CN115926019B

CN115926019B - 脱乙酰壳多糖衍生物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN115926019B
Application number: CN202310076157.1A
Authority: CN
Inventors: 张伟; 袁菊懋; 徐国金
Original assignee: Anhui Heben Biotechnology Co ltd; Hepburn Shixin Beijing Biotechnology Co ltd
Current assignee: Anhui Heben Biotechnology Co ltd; Hepburn Shixin Beijing Biotechnology Co ltd
Priority date: 2023-02-07
Filing date: 2023-02-07
Publication date: 2023-06-02
Anticipated expiration: 2043-02-07
Also published as: CN115926019A

Abstract

本发明涉及一种脱乙酰壳多糖衍生物及其制备方法和应用。该脱乙酰壳多糖衍生物包括：(1)脱乙酰壳多糖主链；(2)与所述主链通过醚键连接的基团A；以及(3)与所述主链通过酰胺键连接的基团B，其中，所述基团A具有一个或多个羟乙基，所述基团B具有一个或多个酰基和一个或多个氨基。本发明提供的脱乙酰壳多糖衍生物具有良好的促渗透效果，在护肤品领域具有广阔的应用前景。

Description

脱乙酰壳多糖衍生物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种脱乙酰壳多糖衍生物及其制备方法和应用。

背景技术

皮肤是人体最大的器官，其主要功能是发挥屏障作用和保护作用，一方面是保护肌肉和骨骼，发挥感觉功能、吸收功能及分泌功能；另一方面起到阻止外界有害物质进入皮肤。然而随着年龄的增加，人体的各项生理机能也随之降低，最为显著的表现就是面部皮肤的变化，包括干燥、无光泽、色素、皱纹等。研究证实，这些变化的出现一般都与皮肤细胞的衰老密切相关。为改善由于衰老导致的皮肤问题，通常使用的方法是使用护肤品加以改善。然而由于皮肤的屏障作用，护肤品中的功效物质难以进入皮肤内部，发挥其护肤作用。为解决这一问题，护肤品中一般使用如下方法：1.物理方法，即使用物理方法改变角质层结构，从而扩大透皮途径，如：离子导入、超声导入、微针、电穿孔等；2.化学方法，即使用化学或者中药，使其与角质层脂质相互作用以改变其排列结构从而增强功效物的渗透率，如：乙醇、氮酮、薄荷、冰片；3.药学促渗技术，主要包括：纳米技术、脂质体、微乳液技术等。但是目前这样的方法其渗透率有限，特别是对于大分子功效物的渗透率更是有限。如何进一步提升功效物的渗透率是护肤品亟待解决的问题之一。

甲壳素作为自然界中唯一带正电荷的高分子化合物，具有抗菌、抗炎、保湿等功效。因此，以甲壳素为原料制备了诸多可以用于护肤品的原料，包括水解壳多糖、脱乙酰壳多糖、羧甲基壳多糖等，但是这些壳多糖衍生物多是发挥抗菌、增稠等功能。未见壳聚糖衍生物作为促渗剂用于护肤品中的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种适合作为皮肤渗透剂的脱乙酰壳多糖衍生物。本发明的另一目的是提供该脱乙酰壳多糖衍生物的制备方法。本发明的又一目的是提供该脱乙酰壳多糖衍生物的用途。

在第一方面，本发明提供了一种脱乙酰壳多糖衍生物，包括：(1)脱乙酰壳多糖主链；(2)与所述主链通过醚键连接的基团A；以及(3)与所述主链通过酰胺键连接的基团B，其中，所述基团A具有一个或多个羟乙基，所述基团B具有一个或多个酰基和一个或多个氨基。

本发明通过在脱乙酰壳聚糖主链上修饰羟乙基，从而增加其与皮肤角质层中脂质的相容性；通过在脱乙酰壳聚糖主链的氨基上引入酰基和氨基，从而增加其正电荷量，以提高其电荷含量，进而获得结构可调节、负载量可调节的脱乙酰壳多糖衍生物。

根据本发明的实施方式，所述脱乙酰壳多糖衍生物具有如下结构单元1、结构单元2、结构单元3中的至少一种：

其中，结构单元1、2、3中，A表示所述基团A，B表示所述基团B。

在一些实施方式中，所述脱乙酰壳多糖衍生物具有所述结构单元1和2。在一些实施方式中，所述脱乙酰壳多糖衍生物具有所述结构单元3。在一些实施方式中，所述脱乙酰壳多糖衍生物具有所述结构单元1、2和3。

根据本发明的实施方式，所述基团A是聚乙二醇基团。聚乙二醇基团的平均分子量可以为164-5000Da。在一些实施例中，聚乙二醇基团的平均分子量可以为200Da、500Da、1000Da、1500Da、2000Da、2500Da、3000Da、3500Da、4000Da、4500Da、5000Da或其中任意二个数值之间的范围。

根据本发明的实施方式，所述基团A具有如下结构：

m≥1。

根据本发明的实施方式，m的取值范围是1-100，例如1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、90或其中任意两个数值之间的范围。

根据本发明的实施方式，所述基团B是氨基酸或多肽分子去掉一个羟基形成的基团。优选地，所述氨基酸选自选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸中的一种或多种。优选地，所述多肽选自二肽、三肽或四肽中的一种或多种。

根据本发明的实施方式，所述基团B具有如下结构：

其中羰基C＝O与脱乙酰壳多糖主链连接。

根据本发明的实施方式，所述基团B所述基团B为

根据本发明的实施方式，所述脱乙酰壳多糖衍生物的平均分子量为500-18000Da，优选537-18000Da。在一些实施例中，所述脱乙酰壳多糖衍生物的平均分子量可以为550Da、600Da、650Da、800Da、900Da、1000Da、1200Da、1500Da、2000Da、2500Da、3000Da、3500Da、4000Da、4500Da、5000Da、6000Da、8000Da、9000Da、10000Da或其中任意二个数值之间的范围。

在第二方面，本发明还提供了一种如上所述的脱乙酰壳多糖衍生物的制备方法，其包括如下步骤：

(a)将脱乙酰壳多糖与含基团A的化合物反应，得到接枝有基团A的脱乙酰壳多糖；

(b)将所述接枝基团A的脱乙酰壳多糖与含基团B的化合物进行缩合反应，得到所述脱乙酰壳多糖衍生物。

在本发明的一些实施方式中，含基团A的化合物为甲氧基聚乙二醇环氧乙烷。优选地，所述甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的平均分子量为176-5000Da，例如200Da、300Da、550Da、600Da、650Da、800Da、900Da、1000Da、1200Da、1500Da、2000Da、2500Da、3000Da、3500Da、4000Da、4500Da、5000Da或其中任意二个数值之间的范围。在一些实施例中，所述甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的平均分子量为1000-2500Da。在一些实施例中，所述甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的平均分子量为1500-2000Da。

在本发明的一些实施方式中，含基团B的化合物为氨基酸或多肽，优选地，所述氨基酸选自所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸中的一种或多种。优选地，所述多肽选自二肽、三肽或四肽中的一种或多种。

在本发明的一些实施方式中，含基团B的化合物为精氨酸或组氨酸。在一些实施例中，含基团B的化合物为精氨酸。

在本发明的一些实施方式中，步骤(a)中，所述反应的温度为至0-95℃，优选为20-35℃，例如25℃，反应时间可以为0.5-24小时，例如2小时、3小时、5小时、8小时、10小时、12小时、14小时、16小时等。

在本发明的一些实施方式中，步骤(a)中，所述脱乙酰壳多糖与甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的摩尔比为1:0.1-1。

在本发明的一些实施方式中，步骤(b)中，采用EDC和NHS作为缩合试剂。

优选地，所述含基团B的化合物与所述EDC的摩尔比为1：1-1.5。

优选地，所述含基团B的化合物与所述NHS的摩尔比为1：1-1.5。

在本发明的一些实施方式中，步骤(b)中，所述缩合反应的温度为0-4℃，反应时间可以为0.5-24小时，例如2小时、3小时、5小时、8小时、10小时、12小时、14小时、16小时等。

在本发明的一些实施方式中，步骤(a)中，所述脱乙酰壳多糖的平均分子量为537-18000Da在一些实施例中，所述脱乙酰壳多糖的平均分子量可以为550Da、600Da、650Da、800Da、900Da、1000Da、1200Da、1500Da、2000Da、2500Da、3000Da、3500Da、4000Da、4500Da、5000Da、6000Da、8000Da、9000Da、10000Da或其中任意二个数值之间的范围，例如1000-10000Da，1000-5000Da，或1000-3000Da。

在本发明的一些实施方式中，步骤(a)中使用的脱乙酰壳多糖通过包括如下步骤的制备方法获得：a1、将甲壳素水解，得到脱乙酰化产物；a2、将所述脱乙酰化产物进行氧化降解，得到所述脱乙酰壳多糖。

在本发明的一些实施方式中，步骤a1中，水解条件包括将甲壳素溶解于酸性溶液，然后加碱例如(氢氧化钠溶液)调节到碱性(例如pH至8-10)。酸性溶液可以是盐酸或醋酸溶液，pH优选在0-4之间。

在本发明的一些实施方式中，步骤a1中，所述甲壳素与酸性溶液的固液比为1:5-100。

在本发明的一些实施方式中，所述脱乙酰壳多糖的制备包括：将甲壳素溶于酸性溶液(盐酸、醋酸)中，溶液pH在0-4之间，所述甲克素与酸性溶液的固液比为1:5-100；上述甲壳素的酸性溶液中加入氢氧化钠溶液(20-60％)，调节pH至8-10，得沉淀1；将所得沉淀1，通过压滤、水洗等步骤获得沉淀2；将所得白色沉淀2加入反应釜中，加入氢氧化钠溶液，调节pH至8-9；再加入过氧化氢溶液；调节温度至0-95℃度，反应0.5-24小时，得悬浮液；将悬浮液通过离心，水洗，离心等步骤得沉淀3。

在本发明的一些实施方式中，所述脱乙酰壳多糖衍生物的制备包括：将脱乙酰壳多糖溶于水中，调节pH8-10；向其中加入甲氧基聚乙二醇环氧乙烷，调节反应温度至0-95℃，反应0.5-24小时，得透明液体；使用酸性溶液调节透明液体的pH至2-4后，透析后(MW-3000Da)，经冷冻干燥后得产物1；所述脱乙酰壳多糖与甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的摩尔比为1:0.1-1；

将氨基酸或者多肽溶于pH为2-6的PBS溶液(0.05M-1M)中，向其中加入EDC，NHS，0-4℃活化0.1-4h，再向其中加入产物1，控制温度反应0-24h；反应完成透析后(MW-3000Da)，经冷冻干燥后得产物2；其中氨基或者多肽与EDC和NHS的摩尔比为1:1～1.5。

本申请的实施方式中，通过氧化降解制备不同分子量的壳多糖、再通过在壳多糖表面修饰羟乙基，从而增加其与皮肤角质层中脂质的相容性；通过在氨基上修饰氨基酸(如：精氨酸、组氨酸)增加其正电荷量，从而提高其电荷含量，进而获得结构可调节、负载量可调节的脱乙酰壳多糖衍生物。

在第三方面，本发明提供了上述的脱乙酰壳多糖衍生物作为功效成分的促渗剂的用途。所述功效成分优选是皮肤用功效成分，包括但不限于：传明酸(氨甲环酸)、维生素C乙基醚、甘草黄酮、胶原蛋白、透明质酸钠等。优选地，脱乙酰壳多糖衍生物与功效成分的质量比为1:0.01-10。

在第四方面，本发明提供了一种护肤品，包括功效成分和上述的脱乙酰壳多糖衍生物。所述护肤品可以是水、乳、霜等。优选地，脱乙酰壳多糖衍生物与功效成分的质量比为1:0.01-10。

本发明提供的脱乙酰壳多糖衍生物可以有效的促进护肤品中功效物的透皮吸收，在护肤品领域具有广阔的应用前景。

附图说明

图1是实施例2制备的脱乙酰壳多糖衍生物的氢谱。

图2是实施例2制备的羟乙基脱乙酰壳多糖的氢谱。

图3是实施例2制备的脱乙酰壳多糖CS、羟乙基脱乙酰壳多糖QYJ-CS、脱乙酰壳多糖衍生物JAS-CS的红外谱图。

图4是实施例2制备的脱乙酰壳多糖衍生物的TEM图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例和附图，对本发明进行进一步的详细说明。此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于构成对本发明的任何限制。

实施例1脱乙酰壳多糖衍生物的合成

步骤一、取5克甲壳素溶于200ml 10％醋酸溶液中，调节pH为2，搅拌溶解后；加入40％NaOH水溶液，调节pH至8.5，得白色沉淀。将白色沉淀洗涤，压滤后，倒入三口烧瓶中，再加入过氧化氢20g和180mL水，调节温度至60℃，反应12小时，得乳白色液体，通过离心，水洗等步骤后得白色沉淀脱乙酰壳多糖。

步骤二、将脱乙酰壳多糖溶于50mL中，调节pH为9，然后加入0.5g甲氧基PEG环氧乙烷，调节反应温度至45℃，反应12小时，然后使用10％HCl溶液调节pH＝2，经透析(MW＝3000Da)，冷冻干燥后得产物羟乙基壳多糖4.5g。

步骤三、将精氨酸0.356g溶于pH＝5.0(0.1M)的缓冲溶液中，冰水浴(0℃)下，加入EDC0.44g，NHS 0.23g，冰浴下保持2h。再加入上步冷冻干燥物羟乙基壳多糖3g，室温下反应6h，经透析(MW＝3000Da)，冷冻干燥后得最终产物脱乙酰壳多糖衍生物。

实施例2脱乙酰壳多糖衍生物的合成

步骤一、取10克甲壳素溶于400ml 10％盐酸溶液中，调节pH为3，搅拌溶解后；加入50％NaOH水溶液，调节pH至8.5，得白色沉淀。将白色沉淀洗涤，压滤后，倒入三口烧瓶中，再加入过氧化氢30g和170mL水，调节温度至80℃，反应6小时，得乳白色液体，通过离心，水洗等步骤后得白色沉淀脱乙酰壳多糖(CS)。

步骤二、将白色沉淀溶于100mL中，调节pH为9，然后加入0.1g甲氧基PEG环氧乙烷，调节反应温度至60℃，反应6小时，然后使用10％HCl溶液调节pH＝4，经透析(MW＝3000Da)，冷冻干燥后得产物羟乙基壳多糖QYJ-CS 8.5g。

步骤三、将精氨酸0.712g溶于pH＝4.0(0.1M)的缓冲溶液中，冰水浴(0℃)下，加入EDC0.88g，NHS 0.46g，冰浴下保持2h。再加入上步冷冻干燥物羟乙基壳多糖4g，室温下反应12h，经透析(MW＝3000Da)，冷冻干燥后得最终产物脱乙酰壳多糖衍生物(精氨酸羟乙基壳多糖，简称JAS-CS)。

图1是步骤三的JAS-CS的¹HNMR谱图，图2是步骤二的QYJ-CS的¹HNMR谱图，图3示出了步骤一的脱乙酰壳多糖(CS)、以及步骤二的QYJ-CS和步骤三的JAS-CS红外谱图。

脱乙酰壳多糖衍生物的TEM照片如图4所示，可以看出脱乙酰壳多糖衍生物颗粒为纳米结构。

实施例3脱乙酰壳多糖衍生物的合成

步骤一、取15克甲壳素溶于400ml30％乙酸溶液中，调节pH为1，搅拌溶解后；加入20％NaOH水溶液，调节pH至8.5，得白色沉淀。将白色沉淀洗涤，压滤后，倒入三口烧瓶中，再加入过氧化氢50g和250mL水，调节温度至50℃，反应8小时，得乳白色液体，通过离心，水洗等步骤后得白色沉淀。

步骤二、将白色沉淀溶于300mL中，调节pH为8.5，然后加入1g甲氧基PEG环氧乙烷，调节反应温度至45℃，反应2小时，然后使用20％HCl溶液调节pH＝5.5，经透析(MW＝3000Da)，冷冻干燥后得产物12g。

步骤三、将精氨酸0.174g溶于pH＝5.5(0.1M)的缓冲溶液中，冰水浴(0℃)下，加入EDC0.24g，NHS 0.138g，冰浴下保持2h。再加入上步冷冻干燥物2g，室温下反应24h，经透析(MW＝3000Da)，冷冻干燥后得最终产物脱乙酰壳多糖衍生物。

应用例透皮效果测试：

所有的溶剂与试剂均为色谱级，标准品购买于上海源叶生物科技有限公司，具体见表1和表2。

表1实验试剂

表2实验仪器

1)样品处理步骤如下：按照表3配方加入到超纯水中，12000r/min转速下离心10min；取上清液于内衬管中。

2)体外释放和透皮试验方法

采用Franz扩散池，使用小型巴马猪离体皮肤，上室为供给池，下室为接受池。接收池容积为15mL，供给池内径为1.5cm，有效扩散面积1.766cm²，(37℃)恒温水浴，并以200r/min磁力恒速搅拌。试验时，在接受池内加满接受液(30％乙醇-生理氯化钠溶液)，小型巴马猪离体皮肤固定在两室之间，角质层朝上，使真皮层与接受液充分接触，排除气泡，在供给池中加入待测样品1ml(参见表3)。分别于6h时从取样管中精密吸取1mL接受液样品，吸取的样品经过0.45微米微孔滤膜过滤后直接进行HPLC分析。HPLC分析所用的仪器为waters2695型高效液相色谱仪，配备waters 2424蒸发光检测器。色谱柱为Diamonsil C18(2)(150*4.6mm,5μm)，流动相为乙腈：0.3％TFA水/7:93，漂移管温度85℃，喷雾器温度30℃，氮气流速25psi，增益100，流动相流速为1mL/min，柱温为35℃，进样量10μL。

以累计透过量为监测指标，按以下公式计算单位面积累计渗透量和透皮吸收百分率。

其中：Q_n为第n个取样时间点的累积释放量；W％为累计释放百分率；V₀为释放介质总体积；C_n为第n次取样液中药物浓度；C_i为第i次取样液中药物浓度；V_i为第i次取样液体积；S为透析袋中药物总质量；A为Franz扩散池有效扩散面积.

结果参见表3。

表3

结果表明，采用本发明的脱乙酰壳多糖衍生物作为促渗透剂与功效物氨基环酸混合，可以显著功效物的渗透率，可以提升20％；而且，相同条件下，相比其他参比物，本发明的脱乙酰壳多糖衍生物的促渗效果更加优异。

本发明的技术方案不限于上述具体实施例的限制，凡是根据本发明的技术方案做出的技术变形，均落入本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种脱乙酰壳多糖衍生物作为功效成分的促渗剂的用途，其中，所述功效成分是氨基环酸；所述脱乙酰壳多糖衍生物包括：(1)脱乙酰壳多糖主链；(2)与所述主链通过醚键连接的基团A；以及(3)与所述主链通过酰胺键连接的基团B，其中，所述基团A具有一个或多个羟乙基，所述基团B具有一个或多个酰基和一个或多个氨基；

所述脱乙酰壳多糖衍生物具有如下结构单元1、结构单元2中的至少一种：

其中，结构单元1、2中，A表示所述基团A，B表示所述基团B；

所述基团A具有如下结构：

m为1-100；

所述基团B是氨基酸或多肽分子去掉一个羟基形成的基团；

所述脱乙酰壳多糖衍生物的平均分子量为500-18000Da。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸中的一种或多种；和/或所述多肽选自二肽、三肽、四肽、五肽、六肽中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述基团B具有如下结构：

，其中羰基C=O与脱乙酰壳多糖主链连接。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述基团B为

。

5.根据权利要求1-3任一项所述的用途，其特征在于，所述脱乙酰壳多糖衍生物的制备方法，其包括如下步骤：

（a）将脱乙酰壳多糖与含基团A的化合物反应，得到接枝基团A的脱乙酰壳多糖；

（b）将所述接枝基团A的脱乙酰壳多糖与含基团B的化合物进行缩合反应，得到所述脱乙酰壳多糖衍生物。

6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述含基团A的化合物为甲氧基聚乙二醇环氧乙烷；和/或

所述含基团B的化合物为氨基酸或多肽。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的平均分子量为176-5000Da；和/或

所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸中的一种或多种，所述多肽选自二肽、三肽、四肽、五肽或六肽中的一种或多种。

8. 根据权利要求6所述的用途，其特征在于，步骤（a）中，所述反应的温度为0-95℃；时间为0.5-24小时；和/或

步骤（a）中，所述脱乙酰壳多糖的平均分子量为537-18000Da；和/或

步骤（a）中，所述脱乙酰壳多糖与甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的摩尔比为1：（0.1-1）；和/或

步骤（b）中，采用EDC和NHS作为缩合试剂；和/或

步骤（b）中，所述缩合反应的温度为0-4℃，时间为0.1-24小时。

9.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，步骤（a）中使用的脱乙酰壳多糖通过包括如下步骤的制备方法获得：a1、将甲壳素水解，得到脱乙酰化产物；a2、将所述脱乙酰化产物进行氧化降解，得到所述脱乙酰壳多糖。

10.一种护肤品，包括功效成分和脱乙酰壳多糖衍生物；所述功效成分是氨基环酸；

所述脱乙酰壳多糖衍生物包括：(1)脱乙酰壳多糖主链；(2)与所述主链通过醚键连接的基团A；以及(3)与所述主链通过酰胺键连接的基团B，其中，所述基团A具有一个或多个羟乙基，所述基团B具有一个或多个酰基和一个或多个氨基；

其中，结构单元1、2中，A表示所述基团A，B表示所述基团B；

所述基团A具有如下结构：

m为1-100；

所述基团B是氨基酸或多肽分子去掉一个羟基形成的基团；

所述脱乙酰壳多糖衍生物的平均分子量为500-18000Da。

11.根据权利要求10所述的护肤品，其特征在于，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸中的一种或多种；和/或所述多肽选自二肽、三肽、四肽、五肽、六肽中的一种或多种。

12.根据权利要求10所述的护肤品，其特征在于，所述基团B具有如下结构：

，其中羰基C=O与脱乙酰壳多糖主链连接。

13.根据权利要求10所述的护肤品，其特征在于，所述基团B为

。

14.根据权利要求10所述的护肤品，其特征在于，所述脱乙酰壳多糖衍生物的制备方法，其包括如下步骤：

15.根据权利要求14所述的的护肤品，其特征在于，所述含基团A的化合物为甲氧基聚乙二醇环氧乙烷；和/或

所述含基团B的化合物为氨基酸或多肽。

16.根据权利要求15所述的护肤品，其特征在于，所述甲氧基聚乙二醇环氧乙烷的平均分子量为176-5000Da；和/或

17. 根据权利要求15所述的护肤品，其特征在于，步骤（a）中，所述反应的温度为0-95℃；时间为0.5-24小时；和/或

步骤（b）中，采用EDC和NHS作为缩合试剂；和/或

18.根据权利要求14所述的护肤品，其特征在于，步骤（a）中使用的脱乙酰壳多糖通过包括如下步骤的制备方法获得：a1、将甲壳素水解，得到脱乙酰化产物；a2、将所述脱乙酰化产物进行氧化降解，得到所述脱乙酰壳多糖。