CN115960082A - 一种四取代的烯烃化合物、其制备方法及其在医药上的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种式I所示的四取代烯烃化合物、药物组合物及其制备方法和应用。该类化合物作为良好的雌激素受体(ER)降解剂，可以预防或治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的用途，所述的疾病优选为癌症，特别是乳腺癌。

Description

一种四取代的烯烃化合物、其制备方法及其在医药上的应用

本申请要求2021年10月13日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202111194595.5，发明名称为“一种四取代的烯烃化合物、其制备方法及其在医药上的应用”的在先申请的优先权。所述在先申请的全文通过引用的方式结合于本申请中。

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种四取代烯烃化合物、其制备方法及其在医药上的应用。

背景技术

雌激素是一种由内分泌系统分泌的类固醇类激素，在生殖系统、骨组织、心血管、免疫系统和中枢神经系统中发挥重要的作用。雌激素信号通路中一个重要的蛋白是雌激素受体(ER)，其是一种配体激活的转录调节蛋白，通过与内源性雌激素的相互作用，介导多种生物效应的诱导，内源性雌激素包括17β-雌二醇和雌酮。已发现ER具有两种亚型，即雌激素受体α(ERα、ESR1和NR3A)和雌激素受体β(ERβ、ESR2和NR3b)，其为细胞核受体家族中的一员，与细胞核受体的结构很相似。

ERα是由6个功能结构域(命名为A-F)组成，4个主要的功能区，N端A/B域的功能区具有非配体依赖的转录激活功能区AF-1。AF-1具有组成性激活活性，通过与基础转录因子、复合因子和其它转录因子的作用激活靶标基因的转录，该区域有多个磷酸化位点，AF-1的作用依赖于蛋白的磷酸化。C域组成的DNA结合结构域(DBD)具有高度的保守性，包含2个锌指结构域，能特异性的结合到靶标DNA上，同时该结构域对受体的二聚化具有重要的作用。D域为铰链区，链接DBD和配体结构域(LBD)，保守性较低(两亚型间的同源性仅30％)。C端的E域组成配体结合域(LBD)，该结构域决定ER与雌激素、SERM(选择性雌激素受体调节剂)、SERD(选择性雌激素受体下调剂)等配体的特异性结合。LBD具有配体依赖的转录激活功能区AF-2，与AF-1协同作用发挥ER受体激活靶基因转录的功能。同时，LBD是受体发生二聚化的关键部位。(Tzukerman，et al.，Mol.Endocrinologv，1994，8:21-30)

ERα主要分布在子宫、卵巢、睾丸、垂体、肾、附睾和肾上腺中，而ERβ主要分布在前列腺、卵巢、肺、膀胱、脑和血管中。约70％的乳腺癌患者中表达ER或黄体酮受体，表明此肿瘤细胞的生长为激素依赖性的，其他的肿瘤如卵巢癌和子宫内膜癌的生长也对ERα具有依赖性；同时在内分泌肿瘤如肾上腺皮质肿瘤、胰腺癌、前列腺癌和甲状腺癌，消化道系统肿瘤如结肠癌、食管癌、肝癌和胰腺癌，以及肺癌中都表达ERα和ERβ。对于这些疾病的治疗可以通过各种方式来抑制ER信号传导，包括拮抗配体和ER的结合，拮抗或下调ERα，阻断雌激素的合成等。针对如乳腺癌细胞内雌激素-雌激素受体信号通路的内分泌疗法(EndocrineTherapy，ET)，因其危害性最小，疗效显著，己经成为治疗雌激素受体阳性乳腺癌的首选疗法。

临床上内分泌疗法主要包含以下三种治疗方法：芳香化酶抑制剂(Aromataseinhibitor，AI)，选择性雌激素受体调节剂(Selective estrogen receptor modulator，SERM)和选择性雌激素受体降解剂Selective estrogen receptor degraders，SERDs)等。早期的芳香化酶抑制剂(第一代，第二代)靶点选择性低，毒副作用大；经过多年的研究，第三代芳香化酶抑制剂大大提高了其选择性，解决了早期芳香化酶抑制剂的问题而得到了广泛的应用。其中，来曲唑等己作为一线药物用于治疗雌激素受体阳性乳腺癌。选择性雌激素受体调节剂(SERM)直接作用于雌激素受体以阻断此信号通路，疗效显著，应用历史较长。其中，他莫昔芬是最具有代表性的选择性雌激素受体调节剂，作为优先推荐使用的一线药物，他莫昔芬用于预防和治疗雌激素受体阳性乳腺癌表现出显著的临床疗效。目前上市的SERM仍有严重的副作用，如他莫昔芬和托瑞米芬长期服用会引起子宫内膜增生、息肉和子宫内膜癌等，而雷洛昔芬常见的副作用包括潮热、腿痛、乳房触痛和静脉栓塞等。尽管芳香化酶抑制剂来曲唑以及选择性雌激素受体调节剂他莫昔芬在治疗雌激素受体阳性乳腺癌方面表现了良好的疗效，但是，随着两类药物的应用，雌激素受体阳性乳腺癌针对芳香化酶抑制剂以及选择性雌激素受体调节剂的耐药性问题也表现的越来越突出。

最近报道，雌激素受体alpha基因(ESRl)的突变可能是转移性ER阳性的乳腺癌患者产生耐药性的原因之一(Toy et al.,Nat.Genetic 2013,45:1439-1445；Li,S.et alCell Rep.4,1116-1130(2013))。然而论述的可能的耐药性机制中，肿瘤的生长存在ER依赖性，因此选择性下调ERα的机制，是一种阻滞ERα活性介导早期的、转移性和耐药性癌症的较好方法。选择性雌激素受体下调剂(Selective estrogen receptor down-regulator,SERD)体现出了特有的优越性。机理上，选择性雌激素受体下调剂桔抗雌激素受体功能，可大大加速乳腺癌细胞内(正常的或者变异的)雌激素受体的泛素化降解，彻底阻断雌激素/雌激素受体信号通路，达到抑制正常的或者耐药性乳腺癌细胞生长增殖的目的。

研究表明，选择性雌激素受体下调剂可有效抑制耐荷尔蒙的乳腺癌细胞的增殖，唯一上市的选择性雌激素受体下调剂氟维司群(Fulvestrant)在治疗耐荷尔蒙疗法的乳腺癌上表现出了良好的效果，验证了选择性雌激素受体下调剂的独特优势。但是，氟维司群本身存在很多问题，如因为其PK性质很差，其口服生物利用度为零；同时，氟维司群又有较高的血液清除率。由于以上原因，这个药物只能通过肌肉注射给药。然而，因为其强亲酯性结构，肌肉注射给药的氟维司群在组织分布上也存在严重问题；氟维司群在临床上只有约50％乳腺癌患者表现出了临床响应。因此，研发有口服生物利用度的选择性雌激素受体下调剂是亟需的医疗需求。

发明内容

本发明的目的在于公开一种四取代烯烃类雌激素受体α降解剂，提供一种式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐：

其中：

W为CH或N；

Y为O，S，CH₂或NH；

Z为氨基或3-8元含1-3个O、S或N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、烃基、卤代烃基、羟烷基、环烃基、杂环基、芳基或杂芳基取代；Z优选为氨基或3-8元含N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、C1-C12烷基、C1-C12卤代烷基、C1-C12羟烷基取代；

R¹为氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

R²为氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

每个R³相同或不同，彼此独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基、氨基、硝基、羧基、醛基、羟基、羟烷基、磺酰烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

每个R⁴相同或不同，彼此独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基、氨基、硝基、羧基、醛基、羟基、羟烷基、磺酰烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

m为0、1、2、3；

n为0、1、2、3、4、5；

k为0、1、2、3、4、5、6。

根据本发明的实施方案，所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，R1优选为卤素，更优选为氟原子。

根据本发明的实施方案，所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，R3优选氢原子。

根据本发明的实施方案，所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，R4优选氢原子。

根据本发明的实施方案，所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，所述式I化合物进一步优选为如下式II：

其中：

W选自CH或N；

Y选自O或NH；

Z为氨基或3-8元含1-3个O、S或N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、烃基、卤代烃基、羟烷基、环烃基、杂环基、芳基或杂芳基取代；Z优选为氨基或3-8元含N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、C1-C12烷基、C1-C12卤代烷基、C1-C12羟烷基取代；

R²为氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

k为0、1、2、3、4、5、6。

根据本发明的实施方案，所述式I或II所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，R²为卤素取代的C1-C6的烷基，或卤素取代的C3-C12的环烷基；优选的，R²为氟取代的C1-C6的烷基，如选自以下基团：

其中p优选自0、1、2、3和4，进一步优选为1。

根据本发明的实施方案，所述式I或II所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，R²优选为-CH₂CF₃。

根据本发明的实施方案，所述式I或II所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，Z进一步优选以下基团：

其中：t为0、1、2、3、4、5，优选为0或1。

根据本发明的实施方案，所述式I或II所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，Z进一步优选以下具体基团：

根据本发明的实施方案，所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐中，式I化合物的举例性的、非限制性的具体实例如下表所示：

本发明的另一方面提供式I所述化合物或其盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，将化合物I-1与I-2，经Suzuki偶联，得到化合物I-3；

第二步，将化合物I-3与卤代芳基化合物，经Suzuki偶联，脱保护，得到化合物I。

化合物I-1按照现有技术已知方法制备。

其中，R¹、R²、R³、R⁴、W、Y、Z、m、n、k具有上文所述的定义。PG为本领域公知的N保护基，例如可以为THP；X为卤素，例如Cl、Br、I。

本发明的另一方面提供式II所述化合物或其盐的制备方法，包括以下步骤：

第一步，将化合物II-1与II-2，经Suzuki偶联，得到化合物II-3；

第二步，将化合物II-3与卤代苯，经Suzuki偶联，脱保护，得到化合物II。

化合物II-1按照现有技术已知方法制备。

其中，R²、W、Y、Z、k具有上文所述的定义。PG为本领域公知的N保护基，例如可以为THP；X为卤素，例如Cl、Br、I。

本发明进一步提供一种药物组合物，其包含本发明所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本发明所述的药物组合物进一步包含治疗有效量的本发明所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

所述药物组合物中的载体为“可接受的”，其可与组合物的活性成分相容(并且优选地，能够稳定活性成分)并且对被治疗的受试者不是有害的。可以使用一种或多种增溶剂作为药物赋形剂用于递送活性化合物。

本发明进一步提供所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，或所述药物组合物在制备雌激素受体降解剂中用途。

本发明进一步提供所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，或所述药物组合物在制备预防或治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途。

本发明进一步提供一种预防或治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的方法，该方法包括向需要其的患者施用治疗有剂量的本发明的式I和II所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，或其药物组合物。

本发明中所述雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症可以为癌症，优选为乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或子宫癌，更优选乳腺癌。

本发明可将活性化合物制成适合于通过任何适当途径给药的形式，活性化合物优选是以单位剂量的方式，或者是以患者可以以单剂自我给药的方式。本发明化合物或组合物的单位剂量的表达方式可以是片剂、胶囊、扁囊剂、瓶装药水、药粉、颗粒剂、锭剂、栓剂、再生药粉或液体制剂。

本发明治疗方法中所用化合物或组合物的剂量通常将随疾病的严重性、患者的体重和化合物的相对功效而改变。不过作为一般性指导，合适的单位剂量可以是0.1～1000mg。

本发明的药物组合物除活性化合物外，可含有一种或多种辅料，所述辅料选自以下成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂或赋形剂等。根据给药方法的不同，组合可含有0.1至99重量百分的活性化合物。

本发明含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂、造粒剂和崩解剂、润滑剂。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。例如，可使用水溶性味道掩蔽物质，也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂混合，或其中活性成分与水溶性载体混合的软明胶囊提供口服制剂。

在一些实施方案中，本发明水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂、分散剂或润湿剂。水混悬液的活性成分与一种或多种分散剂、湿润剂或悬浮剂混合。水混悬液还可以含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。

在一些实施方案中，本发明油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物或矿物油中配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂保存这些组合物。本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式，油相可以是植物油或矿物油或其混合物，适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂。可用甜味剂，此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。

本发明的药物组合物可以是注射剂，包括无菌注射水溶液或粉针剂形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶液油相的无菌注射水包油微乳。可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。

本发明的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂来制备的无菌注射溶液或混悬液。

可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激赋形剂混合来制备这些药物组合物。

如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物I和II日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。

有益效果

本发明提供的通式I化合物，具有良好的雌激素受体降解活性；本发明化合物不仅具有良好的生物学活性，安全性良好，且提高了药物口服生物利用度。针对目前国内临床报道的酸侧链型SERDs药物出现胃肠道不耐受等诸多副反应，本发明提供一种全新碱侧链型SERDs化合物，能够降低胃肠道不适的潜在风险。

附图说明

图1：小鼠单剂量静注3mg/kg化合物5后的药代动力学图；

图2：小鼠单剂量灌胃15mg/kg化合物5后的药代动力学图；

图3：小鼠CDX模型中肿瘤生长曲线图。数据点代表组内平均肿瘤体积，误差线代表标准误(SEM)。

术语定义与说明

除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙级、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基已基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基已基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3二甲基已基、2,4二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基已基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正已基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、疏基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。

术语“烷氧基”指-0-(烷基)和-0-(非取代的环烷基)，其中烷基和环烷基的定义如本文所述。烷氧基的非限制性实例包括:甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、疏基、羟基、硝基、鼠基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或酸酯基。

术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子(例如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个)，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。

术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧、S、S(O)或S(O)2的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1-4个是杂原子(例如1、2、3和4个)；更优选包含3至6个环原子(例如3、4、5、6个)。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基.哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等，优选哌啶基、吡咯烷基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。

杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、疏基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。

术语“芳基”指具有共轭的电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和茶基。所述芳基环包括上述芳基稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上。

芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、疏基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基，优选苯基。术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元(例如5、6、7、8、9或10元)，更优选为5元或6元，例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、嗯唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为咪唑基、吡唑基、嘧啶基或噻唑基；更优选为吡唑基或噻唑基。所述杂芳基环包括上述杂芳基稠合于芳基、杂环基或环烷基环上。

杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多，个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。

术语“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。

术语“卤代烷基”指被卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。

术语“氚代”指被氚原子取代。

术语“羟基”指-OH基团。

术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。

术语“氰基”指-CN。

术语"硝基”指-NO₂。

术语“羧基"指-C(O)OH。

术语“醛基”指-CHO。

术语“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O-(环烷基)，其中烷基和环烷基如上定义。

“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1-3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯烃)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。本发明中“X选自A、B、或C”、“X选自A，B和C”、“X为A，B或C”、“X为A、B和C”等不同用语均表达了相同的意义，即表示X可以是A，B，C中任意一种或几种。

根据其分子结构，本发明的化合物可以是手性的，因此可能存在各种对映异构体形式。因而这些化合物可以以消旋体形式或光学活性形式存在。本发明的化合物或其中间体可以通过本领域技术人员公知的化学或物理方法分离为对映异构体化合物，或者以此形式用于合成。在外消旋的胺的情况中，通过与光学活性的拆分试剂反应，从混合物制得非对映异构体。适当的拆分试剂的示例是光学活性的酸，例如R和S形式的酒石酸、二乙酰酒石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸、适当的N-保护的氨基酸(例如N-苯甲酰脯氨酸或N-苯磺酰基脯氨酸)或各种光学活性的樟脑磺酸。借助光学活性的拆分试剂(例如固定在硅胶上的二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸、三乙酸纤维素或其它碳水化合物的衍生物或手性衍生化的异丁烯酸酯聚合物)，也可有利地进行色谱对映体拆分。用于此目的的适当的洗脱剂是含水或含醇的溶剂混合物，例如，己烷/异丙醇/乙腈。

本领域技术人员将理解，由于氮需要具有可用的孤对电子用于被氧化为氮氧化物，因此并非所有的含氮杂环都可以形成N-氧化物；本领域技术人员将识别能够形成N-氧化物的含氮杂环。本领域技术人员还将认识到叔胺能够形成N-氧化物。制备杂环和叔胺的N-氧化物的合成方法对于本领域技术人员而言是熟知的，所述合成方法包括用过氧酸如过氧乙酸和间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、过氧化氢、烷基氢过氧化物如叔丁基氢过氧化物、过硼酸钠和双环氧乙烷(dioxirane)如二甲基双环氧乙烷氧化杂环和叔胺。这些制备N-氧化物的方法已在文献中广泛地描述和综述。

药学上可接受的盐可以是例如在链或环中具有氮原子的具有足够碱性的本发明的化合物的酸加成盐。

另外，碱性含氮基团可用如下试剂季铵化：低级烷基卤化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯，例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯；长链卤化物，例如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物如苄基和苯乙基溴化物等。作为实例，药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、硫酸氢盐、氢溴酸盐、醋酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、甲酸盐或葡甲胺盐等。

由于本发明的化合物可存在多个成盐位点，所述药学上可接受的盐不仅包括本发明化合物其中1个成盐位点上形成的盐，而且还包括其中2、3或全部成盐位点上形成的盐。为此，所述药学上可接受的盐中式I化合物与成盐所需的酸的根离子(阴离子)或碱的阳离子摩尔比可以在较大的范围内变化，例如可以是4:1～1:4，如3:1、2:1、1:1、1:2、1:3等。

根据不同取代基的位置和性质，本发明的化合物还可以包含一个或多个不对称中心。不对称碳原子可以(R)或(S)构型存在，仅有一个不对称中心时，产生外消旋混合物，含有多个不对称中心时，得到非对映异构体混合物。在某些情况下，由于围绕特定键的旋转受阻还可能存在不对称性，例如该中心键连接特定化合物的两个被取代的芳族环。并且，取代基还可以顺式或反式异构的形式存在。

本发明化合物还包括其各自所有可能的立体异构体，其是单一立体异构体或所述立体异构体(例如R-异构体或S-异构体，或者E-异构体或Z-异构体)的任意比例的任意混合物的形式。可通过任意适合的现有技术方法(例如色谱法，特别是例如手性色谱法)实现本发明的化合物的单一立体异构体(例如单一对映异构体或单一非对映异构体)的分离。

术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本发明化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。质子移变互变异构体来自两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本发明包含化合物的所有互变异构形式。

在本发明中，所涉及的化合物亦包括经同位素标记的化合物，所述经同位素标记的化合物与式I中所示的那些相同，但是其中一或多个原子被原子质量或质量数不同于通常天然存在的原子质量或质量数的原子替代。可掺入本发明的化合物的同位素的实例包括H、C、N、O、S、F及Cl的同位素，分别诸如2H、3H、13C、11C、14C、15N、18O、17O、32P、35S、18F及36Cl。含有上述同位素和/或其他原子的其他同位素的本发明的化合物、其前药、或者所述化合物或所述前药的药学上可接受的盐在本发明的范围内。本发明的某些经同位素标记的化合物，例如掺入放射性同位素(诸如3H和14C)的化合物可用于药物和/或底物组织分布测定。氚(即3H)和碳14(即14C)同位素因易于制备和可检测性而成为特别优选的。再者，以较重的同位素(诸如氘，即2H)替代可提供源自更高的代谢稳定性的某些治疗优势(例如增加的体内半衰期或减少的剂量需求)，并因此可在某些情况下是优选的。如权利要求所请求保护的本发明化合物可特别地限定以氘或氚替代。此外，取代基中出现的氢未单独列明术语氘或氚并不表示排除氘或氚，而是同样也可以包含氘或氚。

术语“有效量”或者“治疗有效量”是指足以实现预期应用(包括但不限于如下定义的疾病治疗)的本发明所述化合物的量。治疗有效量可以取决于以下因素而改变：预期应用(体外或者体内)，或者所治疗的受试者和疾病病症如受试者的重量和年龄、疾病病症的严重性和给药方式等，其可以由本领域普通技术人员容易地确定。具体剂量将取决于以下因素而改变：所选择的特定化合物、所依据的给药方案、是否与其它化合物组合给药、给药的时间安排、所给药的组织和所承载的物理递送系统。

术语“溶剂化物”是本发明的化合物的那些形式，其以固体或液体的状态通过与溶剂分子的配位作用形成配合物。水合物是溶剂化物的特定形式，其中配位作用是与水进行。在本发明中，优选的溶剂化物是水合物。进一步的，本发明通式I化合物的药学上可接受的溶剂化物(水合物)是指化合物I与化学计量学的一个或多个分子的水或其他溶剂形成的共晶和包合物。可用于溶剂化物的溶剂包括但不限于：水、甲醇、乙醇、乙二醇和醋酸。

术语“前药”或称为“药物前体”，代表化合物在体内转化为前述通式或具体化合物所示的化合物。这样的转化受前体药物在血液中水解或在血液或组织中经酶转化为母体结构的影响。本发明前药可以是酯，在本发明中酯可以作为前药的有苯酯类，脂肪族酯类，酰氧基甲基酯类，碳酸酯，氨基甲酸酯类和氨基酸酯类。例如本发明里的一个化合物包含羟基/羧基，即可以将其酰化得到前体药物形式的化合物。其他的前药形式包括磷酸酯，如这些磷酸酯类化合物是经母体上的羟基磷酸化得到的。

具体实施方式

以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。

实施例化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。

NMR位移(δ)10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。

MS的测定用Agilent 1200/1290DAD-6110/6120Quadrupole MS液质联用仪(生产商:Agilent，MS型号:6110/6120Quadrupole MS)；waters ACQuity UPLC-QD/SQD(生产商:waters，MS型号:waters ACQuity Qda Detector/waters SQ Detector)，THERMO UItimate3000-QExactive(生产商:THERMO，MS型号:THERMO Q Exactive)。

高效液相色谱法(HPLC)分析使用Agilent HPLC 1200DAD、Agilent HPLC1200 VWD和Waters HPLC e2695-2489高压液相色谱仪。

手性HPLC分析测定使用Agilent 1260DAD高效液相色谱仪。

高效液相制备使用Waters 2545-2767，Waters 2767-SQ Detecor2，ShimadzuLC-20AP和Gilson GX-281制备型色谱仪。

手性制备使用Shimadzu LC-20AP制备型色谱仪。

CombiFlash快速制备仪使用Combiflash Rf200(TELEDYNE ISCO)。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。

硅胶柱色谱法一般使用烟台黄海硅胶200-300目硅胶为载体。

激酶平均抑制率及IC50值的测定用NoyoStar酶标仪(德国BMG公司)。

本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG、Acros Organics、Aldrich Chemical Company、韶远化学科技(AccelaChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。

实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。

实施例中无特殊说明，小时缩写为h。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。

加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或HC2-SS型氢化仪。

氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。

微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。

实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括:，A:二氯甲烷/甲醇体系，B:正己烷/乙酸乙酯体系，C:石油醚乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。

化合物合成实施例

实施例1

(Z)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(6-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物1)的合成

第一步：2-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-5-溴吡啶(化合物1c)的制备

将化合物1a(1.0g，5mmol)，化合物1b(0.9g，5mmol)和碳酸铯(2.0g，6.2mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，室温搅拌8h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品直接溶解于二氯甲烷(10mL)中，置于冰浴中搅拌，再加入三氟乙酸(1mL)，TLC监控至反应完全，反应液倒入50mL碳酸氢钠水溶液(含量10％)中，再加入二氯甲烷(20mL)萃取，分液，浓缩有机层经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/1)纯化得到化合物1c(0.9g，淡化色油状物)，收率80％。

MS m/z(ESI)：230.1(M+1)。

第二步：5-溴-2-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶(化合物1e)的制备

将化合物1c(0.9g,4mmol)，化合物1d(1.1g,4.7mmol)和三乙胺(1.7mL，12mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，在冰浴中搅拌2h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，加入乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/5)纯化得到化合物1e(1.0g，淡化色油状物)，收率86％。

MS m/z(ESI)：290.1(M+1)。

第三步：(E)-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)1H-吲唑-5-基)-1-(6-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氧基)吡啶-3-基)丁-1-烯-2-基)硼酸(化合物1g)的制备

将化合物1f(765mg,1.32mmol)(采用现有技术方法制备)，化合物1e(382mg,1.32mmol)，碳酸铯(1286mg,3.95mmol)和双三苯基磷二氯化钯(92mg,0.13mmol)的加入到2-甲基四氢呋喃/水＝5/1(24mL)溶液里，在50度氮气保护下反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(3x 30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到化合物1g(497mg,黄色油状物)，产率：65％。

MS m/z(ESI)：581.4(M+1)。

第四步：(Z)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(6-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物1)的制备

将化合物1g(497mg,0.86mmol)，溴苯(206mg,1.31mmol)，氢氧化钾(221mg,3.94mmol)和双三苯基磷二氯化钯(催化量)，加入二氧六环/水＝5/1(24mL)混合溶液里，在氮气保护下于80度反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水淬灭(5mL)，用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后，溶解于二氯甲烷(3mL)溶液里，再加入三氟乙酸(1mL)，在25度反应8小时。TLC监控反应完成后，将反应液浓缩后经制备机纯化后得到化合物1(55.1mg)，产率：12％。

MS m/z(ESI)：551.1(M+23)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.23(d,J＝1.4Hz,1H),8.00(dd,J＝9.1,1.7Hz,1H),7.74(s,1H),7.57(d,J＝8.6Hz,1H),7.39(d,J＝8.7Hz,1H),7.37–7.29(m,4H),7.25(d,J＝9.1Hz,1H),5.66(d,J＝7.2Hz,1H),4.97(dd,J＝12.6,9.9Hz,1H),4.60(dt,J＝12.6,6.9Hz,2H),4.50(t,J＝5.5Hz,1H),3.58(dd,J＝21.1,11.5Hz,2H),3.47(q,J＝10.3Hz,2H),3.26–3.14(m,2H),2.18–1.87(m,3H).

实施例2

(Z)-N-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-胺(化合物2)的合成

第一步：N-(氮杂环丁烷-3-基)-5-溴吡啶-2-胺(化合物2c)的制备

将化合物2a(1.0g，3.5mmol)，化合物2b(0.6g，3.5mmol)和碳酸铯(2.0g，6.2mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，室温搅拌8h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品直接溶解于二氯甲烷(10mL)中，置于冰浴中搅拌，再加入三氟乙酸(1mL)，TLC监控至反应完全，反应液倒入50mL碳酸氢钠水溶液(含量10％)中，再加入二氯甲烷(20mL)萃取，分液，浓缩有机层经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/1)纯化得到化合物2c(0.6g，淡化色油状物)，收率74％。

MS m/z(ESI)：228.1(M+1)。

第二步：5-溴-N-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)吡啶-2-胺(化合物2d)的制备

将化合物2c(0.6g,2.6mmol)，化合物1d(1.1g,4.7mmol)和三乙胺(1.7mL，12mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，在冰浴中搅拌2h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，加入乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/5)纯化得到化合物2d(576.5mg，淡化色油状物)，收率76％。

MS m/z(ESI)：288.0(M+1)。

第三步：(E)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)-1-(6-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)吡啶-3-基)丁-1-烯-2-基)硼酸(化合物2e)的制备

将化合物1f(765mg,1.32mmol)(采用现有技术方法制备)，化合物2d(378.8mg,1.32mmol)，碳酸铯(1286mg,3.95mmol)和双三苯基磷二氯化钯(92mg,0.13mmol)的加入到2-甲基四氢呋喃/水＝5/1(24mL)溶液里，在50度氮气保护下反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(3x 30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到化合物2e(611mg,黄色油状物)，产率：80％。

MS m/z(ESI)：580.2(M+1)。

第四步：(Z)-N-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-胺(化合物2)的制备

将化合物2e(611mg,1.06mmol)，溴苯(206mg,1.31mmol)，氢氧化钾(221mg,3.94mmol)和双三苯基磷二氯化钯(催化量)，加入二氧六环/水＝5/1(24mL)混合溶液里，在氮气保护下于80度反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水淬灭(5mL)，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后，溶解于二氯甲烷(3mL)溶液里，再加入三氟乙酸(1mL)，在25度反应8小时。TLC监控反应完成后，将反应液浓缩后经制备机纯化后得到化合物2(116.9mg)，产率：21％。

MS m/z(ESI)：550.2(M+23)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.20(d,J＝6.9Hz,1H),8.08(s,1H),8.01(t,J＝7.6Hz,1H),7.84(ddd,J＝30.0,16.5,7.7Hz,1H),7.61(d,J＝6.1Hz,2H),7.45(d,J＝8.0Hz,2H),7.34–7.11(m,3H),6.69(d,J＝9.2Hz,1H),4.52(dd,J＝12.8,7.3Hz,2H),4.46–4.34(m,2H),4.28(dd,J＝11.8,6.6Hz,2H),3.33(dd,J＝20.7,10.3Hz,2H),3.12–2.96(m,2H),2.22–1.77(m,2H).

实施例3

(Z)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(6-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-3-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物3)的合成

第一步：5-溴-2-(2-溴乙氧基)吡啶(化合物3c)的制备

在氮气保护下，于0度往化合物3a(1.0g，5.8mmol)，三苯基膦(3.58g，13.60mmol)和化合物3b(0.7g，5.8mmol)的四氢呋喃(10mL)中的溶液滴加偶氮二甲酸二异丙酯酯(2.76g，13.6mmol)，在0度，N₂氛围下反应10h，TLC监控反应结束后，加H₂O淬灭反应，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：92/8)纯化得到化合物3c(1.1g，淡黄色液体)，收率为92％。

MS m/z(ESI)：279.8(M+1)。

第二步：5-溴-2-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)吡啶(化合物3e)的制备

将化合物3c(1.5g,5.4mmol)，化合物3d(1.1g,4.7mmol)和三乙胺(1.7mL，12mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，在冰浴中搅拌2h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，加入乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/5)纯化得到化合物3e(576.5mg，淡化色油状物)，收率70％。

MS m/z(ESI)：289.0(M+1)。

第三步：(E)-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)-1-(6-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-3-基)丁-1-烯-2-基)硼酸(化合物3f)的制备

将化合物1f(765mg,1.32mmol)(采用现有技术方法制备)，化合物3e(576.5mg,2mmol)，碳酸铯(1286mg,3.95mmol)和双三苯基磷二氯化钯(92mg,0.13mmol)的加入到2-甲基四氢呋喃/水＝5/1(24mL)溶液里，在50度氮气保护下反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到化合物3f(650mg,黄色油状物)，产率：85％。

MS m/z(ESI)：581.2(M+1)。

第四步：(Z)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(6-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-3-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物3)的制备

将化合物3f(650mg,1.12mmol)，溴苯(206mg,1.31mmol)，氢氧化钾(221mg,3.94mmol)和双三苯基磷二氯化钯(催化量)，加入二氧六环/水＝5/1(24mL)混合溶液里，在氮气保护下于80度反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水淬灭(5mL)，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后，溶解于二氯甲烷(3mL)溶液里，再加入三氟乙酸(1mL)，在25度反应8小时。TLC监控反应完成后，将反应液浓缩后经制备机纯化后得到化合物3(88.9mg)，产率：15％。

MS m/z(ESI)：529.1(M+1)。

¹H NMR(400MHz,DMSO)δ12.74(s,1H),7.69(d,J＝2.2Hz,1H),7.64(s,1H),7.59–7.50(m,1H),7.44–7.05(m,7H),6.60(d,J＝8.6Hz,1H),4.92(t,J＝5.1Hz,1H),4.55(d,J＝47.9Hz,2H),4.29(s,2H),4.17(t,J＝9.8Hz,2H),3.95(s,2H),3.47(dd,J＝21.5,10.8Hz,2H),1.44(ddd,J＝20.2,14.3,6.6Hz,2H),1.37–1.20(m,2H).

实施例4

(Z)-N-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)-5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-胺(化合物4)的合成

第一步：2-((5-溴吡啶-2-基)氨基)乙烷-1-醇(化合物4c)的制备

将化合物4a(1.0g，5.2mmol)，化合物4b(0.32g，5.2mmol)和碳酸铯(2.0g，6.2mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，室温搅拌8h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品直接溶解于二氯甲烷(10mL)中，置于冰浴中搅拌，再加入三氟乙酸(1mL)，TLC监控至反应完全，反应液倒入50mL碳酸氢钠水溶液(含量10％)中，再加入二氯甲烷(20mL)萃取，分液，浓缩有机层经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/2)纯化得到化合物4c(785mg，淡化色油状物)，收率70％。

MS m/z(ESI)：226.9(M+1)。

第二步：5-溴-N-(2-氯乙基)吡啶-2-胺(化合物4d)的制备

将化合物4c(785mg，3.6mmol)溶解在三氯氧磷(5mL)溶液里，加热回流2h，倒入热水(20mL)中，乙酸乙酯(20mL)萃取，分液，无水硫酸钠干燥有机层，浓缩得粗品化合物4d(848mg，褐色油状物)直接用于下一步。

第三步：5-溴-N-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)吡啶-2-胺(化合物4f)的制备

将化合物4d(848mg，3.6mmol)，化合物4e(324mg，3.6mmol)和碳酸铯(2.0g，6.2mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，室温搅拌8h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/1)纯化得到化合物4f(0.9g，淡化色油状物)，收率87％。

MS m/z(ESI)：288.0(M+1)。

第四步：(E)-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)-1-(6-((2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-3-基)-1-丁烯-2-基)硼酸(化合物4g)的制备

将化合物1f(765mg,1.32mmol)(采用现有技术方法制备)，化合物4f(574mg,2mmol)，碳酸铯(1286mg,3.95mmol)和双三苯基磷二氯化钯(92mg,0.13mmol)的加入到2-甲基四氢呋喃/水＝5/1(24mL)溶液里，在50度氮气保护下反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到化合物4g(650mg,黄色油状物)，产率：85％。

MS m/z(ESI)：580.2(M+1)。

第五步：(Z)-N-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)-5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)吡啶-2-胺(化合物4)的制备

将化合物4g(650mg,1.1mmol)，溴苯(206mg,1.31mmol)，氢氧化钾(221mg,3.94mmol)和双三苯基磷二氯化钯(催化量)，加入二氧六环/水＝5/1(24mL)混合溶液里，在氮气保护下于80度反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水淬灭(5mL)，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后，溶解于二氯甲烷(3mL)溶液里，再加入三氟乙酸(1mL)，在25度反应8小时。TLC监控反应完成后，将反应液浓缩后经制备机纯化后得到化合物4(121.7mg)，产率：21％。

MS m/z(ESI)：528.2(M+1)。

实施例5

(E)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)苯基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物5)的合成

第一步：3-(4-碘苯氧基)氮杂环丁烷(化合物5c)的制备

将化合物5b(0.8g，4.6mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中，冰浴搅拌下，加入钠氢(264mg，6.9mmol)，继续冰浴搅拌0.5h，再加入化合物5a(1.0g，4.5mmol)，TLC监控反应完全，倒入冰水(100mL)中，二氯甲烷(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤二氯甲烷层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品直接溶解于二氯甲烷(10mL)中，置于冰浴中搅拌，再加入三氟乙酸(1mL)，TLC监控至反应完全，反应液倒入50mL碳酸氢钠水溶液(含量10％)中，再加入二氯甲烷(20mL)萃取，分液，浓缩有机层经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/1)纯化得到化合物5c(0.9g，淡化色油状物)，收率79％。

MS m/z(ESI)：275.9(M+1)。

第二步：1-(3-氟丙基)-3-(4-碘苯氧基)氮杂环丁烷(化合物5d)的制备

将化合物5c(0.9g,3.2mmol)，化合物1d(1.1g,4.7mmol)和三乙胺(1.7mL，12mmol)置于NN-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，在冰浴中搅拌2h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，加入乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/5)纯化得到化合物5d(0.8g，淡化色油状物)，收率81％。

MS m/z(ESI)：336.0(M+1)。

第三步：(Z)-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)-1-(4-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)苯基)丁-1-烯-2-基)硼酸(化合物5e)的制备

将化合物1f(765mg,1.32mmol)(采用现有技术方法制备)，化合物5d(442mg,1.32mmol)，碳酸铯(1286mg,3.95mmol)和双三苯基磷二氯化钯(92mg,0.13mmol)的加入到2-甲基四氢呋喃/水＝5/1(24mL)溶液里，在50度氮气保护下反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到化合物5e(420mg,黄色油状物)，产率：55％。

MS m/z(ESI)：580.2(M+1)。

第四步：(E)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(4-((1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)苯基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物5)的制备

将化合物5e(420mg,0.72mmol)，溴苯(206mg,1.31mmol)，氢氧化钾(221mg,3.94mmol)和双三苯基磷二氯化钯(催化量)，加入二氧六环/水＝5/1(24mL)混合溶液里，在氮气保护下于80度反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水淬灭(5mL)，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后，溶解于二氯甲烷(3mL)溶液里，再加入三氟乙酸(1mL)，在25度反应8小时。TLC监控反应完成后，将反应液浓缩后经制备机纯化后得到化合物5(61.1mg)，产率：16％。

MS m/z(ESI)：550.1(M+23)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ7.59(s,1H),7.45(dd,J＝8.7,1.8Hz,1H),7.25(dd,J＝8.8,1.3Hz,1H),7.22–7.16(m,4H),7.16–7.09(m,1H),6.87(d,J＝8.7Hz,2H),6.53(d,J＝8.7Hz,2H),4.55(t,J＝5.6Hz,1H),4.43(t,J＝5.6Hz,1H),4.26–4.17(m,2H),3.77(dd,J＝10.8,4.4Hz,2H),3.38(q,J＝10.5Hz,3H),3.11(t,J＝7.4Hz,2H),1.97–1.73(m,2H).

实施例6

(E)-N-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)苯胺(化合物6)的合成

第一步：N-(4-碘苯基)氮杂环丁烷-3-胺(化合物6b)的制备

将化合物6a(1.0g，3.0mmol)，化合物2b(550mg，3.2mmol)和碳酸铯(2.0g，6.2mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，室温搅拌8h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品直接溶解于二氯甲烷(10mL)中，置于冰浴中搅拌，再加入三氟乙酸(1mL)，TLC监控至反应完全，反应液倒入50mL碳酸氢钠水溶液(含量10％)中，再加入二氯甲烷(20mL)萃取，分液，浓缩有机层经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/2)纯化得到化合物6b(582mg，淡化色油状物)，收率72％。

MS m/z(ESI)：274.9(M+1)

第二步：1-(3-氟丙基)-N-(4-碘苯基)氮杂环丁烷-3-胺(化合物6c)的制备

将化合物6b(0.5g,1.8mmol)，化合物1d(550mg,2.4mmol)和三乙胺(1.7mL，12mmol)置于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，在冰浴中搅拌2h，TLC监控反应完全，倒入水(100mL)中，加入乙酸乙酯(50mL)萃取分液，再用饱和食盐水(50mL)洗涤乙酸乙酯层，无水硫酸钠干燥有机层，过滤，浓缩滤液，粗品经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：10/1至1/5)纯化得到化合物6c(450mg，淡化色油状物)，收率75％。

MS m/z(ESI)：335.0(M+1)。

第三步：(Z)-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)-1-(4-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁-3-基)氨基)苯基)丁-1-烯-2-基)硼酸(化合物6d)的制备

将化合物1f(765mg,1.32mmol)(采用现有技术方法制备)，化合物6c(440mg,1.32mmol)，碳酸铯(1286mg,3.95mmol)和双三苯基磷二氯化钯(92mg,0.13mmol)的加入到2-甲基四氢呋喃/水＝5/1(24mL)溶液里，在50度氮气保护下反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到化合物6d(495mg,褐色油状物)，产率：65％。

MS m/z(ESI)：579.2(M+1)。

第四步：(E)-N-(1-(3-氟丙基)氮杂环丁烷-3-基)-5-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)苯胺(化合物6)的制备

将化合物6d(495mg,0.86mmol)，溴苯(206mg,1.31mmol)，氢氧化钾(221mg,3.94mmol)和双三苯基磷二氯化钯(催化量)，加入二氧六环/水＝5/1(24mL)混合溶液里，在氮气保护下于80度反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水淬灭(5mL)，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后，溶解于二氯甲烷(3mL)溶液里，再加入三氟乙酸(1mL)，在25度反应8小时。TLC监控反应完成后，将反应液浓缩后经制备机纯化后得到化合物6(99.5mg)，产率：22％。

MS m/z(ESI)：527.2(M+1)。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ7.57(s,1H),7.43(d,J＝8.8Hz,1H),7.27–7.08(m,6H),6.68(d,J＝8.6Hz,2H),6.25(d,J＝8.6Hz,2H),4.54(t,J＝5.6Hz,1H),4.42(t,J＝5.7Hz,1H),4.11(dd,J＝18.5,7.4Hz,3H),3.46(d,J＝11.4Hz,1H),3.44–3.32(m,3H),2.99(s,2H),1.88–1.71(m,2H).

实施例7

(E)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物7)的合成

第一步：1-(2-溴乙氧基)-4-碘苯(化合物7b)的制备

氮气保护，在冰浴搅拌下，向化合物7a(2.00g，9.10mmol)，三苯基膦(3.58g，13.60mmol)和2-溴乙醇(1.14g，9.10mmol)的四氢呋喃(10mL)中的溶液滴加偶氮二甲酸二异丙酯酯(2.76g，13.6mmol)，在0度，N₂氛围下反应10h。TLC监控反应结束后，加H₂O淬灭反应，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：92/8)纯化得到化合物7b(1.91g，白色固体)，收率，58％。

MS m/z(ESI)：326.9(M+1)。

第二步：3-(氟甲基)-1-[2-(4-碘苯氧基)乙基]氮杂环丁烷(化合物7c)的制备

向3-(氟甲基)氮杂环丁烷(572mg，6.42mmol)和碳酸钾(2.09g，6.42mmol)的乙腈(15mL)溶液中加入化合物7b(700mg，2.14mmol)和碘化钾(1.07g，6.42mmol)。加热至65度，在N2氛围下保温反应5小时。TLC监控反应结束后，加水淬灭反应，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后经硅胶柱(石油醚/乙酸乙酯：50/50)纯化得到化合物7C(440mg，黄色油状物)，产率:55％。

MS m/z(ESI)：336.1(M+1)。

第三步：(Z)-4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)苯基)丁-1-烯-2-基)硼酸(化合物7d)的制备

将化合物1c(765mg,1.32mmol)(采用现有技术方法制备)，化合物7c(441mg,1.32mmol)，碳酸铯(1286mg,3.95mmol)和双三苯基磷二氯化钯(92mg,0.13mmol)的加入到2-甲基四氢呋喃/水＝5/1(24mL)溶液里，在50度氮气保护下反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后经柱层析(流动相：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到化合物7d(760mg,黄色油状物，纯度：80％)，产率：79％。

MS m/z(ESI)：580.2(M+1)。

第四步：(E)-3-氟-5-(4,4,4-三氟-1-(4-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)-1H-吲唑(化合物7)的制备

将化合物7d(760mg,1.31mmol)，溴苯(206mg,1.31mmol)，氢氧化钾(221mg,3.94mmol)和双三苯基磷二氯化钯(催化量)，加入二氧六环/水＝5/1(24mL)混合溶液里，在氮气保护下于80度反应2小时。TLC监控反应完成后，加入水淬灭(5mL)，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机相经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液浓缩后，溶解于二氯甲烷(3mL)溶液里，再加入三氟乙酸(1mL)，在25度反应8小时。TLC监控反应完成后，将反应液浓缩后经制备机纯化后得到化合物7(26.07mg)，产率：10％。

MS m/z(ESI)：528.1(M+1)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.69(s,1H),7.57(s,1H),7.53(d,J＝8.7Hz,1H),7.25-7.16(m,6H),6.84(d,J＝8.8Hz,2H),6.65(d,J＝8.8Hz,2H),4.59(d,J＝4.8Hz,1H),4.48(d,J＝5.2Hz,1H),3.98(brs,4H),3.71(brs,2H),3.48-3.40(m,3H),3.01(brs,2H).

实施例8

(E)-N-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)-4-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)苯胺(化合物8)的制备

第一步：4-溴-N-(2-溴乙基)苯胺(化合物8b)的制备

将化合物8a(5g,29.1mmol)，1,2-二溴乙烷(10.93g,58.2mmol)和碳酸钾(8.04g,58.2mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，在90度下反应5小时。反应结束后，反应液用水(20mL)淬灭，乙酸乙酯(3×20mL)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥。粗产品用硅胶柱(乙酸乙酯/石油醚＝8％)纯化得到化合物8b(538mg,黄色油状)。产率：7％。

MS m/z(ESI)：280.0(M+1)。

第二步：4-溴-N-(2-(3-氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)苯胺(化合物8c)的制备

将化合物8b(300mg,1.07mmol)，化合物4e(287mg,3.23mmol)和碳酸钾(297mg,2.15mmol)溶于乙腈(10mL)中，在80度下反应7小时。TLC监控反应结束后，过滤浓缩，加水(30mL)和乙酸乙酯(3x 30mL)萃取，将有机相合并，有机相用无水硫酸钠干燥。粗产品用硅胶柱(甲醇/二氯甲烷＝12％)纯化得到化合物8c(300mg,黄色油状物)，收率95％。

MS m/z(ESI)：287.1(M+1)。

第三步：(Z)-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)-1-(4-((2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)氨基)苯基)丁-1-烯-2-基)硼酸(化合物8d)的制备

将化合物8c(330mg,1.15mmol)，化合物1f(668mg,1.5mmol)(采用现有技术方法制备)，碳酸铯(1123mg,3.45mmol)和双三苯基磷二氯化钯(80mg,0.11mmol)溶于2-甲基四氢呋喃：水＝5：1(24mL)，在50度反应2小时。TLC监控反应结束后，过滤浓缩，加水(20mL)和乙酸乙酯(3×20mL)萃取，将有机相合并，有机相用无水硫酸钠干燥。粗产品用硅胶柱(甲醇/二氯甲烷＝10％)纯化得到化合物8d(500mg,黄色油状)，收率73％。MS m/z(ESI)：579.3(M+1)。

第四步：(E)-N-(2-(3-(氟甲基)氮杂环丁烷-1-基)乙基)-4-(4,4,4-三氟-1-(3-氟-1H-吲唑-5-基)-2-苯基丁-1-烯-1-基)苯胺(化合物8)的制备

将化合物8d(500mg,0.86mmol)，氢氧化钾(145mg,2.59mmol)，双三苯基磷二氯化钯(61mg,0.086mmol)和溴苯(136mg,0.86mmol)溶于1,4-二氧六环：水＝4：1(20mL)，在80度下反应2小时。反应结束后，过滤，加水(20mL)，乙酸乙酯(3×20mL)，将有机相收集，干燥浓缩，浓缩后粗品，直接加入溶于二氯甲烷(20mL)，在0度下滴加三氟乙酸(280mg,2.46mmol)，在25度下反应16小时。TLC监控反应结束后，粗产品通过制备纯化(FA，流动相：ACN:H2O(0.1％FA)＝30％:70％)，得到化合物8(61.89mg)，收率：23.20％；

MS m/z(ESI)：527.1(M+1)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.43(s,1H),7.49(dd,J＝10.2,3.6Hz,2H),7.25-7.19(m,5H),7.15(dd,J＝5.2,3.2Hz,1H),6.65(d,J＝8.6Hz,2H),6.30(d,J＝8.6Hz,2H),4.60(d,J＝5.0Hz,1H),4.48(d,J＝5.0Hz,1H),4.09(t,J＝9.8Hz,2H),3.88(s,2H),3.37(q,J＝10.8Hz,2H),3.19–3.12(m,5H).

化合物体外生物学测试实施例

测试实施例1：MCF-7细胞增殖抑制实验：

(1)实验材料：RPMI 1640培养基，胎牛血清，Promega CellTiter-Glo试剂。MCF-7细胞系购自欧洲细胞培养物保藏所(ECACC)。Envision多标记分析仪(PerkinElmer)。

(2)实验方法:将MCF-7细胞种于黑色384孔板中，每30毫升细胞悬液中600个细胞每孔。细胞板置于二氧化碳培养箱中过夜培养。将待测化合物用Epmotion进行5倍稀释至第10个浓度，即从2.5毫摩稀释至0.25纳摩，设置双复孔实验。向中间板中加入198微升培养基，再按照对应位置，转移2微升每孔的梯度稀释化合物至中间板，混匀后转移20微升每孔到细胞板中。细胞板置于二氧化碳培养箱中培养6天。向细胞板中加入每孔25微升的Promega CellTiter-Glo试剂，室温孵育10分钟使发光信号稳定。采用PerkinRImerEnvision多标记分析仪读数。

(3)数据分析：利用方程式(Max-Ratio)/(Max-Min)*100％将原始数据换算成抑制率，EC₅₀的值即可通过四参数进行曲线拟合得出。结果见表1。

测试实施例2：MCF-7细胞内ER降解

(1)实验材料：RPMI 1640培养基，胎牛血清，PBS,16％多聚甲醛，Triton，封闭液，雌激素受体抗体，近红外羊抗兔二抗，DRAQ5染料。MCF-7细胞系购自欧洲细胞培养物保藏所(ECACC)。Odyssey红外荧光扫描成像系统。

(2)实验方法：将MCF-7细胞种于黑色384孔板中，每30毫升细胞悬液中3200个细胞每孔。细胞板置于二氧化碳培养箱中培养4天。将待测化合物用Epmotion进行5倍稀释至第10个浓度，即氟维司群从0.25毫摩稀释至0.128纳摩，其他化合物从2.5毫摩稀释至0.128纳摩，设置双复孔实验。向中间板中加入198微升培养基，再按照对应位置，转移2微升每孔的梯度稀释化合物至中间板，混匀后转移20微升每孔到细胞板中。细胞板置于二氧化碳培养箱中培养20小时。向细胞板中加入每孔50微升的8％多聚甲醛，室温孵育30分钟后，用PBS洗两次，拍干后加入50μl含0.1％Triton的PBS，室温孵育15分钟，然后用PBS洗五次，拍干后加入50微升封闭液室温孵育1个小时，拍干后加入50μl含0.1％雌激素受体抗体的封闭液，4摄氏度过夜。第二天拍掉一抗后PBS洗五次，然后加入含0.1％近红外羊抗兔二抗和0.05％DRAQ5染料的封闭液，室温孵育1个小时后，用PBS洗五遍，拍干后用Odyssey红外荧光扫描成像系统读数。

(3)数据分析：利用方程式(Max-Ratio)/(Max-Min)*100％将原始数据换算成抑制率，DC₅₀的值即可通过四参数进行曲线拟合得出。结果见表1。

表1本发明化合物体外筛选试验结果

化合物	<![CDATA[MCF-7抗细胞增殖EC<sub>50</sub>(nM)]]>	<![CDATA[MCF-7细胞内ER降解DC<sub>50</sub>(nM)]]>
			Fulvestrant	2	6
RAD1901	1.5	2
			3	0.7	2
4	3.5	4
			5	0.6	3
6	<0.5	5
			7	<0.5	12
8	<0.5	1

实验结论：以上数据显示，本发明化合物具有明显的ER抑制和降解作用。

测试实施例3：药代动力学评价

3.1目的

以C57BL/6J小鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定C57BL/6J小鼠注射和灌胃给予化合物5后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在C57BL/6J小鼠体内的药代动力学行为，评价其药动力学特征。

3.2实验方案

(1)实验动物

C57BL/6J小鼠6只，雄性，分成4组，购自上海吉辉实验动物饲养有限公司，动物生产许可证SCXK(沪)2017-0012。

(2)药物配制

处方为5％DMSO+10％Solutol+85％Saline。先称量适量受试化合物(折算纯度和盐系数)，加入处方量的DMSO，涡旋得到澄清透明溶液，再加入处方量的Solutol HS 15，涡旋混匀后再加入处方量的生理盐水。得到0.6mg/mL或2mg/mL的溶液。配制过程中，如不能得到溶液，可尝试不高于60℃水浴超声帮助溶解。

(3)给药

小鼠禁食一夜后分别静注(3mpk)和灌胃(15mpk)给药。

(4)样品采集

给药后5min(仅静脉给药组)、15min、30min、1h、2h、4h、8h、24h。在每个时间点采集约30μL血液样品置于含EDTA-K2抗凝剂的抗凝管中，30分钟内离心得血浆。离心前全血样品置于湿冰上。对每个受试化合物，共采集45个血浆样品。所有采集的血浆样品保存在干冰上或不高于-70℃中直至分析检测。采用液相色谱-串联质谱法(LC/MS/MS)测定血浆和给药溶液中的原形药物浓度。

3.3实验结果

化合物5的C57BL/6J小鼠药代动力学参数结果如表2及附图1、2所示。

表2本发明化合物5的小鼠药代动力学参数

Treatment	3mg/kg,IV	15mg/kg,PO
			CL_pred(mL/hr/kg)	488	/
Vss_pred(mL/kg)	3382	/
			<![CDATA[T<sub>max</sub>(hr)]]>	/	1.00
<![CDATA[C<sub>max</sub>(ng/mL)]]>	/	1058
			<![CDATA[T<sub>1/2</sub>(hr)]]>	7.91	8.77
<![CDATA[AUC<sub>last</sub>(hr*ng/mL)]]>	5691	10618
			<![CDATA[AUC<sub>INF</sub>_pred(hr*ng/mL)]]>	6170	12413
<![CDATA[MRT<sub>INF</sub>_pred(h)]]>	6.94	11.6
			F(％)	/	37.3
Rsq_adjusted	0.95	0.95

结论：本发明化合物的药代吸收良好，具有明显的药代吸收效果。

测试实施例4：化合物5在人乳腺癌MCF-7BALB/c Nude荷瘤鼠的体内药效学实验

4.1目的

测试药物Fulvestrant、RAD1901、化合物5对雌性BALB/c Nude小鼠上建立的人乳腺癌MCF-7皮下异种移植肿瘤模型的体内药效情况，评价本发明化合物5在CDX模型上抗肿瘤的能力。

4.2实验方案

(1)实验动物

BALB/c Nude小鼠，雌性，6-8周龄，体重18-22克，数量32只，采购于浙江维通利华实验动物技术有限公司，动物合格证号：20220124Abzz0619000227。

(2)动物饲养环境

动物到达后在实验环境饲养3-7天后方可开始实验。动物在SPF级动物房以IVC(独立送风系统)笼具饲养(每笼4只)。所有笼具、垫料及饮水在使用前均灭菌。笼具、饲料及饮水每周更换两次。饲养环境及光照情况如下：

温度：20-26℃；湿度：40-70％。

笼具：聚碳酸酯制成，体积300mm×180mm×150mm。垫料为玉米芯，每周更换两次。

食物：实验动物在整个实验阶段中可自由进食(照射灭菌，干颗粒状食物)。

饮水：实验动物可自由饮用灭菌水。

笼具标识：动物信息卡注明每笼笼内动物数目、性别、品系、接收日期、给药方案、实验编号、组别以及实验开始日期。

动物标识：实验动物以耳标进行标识。

(3)细胞信息

细胞：人乳腺癌细胞MCF-7(货号ECACC-86012803)购买于ECACC。

(4)药效测试方案

当接种的MCF-7肿瘤平均体积到达190mm³时，则进行分组并按对照组、Fulvestrant(100mpk，s.c,BIW)、RAD1901(60mpk，p.o.，QD)、化合物5(10mpk，p.o.,QD)方案给药。各组分别在分组当天(PG-D0)开始给药，给药周期为4周。每周测量两次肿瘤体积，实验结束(PG-D28)时，称量所有小鼠肿瘤的重量。

4.3药效测试结果

药物Fulvestrant、RAD1901及化合物5在小鼠CDX模型中抑瘤能力如图3所示，其中RAD1901(60mpk，QD，4周)抑瘤率为89％，化合物5(10mpk，QD，4周)抑瘤率为93％。

结论：本发明化合物在小鼠CDX药效模型中，抗MCF-7增殖的能力优于Fulvestrant和RAD1901。

以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (14)

1.一种式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐：

其中：

W为CH或N；

Y为O，S，CH₂或NH；

Z为氨基或3-8元含1-3个O、S或N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、烃基、卤代烃基、羟烷基、环烃基、杂环基、芳基或杂芳基取代；Z优选为氨基或3-8元含N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、C1-C12烷基、C1-C12卤代烷基、C1-C12羟烷基取代；

R¹为氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

R²为氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

每个R³相同或不同，彼此独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基、氨基、硝基、羧基、醛基、羟基、羟烷基、磺酰烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

每个R⁴相同或不同，彼此独立地选自氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、氰基、氨基、硝基、羧基、醛基、羟基、羟烷基、磺酰烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

m为0、1、2、3；

n为0、1、2、3、4、5；

k为0、1、2、3、4、5、6。

2.根据权利要求1所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，R¹优选为卤素，更优选为氟原子。

3.根据权利要求1或2所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，R³优选为氢原子，R⁴优选为氢原子。

4.根据权利要求1至3任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，式I所示的化合物结构如式II所示：

其中，

W为CH或N；

Y为O，S，CH₂或NH；

Z为氨基或3-8元含1-3个O、S或N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、烃基、卤代烃基、羟烷基、环烃基、杂环基、芳基或杂芳基取代；Z优选为氨基或3-8元含N的杂环烷基，所述氨基、杂环烷基任选的被一个或多个卤素、C1-C12烷基、C1-C12卤代烷基、C1-C12羟烷基取代；

R²为氢原子、卤素、烷基、卤代烷基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

k为0、1、2、3、4、5、6。

5.根据权利要求1至4任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，R²为卤素取代的C1-C6的烷基，或卤素取代的C3-C12的环烷基，优选的，R²选自以下基团：

其中p为0、1、2、3、4。

6.根据权利要求1至5任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，Z选自以下基团：

其中：t为0、1、2、3、4、5。

7.根据权利要求1至6任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，Z选自以下基团：

8.根据权利要求1至7任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，式I化合物的结构如下所示：

9.根据权利要求1至8任一项所述式I所示的化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步，将化合物I-1与I-2，经Suzuki偶联，得到化合物I-3；

第二步，将化合物I-3与卤代芳基化合物，经Suzuki偶联，脱保护，得到化合物I。

10.根据权利要求1至9任一项所述式I所示的化合物的制备方法，其特征在于，式I化合物结构如式II所示，包括以下步骤：

第一步，将化合物II-1与II-2，经Suzuki偶联，得到化合物II-3；

第二步，将化合物II-3与卤代苯，经Suzuki偶联，脱保护，得到化合物II。

11.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含治疗有效量的根据权利要求1至8中任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。

12.根据权利要求1至8中任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，或根据权利要求11所述的药物组合物在制备雌激素受体降解剂中的用途。

13.根据权利要求1至8中任一项所述式I所示的化合物及其消旋体、立体异构体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂化物、多晶型物、代谢产物、酯、前药或其药学上可接受的盐，或根据权利要求11所述的药物组合物在制备预防或治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途。

14.根据权利要求13所述的用途，其中所述雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症为癌症，优选为乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或子宫癌，更优选乳腺癌。

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