CN115996704A - 抗体制剂稀释剂 - Google Patents

抗体制剂稀释剂 Download PDF

Info

Publication number
CN115996704A
CN115996704A CN202180047161.4A CN202180047161A CN115996704A CN 115996704 A CN115996704 A CN 115996704A CN 202180047161 A CN202180047161 A CN 202180047161A CN 115996704 A CN115996704 A CN 115996704A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ser
val
thr
gly
leu
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180047161.4A
Other languages
English (en)
Inventor
S·杜贝
B·加西亚特
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ikonos Science
Original Assignee
Ikonos Science
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ikonos Science filed Critical Ikonos Science
Publication of CN115996704A publication Critical patent/CN115996704A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明涉及一种用于稀释包括多特异性异源二聚体免疫球蛋白的药物产品的稀释剂，以获得准备通过输注施用于患者的药物产品。特别地，本发明的稀释剂使得抗体材料的损失降到最低。

Description

抗体制剂稀释剂
技术领域
本发明涉及一种用于稀释包括多特异性异源二聚体免疫球蛋白的药物产品的稀释剂，以获得准备通过输注施用于患者的药物产品。特别地，本发明的稀释剂使得抗体材料的损失降到最低。
背景技术
除了具有治疗特性的活性药物成分(API)之外，治疗产品的药物制剂通常还包括非活性成分或有助于API的稳定性、生物利用度和有效性的赋形剂。
赋形剂的实例包含溶剂、稀释剂、缓冲剂、pH调节剂、表面活性剂、防腐剂、张力调节剂、抗氧化剂等。基于药物产品呈现、施用途径和施用剂量以及基于它们对API稳定性的影响来选择合适的赋形剂。
生物分子，如蛋白质，例如抗体，目前被开发为治疗从癌症到自身免疫疾病的多种疾病的治疗剂。考虑到某些治疗性抗体可能需要施用的低浓度，重要的是确保药物产品具有适当的配方，并且用稀释剂稀释，所述稀释剂将维持蛋白质稳定，并且同时限制其在用于储存和施用的容器的表面上的吸附，所述容器如小瓶、注射器、输注系统(袋、管线、过滤器等)。在某些情况下，例如对于
Figure BDA0004027716880000011
的双特异性抗体，允许从施用容器中回收高蛋白的药物组合物包括防腐剂，例如苯甲醇，其具有抑制微生物生长的功能(WO2018204907)。然而，尽管防腐剂在避免微生物污染方面具有益处，但是已经显示它们可能由于蛋白质结构改变和聚集而导致基于蛋白质的药物的物理不稳定性(抗微生物防腐剂对IgG1 mAb的构象稳定性、聚集倾向和主链柔性的影响的相关性(Correlating the Effects of AntimicrobialPreservatives on Conformational Stability,Aggregation Propensity,and BackboneFlexibility of an IgG1 mAb)Jayant Arora等人《药物科学杂志(Journal ofPharmaceutical Sciences)》106(2017)1508-1518)。此外，另外的研究已经显示某些防腐剂对人类神经元的毒性，也与其浓度有关(在疫苗和生物制剂中用作防腐剂的化合物的相对毒性(The relative toxicity of compounds used as preservatives in vaccinesand biologics)。David A.Geier等人《医学科学评议杂志(Med Sci Monit)》，2010；16(5):SR21-27)。
因此，对于诸如抗体之类的治疗性蛋白质的生产，开发确保治疗性抗体的稳定性和高回收率以便向患者施用必要量的稳定治疗性药物的稀释剂仍然是一个挑战。
具体实施方式
本发明涉及一种用于稀释药物产品的稀释剂，所述稀释剂包括缓冲剂和一种或多种稳定剂或张力剂，其中所述药物产品包括多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段，其包括第一工程化CH3结构域和第二工程化CH3结构域，并且其中在用所述稀释剂稀释所述药物产品后，获得准备通过输注施用于患者的药物产品，其特征在于所述稀释剂使得通过ELISA测量的输注系统中抗体材料的损失小于约30％。
特别地，本发明的稀释剂具有约5.5与约7.5之间的pH。
在一个实施例中，根据本发明的稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自包括组氨酸、Tris、柠檬酸盐、磷酸盐和柠檬酸盐磷酸盐的组，并且其中所述缓冲剂以等于或小于30mM的浓度存在于所述稀释剂中。
在另一个实施例中，根据本发明的稀释剂包括稳定剂或张力剂，所述稳定剂或张力剂选自包括如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯80的多元醇、如组氨酸、精氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、赖氨酸的氨基酸、如氯化钠的盐的组。
在某些具体实施例中，本发明的稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的组氨酸、Tris和磷酸盐的组，并且稳定剂或张力剂包括以约100mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸，以及以约0.05％(w/v)的浓度或约0.004％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约7或约7.4的pH。
在其它具体实施例中，本发明的稀释剂包括以约1.1mM的浓度存在于所述稀释剂中的柠檬酸盐缓冲剂，并且稳定剂或张力剂包括以约62mM的浓度存在于所述稀释剂中的赖氨酸-HCl、以约154mM的浓度存在于所述稀释剂中的氯化钠，以及以约0.004％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约6.6至约7的pH。
在进一步的具体实施例中，本发明的稀释剂包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的缓冲剂，所述缓冲剂选自包括组氨酸、磷酸盐、柠檬酸盐和柠檬酸盐-磷酸盐的组，并且稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有选自包括约6、约6.5和约7的组的pH。
在某些更具体的实施例中，本发明的稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自包括磷酸盐、柠檬酸盐和柠檬酸盐-磷酸盐的组，其以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中，并且稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约6.5或约7的pH，并且其在约5℃和/或约25℃和/或40℃下稳定至少3个月。
在其它更具体的实施例中，本发明的稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自磷酸盐或柠檬酸盐-磷酸盐，其以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中，并且稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约6或约6.5的pH，并且其在约5℃下稳定至少29个月，在约25℃下稳定至少12个月，并且在40℃下稳定至少3个月。
在特别具体的实施例中，本文公开的稀释剂包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的磷酸盐缓冲剂，稳定剂或张力剂由以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl和以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80组成，并且所述稀释剂具有约6的pH，并且其在约5℃下稳定至少29个月，在约25℃下稳定至少12个月，并且在40℃下稳定至少3个月。
在本发明的一个方面，选自包括盐水溶液、葡萄糖溶液以及盐水溶液和葡萄糖溶液的组合的组的等渗溶液与本文公开的所述稀释剂以约1:10的比率混合。
在本发明的另一方面，所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段以约5ng/mL与约20ng/mL之间的浓度存在于准备施用的所述药物产品中。
在更具体的方面，所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段以约10ng/mL的浓度存在于准备施用的所述药物产品中。
在本发明的另一方面，所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段的第一工程化CH3结构域包括由以下各项组成的组的取代：S20K、T22V、K26T、K79Y、F85.1S、Y86V、K88W、T90N，并且所述第二工程化CH3结构域包括选自由以下各项组成的组的取代：Q3E、Y5A、L7F、S20T、T22V、K26T、T81D、V84L、D84.2E、F85.1A、Y86S、K88R、T90R，并且所述异源二聚体免疫球蛋白或异源二聚体片段通过所述第一工程化CH3结构域和第二工程化CH3结构域异源二聚化。
在进一步的方面，所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的第一靶标结合，与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的不同于第一靶标的第二靶标结合，以及与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的不同于第一靶标或不同于第一和第二靶标的第三靶标结合。
在具体方面，所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的第一靶标结合，以及与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的不同于第一靶标的第二靶标。
在某些具体实施例中，所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段是双特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段，其包括SEQ ID NO:1，2和3的氨基酸序列或SEQ ID NO:4，5和6的氨基酸序列，或包括SEQ ID NO:7，8和9的氨基酸序列，或与SEQID NO:1至9的氨基酸序列具有至少80％同源性的氨基酸序列。
本发明还涉及一种准备施用于患者以用于治疗癌症的药物产品，其通过包括以下各者的步骤获得：
(i)纯化多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段以获得药物物质；
(ii)向所述药物物质中加入赋形剂以获得稳定的药物制剂，其中所述稳定的药物制剂可为液体，或冻干的或重构的；
(iii)向所述稳定的药物制剂中加入根据本发明的稀释剂；
其中准备施用的所述药物产品通过输注施用于患者，并且所述稀释剂使得通过ELISA测量的输注系统中抗体材料的损失小于约30％。
如本文所用，以下术语具有以下含义：除非上下文另有明确说明，本文所用的“一个”、“一种”和“所述”是指单数和复数。除非另有定义，结合本发明使用的科学术语和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。此外，除非上下文另有要求，否则单数术语应包含复数，并且复数术语应包含单数。通常，与本文所述的细胞和组织培养、分子生物学和蛋白质和寡核苷酸或多核苷酸化学、分析化学、合成有机化学和医药化学和药物化学的实验室程序和技术相关使用的命名法和技术是本领域熟知和常用的。
高于0℃的温度在本发明中表示为在温度值之前是否有“+”，例如25℃和+25℃可根据本发明互换使用。
本发明涉及一种用于稀释药物产品的稀释剂，所述稀释剂包括缓冲剂和一种或多种稳定剂或张力剂，其中所述药物产品包括多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段，其包括第一工程化CH3结构域和第二工程化CH3结构域，并且其中在用所述稀释剂稀释所述药物产品后，获得准备通过输注施用于患者的药物产品，其特征在于所述稀释剂使得通过ELISA测量的输注系统中抗体材料的损失小于约30％。
根据本发明，通过测量在输注系统中孵育之前和之后的抗体浓度来测量抗体材料的损失。本文通过ELISA测量抗体浓度。术语“ELISA”是指如本文所述或本领域已知的酶联免疫吸附测定。传统的ELISA测定通常涉及使用与酶连接(缀合)的第一抗体或第二抗体，所述酶作用于底物以产生可检测的信号(例如产生有色产物)，从而指示抗原或另一种分析物的存在。本文所用的术语“ELISA”还包括使用非酶报道分子，例如生成可定量信号的荧光、电化学发光或实时PCR报道分子。应当理解，术语“ELISA”包括许多变化，包含但不限于“直接”、“间接”、“夹心”、“竞争性”和“反向”ELISA。
在ELISA测定中，通常将一定量的抗原固定到固体表面，并且接着将识别抗原的特异性抗体添加到表面上以允许形成抗原-抗体复合物。在直接ELISA中，标记的第一抗体(例如，抗体-酶缀合的)用于检测抗原，而在间接ELISA中，抗原被第一抗体结合，然后被标记的第二抗体检测。夹心ELISA(也称为捕获ELISA)是指将捕获抗体(对抗原具有特异性)固定到固体载体上，接着添加一定量的抗原。然后通过第二抗体(即检测抗体)检测结合的抗原，所述第二抗体识别抗原上不同于捕获抗体的区域。捕获的抗原通过检测抗体检测，所述检测抗体可以共价连接至酶，或者其本身可以通过添加第二抗体-酶缀合的检测。直接、间接和夹心ELISA测定可适于以竞争性形式进行。在竞争性ELISA中，样品中抗原或抗体的浓度是作为分别来自具有已知浓度的标记抗体或抗原的预期信号输出的变化来测量的。例如，可以通过将对于抗原具特异性的捕获抗体固定到表面上并将其与含有靶抗原和已知量的酶标记靶抗原的样品一起孵育来进行竞争性ELISA。样品中存在的抗原越多，与捕获抗体结合的缀合抗原越少。当加入酶底物时，产生的信号与样品中存在的抗原量成反比。与上述技术不同，反向ELISA使抗原悬浮在流体中。特别地，将抗体和抗原一起孵育，将孵育的流体移至清除剂容器以除去未结合的抗体，并且通过流式细胞术测量剩余的抗体和抗原复合物。
测量低浓度抗体材料的损失的其它等效技术包含但不限于中尺度发现和质谱分析。
根据本发明，术语“药物产品”涉及包含活性药物成分(API)(也称为药物物质(DS))的产品，所述活性药物成分为准备施用于患者的成品剂型。例如，药物产品可以通过纯化DS，例如抗体或抗体片段之类的蛋白质，接着向药物物质中加入赋形剂以获得稳定的药物制剂来获得，所述药物制剂可以是液体，或冻干的或重构的。如果加入稀释剂以准备例如通过输注系统施用，药物产品可以是“稀释的”。
如果在目视检查颜色和/或透明度时，或通过UV光散射或通过尺寸排阻色谱法测量时，蛋白质在药物制剂中没有显示聚集、沉淀和/或变性的迹象，则蛋白质的“物理稳定性”得以保留。蛋白质的“化学稳定性”可以通过检测和定量蛋白质的化学改变形式来评估。化学改变可发包括尺寸修饰(例如剪切)，其可以使用例如尺寸排阻色谱法、SDS-PAGE和/或基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱法(MALDI/TOF MS)来评估。其它类型的化学改变包含电荷改变(例如，作为脱酰胺作用的结果而发生)，其可以通过例如离子交换色谱法来评估。
“液体”制剂是以液体形式制备的制剂。这样的制剂可以适合于直接施用于受试者，或可替代地，可以包装成液体形式、冷冻状态或干燥形式(例如冻干的)进行储存，用于随后重构为液体形式或适合于施用于受试者的其它形式。
“冻干”制剂是通过冷冻干燥液体或预冻干制剂而制备的制剂。冷冻干燥可以通过冷冻制剂，并且接着在适合于一次干燥的温度下从冷冻内容物中升华出冰来进行。在这种条件下，产品温度低于制剂的崩解温度。然后可以进行第二干燥阶段，其产生合适的冻干饼。
“重构”制剂是通过将冻干蛋白质制剂溶解在重构介质中使得蛋白质分散在重构制剂中而制备的制剂。重构制剂应适合施用(例如肠胃外施用)于待用感兴趣的蛋白质治疗的受试者。
用于制备重构制剂的合适的“重构介质”包含药学上可接受的介质(对人施用是安全和无毒的)。合适的重构介质的实例包含无菌注射用水(SWFI)、抑菌注射用水(BWFI)。注射用水(WFI)、如磷酸盐缓冲盐水(PBS)的pH缓冲溶液、无菌盐水溶液、林格氏溶液或葡萄糖溶液和用于制备药物制剂的缓冲剂。
本发明的准备施用的药物产品准备使用本领域已知的多种方法中的一种或多种通过一种或多种施用途径施用于患者。
用于本发明目的的“患者”包含人和其它动物，优选为哺乳动物并且最优选为人。因此，本发明的抗体具有人类治疗应用和兽医应用。
如本领域技术人员将理解的，施用途径和/或模式将根据期望的结果而变化。优选的施用途径包含静脉内、肌内、皮内、腹膜内、皮下、脊髓或其它肠胃外施用途径，例如通过注射或输注。更优选的施用途径是静脉内或皮下。本文所用的短语“肠胃外施用”是指除肠内施用和局部施用之外的施用模式，通常通过注射，并且包含但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内注射和输注。可替代地，本发明的抗体可以通过非肠胃外途径施用，例如局部、表皮或粘膜施用途径，例如鼻内、口服、阴道、直肠、舌下或局部施用。
在特定实施例中，本发明的准备施用的药物产品通过经由输注系统或输注装置例如静脉内或皮下输注施用，所述输注系统或输注装置包括一种或多种选自包括以下各者的组的元件：输注袋、输注装置、管线、过滤器、针、滴注室、注射器、泵、旋塞阀、阀、插管、管、帽、长钉、线圈、室、连接器、端口、鲁尔锁。
根据本发明，稀释剂使得在用于储存和/或用于施用的如小瓶、注射器、管、Falcon管、输注系统之类的容器中抗体材料的损失最小化，所述输注系统包括选自包括以下各者的组的一个或多个元件：输注袋、输注装置、管线、过滤器、针、滴注室、注射器、泵、旋塞阀、阀、插管、管、帽、长钉、线圈、室、连接器、端口、鲁尔锁，其中此类容器可以由不同的材料制成，包含塑料和玻璃。特别地，根据本发明，准备施用的药物产品通过输注施用于患者，并且稀释剂使得输注系统中抗体材料的损失降至最低。更具体地，抗体材料的损失小于约50％，或小于约40％，或小于约30％，或小于约29％，或约28％，或约27％，或约26％，或约25％，或约24％，或约23％，或约22％，或约21％，或约20％，约19％，或约18％，或约17％，或约16％，或约15％，或约14％，或约13％，或约12％，或约11％，或约10％，约9％，或约8％，或约7％，或约6％，或约5％，或约4％，或约3％，或约2％，或约1％。优选地，抗体材料的损失小于约30％，更优选地小于约20％，甚至更优选地小于约10％，最优选地小于5％。
根据本发明，稀释剂包括缓冲剂和一种或多种稳定剂或张力剂。
本文所用的术语“缓冲剂”是指通过其酸-碱缀合物组分的作用抵抗pH变化的缓冲溶液。本发明的缓冲剂具有在约5.0至约8.0范围内的pH；优选地，缓冲剂的pH选自包括等于约5、约5.5、约6、约6.5、约6.9、约7、约7.4、约7.5、约8的pH的组。本发明还公开了pH值为上述值之间的任何值的缓冲剂。
可以将pH控制在该范围内的缓冲剂的实例包含柠檬酸、乙酸盐(例如乙酸钠)、琥珀酸盐(例如琥珀酸钠)、葡糖酸盐、如组氨酸(例如组氨酸-HCl)的氨基酸、柠檬酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐磷酸盐、Tris、其它有机酸缓冲剂、它们的盐和缓冲剂的组合。在本发明的一个实施例中，缓冲剂以等于或小于约30mM的浓度存在于准备施用的药物产品中。在某些实施例中，缓冲剂的浓度为约1mM至约30mM；优选地，缓冲剂以选自包括约1mM、约3mM、约5mM、约7mM、约10mM、约15mM、约20mM、约25mM和约30mM的组的浓度存在于准备施用的药物产品中。在优选的实施例中，缓冲剂以约25mM的浓度存在于本发明的准备施用的药物产品中。在另一个优选的实施例中，缓冲剂以约1mM的浓度存在于本发明的准备施用的药物产品中。本发明还包含浓度为上述值的任何中间值的缓冲剂。
稳定剂或张力剂选自包括以下各者的组：乙酸钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氯化钠(NaCl)、乙酸钾、碳酸氢钾、碳酸钾、氯化钾、氯化钙(CaCl2)、谷氨酸盐、如蔗糖、葡萄糖和海藻糖的糖、如甘露醇、麦芽糖醇、山梨糖醇、木糖醇、赤藓糖醇和异麦芽酮糖醇的多元醇，如PEG400的聚乙二醇、乙二胺四乙酸(EDTA)、如组氨酸(例如组氨酸-HCl)、精氨酸(例如盐酸精氨酸)和甘氨酸的氨基酸、甲硫氨酸、脯氨酸、赖氨酸(例如赖氨酸-HCl)、谷氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、胺、谷胱甘肽、如例如羟丙基β-环糊精(HPBCD)、羟丙基-磺丁基β-环糊精(HPSBCD)、磺丁醚β-环糊精(SBECD)、β-环糊精(BetaCD)、α-环糊精(Alpha CD)和γ-环糊精(Gamm CD)的环糊精，以及表面活性剂。典型表面活性剂的非限制性实例包含：非离子表面活性剂(HLB 6至18)，例如脱水山梨糖醇脂肪酸酯(例如脱水山梨糖醇单辛酸酯、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯)、甘油脂肪酸酯(例如甘油单辛酸酯、甘油单肉豆蔻酸酯、甘油单硬脂酸酯)、聚甘油脂肪酸酯(例如十甘油单硬脂酸酯、十甘油二硬脂酸酯、十甘油单亚油酸酯)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯(例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇三油酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇三硬脂酸酯)、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯(例如聚氧乙烯山梨糖醇四硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇四油酸酯)、聚氧乙烯甘油脂肪酸酯(例如聚氧乙烯甘油单硬脂酸酯)、聚乙二醇脂肪酸酯(例如聚乙二醇二硬脂酸酯)、聚氧乙烯烷基醚(例如聚氧乙烯月桂基醚)、聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚(例如聚氧乙烯聚氧丙烯乙二醇醚、聚氧乙烯聚氧丙烯丙基醚、聚氧乙烯聚氧丙烯鲸蜡基醚)、聚氧乙烯烷基苯基醚(例如聚氧乙烯壬基苯基醚)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(例如聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油)、聚氧乙烯蜂蜡衍生物(例如聚氧乙烯山梨醇蜂蜡)、聚氧乙烯羊毛脂衍生物(例如聚氧乙烯羊毛脂)和聚氧乙烯脂肪酸酰胺(例如聚氧乙烯硬脂酰胺)；阴离子表面活性剂，例如Cio-顺式烷基硫酸盐(例如十六烷基硫酸钠、月桂基硫酸钠、油烯基硫酸钠)、具有平均2-4摩尔环氧乙烷的聚氧乙烯Cio-顺式烷基醚硫酸盐(例如聚氧乙烯月桂基硫酸钠)和Cs-顺式烷基磺基琥珀酸酯盐(例如月桂基磺基琥珀酸酯钠)；天然表面活性剂，例如卵磷脂、甘油磷脂、鞘氨醇磷脂(例如鞘磷脂)和C12-C18脂肪酸的蔗糖酯；泊洛沙姆，例如泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、泊洛沙姆124、泊洛沙姆237、泊洛沙姆338、聚乙烯吡咯烷酮、盐和上述组分的组合。优选地，表面活性剂选自聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯。优选地，表面活性剂选自聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯。特别优选地，表面活性剂是聚山梨醇酯20、21、40、60、65、80、81和85，最优选地为聚山梨醇酯80。聚山梨醇酯80也已知商品名为吐温80TM(ICI Americas,Inc.)。
在本发明的具体实施例中，一种或多种稳定剂或张力剂选自包括以下各者的组：聚山梨醇酯80、如组氨酸、精氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、赖氨酸的氨基酸、如氯化钠的盐。在更具体的实施例中，稳定剂或张力剂选自包括精氨酸或精氨酸HCl、赖氨酸或赖氨酸HCl、NaCl和聚山梨醇酯80的组。特别地，精氨酸或精氨酸HCl以约50mM至约800mM的浓度存在于准备施用的药物产品中，优选地浓度选自包括约50mM、约100mM、约150mM、约200mM、约250mM、约300mM、约350mM、约400mM、约450mM、约500mM、约550mM、约600mM、约650mM、约700mM、约750mM和约800mM的组，更优选地精氨酸或精氨酸HCl的浓度为约100mM或约500mM；赖氨酸或赖氨酸HCl以约20mM至约800mM的浓度存在于准备施用的药物产品中，优选地浓度选自包括约20mM、约25mM、约30mM、约35mM、约40mM、约45mM、约50mM、约100mM、约150mM、约200mM、约250mM、约300mM、约350mM、约400mM、约450mM、约500mM、约550mM、约600mM、约650mM、约700mM、约750mM和约800mM的组，更优选地赖氨酸HCl的浓度为约500mM或约62mM；NaCl以约20mM至约400mM的浓度存在于准备施用的药物产品中，优选地浓度选自包括约20mM、约25mM、约30mM、约35mM、约40mM、约45mM、约50mM、约100mM、约150mM、约200mM、约250mM、约300mM、约350mM、约400mM的组，更优选地NaCl的浓度为约154mM；聚山梨醇酯80以约0.001％(w/v)至约0.1％的浓度存在于所述准备施用的药物产品中，优选地浓度选自包括约0.001％(w/v)、约0.002％(w/v)、约0.004％(w/v)、约0.006％(w/v)、约0.008％(w/v)、约0.01％(w/v)、约0.02％(w/v)、约0.04％(w/v)、约0.05％(w/v)、约0.06％(w/v)、约0.08％(w/v)、约0.1％(w/v)的组，更优选地浓度为约0.004％(w/v)，或约0.04％(w/v)，约0.05％(w/v)。本发明还包含浓度为上述值的任何中间值的稳定剂或张力剂。
在一个实施例中，根据本发明的稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的组氨酸、Tris和磷酸盐的组，并且稳定剂或张力剂包括以约100mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸，以及以约0.05％(w/v)的浓度或约0.004％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约7或约7.4的pH。
在本发明的另一个实施例中，本发明的稀释剂包括以约1.1mM的浓度存在于所述稀释剂中的柠檬酸盐缓冲剂，并且稳定剂或张力剂包括以约62mM的浓度存在于所述稀释剂中的赖氨酸-HCl、以约154mM的浓度存在于所述稀释剂中的氯化钠，以及以约0.004％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约6.6至约7的pH。具体地，本发明的稀释剂包括以约2.1g/L的浓度存在于所述稀释剂中的柠檬酸、以约9.0g/L的浓度存在于所述稀释剂中的NaCl、以约91.0g/L的浓度存在于所述稀释剂中的赖氨酸HCl和以约0.004％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂的pH为约6.6至约7，具体地pH选自包括约6.6、约6.7、约6.8、约6.9、约7的组。
在其它实施例中，本发明的稀释剂包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的缓冲剂，所述缓冲剂选自包括组氨酸、磷酸盐、柠檬酸盐和柠檬酸盐-磷酸盐的组，并且稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且其中所述稀释剂具有选自包括约6、约6.5和约7的组的pH。
在优选的实施例中，本文公开的稀释剂包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的磷酸盐缓冲剂，稳定剂或张力剂由以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl和以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80组成，并且所述稀释剂具有约6.5的pH。在另一个优选的实施例中，本文公开的稀释剂包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的柠檬酸盐-磷酸盐缓冲剂，稳定剂或张力剂由以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的赖氨酸-HCl和以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80组成，并且所述稀释剂具有约6.0的pH。在更优选的实施例中，本文公开的稀释剂包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的磷酸盐缓冲剂，稳定剂或张力剂由以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl和以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80组成，并且所述稀释剂具有约6的pH。
在某些更具体的实施例中，本发明的稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自包括磷酸盐、柠檬酸盐和柠檬酸盐-磷酸盐的组，其以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中，并且稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约6.5或约7的pH，并且其在约5℃和/或约25℃和/或约40℃下稳定至少3个月。
在其它更具体的实施例中，本发明的稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自磷酸盐或柠檬酸盐-磷酸盐，其以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中，并且稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且所述稀释剂具有约6或约6.5的pH，并且其在约5℃下稳定至少29个月，在约25℃下稳定至少12个月，并且在约40℃下稳定至少3个月。
在特别具体的实施例中，本文公开的稀释剂包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的磷酸盐缓冲剂，稳定剂或张力剂由以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl和以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80组成，并且所述稀释剂具有约6的pH，并且其在约5℃下稳定至少29个月，在约25℃下稳定至少12个月，并且在约40℃下稳定至少3个月。
在本发明的一个方面，选自包括盐水溶液、葡萄糖溶液以及盐水溶液和葡萄糖溶液的组合的组的等渗溶液与本文公开的稀释剂以选自包括约1:2、约1:5、约1:10、约1:15、约1:20的组的比率混合，优选地以约1:10的比率混合。
根据本发明的准备施用的药物产品包括多特异性抗体或其抗体片段。
术语“抗体”或“免疫球蛋白”在本文中可互换使用，并且是指完整抗体及其任何抗原结合片段或单链。“抗体”是指包括通过二硫键相互连接的至少两条重(H)链和两条轻(L)链的糖蛋白，或其抗原结合片段。每条重链由重链可变区(本文缩写为VH)和重链恒定区组成。重链恒定区由三个结构域CH1、CH2和CH3组成。每条轻链由轻链可变区(本文缩写为VL)和轻链恒定区组成。轻链恒定区由一个结构域CL组成。VH区和VL区可进一步细分为高变区，称为互补决定区(CDR)，其序列具有高变性和/或参与抗原识别和/或通常形成结构上限定的环，穿插有更保守的区域，称为构架区(FR或FW)。每个VH和VL由三个CDR和四个FW组成，按以下顺序从氨基末端到羧基末端排列：FW1、CDR1、FW2、CDR2、FW3、CDR3和FW4。FW1、FW2、FW3和FW4的氨基酸序列一起构成了本文所述VH或VL的“非CDR区”或“非延伸CDR区”。通过恒定区的基因确定，抗体被分成不同类别，也称为同种型。人恒定轻链分为κ(CK)和λ(CX)轻链。重链被分为mu(μ)、delta(δ)、gamma(γ)、alpha(α)或epsilon(ε)，并且分别将抗体的同种型定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。因此，本文所用的“同种型”是指由其恒定区的化学和抗原特征定义的免疫球蛋白的任何种类和/或亚类。已知的人免疫球蛋白同种型是IgG1(IGHG1)、IgG2(IGHG2)、IgG3(IGHG3)、IgG4(IGHG4)、IgA1(IGHA1)、IgA2(IGHA2)、IgM(IGHM)、IgD(IGHD)和IgE(IGHE)。IgG类是最常用于治疗目的的。在人类中，该类别包括亚类IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。
抗体片段包含但不限于(i)由VL、VH、CL和CHI结构域组成的Fab片段，包含Fab'和Fab'-SH，(ii)由VH和CHI结构域组成的Fd片段，(iii)由单一抗体的VL和VH结构域组成的Fv片段；(iv)dAb片段(Ward ES等人，(1989)《自然(Nature)》，341:544-546)，其由单一变量组成，(v)F(ab')2片段，包括两个连接的Fab片段的二价片段，(vi)单链Fv分子(scFv)，其中VH结构域和VL结构域通过肽接头连接，所述肽接头允许两个结构域缔合以形成抗原结合位点(Bird RE等人，(1988)《科学(Science)》242:423-426；Huston JS等人，(1988)《美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)》，85:5879-83)，(vii)双特异性单链Fv二聚体(PCT/US92/09965)，(viii)“双抗体”或“三抗体”，通过基因融合构建的多价或多特异性片段(Tomlinson I&Hollinger P(2000)方法Enzymol326:461-79；WO94/13804；Holliger P等人，(1993)《美国国家科学院院刊》，90:6444-48)和(ix)与相同或不同抗体遗传融合的scFv(Coloma MJ&Morrison SL(1997)《自然生物技术(Nature Biotechnology)》，15(2):159-163)。
在本发明的一个实施例中，公开的抗体是单克隆的。
本文所用的术语“单克隆抗体”是指由全部来源于相同单细胞的克隆细胞产生的抗体，并且其特异性结合靶抗原的相同表位。当产生治疗性抗体时，单克隆抗体的生成优于多克隆抗体。事实上，虽然单克隆抗体由来源于单个克隆的细胞产生并结合所有相同表位，但是多克隆抗体由不同的免疫细胞产生并识别特定抗原的多个表位。单克隆抗体确保批次间的均一性，降低的交叉反应性和对靶标的高特异性。可以使用重组DNA在例如宿主细胞中表达单克隆抗体，从而产生重组抗体。
在本发明的某个实施例中，抗体是重组抗体。
本文所用的术语“重组抗体”是指通过涉及使用重组DNA的任何方法产生的抗体。重组抗体可以以改善诸如免疫原性、结合亲和力、分子大小、特异性、半衰期和形式的特征的方式工程化。重组抗体的实例包含但不限于工程化抗体、嵌合抗体、CDR移植抗体(例如人源化抗体)、完全人类抗体、抗体片段、Fc工程化抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体、三特异性抗体、四特异性抗体)、单体抗体和多聚体抗体(例如同二聚体抗体和异源二聚体抗体)。
在更具体的实施例中，本发明的抗体是异源二聚体抗体，特别地，多特异性抗体或其抗体片段是包括第一工程化CH3结构域和第二工程化CH3结构域的异源二聚体免疫球蛋白或其异源二聚体片段。
本文所用的术语“异源二聚体抗体”或“异源二聚体片段”或“异源二聚体”包含至少包括第一多肽和第二多肽的免疫球蛋白分子或其部分，如第一结构域和第二结构域，其中第二多肽在氨基酸序列上不同于第一多肽。优选地，异源二聚体免疫球蛋白包括两条多肽链，其中第一链具有至少一个与第二链不相同的结构域，并且其中两条链组装，即通过它们不相同的结构域相互作用。具体地，异源二聚体免疫球蛋白包括至少两个结构域，其中第一结构域与第二结构域不相同，并且其中两个结构域组装，即通过它们的蛋白质-蛋白质界面相互作用。更优选地，异源二聚体免疫球蛋白对至少两种不同的配体、抗原或结合位点具有结合特异性，即是双特异性的。
术语“多特异性抗体”是指具有两个或更多个结合位点的任何抗体，所述结合位点可结合相同抗原的两个或更多个不同表位，或两种或更多种不同抗原。多特异性抗体的非限制性实例是双特异性抗体、三特异性抗体、四特异性抗体。优选地，本发明的抗体是双特异性或三特异性或四特异性的，更优选地其是双特异性或三特异性的。在本发明的某些实施例中，多特异性抗体或其片段是双特异性的。
本文所用的术语“异源二聚体免疫球蛋白”或“异源二聚体片段”或“异源二聚体”包含至少包括第一多肽和第二多肽的免疫球蛋白分子或其部分，如第一结构域和第二结构域，其中第二多肽在氨基酸序列上不同于第一多肽。优选地，异源二聚体免疫球蛋白包括两条多肽链，其中第一链具有至少一个与第二链不相同的结构域，并且其中两条链组装，即通过它们不相同的结构域相互作用。具体地，异源二聚体免疫球蛋白包括至少两个结构域，其中第一结构域与第二结构域不相同，并且其中两个结构域组装，即通过它们的蛋白质-蛋白质界面相互作用。更优选地，异源二聚体免疫球蛋白对至少两种不同的配体、抗原或结合位点具有结合特异性，即是双特异性的。本文所用的异源二聚体免疫球蛋白包含但不限于全长双特异性抗体、双特异性Fab、双特异性F(ab')2、与Fc区融合的双特异性scFv、与Fc区融合的双抗体和与Fc区融合的结构域抗体。优选地，异源二聚体免疫球蛋白片段包括至少两个结构域，其中第一结构域与第二结构域不相同，并且其中两个结构域组装，即通过它们的蛋白质-蛋白质界面相互作用。更优选地，异源二聚体免疫球蛋白片段包括至少两个工程化结构域，其中第一工程化结构域与第二工程化结构域不相同，即第一工程化结构域在氨基酸序列上与第二工程化结构域不同，并且其中两个工程化结构域通过它们的蛋白质-蛋白质界面的相互作用组装。
本文所用的术语“结构域”包含多肽的任何区域，该区域负责与蛋白质配偶体(即另一蛋白质(或其区域)或另一结构域)选择性组装和/或可独立地或在多结构域实体内执行类似结合受体或底物的完整生物功能或部分。通常，本文提及的结构域不是铰链区和/或不包含铰链区。该结构域可以独立于蛋白质链的其余部分而存在。结构域形成紧凑的三维结构并且是独立稳定和折叠的。结构域的长度在约25个氨基酸至500个氨基酸之间变化。优选地，本文所用的结构域的长度在约70个氨基酸至约120个氨基酸之间变化。最短的结构域如锌指通过金属离子或二硫键稳定。结构域通常形成功能单位，例如钙调蛋白的钙结合EF手结构域。因为它们是自稳定的，可以通过基因工程在一种蛋白与另一种蛋白之间“交换”结构域以制备嵌合蛋白。免疫球蛋白由属于免疫球蛋白超家族的可变结构域和恒定结构域组成(Williams AF和Barclay AN，《免疫学年度评论(Annu Rev Immunol)》，6:381-405(1988)；Bork P等人，《分子生物学杂志(J Mol Biol)》，242(4):309-20(1994))。本文包含的结构域是来自IGHA1、IGHA2、IGHD、IGHE、IGHG1、IGHG2、IGHG3、IGHG4、IGHGP和IGHM的CH1和CH3，特别是天然存在的CH1和CH3；来自IGHE和IGHM的CH4，特别是天然存在的CH4；IGKC、IGLC1、IGLC2、IGLC3、IGLC6和IGLC7，特别是天然存在的IGKC、IGLC1、IGLC2、IGLC3、IGLC6和IGLC7。本文包含的其它结构域是来自IGHA1、IGHA2、IGHD、IGHE、IGHG1、IGHG2、IGHG3、IGHG4、IGHGP和IGHM的CH2，特别是天然存在的CH2。优选地，本文使用非糖基化的CH2结构域，它们的非糖基化形式是本文提及的同源二聚体。与天然糖基化Fc片段中的CH2结构域相比，非糖基化Fc片段中的CH2结构域彼此接近得更紧密。鼠非糖基化IgG1 Fc片段的晶体结构已经显示完全非糖基化的Fc片段可以采用“闭合”结构，其中来自第一非糖基化免疫球蛋白链的CH2结构域的Pro 332和来自第二非糖基化免疫球蛋白链的CH2结构域的Pro 332之间的距离仅为1 1.6A(Feige MJ等人，《分子生物学杂志》，391(3):599-608(2009))。本文包含的其它结构域是VH结构域和VL结构域，其不具有根据本发明的工程化蛋白质-蛋白质界面，即除了由人源化过程引起的回复突变外，其不被特异性工程化以修饰其天然存在的蛋白质-蛋白质界面。
本文所用的术语“工程化免疫球蛋白链”包含包括至少一个工程化结构域的免疫球蛋白链，所述工程化结构域具有不同于亲本结构域的蛋白质-蛋白质界面。本文所用的术语“工程化结构域”包含从亲本结构域和供体结构域工程化的结构域。
本发明利用
Figure BDA0004027716880000141
技术描述的方法(PCT公开号：WO2012/131555)，其基于显示优于现有技术方法的异源二聚化的生物模拟的独特概念。BEAT技术基于天然存在的同源或异源二聚体免疫球蛋白结构域对之间的界面交换以产生新的异源二聚体，该异源二聚体可用作基于Fc的双特异性抗体的构建模块。
在一个方面，本发明提供了一种包括第一多肽和第二多肽的异源二聚体免疫球蛋白或其片段，所述第一多肽和第二多肽包括具有修饰的CH3结构域的工程化免疫球蛋白恒定区，所述修饰的CH3结构域具有蛋白质-蛋白质界面，其中第一多肽的蛋白质-蛋白质界面在选自由以下各项组成的组的位置处包括氨基酸取代：3、5、7、20、22、26、27、79、81、84、84.2、85.1、86、88和90(
Figure BDA0004027716880000151
编号)，并且其中第二多肽的蛋白质-蛋白质界面在位置84.4处和在选自由以下各项组成的组的位置处包括氨基酸取代：3、5、7、20、22、26、27、79、81、84、84.2、85.1、86、88和90(
Figure BDA0004027716880000152
编号)。
在另一个实施例中，根据本发明的多特异性抗体或其抗体片段是异源二聚体免疫球蛋白或其异源二聚体片段，其中第一多肽和第二多肽包括具有修饰的CH3结构域的工程化免疫球蛋白恒定区，所述修饰的CH3结构域具有蛋白质-蛋白质界面，其中第一多肽的蛋白质-蛋白质界面在位置88处和在选自由以下各项组成的组的位置包括氨基酸取代：3、5、7、20、22、26、27、79、81、84、84.2、85.1、86和90(
Figure BDA0004027716880000153
编号)，并且其中第二多肽的蛋白质-蛋白质界面在位置85.1和/或86处和在选自由以下各项组成的组的位置处包括氨基酸取代：3、5、7、20、22、26、27、79、81、84、84.2、84.4、88和90(
Figure BDA0004027716880000154
编号)，其中在第一工程化免疫球蛋白恒定区中的位置88处取代的氨基酸残基与在第二工程化免疫球蛋白恒定区中的位置85.1和/或86处取代的氨基酸残基相互作用，其中每个组成员的氨基酸位置根据
Figure BDA0004027716880000155
编号指示。
优选地，在第一工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中在位置88处被取代的氨基酸残基是88W及其保守氨基酸取代，其中氨基酸位置根据
Figure BDA0004027716880000156
编号指示。更优选地，在第一工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中在位置88处被取代的氨基酸残基是88W，并且其中在第一工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中被取代的另外的氨基酸残基选自由以下各项组成的组：3A、20V、20T、20A、20N、20Q、20E、20S、20K、20W、22A、22G、22T、22L、221、22V、26R、26Q、26T、26K、26V、26S、26N、26E、79Y、85.IT、85.1M、85.1A、85.IS、85.1R、85.1H、85.IK、85.IF、85.1C、85.IN、85.1W、86S、861、86T、86H、86Q、86V、86W、86Y、86F和90N，其中氨基酸位置根据
Figure BDA0004027716880000157
编号指示。
优选地，在第二工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中的位置85和86处被取代的氨基酸残基选自由以下各项组成的组：85.1A、85.IS、85.1C和86S以及其保守氨基酸取代(
Figure BDA0004027716880000158
编号)。更优选地，在第二工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中被取代的氨基酸残基选自由以下各项组成的组：85.1A、85.IS、85.1C和86S，并且其中在第二工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中取代的另外的氨基酸残基选自由以下各项组成的组：3E、5A、7F、20T、22V、26T、8ID、84L、84.2E、88R和90R以及其保守性氨基酸取代(
Figure BDA0004027716880000161
编号)。
在优选的实施例中，在第一工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中在位置88处被取代的氨基酸残基是88W，并且其中在第一工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中被取代的另外的氨基酸残基是：3A、20K、22V、26T、79Y、85.IS、86V和90N，并且其中在第二工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中在位置85.1和86处被取代的氨基酸残基是85.1A、85.IS或85.1A和86S，并且其中在第二工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中取代的另外的氨基酸残基是：3E、5A、7F、20T、22V、26T、8ID、84L、84.2E、84.4Q、88R和90R(
Figure BDA0004027716880000162
编号)。
在替代的实施例中，本发明提供了异源二聚体免疫球蛋白或其片段，其中第一多肽和第二多肽包括具有修饰的CH3结构域的工程化免疫球蛋白恒定区，所述修饰的CH3结构域具有蛋白质-蛋白质界面，其中第一多肽的蛋白质-蛋白质界面在位置20和在选自由以下各项组成的组的位置处包括氨基酸取代：3、5、7、22、26、27、79、81、84、84.2、85.1、86、88和90,并且，其中第二多肽的蛋白质-蛋白质界面在位置26处和在选自由以下各项组成的组的位置处包括氨基酸取代：3、22、27、79、81、84、85.1、86和88，其中在第一工程化免疫球蛋白恒定区中的位置20处取代的氨基酸残基与在第二工程化免疫球蛋白恒定区中的位置26处取代的氨基酸残基相互作用，其中每个组成员的氨基酸位置根据IMGT编号指示。
优选地，在第一工程化免疫球蛋白链的蛋白质-蛋白质界面中被取代的氨基酸残基包括在位置20和22处的氨基酸残基，以及任选地在选自由以下各项组成的组的位置处的另外的氨基酸残基：3、5、7、26、27、79、81、84、84.2、84.4、85.1、86、88和90，并且其中在第二工程化免疫球蛋白链的蛋白质-蛋白质界面中被取代的氨基酸残基包括在位置26处和在选自由以下各项组成的组的另一位置处的氨基酸残基：3、5、7、20、22、27、79、81、84、84.2、84.4、85.1、86、88和90，其中每个组成员的氨基酸位置根据
Figure BDA0004027716880000163
编号指示。
优选地，在第一工程化免疫球蛋白链的蛋白质-蛋白质界面中被取代的氨基酸残基包括在位置20和22处的氨基酸残基，以及任选地在选自由以下各项组成的组的位置处的另外的氨基酸残基：3、5、7、26、27、79、81、84、84.2、84.4、85.1、86、88和90，并且其中在第二工程化免疫球蛋白链的蛋白质-蛋白质界面中被取代的氨基酸残基包括位置26和86的氨基酸残基，以及任选地在选自由以下各项组成的组的另一位置处的氨基酸残基：3、5、7、20、22、27、79、81、84、84.2、84.4、85.1、88和90，其中每个组成员的氨基酸位置根据
Figure BDA0004027716880000164
编号指示。
在最优选的实施例中，在第一工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中在位置20处被取代的氨基酸残基是20K，并且其中在第一工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中被取代的另外的氨基酸残基是：3A、22V、26T、79Y、85.IS、86V、88W和90N，并且其中在第二工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中在位置26处被取代的氨基酸残基是26T，并且其中在第二工程化免疫球蛋白恒定区的蛋白质-蛋白质界面中被取代的另外的氨基酸残基是3E、5A、7F、20T、22V、8ID、84L、84.2E、84.4Q、85.1C/S/A、86S、88R和90R(
Figure BDA0004027716880000171
编号)。
在一个方面，根据本发明的多特异性抗体或其抗体片段是异源二聚体免疫球蛋白或其异源二聚体片段，其中所述异源二聚体免疫球蛋白或其异源二聚体片段包括第一工程化免疫球蛋白链和第二工程化免疫球蛋白链，其中所述第一免疫球蛋白链和第二免疫球蛋白链用促进所述第一免疫球蛋白链与第二免疫球蛋白链之间二聚化的蛋白质界面中的氨基酸取代进行工程化，其中所述第一工程化免疫球蛋白链和所述第二工程化免疫球蛋白链不相同，并且，其中所述第一工程化结构域和第二工程化结构域各自包括CH3结构域，其中所述工程化结构域中的取代来自天然存在的TCR恒定结构域异源二聚体或同源二聚体中的等同位置，其中在所述第一工程化免疫球蛋白链和第二工程化免疫球蛋白链的蛋白质-蛋白质界面中被取代的氨基酸残基包括以下氨基酸残基：在第一工程化免疫球蛋白链中的(20、22、26、79、85.1、86、88、90)和第二工程化免疫球蛋白链中的(3、5、7、20、22、26、81、84、84.2、85.1、86、88、90)；或第一工程化免疫球蛋白链中的(7、20、22、27、79、81、84.2、85.1、86、88、90)，和第二工程化免疫球蛋白链中的(3、5、20、22、26、27、81、84、85.1、86、88)；其中每个组成员的氨基酸位置根据
Figure BDA0004027716880000172
编号指示。
在更具体的实施例中，第一工程化CH3结构域包括根据IMGT编号在以下残基20、22、26、79、85.1、86、88、90中的一个或多个处的取代，并且其中第二工程化CH3结构域包括根据IMGT编号在选自3、5、20、22、26、27、81、84、85.1、86、88的组的至少一个残基处的取代，并且其中异源二聚体免疫球蛋白或异源二聚体片段通过所述第一工程化CH3结构域和第二工程化CH3结构域异源二聚化；更具体地，第一工程化CH3结构域包括由以下各项组成的组的取代：S20K、T22V、K26T、K79Y、F85.1S、Y86V、K88W、T90N，并且所述第二工程化CH3结构域包括选自由以下各项组成的组的取代：Q3E、Y5A、L7F、S20T、T22V、K26T、T81D、V84L、D84.2E、F85.1A、Y86S、K88R、T90R。在另一个实施例中，第二工程化CH3结构域还包括根据IMGT编号的取代D84.4Q。
根据本发明的一个方面，多特异性异源二聚体免疫球蛋白以约1ng/mL至约5mg/mL，或约1ng/mL至约4mg/mL，或约1ng/mL至约2mg/mL，或约1ng/mL至约1mg/mL，或约2ng/mL至约5mg/mL，或约5ng/mL至约5mg/mL，或约10ng/mL至约5mg/mL，或约5ng/mL和约4mg/mL，或约10ng/mL和约2mg/mL的浓度存在于本发明的准备施用的药物产品中；例如，准备施用的药物产品的浓度选自包括约1ng/mL、约5ng/mL、约10ng/mL、约50ng/mL、约100ng/mL、约150ng/mL、约200ng/mL、约250ng/mL、约300ng/mL、约350ng/mL、约400ng/mL、约450ng/mL、约500ng/mL、约550ng/mL、约600ng/mL、约650ng/mL、约700ng/mL、约750ng/mL、约800ng/mL、约850ng/mL、约900ng/mL、约950ng/mL、约1mg/mL、约1.2mg/mL、约1.4mg/mL、约1.6mg/mL、约1.8mg/mL、约2mg/mL、约2.2mg/mL、约2.4mg/mL、约2.6mg/mL、约2.8mg/mL、约3mg/mL、约3.2mg/mL、约3.4mg/mL、约3.6mg/mL、约3.8mg/mL、约4mg/mL、约4.2mg/mL、约4.4mg/mL、约4.6mg/mL、约4.8mg/mL、约5mg/mL的组。在更具体的实施例中，抗体或其抗体片段以约5ng/mL至约20ng/mL之间的浓度存在于本发明的准备施用的药物产品中，更具体地，所述浓度选自包括约5ng/mL、约8ng/mL、约10ng/mL、约12ng/mL、约15ng/mL、约18ng/mL、约20ng/mL的组。本发明还包含以以上述值的任何中间值的浓度存在于所公开的准备施用的药物产品中的抗体或其抗体片段。
在本发明的其它方面，本发明的多特异性异源二聚体免疫球蛋白或异源二聚体免疫球蛋白与以下各项结合：选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第一靶标，选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的不同于第一靶标的第二靶标，选自包含CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的不同于第一靶标或不同于第一靶标和第二靶标的第三靶标，和选自包含CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的不同于第一靶标或不同于第一靶标和第二靶标或不同于第一靶标、第二靶标和第三靶标的第四靶标。
在本发明的其它方面，本发明的多特异性异源二聚体免疫球蛋白或异源二聚体免疫球蛋白与以下各项结合：选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第一靶标，选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的不同于第一靶标的第二靶标结合，和选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的不同于第一靶标或不同于第一靶标和第二靶标的第三靶标。
在本发明的某些方面，本发明的多特异性异源二聚体免疫球蛋白或其异源二聚体免疫球蛋白与以下各项结合：选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的第一靶标，和选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IgE、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的不同于第一靶标的第二靶标。
在更具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD3结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与HER2结合并且至少与选自包括CD3、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD38结合并且至少与选自包括HER2、CD3、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与EFGR结合并且至少与选自包括HER2、CD38、CD3、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD20结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD3、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与OX40结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、CD3、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD19结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD3、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD47结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD3、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与IL1RAP结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、CD3、BMCA、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与BMCA结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、CD3、NKp30、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与NKp30结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、CD3、CD16、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD16结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD3、CD16a和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD16a结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD3、CD16和CD16b的组的第二靶标结合。
在另一个具体的方面，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD16b结合并且至少与选自包括HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30、CD3、CD16a和CD16的组的第二靶标结合。
在具体的实施例中，多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与CD3结合并且与选自包括HER2、CD38、EGFR的组的第二靶标结合。
例如，根据本发明的多特异性抗体可通过
Figure BDA0004027716880000201
技术(WO2012131555)生成。
例如，本发明提供了一种包括双特异性异源二聚体免疫球蛋白的药物产品，所述双特异性异源二聚体免疫球蛋白结合至：
i)CD3和HER2，包括SEQ ID NO:1，2和3的氨基酸序列；或SEQ ID NO:10，11和12的氨基酸序列；或SEQ ID NO:13，14和15的氨基酸序列；或SEQ ID NO:16，17和12的氨基酸序列；或SEQ ID NO:18，19和20的氨基酸序列；或SEQ ID NO:20，21和22的氨基酸序列；或SEQID NO:23，24和15的氨基酸序列；或
ii)CD3和CD38，包括SEQ ID NO:7，8和9的氨基酸序列；或SEQ ID NO:25，14和26的氨基酸序列；或SEQ ID NO:27，28和29的氨基酸序列；或SEQ ID NO:30，31和26的氨基酸序列；或SEQ ID NO:32，33和34的氨基酸序列；或SEQ ID NO:24，35和36的氨基酸序列；或SEQID NO:24，29和37的氨基酸序列；或
iii)CD3和OX40，包括SEQ ID NO:38，39和14的氨基酸序列；或氨基酸序列40，41和24；或氨基酸序列42，43和24；或氨基酸序列44，38和24；或
iv)CD3和EGFR，包括SEQ ID NO:4，5和6的氨基酸序列；或SEQ ID NO:45，46和28的氨基酸序列；或SEQ ID NO:47，48和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:49，50和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:51，52和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:53，54和24的氨基酸序列；或SEQID NO:55，46和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:56，57和24的氨基酸序列；或
v)CD3和CD20，包括SEQ ID NO:58，59和31的氨基酸序列；或SEQ ID NO:60，61和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:62，63和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:64，59和24的氨基酸序列；或
vi)CD3和CD19，包括SEQ ID NO:65，66和24的氨基酸序列；或
vii)CD3和IgE，包括SEQ ID NO:67，68和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:69，70和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:71，72和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:73，74和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:75，76和24的氨基酸序列；或SEQ ID NO:77，78和24的氨基酸序列。
在某些优选的实施例中，双特异性抗体或其抗体片段结合第一靶标CD3和选自包括HER2、CD38和EGFR的组的第二靶标。在本发明的一个实施例中，称为Ab1的双特异性抗体结合T细胞表达的分化簇3(CD3)和通常在如乳腺癌细胞、卵巢癌细胞、膀胱癌细胞、唾液腺癌细胞、子宫内膜癌细胞、胰腺癌细胞和非小细胞肺癌(NSCLC)细胞之类的癌细胞中过表达的人表皮生长因子受体2(HER2)。根据本发明的Ab1包括SEQ ID NO:1至3的氨基酸序列。在另一个实施例中，单克隆双特异性抗体是Ab2(SEQ ID NO:4至6)，其与已知为包含结肠直肠癌的不同类型癌症中的靶标的CD3和EGFR结合。在一个实施例中，本发明提供的双特异性抗体与CD3和CD38(SEQ ID NO:7至9)上的表位结合。在另一个实施例中，单克隆双特异性抗体是Ab3，其被设计成同时接合T细胞上的CD3分子和多发性骨髓瘤细胞上的CD38抗原，并因此将细胞毒性T细胞桥接至多发性骨髓瘤肿瘤细胞，从而杀死结合的靶细胞。该过程被描述为重定向杀伤或溶解。
本发明还涉及一种准备施用于治疗有需要的患者的药物产品。根据本发明的另一方面，提供了一种治疗有需要的患者的方法。
如本文所用，术语“受试者”等同于术语“患者”，并且其包含任何人或非人动物。术语“非人动物”包含所有脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，如非人灵长类、绵羊、狗、猫、马、牛、鸡、两栖动物、爬行动物等。优选地，受试者是人。
本发明中的术语“治疗(treatment/treating)”意指包含疾病或病症的治疗性治疗，以及预防性或抑制性措施。因此，例如，在疾病发作之前成功施用抗体导致对疾病的治疗。作为另一个实例，在疾病的临床表现后成功施用抗体以对抗疾病的症状包括对疾病的治疗。“治疗”还包括在疾病出现后施用抗体以根除疾病。在发病后和临床症状发展后成功施用抗体，可能减轻临床症状和可能改善疾病，包括对疾病的治疗。“需要治疗”的哺乳动物包含已经患有所述疾病或病症的哺乳动物，以及易于患有所述疾病或病症的哺乳动物，包含其中要预防所述疾病或病症的哺乳动物。
本发明的抗体可以以单剂量或多剂量施用。本发明中使用的术语“剂量”或“用量”是可互换的，并且指示每受试者体重施用的药物物质的量或施用给受试者的总剂量，而与其体重无关。
根据本发明的一个方面，可以将所提供的准备施用的药物产品施用于个体。施用优选为“治疗有效量”，这足以显示对受试者的益处。这种益处可以是至少改善至少一种症状。实际施用量以及施用的速率和时程将取决于所治疗疾病的性质和严重程度。治疗处方，如剂量决定等，由医生负责。抗体的适当剂量是本领域熟知的(Ledermann JA等人，(1999)《国际癌症杂志(Int J Cancer)》47:659-664；Bagshawe KD等人，(1991)《抗体、免疫偶联物和放射性药物(Antibody,Immunoconjugates and Radiopharmaceuticals)》，4:915-922)。精确剂量将取决于多种因素，包含待治疗区域的大小和位置、受试者的体重、抗体(例如全抗体或片段)的确切性质以及在施用抗体之前、之时或之后施用的任何另外的治疗剂。
本发明还涉及一种制备本发明的稀释剂的方法。
本发明还公开了一种包括本发明的稀释剂的制品。
图1：在T0和在5℃、25℃和40℃下1个月之后通过280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D1至D10中的稳定性。
图2：在玻璃小瓶和聚乙烯衬里的施用装置(给药装置)中孵育24小时之后，第一次运行时针对稀释剂D1至D10的Ab1回收率(ng/mL)。报告的理论浓度(“Exp Conc”)。
图3：在玻璃小瓶和聚乙烯衬里的施用装置(给药装置)中孵育24小时之后，第二次运行时针对稀释剂D5、D6、D7、D9和D10的Ab1回收率(ng/mL)。报告的理论浓度(“ExpConc”)。
图4：在T0、在－80℃至25℃下的三个冷冻-解冻(FT)循环之后和在－80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。
图5：在T0、在－80℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在－80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。
图6：在T0、在-20℃至25℃下的三个FT循环之后和在-20℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。
图7：在T0、在-20℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在-20℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。
图8：在T0、在－80℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在－80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D2中的稳定性。
图9：在T0、在-20℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在-20℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D2中的稳定性。
图10：在T0、在－80℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在－80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D3中的稳定性。
图11：在T0、在－80℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在－80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D5中的稳定性。
图12：在T0、在-20℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在-20℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D3中的稳定性。
图13：在T0、在-20℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在-20℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D5中的稳定性。
图14：在T0、在－80℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在－80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D8中的稳定性。
图15：在T0、在-20℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后和在-20℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D8中的稳定性。
图16：在T0、在－80℃至25℃下的一个FT循环之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图17：在T0和在-20℃至25℃下的一个FT循环之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图18：在T0和在5℃下孵育24小时或1周(1W)之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图19：在T0和在25℃下于黑暗条件下孵育24小时或1周之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图20：在T0和在25℃下于光照条件下孵育24小时或1周之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图21:在5℃下在其中不锈钢针放置于中间的填充至体积的80％的100mL玻璃小瓶(“80％填充+针”)中孵育1周之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图22：在25℃下于黑暗条件下在其中不锈钢针放置于中间的填充至体积的80％的100mL玻璃小瓶(“80％填充+针”)中孵育1周之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图23：在25℃下于光照条件下在其中不锈钢针放置于中间的填充至体积的80％的100mL玻璃小瓶(“80％填充+针”)中孵育1周之后，通过在280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图24：在5℃下在完全填充或填充至80％的100mL玻璃小瓶中孵育1周之后，通过280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图25：在25℃下于黑暗条件下在完全填充或填充至80％的100mL玻璃小瓶中孵育1周之后，通过280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图26：在25℃下于光照条件下在注射器、填充至80％的100mL玻璃小瓶中孵育1周之后，通过280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图27：在25℃下在黑暗条件下和在室内光下孵育1周之后，通过280nm处的吸收测量的Ab1在包括吐温80-1(吐温1)或吐温80-2(吐温2)或吐温80-3(吐温3)的稀释剂D1中的稳定性。
图28：ELISA定量结果(试验1)
图29：ELISA定量结果(试验2)
图30：ELISA定量结果(试验3)
实例1：稀释剂D1至D10中的Ab1稳定性研究
材料和方法
首先，研究不同应力条件下Ab1(CD3xHER2双特异性抗体)在稀释剂D1至D10(示于表1中)中的稳定性。Ab1以10ng/ml的浓度存在于所述稀释剂中。
Figure BDA0004027716880000261
表1.稀释剂D1至D10的组合物
在接收材料后的时间点T0直接分析未受应力的样品，以便具有与受应力的样品进行比较的对照。研究的应力条件包含：
-温度应力：温度应力的目的是评价各温度对Ab1分子特性的影响。在这种情况下，研究了在5±3℃、25±2℃和40±2℃下孵育1个月(1M)。
-冷冻/解冻(FT)应力：在不同条件下进行FT和保持时间研究，包含在-20℃或-80℃至25℃下的1、2或3个FT循环，和在-20℃或-80℃至25℃下的1或3个FT循环，接着在5℃或25℃下孵育24或48小时。
对于这些实验，在D1至D10中使用吐温80作为聚山梨醇酯80。已经研究了不同类型的聚山梨醇酯80，特别是不同类型的吐温80对Ab1稳定性的影响，以及与金属针的接触、玻璃小瓶填充体积和光照/黑暗条件的影响。
为了确定分子在所述条件下的稳定性，使用Nanodrop 2000设备(赛默科技(Thermo scientific))通过UV-可见光分光光度计测量总蛋白质浓度。
结果和结论
一个月稳定性研究
首先，在储存前(T0)和在5℃、25℃和40℃下储存1个月之后研究Ab1在稀释剂D1至D10中的稳定性。从A280测量获得的结果来看，稀释剂D5至D10结果最稳定，针对所有测试温度A280低于规格设定的极限0.15(测量值0.15设定为截止值，为≥0.15值开始干扰实际蛋白质含量测量)，除D8在40℃下储存导致A280略高于规格极限(数据示于图1中)。
恢复研究
在将其储存在玻璃小瓶和聚乙烯衬里的施用装置中24小时之后，研究在稀释剂D1至D10中稀释8ng/mL的Ab1的回收率。图2和图3中所示的结果表明，在所测试的大多数缓冲剂中回收率相似，然而D7和D10在不同缓冲剂中结果最稳定。如果与最低浓度下目标值±40％/50％的限值一致，则认为稀释剂可接受。
冷冻/解冻应力
在图4至图15中给出了在施加冷冻/解冻(FT)应力后获得的Ab1稳定性分析的结果。为了研究FT温度的影响，对稀释剂D1和D7进行-80℃至25℃和-20℃至25℃的FT。具体而言，图4至图7显示了针对D1获得的结果。更具体地，图4显示了在T0、在-80℃至25℃下的三个FT循环之后和在-80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在分光光度计上在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。图5显示在(T0)之前以及-80℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后以及在-80℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃或5℃下孵育24小时或48小时之后，在通过Nanodrop测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。图6显示了在T0、在-20℃至25℃下的三个FT循环之后和在-20℃至25℃下的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24小时或48小时之后，通过在分光光度计上在280nm处的吸收测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。图7显示了在T0，以及在-20℃至25℃的一个、两个或三个FT循环之后，以及在-20℃至25℃的三个FT循环、接着在25℃或5℃孵育24小时或48小时之后，通过A280光谱法或Nanodrop测量的Ab1在稀释剂D1中的稳定性。
接下来，通过D2的FT研究来研究pH对Ab1稳定性的影响。在图8和图9中，分别显示了在T0以及分别在-80℃至25℃和-20℃至25℃的一个、两个或三个FT循环之后，以及在-80℃(或-20℃)至25℃的三个FT循环、接着在25℃下孵育24小时或48小时或接着在5℃下孵育24h或48h之后，Ab1在稀释剂D2中的稳定性。
对稀释剂D3和D5进行类似的实验以研究缓冲剂类型的影响(对于D3获得的结果，参见图10和图12和对于D5获得的结果，参见图11和图13)。图14和图15示出了聚山梨醇酯80浓度的影响的评估，在T0、分别在-80℃至25℃和从-20℃至25℃下的一个、两个或三个FT循环之后，以及在-80℃(或-20℃)至25℃下的三个FT循环、接着在25℃或在5℃下孵育24小时或48小时之后，获得D8的结果。
基于对D1、D2、D3、D5和D8进行的FT研究之间的比较，可以得出结论，冷冻温度(即-20℃或-80℃)对抗体的降解具有较小的影响。缓冲剂的类型对抗体的稳定性具有影响，事实上当比较D1(缓冲剂:组氨酸)、D3(缓冲剂:Tris)和D5(缓冲剂:磷酸盐)的降解曲线时，显然，使用磷酸盐时获得更高的稳定性。不同地，稀释剂的pH不影响抗体降解曲线，如对于具有pH 7.4的D1(图5和图7)和对于具有pH 7.0的D2(图8和图9)获得的结果所示。
吐温类型的影响
接下来，研究在100ml玻璃小瓶(80％填充)中聚山梨醇酯80类型对在D1中稀释的Ab1的稳定性的影响。特别地，测试了吐温80-1、吐温80-2和吐温80-3。首先，在-80℃至25℃下的1个FT循环之前和之后(图16)以及在-20℃至25℃下的1个FT循环之后(图17)测试聚山梨醇酯80类型的作用，其显示测试的吐温80之间总体上没有显著差异。接下来，研究在5℃下储存24小时和1周(1W)(图18)，其显示当使用吐温1和吐温2时在1W储存后抗体的不稳定性。在黑暗条件(图19)和光照条件(图20)下，在25℃下孵育样品24小时和1周(1W)后获得类似的结果。
金属的影响
另外，研究了金属对稀释在包括吐温80-1或吐温80-2或吐温80-3的D1中稀释的Ab1的稳定性的影响。具体地，将100mL玻璃小瓶填充至体积的80％，将一组五个不锈钢针放置在小瓶的中间，并在5℃(图21)和25℃下在黑暗条件(图22)或在光照条件下(图23)孵育一周后评价抗体的稳定性。如图21至图23中的结果所示，Ab1的稳定性不受针的存在的影响。
填充体积的影响
此外，研究了小瓶填充百分比对Ab1在包括吐温80-1或吐温80-2或吐温80-3的D1中的稳定性的影响。具体地，将100mL玻璃小瓶完全填充(Maxfill)，因此排除空气的存在，或将其填充至体积的80％，并在5℃(图24)和25℃下在黑暗条件(图25)或在光照条件下(图26)孵育一周后评价抗体的稳定性。本研究的结果表明，当吐温80-1或吐温80-2用作聚山梨醇酯80时，填充体积影响Ab1的稳定性。
光的影响
将在25℃下在光照条件或黑暗条件下孵育Ab1一周后获得的结果进行比较，显示光照不影响Ab1的稳定性(图27)。
实例2：在稀释剂C1至C18中的Ab2稳定性研究
Ab2是靶向表皮生长因子受体(EGFR)的EGFRxCD3双特异性抗体，EGFR是几种癌症(包含头颈部鳞状细胞癌和结肠直肠癌)中的经证实的靶标。在低浓度下，例如10ng/mL，蛋白质易于吸附在包含输注系统(袋、管线、过滤器等)的各种表面上。需要具有适当赋形剂的稀释剂组合物来限制吸附损失。在该开发中，测试不同稀释剂组合物的Ab2回收率。
材料和方法
测试的稀释剂(C1至C18)的组合物在表2中给出。
稀释剂 组合物
C1 <![CDATA[25mM柠檬酸盐<sup>a</sup>-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0]]>
C2 <![CDATA[25mM柠檬酸盐<sup>a</sup>-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0]]>
C3 <![CDATA[25mM柠檬酸盐<sup>a</sup>-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.5]]>
C4 <![CDATA[25mM柠檬酸盐<sup>a</sup>-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 7.0]]>
C5 <![CDATA[25mM组氨酸<sup>b</sup>-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0]]>
C6 <![CDATA[25mM组氨酸<sup>b</sup>-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0]]>
C7 <![CDATA[25mM组氨酸<sup>b</sup>-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.5]]>
C8 25mM组氨酸b-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.5
C9 25mM磷酸盐c-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0
C10 25mM磷酸盐c-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0
C11 25mM磷酸盐c-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.5
C12 25mM磷酸盐c-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.5
C13 25mM磷酸盐c-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 7.0
C14 25mM磷酸盐c-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 7.0
C15 <![CDATA[25mM柠檬酸盐-磷酸盐<sup>d</sup>-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0]]>
C16 <![CDATA[25mM柠檬酸盐-磷酸盐<sup>d</sup>-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 6.0]]>
C17 25mM柠檬酸盐-磷酸盐-500mM L-精氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 7.0
C18 25mM柠檬酸盐-磷酸盐-500mM L-赖氨酸HCl-0.04％(w/v)聚山梨醇酯80-pH 7.0
表2.经测试的定制稀释剂列表。a使用柠檬酸和柠檬酸三钠二水合物制备b使用L-组氨酸和L-组氨酸-单盐酸盐制备。c使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠制备。d使用柠檬酸盐缓冲剂和磷酸盐缓冲剂(2:1比率)制备e使用柠檬酸盐缓冲剂和磷酸盐缓冲剂(1:2比率)制备。
用于静脉(IV)途径临床试验的材料包含注射器(50mL)、针(23G)、输注装置、三通旋塞阀和定制稀释剂(缓冲剂)。对于IV相容性研究，制备不同稀释度的Ab2并填充在50mL的Falcon管(试验1和2)或盐水袋中(试验3、4和5)；使用新鲜的3mL注射器和18G针直接从Falcon管(试验1和2)或从盐水袋(试验3、4和5)中取出T0样品；将其在25±2℃下保持长达24小时。之后，使用Falcon管样品进行分析(试验1和2)或安装输注管线(带有针-23G)，并且在空玻璃小瓶中进行缓慢注射并用于分析。试验信息总结参见表3。
Figure BDA0004027716880000301
表3.用于Ab2定制稀释剂开发的给药装置材料列表
对于在Falcon管中的相容性研究(试验1和2)，将Ab2在C1至C18稀释剂中稀释至10ng/mL的目标浓度。对于盐水袋中的相容性研究(试验3、4和5)，按顺序进行以下步骤以制备样品：
1.将Ab2原料药物物质(BDS)在小瓶中稀释至0.10mg/mL，并将盐水袋在室温下保持最少2小时以平衡至室温。
2.用高纯化水(HPW)洗涤小瓶并在室温下干燥。使用蒸汽灭菌对这些洗涤过的空瓶进行高压灭菌并进行干燥。经洗涤并高压灭菌的小瓶用于收集用于ELISA定量的样品。
3.根据表2的组合物制备稀释剂。
4.在无菌1L玻璃容器(Schott)中在层流罩(LAF)下使用0.22μm过滤器过滤制备的缓冲剂，适当标记并在5±3℃下储存直至使用。
5.对于每种稀释剂，取18G针和60mL注射器，并且从每个袋中抽出55mL盐水。然后丢弃该55mL盐水。
6.使用另一个18G针和60mL注射器，将55mL定制稀释剂添加到盐水袋中(已经从中抽取55mL盐水)。
7.向含有0.1mg/mL的Ab2的小瓶中加入0.9mL稀释剂，因此体积从1.1mL增加至2.0mL，随后浓度从0.1mg/mL降低至0.055mg/mL。
8.如表4中所概述制备Ab2的单一稀释。
Figure BDA0004027716880000311
表4.样品制备(稀释)方案(IV)。*500mL袋通常过量填充5-10％过量以确保灌注等。已考虑550mL的体积进行计算。
9.在本研究期间，测试了不同条件，如表5。
Figure BDA0004027716880000312
表5.试验条件总结：X：测试；NT：未测试；*试验5使用每种条件的5次重复进行重复测试，因此将Ab2稀释在5个袋中。
10.孵育后，取出袋并连接输注管线。在试验3中，还在T0连接管线以研究在+25±2℃下在管线和袋中孵育24小时后的吸附。
11.灌注输注管线，并且丢弃前30mL，然后将样品收集在玻璃小瓶中。将约1mL样品收集在玻璃小瓶中并用于ELISA定量(详见表6和以下描述)。
12.在每个研究过程中同时分析所有样品(T0和孵育后)。
测定类型 参数 规格
ELISA定量 蛋白质浓度 5-15ng/mL
表6.用于Ab2定制稀释剂开发的测试方法和规格
开发ELISA方法用于定量测试蛋白质。遵循以下步骤，1)通过在96孔costar板上添加100μl的10μg/mL的抗体靶标(人CD3 1-26N端肽FC)来执行包被。加入抗体靶标后，将板在2-8℃孵育过夜。2)第二天早晨，使用板洗涤器用200μL PBS 0.01％吐温20来洗涤板，随后添加200μL封闭缓冲剂(PBS中的2％BSA)并在37℃±2℃下孵育90±30分钟。3)孵育后，除去封闭缓冲剂，并使用板洗涤器用200μL PBS 0.01％吐温20来洗涤板。然后将样品和参比标准品(已知浓度)加入(100μL)到板中。将板在37℃±2℃下进一步孵育60±5分钟。4)孵育后，用200μL PBS 0.01％吐温20洗涤板，并向板中加入检测抗体。将板在37℃±2℃下再孵育60±5分钟。5)最后，用200μL PBS 0.01％吐温20洗涤板，并通过添加TMB过氧化物酶EIA底物试剂盒显影。10分钟后，通过加入50μL H2SO4 1M溶液终止反应，并使用UV分光光度计读板。
结果和讨论
试验1
试验1的目的是筛选表2的稀释剂，以选择用于后续试验的最有希望的稀释剂。在该试验中，将Ab2在表2中列出的18种缓冲剂组合物中稀释至10ng/mL的目标浓度。使用如上所述的ELISA定量进行回收率分析。
分析18种稀释剂。数据显示8种稀释剂(C1、C2、C5、C6、C7、C10、C13和C15)的基质不相容性(源自不存在具有上渐近线、下渐近线和线性点的适当S曲线-可能的主要原因是组合物和缓冲剂类型的差异导致基质效应。该矩阵效应使得样本的数据解释变得困难)。对于其它10种，似乎与封闭缓冲剂相比条件不是最佳的，因此将它们重复至5ng/mL和更高的Strep-HRP稀释度。结果示于图28中。
基于图28中呈现的数据，进行试验2的待测试稀释剂的进一步选择。根据三个标准对图28的简短列出的稀释剂进行评级：
·分析期间的噪声；
·Ab2的结合(或回收率)；
·观察值与目标值的准确度(或接近程度)。在每种情况下，将T0和T24的平均值与10ng/mL的目标值进行比较，然后应用评级(表7)。
Figure BDA0004027716880000331
表7.试验后所选稀释剂的评级。NA：不适用，因为T24值高于T0，并且因此在计算平均评级值时被忽略。
基于上述评级，选择4种稀释剂C9、C11、C12和C14用于进一步筛选。
试验2
在本试验中，测试了四种选择的稀释剂(C9、C11、C12和C14)和D7(参见表1)，图29和表8中命名为对照“Ctrl”。在分析的第一次尝试中，样品似乎接近曲线平台，这导致测量浓度的高可变性，并且因此，将样品稀释10倍以出现在曲线的线性部分的中心。
Figure BDA0004027716880000332
表8.试验2ELISA定量结果
根据可用数据，发现所有回收结果均在预定义规格(≥5和≤15ng/mL)内。当在C9、C11、C12、C14和D7中稀释至10ng/mL时，发现Ab2与测试的给药装置相容。
试验3
在本试验中，目标是测试当在C9、C11和C12稀释剂中稀释至10ng/mL时Ab2与给药装置(表3)的相容性表9和图30。
Figure BDA0004027716880000341
表9.试验3ELISA定量结果
根据可用数据，发现所有回收结果均在预定义规格(≥5和≤15ng/mL)内。当在C9、C11和C12中稀释至10ng/mL时，发现Ab2与测试的给药装置相容。
试验4
在本试验中，目标是测试选自试验3的两种稀释剂C9和C12与试验1后由于与方法的潜在基质不相容性而丢弃的两种稀释剂C8和C17的相容性。在分析之前还将D7用作对照，将所有样品在封闭缓冲剂中稀释，使得它们在450nm(Y轴)处达到相同的吸光度。
Figure BDA0004027716880000342
表10.试验4ELISA定量结果
根据可用数据，发现所有回收结果均在预定义规格(≥5和≤15ng/mL)内。当在C8、C9、C12、C17和柠檬酸盐稀释剂(D7)中稀释至10ng/mL时，发现Ab2与测试的给药装置相容。
试验5
在本试验中，目标是测试当在所选C9稀释剂和D7中稀释至10ng/mL时Ab2与给药装置(表3)的相容性。
Figure BDA0004027716880000343
表11.试验5ELISA定量结果
根据可用数据，发现回收结果在预定义规格内(目标浓度±50％，即：≥5和≤15ng/mL)用于D7，但不用于C9稀释剂。因此，当在柠檬酸盐稀释剂(D7)中稀释至10ng/mL时，发现Ab2与测试的给药装置(表3)相容，而当在C9稀释剂中稀释至10ng/mL时，似乎与给药装置不相容。通过重复测试C9稀释剂，证实了该观察结果，如以下部分所示。
试验5(+5±3℃条件的重复试验)
根据之前的结果，重复测试+5±3℃条件。将Ab2在5个单独的袋中稀释至10ng/mL(表3)，并通过ELISA定量来分析T0和孵育后(+5±3℃下24小时)的样品。所有结果示于表12中。
Figure BDA0004027716880000351
表12.试验5(重复试验)ELISA定量结果
根据可用数据，发现所有回收结果均在预定义规格(≥5和≤15ng/mL)内。当在C9中稀释至10ng/mL时，发现Ab2与测试的给药装置(表3)相容。
总之，基于回收率数据，似乎当稀释至10ng/mL时和在+5±3℃和+25±2℃下在输注袋中孵育24小时后，两种稀释剂对于Ab2是最佳的。两种最佳缓冲剂如下：
-柠檬酸2.1g/L，氯化钠9.0g/L，L-赖氨酸单盐酸盐91.0g/L，聚山梨醇酯80 0.4g/L(0.04％)pH 7.0(D7)。
-25mM磷酸盐，500mM L-精氨酸单盐酸盐，聚山梨醇酯800.4g/L(0.04％)pH 6.0(C9)。
发现D7在防止吸附损失以及缓冲剂组合物的稳定性方面是最佳的。
发现C9在防止吸附损失和稳定性方面是最佳的，如实例3中所示。
实例3：Ab2稳定性研究-长期储存
本实验的目的是评估当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存时Ab2在C3、C4、C7、C8、C9、C11、C12、C14、C16、C17、C18稀释剂中的稳定性。基于3个月稳定性数据，选择三种稀释剂用于长达29个月的进一步稳定性。
材料和方法
通过监测pH的变化，通过评价样品的外观和通过测量蛋白质含量(通过测量280nm波长处的吸光度(A280))、样品重量克分子渗透压浓度，和通过使用USP<787>推荐的光遮蔽法或通过使用微流动成像仪器的类似方法进行亚可见粒子分析来评估长期稳定性。在这两种情况下，使用的基本原则是颗粒的存在导致用于测量颗粒尺寸和计数的光路中的阻塞。
将所获得的值与规范设定的值进行比较，这被认为是为了确保样品的稳定性。对pH制定了严格规范(通常；目标±0.1单位)，并且本发明目的是使用该测定作为缓冲组分的任何降解的灵敏量度。将适用于生物制药工业的标准规范用于外观测试。对于亚可见颗粒，采用USP<787>中的规格，而其余测试仅“报告结果”在此时间点用作规格，因为测试需要基于数据的规格-尽管如此，仍针对与T0相比的变化对其进行评价。
_______________
结果和结论
C3-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000371
表13：C3稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C3是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
C4-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000381
表14：C4稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C4是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
C7-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000391
表15：C7稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃下储存长达3个月以及在+25±2℃和+40±2℃下储存长达1个月时，发现稀释剂C7不稳定，因为并非所有结果均符合预定义规格。实际上，在+5±3℃下3个月后和在+25±2℃和+40±2℃下1个月后观察到聚山梨醇酯80浓度降低。在所有储存温度条件下的吸光度值似乎有增加的趋势，这可能与样品中的降解有关。液体的pH值和外观符合预定义规格。
C8-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000401
表16：C8稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃下储存长达3个月以及在+25±2℃和+40±2℃下储存长达1个月时，发现稀释剂C8不稳定，因为并非所有结果均符合预定义规格。实际上，在+5±3℃下3个月后和在+25±2℃和+40±2℃下1个月后观察到聚山梨醇酯80浓度降低。在所有储存温度条件下的吸光度值似乎有增加的趋势，这可能与样品中的降解有关。液体的pH值和外观符合预定义规格。
C9-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000411
表17：C9稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C9是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在电导率、重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
C11-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000421
表18：C11稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C11是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在电导率、重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
C12-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000431
表19：C12稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃和+25±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C12是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在电导率、重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
当在+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C12不稳定，因为吸光度值从T0值显著增加(0.037Au至0.125AU)。pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。
C14-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000441
表20：C14稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃和+25±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C14是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。当在+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C14不稳定，因为吸光度值从T0值显著增加(0.037Au至0.223AU)。所有其它测试(pH、液体外观、亚可见颗粒含量)均符合预定义规格。重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量没有显示出显著变化。
C16-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000451
表21：C16稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C16是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在电导率、重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
C17-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000461
表22：C17稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C17是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见含量符合预定义规格。在重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
C18-在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000471
表23：C18稳定性研究：在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存3个月
当在+5±3℃、+25±2℃和+40±2℃下储存长达3个月时，发现稀释剂C18是稳定的，因为pH值、液体外观和亚可见颗粒含量符合预定义规格。在重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。在电导率方面，似乎存在增加的趋势，与温度无关，因为它发生在所有储存温度条件下。因此，这与样品的不稳定性无关。
基于上述结果，可以做出下述结论：
1.含精氨酸HCl和聚山梨醇酯80的基于磷酸盐(C9，C11)的稀释剂在所有温度下稳定长达3个月。具有精氨酸HCl和聚山梨醇酯80的基于柠檬酸盐(C3和C4)的稀释剂在3M后在所有储存温度下是稳定的。含赖氨酸HCl/精氨酸HCl和聚山梨醇酯80的基于组氨酸的稀释剂(C7和C8)在+25℃或以上的高温下储存1M后不稳定，并且在+5±3℃下储存3M后不稳定。
2.含有赖氨酸HCl(C8，C12和C14)的稀释剂在加速和应力温度条件下比含有精氨酸HCl(C9和C11)的稀释剂更不稳定。
3.双缓冲系统(柠檬酸盐-磷酸盐)的使用显著地改善了作为应力储存条件的含有赖氨酸HCl的稀释剂的稳定性(C14对C18)，因为C18在3M之后在所有储存温度下都是稳定的并且C14仅在应力条件下在3M下是不稳定的。
4.发现pH 6.5的含有赖氨酸HCl的稀释剂(C14)在应力条件下储存3个月后不稳定，而pH 6.5的含有精氨酸HCl的稀释剂(C12)在应力条件下储存3个月后稳定。因此，在pH6.5下，优选结合磷酸盐和精氨酸HCl的缓冲体系。
相应地，发现具有磷酸盐和精氨酸HCl的缓冲剂与聚山梨醇酯80(C9，C11)的最佳组合是最佳组合物。然而，考虑到双缓冲体系(C16)在稳定基于赖氨酸HCl的体系中的潜力，也有兴趣监测它们的稳定性。因此，选择用于长期稳定性的最后三种稀释剂是C9、C11和C16。
C9-在+5±3℃下储存29个月
Figure BDA0004027716880000491
表24：C9稳定性研究：在+5±3℃下储存29个月
C9-在+25±2℃下储存12个月
Figure BDA0004027716880000501
表25：C9稳定性研究：在+25±2℃下储存12个月
C9-在+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000502
表26：C9稳定性研究：在+40±2℃下储存3个月
C11-在+5±3℃下储存29个月
Figure BDA0004027716880000511
表27：C11稳定性研究：在+5±3℃下储存29个月
C11-在+25±2℃下储存12个月
Figure BDA0004027716880000521
表28：C11稳定性研究：在+25±2℃下储存12个月
C11-在+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000522
表29：C11稳定性研究：在+40±2℃下储存3个月
C16-在+5±3℃下储存29个月
Figure BDA0004027716880000531
表30：C16稳定性研究：在+5±3℃下储存29个月
C16-在+25±2℃下储存12个月
Figure BDA0004027716880000541
表31：C16稳定性研究：在+5±3℃下储存12个月
C16-在+40±2℃下储存3个月
Figure BDA0004027716880000542
表32：C16稳定性研究：在+40±2℃下储存3个月
总之，根据可用数据：
-C9稀释剂在10mL小瓶(VCDIN10R，来自Schott)中在+5±3℃下储存时可稳定长达29个月，在+25±2℃下储存时可稳定长达12个月，并且在+40±2℃下储存时可稳定长达3个月，因为其在pH、液体外观和亚可见粒子含量方面均在预定义规格内。在电导率、重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
-C11稀释剂在10mL小瓶(VCDIN10R，来自Schott)中在+5±3℃下储存时可稳定长达29个月，在+25±2℃下储存时可稳定长达12个月，并且在+40±2℃下储存时可稳定长达3个月，因为其在pH、液体外观和亚可见粒子含量方面均在预定义规格内。在电导率、重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
-C16稀释剂在10mL小瓶(VCDIN10R，来自Schott)中在+5±3℃下储存时可稳定长达29个月，在+25±2℃下储存时可稳定长达12个月，并且在+40±2℃下储存时可稳定长达3个月，因为其在pH、液体外观和亚可见粒子含量方面均在预定义规格内。在电导率、重量摩尔渗透压浓度、吸光度(A280)值和聚山梨醇酯80含量方面没有观察到显著变化。
Figure BDA0004027716880000551
表33：结果总结
序列表
<110> 伊克诺斯科学公司
<120> 抗体制剂稀释剂
<130> IST5001-01-PC00
<160> 78
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 495
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 赫赛汀ScFv LALA BTB Fc_蛋白
<400> 1
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1               5                   10                  15
Gly Ser Thr Gly Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
            20                  25                  30
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn
        35                  40                  45
Ile Lys Asp Thr Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
    50                  55                  60
Leu Glu Trp Val Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr
65                  70                  75                  80
Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys
                85                  90                  95
Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala
            100                 105                 110
Val Tyr Tyr Cys Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp
        115                 120                 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly
    130                 135                 140
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr
145                 150                 155                 160
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile
                165                 170                 175
Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln
            180                 185                 190
Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Phe
        195                 200                 205
Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr
    210                 215                 220
Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr
225                 230                 235                 240
Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly
                245                 250                 255
Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly Thr Asp Lys Thr His
            260                 265                 270
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val
        275                 280                 285
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
    290                 295                 300
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
305                 310                 315                 320
Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
                325                 330                 335
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
            340                 345                 350
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
        355                 360                 365
Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
    370                 375                 380
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala Thr Phe Pro
385                 390                 395                 400
Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu Val Cys Leu
                405                 410                 415
Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
            420                 425                 430
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Asp Pro Pro Leu Leu Glu Ser
        435                 440                 445
Asp Gly Ser Phe Ala Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp Lys Ser Arg
    450                 455                 460
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
465                 470                 475                 480
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
                485                 490                 495
<210> 2
<211> 469
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> OKT3 H11 1133 LALA BTA_蛋白
<400> 2
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1               5                   10                  15
Gly Ser Thr Gly Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
            20                  25                  30
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr
        35                  40                  45
Phe Thr Arg Tyr Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
    50                  55                  60
Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Tyr Tyr
65                  70                  75                  80
Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Thr Asp Lys Ser Lys
                85                  90                  95
Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala
            100                 105                 110
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr
        115                 120                 125
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
    130                 135                 140
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
145                 150                 155                 160
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
                165                 170                 175
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
            180                 185                 190
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
        195                 200                 205
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
    210                 215                 220
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
225                 230                 235                 240
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala
                245                 250                 255
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
            260                 265                 270
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
        275                 280                 285
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val
    290                 295                 300
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
305                 310                 315                 320
Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
                325                 330                 335
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
            340                 345                 350
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
        355                 360                 365
Ala Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
    370                 375                 380
Val Lys Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
385                 390                 395                 400
Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr
                405                 410                 415
Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu
            420                 425                 430
Asn Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser
        435                 440                 445
Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser
    450                 455                 460
Leu Ser Pro Gly Lys
465
<210> 3
<211> 233
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> OKT3 L8 LC_蛋白
<400> 3
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1               5                   10                  15
Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
            20                  25                  30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser
        35                  40                  45
Val Ser Tyr Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys
    50                  55                  60
Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg
65                  70                  75                  80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser
                85                  90                  95
Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser
            100                 105                 110
Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
        115                 120                 125
Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu
    130                 135                 140
Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro
145                 150                 155                 160
Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly
                165                 170                 175
Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr
            180                 185                 190
Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His
        195                 200                 205
Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val
    210                 215                 220
Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225                 230
<210> 4
<211> 723
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> SF3_scFV_Hc序列
<400> 4
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1               5                   10                  15
Gly Ser Thr Gly Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
            20                  25                  30
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr
        35                  40                  45
Phe Asn Thr Tyr Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
    50                  55                  60
Leu Glu Trp Val Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp
                85                  90                  95
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
            100                 105                 110
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr
        115                 120                 125
Val Ser Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
    130                 135                 140
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
145                 150                 155                 160
Glu Ile Val Val Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
                165                 170                 175
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Glu
            180                 185                 190
Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Gly Gln Ala Phe Arg
        195                 200                 205
Gly Leu Ile Gly Gly Ala Asn Lys Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg
    210                 215                 220
Phe Ser Gly Ser Leu Ser Gly Asp Glu Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ser
225                 230                 235                 240
Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Phe Tyr Ser
                245                 250                 255
Asn Thr Trp Val Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly
            260                 265                 270
Gly Gly Thr Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys
        275                 280                 285
Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Val
    290                 295                 300
Ser Ser Gly Asp Tyr Tyr Trp Thr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Lys
305                 310                 315                 320
Gly Leu Glu Trp Ile Gly His Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr
                325                 330                 335
Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys
            340                 345                 350
Thr Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala
        355                 360                 365
Ile Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Arg Val Thr Gly Ala Phe Asp Ile Trp
    370                 375                 380
Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
385                 390                 395                 400
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
                405                 410                 415
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
            420                 425                 430
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
        435                 440                 445
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
    450                 455                 460
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn
465                 470                 475                 480
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser
                485                 490                 495
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala
            500                 505                 510
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
        515                 520                 525
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
    530                 535                 540
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
545                 550                 555                 560
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
                565                 570                 575
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
            580                 585                 590
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
        595                 600                 605
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala
    610                 615                 620
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
625                 630                 635                 640
Lys Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
                645                 650                 655
Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro
            660                 665                 670
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn
        675                 680                 685
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val
    690                 695                 700
Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
705                 710                 715                 720
Ser Pro Gly
<210> 5
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> SF3_Lc
<400> 5
Met Arg Ser Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Ile Pro
1               5                   10                  15
Gly Thr Asn Ala Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
            20                  25                  30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp
        35                  40                  45
Ile Ser Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
    50                  55                  60
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser
65                  70                  75                  80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser
                85                  90                  95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln His Phe Asp
            100                 105                 110
His Leu Pro Leu Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
        115                 120                 125
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
    130                 135                 140
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
145                 150                 155                 160
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
                165                 170                 175
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
            180                 185                 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
        195                 200                 205
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
    210                 215                 220
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225                 230
<210> 6
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> SF3_Fc
<400> 6
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1               5                   10                  15
Gly Ser Thr Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
            20                  25                  30
Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
        35                  40                  45
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
    50                  55                  60
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
65                  70                  75                  80
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
                85                  90                  95
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
            100                 105                 110
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
        115                 120                 125
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
    130                 135                 140
Glu Pro Glu Val Ala Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys
145                 150                 155                 160
Asn Gln Val Thr Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
                165                 170                 175
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
            180                 185                 190
Thr Asp Pro Pro Leu Leu Glu Ser Asp Gly Ser Phe Ala Leu Ser Ser
        195                 200                 205
Arg Leu Arg Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
    210                 215                 220
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
225                 230                 235                 240
Leu Ser Leu Ser Pro Gly
                245
<210> 7
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> hum9G7_VL_cK
<400> 7
Met Arg Ser Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Ile Pro
1               5                   10                  15
Gly Thr Asn Ala Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
            20                  25                  30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp
        35                  40                  45
Val Ile Thr Ser Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
    50                  55                  60
Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser
65                  70                  75                  80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser
                85                  90                  95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr
            100                 105                 110
Thr Ile Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
        115                 120                 125
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
    130                 135                 140
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
145                 150                 155                 160
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
                165                 170                 175
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
            180                 185                 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
        195                 200                 205
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
    210                 215                 220
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225                 230
<210> 8
<211> 470
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> h9G7 1133 BTA LALA FTO (dA)
<400> 8
Met Arg Ser Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Ile Pro
1               5                   10                  15
Gly Thr Asn Ala Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Thr Leu Val
            20                  25                  30
Lys Pro Thr Gln Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Leu Ser
        35                  40                  45
Leu Ser Thr Ser Gly Lys Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly
    50                  55                  60
Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Arg
65                  70                  75                  80
Tyr Asn Pro Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Thr Lys Asp Thr Ser
                85                  90                  95
Lys Asn Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr
            100                 105                 110
Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Ile Glu Leu Gly Arg Ser Tyr Val Met
        115                 120                 125
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
    130                 135                 140
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
145                 150                 155                 160
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
                165                 170                 175
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
            180                 185                 190
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
        195                 200                 205
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
    210                 215                 220
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
225                 230                 235                 240
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
                245                 250                 255
Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
            260                 265                 270
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
        275                 280                 285
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp
    290                 295                 300
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
305                 310                 315                 320
Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
                325                 330                 335
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
            340                 345                 350
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg
        355                 360                 365
Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
    370                 375                 380
Asn Gln Val Lys Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
385                 390                 395                 400
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr
                405                 410                 415
Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser
            420                 425                 430
Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser
        435                 440                 445
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser
    450                 455                 460
Leu Ser Leu Ser Pro Gly
465                 470
<210> 9
<211> 501
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> hSP34_H3K21_W100eY/T29E-W91F-L95T (hSP34v.3)
scFv_11_BTB_D401Q_LALA
<400> 9
Met Arg Ser Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Ile Pro
1               5                   10                  15
Gly Thr Asn Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
            20                  25                  30
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr
        35                  40                  45
Phe Asn Thr Tyr Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
    50                  55                  60
Leu Glu Trp Val Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp
                85                  90                  95
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
            100                 105                 110
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr
        115                 120                 125
Val Ser Tyr Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
    130                 135                 140
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
145                 150                 155                 160
Glu Ile Val Val Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
                165                 170                 175
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Glu
            180                 185                 190
Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Gly Gln Ala Phe Arg
        195                 200                 205
Gly Leu Ile Gly Gly Ala Asn Lys Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg
    210                 215                 220
Phe Ser Gly Ser Leu Ser Gly Asp Glu Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ser
225                 230                 235                 240
Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Phe Tyr Ser
                245                 250                 255
Asn Thr Trp Val Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly
            260                 265                 270
Gly Gly Thr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
        275                 280                 285
Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
    290                 295                 300
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
305                 310                 315                 320
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
                325                 330                 335
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
            340                 345                 350
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
        355                 360                 365
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
    370                 375                 380
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
385                 390                 395                 400
Pro Glu Val Ala Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn
                405                 410                 415
Gln Val Thr Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
            420                 425                 430
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
        435                 440                 445
Asp Pro Pro Leu Leu Glu Ser Gln Gly Ser Phe Ala Leu Ser Ser Arg
    450                 455                 460
Leu Arg Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
465                 470                 475                 480
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
                485                 490                 495
Ser Leu Ser Pro Gly
            500
<210> 10
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3-1抗体FAB重链
（CD3ε臂-具有N82aS取代的人源化OKT3）
<400> 10
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
            20                  25                  30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
        35                  40                  45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Thr Asp Lys Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
Lys
<210> 11
<211> 475
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3-1抗体scFv重链（HER2臂）
<400> 11
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
            20                  25                  30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
            100                 105                 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
    130                 135                 140
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala
145                 150                 155                 160
Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
                165                 170                 175
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly
            180                 185                 190
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
        195                 200                 205
Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
    210                 215                 220
Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu
225                 230                 235                 240
Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly Thr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro
                245                 250                 255
Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
            260                 265                 270
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
        275                 280                 285
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
    290                 295                 300
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
305                 310                 315                 320
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
                325                 330                 335
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
            340                 345                 350
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
        355                 360                 365
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp
    370                 375                 380
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe
385                 390                 395                 400
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
                405                 410                 415
Asn Asn Tyr Lys Thr Asp Pro Pro Leu Leu Glu Ser Asp Gly Ser Phe
            420                 425                 430
Ala Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
        435                 440                 445
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
    450                 455                 460
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465                 470                 475
<210> 12
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有VL8结构域的OKT3人源化轻链
<400> 12
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Val
            20                  25                  30
Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Thr Ser Lys Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Pro Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 13
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3-2抗体FAB重链（HER2臂）
<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
            20                  25                  30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
            100                 105                 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Asn Gly Pro Ser Val
        115                 120                 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
    130                 135                 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145                 150                 155                 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
                165                 170                 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
            180                 185                 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
        195                 200                 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
    210                 215                 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225                 230                 235                 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
                245                 250                 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
            260                 265                 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
        275                 280                 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
    290                 295                 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305                 310                 315                 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
                325                 330                 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr
            340                 345                 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu
        355                 360                 365
Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
    370                 375                 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Val
385                 390                 395                 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp
                405                 410                 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
            420                 425                 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
        435                 440                 445
Gly Lys
    450
<210> 14
<211> 477
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3-2抗体scFv重链
(CD3ε臂 - 具有N82aS取代的人源化OKT3)
<400> 14
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
            20                  25                  30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
        35                  40                  45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Thr Asp Lys Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ala Ser Asp Ile Gln Leu Thr
    130                 135                 140
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile
145                 150                 155                 160
Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Val Ala Trp Tyr Gln Gln
                165                 170                 175
Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu
            180                 185                 190
Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp
        195                 200                 205
Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr
    210                 215                 220
Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr
225                 230                 235                 240
Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Thr Asp Lys Thr His Thr Cys
                245                 250                 255
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
            260                 265                 270
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
        275                 280                 285
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln
    290                 295                 300
Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
305                 310                 315                 320
Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu
                325                 330                 335
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
            340                 345                 350
Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
        355                 360                 365
Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala Thr Phe Pro Pro Ser
    370                 375                 380
Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu Val Cys Leu Val Thr
385                 390                 395                 400
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln
                405                 410                 415
Pro Glu Asn Asn Tyr Asn Thr Asp Pro Pro Leu Leu Glu Ser Asp Gly
            420                 425                 430
Ser Phe Ala Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
        435                 440                 445
Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
    450                 455                 460
Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465                 470                 475
<210> 15
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗HER2轻链
<400> 15
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
            20                  25                  30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 16
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3-3抗体FAB重链
（CD3ε臂-具有G65S取代的人源化OKT3）
<400> 16
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
            20                  25                  30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
        35                  40                  45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Ser Arg Phe Thr Leu Ser Thr Asp Lys Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
Lys
<210> 17
<211> 474
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3-3抗体scFv重链（具有另外二硫键的HER2臂）
<400> 17
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
            20                  25                  30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
            100                 105                 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
    130                 135                 140
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala
145                 150                 155                 160
Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
                165                 170                 175
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly
            180                 185                 190
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
        195                 200                 205
Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
    210                 215                 220
Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu
225                 230                 235                 240
Ile Lys Gly Gly Gly Gly Thr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
                245                 250                 255
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
            260                 265                 270
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
        275                 280                 285
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
    290                 295                 300
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
305                 310                 315                 320
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
                325                 330                 335
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
            340                 345                 350
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
        355                 360                 365
Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp Glu
    370                 375                 380
Leu Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr
385                 390                 395                 400
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
                405                 410                 415
Asn Tyr Lys Thr Asp Pro Pro Leu Leu Glu Ser Gln Gly Ser Phe Ala
            420                 425                 430
Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
        435                 440                 445
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
    450                 455                 460
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465                 470
<210> 18
<211> 455
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3(SP34)抗体FAB重链
（CD3ε臂-来自WO2008/119565的人源化SP34 VH）
<400> 18
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Lys Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Ile Ser Tyr Trp
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
        115                 120                 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
    130                 135                 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145                 150                 155                 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
                165                 170                 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
            180                 185                 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
        195                 200                 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
    210                 215                 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
225                 230                 235                 240
Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
                245                 250                 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
            260                 265                 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
        275                 280                 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
    290                 295                 300
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305                 310                 315                 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
                325                 330                 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
            340                 345                 350
Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys
        355                 360                 365
Asn Gln Val Lys Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
    370                 375                 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr
385                 390                 395                 400
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser
                405                 410                 415
Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
            420                 425                 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
        435                 440                 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
    450                 455
<210> 19
<211> 217
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3(SP34)抗体FAB轻链
（CD3ε臂-来自WO2008/119565的人源化SP34 VL）
<400> 19
Gln Thr Val Val Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Gly Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Ser Gly
            20                  25                  30
Asn Tyr Pro Asn Trp Val Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Gly
        35                  40                  45
Leu Ile Gly Gly Thr Lys Phe Leu Ala Pro Gly Thr Pro Ala Arg Phe
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Val
65                  70                  75                  80
Gln Pro Glu Asp Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Val Leu Trp Tyr Ser Asn
                85                  90                  95
Arg Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Arg Thr
            100                 105                 110
Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu
        115                 120                 125
Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro
    130                 135                 140
Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr
                165                 170                 175
Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His
            180                 185                 190
Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val
        195                 200                 205
Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 20
<211> 474
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3(SP34)抗体scFv重链
(具有N82aS取代的HER2臂)
<400> 20
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
            20                  25                  30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
            100                 105                 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser
    130                 135                 140
Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala
145                 150                 155                 160
Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
                165                 170                 175
Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly
            180                 185                 190
Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu
        195                 200                 205
Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
    210                 215                 220
Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu
225                 230                 235                 240
Ile Lys Gly Gly Gly Gly Thr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
                245                 250                 255
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
            260                 265                 270
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
        275                 280                 285
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp
    290                 295                 300
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
305                 310                 315                 320
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
                325                 330                 335
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
            340                 345                 350
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly
        355                 360                 365
Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala Thr Phe Pro Pro Ser Arg Glu Glu
    370                 375                 380
Met Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr
385                 390                 395                 400
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn
                405                 410                 415
Asn Tyr Asn Thr Asp Pro Pro Leu Leu Glu Ser Gln Gly Ser Phe Ala
            420                 425                 430
Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
        435                 440                 445
Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr
    450                 455                 460
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465                 470
<210> 21
<211> 455
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3(SP34-Kappa1)抗体FAB重链
（CD3ε臂-人源化SP34 VH1）
<400> 21
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Val Ser Trp Phe
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
        115                 120                 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
    130                 135                 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145                 150                 155                 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
                165                 170                 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
            180                 185                 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
        195                 200                 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
    210                 215                 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
225                 230                 235                 240
Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
                245                 250                 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
            260                 265                 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
        275                 280                 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
    290                 295                 300
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305                 310                 315                 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
                325                 330                 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
            340                 345                 350
Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys
        355                 360                 365
Asn Gln Val Lys Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
    370                 375                 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr
385                 390                 395                 400
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser
                405                 410                 415
Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
            420                 425                 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
        435                 440                 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
    450                 455
<210> 22
<211> 217
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有VL1结构域的SP34人源化轻链
<400> 22
Glu Ala Val Val Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr
            20                  25                  30
Ser Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Gly Gln Ala Phe Arg
        35                  40                  45
Gly Leu Ile Gly Gly Ala Asn Lys Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg
    50                  55                  60
Phe Ser Gly Ser Leu Ser Gly Asp Glu Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ser
65                  70                  75                  80
Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Leu Trp Tyr Ser
                85                  90                  95
Asn Leu Trp Val Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr
            100                 105                 110
Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu
        115                 120                 125
Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro
    130                 135                 140
Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr
                165                 170                 175
Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His
            180                 185                 190
Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val
        195                 200                 205
Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 23
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT HER2/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗HER2 FAB臂）
<400> 23
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
            20                  25                  30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Ser Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
            100                 105                 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
        115                 120                 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
    130                 135                 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145                 150                 155                 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
                165                 170                 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
            180                 185                 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
        195                 200                 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
    210                 215                 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225                 230                 235                 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
                245                 250                 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
            260                 265                 270
Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
        275                 280                 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg
    290                 295                 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305                 310                 315                 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
                325                 330                 335
Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr
            340                 345                 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu
        355                 360                 365
Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
    370                 375                 380
Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met
385                 390                 395                 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp
                405                 410                 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His
            420                 425                 430
Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
        435                 440                 445
Gly
<210> 24
<211> 481
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT抗体scFv重链SP34-Kappa2
（抗CD3ε臂-人源化SP34 VH5/VL32 BT11 LALA）
<400> 24
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Val Ser Tyr Phe
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Val
    130                 135                 140
Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr
145                 150                 155                 160
Leu Ser Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Ala Ala Asn Tyr Ala
                165                 170                 175
Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Gly Gln Ala Phe Arg Gly Leu Ile Gly
            180                 185                 190
Gly Ala Asn Lys Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
        195                 200                 205
Leu Ser Gly Asp Glu Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu
    210                 215                 220
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Phe Tyr Ser Asn Leu Trp Val
225                 230                 235                 240
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Thr Asp
                245                 250                 255
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
            260                 265                 270
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
        275                 280                 285
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
    290                 295                 300
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
305                 310                 315                 320
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
                325                 330                 335
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
            340                 345                 350
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
        355                 360                 365
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala
    370                 375                 380
Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu
385                 390                 395                 400
Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
                405                 410                 415
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Asp Pro Pro Leu
            420                 425                 430
Leu Glu Ser Gln Gly Ser Phe Ala Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp
        435                 440                 445
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
    450                 455                 460
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
465                 470                 475                 480
Gly
<210> 25
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-HB7最佳拟合/CD3抗体FAB重链
（CD38臂-人源化HB-7最佳拟合）
<400> 25
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1               5                   10                  15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ile Ser Tyr
            20                  25                  30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
        35                  40                  45
Gly Val Ile Trp Arg Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Met
    50                  55                  60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu
65                  70                  75                  80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys Ala
                85                  90                  95
Lys Thr Leu Ile Thr Thr Gly Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Val Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
Lys
<210> 26
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化HB-7最佳拟合轻链
<400> 26
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn Arg
            20                  25                  30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Ser Gly Ala Thr Ser Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Lys Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Trp Ser Thr Pro Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 27
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-767/CD3抗体FAB重链（CD38臂-人类克隆767）
<400> 27
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1               5                   10                  15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ile Ser Tyr
            20                  25                  30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
        35                  40                  45
Gly Val Ile Trp Arg Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Met
    50                  55                  60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu
65                  70                  75                  80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys Ala
                85                  90                  95
Lys Thr Leu Ile Thr Thr Gly Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
Lys
<210> 28
<211> 482
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-767/CD3抗体scFv重链
（CD3ε臂-具有G65S取代的人源化OKT3）
<400> 28
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Lys Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Ile Ser Tyr Trp
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Thr Val Val
    130                 135                 140
Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly Thr Val Thr Leu
145                 150                 155                 160
Thr Cys Gly Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Ser Gly Asn Tyr Pro Asn
                165                 170                 175
Trp Val Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Gly Leu Ile Gly Gly
            180                 185                 190
Thr Lys Phe Leu Ala Pro Gly Thr Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu
        195                 200                 205
Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Val Gln Pro Glu Asp
    210                 215                 220
Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Val Leu Trp Tyr Ser Asn Arg Trp Val Phe
225                 230                 235                 240
Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Gly Thr Asp
                245                 250                 255
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
            260                 265                 270
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
        275                 280                 285
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
    290                 295                 300
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
305                 310                 315                 320
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
                325                 330                 335
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
            340                 345                 350
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
        355                 360                 365
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala
    370                 375                 380
Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu
385                 390                 395                 400
Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
                405                 410                 415
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Asp Pro Pro Leu
            420                 425                 430
Leu Glu Ser Gln Gly Ser Phe Ala Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp
        435                 440                 445
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
    450                 455                 460
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
465                 470                 475                 480
Gly Lys
<210> 29
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人767轻链
<400> 29
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1               5                   10                  15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Thr Ser Asn Ile Gly Thr Asn
            20                  25                  30
Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Arg Asn Asp Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65                  70                  75                  80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Arg
                85                  90                  95
Ser Gly Val Tyr Ala Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Arg
            100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
        115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
    130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
                165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
            180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
        195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 30
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-HB7最佳拟合/CD3(SP34)抗体FAB重链
（CD38臂-人源化HB-7最佳拟合）
<400> 30
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1               5                   10                  15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ile Ser Tyr
            20                  25                  30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
        35                  40                  45
Gly Val Ile Trp Arg Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Met
    50                  55                  60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu
65                  70                  75                  80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys Ala
                85                  90                  95
Lys Thr Leu Ile Thr Thr Gly Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
Lys
<210> 31
<211> 482
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEST CD38-HB7最佳拟合/CD3(SP34)抗体scFv重链
（CD3臂–来自WO2008/119565的人源化SP34 VH/VL结构域）
<400> 31
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Lys Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Ile Ser Tyr Trp
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Thr Val Val
    130                 135                 140
Thr Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly Thr Val Thr Leu
145                 150                 155                 160
Thr Cys Gly Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Ser Gly Asn Tyr Pro Asn
                165                 170                 175
Trp Val Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Gly Leu Ile Gly Gly
            180                 185                 190
Thr Lys Phe Leu Ala Pro Gly Thr Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Leu
        195                 200                 205
Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Val Gln Pro Glu Asp
    210                 215                 220
Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Val Leu Trp Tyr Ser Asn Arg Trp Val Phe
225                 230                 235                 240
Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Gly Thr Asp
                245                 250                 255
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
            260                 265                 270
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
        275                 280                 285
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
    290                 295                 300
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
305                 310                 315                 320
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
                325                 330                 335
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
            340                 345                 350
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
        355                 360                 365
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala
    370                 375                 380
Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu
385                 390                 395                 400
Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
                405                 410                 415
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Asp Pro Pro Leu
            420                 425                 430
Leu Glu Ser Gln Gly Ser Phe Ala Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp
        435                 440                 445
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
    450                 455                 460
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
465                 470                 475                 480
Gly Lys
<210> 32
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-9G7最佳拟合/CD3(SP34)抗体FAB重链
（CD38臂-人源化9G7最佳拟合VH）
<400> 32
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Thr Leu Val Lys Pro Thr Gln
1               5                   10                  15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Leu Ser Leu Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Gly Lys Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ala
    50                  55                  60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Thr Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65                  70                  75                  80
Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Ala Arg Ile Glu Leu Gly Arg Ser Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly
            100                 105                 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly Lys
    450
<210> 33
<211> 482
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-9G7最佳拟合/CD3(SP34-Kappa2)抗体scFv重链
（CD3臂-人源化SP34 VH5/VL32）v
<220>
<221> misc_feature
<222> (213)..(213)
<223> Xaa可以为任何天然存在的氨基酸
<400> 33
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Val Ser Trp Phe
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
        115                 120                 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Val
    130                 135                 140
Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr
145                 150                 155                 160
Leu Ser Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser Asn Tyr Ala
                165                 170                 175
Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Gly Gln Ala Phe Arg Gly Leu Ile Gly
            180                 185                 190
Gly Ala Asn Lys Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
        195                 200                 205
Leu Ser Gly Asp Xaa Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu
    210                 215                 220
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn Leu Trp Val
225                 230                 235                 240
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Thr Asp
                245                 250                 255
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
            260                 265                 270
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
        275                 280                 285
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
    290                 295                 300
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
305                 310                 315                 320
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
                325                 330                 335
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
            340                 345                 350
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
        355                 360                 365
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Glu Val Ala
    370                 375                 380
Thr Phe Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Thr Leu
385                 390                 395                 400
Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
                405                 410                 415
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Asp Pro Pro Leu
            420                 425                 430
Leu Glu Ser Gln Gly Ser Phe Ala Leu Ser Ser Arg Leu Arg Val Asp
        435                 440                 445
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
    450                 455                 460
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
465                 470                 475                 480
Gly Lys
<210> 34
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化9G7最佳拟合轻链 （具有F36Y取代的原型轻链）
<400> 34
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Val Ile Thr Ser
            20                  25                  30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Ile Pro Leu
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 35
<211> 454
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-9G7最佳框架/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗CD38 FAB臂）
<400> 35
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Thr Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Val Ser Trp Phe
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
        115                 120                 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
    130                 135                 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145                 150                 155                 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
                165                 170                 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
            180                 185                 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
        195                 200                 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
    210                 215                 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
225                 230                 235                 240
Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
                245                 250                 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
            260                 265                 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp
        275                 280                 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
    290                 295                 300
Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305                 310                 315                 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
                325                 330                 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg
            340                 345                 350
Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
        355                 360                 365
Asn Gln Val Lys Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
    370                 375                 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr
385                 390                 395                 400
Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser
                405                 410                 415
Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser
            420                 425                 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser
        435                 440                 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly
    450
<210> 36
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人源化9G7最佳框架轻链
<400> 36
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ile Thr Ser
            20                  25                  30
Val Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Ile Pro Leu
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 37
<211> 454
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD38-767/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗CD38 FAB臂）
<400> 37
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Lys Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Arg Ile Arg Ser Lys Tyr Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
    50                  55                  60
Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65                  70                  75                  80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
                85                  90                  95
Tyr Cys Val Arg His Gly Asn Phe Gly Asn Ser Tyr Ile Ser Tyr Trp
            100                 105                 110
Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
        115                 120                 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
    130                 135                 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145                 150                 155                 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
                165                 170                 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
            180                 185                 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
        195                 200                 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
    210                 215                 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
225                 230                 235                 240
Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
                245                 250                 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
            260                 265                 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp
        275                 280                 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
    290                 295                 300
Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305                 310                 315                 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
                325                 330                 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg
            340                 345                 350
Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
        355                 360                 365
Asn Gln Val Lys Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
    370                 375                 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr
385                 390                 395                 400
Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser
                405                 410                 415
Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser
            420                 425                 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser
        435                 440                 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly
    450
<210> 38
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT OX40/CD3抗体FAB重链
（具有来自WO2013/008171的人源化抗人OX40 VH结构域的OX40臂）
<400> 38
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1               5                   10                  15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Ile Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Thr Ala
    50                  55                  60
Leu Lys Thr Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65                  70                  75                  80
Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Ala Arg Ile Asp Trp Asp Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
            100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
        115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
    130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
                165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
            180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
        195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
    210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
                245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
            260                 265                 270
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
        275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val
    290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
                325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu
            340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val Cys
        355                 360                 365
Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
    370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser
                405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
            420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
        435                 440                 445
<210> 39
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT OX40/CD3抗体FAB轻链
（具有来自WO2013/008171的人源化抗人OX40 VL结构域的OX40臂）
<400> 39
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Trp Ile Tyr
        35                  40                  45
Ala Thr Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Trp Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 40
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT OX40maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗OX40 maxgraft FAB臂）
<400> 40
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Thr Ala
    50                  55                  60
Leu Lys Ser Gly Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Thr Val
65                  70                  75                  80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Ala Arg Ile Asp Trp Asp Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
            100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
        115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
    130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
                165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
            180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
        195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
    210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
                245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
            260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
        275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val
    290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
                325                 330                 335
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu
            340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val Cys
        355                 360                 365
Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
    370                 375                 380
Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser
                405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
            420                 425                 430
Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 41
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT OX40maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗OX40 maxgraft FAB臂LC）
<400> 41
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
            20                  25                  30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Trp Ile Tyr
        35                  40                  45
Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Trp Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 42
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT OX40mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗OX40 mingraft FAB臂）
<400> 42
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Gly Met Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Val Ser Ala Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser
    50                  55                  60
Val Lys Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
65                  70                  75                  80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Ala Arg Ile Asp Trp Asp Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
            100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
        115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
    130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
                165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
            180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
        195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
    210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
                245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
            260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
        275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val
    290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
                325                 330                 335
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu
            340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val Cys
        355                 360                 365
Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
    370                 375                 380
Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser
                405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
            420                 425                 430
Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 43
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT OX40mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗OX40 mingraft FAB臂LC）
<400> 43
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Leu
            20                  25                  30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Ala Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Trp Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 44
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT OX40/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（抗OX40 1D4 FAB臂BT33 LALA）
<400> 44
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1               5                   10                  15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
            20                  25                  30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Ile Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Thr Ala
    50                  55                  60
Leu Lys Thr Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65                  70                  75                  80
Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Ala Arg Ile Asp Trp Asp Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
            100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
        115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
    130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
                165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
            180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
        195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
    210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
                245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
            260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
        275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val
    290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
                325                 330                 335
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu
            340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val Cys
        355                 360                 365
Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
    370                 375                 380
Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser
                405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
            420                 425                 430
Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 45
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFR/CD3抗体FAB重链（具有鼠爱必妥（Erbitux）
VH结构域的EGFR臂）
<400> 45
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln
1               5                   10                  15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr
            20                  25                  30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
        35                  40                  45
Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Asp Tyr Asn Thr Pro Phe Thr
    50                  55                  60
Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe
65                  70                  75                  80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Ser Asn Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Ala Leu Thr Tyr Tyr Asp Tyr Glu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Val Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
Lys
<210> 46
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFR/CD3抗体FAB轻链（具有鼠爱必妥VL结构域的EGFR臂）
<400> 46
Asp Ile Leu Leu Thr Gln Ser Pro Val Ile Leu Ser Val Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Val Ser Phe Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn
            20                  25                  30
Ile His Trp Tyr Gln Gln Arg Thr Asn Gly Ser Pro Arg Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Lys Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Ser
65                  70                  75                  80
Glu Asp Ile Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn Asn Trp Pro Thr
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 47
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRcetux-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗EGFR西妥昔单抗（cetuximab）
maxgraft FAB臂）
<400> 47
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr
            20                  25                  30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
        35                  40                  45
Gly Ala Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Asp Tyr Asn Thr Pro Phe Thr
    50                  55                  60
Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Ala Leu Thr Tyr Tyr Asp Tyr Glu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 48
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRcetux-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗EGFR西妥昔单抗maxgraft FAB臂）
<400> 48
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn
            20                  25                  30
Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Lys Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn Asn Trp Pro Thr
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 49
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRcetux-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗EGFR西妥昔单抗mingraft FAB臂）
<400> 49
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr
            20                  25                  30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ala Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Ala Leu Thr Tyr Tyr Asp Tyr Glu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 50
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRcetux-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗EGFR西妥昔单抗mingraft FAB臂）
<400> 50
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn
            20                  25                  30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Tyr Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asn Asn Asn Trp Pro Thr
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 51
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRpani-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗EGFR帕尼单抗（panitumumab）
maxgraft FAB臂）
<400> 51
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Gly Ser Val Ser Ser Gly
            20                  25                  30
Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Ile Gly Ala Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser
    50                  55                  60
Val Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Thr Phe
65                  70                  75                  80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Val Arg Asp Arg Val Thr Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 52
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRpani-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗EGFR帕尼单抗maxgraft FAB臂）
<400> 52
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
            20                  25                  30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln His Phe Asp His Leu Pro Leu
                85                  90                  95
Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 53
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRpani-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗EGFR帕尼单抗mingraft FAB臂）
<400> 53
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Gly Ser Val Ser Ser Gly
            20                  25                  30
Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Val Ser Ala Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser
    50                  55                  60
Val Lys Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
65                  70                  75                  80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Val Arg Asp Arg Val Thr Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 54
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRpani-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗EGFR帕尼单抗mingraft FAB臂）
<400> 54
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
            20                  25                  30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Asp His Leu Pro Leu
                85                  90                  95
Ala Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 55
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRcetux/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（抗EGFR西妥昔单抗FAB臂BT33 LALA）
<400> 55
Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln
1               5                   10                  15
Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr
            20                  25                  30
Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
        35                  40                  45
Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Asp Tyr Asn Thr Pro Phe Thr
    50                  55                  60
Ser Arg Leu Ser Ile Asn Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe
65                  70                  75                  80
Lys Met Asn Ser Leu Gln Ser Asn Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Arg Ala Leu Thr Tyr Tyr Asp Tyr Glu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 56
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRpani/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（抗EGFR帕尼单抗FAB臂BT33 LALA）
<400> 56
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1               5                   10                  15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Val Ser Ser Gly
            20                  25                  30
Asp Tyr Tyr Trp Thr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu
        35                  40                  45
Trp Ile Gly His Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Pro Ser
    50                  55                  60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Thr Gln Phe
65                  70                  75                  80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr
                85                  90                  95
Cys Val Arg Asp Arg Val Thr Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly
            100                 105                 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
        115                 120                 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
    130                 135                 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145                 150                 155                 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
                165                 170                 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
            180                 185                 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
        195                 200                 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
    210                 215                 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225                 230                 235                 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
                245                 250                 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
            260                 265                 270
Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
        275                 280                 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val
    290                 295                 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305                 310                 315                 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
                325                 330                 335
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr
            340                 345                 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val
        355                 360                 365
Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
    370                 375                 380
Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu
385                 390                 395                 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys
                405                 410                 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
            420                 425                 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 57
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT EGFRpani/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗EGFR帕尼单抗FAB臂）
<400> 57
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
            20                  25                  30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln His Phe Asp His Leu Pro Leu
                85                  90                  95
Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 58
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD20/CD3抗体FAB重链
<400> 58
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
            20                  25                  30
Asn Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
        35                  40                  45
Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Ser Thr Tyr Tyr Gly Gly Asp Trp Tyr Phe Asn Val Trp Gly
            100                 105                 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly Lys
    450
<210> 59
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD20/CD3抗体FAB轻链
<400> 59
Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Lys Val Thr Met Glu Thr Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser
            20                  25                  30
Tyr Ile His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp
        35                  40                  45
Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Val Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu
65                  70                  75                  80
Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Ser Asn Pro
                85                  90                  95
Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala
            100                 105                 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
        115                 120                 125
Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu
    130                 135                 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
145                 150                 155                 160
Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu
                165                 170                 175
Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val
            180                 185                 190
Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
        195                 200                 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 60
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD20maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗CD20 maxgraft FAB臂）
<400> 60
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
            20                  25                  30
Asn Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
        35                  40                  45
Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Ser Arg Ala Thr Leu Ser Ala Asp Lys Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Ser Thr Tyr Tyr Gly Gly Asp Trp Tyr Phe Asn Val Trp Gly
            100                 105                 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly
    450
<210> 61
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD20maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗CD20 maxgraft FAB臂LC）
<400> 61
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Leu Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser
            20                  25                  30
Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Trp
        35                  40                  45
Ile Tyr Ala Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Ser Asn Pro
                85                  90                  95
Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala
            100                 105                 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
        115                 120                 125
Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu
    130                 135                 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
145                 150                 155                 160
Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu
                165                 170                 175
Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val
            180                 185                 190
Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
        195                 200                 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 62
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD20mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗CD20 mingraft FAB臂）
<400> 62
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
            20                  25                  30
Asn Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Ser Thr Tyr Tyr Gly Gly Asp Trp Tyr Phe Asn Val Trp Gly
            100                 105                 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly
    450
<210> 63
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD20mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗CD20 mingraft FAB臂LC）
<400> 63
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser
            20                  25                  30
Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu
        35                  40                  45
Ile Tyr Ala Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
65                  70                  75                  80
Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Ser Asn Pro
                85                  90                  95
Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala
            100                 105                 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
        115                 120                 125
Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu
    130                 135                 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
145                 150                 155                 160
Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu
                165                 170                 175
Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val
            180                 185                 190
Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
        195                 200                 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 64
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD20/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（抗CD20利妥昔单抗FAB臂BT33 LALA）
<400> 64
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
            20                  25                  30
Asn Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
        35                  40                  45
Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
    50                  55                  60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65                  70                  75                  80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Ser Thr Tyr Tyr Gly Gly Asp Trp Tyr Phe Asn Val Trp Gly
            100                 105                 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly
    450
<210> 65
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD19/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗CD19 FAB臂）
<400> 65
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr
            20                  25                  30
Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
    50                  55                  60
Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
                85                  90                  95
Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
            100                 105                 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
        115                 120                 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
    130                 135                 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145                 150                 155                 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
                165                 170                 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
            180                 185                 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
        195                 200                 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
    210                 215                 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225                 230                 235                 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
                245                 250                 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
            260                 265                 270
Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
        275                 280                 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg
    290                 295                 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305                 310                 315                 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
                325                 330                 335
Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr
            340                 345                 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu
        355                 360                 365
Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
    370                 375                 380
Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met
385                 390                 395                 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp
                405                 410                 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His
            420                 425                 430
Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
        435                 440                 445
Gly
<210> 66
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT CD19/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链（抗CD19 FAB臂）
<400> 66
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr
            20                  25                  30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Ile Lys Leu Leu Ile
        35                  40                  45
Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
    50                  55                  60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65                  70                  75                  80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ala Thr Leu Pro Tyr
                85                  90                  95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
            100                 105                 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
        115                 120                 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
    130                 135                 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145                 150                 155                 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
                165                 170                 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
            180                 185                 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
        195                 200                 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 67
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEomali-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗IgE奥马珠单抗（omalizumab）
maxgraft FAB臂）
<400> 67
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
            20                  25                  30
Tyr Ser Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
        35                  40                  45
Val Ala Ser Ile Thr Tyr Asp Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Phe Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Gly Ser His Tyr Phe Gly His Trp His Phe Ala Val Trp Gly
            100                 105                 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly
    450
<210> 68
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEomali-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗IgE奥马珠单抗maxgraft FAB臂）
<400> 68
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
            20                  25                  30
Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
        35                  40                  45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser
    50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser His
                85                  90                  95
Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
            100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
        115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
    130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
                165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
            180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
        195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 69
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> EAT IgEomali-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗IgE奥马珠单抗mingraft FAB臂）
<400> 69
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
            20                  25                  30
Tyr Ser Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
        35                  40                  45
Val Ser Ala Ile Thr Tyr Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Gly Ser His Tyr Phe Gly His Trp His Phe Ala Val Trp Gly
            100                 105                 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly
    450
<210> 70
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEomali-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗IgE奥马珠单抗mingraft FAB臂）
<400> 70
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
            20                  25                  30
Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
        35                  40                  45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
    50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser His
                85                  90                  95
Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
            100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
        115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
    130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
                165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
            180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
        195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 71
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEbsw17-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体 FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗IgE奥马珠单抗maxgraft FAB臂）
<400> 71
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Asn Ile Ile Tyr Tyr Pro Asp Asn Val Lys
    50                  55                  60
Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Ser Thr Tyr Gly Gly Phe Asp His Trp Gly Gln Gly Thr
            100                 105                 110
Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
        115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
    130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
                165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
            180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
        195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
    210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
                245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
            260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
        275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val
    290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
                325                 330                 335
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu
            340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val Cys
        355                 360                 365
Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
    370                 375                 380
Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser
                405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
            420                 425                 430
Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 72
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEbsw17-maxgraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗IgE奥马珠单抗maxgraft FAB臂）
<400> 72
Asp Leu Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Thr Phe Leu
            20                  25                  30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Trp Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Met Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Trp Ser Gly Asn Pro Leu Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 73
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEbsw17-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（具有G65S取代BT33 LALA的抗IgE奥马珠单抗mingraft FAB臂）
<400> 73
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ser Ala Ile Ser Ser Gly Asn Ile Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
    50                  55                  60
Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Ser Thr Tyr Gly Gly Phe Asp His Trp Gly Gln Gly Thr
            100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
        115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
    130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
                165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
            180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
        195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
    210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
                245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
            260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
        275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val
    290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
                325                 330                 335
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu
            340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val Cys
        355                 360                 365
Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
    370                 375                 380
Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser
                405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
            420                 425                 430
Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 74
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEbsw17-mingraft/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗IgE奥马珠单抗mingraft FAB臂）
<400> 74
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Thr Phe Leu
            20                  25                  30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu
65                  70                  75                  80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Trp Ser Gly Asn Pro Leu Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210
<210> 75
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEomali/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（抗IgE奥马珠单抗FAB臂BT33 LALA）
<400> 75
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly
            20                  25                  30
Tyr Ser Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
        35                  40                  45
Val Ala Ser Ile Thr Tyr Asp Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
    50                  55                  60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Phe Tyr
65                  70                  75                  80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
                85                  90                  95
Ala Arg Gly Ser His Tyr Phe Gly His Trp His Phe Ala Val Trp Gly
            100                 105                 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
        115                 120                 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145                 150                 155                 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
                165                 170                 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
            180                 185                 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
        195                 200                 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
    210                 215                 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225                 230                 235                 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
                245                 250                 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
            260                 265                 270
Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
        275                 280                 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe
    290                 295                 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305                 310                 315                 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
                325                 330                 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val
            340                 345                 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys
        355                 360                 365
Leu Val Cys Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
    370                 375                 380
Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro
385                 390                 395                 400
Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val
                405                 410                 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met
            420                 425                 430
His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
        435                 440                 445
Pro Gly
    450
<210> 76
<211> 218
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEomali/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗IgE奥马珠单抗FAB臂）
<400> 76
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1               5                   10                  15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
            20                  25                  30
Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
        35                  40                  45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser
    50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser His
                85                  90                  95
Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
            100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
        115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
    130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
                165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
            180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
        195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
    210                 215
<210> 77
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEbsw17/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB重链
（抗IgE Bsw17 FAB臂BT33 LALA）
<400> 77
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Phe Val Lys Pro Gly Gly
1               5                   10                  15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
            20                  25                  30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
        35                  40                  45
Ala Ser Ile Ser Ser Gly Asn Ile Ile Tyr Tyr Pro Asp Asn Val Lys
    50                  55                  60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Val Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65                  70                  75                  80
Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Thr
                85                  90                  95
Arg Gly Arg Ser Thr Tyr Gly Gly Phe Asp His Trp Gly Gln Gly Thr
            100                 105                 110
Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
        115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
    130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
                165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
            180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
        195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
    210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
                245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro
            260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
        275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val
    290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
                325                 330                 335
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Ala Val Tyr Thr Leu
            340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Lys Leu Val Cys
        355                 360                 365
Leu Val Thr Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
    370                 375                 380
Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Ser Leu Val Ser Trp Leu Asn Val Asp Lys Ser
                405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
            420                 425                 430
Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
        435                 440                 445
<210> 78
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> BEAT IgEbsw17/CD3(SP34-Kappa2)抗体FAB轻链
（抗IgE Bsw17 FAB臂）
<400> 78
Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Thr Phe Ile
            20                  25                  30
His Trp Tyr Arg Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Gly Trp Ile Tyr
        35                  40                  45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
    50                  55                  60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Thr Met Glu Ala Glu
65                  70                  75                  80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Trp Ser Gly Asn Pro Leu Thr
                85                  90                  95
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
            100                 105                 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
        115                 120                 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
    130                 135                 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145                 150                 155                 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
                165                 170                 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
            180                 185                 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
        195                 200                 205
Asn Arg Gly Glu Cys
    210

Claims (18)

1.一种用于稀释药物产品的稀释剂，其中所述稀释剂包括缓冲剂和一种或多种稳定剂或张力剂，其中所述药物产品包括多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段，其包括第一工程化CH3结构域和第二工程化CH3结构域，并且其中在用所述稀释剂稀释所述药物产品后，获得准备通过输注施用于患者的药物产品，其特征在于所述稀释剂使得通过ELISA测量的输注系统中抗体材料的损失小于约30％。
2.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中所述稀释剂具有介于约5.5与约7.5之间的pH。
3.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中所述缓冲剂选自包括组氨酸、Tris、柠檬酸盐、磷酸盐和柠檬酸盐磷酸盐的组，并且其中所述缓冲剂以等于或小于30mM的浓度存在于所述稀释剂中。
4.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中所述稳定剂或张力剂选自包括如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯80的多元醇、如组氨酸、精氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、赖氨酸的氨基酸、如氯化钠的盐的组。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的稀释剂，其中所述缓冲剂选自包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的组氨酸、Tris和磷酸盐的组，并且所述稳定剂或张力剂包括以约100mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸，以及以约0.05％(w/v)的浓度或约0.004％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且其中所述稀释剂具有约7或约7.4的pH。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的稀释剂，其中所述缓冲剂是以约1.1mM的浓度存在于所述稀释剂中的柠檬酸盐，并且所述稳定剂或张力剂包括以约62mM的浓度存在于所述稀释剂中的赖氨酸-HCl、以约154mM的浓度存在于所述稀释剂中的氯化钠，以及以约0.004％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且其中所述稀释剂具有约6.6至约7的pH。
7.根据权利要求1至4中任一项所述的稀释剂，其中所述稀释剂包括缓冲剂，所述缓冲剂选自包括以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的组氨酸、磷酸盐、柠檬酸盐和柠檬酸盐-磷酸盐的组，并且所述稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且其中所述稀释剂具有选自包括约6、约6.5和约7的组的pH。
8.根据权利要求7所述的稀释剂，其中所述缓冲剂选自包括磷酸盐、柠檬酸盐和柠檬酸盐-磷酸盐的组，其以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中，并且所述稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且其中所述稀释剂具有约6.5或约7的pH，并且其在约5℃和/或约25℃和/或40℃下稳定至少3个月。
9.根据权利要求7所述的稀释剂，其中所述缓冲剂是磷酸盐或柠檬酸盐-磷酸盐，其以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中，并且所述稳定剂或张力剂包括以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl或赖氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且其中所述稀释剂具有约6或约6.5的pH，并且其在约5℃下稳定至少29个月，在约25℃下稳定至少12个月，并且在约40℃下稳定至少3个月。
10.根据权利要求9所述的稀释剂，其中所述缓冲剂是以约25mM的浓度存在于所述稀释剂中的磷酸盐，所述稳定剂或张力剂是以约500mM的浓度存在于所述稀释剂中的精氨酸-HCl，以及以约0.04％(w/v)的浓度存在于所述稀释剂中的聚山梨醇酯80，并且其中所述稀释剂具有约6的pH，并且其在约5℃下稳定至少29个月，在约25℃下稳定至少12个月，并且在约40℃下稳定至少3个月。
11.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中选自包括盐水溶液、葡萄糖溶液以及盐水和葡萄糖溶液的组合的组的等渗溶液与所述稀释剂以约1:10的比率混合。
12.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段以约5ng/mL与约20ng/mL之间的浓度存在于准备施用的所述药物产品中。
13.根据权利要求12所述的稀释剂，其中所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段以约10ng/mL的浓度存在于准备施用的所述药物产品中。
14.根据权利要求1所述的稀释剂，其中所述第一工程化CH3结构域包括由以下各项组成的组的取代：S20K、T22V、K26T、K79Y、F85.1S、Y86V、K88W、T90N，并且所述第二工程化CH3结构域包括选自由以下各项组成的组的取代：Q3E、Y5A、L7F、S20T、T22V、K26T、T81D、V84L、D84.2E、F85.1A、Y86S、K88R、T90R，并且其中所述多特异性异源二聚体免疫球蛋白或异源二聚体片段通过所述第一工程化CH3结构域和第二工程化CH3结构域异源二聚化。
15.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的第一靶标结合，与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的不同于所述第一靶标的第二靶标结合，以及与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的不同于所述第一靶标或不同于所述第一靶标和所述第二靶标的第三靶标结合。
16.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段与选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的第一靶标结合，以及选自包括CD3、HER2、CD38、EGFR、CD20、OX40、CD19、CD47、IL1RAP、BMCA、NKp30和CD16的组的不同于所述第一靶标的第二靶标结合。
17.根据前述权利要求中任一项所述的稀释剂，其中所述多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段是双特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段，其包括SEQIDNO:1，2和3的氨基酸序列或SEQ ID NO:4，5和6的氨基酸序列，或包括SEQ ID NO:7，8和9的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:1至9的氨基酸序列具有至少80％同源性的氨基酸序列。
18.一种准备施用于患者以用于治疗癌症的药物产品，其通过包括以下各者的步骤获得：
(i)纯化多特异性异源二聚体抗体或其异源二聚体抗体片段以获得药物物质；
(ii)向所述药物物质中加入赋形剂以获得稳定的药物制剂，其中所述稳定的药物制剂可为液体，或冻干的或重构的；
(iii)向所述稳定的药物制剂中加入根据权利要求2至11中任一项所述的稀释剂；
其中准备施用的所述药物产品通过输注施用于患者，并且所述稀释剂使得通过ELISA测量的输注系统中抗体材料的损失小于约30％。
CN202180047161.4A 2020-06-12 2021-06-14 抗体制剂稀释剂 Pending CN115996704A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP20179607 2020-06-12
EP20179607.5 2020-06-12
PCT/EP2021/065933 WO2021250275A1 (en) 2020-06-12 2021-06-14 Antibody formulation diluent

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115996704A true CN115996704A (zh) 2023-04-21

Family

ID=71094109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180047161.4A Pending CN115996704A (zh) 2020-06-12 2021-06-14 抗体制剂稀释剂

Country Status (10)

Country Link
US (1) US20240092903A1 (zh)
EP (1) EP4164594A1 (zh)
JP (1) JP2023529870A (zh)
KR (1) KR20230024972A (zh)
CN (1) CN115996704A (zh)
AU (1) AU2021288637A1 (zh)
CA (1) CA3180138A1 (zh)
IL (1) IL298731A (zh)
MX (1) MX2022015509A (zh)
WO (1) WO2021250275A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201603244VA (en) * 2013-11-04 2016-05-30 Glenmark Pharmaceuticals Sa Production of t cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE199392T1 (de) 1992-12-04 2001-03-15 Medical Res Council Multivalente und multispezifische bindungsproteine, deren herstellung und verwendung
PT1516628E (pt) * 1995-07-27 2013-09-24 Genentech Inc Formulação de proteína liofilizada isotónica estável
BR112013023918A2 (pt) 2011-03-25 2016-12-13 Glenmark Pharmaceuticals Sa imunoglobulina hetero-dimérica ou fragmento hetero-dimérico da mesma, método para produzir uma imunoglobulina hetero-dimérica ou fragmento hetero-dimérico da mesma, método para construir uma interface proteína-proteína de um domínio de uma proteína de múltiplos domínios e uso de um domínio doador de um primeiro e de um segundo membro de uma super-família de imunoglobulina de ocorrência natural
US9856323B2 (en) * 2012-04-26 2018-01-02 Bioatla, Llc Anti-CD22 antibodies
US9209965B2 (en) 2014-01-14 2015-12-08 Microsemi Semiconductor Ulc Network interface with clock recovery module on line card
AR111773A1 (es) 2017-05-05 2019-08-21 Amgen Inc Composición farmacéutica que comprende constructos de anticuerpos biespecíficos para almacenamiento y administración
US20210087267A1 (en) * 2017-12-20 2021-03-25 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Liquid formulations of anti-cd200 antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
EP4164594A1 (en) 2023-04-19
US20240092903A1 (en) 2024-03-21
MX2022015509A (es) 2023-02-23
AU2021288637A1 (en) 2023-01-19
KR20230024972A (ko) 2023-02-21
WO2021250275A1 (en) 2021-12-16
CA3180138A1 (en) 2021-12-16
IL298731A (en) 2023-02-01
JP2023529870A (ja) 2023-07-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7382232B2 (ja) 抗ｌａｇ３抗体の製剤および抗ｌａｇ３抗体と抗ｐｄ－１抗体との共製剤
JP6473845B2 (ja) 抗α４β７抗体のための製剤
JP6467457B2 (ja) 抗α４β７抗体のための製剤
CN111183155A (zh) 抗cd47抗体及其用途
KR20190142393A (ko) 항-ctla4 항체 단독의, 및 프로그램화된 사멸 수용체 1 (pd-1) 항체와 조합된 항-ctla4 항체의 안정한 제제 및 그의 사용 방법
JP7503056B2 (ja) 抗ｌａｇ３抗体および抗ｐｄ－１抗体の共－製剤
JP7503056B6 (ja) 抗ｌａｇ３抗体および抗ｐｄ－１抗体の共－製剤
AU2007215012A1 (en) Antibody formulation
US20210253692A1 (en) High Concentration Liquid Antibody Formulations
CN115996704A (zh) 抗体制剂稀释剂
CN113194925A (zh) 抗体制剂
JP2024519579A (ja) 抗ｔｉｇｉｔ抗体及びその使用の方法
CN113842456B (zh) 一种抗人4-1bb的单克隆抗体制剂及其用途
US20240228600A1 (en) Anti-sema3a antibodies and their uses for treating a thrombotic disease of the retina
JP2024516843A (ja) 抗ｔｉｇｉｔ抗体、抗ｃｄ９６抗体、及びそれらの使用の方法
CA3195707A1 (en) Anti-sema3a antibodies and their uses for treating a thrombotic disease of the retina
KR20220044286A (ko) 항 pd-1/her2 이중특이성 항체를 포함하는 제제, 이의 제조 방법 및 용도
CN117222429A (zh) 包括针对tnf样配体1a（tl1a）的人源化抗体的组合物以及其用途
EA034583B1 (ru) ПРИМЕНЕНИЯ АНТИ-α4β7 АНТИТЕЛА

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination