CN1159332C - 一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法 - Google Patents
一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1159332C CN1159332C CNB011307846A CN01130784A CN1159332C CN 1159332 C CN1159332 C CN 1159332C CN B011307846 A CNB011307846 A CN B011307846A CN 01130784 A CN01130784 A CN 01130784A CN 1159332 C CN1159332 C CN 1159332C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- isopropylidene
- nmr
- compound
- solution
- 1mmol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- -1 Thiophosphoryl amino acid ester compound Chemical class 0.000 title claims abstract description 51
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 3
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 142
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 71
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 67
- 125000003253 isopropoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(O*)C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 48
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 37
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims abstract description 24
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 64
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 52
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 42
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 22
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 22
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 22
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 22
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 22
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 22
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 10
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 claims description 7
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 7
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 7
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 7
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 7
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000005352 clarification Methods 0.000 claims description 6
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N triethyl orthoformate Chemical compound CCOC(OCC)OCC GKASDNZWUGIAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 4
- 230000006837 decompression Effects 0.000 claims description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003292 glue Substances 0.000 claims description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 2
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 abstract description 4
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 abstract 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 126
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 120
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 40
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000000047 product Substances 0.000 description 28
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical group CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 20
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 20
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 20
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 20
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 20
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 description 20
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 20
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 20
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 19
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 19
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- UBGDNZQSYVIVHU-PEBGCTIMSA-N 1-[(3ar,4r,6r,6ar)-6-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-3a,4,6,6a-tetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl]-4-aminopyrimidin-2-one Chemical compound N1([C@@H]2O[C@H](CO)[C@H]3OC(O[C@H]32)(C)C)C=CC(N)=NC1=O UBGDNZQSYVIVHU-PEBGCTIMSA-N 0.000 description 17
- GFDUSNQQMOENLR-PEBGCTIMSA-N 1-[(3ar,4r,6r,6ar)-6-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-3a,4,6,6a-tetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound N1([C@@H]2O[C@H](CO)[C@H]3OC(O[C@H]32)(C)C)C=CC(=O)NC1=O GFDUSNQQMOENLR-PEBGCTIMSA-N 0.000 description 17
- XKPDAYWPKILAMO-UHFFFAOYSA-N 2',3'-O-Isopropylidene-Guanosine Natural products C1=NC(C(N=C(N)N2)=O)=C2N1C1OC(CO)C2OC(C)(C)OC21 XKPDAYWPKILAMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- GFDUSNQQMOENLR-UHFFFAOYSA-N 2',3'-O-Isopropylidene-Uridine Natural products C12OC(C)(C)OC2C(CO)OC1N1C=CC(=O)NC1=O GFDUSNQQMOENLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- XKPDAYWPKILAMO-IOSLPCCCSA-N 9-[(3ar,4r,6r,6ar)-6-(hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-3a,4,6,6a-tetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-4-yl]-2-amino-3h-purin-6-one Chemical compound C1=NC(C(N=C(N)N2)=O)=C2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H]2OC(C)(C)O[C@H]21 XKPDAYWPKILAMO-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 17
- LCCLUOXEZAHUNS-WOUKDFQISA-N [(3ar,4r,6r,6ar)-4-(6-aminopurin-9-yl)-2,2-dimethyl-3a,4,6,6a-tetrahydrofuro[3,4-d][1,3]dioxol-6-yl]methanol Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H]2OC(C)(C)O[C@H]21 LCCLUOXEZAHUNS-WOUKDFQISA-N 0.000 description 15
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 4
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 4
- COQRGFWWJBEXRC-UHFFFAOYSA-N hydron;methyl 2-aminoacetate;chloride Chemical compound Cl.COC(=O)CN COQRGFWWJBEXRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N l-alanyl ester Chemical compound COC(=O)[C@H](C)N DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- KUGLDBMQKZTXPW-JEDNCBNOSA-N methyl (2s)-2-amino-3-methylbutanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@@H](N)C(C)C KUGLDBMQKZTXPW-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 4
- SWVMLNPDTIFDDY-FVGYRXGTSA-N methyl (2s)-2-amino-3-phenylpropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 SWVMLNPDTIFDDY-FVGYRXGTSA-N 0.000 description 4
- QVDXUKJJGUSGLS-LURJTMIESA-N methyl L-leucinate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CC(C)C QVDXUKJJGUSGLS-LURJTMIESA-N 0.000 description 4
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical compound OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 2
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005864 Sulphur Substances 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- VSDUZFOSJDMAFZ-VIFPVBQESA-N methyl L-phenylalaninate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 VSDUZFOSJDMAFZ-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003582 thiophosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一种硫代磷酰氨基酸酯化合物，结构式为：其制备方法为首先将原料(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于四氢呋喃中，向上述溶液中加入氨基酸甲酯盐酸盐，再滴加缚酸剂，将2′，3′-O-异亚丙基核苷溶液加入上述溶液中，再滴加缚酸剂，反应完成后，过滤，旋转蒸馏，柱层析分离，即得硫代磷酰氨基酸酯化合物。
Description
本发明涉及一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法，尤其涉及2′，3′-O-异亚丙基核苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰氨基酸酯化合物的制备方法，该类化合物具有良好的生物活性和抗病毒、抗肿瘤、抗爱兹病毒等药物活性，可在临床应用中发展成为一种核苷类抗病毒、抗肿瘤、抗爱兹病毒前药(prodrugs)。
硫代磷酸在磷原子上含有一个硫取代氧的结构，虽然这个结构仍然保留着原来的电荷，保留着高水溶性的性质，但硫代磷酸的寡聚脱氧核糖核酸(S-oligos)的其他理化特性和生物学属性均与天然的磷酸二酯原型有很大的差别。最显著的差别之一是硫代磷酸对核酸酶具有抵抗性。由于细胞内外核酸酶的存在，很快消化掉了加入的磷酸二酯类反义寡聚核苷酸，使其丧失作用功能。通过合成具有抵抗核酸酶的硫代磷酸类化合物，对于今后应用合成的寡聚脱氧核糖核酸用于治疗目的，无疑是开辟了一条希望之路。
本发明的目的是提出一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法，具体地讲，是2′，3′-O-异亚丙基核苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰氨基酸酯化合物的制备方法，以用于开发抗病毒、抗肿瘤、抗爱兹病毒的活性药物。
本发明提出的2′，3′-O-异亚丙基核苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰氨基酸酯化合物，其结构式为：
上述结构式中R为H，CH3，C6H5CH2，(CH3)2CH2，(CH3)2CHCH2；B为腺嘌呤，鸟嘌呤，胞嘧啶，尿嘧啶。
上述化合物的制备方法，包括如下步骤：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃的条件下，将原料(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成浓度为0.8～1.0mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入与原料相同物质的量的氨基酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加缚酸剂三乙胺，缚酸剂的加入量是原料物质的量的2倍。
3)制备2′，3′-O-异亚丙基核苷溶液备用：
室温下取核苷悬浮于干燥的溶剂中配成0.5～1.0mol/L的溶液，边搅拌边向其中加入与核苷等物质的量的对甲苯磺酸和四倍物质的量的原甲酸三乙酯，体系变澄清后，用浓氨水与大量水进行中和使PH＝7～8，然后将上述溶液减压浓缩，在冰箱中静置过夜即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基核苷。将制得的2′，3′-O-异亚丙基核苷抽滤干燥后溶于溶剂中配制成0.5～1.0mol/L的溶液。
4)跟踪上述第二步的反应进程，待原料全部反应完毕以后，将与原料相同物质的量的上述第三步制备的2′，3′-O-异亚丙基核苷溶液慢慢滴入第二步的溶液中，搅拌均匀后继续滴加与原料相同物质的量的缚酸剂三乙胺。
5)监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。再用硅胶柱进行柱层析分离，即可得到2′，3′-O-异亚丙基核苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰氨基酸酯化合物。
用本发明的方法制备的2′，3′-O-异亚丙基核苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰氨基酸甲酯，是一类全新的具有抗爱兹病毒药物活性的化合物，通过合成不同种类的核苷-氨基酸缀合物，并进行活性实验，初步得到了满意的结果，为进一步研制和开发新型抗爱兹病毒药物提供了基础研究成果。
以下介绍本发明的实施例：
实施例1：制备2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰甘氨酸甲酯化合物，其中R为H，B为腺嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.125g)的甘氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)制备2′，3′-O-异亚丙基腺苷备用：
室温下取1mol(267g)腺苷悬浮于2L的丙酮中，搅拌下向其中加入1.1mol(210g)对甲苯磺酸和4mol(640ml)原甲酸三乙酯，约1小时后体系变澄清，用100ml浓氨水与5.9L水进行中和，然后将上述溶液减压浓缩至1.5L，在冰箱中静置过夜即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基腺苷266g(87％)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基腺苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测上述第二步的反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰甘氨酸甲酯，产率为58.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(DMSO-d6，δ：ppm，J：Hz)：δ60.38，61.02；
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ9.26，9.22(bs，1H，NH)，8.43(1H，s，H-2)，8.23(1H，s，H-8)，7.40(2H，s，NH2)，6.44(1H，m，H-1′)，4，50(2H，m，H-2′，3′)，3.97(1H，m，H-4′)，3.88(3H，s，OCH3)，3.64(2H，m，H-5′)，3.57(2H，m，H-α)，1.54(3H，s，CH3)，1.33(3H，s，CH3)；13C NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ173.24(
COOMe)，163.70(C-2)，150.43(C-4)，140.76(C-6)，117.02，116.96(＞CMe2)，101.76(C-1′)，87.74(C-5)，84.83(C-2′)，73.54(C-3′)，69.80(C-4′)，60.87(C-5′)，54.78(OCH3)，45.86(C-α)，26.40(CH3)，26.86(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 476(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 474(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
爱兹病毒＝Human immunodeficiency virus
MT-4＝Human leukenia T cell
CEM＝Human lymphoblastoid T cell
ED50＝抗病毒活性指标
CD50＝细胞毒性指标
ED50 CEM-TK- 5×10-3M (CD50 7×10-6M)
CEM-SS 4×10-3M (CD50 8×10-6M)
MT4 2×10-3M (CD50 8×10-6M)
实施例2：制备2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-硫代磷酰丙氨酸甲酯化合物，其中R为CH3，B为腺嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.14g)的丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基腺苷的合成同上述实施例(1)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基腺苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯，产率为62.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(DMSO-d6，δ：ppm，J：Hz)：δ57.86，57.03；
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ9.44，9.40(bs，1H，NH)，8.89(1H，s，H-2)，8.67(1H，s，H-8)，7.67(2H，s，NH2)，6.59(1H，m，H-1′)，4，78(2H，m，H-2′，3′)，4.22(1H，m，H-4′)，3.98(3H，s，OCH3)，3.85(2H，m，H-5′)，3.67(2H，m，H-α)，1.61(3H，s，CH3)，1.42(3H，s，CH3)，1.31，1.30(3H，d，3J＝6，β-CH3)；
13C NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ180.24(
COOMe)，170.70(C-2)，156.43(C-4)，149.76(C-6)，117.02，116.96(＞CMe2)，108.23(C-1′)，89.66(C-5)，85.87(C-2′)，76.23(C-3′)，69.66(C-4′)，61.23(C-5′)，54.78(OCH3)，50.73(C-α)，48.66(C-β)，26.40(CH3)，26.86(CH3)；ESI-MS (pos.)：m/z 487(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 489(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 4×10-3M (CD50 2×10-6M)
CEM-SS 6×10-3M (CD50 9×10-6M)
MT4 8×10-3M (CD50 6×10-6M)
实施例3：制备2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰苯丙氨酸甲酯化合物，其中R为C6H5CH2，B为腺嘌呤。
化合物的结构式：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.22g)的苯丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O.-异亚丙基腺苷的合成同上述实施例(1)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基腺苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰苯丙氨酸甲酯，产率为58.7％。
波谱数据如下：
31P NMR(DMSO-d6，δ：ppm，J：Hz)：δ58.64，58.33；
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ9.21，9.15(bs，1H，NH)，8.67(1H，s，H-2)，8.58(1H，s，H-8)，7.88(2H，s，NH2)，7.15-7.35(5H，m，Ph)，6.59(1H，m，H-1′)，4，55(2H，m，H-2′，3′)，4.37(1H，m，H-4′)，3.79(3H，s，OCH3)，3.66(2H，m，H-5′)，3.48(2H，m，H-α)，2.32(2H，m，H-β)，1.61(3H，s，CH3)，1.49(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ174.24(
COOMe)，170.60(C-2)，159.43(C-4)，148.36(Ph-jpso)，117.02，116.96(＞CMe2)，136.11(C-6)，135.12(Ph-para)，130.42(Ph-ortho)，119.91(Ph-meta)，108.23(C-1′)，89.65(C-5)，87.87(C-2′)，76.23(C-3′)，72.66(C-4′)，61.23(C-5′)，56.82(C-β)，56.78(OCH3)，52.73(C-α)，26.40(CH3)，23.80(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 565(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 563(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 8×10-3M (CD50 4×10-6M)
CEM-SS 9×10-3M (CD50 7×10-6M)
MT4 6×10-3M (CD50 8×10-6M)
实施例4：制备2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯化合物，其中R为(CH3)2CHCH2，B为腺嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.17g)的缬氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基腺苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
4)2′，3′-O-异亚丙基腺苷的合成同上述实施例(1)。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯，产率为55.2％。
波谱数据如下：
31P NMR(DMSO-d6，δ：ppm，J：Hz)：δ56.32，56.14；
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ9.44，9.40(bs，1H，NH)，8.67(1H，s，H-2)，8.58(1H，s，H-8)，7.54(2H，s，NH2)，6.59(1H，m，H-1′)，4，78(2H，m，H-2′，3′)，4.22(1H，m，H-4′)，3.98(3H，s，OCH3)，3.85(2H，m，H-5′)，3.67(1H，m，H-α)，3.45(1H，m，H-β)，1.61(3H，s，CH3)，1.42(3H，s，CH3)，1.31(3H，d，3J＝6，CH3)，1.25(3H，d，3J＝6，CH3)；
13C NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ172.24(
COOMe)，165.70(C-2)，159.43(C-4)，145.76(C-6)，117.02，116.96(＞CMe2)，108.23(C-1′)，89.66(C-5)，85.87(C-2′)，76.23(C-3′)，69.66(C-4′)，61.23(C-5′)，54.78(OCH3)，50.73(C-α)，48.66(C-β)，26.40(CH3)，26.86(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 518(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 516(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 5×10-3M (CD50 2×10-6M)
CEM-SS 6×10-3M (CD50 5×10-6M)
MT4 8×10-3M (CD50 6×10-6M)
实施例5：制备2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰亮氨酸甲酯化合物，其中R为(CH3)2CHCH2，B为腺嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.18g)的亮氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基腺苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
4)2′，3′-O-异亚丙基腺苷的合成同上述实施例(1)。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基腺苷5′-硫代磷酰亮氨酸甲酯，产率为53.2％。
波谱数据如下：
31P NMR(DMSO-d6，δ：ppm，J：Hz)：δ54.32，54.14；
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ9.31，9.27(bs，1H，NH)，8.67(1H，s，H-2)，8.58(1H，s，H-8)，7.54(2H，s，NH2)，6.59(1H，m，H-1′)，4，78(2H，m，H-2′，3′)，4.22(1H，m，H-4′)，3.98(3H，s，OCH3)，3.85(2H，m，H-5′)，3.67(1H，m，H-α)，3.45(1H，m，H-β)，3.21(1H，m，H-γ)，1.61(3H，s，CH3)，1.42(3H，s，CH3)，1.31(3H，d，3J＝6，CH3)，1.25(3H，d，3J＝6，CH3)；
13C NMR(500MHz，DMSO-d6)：δ172.24(
COOMe)，165.70(C-2)，159.43(C-4)，145.76(C-6)，116.02，115.96(＞CMe2)，109.23(C-1′)，89.66(C-5)，85.87(C-2′)，76.23(C-3′)，69.66(C-4′)，61.23(C-5′)，54.78(OCH3)，50.73(C-α)，48.66(C-β)，46.35(C-γ)，23.40(CH3)，22.86(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 531(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 529(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 5×10-3M (CD50 2×10-6M)
CEM-SS 2×10-3M (CD50 5×10-6M)
MT4 5×10-3M (CD50 9×10-6M)
实施例6：制备2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-硫代磷酰甘氨酸甲酯化合物，其中R为H，B为鸟嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.125g)的甘氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)制备2′，3′-O-异亚丙基鸟苷备用
室温下取1mol(286g)鸟苷悬浮于2L的丙酮中，搅拌下向其中加入1.1mol(210g)对甲苯磺酸和4mol(640ml)原甲酸三乙酯，约1小时后体系变澄清，用100ml浓氨水与5.9L水进行中和，此时产物2′，3′-O-异亚丙基鸟苷慢慢析出，室温下静置过夜，过滤后再用冰-水混合物充分洗涤，干燥后得到产物2′，3′-O-异亚丙基鸟苷240g(74％)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.323g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基鸟苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)二氯硫代磷酰甘氨酸甲酯，产率为58.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：856.68，56.39；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ8.18(1H，s，H-8)，5.82，5.81(1H，d，3J＝6.0，H-1′)，4，89(1H，m，H-2′)，4.23(1H，m，H-3′)，3.23(1H，m，H-4′)，3.54(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，3.54(2H，m，H-α)，1.66，1.65(3H，d，3J＝6.0，β-CH3)，1.35(3H，s，CH3)，1.33(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ172.31(
COOMe)，165.81(C-2)，158.67(C-6)，152.34(C-4)，139.66(C-8)，121.11(＞CMe2)，118.71(C-5)，89.42(C-4′)，86.25(C-1′)，73.55(C-3′)，70.82(C-2′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，50.62(C-β)，45.89(C-α)，28.66(CH3)，26.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 491(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 489(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 8×10-3M (CD50 6×10-6M)
CEM-SS 3×10-3M (CD50 4×10-6M)
MT4 6×10-3M (CD50 3×10-6M)
实施例7：2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯化合物的制备，其中R为CH3，B为鸟嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.140g)的丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基鸟苷的合成同上述实施例(6)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基鸟苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
4)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯，产率为52.3％。
波谱数据如下：
31P NMR CD2O，δ：ppm，J：Hz)：δ55.88，55.37；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ8.07(1H，s，H-8)，5.82，5.81(1H，d，3J＝6.0，H-1′)，4，51(1H，m，H-2′)，4.18(1H，m，H-3′)，3.94(1H，m，H-4′)，3.86(3H，s，OCH3)，3.68(2H，m，H-5′)，3.57(2H，m，H-α)，1.35(3H，s，CH3)，1.33(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ178.31(
COOMe)，156.81(C-2)，153.67(C-6)，151.34(C-4)，135.66(C-8)，120.11(＞CMe2)，116.71(C-5)，86.42(C-4′)，85.25(C-1′)，73.74(C-3′)，70.42(C-2′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，23.66(CH3)，23.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 506(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 504(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 6×10-3M (CD50 7×10-5M)
CEM-SS 6×10-3M (CD50 9×10-6M)
MT4 2×10-4M (CD50 7×10-5M)
实施例8：制备2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰苯丙氨酸甲酯化合物，其中R为C6H5CH2，B为鸟嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.21g)的苯丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基鸟苷的合成同上述实施例(6)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基鸟苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰苯丙氨酸甲酯，产率为50.3％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ57.18，56.89；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ8.07(1H，s，H-8)，7.25-7.41(5H，m，Ph)，5.79，5.78(1H，d，3J＝6.0，H-1′)，4，41(1H，m，H-2′)，4.18(1H，m，H-3′)，3.94(1H，m，H-4′)，3.86(3H，s，OCH3)，3.68(2H，m，H-5′)，3.57(2H，m，H-α)，2.27(2H，m，H-β)，1.21(3H，s，CH3)，1.17(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ180.31(
COOMe)，166.81(C-2)，161.67(C-6)，158.34(C-4)，151.26(Ph-jpso)，135.66(C-8)，130.07(Ph-para)，128.23(Ph-ortho)，118.45(Ph-meta)，108.11(＞CMe2)，96.71(C-5)，86.42(C-4′)，85.25(C-1′)，73.74(C-3′)，70.42(C-2′)，61.45(C-5′)，57.22(C-β)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，23.66(CH3)，23.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 581(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 579(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 6×10-3M (CD50 7×10-5M)
CEM-SS 6×10-3M (CD50 9×10-6M)
MT4 2×10-4M (CD50 7×10-5M)
实施例9：制备2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯化合物，其中R为(CH3)2CH2，B为鸟嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.170g)的缬氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基鸟苷的合成同上述实施例(6)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基鸟苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯，产率为56.2％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ58.86，58.27；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ9.07(1H，s，H-8)，6.82，6.81(1H，d，3J＝6.0，H-1′)，5，48(1H，m，H-2′)，4.95(1H，m，H-3′)，4.36(1H，m，H-4′)，3.86(3H，s，OCH3)，3.68(2H，m，H-5′)，3.57(2H，m， H-α)，3.45(1H，m，H-β)，1.35(3H，s，CH3)，1.31(3H，s，CH3)，1.16，1.15(3H，d，3J＝6.0，CH3)，1.06，1.05(3H，d，3J＝6.0，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ178.31(
COOMe)，156.81(C-2)，153.67(C-6)，151.34(C-4)，135.66(C-8)，120.11(＞CMe2)，116.71(C-5)，86.42(C-4′)，85.25(C-1′)，73.74(C-3′)，70.42(C-2′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，44.24(C-β)，23.66(CH3)，23.15(CH3)，21.26(CH3)，20.05(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 533(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 531(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 5×10-3M (CD50 6×10-5M)
CEM-SS 7×10-3M (CD50 9×10-6M)
MT4 4×10-4M (CD50 8×10-5M)
实施例10：制备2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰亮氨酸甲酯化合物，其中R为(CH3)2CHCH2，B为鸟嘌呤。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.180g)的亮氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基鸟苷的合成同上述实施例(6)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.31g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基鸟苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基鸟苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰亮氨酸甲酯，产率为50.2％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：HZ)：δ55.86，55.27；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ9.07(1H，s，H-8)，6.82，6.81(1H，d，3J＝6.0，H-1′)，5，48(1H，m，H-2′)，4.95(1H，m，H-3′)，4.36(1H，m，H-4′)，3.86(3H，s，OCH3)，3.68(2H，m，H-5′)，3.57(2H，m，H-α)，3.45(1H，m，H-β)，3.22(1H，m，H-γ)，1.35(3H，s，CH3)，1.31(3H，s，CH3)，1.16，1.15(3H，d，3J＝6.0，CH3)，1.06，1.05(3H，d，3J＝6.0，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ178.31(
COOMe)，166.81(C-2)，159.67(C-6)，156.34(C-4)，134.66(C-8)，117.11(＞CMe2)，116.71(C-5)，86.42(C-4′)，85.25(C-1′)，73.74(C-3′)，70.42(C-2′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，44.24(C-β)，41.24(C-γ)，21.26(CH3)，20.05(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 548(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 546(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 6×10-3M (CD50 6×10-5M)
CEM-SS 8×10-3M (CD50 8×10-6M)
MT4 8×10-4M (CD50 2×10-5M)
实施例11：制备2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰甘氨酸甲酯化合物，其中R为H，B为胞嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.125g)的甘氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)制备2′，3′-O-异亚丙基胞苷备用
室温下取1mol(244g)鸟苷悬浮于2L的丙酮中，搅拌下向其中加入1.1mol(210g)对甲苯磺酸和4mol(640ml)原甲酸三乙酯，约1小时后体系变澄清，加入1mol(84g)NaHCO3进行中和，继续搅拌15分钟，过滤后固体用丙酮洗涤，将滤液与洗涤液蒸干后得到产物2′，3′-O-异亚丙基胞苷慢慢析出，室温下静置过夜，过滤后再用冰-水混合物充分洗涤，干燥后得到产物2′，3′-O-异亚丙基胞苷263g(92％)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.282g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基胞苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰甘氨酸甲酯，产率为60.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ57.68，56.26；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.24(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.28(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.71(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.69(2H，m，H-α)，2.15(1H，H-2′)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ177.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，140.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，28.66(CH3)，26.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 451(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 449(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 8×10-4M (CD50 6×10-5M)
CEM-SS 6×10-3M (CD50 4×10-5M)
MT4 6×10-4M (CD50 3×10-6M)
实施例12：制备2′，3′O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯化合物，其中R为CH3，B为胞嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.14g)的丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基胞苷的合成同上述实施例11。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.282g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基胞苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯，产率为62.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ55.66，55.31；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.88(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.68(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.71(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.89(2H，m，H-α)，2.66(1H，H-2′)，1.45(3H，d，3J＝6，H-β)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ185.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，145.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，50.86(C-β)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，27.66(CH3)，24.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 464(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 462(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 5×10-3M (CD50 5×10-5M)
CEM-SS 5×10-3M (CD50 8×10-6M)
MT4 7×10-4M (CD50 3×10-6M)
实施例13：制备2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)二氯硫代磷酰苯丙氨酸甲酯化合物，其中R为C6H5CH2，B为胞嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.22g)的苯丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基胞苷的合成同上述实施例11。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.282g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基胞苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰苯丙氨酸甲酯，产率为56.7％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ58.71，58.13；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ8.22，8.21(1H，d，3J＝5.5，H-6)，7.29-7.41(5H，m，Ph)，7.03(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.66(1H，m，H-3′)，3.82(1H，m，H-4′)，3.58(3H，s，OCH3)，3.44(2H，m，H-5′)，2.89(2H，m，H-α)，2.66(1H，H-2′)，2.27(1H，m，H-β)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ180.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，146.36(Ph-jpso)，117.02，136.11(C-6)，137.12(Ph-para)，136.42(Ph-ortho)，122.91(Ph-meta)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，50.86(C-β)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，27.66(CH3)，24.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 540(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 538(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 5×10-4M (CD50 8×10-5M)
CEM-SS 6×10-4M (CD50 8×10-5M)
MT4 8×10-4M (CD50 7×10-6M)
实施例14：制备2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯化合物，其中R为(CH3)2CH2，B为胞嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.17g)的缬氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基胞苷的合成同上述实施例11。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.282g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基胞苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯，产率为52.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ56.98，56.21；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.63(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.61(1H，m，H-3′)，3.69(1H，m，H-4′)，3.76(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.89(2H，m，H-α)，2.66(1H，H-2′)，2.14(1H，m，H-β)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ185.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，145.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，50.86(C-β)，49.89(C-α)，46.21(C-β)，39.82(C-2′)，24.37(CH3)，23.22(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 506(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 504(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 5×10-4M (CD50 5×10-7M)
CEM-SS 5×10-4M (CD50 6×10-6M)
MT4 8×10-3M (CD50 3×10-5M)
实施例15：2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰亮氨酸甲酯化合物的制备，其中R为(CH3)2CHCH2，B为胞嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.18g)的亮氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基胞苷的合成同上述实施例11。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.282g)已溶于吡啶中的2′，3′-O-异亚丙基胞苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基胞苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰亮氨酸甲酯，产率为55.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ54.36，53.56；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.96，7.95(1H，d，3J＝6，H-6)，6.36(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.78(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.76(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，3.22(2H，m，H-α)，2.96(1H，H-2′)，2.77(1H，m，H-β)，2.39(1H，m，H-γ)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ185.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，145.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，88.25(C-1′)，85.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.88(OCH3)，50.86(C-β)，48.89(C-α)，46.21(C-γ)，39.82(C-2′)，23.39(CH3)，23.01(CH3)；ESI-MS(pos.)：m/z 508(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 506(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 5×10-3M (CD50 6×10-6M)
CEM-SS 8×10-4M (CD50 9×10-6M)
MT4 7×10-4M (CD50 8×10-6M)
实施例16：制备2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰甘氨酸甲酯化合物，其中R为H，B为尿嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.125g)的甘氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)制备2′，3′-O-异亚丙基尿苷备用
室温下取1mol(244g)尿苷悬浮于2L的丙酮中，搅拌下向其中加入1.1mol(210g)对甲苯磺酸和4mol(640ml)原甲酸三乙酯，约1小时后体系变澄清，加入1mol(84g)NaHCO3进行中和，继续搅拌15分钟，过滤后固体用丙酮洗涤，将滤液与洗涤液蒸干后得到产物2′，3′-O-异亚丙基尿苷慢慢析出，室温下静置过夜，过滤后再用冰-水混合物充分洗涤，过滤后滤液经减压蒸馏得到产物2′，3′-O-异亚丙基尿苷256g(90％)。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.284g)已溶于THF中的2′，3′-O-异亚丙基尿苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰甘氨酸甲酯，产率为63.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ57.68，56.26；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.24(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.28(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.71(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.69(2H，m，H-α)，2.15(1H，H-2′)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ177.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，140.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，28.66(CH3)，26.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 480(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 478(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 8×10-3M (CD50 9×10-5M)
CEM-SS 9×10-3M (CD50 8×10-5M)
MT4 8×10-4M (CD50 5×10-6M)
实施例17：制备2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯化合物，其中R为CH3，B为尿嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.14g)的丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基尿苷的合成同上述实验16。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.284g)已溶于THF中的2′，3′-O-异亚丙基尿苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯，产率为58.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ58.32，57.68；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.24(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.2g(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.71(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.69(2H，m，H-α)，2.15(1H，H-2′)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；13C NMR(500MHz，D2O)：δ177.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，140.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，28.66(CH3)，26.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 466(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 464(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 8×10-4M (CD50 9×10-4M)
CEM-SS 7×10-4M (CD50 6×10-5M)
MT4 8×10-3M (CD50 5×10-5M)
实施例18：2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰丙氨酸甲酯化合物的制备，其中R为C6H5CH2，B为尿嘧啶。
化合物的结构式：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.21g)的苯丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基尿苷的合成同上述实验16。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.284g)已溶于THF中的2′，3′-O-异亚丙基尿苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶
氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代
磷酰苯丙氨酸甲酯，产率为51.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ60.32，59.68；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.24(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.28(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.71(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.69(2H，m，H-α)，2.15(1H，H-2′)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ177.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，140.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，28.66(CH3)，26.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 542(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 540(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 6×10-4M (CD50 7×10-5M)
CEM-SS 9×10-3M (CD50 9×10-5M)
MT4 5×10-3M (CD50 6×10-4M)
实施例19：制备2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯化合物，其中R为(CH3)2CH2，B为尿嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.17g)的缬氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基尿苷的合成同上述实验16。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.284g)已溶于THF中的2′，3′-O-异亚丙基尿苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰缬氨酸甲酯，产率为66.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ60.82，59.98；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.24(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.28(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.71(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.69(2H，m，H-α)，2.15(1H，H-2′)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；13C NMR(500MHz，D2O)：δ177.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，140.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，28.66(CH3)，26.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 542(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 540(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 6×10-4M (CD50 7×10-5M)
CEM-SS 9×10-3M (CD50 9×10-5M)
MT4 5×10-3M (CD50 6×10-4M)
实施例20：制备2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰亮氨酸甲酯化合物，其中R为(CH3)2CHCH2，B为尿嘧啶。
化合物的结构式为：
化合物的合成步骤如下：
1)氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃，将1mmol(0.17g)的(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃(THF)中，配制成1mol/L的溶液。
2)向上述溶液中加入1mmol(0.18g)的亮氨酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加2mmol(0.2g)三乙胺。
3)2′，3′-O-异亚丙基尿苷的合成同上述实验16。
4)用核磁共振仪(NMR)跟踪上述第二步的反应进程，待(异丙氧基取代)二氯硫磷全部反应完毕以后，将1mmol(0.284g)已溶于THF中的2′，3′-O-异亚丙基尿苷慢慢滴入上述体系中，搅拌均匀后继续滴加1mmol(0.1g)三乙胺。
5)用NMR监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解。水解完成以后，用硅胶柱进行柱层析分离，洗脱剂为异丙醇∶氨水∶水＝33∶1∶1即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基尿苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰亮氨酸甲酯，产率为62.4％。
波谱数据如下：
31P NMR(D2O，δ：ppm，J：Hz)：δ59.87，59.68；
1H NMR(500MHz，D2O)：δ7.90，7.89(1H，d，3J＝5.5，H-6)，6.24(1H，m，H-1′)，5.84，5.83(1H，d，3J＝6，H-5)，4.28(1H，m，H-3′)，3.88(1H，m，H-4′)，3.71(3H，s，OCH3)，3.65(2H，m，H-5′)，2.69(2H，m，H-α)，2.15(1H，H-2′)，1.15(3H，s，CH3)，1.07(3H，s，CH3)；
13C NMR(500MHz，D2O)：δ177.63(
COOMe)，165.82(C-4)，158.13(C-2)，140.34(C-6)，121.11(＞CMe2)，93.71(C-5)，87.25(C-1′)，84.42(C-4′)，70.42(C-3′)，61.45(C-5′)，54.62(OCH3)，45.89(C-α)，39.82(C-2′)，28.66(CH3)，26.15(CH3)；
ESI-MS(pos.)：m/z 542(M+H)+；ESI-MS(neg.)：m/z 540(M-H)-.
该化合物在CEM细胞和MT-4细胞中的抗爱兹病毒-1活性实验
ED50 CEM-TK- 6×10-4M (CD50 7×10-5M)
CEM-SS 9×10-3M (CD50 9×10-5M)
MT4 5×10-3M (CD50 6×10-4M)
Claims (2)
1、一种2′，3′-O-异亚丙基核苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰氨基酸酯化合物，其特征在于该化合物的结构式为：
上述结构式中R为H、CH3、C6H5CH2、(CH3)2CH2或(CH3)2CHCH2中的任何一种；B为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶或尿嘧啶中的任何一种。
2、一种如权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤；
1)在氮气保护下，冰盐浴冷却至-4～-8℃的条件下，将原料(异丙氧基取代)二氯硫磷溶于已干燥过的四氢呋喃中，配制成浓度为0.8～1.0mol/L的溶液；
2)向上述溶液中加入与原料相同物质的量的氨基酸甲酯盐酸盐，搅拌均匀后慢慢滴加缚酸剂乙三胺，缚酸剂的加入量是原料物质的量的2倍；
3)制备2′，3′-O-异亚丙基核苷溶液备用：
室温下取核苷悬浮于干燥的溶剂中配成0.5～1.0mol/L的溶液，搅拌下向其中加入与核苷等物质的量的对甲苯磺酸和四倍物质的量的原甲酸三乙酯，体系变澄清后，用浓氨水与大量水进行中和使pH＝7～8，然后将上述溶液减压浓缩，在冰箱中静置过夜即可得到产物2′，3′-O-异亚丙基核苷，将制得的2′，3′-O-异亚丙基核苷抽滤干燥后溶于溶剂中配制成0.5～1.0mol/L的溶液；
4)跟踪上述第二步的反应进程，待原料全部反应完毕以后，将与原料相同物质的量的上述第三步制备的2′，3′-O-异亚丙基核苷溶液慢慢滴入第二步的溶液中，搅拌均匀后继续滴加与原料相同物质的量的缚酸剂；
5)监测反应完成后，过滤，旋转蒸馏除去溶剂及其他低沸点物质，最后用氨水进行水解，再用硅胶柱进行柱层析分离，即可得到2′，3′-O-异亚丙基核苷5′-(异丙氧基取代)硫代磷酰氨基酸酯化合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB011307846A CN1159332C (zh) | 2001-08-24 | 2001-08-24 | 一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB011307846A CN1159332C (zh) | 2001-08-24 | 2001-08-24 | 一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1337401A CN1337401A (zh) | 2002-02-27 |
| CN1159332C true CN1159332C (zh) | 2004-07-28 |
Family
ID=4670143
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB011307846A Expired - Fee Related CN1159332C (zh) | 2001-08-24 | 2001-08-24 | 一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1159332C (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BR112013005872A2 (pt) | 2010-09-22 | 2019-09-24 | Alios Biopharma Inc | compostos, composição farmacêutica e respectivos usos |
| AU2012358804B2 (en) | 2011-12-22 | 2018-04-19 | Alios Biopharma, Inc. | Substituted phosphorothioate nucleotide analogs |
| US8916538B2 (en) | 2012-03-21 | 2014-12-23 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Solid forms of a thiophosphoramidate nucleotide prodrug |
| EP2827876A4 (en) | 2012-03-22 | 2015-10-28 | Alios Biopharma Inc | PHARMACEUTICAL COMBINATIONS WITH A THIONUCLEOTIDE ANALOG |
-
2001
- 2001-08-24 CN CNB011307846A patent/CN1159332C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1337401A (zh) | 2002-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1040761C (zh) | 含乙基膦酸酯侧链的稠合含氮杂环衍生物含有它们的药物组合物及其应用 | |
| CN1159311C (zh) | 二氢嘧啶类化合物 | |
| CN1133642C (zh) | 核苷5’-硫代磷酰氨基酸酯化合物 | |
| CN1205220C (zh) | 新颖的环孢菌素 | |
| CN1122036C (zh) | 用于制备奥氮平的中间体和方法 | |
| CN1539828A (zh) | 含氮杂环羧酰胺衍生物或其盐 | |
| CN101050194A (zh) | 双环辛烷类衍生物、其制备方法及其在医药上的用途 | |
| CN1150419A (zh) | 新的法呢基转移酶抑制剂、其制法及其药物组合物 | |
| CN1038811A (zh) | 苯并吡喃衍生物及其制备方法 | |
| CN101080391A (zh) | 2－吡啶基乙基羧酰胺衍生物的制备方法 | |
| CN101048423A (zh) | 亚磷酰胺化合物及低聚核糖核酸的制备方法 | |
| CN1231472C (zh) | 嘧啶无环核苷衍生物、其制备方法及其用途 | |
| CN1049500A (zh) | 苯并吡喃化合物，其生产方法及药物组合物 | |
| CN87108160A (zh) | 制备和应用具有活性羰基的唾液酸衍生物的方法 | |
| CN1183156C (zh) | 杂环化合物、其中间体和弹性蛋白酶抑制剂 | |
| CN1190427C (zh) | 制备嘧啶衍生物的方法 | |
| CN1275966C (zh) | 吡啶并吡啶并吡咯并 [ 3 , 2 － g ]吡咯并 [ 3 , 4 － e ]吲哚和吡啶并吡咯并[ 2 , 3 － a ]吡咯并 [ 3 , 4 －c ]咔唑化合物 ,其制备方法以及其药物组合物 | |
| CN1878750A (zh) | 芳基烷基氨基甲酸酯衍生物、其制备方法和其在治疗学中的用途 | |
| CN1138583A (zh) | 9-取代的2-(2-正烷氧基苯基)-嘌呤-6-酮类化合物 | |
| CN1254334A (zh) | 新颖的对苯二甲酰胺衍生物 | |
| CN1159332C (zh) | 一种硫代磷酰氨基酸酯化合物及其制备方法 | |
| CN1805947A (zh) | 合成2－羟基－n , n－二甲基－3－[[2－[[1 ( r )－(5－甲基－2－呋喃基)丙基]氨基]－3 , 4－二氧代－1－环丁烯－1－基]氨基] 苯甲酰胺 | |
| CN85101425A (zh) | 带有次苯基的斯伯格埃林有关化合物及其制备方法 | |
| CN1216057C (zh) | 喜树碱类似物的衍生物及其制备方法 | |
| CN1020097C (zh) | 取代的苯衍生物的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |