占13.46%,sn-1,3位中链脂肪酸比物理混合增加,占33.89%,
Sn-2位上的长链脂肪酸含量较物理混合有所增加,占86.54%,尤其是C20:5和C22:6。
表2三种脂肪组件的甘油三酯组成
注:“nd”未检出
由表2可知,在经过酯交换反应后,与物理混合物对比,脂肪组件中的甘油三酯结构发生巨大变化,物理混合物中仅包含MMM和LLL(M代表中链脂肪酸,L代表长链脂肪酸)两种甘油三酯结构,而脂肪组件不仅包含这两种,还含有MML和MLL结构的甘油三酯。
脂肪组件1中含有EPA的MLCT结构脂和/或含有DHA的MLCT占总甘油三酯质量的29.68%。
脂肪组件2中含有EPA的MLCT结构脂和/或含有DHA的MLCT占总甘油三酯质量的13.51%。
脂肪组件3中含有EPA的MLCT结构脂和/或含有DHA的MLCT占总甘油三酯质量的12.19%。
实施例5不同脂肪组件的脂解程度测定
油脂乳液制备:初始的水包油乳液由10%的油相和90%的水相组成。将1g吐温20分散到99g磷酸盐缓冲溶液中(5mM,pH 7.0)中制备水相,置于4℃保存过夜,以确保充分的水合作用。将10g油相加入90g水相中,然后用高速Ultra-Turrax搅拌器在19000rpm的转速下剪切2min,形成原油乳状液,然后转入高压均质器,在680Bar压力下循环5次。将10%油相的乳液用PBS稀释5倍,用于后续的体外消化实验。
体外模拟消化过程:
构建体外消化模型,研究了脂肪组件在小肠消化过程中的消化行为。脂质乳液在体外消化过程中经历了口腔、胃和小肠三个阶段。在口腔阶段,60mL初始乳液(含2%的油相)与60mL含1.8g粘蛋白的口腔工作液混合,调至pH 6.80±0.05后,在37℃的摇床中孵育2min。进入胃消化阶段,将75mL胃工作液与等体积的口腔消化产物混合,调节pH为2.50±0.05。在37℃下,以100rpm的速度震荡120min。在小肠消化阶段,首先调节胃食糜(60mL)pH至7.00±0.05,然后加入小肠工作液(3mL)和胆盐溶液(7mL),调节pH至7.00±0.05。随后快速加入胰脂肪酶溶液(5mL),于37℃下反应120min,此过程将甘油三酯水解成甘二酯、单甘酯和游离脂肪酸。此外,在小肠消化阶段,采用0.1M NaOH溶液与pH-stat滴定法维持小肠消化液的pH为7.00±0.05。上述所有溶液和消化液在实验前均于37℃水浴中预热10min。
脂解产物提取:用氯仿/甲醇混合溶剂(2∶1,v/v)辅以超声萃取提取消化产物中的总脂质,氮吹去除溶剂,得到消化后的脂质。
为了确定脂质分解程度,采用配备示差检测器的高效液相色谱(HPLC-RID)分析脂质成分。流动相为正己烷/异丙醇/甲酸(15∶1∶0.003,v/v/v),流速1mL/min,柱温35℃,进样量20μL。脂质分解程度(%)的计算公式为消化过程中释放的游离脂肪酸占油脂中总脂肪酸的百分比,计算公式如下:
其中[TAG],[DAG],[MAG]和[FFA]分别为游离脂肪酸、甘油三酯、甘油二酯、甘油单酯对应的摩尔含量。TAG、DAG、MAG和FFA的摩尔质量由每种脂类的脂肪酸组成推导得到。
此外,还采用UPLC-Q-TOF-MS对脂解产物中未消化的TAGs以及水解产生的DAGs、MAGs和FFAs进行分析。
结果:由脂解程度图(图1)可以看出,脂肪组件1、2、3与其对应的物理混合物的脂解过程相似,在口腔和胃阶段由于缺乏脂肪酶,其脂解程度均较低,进入小肠后,在胰脂肪酶的作用下,脂质分解程度增加。脂肪组件1、2、3的脂解程度均较其分别对应的物理混合物高,分别为52.12%vs 42.85%,59.65%vs 49.14%,63.65%vs 55.14%。可见脂肪组件3的脂解度最高,其次为脂肪组件2,最低的为脂肪组件1。3种脂肪组件的脂解程度差异主要和其脂肪酸组成和甘油三酯组成有关。
为了进一步了解脂解产物中的脂质分子,采用UPLC-Q-TOF-MS检测脂肪组件3及其对应物理混合物消化前后TAGs、DAGs、MAGs和FFAs的组成和相对含量的差异。在两种初始乳剂和消化产物中共鉴定出109种分子,其中TAG 52种,DAG 25种,MAG 14种,FFA 18种。如图2所示,与初始乳剂相比,肠道消化后脂质分子发生了较大变化。在小肠中,大部分TAGs被脂肪酶消化。同时,消化产物中出现了大量的DAGs、MAGs和FFAs。结果与HPLC-RID分析结果一致。比较两组消化产物的脂质分子组成存在较大差异。对于未消化的TAGs,脂肪组件3消化产物中以MML-和MML-型TAGs为主,而物理混合物中以MMM-和LLL-型TAGs为主。脂肪组件3释放的DAGs主要为18∶1/10∶0、18∶2/10∶0、20∶5/18∶1和20∶5/8∶0,而物理混物释放的DAGs主要为18∶1/18∶2、18∶1/18∶1、20∶6/20∶6和10∶0/10∶0。两种油脂中释放的MAGs主要为MAG-18∶1,MAG-22∶6,MAG-20∶5和MAG-18∶2。但需要强调的是,脂肪组件3释放的MAGs含量高于物理混合物释放的MAGs。消化产物中甘油单酯的含量主要受油脂中sn-2脂肪酸组成的影响,而甘油三酯消化后主要是以游离脂肪酸和sn-2MAG形式被吸收,尤其是22∶6和20∶5两种长链多不饱和脂肪酸,以sn-2MAG的形式释放,可以提高其后期的生物利用度,更好的发挥其营养价值。
实施例6不同脂肪组件游离脂肪酸释放水平测定
游离脂肪酸释放测定:在小肠消化阶段,用pH-stat自动滴定仪监测释放的游离脂肪酸,并记录120min消化过程中用来中和游离脂肪酸的NaOH(0.1M)的消耗量(mL)。在这个过程中,胰脂肪酶将甘油三酯转化为甘油二酯、单甘酯和游离脂肪酸的复杂混合物。释放的游离脂肪酸(FFAs)以百分含量表示,并通过以下公式计算:
其中,FFAs%为释放FFA的百分比,VNaOH为消化过程中消耗的NaOH溶液体积(L),mNaOH为NaOH的摩尔浓度(mol/L),MWLipid为不同油脂的平均摩尔质量,WLipid为小肠消化液中所含油脂质量。
结果:在模拟小肠消化过程中,几种油脂的消化曲线总体趋势相似,如图3所示。在小肠消化的最初阶段,游离脂肪酸释放量迅速增加,随着时间的延长,FFAs释放量缓慢增加,最后进入平稳阶段。然而,由于TAG结构的不同,物理混合物和脂肪组件的总FFAs释放过程也具有显著差异。小肠消化的前15min内,物理混合物的总FFAs释放量高于脂肪组件。当小肠消化进行15min后,几种油脂的总FFAs释放量均缓慢增加,且脂肪组件的FFAs释放量逐渐超过其对应的物理混合物(脂肪组件1vs物混1∶102.79%vs 87.81%;脂肪组件2vs物混2:99.79%vs 85.81%:脂肪组件3vs物混3∶106.59%vs 94.87%)。这是由于本发明的脂肪组件中含有MML或LLM型甘油三酯,既含有一定的MCFA,又含有一定的LCFA;且长链脂肪酸多数位于sn-2位上,中链脂肪酸位于sn-1,3位,较易被胰脂肪酶消化。
为了探究不同甘油三酯结构的油脂在小肠消化阶段中的水解速率,对不同时间点总FFAs释放率,采用方程ln[(Φmax-Φt)/Φmax]=-kt+b进行一阶动力学曲线拟合(如图4),两条曲线的拟合度良好,R2adj分别为0.9485(物混)和0.9785(MLCT)。比较一阶动力学常数的绝对值可知,物混的一阶动力学常数k的绝对值显著高于MLCT组(0.0444s-vs 0.0395s-),这说明在小肠消化过程中,物混的脂解速率快于MLCT,即MLCT的整体消化率比较慢。值得注意的是,根据FFAs释放量的结果可知,在小肠消化结束时MLCT的消化程度高于物混。上述结果表明在整个小肠消化过程中,MLCT是缓慢持续释放FFA的,相对于物混供能更平稳,这一特点避免了中链脂肪酸在短时间内耗尽,而长链脂肪酸又不能及时提供能量的缺陷。
实施例7 FAs的生物可及性
该实施例对比了脂肪组件3及其对应的物理混合物在体外消化过程中脂肪酸的生物可及性的差别。所谓脂肪酸的生物可及性,是指脂肪酸进入生物体内并被生物利用的难易程度。即从小肠消化液中转移到混合胶束中的脂肪酸的比例。具体操作如下,将25mL小肠消化液转移到离心管中,在4℃条件下以10000rpm/min的转速离心90min。胶束相(中间水相)用注射器收集,并用0.45μm滤膜过滤。采用氯仿/甲醇(2∶1,v/v)辅助超声处理10min,提取胶束相和总消化产物中的脂质,4000rpm/min的转速离心5min,收集下层有机相,氮气吹干。随后,如前所述,将样品皂化、甲基化和FAME量化。同时,以十三烷酸甲酯(5mg/mL)作为内标,对上述提取的脂质样品中FAs的浓度进行定量。FAs生物可及性被定义为在消化结束时从原始油中吸收到胶束相的FAs的重量百分比,即:
其中,C胶束相为胶束相FAs浓度,C消化产物为小肠消化产物FAs浓度。
小肠消化120min后,FAs在物理混合物和脂肪组件3中的生物可及性分别为76.50%和83.29%,两者具有显著性差异(P<0.05)。这一结果与FFAs的释放水平有关,释放的FFAs越多,形成的混合胶束越多,FAs的生物可及性也越高。由表3结果可以看出,不同FA在物理混合物和脂肪组件3中的生物可及性同样具有显著性差异。C10:0、C16:0和C18:0在物理混合物中的生物可及性明显高于脂肪组件3,而C18:1 n-9、C18:2 n-6、C18:3 n-3、C20:5 n-3和C22:6 n-3则是在脂肪组件3中的生物可及性更高。此外,本实验的结果还可以观察到与不饱和脂肪酸相比,饱和脂肪酸,特别是C16:0和C18:0从消化液转移到胶束相的过程中丢失较多。上述结果表明,与物理混合物相比,脂肪组件3可能会减少长链饱和脂肪酸的吸收,同时增加单不饱和脂肪酸和长链多不饱和脂肪酸的吸收,这一现象可能是脂肪组件3在消化过程中,释放的长链饱和脂肪酸较物混少,而不饱和脂肪酸较多,浓度的变化会导致脂肪酸的生物可及性随之改变。总而言之,这种现象对人体健康有益,尤其对需要营养治疗的患者,可能更加有益。
表3物理混合物和脂肪组件3经小肠消化后FAs的生物可及性
注:表中不同小写字母表示两种油脂生物可及性在显著差异(P<0.05)。
实施例8脂肪组件对化疗期间大鼠营养状态的改善作用
该实施例通过建立肝切除大鼠术后化疗模型,考察脂肪组件3作为能量物质对大鼠肝切除后化疗阶段营养状况的影响。实验动物SPF级70%肝切除SD大鼠(6周龄,雄性),饲养于清洁级实验动物中心,温度(23±2℃),湿度60%,自由饮水和采食。30只雄性SD大鼠随机分为3组,分别为实验组1、实验组2和基础对照组。适应一周后开始按饲料配方喂养(表4)。记录每天的摄食量和饮水量,观察大鼠的状态;化疗药物顺铂的剂量为(2.0mg/kg),每周腹腔注射2次,持续21天。
表4饲养肝切除大鼠的膳食配方
饲喂21天后。大鼠禁食12h,称重后,麻醉后心脏取血,采用全自动血液生化分析仪测定检测血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量以及肝功能指标。通过测试体重、肝重、血清生化指标的变化,研究了脂肪组件3对化疗大鼠的营养作用。
在饲喂的21天,每天观察大鼠的状态,对照组大鼠明显消瘦,运动量减少,个别大鼠出现腹泻,毛发粗糙无光泽,且脱毛严重;物理混合组大鼠运动量减少,毛发无光泽,未见呕吐、腹泻、出现死亡现象;脂肪组件3组大鼠未见明显消瘦,未见呕吐,腹泻现象,毛发发黄,无光泽,未见死亡。
表5不同组大鼠体重变化及肝脏重量
表6不同组大鼠血清生化指标水平
由表5可知,脂肪组件3中大鼠体重增加高于对照组和物理混合组,且肝脏重量较高,表明脂肪组件3能更好的改善化疗大鼠的营养状态。
表6可知,对于血脂方面,脂肪组件3中大鼠血清TC、TG和LDL均低于对照组和物理混合组,而HDL高于其他两组。在肝功能方面,脂肪组件3降低了AST和ALT水平,更有利于改善化疗大鼠肝脏功能。此外,脂肪组件3还可以降低炎症因子CRP的水平,同时增加免疫球蛋白IgM和IgG的浓度,有利于减少炎症反应,同时提高机体的免疫水平。
综上,说明本发明所提供的脂肪组件可以有效的改善化疗期间大鼠的营养状态。
可以理解,本文中的具体的例子只是为了帮助本领域技术人员更好地理解本公开,而非限制本发明的范围。
可以理解,本说明书中描述的各种实施方式,既可以单独实施,也可以组合实施,本公开对此并不限定。
除非另有说明,本公开所使用的所有技术和科学术语与本说明书的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的,不是旨在限制本说明书的范围。本说明书所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项的任意的和所有的组合。在本公开和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“上述”和“该”也旨在包括多数形式,除非上下文清楚地表示其他含义。
以上所述,仅为本说明书的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本说明书揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本说明书的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应所述以权利要求的保护范围为准。
Claims (17)
1.一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述脂肪组件的脂肪酸组成具有以下特点,
中碳链脂肪酸占总脂肪酸质量的20%-50%,中链脂肪酸与长链脂肪酸的质量比为1:1-1:3;
饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的35%-60%,单不饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的15%-27.5%,多不饱和脂肪酸占总脂肪酸质量的30%-55%;
所述脂肪组件的甘油三酯组成上,中长碳链甘油三酯MLCT占总甘油三酯质量的65%-85%,sn-1,3位中碳链脂肪酸占sn-1,3位总脂肪酸的30-60%,sn-2位长碳链脂肪酸占sn-2位总脂肪酸的65%-90%;
所述中碳链脂肪酸为碳原子6-12的脂肪酸;所述长链脂肪酸为碳原子14-24的脂肪酸。
2.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述脂肪组件的甘油三酯组成上,sn-2位长碳链脂肪酸占sn-2位总脂肪酸的75%-90%。
3.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述中链脂肪酸与长链脂肪酸的质量比为1:1-1:2。
4.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述甘油三酯组成中包括含有EPA和/或DHA的MLCT结构脂。
5.根据权利要求4所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述含有EPA和/或DHA的MLCT结构脂,其中一种或两种之和占总甘油三酯质量的5%-30%。
6.根据权利要求4所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述含有EPA和/或DHA的MLCT结构脂,其中一种或两种之和占总甘油三酯质量的15%-30%。
7.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述多不饱和脂肪酸为C18:2 n-6,C18:3 n-3,C20:5:n-3,C22:6 n-3。
8.根据权利要求7所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述脂肪组件的多不饱和脂肪酸组成上,
C18:2 n-6占总脂肪酸质量的10%-30%;
C18:3 n-3占总脂肪酸质量的2%-20%;
C20:5 n-3占总脂肪酸质量的5%-20%;
C22:6 n-3占总脂肪酸质量的2%-10%。
9.根据权利要求8所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述脂肪组件的多不饱和脂肪酸组成上,
C18:2 n-6占总脂肪酸质量的16%-25%;
C18:3 n-3占总脂肪酸质量的4%-15%;
C20:5 n-3占总脂肪酸质量的10%-18%;
C22:6 n-3占总脂肪酸质量的2%-8%。
10.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品的脂肪组件,其特征在于,所述脂肪组件的脂肪酸组成上,n-6脂肪酸与n-3脂肪酸的质量比为1:1-5:1。
11.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品的脂肪组件,其特征在于,所述脂肪组件的脂肪酸组成上,n-6脂肪酸与n-3脂肪酸的质量比为1:1-2:1。
12.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述中碳链脂肪酸来源包括MCT、棕榈仁油、椰子油中一种或多种;所述长碳链脂肪酸的来源包括大豆油、棕榈油、菜籽油、葵花籽油、棕榈油、亚麻籽油、鱼油、藻油中一种或多种。
13.根据权利要求12所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件,其特征在于,所述脂肪组件以反应原料的比例计,包括25%-50%中链甘油三酯以及50%-75%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-60%大豆油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-60%大豆油,1%-15%亚麻籽油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-40%大豆油,10-20%葵花籽油,1%-15%亚麻籽油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-40%大豆油,10-20%菜籽油,1%-15%亚麻籽油,10%-20%鱼油;
或,25%-50%中链甘油三酯,20%-35%大豆油,5-15%葵花籽油,5%-15%棕榈油,1%-5%亚麻籽油,15%-20%鱼油。
14.根据权利要求1所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件的制备方法,其特征在于,中碳链甘油三酯来源的油脂和长碳链甘油三酯来源的油脂按质量比1:1-1:3混合,无溶剂体系下,加入反应底物质量比4-14%的脂肪酶,温度50-70℃,进行酯酯交换反应3-12 h。
15.根据权利14所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品脂肪组件的制备方法,其特征在于,所述脂肪酶包括固定化酶NS 40086、Lipozyme TL IM、Lipozyme RM、Lipozyme 435、Novozym 435中的一种或几种。
16.一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品,其特征在于,所述含有上述权利要求1-13任意一种适用于肝癌患者特殊医学用途食品脂肪组件,并且所述脂肪组件含量为30-50 g/L。
17.根据权利要求16所述的一种适用于肝癌患者特殊医学用途配方食品,其特征在于,所述脂肪组件含量为35-45 g/L。
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