CN115991732A - 一种具有抗炎作用的珍珠贝活性肽及其应用 - Google Patents
一种具有抗炎作用的珍珠贝活性肽及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有抗炎作用的珍珠贝活性肽及其应用，涉及活性肽技术领域。该珍珠贝活性肽的氨基酸序列为FPGA。本发明提供的具有抗炎作用的珍珠贝活性肽可以调控细胞炎症介质的释放，具体地，能够降低NO的释放量，减少促炎细胞因子的分泌，同时还能促进抗炎细胞因子的分泌，表现出优秀的抗炎活性，能够应用于药物、功能性食品或化妆品制备中。
Description
技术领域
本发明属于活性肽技术领域，更具体地，涉及一种具有抗炎作用的珍珠贝活性肽及其应用。
背景技术
炎症就是平时所说的“发炎”，是生物组织受到某种刺激如外伤、感染等损伤因子的刺激所发生的一种以防御反应为主的基本病理过程。现有常用的抗炎药物比如非甾体抗炎药在发挥治疗效果的同时，也会产生一些与用药目的无关的有害反应，即药物不良反应，寻找具有抗炎效果且不良反应少的活性成分具有重要意义。
珍珠作为药食两用天然原料资源，具有调节内分泌、清热解毒和促进皮肤修复等功效，从珍珠中水解得到的基质蛋白同样具有抗氧化、抗炎和抗凋亡等多种功效。但珍珠作为一种珍贵药材，加工工艺复杂，产量较低，价格昂贵。马氏珠母贝又称马氏珍珠贝，产量高，贝肉营养丰富，含有丰富的蛋白质，但取珠后的贝肉等副产物综合利用率低，大部分被丢弃，造成资源浪费和环境污染。
现有技术公开了一种新型海洋贝类小分子免疫活性肽的制备方法和应用，该专利指出对海洋贝类(包括珍珠贝)进行酶解后得到的多肽混合物具有抗氧化等活性，但其未从肽序列的层面对活性成分进行研究，更未见其关于源于珍珠贝的活性肽在抗炎活性方面的研究。
发明内容
本发明的目的在于克服现有对珍珠贝肉的抗炎活性成分的研究不足的缺陷，提供一种具有抗炎作用的珍珠贝活性肽。该活性肽能够抑制环氧合酶-2的活性，调控细胞分泌炎症介质，包括降低NO的释放量，减少促炎细胞因子的分泌，同时促进抗炎细胞因子分泌，具有抗炎作用，能够用于制备抗炎添加剂，广泛应用于药物、功能性食品或化妆品领域。
本发明的另一目的是提供一种上述珍珠贝活性肽在制备抗炎添加剂中的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种具有抗炎作用的珍珠贝活性肽，所述活性肽具有如SEQ ID NO：1所示序列。
本发明的发明人从珍珠贝中提取到具有抗炎作用的珍珠贝活性肽，其序列为：FPGA(Phe-Pro-Gly-Ala)，分子量为390.1903Da，该珍珠贝活性肽能够占据环氧合酶-2的关键活性位点，抑制环氧合酶-2的活性，还可以调控细胞分泌炎症介质，包括降低NO的释放量、减少促炎细胞因子的分泌以及促进抗炎细胞因子分泌，具有抗炎作用，能够用于制备抗炎添加剂，广泛应用于药物、功能性食品或化妆品领域。
本发明具体保护一种上述珍珠贝活性肽在制备抗炎添加剂中的应用。
具体地，所述抗炎添加剂用于制备功能性食品。
具体地，所述抗炎添加剂用于制备化妆品。
本发明提供的活性肽来源于珍珠贝肉，能够调节细胞因子，具有抗炎功效，用于化妆品中能够起到抗炎作用。
具体地，所述抗炎添加剂用于制备药物。
具体地，所述药物为抑制环氧合酶-2活性的药物。
前列腺素内过氧化物合酶，通常称为环氧合酶(COX)，主要由环氧合酶-1和环氧合酶-2亚型组成，是诱导前列腺素(PGs)产生的生物合成途径及调控炎症反应的关键酶，而前列腺素在炎症中发挥着重要的作用。通过抑制环氧化酶活性，尤其是环氧合酶-2的活性，可以减少炎症通路下游中的促炎细胞因子表达，干扰炎症疾病的发病机制，并能有效减轻炎症疾病症状。
环氧合酶-2共有3个重要活性区域，第一个区域是疏水口袋，由Tyr 385、Trp 387、Phe 518、Ala 201、Tyr 248和Leu 352氨基酸残基组成；第二个区域是活性位点的入口，由亲水氨基酸残基Arg 120、Glu 524、Tyr 355组成；第三个区域是由His 90、Arg 513和Val523组成的侧面口袋。与环氧合酶-2蛋白A链(环氧合酶-2活性位点的主要区域)相关的氨基酸残基His 90、Arg 120、Gln 192、Val 349、Leu 352、Ser 353、Tyr 355、Leu 359、Tyr 385、Trp 387、Arg 513、Ala516、Phe518、Val523 523、Gly 526、Ala 527和Leu 531都参与了蛋白-配体互补活性。本发明提供的珍珠贝活性肽(FPGA)能够与环氧合酶-2蛋白质的残基Thr206，His 207，Tyr 385形成氢键，与Val 291和Leu 294形成疏水键，其中，Tyr 385为环氧合酶-2的疏水口袋中的特征氨基酸残基，因此，本发明所述珍珠贝活性肽能够占据环氧合酶-2活性位点的关键区域，抑制环氧合酶-2的活性，从而抑制炎症反应。
具体地，所述药物为降低细胞NO释放量的药物。
NO是一种重要的细胞内和细胞间信号分子，参与调节多种生理和病理过程，在正常状态下，NO可以调节神经传递、血管舒张和免疫反应等生理功能，然而细胞内过量的NO不利于缓解炎症反应，且会损伤细胞，导致细胞凋亡，本发明所述珍珠贝活性肽可以通过控制细胞分泌NO，降低NO的水平，抑制炎症反应。
具体地，所述药物为减少促炎因子分泌的药物。
具体地，所述药物为促进抗炎因子分泌的药物。
细胞炎症因子是免疫系统中重要的炎症介质，根据它们在炎症反应中起到的作用可分为促炎性因子(TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8、IL-1β和IFN-γ)以及抗炎性因子(IL-4、IL-10和TGBβ)，本发明所述珍珠贝活性肽可以显著减少细胞促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌，同时提高抗炎细胞因子IL-10的分泌。
具体地，所述抗炎添加剂在功能性食品、化妆品或药物中的添加量为0.0625～2.0mg/mL。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明提供的具有抗炎作用的珍珠贝活性肽能够占据环氧合酶-2的关键活性位点，抑制环氧合酶-2的活性，还可以调控细胞分泌炎症介质，包括降低NO的释放量，减少促炎细胞因子的分泌，同时促进抗炎细胞因子分泌，具有抗炎作用，能够用于制备抗炎添加剂，广泛应用于药物、功能性食品或化妆品领域。
附图说明
图1为珍珠贝肉酶解物、＜3kDa组分和≥3kDa组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7 NO释放量的影响图；
图2为RP-HPLC分离纯化<3kDa组分在280nm的吸收波长谱图；
图3为组分F1、F2和F3对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞细胞存活率的影响图；
图4为组分F1、F2和F3对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞NO释放量的影响图；
图5为组分F1在280nm的吸收波长谱图。
图6为组分F1的总电子流图。
图7为环氧合酶-2与珍珠贝活性肽相互作用的分子对接模型3D图(A)和2D图(B)。
图8为珍珠贝活性肽对RAW264.7细胞存活率的影响图。
图9为不同浓度的珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞NO释放量的影响图。
图10为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞TNF-α因子释放量的影响图。
图11为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞IL-6因子释放量的影响图。
图12为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞IL-1β因子释放量的影响图。
图13为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞IL-10因子释放量的影响图。
具体实施方式
下面结合实施例进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下例实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域常规条件或按照制造厂商建议的条件；所使用的原料、试剂等，如无特殊说明，均为可从常规市场等商业途径得到的原料和试剂。本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
本发明各实施例的细胞抗炎活性评价具体过程为：
细胞培养：小鼠RAW264.7巨噬细胞(购自中科院上海细胞所)使用含10％FBS(购自Gibco公司，56℃下灭活30min)的DMEM培养基(购自Gibco公司)置于5％ CO2、37℃细胞培养箱中培养，待细胞生长至对数生长期进行传代。当细胞铺板率大于培养瓶面积的80％时，吸尽原培养基，移液枪吸取培养液2mL吹打细胞至完全脱落，细胞计数，根据计数结果调整细胞悬液浓度，接种至孔板中，置于恒温培养箱中培养。
细胞毒性试验：使用小鼠RAW264.7巨噬细胞评价样品的细胞毒性。将RAW264.7巨噬细胞浓度调整至1×104个/mL，按每孔100μL将细胞接种于96孔板中(每组设置6个复孔)孵育过夜，弃去旧培养基，设置对照组和样品组，样品组加入含样品的完全培养基100μL，空白组加入等量的完全培养基，继续培养24h后，弃去旧培养基，每孔加入100μL MTT溶液(购自Sigma公司，0.5mg/mL)并在培养箱中孵育4h，最后弃去MTT溶液，每孔加入150μL的DMSO(购自Sigma公司)溶解固体物质，震荡10min使结晶充分溶解，使用酶标仪测定490nm下每孔的吸光值；细胞活力以对照组的百分比表示，与对照组相比，降低细胞活力超过10％的样品浓度视为具有细胞毒性。
NO释放量的测定：将RAW264.7巨噬细胞浓度调整至5×104个/mL，按每孔500μL接种于24孔板中(每组设置3个复孔)。在37℃，5％ CO2条件下孵育过夜，阳性对照组选择地塞米松(DEX，1μg/mL，购自Sigma公司)作为治疗对照，样品组分别加入500μL不同浓度的样品处理，空白组和模型组加入等量的完全培养基(细胞培养的培养基)，继续培养24h后，吸净上清，模型组、样品组和阳性对照组加入500μL LPS(购自Sigma公司，1μg/mL)刺激细胞24h，空白组加入等量的完全培养基。收集细胞培养上清液，采用Griess法测量培养上清液中的NO含量(NO检测试剂盒购自碧云天生物技术)，即为NO释放量。
实施例1珍珠贝肉的酶解、超滤及分离纯化
(1)酶解：利用中性蛋白酶对珍珠贝肉进行酶解，具体过程如下：将珍珠贝肉(马氏珠母珍珠贝肉，购自北海黑珍珠海洋生物科技有限公司)洗净沥干，打碎成珍珠贝肉匀浆，按料液比(质量比)1:1加入去离子水，调整pH为7.0；按酶底比0.31％加入中性蛋白酶(10U/g)(购自广西南宁庞波生物工程有限公司)，在46.3℃下水浴酶解84min；90℃水浴灭酶10min后冷却至室温，4000r/min离心10min，收集上清液，冷冻干燥得到珍珠贝肉酶解物，并储存在-20℃用于后续分析。
(2)超滤：利用截留分子量为3kDa的超滤管对珍珠贝肉酶解物进行分离，在4000r/min下离心30min，收集分子量＜3kDa组分和≥3kDa组分，真空冷冻干燥后于-20℃保存。
将珍珠贝肉酶解物、＜3kDa组分和≥3kDa组分作为样品，分别进行细胞抗炎活性评价。
珍珠贝肉酶解物、＜3kDa组分和≥3kDa组分的细胞抗炎活性评价结果如图1所示，图1中，###表示与空白组相比P<0.001；*和***分别表示与模型组相比P<0.05、P<0.01和P<0.001。从图1可知，对比模型组，阳性对照组(DEX，1μg/ml)NO释放量下降44.84％；在2.0mg/mL浓度下，珍珠贝肉酶解物、≥3kDa组分和<3kDa组分均对NO的释放有显著的抑制作用(P<0.001)，其NO释放量分别下降了70.00±0.69％，62.60±1.98％，74.08±1.83％(P<0.001)。可知，<3kDa组分具有最强的抗炎活性，对其下一步分离纯化。
(3)分离纯化：利用高效液相色谱分离(RP-HPLC)对<3kDa组分进行分离纯化，具体过程如下：
首先将<3kDa的组分通过0.45μm滤膜筛滤后，使用C18自组装色谱柱(10μm，10mm×250mm)制备型反相高效液相色谱分离；其中，色谱条件为：流动相A：0.1％三氟乙酸水溶液；流动相B：0.1％三氟乙酸甲醇溶液；进样量：3mL；洗脱流速为10mL/min；检测波长：280nm；洗脱程序如下表1：
表1.洗脱程序
| 时间 | 流动相 |
| 0-45min | 5～10％流动相B |
| 45-65min | 10～20％流动相B |
| 65-75min | 20～50％流动相B |
| 75-80min | 50～95％流动相B |
| 80-85min | 95～5％流动相B |
收集各洗脱峰，使用旋转蒸发浓缩，得分组分F1、F2和F3，高效液相色谱图如图2所示，通过浓缩冷冻干燥后进行细胞抗炎活性评价。将组分F1、F2和F3作为样品，按照前述的方法对组分F1、F2和F3进行细胞抗炎活性评价，结果如图3和图4所示。
图3为组分F1、F2和F3对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞细胞存活率的影响图；图4为组分F1、F2和F3对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞NO释放量的影响图；其中，###表示与空白组相比P<0.001；**和***分别表示与模型组相比P<0.01和P<0.001；从图3可知，组分F1、F2和F3在0～2.0mg/mL内对RAW264.7巨噬细胞无毒副作用。从图4可知，模型组由LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞NO释放量显著增加(P<0.001)，随组分F1、F2和F3浓度逐渐提高，它们对RAW264.7巨噬细胞NO释放的抑制作用逐渐增强。对比模型组RAW264.7细胞的NO释放量，在2.0mg/mL的浓度下，组分F1、F2和F3处理组RAW264.7巨噬细胞NO释放量分别下降58.98％、50.76％和53.45％(P<0.001)。可知，组分F1对RAW264.7细胞分泌NO的抑制作用最强，选择组分F1进一步分离纯化。
将组分F1进行二次分离，其中，色谱条件为：C18柱(5μm，4.6mm×200mm)；流动相A：0.1％三氟乙酸水溶液；流动相B：0.1％三氟乙酸甲醇溶液；进样量：1mL；洗脱流速：10mL/min；检测波长：280nm；洗脱程序如下表2：
表2.洗脱程序
| 时间 | 流动相 |
| 0-45min | 5～10％流动相B |
| 45-50min | 10～20％流动相B |
| 50-55min | 20～95％流动相B |
| 55-70min | 95～5％流动相B |
F1组分进一步分离纯化仅有一个吸收峰，如图5所示，因此将组分F1用于后续肽段组成和氨基酸序列分析。
实施例2珍珠贝活性肽的结构鉴定、分子对接筛选和合成
2.1结构鉴定：将组分F1溶于0.1％甲酸的去离子水中，在C18除盐柱(AcclaimPepMap 100，75μm×2cm)中进行脱盐处理后，通过在线纳喷离子源的LC-MS/MS分析样品的肽段组成和氨基酸序列。色谱条件：C18色谱柱(Acclaim PepMap，75μm×25cm)；柱流量控制在300nL/min，柱温为40℃，进样量：3μL；电喷雾电压2kV。流动相A为0.1％甲酸水溶液、流动相B为含0.1％甲酸的乙腈溶液；洗脱程序：0～3min，2～6％流动相B；3～42min，6～20％流动相B；42～47min，20～35％流动相B；47～48min，35～100％流动相B；48～60min，100％流动相B。质谱仪在数据依赖采集模式下运行，自动在MS和MS/MS采集间切换，质谱参数设置如下：①一级质谱扫描范围(m/z)：350～1800；分辨率：70000；自动增益控制目标：3e6；最大进样时间：50ms；扫描电荷：2-6；②HCD-MS/MS，分辨率：17500；隔离窗口：2m/z；自动增益控制目标：1e5；最大进样时间：45ms；碰撞能量：28；动态排除时间：30s。串联质谱图使用De Novo软件(PEAKS Studio X+)进行分析。通过PEAKS DB对uniprot-Mytilus coruscus数据库搜库，设置None酶解。搜库参数碎片离子质量容许误差：0.02Da；母离子质量容许误差：7ppm；最大漏切数：2；可变修饰：Oxidation(M)15.99，Deamidation(NQ)0.98；蛋白卡值为：-10lgP≥0，至少含1unique peptide；肽段卡值：-10lgP≥15。鉴定结果如图6所示，共从组分F1中鉴定出260多种不同分子质量的肽段，鉴定出的肽段均为3～10个氨基酸残基的短肽，分子量介于349.167～1102.58之间。
2.2分子对接筛选：首先对环氧合酶-2(COX-2，PDB ID：1CX2)的3D结构进行预处理和优化，输出为mol2格式文件以进行后续分子对接，其中，环氧合酶-2的3D结构由蛋白质结构数据库(The Protein Data Bank，PDB)(https://www1.rcsb.org/)下载；使用PyMol软件去除受体蛋白分子中的重复链、水分子和原始配体，保存为PDB格式文件；然后使用Autodock Tools 1.5.6软件给受体蛋白添加极性氢原子、计算gasteiger电荷和设置旋转键，保存为PDBQT格式文件；配体的2D结构由Marvin Sketch软件绘制，并针对能量最小化进行优化，构建3D结构，保存为PDBQT格式文件；采用AutoDock Vina 1.1.2对上述受体和配体进行分子模拟柔性对接，对接结果以结合能值表示，对接参数如下：将受体蛋白中的以下氨基酸残基设置为可灵活变换构象，His 90、Arg 120、Gln 192、Val 349、Leu 352、Ser 353、Tyr 355、Tyr 385、Trp 387、Arg 513、Ala 516、Phe 518、Val 523、Gly 526、Ala 527、Leu351。网格框的中心位置设置为：center_x＝28.684，center_y＝28.603，center_z＝9.285，盒子大小为40×40×40，其他参数均采用默认值；最后，使用Discovery Studio 4.5软件对分子对接结果进行可视化分析。
通过设定置信度(-10lgP)≥36.0，共筛选出70个肽段进行分子模拟对接试验，研究它们与环氧合酶-2相互作用的影响，每个肽段与环氧合酶-2受体蛋白进行分子对接模拟分析，每个肽段重复10次，结合能结果取其平均值，选择分子对接中与环氧合酶-2受体蛋白结合能量较低的肽段进一步分析其抗炎机制。
其中，珍珠贝活性肽(FPGA，Phe-Pro-Gly-Ala)具有较低的结合能，具体如表3所示，表明该珍珠贝活性肽能够自发地、稳定地与环氧合酶-2受体蛋白中的关键活性位点结合。
表3.珍珠贝活性肽与环氧合酶-2受体蛋白分子模拟对接结果
表4.基于分子对接模拟的环氧合酶-2与活性肽的结合能和相互作用位点
图7为环氧合酶-2与珍珠贝活性肽相互作用的分子对接模型3D图(A)和2D图(B)。从图7和表4可知，珍珠贝活性肽(FPGA)可以与环氧合酶-2蛋白质的残基Thr 206，His 207，Tyr 385形成氢键，与Val 291和Leu 294形成疏水键，其中，珍珠贝活性肽与环氧合酶-2的疏水口袋中的特征氨基酸残基Tyr 385形成氢键。可知，珍珠贝活性肽与环氧合酶-2活性位点内不同的氨基酸残基结合，在不同活性区域内相互作用可以影响环氧合酶-2蛋白的活性，抑制其催化活性，并诱导抗炎功能。
2.3合成：采用固相合成法合成珍珠贝活性肽，珍珠贝活性肽由杰肽生物科技有限公司合成，纯度高于95％，用于进一步研究其抗炎活性。
实施例3
以珍珠贝活性肽作为样品，对其进行细胞抗炎活性评价，测定RAW264.7巨噬细胞NO释放量；同时通过定量酶联免疫吸附试验(ELISA)(试剂盒购自欣博盛生物科技有限公司)测量培养上清液中的细胞炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-10)的含量。
细胞毒性试验评价：
通过MTT法评估珍珠贝活性肽(FPGA)在0.0625～2.0mg/mL浓度下对RAW264.7巨噬细胞的细胞毒性，结果如图8所示，该活性肽处理RAW264.7巨噬细胞24h后，未产生显著的细胞毒性，且有助于RAW264.7巨噬细胞的增殖，因此，该珍珠贝活性肽即使在2.0mg/mL的高浓度下依旧不产生细胞毒性，后续可以选择在1～200μg/mL浓度范围内进行NO释放量测定。
RAW264.7巨噬细胞NO释放量的测定：
由图9的细胞试验结果可知，模型组RAW264.7巨噬细胞经LPS刺激后，NO释放量显著增加(P<0.001)，与模型组相比，阳性对照组能够显著抑制RAW264.7巨噬细胞NO的释放，NO释放量下降40.85±5.55％(P<0.001)；珍珠贝活性肽处理组在不同浓度下均能显著抑制RAW264.7巨噬细胞释放NO，且均呈浓度依赖性；在200μg/mL的浓度下，活性肽处理组的NO释放量下降36.47±1.97％(P<0.001)。实验结果表明，活性肽能有效抑制由LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞NO的释放。
RAW264.7巨噬细胞细胞因子的测定：
图10为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞TNF-α因子释放量的影响图；图11为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞IL-6因子释放量的影响图；图12为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞IL-1β因子释放量的影响图；图13为珍珠贝活性肽对RAW264.7巨噬细胞IL-10因子释放量的影响图。从图10～图13可以看出，与空白对照组相比，RAW264.7巨噬细胞在LPS刺激下，模型组RAW264.7巨噬细胞各细胞炎症因子TNF-α(图10)、IL-6(图11)、IL-1β(图12)和IL-10(图13)释放量显著上升，对比模型组，阳性对照组能够显著减少促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β的释放，即DEX处理可以显著抑制LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞分泌TNF-α、IL-6和IL-1β炎症介质(P<0.001)，表明本发明中使用的细胞炎症模型能够作为抗炎物质的有效评价手段。而活性肽处理组不仅可以显著减少RAW264.7巨噬细胞促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌，且在1～200μg/mL浓度下均呈剂量依赖性，当浓度达到200μg/mL时，还能显著提高抗炎因子IL-10的分泌，最高浓度200μg/mL下对细胞炎症因子分泌的影响如表5所示。
表5.各样品组对RAW264.7巨噬细胞炎症因子的影响(P<0.001)
通过实施例2～3，表明本发明的珍珠贝活性肽可与环氧合酶-2的活性位点结合，抑制环氧合酶-2的活性，同时还能降低NO和促炎因子水平，促进抗炎因子的分泌，从而有效调控RAW264.7巨噬细胞炎症因子的分泌，具有优秀的抗炎活性。
最后应当指出的是，以上实施例仅是本发明的具有代表性的例子。显然，本发明的技术方案并不限于上述实施例，还可有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明内容直接导出或联想到所有变形，均应认为是本发明的权利要求的保护范围。
Claims (10)
1.一种具有抗炎作用的珍珠贝活性肽，其特征在于，所述活性肽具有如SEQ ID NO：1所示序列。
2.一种权利要求所述的珍珠贝活性肽在制备抗炎添加剂中的应用。
3.如权利要求2所述应用，其特征在于，所述抗炎添加剂用于制备功能性食品。
4.如权利要求2所述应用，其特征在于，所述抗炎添加剂用于制备化妆品。
5.如权利要求2所述应用，其特征在于，所述抗炎添加剂用于制备药物。
6.如权利要求5所述应用，其特征在于，所述药物为抑制环氧合酶-2活性的药物。
7.如权利要求5所述应用，其特征在于，所述药物为降低细胞NO释放量的药物。
8.如权利要求5所述应用，其特征在于，所述药物为减少促炎因子分泌的药物。
9.如权利要求5所述应用，其特征在于，所述药物为促进抗炎因子分泌的药物。
10.如权利要求3～9任一所述应用，其特征在于，所述抗炎添加剂在功能性食品、化妆品或药物中的添加量为0.0625～2.0mg/mL。
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