CN115916238A - 包含胰高血糖素/GLP-l/GIP受体三重激动剂或其缀合物的高血脂症预防或治疗组合物及其使用方法 - Google Patents

包含胰高血糖素/GLP-l/GIP受体三重激动剂或其缀合物的高血脂症预防或治疗组合物及其使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及三重激动剂或其长效缀合物针对高血脂症的治疗用途，该三重激动剂作用于胰高血糖素、GLP‑l和GIP受体全部。

Description

包含胰高血糖素/GLP-l/GIP受体三重激动剂或其缀合物的高血脂症预防或治疗组合物及其使用方法
技术领域
本发明涉及三重胰高血糖素/GLP-l/GIP受体激动剂或其缀合物的用于治疗高血脂症的用途。
背景技术
脂质包括胆固醇和甘油三酯，并且胆固醇分为低密度脂蛋白(LDL)胆固醇和高密度脂蛋白(HDL)胆固醇。关于这点，不同于其中血液中的胆固醇和甘油三酯水平超出正常范围(包括增加和减少)的血脂异常和其中血液中的总胆固醇水平高的高胆固醇血症，高血脂症是血液中的LDL胆固醇水平和甘油三酯水平中的一者高或两者均高的疾病的总称，并且区别于血脂异常和高胆固醇血症。因此，由于这些疾病的发病机制和患者状况彼此不同，需要采取不同的治疗和饮食控制方法。例如，在体内异常调节的脂质水平引起的血脂异常的情况下，异常低的胆固醇水平可能是个问题，并且以不同于高血脂症的方式经由饮食如摄取健康补充品的以增加生命活动所必需的胆固醇的水平是重要的。
当LDL胆固醇和/或甘油三酯的水平在血液中异常高时，其可能积聚在血管壁上，引起炎症，导致心血管疾病、脑血管疾病和外周动脉疾病。其中，心血管疾病和脑血管疾病以及癌症是韩国的三个主要死亡诱因。由于西式饮食习惯，高血脂症随着肥胖的上升而增加，并且高血脂症患者的数量在韩国每年增加10％。肥胖、饮酒等已知是高血脂症的诱因。其中，肥胖是最大的诱因。
为了预防和/或治疗高血脂症，已经做出各种努力来调节血脂水平。例如，他汀类(statins)——其通过作为HMG-辅酶A还原酶(HMGCR)抑制剂而对胆固醇合成具有抑制效果，依泽替米贝(ezetimibe)——其通过在小肠中抑制Niemann-Pick C1-Like 1(NPC1L1)而对胆固醇的再吸收具有抑制效果，以及依洛尤单抗(evolocumab)——其抑制前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9，PCSK9)(其抑制LDL吸收)已被开发并且用作治疗剂(US Endocrinology,2011；7(1):23–9,Am J Pharm Benefits.2010；2(4):267–274,N Engl J Med 2014；370:1809–1819)。
然而，利用他汀系药物治疗的不利之处在于胆固醇水平在许多情况下并未充分被其调节，并且高剂量或长期使用可导致肝毒性和肌病性障碍。使用依泽替米贝的不利之处在于其调节血脂水平的效果在临床实践中显著低于常规药物。依洛尤单抗据报导对在LDL受体(LDLR)中具有基因突变的患者无效。如上所述，由于目前商业化的药物仅作用于单一靶标，其在从具有基因突变的患者或具有非常高的高血脂症风险的患者的血液去除脂质时不是有效的。因此，需要开发作用于多个靶标并且在广范围的高血脂症患者中呈现功效的药物。
同时，胰高血糖素样肽-l(GLP-l)和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)，作为代表性胃肠激素和神经激素，是参与根据食物摄入调控血糖浓度的物质。胰高血糖素，作为胰腺分泌的肽激素，也与这两种物质一起参与调控血糖浓度和脂质代谢。
具体地，GLP-1，作为小肠在被食物摄入刺激时所分泌的激素，以血糖浓度依赖性方式促进胰腺分泌胰岛素并且帮助减低血糖浓度。此外，GLP-1作为饱腹感因子，以通过减缓胃的消化和延迟胃排空时间来减少食物摄入。此外，已经报导在被给予大鼠时减少食物摄入和减轻体重的效果，并且这些效果经确认在正常和肥胖情况中表现相同，从而表明作为肥胖症治疗剂的潜力。
与GLP-1一起，GIP，作为在食物摄入的剌激后分泌的胃肠激素，由42个氨基酸组成并且由小肠的K细胞分泌。已经报告GIP增加GLP-1的活性和抑制炎症的效果——通过抑制肠细胞中的载脂蛋白B48(ApoB48)，导致小肠所吸收的脂质在毛细管中的释放减少。
当血糖水平因其他药物或疾病或者激素或酶的缺陷而下降时，胰腺产生胰高血糖素。胰高血糖素发出信号用于肝脏中糖原分解和随后的葡萄糖释放，以起到使血糖水平增加到正常范围的作用。除了增加血糖水平的效果外，还已经报告了胰高血糖素对压抑动物和人类的食欲和促进褐变(browning)脂肪细胞以及能量消耗的效果。
发明内容
技术问题
本发明的一个目的是提供用于预防或治疗高血脂症的药物组合物，其包括对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的肽或其缀合物。
本发明的另一个目的是提供预防或治疗高血脂症的方法，包括向有需要的个体给予所述肽、其缀合物或包括其的组合物。
本发明的另一目的是提供所述肽、其缀合物或包括其的组合物在制备用于预防或治疗高血脂症的药物中的用途。
技术方案
本发明的一个方面提供用于预防或治疗高血脂症的药物组合物，其包括对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的肽。
在一个具体的实施方式中，该肽的特征在于，添加到其的氨基酸序列是衍生自天然GLP-1、天然GIP或天然exendin-4的氨基酸序列。
在另一个具体的实施方式中，其特征在于，该肽是包括下述通式1所示的氨基酸序列的肽：
Xaa1–Xaa2–Xaa3–Gly–Thr–Phe–Xaa7–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Xaa12–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Xaa27–Xaa28–Xaa29–Xaa30–R1(通式1，SEQ ID NO:103)
上述通式1中，该肽的特征在于，Xaa1是组氨酸(His，H)、4-咪唑乙酰基(CA)或酪氨酸(Tyr，Y)，Xaa2是甘氨酸(Gly，G)、α-甲基-谷氨酸或氨基异丁酸(Aib)，Xaa3是谷氨酸(Glu，E)或谷氨酰胺(Gln，Q)，Xaa7是苏氨酸(Thr，T)或异亮氨酸(IIe，I)，Xaa10是亮氨酸(Leu，L)、酪氨酸(Tyr，Y)、赖氨酸(Lys，K)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，Xaa12是赖氨酸(Lys，K)、丝氨酸(Ser，S)或异亮氨酸(Ile，I)，Xaa13是谷氨酰胺(Gln，Q)、酪氨酸(Tyr，Y)、丙氨酸(Ala，A)或半胱氨酸(Cys，C)，Xaa14是亮氨酸(Leu，L)、甲硫氨酸(Met，M)或酪氨酸(Tyr，Y)，Xaa15是半胱氨酸(Cys，C)、天冬氨酸(Asp，D)、谷氨酸(Glu，E)或亮氨酸(Leu，L)，Xaa16是甘氨酸(Gly，G)、谷氨酸(Glu，E)或丝氨酸(Ser，S)，Xaa17是谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)、异亮氨酸(Ile，I)、谷氨酸(Glu，E)、半胱氨酸(Cys，C)或赖氨酸(Lys，K)，Xaa18是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)或组氨酸(His，H)，Xaa19是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，Xaa20是赖氨酸(Lys，K)、谷氨酰胺(Gln，Q)或精氨酸(Arg，R)，Xaa21是谷氨酸(Glu，E)、谷氨酰胺(Gln，Q)、亮氨酸(Leu，L)、半胱氨酸(Cys)，C)或天冬氨酸(Asp，D)，Xaa23是异亮氨酸(Ile，I)或缬氨酸(Val，V)，Xaa24是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C))、天冬酰胺(Asn，N)、天冬氨酸(Asp，D)或谷氨酸(Glu，E)，Xaa27是缬氨酸(Val，V)、亮氨酸(Leu，L)、赖氨酸(Lys，K)或甲硫氨酸(Met，M)，Xaa28是半胱氨酸(Cys，C)、赖氨酸(Lys，K)、丙氨酸(Ala，A)、天冬酰胺(Asn，N)或天冬氨酸(Asp，D)，Xaa29是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、谷氨酰胺(Gln，Q)、苏氨酸(Thr，T)、谷氨酸(Glu，E)或组氨酸(His，H)，Xaa30是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、赖氨酸(Lys，K)或组氨酸(His，H)或不存在，以及
R1是半胱氨酸(Cys，C)、GKKNDWKHNIT(SEQ ID NO:106)、m–SSGAPPPS–n(SEQ IDNO:107)、或m–SSGQPPPS–n(SEQ ID NO:108)或不存在，其中m是–Cys–、–Pro–、或–Gly–Pro–、并且n是–Cys–、–Gly–、–Ser–、或–His–Gly–或不存在。
在根据任一具体实施方式的组合物中，该肽的特征在于，通式1中的Xaa14为亮氨酸或甲硫氨酸，并且Xaa15为半胱氨酸、天冬氨酸或亮氨酸。
在根据任一具体实施方式的组合物中，该肽的特征在于，在上述通式1中，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸、半胱氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸、亮氨酸、谷氨酸或天冬氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸、谷氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸、精氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是半胱氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、谷氨酸或天冬氨酸，以及Xaa27是亮氨酸或赖氨酸。
在根据任一具体实施方式的组合物中，其特征在于，该肽是包括以下通式2的氨基酸序列的肽。
Xaa1–Xaa2–Gln–Gly–Thr–Phe–Thr–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Lys–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Leu–Xaa28–Xaa29–Xa a30–Xaa31–Ser–Ser–Gly–Gln–Pro–Pro–Pro–Ser–Xaa40(通式2，SEQ ID NO:104)
上述通式2中，该肽的特征在于，Xaa1是4-咪唑乙酰基、组氨酸或酪氨酸，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa10是酪氨酸或半胱氨酸，Xaa13是丙氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸、甲硫氨酸或酪氨酸，Xaa15是天冬氨酸、谷氨酸或亮氨酸，Xaa16是甘氨酸、谷氨酸或丝氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa20是赖氨酸、谷氨酰胺或精氨酸，Xaa21是半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是半胱氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺或谷氨酸，Xaa28是赖氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa29是甘氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或组氨酸，Xaa30是半胱氨酸、甘氨酸、赖氨酸或组氨酸，Xaa31是脯氨酸或半胱氨酸，以及Xaa40是半胱氨酸或不存在。
在根据任一具体实施方式的组合物中，在上述通式1中，该肽的特征在于，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，以及Xaa27是亮氨酸或赖氨酸。
在根据任一具体实施方式的组合物中，在上述通式2中，该肽的特征在于，Xaa13是丙氨酸、酪氨酸或半胱氨酸，Xaa15是天冬氨酸或谷氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa21是半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是半胱氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺，Xaa28是半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa29是谷氨酰胺、半胱氨酸或组氨酸，以及Xaa30是半胱氨酸、赖氨酸或组氨酸。
在根据任一具体实施方式的组合物中，在上述通式1中，该肽的特征在于，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸或半胱氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa16是谷氨酸，Xaa17是精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸或天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是谷氨酰胺、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa27是亮氨酸，以及Xaa28是半胱氨酸、丙氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸。
在根据任一具体实施方式的组合物中，在上述通式1中，该肽的特征在于，Xaa1是组氨酸或4-咪唑乙酰基，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa3为谷氨酰胺，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸，Xaa12是异亮氨酸，Xaa13是丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是甲硫氨酸，Xaa15是天冬氨酸，Xaa16是谷氨酸，Xaa17是异亮氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸或组氨酸，Xaa19是谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸，Xaa21是天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是天冬酰胺，Xaa27是亮氨酸，Xaa28是丙氨酸或天冬酰胺，Xaa29是谷氨酰胺或苏氨酸，以及Xaa30是半胱氨酸或赖氨酸或不存在。
在根据任一具体实施方式的组合物中，其特征在于，该肽是包括以下通式3的氨基酸序列的肽。
Xaa1–Xaa2–Gln–Gly–Thr–Phe–Thr–Ser–Asp–Tyr–Ser–Lys–Xaa13–Leu–Asp–Glu–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Lys–Xaa21–Phe–Val–Xaa24–Trp–Leu–Leu–Xaa28–Xaa29–Xaa30–Xaa31–Ser–Ser–Gly–Gln–Pro–Pro–Pro–Ser–Xaa40(通式3，SEQ ID NO:105)
通式3中，该肽的特征在于，Xaa1是组氨酸或酪氨酸，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa13是丙氨酸、酪氨酸或半胱氨酸，Xaa17是精氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸或精氨酸，Xaa19是丙氨酸或半胱氨酸，Xaa21是谷氨酸或天冬氨酸，Xaa24是谷氨酰胺或天冬酰胺，Xaa28是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa29是半胱氨酸、组氨酸或谷氨酰胺，Xaa30是半胱氨酸或组氨酸，Xaa31是脯氨酸或半胱氨酸，以及Xaa40是半胱氨酸或不存在。
在根据任一具体实施方式的组合物中，该肽的特征在于，R1是半胱氨酸、GKKNDWKHNIT(SEQ ID NO:106)、CSSGQPPPS(SEQ ID NO:109)、GPSSGAPPPS(SEQ ID NO:110)、GPSSGAPPPSC(SEQ ID NO:111)、PSSGAPPPS(SEQ ID NO:112)、PSSGAPPPSG(SEQ IDNO:113)、PSSGAPPPSHG(SEQ ID NO:114)、PSSGAPPPSS(SEQ ID NO:115)、PSSGQPPPS(SEQ IDNO:116)、或PSSGQPPPSC(SEQ ID NO:117)或不存在。
在根据任一具体实施方式的组合物中，其特征在于，该肽包括选自SEQ ID NO:l至102的氨基酸序列。
在根据任一具体实施方式的组合物中，该肽的特征在于，在从通式的N端起第16位和第20位氨基酸之间形成环。
在根据任一具体实施方式的组合物中，该肽的特征在于，该肽的C端被酰胺化。
在根据任一具体实施方式的组合物中，其特征在于，该药物组合物具有增加LDL吸收、抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性以及促进脂肪酸降解的效果中的至少一种。
在根据任一具体实施方式的组合物中，在自给予该药物组合物24至48小时后，3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性小于50％。
在根据任一具体实施方式的组合物中，该药物组合物减少血液中的LDL水平和甘油三酯水平。
本发明的另一方面提供用于预防或治疗高血脂症的药物组合物，其包括包含所述肽的缀合物。
在一个具体的实施方式中，其特征在于，该缀合物是由以下化学式1表示:
[化学式1]
X-La-F
在化学式1中，
X是对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽，
L是聚乙二醇，其中a是0或自然数，并且当a是2或更大时，各个L是独立的，以及
F是免疫球蛋白Fc区。
在另一个具体的实施方式中，其特征在于，该肽是包括以下通式1表示的氨基酸序列的肽：
Xaa1–Xaa2–Xaa3–Gly–Thr–Phe–Xaa7–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Xaa12–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Xaa27–Xaa28–Xaa29–Xaa30–R1(通式1，SEQ ID NO:103)
在以上通式1中，
Xaa1是组氨酸(His，H)、4-咪唑乙酰基(CA)或酪氨酸(Tyr，Y)，
Xaa2是甘氨酸(Gly，G)、α-甲基-谷氨酸或氨基异丁酸(Aib)，
Xaa3是谷氨酸(Glu，E)或谷氨酰胺(Gln，Q)，
Xaa7是苏氨酸(Thr，T)或异亮氨酸(Ile，I)，
Xaa10是亮氨酸(Leu，L)、酪氨酸(Tyr，Y)、赖氨酸(Lys，K)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，
Xaa12是赖氨酸(Lys，K)、丝氨酸(Ser，S)或异亮氨酸(Ile，I)，
Xaa13是谷氨酰胺(Gln，Q)、酪氨酸(Tyr，Y)、丙氨酸(Ala，A)或半胱氨酸(Cys，C)，
Xaa14是亮氨酸(Leu，L)、甲硫氨酸(Met，M)或酪氨酸(Tyr，Y)，
Xaa15是半胱氨酸(Cys，C)、天冬氨酸(Asp，D)、谷氨酸(Glu，E)或亮氨酸(Leu，L)，
Xaa16是甘氨酸(Gly，G)、谷氨酸(Glu，E)或丝氨酸(Ser，S)，
Xaa17是谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)、异亮氨酸(Ile，I)、谷氨酸(Glu，E)、半胱氨酸(Cys，C)或赖氨酸(Lys，K)，
Xaa18是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)或组氨酸(His，H)，
Xaa19是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，
Xaa20是赖氨酸(Lys，K)、谷氨酰胺(Gln，Q)或精氨酸(Arg，R)，
Xaa21是谷氨酸(Glu，E)、谷氨酰胺(Gln，Q)、亮氨酸(Leu，L)、半胱氨酸(Cys，C)或天冬氨酸(Asp，D)，
Xaa23是异亮氨酸(Ile，I)或缬氨酸(Val，V)，
Xaa24是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C)、天冬酰胺(Asn，N)、天冬氨酸(Asp，D)或谷氨酸(Glu，E)，
Xaa27是缬氨酸(Val，V)、亮氨酸(Leu，L)、赖氨酸(Lys，K)或甲硫氨酸(Met，M)，
Xaa28是半胱氨酸(Cys，C)、赖氨酸(Lys，K)、丙氨酸(Ala，A)、天冬酰胺(Asn，N)或天冬氨酸(Asp，D)，
Xaa29是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、谷氨酰胺(Gln，Q)、苏氨酸(Thr，T)、谷氨酸(Glu，E)或组氨酸(His，H)，
Xaa30是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、赖氨酸(Lys，K)或组氨酸(His，H)，或不存在，以及
R1是半胱氨酸(Cys，C)、GKKNDWKHNIT(SEQ ID NO:106)、m–SSGAPPPS–n(SEQ IDNO:107)、或m–SSGQPPPS–n(SEQ ID NO:108)或不存在，
其中m是–Cys–、–Pro–、或–Gly–Pro–，以及
n是–Cys–、–Gly–、–Ser–、或–His–Gly–，或不存在。
在根据任一具体实施方式的组合物中，其特征在于，该药物组合物包括缀合物，其中上述通式1表示的肽是经由聚乙二醇与免疫球蛋白Fc区连接。
在根据任一具体实施方式的组合物中，其特征在于，该药物组合物包括增加LDL吸收、抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性以及促进脂肪酸降解的效果中的至少一种。
在根据任一具体实施方式的组合物中，在自给予该药物组合物24至48小时后，3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性小于50％。
在根据任一具体实施方式的组合物中，该药物组合物减少血液中的LDL水平和甘油三酯水平。
本发明的另一方面提供预防或治疗高血脂症的方法，其包括向有需要的个体给予所述肽、其缀合物或包含其的组合物。
本发明的另一方面提供所述肽、其缀合物或包含其的组合物在制备用于预防或治疗高血脂症的药物中的用途。
有益效果
本发明的三重激动剂的长效缀合物对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-l(GLP-l)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性，并且因此适用于高血脂症的治疗剂。
附图说明
图1是示例本发明的三重激动剂的长效缀合物对高血脂症的体内治疗效果的图。
图2是示例通过本发明的三重激动剂的长效缀合物增加LDL吸收的图。
图3是示例通过本发明的三重激动剂的长效缀合物抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性的图。
图4是示例本发明的三重激动剂的长效缀合物对促进脂肪酸降解的效果的图。
具体实施方式
以下将详细描述本发明。
同时，本文公开的各描述和实施方式可以适用于描述不同的描述和实施方式。即，本文公开的各种因素的所有组合都属于本发明的范围。此外，本发明的范围不应受限于下文提供的详细说明。
贯穿说明书，不仅使用用于天然存在的氨基酸的常规单字母和三字母代码，还使用总体上被允许用于其他氨基酸的那些三字母代码，如a-氨基异丁酸(Aib)、N-甲基甘氨酸(Sar)和α-甲基-谷氨酸。另外，本文中提及的氨基酸如下按照IUPAC-IUB的命名规则缩写。
丙氨酸Ala，A精氨酸Arg，R
天冬酰胺Asn，N天冬氨酸Asp，D
半胱氨酸Cys，C谷氨酸Glu，E
谷氨酰胺Gln，Q甘氨酸Gly，G
组氨酸His，H异亮氨酸Ile，I
亮氨酸Leu，L赖氨酸Lys，K
甲硫氨酸Met，M苯丙氨酸Phe，F
脯氨酸Pro，P丝氨酸Ser，S
苏氨酸Thr，T色氨酸Trp，W
酪氨酸Tyr，Y缬氨酸Val，V
本发明的一个方面提供用于预防或治疗高血脂症的药物组合物，其包括对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的肽。
其特征在于，本发明的三重激动剂对高血脂症具有治疗或预防效果。在本发明中，不同于血液中的胆固醇(低密度脂蛋白(LDL)胆固醇和高密度脂蛋白(HDL)胆固醇)和甘油三酯(其不是胆固醇，而是一种脂质)的水平超出正常范围(包括增加和减少)的血脂异常以及血液中的总胆固醇水平高的高胆固醇血症，高血脂症是血液中LDL胆固醇水平和甘油三酯水平中的一者或两者高的疾病的总称，并且区别于血脂异常和高胆固醇血症。例如，在LDL水平超过130mg/dL和/或甘油三酯水平超过200mg/dL的情况下，其可相应于高血脂症。
表1
Figure BDA0003968771460000081
Figure BDA0003968771460000091
在人类中，LDL胆固醇的正常范围是130mg/dL或更低，HDL胆固醇的正常范围是60mg/dL或更高，具体地，男性40mg/dL或更高，并且女性50mg/dL或更高；并且甘油三酯的正常范围是200mg/dL或更低。当一个人的水平(一个或多个)超出上述正常范围(一个或多个)时，可以理解为该人患有上表1中所述的疾病(一种或多种)。
治疗高血脂症所需的条件与治疗高胆固醇血症和血脂异常所需的条件的区别在于，有效治疗高血脂症需要显著优越的减少LDL和甘油三酯水平的效果，如上表1中所示。
在这方面，本发明的三重激动剂的特征在于，其可减少血液中的LDL胆固醇和/或甘油三酯的水平。
术语“对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽”可以与三重激动剂互换使用。
肽包括各种物质，例如，对胰高血糖素、GLP-1和GIP受体具有显著水平的活性的肽。
尽管不特别限于此，对胰高血糖素、GLP-1和GIP受体具有显著水平的活性的三重激动剂可呈现，与相应受体的天然配体(天然胰高血糖素、天然GLP-1和天然GIP)相比，对于胰高血糖素、GLP-1及GIP受体中的至少一种，具体地两种或更多种受体，更具体地全部三种受体，0.1％或更多、1％或更多、2％或更多、3％或更多、4％或更多、5％或更多、6％或更多、7％或更多、8％或更多、9％或更多、10％或更多、20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多、90％或更多或100％或更多的体外活性。
以下实验实施例1中描述的方法可用于测量三重激动剂的体外活性，但不限于此。
同时，其特征在于，该肽具有激活以下i)至iii)中的一种或多种、两种或更多种、具体地全部三种的能力，具体地显著水平的能力：
i)GLP-l受体；ii)胰高血糖素受体；以及iii)GIP受体。
在这方面，例如，受体的激活表示该肽，与天然配体相比，对于受体具有0.1％或更多、1％或更多、2％或更多、3％或更多、4％或更多、5％或更多、6％或更多、7％或更多、8％或更多、9％或更多、10％或更多、20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多、90％或更多或100％或更多的体外活性。然而，本发明不限于此。
根据本发明的组合物可以通过包括对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的分离的肽而具有增加LDL吸收、抑制胆固醇合成和促进脂肪酸降解的效果中的至少一种，从而对高血脂症具有优越的治疗效果。例如，自给予组合物24至48小时后，3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性可小于50％。
具体地，自向个体给予组合物24小时或更久(例如，24至48小时)后，3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性可以低于50％、低于40％或低于30％，并且这表明个体的体内胆固醇合成可被根据本发明的组合物抑制，并且从而提供对高血脂症的治疗效果。
此外，根据本发明的组合物可以减少血液中的LDL水平和甘油三酯水平，从而提供具体针对高血脂症的优越治疗效果。
此外，该肽可以具有与天然GLP-1、天然胰高血糖素和天然GIP中的一种相比增加的体内半衰期，但不限于此。
尽管不特别限于此，该肽可以是非天然存在的肽。
具体地，分离的肽可以是天然胰高血糖素的类似物，但不限于此。
本发明的天然胰高血糖素类似物可以包括在天然胰高血糖素的氨基酸序列中具有至少一个区别的肽、具有自天然胰高血糖素的氨基酸序列修饰的氨基酸序列的肽、和天然胰高血糖素的模拟物。
同时，虽然不特别限于此，天然胰高血糖素可具有以下氨基酸序列：
His–Ser–Gln–Gly–Thr–Phe–Thr–Ser–Asp–Tyr–Ser–Lys–Tyr–Leu–Asp–Ser–Arg–Arg–Ala–Gln–Asp–Phe–Val–Gln–Trp–Leu–Met–Asn–Thr(SEQ ID NO:118)
具体地，所述肽可以是天然胰高血糖素的类似物，其中天然胰高血糖素的氨基酸序列的一个或多个氨基酸通过取代、添加、缺失、修饰和其任何组合而变化，但不限于此。
此外，氨基酸的取代包括用不同的氨基酸或非天然化合物进行的取代。
此外，添加可以发生在肽的N端和/或C端。同时，添加的氨基酸的长度没有特别限制，而1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个或11个或更多个氨基酸可被添加至其，或者在宽范围内，多肽可以被添加至其，但不限于此。
更具体地，胰高血糖素类似物可以是这样的肽：其中选自天然胰高血糖素的氨基酸序列中的第1、2、3、7、10、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、23、24、27、28和29位氨基酸的1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、11个或更多个、12个或更多个、13个或更多个、14个或更多个、15个或更多个、16个或更多个、17个或更多个、18个或更多个、19个或更多个或20个氨基酸被不同的氨基酸取代，而且独立地或另外地，1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、或11个或更多个氨基酸被添加至其C端被添加至其C端，但不限于此。
甚至更具体地，胰高血糖素类似物可以是这样的肽：其中选自天然胰高血糖素的氨基酸序列中的第1、2、3、10、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、23、24、27、28和29位氨基酸的1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、11个或更多个、12个或更多个、13个或更多个、14个或更多个、15个或更多个、16个或更多个、17个或更多个、18个或更多个或19个氨基酸被不同的氨基酸取代，而且独立地或另外地，1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、或11个或更多个氨基酸被添加至其C端，但不限于此。
甚至更具体地，胰高血糖素类似物可以是这样的肽：其中选自天然胰高血糖素的氨基酸序列中的第1、2、3、10、13、14、15、16、17、18、19、20、21、23、24、28和29位氨基酸的1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、11个或更多个、12个或更多个、13个或更多个、14个或更多个、15个或更多个、16个或更多个或17个氨基酸被不同的氨基酸取代，而且独立或另外地，1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、或11个或更多个氨基酸被添加至其C端，但不限于此。
甚至更具体地，胰高血糖素类似物可以是这样的肽：其中选自天然胰高血糖素的氨基酸序列中的第1、2、13、16、17、18、19、20、21、23、24、27、28、29位氨基酸的1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、11个或更多个、12个或更多个、13个或更多个或14个氨基酸被不同的氨基酸取代，而且独立地或另外地，1个或更多个、2个或更多个、3个或更多个、4个或更多个、5个或更多个、6个或更多个、7个或更多个、8个或更多个、9个或更多个、10个或更多个、或11个或更多个氨基酸被添加至其C端，但不限于此。
引入天然胰高血糖素的氨基酸可选自酪氨酸、α-甲基-谷氨酸、Aib、甲硫氨酸、谷氨酸、组氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、丙氨酸、天冬氨酸和精氨酸，但不限于此。
例如，添加的氨基酸序列可以包括衍生自天然GLP-1、天然GIP或天然exendin-4的氨基酸序列的至少一种氨基酸序列。
胰高血糖素类似物或三重激动剂可包括分子内桥(例如，共价交联或非共价交联)，具体地是包括环的形式，例如在胰高血糖素类似物或三重激动剂的第16位与第20位氨基酸之间形成环的形式，但不限于此。
环的非限制性实例可包括内酰胺桥(或内酰胺环)。
此外，胰高血糖素类似物或三重激动剂包括被修饰以包括环或包括能够在目标位置形成环的氨基酸的那些全部。
例如，胰高血糖素类似物或三重激动剂可以是其中一对第16位和第20位氨基酸被能够形成环的谷氨酸或赖氨酸取代的胰高血糖素类似物或三重激动剂，但不限于此。
环可以在胰高血糖素类似物或三重激动剂中的氨基酸侧链之间形成，例如，内酰胺环可以在赖氨酸侧链和谷氨酸侧链之间形成，但不限于此。
通过组合这些方法制备的胰高血糖素类似物的实例可以包括对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性、与天然胰高血糖素具有至少一个不同的氨基酸、其中N端氨基酸残基的α-碳被去除的肽，但不限于此。根据本发明的天然胰高血糖素类似物可以通过组合用于制备类似物的各种方法来制备。
此外，虽然没有特别限制，但在本发明的肽中，一些氨基酸可以被不同的氨基酸或非天然化合物取代以避免被激动剂降解酶识别，以增加体内半衰期。
具体地，该肽可以是通过三重激动剂的氨基酸序列中的第2位氨基酸的取代以避免被激动剂降解酶识别而具有增加的体内半衰期的肽，但是任何避免被活生物体中的激动剂降解酶识别的氨基酸取代或修饰可被非限制地采用。
此外，用于制备天然胰高血糖素的类似物的这种变异包括利用L型或D型氨基酸和/或非天然氨基酸的变异；和/或天然序列的变异，例如侧链官能团的变异、分子内共价键(如侧链之间的成环)、甲基化、酰基化、泛素化、磷酸化、氨基己烷化(aminohexanation)和生物素化。
此外，变异包括其中一个或多个氨基酸被添加到天然胰高血糖素的氨基和/或羧基末端的那些全部。
取代或添加的氨基酸不仅可以是人类蛋白质中常见的20种氨基酸，而且可以是非典型氨基酸或非天然存在的氨基酸。非典型氨基酸的商业来源可包括Sigma-Aldrich、ChemPep Inc.和Genzyme Pharmaceuticals。包括这些氨基酸和一般肽序列的肽可被合成和购自商品供应商，例如American Peptide Company、Bachem或Anygen(Korea)。
氨基酸衍生物也可以同样的方式获得；例如，可以使用4-咪唑乙酸。
此外，根据本发明的肽可以是不同的形式，其中N端和/或C端被化学修饰或被有机基团保护，或者氨基酸可以被添加到所述肽的末端，用于在体内保护免受蛋白酶影响，同时增加其稳定性。
特别地，由于化学合成肽的N端和C端是带电荷的，N端可以被乙酰化和/或C端可以被酰胺化以去除电荷，但实施方式不限于此.
此外，根据本发明的肽包括所述肽本身、其盐(例如，所述肽的药学上可接受的盐)或其溶剂化物形式的那些全部。此外，所述肽可以是任何药学上可接受的形式。
盐的类型没有特别限制。然而，盐优选地是对个体(例如，哺乳动物)安全并且有效的形式，但不限于此。
术语“药学上可接受的”指代可以在药物医学决策范围内有效地用于预期用途而不引起过度毒性、刺激、过敏反应等的物质。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”指代衍生自药学上可接受的无机酸、有机酸或碱的盐。合适的酸的实例可以包括盐酸、溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、甲苯-p-磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸和苯磺酸。衍生自合适的碱的盐的实例可包括碱金属(如钠和钾)、碱土金属(如镁)、以及铵。
此外，如本文所用，术语“溶剂化物”指代根据本发明的肽或其盐和溶剂分子的复合物。
在本发明的另一具体实施方式中，所述肽可以包括由以下通式1表示的氨基酸序列。
Xaa1–Xaa2–Xaa3–Gly–Thr–Phe–Xaa7–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Xaa12–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Xaa27–Xaa28–Xaa29–Xaa30–R1(通式1,SEQ ID NO:103)
在上述通式1中，Xaa1是组氨酸、4-咪唑乙酰基或酪氨酸，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa3是谷氨酸或谷氨酰胺，Xaa7是苏氨酸或异亮氨酸，Xaa10是亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸、丝氨酸或异亮氨酸，Xaa13是谷氨酰胺、酪氨酸、丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸、甲硫氨酸或酪氨酸，Xaa15是半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或亮氨酸，Xaa16是甘氨酸、谷氨酸或丝氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa20是赖氨酸、谷氨酰胺或精氨酸，Xaa21是谷氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸或谷氨酸，Xaa27是缬氨酸、亮氨酸、赖氨酸或甲硫氨酸，Xaa28是半胱氨酸、赖氨酸、丙氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa29是半胱氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸、谷氨酸或组氨酸，Xaa30是半胱氨酸、甘氨酸、赖氨酸或组氨酸或不存在，以及
R1是半胱氨酸、GKKNDWKHNIT(SEQ ID NO:106)、m–SSGAPPPS–n(SEQ ID NO:107)、或m–SSGQPPPS–n(SEQ ID NO:108)或不存在，
其中m是–Cys–、–Pro–、或–Gly–Pro–、并且n是–Cys–、–Gly–、–Ser–、或–His–Gly–或不存在。
三重激动剂的实例可以包括包含选自SEQ ID NO:l至102的氨基酸序列的肽和(主要)由选自SEQ ID NO:l至102的氨基酸序列组成的肽，但不限于此。
此外，虽然在本发明中被描述为“由特定SEQ ID NO:组成的肽”，但其不排除可天然存在或通过在SEQ ID NO的氨基酸序列上游或下游添加无意义序列而存在的突变，或其沉默突变，只要该肽具有与由所述氨基酸序列组成的肽相同或等同的活性，并且即使存在这种序列添加或突变，其显然属于本发明的范围。
以上给出的描述也可以适用于本发明的其他具体实施方式或方面，但不限于此。
具体地，在以上通式1中，Xaa14可以是亮氨酸或甲硫氨酸，并且Xaa15可以是半胱氨酸、天冬氨酸或亮氨酸。
所述肽的实例可包括包含选自SEQ ID NO:l至12、14至17、和21至102的氨基酸序列或(主要)由其组成的肽，但不限于此。
所述肽可以是能够显著激活胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体的肽，但不限于此。具体地，所述肽可以是能够显著激活GLP-1以及另外地胰高血糖素受体和/或GIP受体的肽，但不限于此。
更具体地，在上述通式1中，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸、半胱氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸、亮氨酸、谷氨酸或天冬氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸、谷氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸、精氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是半胱氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、谷氨酸或天冬氨酸，以及Xaa27是亮氨酸或赖氨酸，但不限于此。
甚至更具体地，在以上通式1中，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸:，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，以及Xaa27是亮氨酸或赖氨酸，但不限于此。
甚至更具体地，在以上通式1中，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸或半胱氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa16是谷氨酸，Xaa17是精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸或天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是谷氨酰胺、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa27是亮氨酸，以及Xaa28是半胱氨酸、丙氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸。
具体地，在上述通式1中，Xaa1是组氨酸或4-咪唑乙酰基，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa3是谷氨酰胺，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸，Xaa12是异亮氨酸，Xaa13是丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是甲硫氨酸，Xaa15是天冬氨酸，Xaa16是谷氨酸，Xaa17是异亮氨酸或赖氨酸，’Xaa18是丙氨酸或组氨酸，Xaa19是谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸，Xaa21是天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是天冬酰胺，Xaa27是亮氨酸，Xaa28是丙氨酸或天冬酰胺，Xaa29是谷氨酰胺或苏氨酸，以及Xaa30是半胱氨酸或赖氨酸或不存在。
更具体地，在上述通式1中，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa3是谷氨酰胺，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸，Xaa13是酪氨酸，Xaa14是亮氨酸，Xaa15是天冬氨酸，Xaa16是甘氨酸、谷氨酸或丝氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸或谷氨酰胺，Xaa20是赖氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa27是亮氨酸或赖氨酸，以及Xaa29是甘氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸或组氨酸，但不限于此。
所述肽可以是具有显著的激活GLP-1受体和胰高血糖素受体的能力以及更高的激活GIP受体的能力的肽；具有显著的激活GLP-1受体、胰高血糖素受体和GIP受体的能力的肽；或具有显著的激活GLP-1受体和GIP受体的能力以及更高的激活胰高血糖素受体的能力的肽，但不限于此。
肽的实例可包括包含选自SEQ ID NO:8、9、21至37、39、42、43、49至61、64至83、85、86、88、89、91至93、和95至102的氨基酸序列或(主要)由其组成的肽，但不限于此。
在一个具体的实施方式中，所述肽可以包括由以下通式2表示的氨基酸序列。
Xaa1–Xaa2–Gln–Gly–Thr–Phe–Thr–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Lys–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Leu–Xaa28–Xaa29–Xa a30–Xaa31–Ser–Ser–Gly–Gln–Pro–Pro–Pro–Ser–Xaa40(通式2，SEQ ID NO:104)
在上述通式2中，Xaa1是4-咪唑乙酰基、组氨酸或酪氨酸；Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib；Xaa10是酪氨酸或半胱氨酸；Xaa13是丙氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸或半胱氨酸；Xaa14是亮氨酸、甲硫氨酸或酪氨酸；Xaa15是天冬氨酸、谷氨酸或亮氨酸；Xaa16是甘氨酸、谷氨酸或丝氨酸；Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸或赖氨酸；Xaa18是丙氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或组氨酸；Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或缬氨酸；Xaa20是赖氨酸、谷氨酰胺或精氨酸；Xaa21是半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸；Xaa24是半胱氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺或谷氨酸；Xaa28是赖氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸；Xaa29是甘氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或组氨酸；Xaa30是半胱氨酸、甘氨酸、赖氨酸或组氨酸；Xaa31是脯氨酸或半胱氨酸；以及Xaa40是半胱氨酸，或不存在。
更具体地，在上述通式2中，Xaa13是丙氨酸、酪氨酸或半胱氨酸；Xaa15是天冬氨酸或谷氨酸；Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、半胱氨酸或赖氨酸；Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸；Xaa21是半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺或天冬氨酸；Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸；Xaa24是半胱氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺；Xaa28是半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸；Xaa29是谷氨酰胺、半胱氨酸或组氨酸；以及Xaa30是半胱氨酸、赖氨酸或组氨酸。
所述肽的实例可以包括包含选自SEQ ID NO:21、22、42、43、50、64至77、和95至102的氨基酸序列，更具体地，选自SEQ ID NO:21、22、42、43、50、64至77、和96至102的氨基酸序列，或(主要)由其组成的肽，但不限于此。
在一个具体实施方式中，所述肽可以包括以下通式3的氨基酸序列。
Xaa1–Xaa2–Gln–Gly–Thr–Phe–Thr–Ser–Asp–Tyr–Ser–Lys–Xaa13–Leu–Asp–Glu–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Lys–Xaa21–Phe–Val–Xaa24–Trp–Leu–Leu–Xaa28–Xaa29–Xaa30–Xaa31–Ser–Ser–Gly–Gln–Pro–Pro–Pro–Ser–Xaa40(通式3，SEQ ID NO:105)
上述通式3中，Xaa1是组氨酸或酪氨酸；Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib；Xaa13是丙氨酸、酪氨酸或半胱氨酸；Xaa17是精氨酸、半胱氨酸或赖氨酸；Xaa18是丙氨酸或精氨酸；Xaa19是丙氨酸或半胱氨酸；Xaa21是谷氨酸或天冬氨酸；Xaa24是谷氨酰胺或天冬酰胺；Xaa28是半胱氨酸或天冬氨酸；Xaa29是半胱氨酸、组氨酸或谷氨酰胺；Xaa30是半胱氨酸或组氨酸；Xaa31是脯氨酸或半胱氨酸；以及Xaa40是半胱氨酸或不存在。
所述肽的实例可以是包括选自SEQ ID NO:21、22、42、43、50、64至71、75至77、和96至102的氨基酸序列或(主要)由其组成的肽，但不限于此。
此外，在上述通式1中，R1是半胱氨酸、GKKNDWKHNIT(SEQ ID NO:106)、CSSGQPPPS(SEQ ID NO:109)、GPSSGAPPPS(SEQ ID NO:110)、GPSSGAPPPSC(SEQ ID NO:111)、PSSGAPPPS(SEQ ID NO:112)、PSSGAPPPSG(SEQ ID NO:113)、PSSGAPPPSHG(SEQ ID NO:114)、PSSGAPPPSS(SEQ ID NO:115)、PSSGQPPPS(SEQ ID NO:116)、或PSSGQPPPSC(SEQ IDNO:117)，或不存在，但不限于此。
此外，本发明的肽可以根据长度通过本领域公知的方法合成，例如通过自动肽合成仪，并且可以通过基因工程技术来制备。
具体地，本发明的肽可以通过标准合成方法、重组表达系统或本领域已知的任何其他方法来制备。因此，根据本发明的肽可以通过多种方法合成，包括以下方法：
(a)通过固相或液相方法以逐步或片段组装方式合成肽，然后分离和纯化最终肽产物的方法；
(b)在宿主细胞中表达编码肽的核酸构建体并且从宿主细胞培养物中回收表达产物的方法；
(c)进行编码肽的核酸构建体的体外无细胞表达并且从中回收表达产物的方法；或者
通过方法(a)、(b)和(c)的任何组合的方式获得肽片段，通过连接肽片段而获得肽，并且然后回收所述肽的方法。
此外，对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽可以是缀合物形式，其中能够增加所述肽的体内半衰期的生物相容性材料被连接到对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽。贯穿说明书，生物相容性材料可以与载体互换使用。
在本发明中，肽缀合物可以呈现与未连接到载体的肽相比增加的长效效果，并且贯穿说明书，缀合物被称为“长效缀合物”。
同时，所述缀合物可以是非天然存在的缀合物。
本发明的另一方面提供用于预防或治疗高血脂症的药物组合物，其包括缀合物，该缀合物包括对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-l(GLP-l)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的肽。
在本发明的一个具体实施方式中，缀合物是由以下化学式1表示的缀合物：
[化学式1]
X-La-F
在化学式1中，X是对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽；L为聚乙二醇；a为0或自然数，其中当a为2或更大时，各L是独立的；并且F是免疫球蛋白Fc区。
在缀合物中，X，即对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽，如上所述。
在缀合物中，F是能够增加X(即，对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽)的半衰期的物质，相应于构成本发明的缀合物的一部分的组分。
F和X可以通过共价化学键或非共价化学键彼此连接，并且F和X可以经由L通过共价化学键、非共价化学键、或其任何组合彼此连接。
免疫球蛋白Fc区可以具体地是IgG Fc区，但不限于此。
在本发明的一个具体实施方式中，F(免疫球蛋白Fc区)可以具有由两条多肽链组成的二聚体结构，其中L的一端可以与所述两条多肽链中的仅一条连接，但不限于此。
本发明的肽中的至少一个氨基酸侧链可以被附接至生物相容性材料，以增加其体内溶解度和/或半衰期，和/或增加其生物利用度。这些修饰可减少治疗性蛋白质和肽的清除率。
生物相容性材料可以是水溶性的(两亲性或亲水性)、无毒的和/或药学上可接受的。
F可以直接(即，在化学式1中a为0)或经由连接体(L)连接至X。
具体地，L可以是聚乙二醇连接体，其是非肽基连接体。如本文所用，术语“聚乙二醇连接体”包括其中两个或更多个乙二醇重复单元结合在一起的生物相容性聚合物。重复单元经任意的共价键(不是肽键)彼此连接。聚乙二醇连接体可以是构成本发明缀合物一部分的一个构造，并且其相应于化学式1中的L。
在La中，a可以是1或更大，并且当a为2或更大时，各L可以是独立的。
此外，在具体的实施方式中，缀合物可以这样的缀合物：其中F通过共价键经由非肽基连接体连接至X，该非肽基连接体两端包括分别能够与F(具体地免疫球蛋白Fc区)和X(具体地肽药物)键合的反应基团。
具体地，L(即，聚乙二醇连接体)可以是含有乙二醇重复单元的连接体(例如，聚乙二醇)，但不限于此。在本说明书中，聚乙二醇是总称，包括乙二醇均聚物、PEG共聚物和单甲基取代的PEG聚合物(mPEG)的全部形式，但不特别限于此。此外，本领域已知的那些衍生物和在本领域技术人员的技术水平上可以容易制备的衍生物被包括在本发明的范围内。
聚乙二醇连接体可以是这样的聚乙二醇连接体：末端处包括用于制备缀合物的官能团，同时包括乙二醇重复单元。根据本发明的长效缀合物可以是其中X和F通过官能团连接的形式，但不限于此。在本发明中，非肽基连接体可以包括两个或三个或更多个官能团，并且各官能团可以彼此相同或不同，但不限于此。
具体地，连接体可以是由以下化学式2表示的聚乙二醇(PEG)，但不限于此：
[化学式2]
Figure BDA0003968771460000171
其中n是10至2,400，n是10至480，或n是50至250，但不限于此。
在上述长效缀合物中，PEG部分可以不仅包括–(CH2CH2O)n–结构，还包括插入在连接元件和–(CH2CH2O)n–结构之间的氧原子，但不限于此。
此外，在具体的实施方式中，长效缀合物可以具有这样的结构：其中本发明的肽(X)和免疫球蛋白片段(F)通过共价键经由含有乙二醇重复单元的连接体(L)连接，但不限于此。
非肽聚合物的分子量可以在大于0kDa到200kDa的范围内，具体地约1kDa至约100kDa、约1kDa至约50kDa、约1kDa至约30kDa、约2kDa至约30kDa、约1kDa至约20kDa，更具体地约3.4kDa至约10kDa，还更具体地约3.4kDa，但不限于此。
如本文所用，术语“约”指代包括±0.5、±0.4、±0.3、±0.2、±0.1等全部的范围，并且其包括紧随术语“约”之后的那些值的等值或相似范围内的那些值全部，但不限于此。
除了聚乙二醇的外，任何已知的其衍生物以及容易通过本领域已知的技术制备的任何衍生物也落入本发明的范围。
此外，与F相应的多肽连接的本发明的非肽基连接体不仅可以是一种类型的聚合物，也可以是不同类型的聚合物的组合。
在具体实施方式中，非肽基连接体的两端可以分别连接至F(例如免疫球蛋白Fc区)的胺基或硫醇基和X的胺基或硫醇基。
具体地，非肽基聚合物可以包括在两端的反应性基团，其分别连接至F(例如，免疫球蛋白Fc区)和X，具体地X或F(例如，免疫球蛋白Fc区)的N端或赖氨酸的胺基和半胱氨酸的硫醇基，但不限于此。
此外，能够与F(例如，免疫球蛋白Fc区)和X连接的非肽基聚合物的反应基团可以选自醛基、马来酰亚胺基和琥珀酰亚胺衍生物，但不限于此。
在以上描述中，醛基可以是丙醛基或丁醛基，但不限于此。
在以上描述中，琥珀酰亚胺衍生物可以是琥珀酰亚胺戊酸(酯)基、琥珀酰亚胺甲基丁酸(酯)基、琥珀酰亚胺甲基丙酸(酯)基、琥珀酰亚胺丁酸(酯)基、琥珀酰亚胺丙酸(酯)基、N-羟基琥珀酰亚胺、羟基琥珀酰亚胺基、琥珀酰亚胺基羧基甲基或琥珀酰亚胺基碳酸(酯)基，但不限于此。
非肽基连接体可经由这种反应性基团连接至X和F，但不限于此。
另外，经由醛键通过还原性胺化产生的最终产物比通过酰胺键形成的产物更稳定。醛反应性基团在低pH值下选择性地与N端反应，而在高pH值(例如在9.0的pH值)下与赖氨酸残基形成共价键。
此外，非肽基连接体两端的反应性基团可以相同或不同，例如，可以在一端提供马来酰亚胺基团，并且可以在另一端提供醛基、丙醛基或丁醛基。然而，反应性基团没有特别限制，只要F(具体地免疫球蛋白Fc区)和X可以连接到非肽连接体的对应末端。
例如，非肽连接体可以在一端包含马来酰亚胺基并且在另一端包含醛基、丙醛基或丁醛基，作为反应性基团。
当使用两端具有羟基反应性基团的聚乙二醇作为非肽聚合物时，可以通过已知的化学反应通过将羟基激活成各种反应性基团，或使用具有修饰的反应性基团的市售聚乙二醇，来制备根据本发明的长效蛋白质缀合物。
在一个具体的实施方式中，非肽聚合物可以被连接到X的半胱氨酸残基，更具体地X的半胱氨酸的-SH基团，但不限于此。
例如，非肽基聚合物可以被连接至X相应的肽的位于第10位的半胱氨酸残基、位于第13位的半胱氨酸残基、位于第15位的半胱氨酸残基、位于第17位的半胱氨酸残基、位于第19位的半胱氨酸残基、位于第21位的半胱氨酸残基、位于第24位的半胱氨酸残基、位于第28位的半胱氨酸残基、位于第29位的半胱氨酸残基、位于第30位的半胱氨酸残基、位于第31位的半胱氨酸残基、位于第40位的半胱氨酸残基或位于第41位的半胱氨酸残基，但不限于此。
具体地，非肽基聚合物的反应性基团可以被连接到半胱氨酸残基的-SH基团，并且该反应性基团如上所述。当使用马来酰亚胺-PEG-醛时，马来酰亚胺基团可以经由硫醚键连接到X的-SH基团，以及醛基可以经由还原性胺化连接到F(具体地免疫球蛋白Fc区)的-NH2基团，但此仅为实例，并且本发明不限于此。
另外，在缀合物中，非肽聚合物的反应性基团可以被连接至位于免疫球蛋白Fc区的N端处的-NH2基团，但此仅为实例。
如本文所用，术语“免疫球蛋白Fc区”指代包括免疫球蛋白的重链恒定区2(CH2)和/或重链恒定区3(CH3)，不包括重链和轻链可变区的区域。免疫球蛋白Fc区可以是构成本发明的缀合物一部分的组分。
在本说明书中，Fc区不仅包括通过全长免疫球蛋白的木瓜蛋白酶消化而获得的Fc片段的天然序列，还包括Fc片段的天然序列的衍生物(例如，其中天然序列中的一个或多个氨基酸残基通过缺失(例如，铰链区的一部分缺失)、插入、非保守或保守取代或其组合而被修饰的序列)。在本说明书中，术语“生物相容性材料”或“载体”可以指代Fc区。
F具有其中两条多肽链通过二硫键连接的结构，并且可以具有其中两条多肽链通过这两条链中仅一条中的氮原子连接的结构，但不限于此。通过氮原子的连接可以经由还原性胺化而连接至赖氨酸的ε-N原子或N端胺基。
还原性胺化反应指代这样的反应：其中反应物的胺基或氨基与另一反应物的醛(即，能够进行还原性胺化的官能团)反应生成胺，并且其后通过还原反应形成胺键。还原性胺化反应是本领域公知的有机合成反应。
在本发明的长效缀合物的实施方式中，长效缀合物可以是其中免疫球蛋白Fc区通过其N端氮原子连接至连接体的长效缀合物，但不限于此。
免疫球蛋白Fc区可包括在重链恒定区中的铰链区，但不限于此。
在本发明中，免疫球蛋白Fc区可以包括具体的在N端的铰链序列。
如本文所用，术语“铰链序列”指代位于重链中并且通过间二硫键(inter-disulfide bond)形成免疫球蛋白Fc区二聚体的区域。
在本发明中，铰链序列可以是修饰的序列，其中具有以下氨基酸序列的铰链序列的部分缺失，使得序列中只有一个半胱氨酸残基，但不限于此：
Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:119)。
铰链序列可以是这样的铰链序列：其中SEQ ID NO:119的铰链序列中的第8位或第11位半胱氨酸残基缺失，使得序列中包括仅一个半胱氨酸残基。本发明的铰链序列可由3至12个氨基酸组成，包括仅一个半胱氨酸残基，但不限于此。更具体地，本发明的铰链序列可以具有以下序列：
Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:120)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser–Pro(SEQ ID NO:121)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser(SEQ ID NO:122)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Pro(SEQ IDNO:123)、Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro–Ser(SEQ ID NO:124)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys(SEQ ID NO:125)、Glu–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys(SEQ ID NO:126)、Glu–Ser–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:127)、Glu–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:128)、Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:129)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:130)、Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:131)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:132)、Glu–Ser–Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys(SEQ ID NO:133)、Lys–Tyr–Gly–Pro–Pro–Cys–Pro(SEQ ID NO:134)、Glu–Ser–Lys–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:135)、Glu–Ser–Pro–Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:136)、Glu–Pro–Ser–Cys(SEQ IDNO:137)、和Ser–Cys–Pro(SEQ ID NO:138)。
更具体地，铰链序列可以是包括SEQ ID NO:129(Pro-Ser-Cys-Pro)或SEQ ID NO:138(Ser-Cys-Pro)的氨基酸序列的铰链序列，但不限于此。
在本发明的长效缀合物的更具体的实施方式中，缀合物内免疫球蛋白Fc区的N端是脯氨酸，以及缀合物是其中免疫球蛋白Fc区通过脯氨酸的氮原子连接至连接体的缀合物。
在本发明的长效缀合物的一个方面，免疫球蛋白Fc区可以是二聚体的形式，其中免疫球蛋白Fc区的两条链由于其中铰链序列的存在而形成同二聚体或异二聚体。本发明的化学式1的缀合物可以是连接体的一端与二聚体免疫球蛋白Fc区的一条链连接的形式，但不限于此。
如本文所用，术语“N端”指代蛋白质或多肽的氨基末端，并且其可包括自氨基末端的最末端或末端起1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个或更多个氨基酸。本发明的免疫球蛋白Fc区可以包括在N端的铰链序列，但不限于此。
再者，本发明的免疫球蛋白Fc区可以是包括重链恒定区1(CH1)和/或轻链恒定区1(CL1)的部分或全部而不包括该免疫球蛋白的重链和轻链可变区的延伸Fc区，只要免疫球蛋白Fc区与天然型相比具有基本上相同或增强的效果。此外，免疫球蛋白Fc区可以是其中相应于CH2和/或CH3的氨基酸序列的相当长部分被移除的区域。
例如，本发明的免疫球蛋白Fc区可以包括1)CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域，2)CH1结构域和CH2结构域，3)CH1结构域和CH3结构域，4)CH2结构域和CH3结构域，5)选自CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域的一个或多个结构域与免疫球蛋白铰链区(或铰链区的部分)的组合，或，6)重链恒定区和轻链恒定区中的各结构域的二聚体，但不限于此。
再者，在本发明的长效缀合物的一个实施方式中，免疫球蛋白Fc区F是由两条多肽链组成的二聚体，并且Fc区二聚体F和X通过含有乙二醇重复单元的一个共同连接体共价地连接。在该方面的具体实施方式中，X通过连接体L共价连接至Fc区二聚体F的两条多肽链中的仅一条多肽链。在该方面的更具体实施方式中，在Fc区二聚体F的两条多肽链之间X所连接的一条多肽链中，只有一分子的X通过L共价连接。在该方面的最具体的实施方式中，F是同二聚体。
在本发明的长效缀合物的另一方面，两分子的X对称地连接到二聚体形式的一个Fc区是可能的。在这种情况下，免疫球蛋白Fc区和X可以经由L彼此连接。然而，实施方式不限于上述实例。
此外，本发明的免疫球蛋白Fc区不仅包括天然氨基酸序列，还包括其序列衍生物。氨基酸序列衍生物指代通过缺失、添加、非保守或保守取代或其任何组合而具有至少一个不同氨基酸残基的氨基酸序列。
例如，在IgG Fc的情况下，已知对于结合重要的位置214至238、297至299、318至322、或327至331的氨基酸残基可用作合适的修饰位点。
再者，可以制备各种其他类型的衍生物，例如通过去除能够形成二硫键的区域、从天然Fc的N端去除几个氨基酸、或将甲硫氨酸残基添加到天然Fc的N端。另外，为了去除效应功能，可以去除补体结合位点，例如Clq结合位点，或者可以去除抗体依赖性的细胞介导的细胞毒性(ADCC)位点。制备免疫球蛋白Fc区的这些序列衍生物的技术被公开于国际专利公开号WO 97/34631、W O96/32478等。
蛋白质和肽中不改变其活性的氨基酸交换是本领域公知的(H.Neurath,R.L.Hill,The Proteins,Academic Press,New York,1979)。最常发生的交换是氨基酸残基之间的交换，例如，Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Thy/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly。如需，Fc区可以通过磷酸化、硫酸化、丙烯酸化、糖基化、甲基化、法尼基化、乙酰化、酰胺化等进行修饰。
上述Fc衍生物可具有与本发明的Fc区相同的生物活性和抵抗热、pH等的改善的结构稳定性。
此外，Fc区可以由从人或动物(如牛、山羊、猪、小鼠、兔、仓鼠、大鼠或豚鼠)体内分离的天然形式获得，或者可以是从转化的动物细胞或微生物获得的其重组体或衍生物。在这方面，Fc区可以通过从人或动物的活体分离完整免疫球蛋白并且用蛋白酶处理分离的免疫球蛋白而从天然免疫球蛋白获得。当整个免疫球蛋白用木瓜蛋白酶处理时，其被切割成Fab和Fc区，而当整个免疫球蛋白用胃蛋白酶处理时，其被切割成pF’c和F(ab)2片段。可以利用尺寸排阻色谱法等将Fc或pF’c从中分离。在更具体的实施方式中，人源Fc区是从微生物获得的重组免疫球蛋白Fc区。
此外，免疫球蛋白Fc区可以具有天然聚糖或与天然型相比为增加或减少的聚糖，或者可以是去糖基化的形式。免疫球蛋白Fc的聚糖的增加、减少或去除可以通过本领域常用的任何方法实现，如化学法、酶促法和使用微生物的基因工程法。在这方面，通过去除聚糖而获得的免疫球蛋白Fc区显示补体clq结合亲和力显著减少，以及抗体依赖性细胞毒性或补体依赖性细胞毒性减少或损失，并且因此活生物体内不被其引起不必要的免疫响应。基于此，鉴于本发明的目的，去糖基化或非糖基化的免疫球蛋白Fc区可更适合作为药物载体。
如本文所用，术语“去糖基化”指代利用酶从Fc区去除聚糖，并且术语“非糖基化”指代未被糖基化并且在原核生物(更具体地大肠杆菌(E.coli.))中生成的Fc区。
同时，免疫球蛋白Fc区可以衍生自人或动物(如牛、山羊、猪、小鼠、兔、仓鼠、大鼠或豚鼠)。在更具体的实施方式中，免疫球蛋白Fc区可以源自人。
此外，免疫球蛋白Fc区可源自IgG、IgA、IgD、IgE或IgM，或其任何组合或混杂体。在更具体的实施方式中，免疫球蛋白Fc区源自IgG或IgM——人类血液中最丰富的蛋白质，并且在还更具体的实施方式中，其源自IgG——已知其可增强配体结合蛋白质的半衰期。在还更具体的实施方式中，免疫球蛋白Fc区是IgG4 Fc区，并且在最具体的实施方式中，免疫球蛋白Fc区是源自人IgG4的非糖基化Fc区，但不限于此。
此外，在一个具体的实施方式中，作为人IgG4片段的免疫球蛋白Fc区可以是同二聚体的形式，其中两个单体通过各单体的第3位氨基酸半胱氨酸之间的二硫键(链间形式)连接。特别是，同二聚体具有/或可具有在各单体中第35和95位的半胱氨酸之间的二硫键以及第141和199位的半胱氨酸之间的二硫键(即，两个二硫键(链内形式))。
关于氨基酸的数目，各单体可以由221个氨基酸组成，并且形成同二聚体的氨基酸可以由总共442个氨基酸组成，但不限于此。具体地，免疫球蛋白Fc片段可以是这样的免疫球蛋白Fc片段：其中具有氨基酸序列SEQ ID NO:139(由221个氨基酸组成)的两个单体通过各单体的第3位氨基酸半胱氨酸之间的二硫键形成同二聚体，并且其中同二聚体的单体独立地在第35和95位半胱氨酸之间形成内二硫键以及在第141和199位半胱氨酸之间形成内二硫键，但不限于此。
同时，如本文所用，术语“组合”指代当形成二聚体或多聚体时，在编码相同来源的单链免疫球蛋白Fc区的多肽与不同来源的单链多肽之间形成连接。即，二聚体或多聚体可以利用选自IgG Fc、IgA Fc、IgM Fc、IgD Fc和IgE Fc片段的两个或更多个Fc片段来制备。
此外，与天然GLP-1、GIP或胰高血糖素相比，或与未用F修饰的X相比，上述缀合物可呈现延长的效果持续时间，并且缀合物可还包括包封在可生物降解纳米颗粒的形式以及上述那些。
包括所述肽(例如，单独的或与生物相容性材料连接的形式的所述肽)的组合物可用于预防或治疗高血脂症。
如本文所用，术语“预防”指代意图通过给予所述肽或包含其的组合物来抑制或延迟高血脂症发展(发生，development)的所有作用。术语“治疗”指代通过给予所述肽或包含其的组合物来减轻或有益地改变高血脂症相关的症状的所有作用。
如本文所用，“给予”指代通过任何合适的方法将特定物质引入患者，并且组合物的给予途径可以是但不限于能够实现将组合物递送至活生物体中的目标的任何常规途径，例如，腹膜内给予、静脉内给予、肌内给予、皮下给予、皮内给予、口服给予、局部(表面，topical)给予、鼻内给予、肺内给予或直肠内给予。
本发明的药物组合物可进一步包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。该药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂可以是非天然存在的。
如本文所用，术语“药学上可接受”指代足以呈现治疗效果而不引起副作用的量，并且可以容易地被本领域技术人员基于医学领域中公知的因素确定，如患者的疾病类型、年龄、体重、健康状况、性别和对药物的敏感性、给予途径、给予方法、给予频率、治疗持续时间，以及组合或同时使用的药物。
包含本发明的肽或缀合物的药物组合物可进一步包含药学上可接受的载体。虽然药学上可接受的载体没有特别限制，但粘合剂、润滑剂、崩解剂、赋形剂、增溶剂、分散剂、稳定剂、悬浮剂、着色剂和调味剂可以被用于口服给予，缓冲剂、防腐剂、镇痛剂、增溶剂、等渗剂和稳定剂可被组合用于可注射制剂，以及碱、赋形剂、润滑剂、防腐剂等可被用于局部给予的制剂。
本发明的组合物可以与上述药学上可接受的载体组合配制成各种形式。例如，对于口服给予，药物组合物可被配制成片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、糯米纸囊剂(wafer)等。对于可注射制剂，药物组合物可被配制成单剂量安瓿或多剂量形式。药物组合物还可以被配制成溶液、悬浮液、片剂、丸剂、胶囊、缓释制剂等。
同时，适于配制的载体、赋形剂和稀释剂的实例可以包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、金合欢胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、无定形纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、甲基羟基苯甲酸酯、丙基羟基苯甲酸酯、滑石、硬脂酸镁或矿物油。另外，药物组合物可进一步包括填充剂、抗凝剂、润滑剂、湿润剂、调味剂、防腐剂等。
此外，本发明的药物组合物可以被配制成选自片剂、丸剂、粉末、颗粒、胶囊、悬浮液、内用制剂、乳液、糖浆、灭菌水溶液、非水溶剂、冻干制剂和栓剂的制剂。
另外，组合物可以按照本领域常用的方法被配制成适合给予到患者体内的单位剂型，具体地可用于给予蛋白质药物的形式，并且利用本领域常用的给予方法经由口服给予途径或肠胃外给予途径如皮内、静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、心室内、肺内、经皮、皮下、腹膜内、鼻内、肠内、局部、舌下、阴道或直肠途径来给予，但不限于此。
此外，所述肽或其缀合物可以与允许作为药物的各种载体(如盐水溶液或有机溶剂)组合使用。作为药物，可以使用碳水化合物(如葡萄糖、蔗糖、或葡聚糖)、抗氧化剂(如抗坏血酸或谷胱甘肽)、螯合剂、低分子量蛋白质或其他稳定剂，以改善稳定性或吸收性。
本发明的药物组合物的给予剂量和频率可以根据作为活性成分的药物的类型以及各种相关因素(如待治疗的疾病、给予途径、患者的年龄、性别、和体重、以及疾病的严重程度)来确定。
可以利用长期进行给予的分次治疗方案将总有效量的本发明的组合物以单剂或多剂给予患者。本发明的药物组合物的活性成分的量可根据疾病的严重程度而变化。具体地，本发明缀合物的优选日剂量可以是每1kg患者体重约0.0001mg至约500mg。然而，由于缀合物的剂量是考虑各种因素(如患者的年龄、体重、健康状况和性别、疾病的严重程度、饮食和排泄率以及药物组合物的给予途径及频率)而作为对患者有效的剂量而确定的，对于本发明组合物的特定用途的适当有效剂量可由本领域技术人员通过考虑这些因素而确定。药物组合物的制剂、给予途径和给予方法没有特别限制，只要能获得本发明的效果。
由于本发明的药物组合物具有优越的体内持久性和效力，根据本发明的药物组合物的给予次数和频率可以显著减少，但不限于此。
本发明的另一方面提供预防或治疗高血脂症的方法，该方法包括向有需要的个体给予所述肽、其缀合物或包含其的组合物。
所述肽、其缀合物或包含其的组合物、高血脂症、预防和治疗如上所述。
在本发明中，个体指代疑患高血脂症的对象，并且疑患高血脂症的对象指代哺乳动物，如大鼠和家畜，包括患有该疾病或有患该疾病风险的人，但是可以非限制地包括可以用根据本发明的缀合物或包含其的组合物治疗的任何个体。
本发明的方法可以包括以药学有效量给予包含所述肽或其缀合物的药物组合物。适当的日剂量可由医生在合理的医学判断范围内以弹丸(bonus)剂或多剂确定。然而，出于本发明的目的，优选针对特定患者的具体治疗有效量根据各种因素不同地被施用，该因素包括所要实现的响应的类型和程度、具体组合物(包括是否根据情况使用其他制剂)、患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食、给予时间、给予途径、组合物的排泄率、治疗持续时间、与具体组合物组合或同时使用的药物、以及医学领域公知的类似因素。
本发明的另一方面提供所述肽、其缀合物或包含其的组合物在制备用于预防或治疗高血脂症的药物中的用途。
所述肽、其缀合物或包含其的组合物、高血脂症、预防和治疗如上所述。
在下文中，将参考以下实施例更详细地描述本发明。然而，以下实施例仅被展示以示例本发明，并且本发明的范围不限于此。
实施例1：三重激动剂的制备
制备了对GLP-1、GIP和胰高血糖素受体全部具有活性的三重激动剂，并且其序列列于下表2中。
表2
Figure BDA0003968771460000241
Figure BDA0003968771460000251
Figure BDA0003968771460000261
Figure BDA0003968771460000271
Figure BDA0003968771460000281
在表2所示的序列中，以X标注的氨基酸代表非天然氨基酸，氨基异丁酸(Aib)，并且下划线的氨基酸代表其间成环。此外，在表2中，CA是4-咪唑乙酰基，并且Y是酪氨酸。
实施例2：三重激动剂的长效缀合物的制备
关于在两端分别具有马来酰亚胺基和醛基的10kDa PEG，即马来酰亚胺-PEG-醛(l0kDa，NOF，日本)聚乙二醇化到实施例1的各三重激动剂(SEQ ID NO:21、22、42、43、50、77和96)的半胱氨酸残基中，使该三重激动剂和马来酰亚胺-PEG-醛以1:1至3的摩尔比在lmg/mL至5mg/mL的蛋白质浓度下在低温下反应0.5至3小时。在这种情况下，反应在包含添加了20％至60％异丙醇的50mM Tris缓冲液(pH 7.5)的环境中进行。反应完成后，将反应溶液施加到SP琼脂糖HP(GE Healthcare，USA)以纯化在半胱氨酸上单聚乙二醇化的三重激动剂。
随后，使纯化的单聚乙二醇化三重激动剂和免疫球蛋白Fc以1:1至5的摩尔比与在10mg/mL至50mg/mL的蛋白质浓度下在4℃至8℃的温度下反应12至18小时。反应在10mM至50mM氰基硼氢化钠作为还原剂和10％至30％异丙醇被添加到100mM磷酸钙缓冲剂(pH 6.0)的环境中进行。反应完成后，将反应物溶液施加到丁基琼脂糖凝胶FF纯化柱(GEHealthcare，USA)和Source ISO纯化柱(GE Healthcare，USA)以纯化包括三重激动剂和免疫球蛋白Fc的缀合物。纯化的长效缀合物具有这样的结构：其中三重激动剂、聚乙二醇(PEG)连接体和Fc二聚体以1:1:1摩尔比共价连接，并且PEG连接体连接到Fc二聚体的两条多肽链中的仅一条链。
同时，免疫球蛋白Fc是这样的免疫球蛋白Fc：其中具有氨基酸序列SEQ ID NO:139(由221个氨基酸组成)的两个单体通过半胱氨酸(其是各单体的第3位氨基酸)之间的二硫键形成同二聚体，并且其中同二聚体的单体独立地在第35和95位半胱氨酸之间形成内二硫键以及在第141和199位半胱氨酸之间形成内二硫键。
制备后，通过反相色谱、尺寸排阻色谱和离子交换色谱分析的纯度为95％或更高。
其中实施例中制备的三重激动剂经由PEG连接至免疫球蛋白Fc的缀合物被命名为包括三重激动剂和免疫球蛋白Fc的缀合物或长效缀合物。
例如，其中SEQ ID NO:42的三重激动剂经由PEG连接至免疫球蛋白Fc的缀合物被命名为“包括SEQ ID NO:42和免疫球蛋白Fc的缀合物”或“SEQ ID NO:42的长效缀合物”，其在本文中可被互换使用。
实验实施例1：三重激动剂及其长效缀合物的体外活性的测量
在实施例1和2中分别制备的三重激动剂及其长效缀合物的活性利用转化的细胞系来测量，其中GLP-1受体、胰高血糖素(GCG)受体和GIP受体通过测量体外细胞活性的方法转化。
将细胞系转化，使得人GLP-1受体、人GCG受体和人GIP受体的基因各自在中国仓鼠卵巢(CHO)中表达，并且分别适于测量GLP-1、GCG和GIP的活性。因此，使用各转化的细胞系测量各部分的活性。
为了测量在实施例1和2中分别制备的各三重激动剂及其长效缀合物对GLP-1的活性，将人GLP-1进行从50nM到0.000048nM的4倍连续稀释，以及将在实施例1和2中分別制备的三重激动剂及其长效缀合物进行从400nM到0.00038nM的4倍连续稀释。从培养的其中表达人GLP-1受体的CHO细胞去除培养液，并且将各连续稀释物以5μL的量添加到CHO细胞。然后，向其以5μL的量添加包含cAMP抗体的缓冲剂溶液并且在室温下培养15分钟。此后，向其以10μL的量添加包含细胞裂解缓冲剂的检测混合物以裂解细胞，然后在室温下反应90分钟。反应完成后，将细胞裂解物施加至LANCE cAMP试剂盒(PerkinElmer，USA)以经由累积的cAMP计算EC50值，并且将该值彼此比较。相比于人GLP-1的相对效价显示在下表3和4中。
为了测量在实施例1和2中分别制备的三重激动剂及其长效缀合物对GCG的活性，将人GCG进行从50nM到0.000048nM的4倍连续稀释，以及将在实施例1和2中分别制备的三重激动剂及其长效缀合物进行从400nM到0.00038nM的4倍连续稀释。从培养的其中表达人GCG受体的CHO细胞去除培养液，并且将各连续稀释物以5μL的量添加到CHO细胞。然后，向其以5μL的量添加包含cAMP抗体的缓冲剂溶液并且在室温下培养15分钟。此后，向其以10μL的量添加包含细胞裂解缓冲剂的检测混合物以裂解细胞，然后在室温下反应90分钟。反应完成后，将细胞裂解物施加至LANCE cAMP试剂盒(PerkinElmer，USA)以经由累积的cAMP计算EC50值，并且将该值彼此比较。相比于人GCG的相对效价显示在下表3和4中。
为了测量在实施例1和2中分别制备的三重激动剂及其长效缀合物对GIP的活性，将人GIP进行从50nM到0.000048nM的4倍连续稀释，以及将在实施例1和2中分别制备的三重激动剂及其长效缀合物进行从400nM到0.00038nM的4倍连续稀释。从培养的其中表达人GIP受体的CHO细胞去除培养液，并且将各连续稀释物以5μL的量添加到CHO细胞。然后，向其以5μL的量添加包含cAMP抗体的缓冲剂溶液并且在室温下培养15分钟。此后，向其以10μL的量添加包含细胞裂解缓冲剂的检测混合物以裂解细胞，然后在室温下反应90分钟。反应完成后，将细胞裂解物施加至LANCE cAMP试剂盒(PerkinElmer，USA)以经由累积的cAMP计算EC50值，并且将该值彼此比较。相比于人GIP的相对效价显示在下表3和4中。
表3
三重激动剂的相对效价比
Figure BDA0003968771460000301
Figure BDA0003968771460000311
Figure BDA0003968771460000321
表4
Figure BDA0003968771460000331
表4显示三重激动剂及其长效缀合物的相对效价比，并且确认如上述制备的三重激动剂的新型长效缀合物具有激活GLP-1受体、GIP受体和胰高血糖素受体全部的功能。
实验实施例2：三重激动剂的长效缀合物对高血脂症的治疗效果的确认(体内)
用果糖喂养金色叙利亚仓鼠(Golden Syrian hamsters)(以下称高血脂症仓鼠)2周以诱导高血脂症模型。在实施例1制备的三重激动剂中，选择SEQ ID NO:42(1.6nmol/kg，3.1nmol/kg，Q2D)，并且将具有SEQ ID NO:42的三重激动剂的长效缀合物反复地通过皮下给予高血脂症诱导仓鼠3周。作为比较例，测量作为常规治疗剂的依洛尤单抗(evolocumab)(219.2nmol/kg，QW)对高血脂症的治疗效果。
如图1所示，确认通过反复给予SEQ ID NO:42的长效缀合物3周，总血液胆固醇水平(减少50％至60％)和血液LDL水平(减少70％至85％)显著减少，而在依洛尤单抗给予组中观察到可以忽略不计的效果。
实验实施例3：三重激动剂的长效缀合物对高血脂症的治疗效果的确认(体外)
通过利用HepG2细胞确定增加LDL吸收、抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性和促进脂肪酸降解的效果的实验，确认实施例2的三重激动剂的长效缀合物对高血脂症的优越的体外治疗作用模式。
(1)三重激动剂的长效缀合物导致LDL吸收增加
与其中HepG2细胞未用SEQ ID NO:42的长效缀合物处理的对照相比，SEQ ID NO:42的长效缀合物(0.01μM、0.1μM、1μM、和10μM)和依洛尤单抗(10μg/mL)48小时，测量细胞中BODIPY标记的LDL的吸收量，并且结果示于图2。
如图2所示，确认SEQ ID NO:42的长效缀合物以浓度依赖性方式增加LDL的吸收量(相对于对照，增加132.7％至354％)。
(2)三重激动剂的长效缀合物抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR) 的活性
为了测量与其中HepG2细胞未用SEQ ID NO:42的长效缀合物处理的对照相比3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(以下称为HMGCR)(其是胆固醇合成的速率限制酶)的活性，用SEQ ID NO:42的长效缀合物(10μM)和他汀(1μM)处理HepG2细胞，然后在使用HMG-辅酶A(通过利用NADPH，HMGCR将HMG-辅酶A转化为胆固醇前体，甲羟戊酸)的处理条件下测量NADPH减少的程度，并且结果示于图3中。
如图3中所示，确认SEQ ID NO：42的长效缀合物持续抑制HMGCR的活性(相对于对照，减少约80％)。
(3)通过三重激动剂的长效缀合物促进脂肪酸的降解
测量酮体(ketone bodies)，其是脂肪酸降解的副产物。为此，与其中HepG2细胞未用SEQ ID NO:42的长效缀合物处理的对照相比，将用脂肪酸(棕榈酸酯/盐)处理的HepG2细胞用SEQ ID NO:42的长效缀合物(0.01μM、0.1μM、1μM、和10μM)和胰高血糖素(2.5μM)处理，然后利用市售的酮体测量试剂盒(Sigma#MAK041)测量酮体生成量。
测量结果是，如图4中所示，确认SEQ ID NO:42的长效缀合物以浓度依赖性方式增加了酮体生成。
基于上述实验，确认根据本发明的三重激动剂及其长效缀合物通过增加LDL吸收、抑制胆固醇合成——通抑制HMGCR的活性，和减少甘油三酯水平和LDL水平——通过促进脂肪酸的降解，而对高血脂症具有治疗效果。
本发明的以上描述是出于示例目的提供的，并且本领域技术人员将理解，在不改变本发明的技术构思和本质特征的情况下，可以进行各种变化和改动。因此，显然，上述实施方式在所有方面都是示例性的，并且不限制本发明。本文公开的各种实施方式不意图是限制性的，真正范围和精神由所附权利要求表示。本发明仅受所附的权利要求以及这些权利要求的全部范围的等同形式所限制。
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<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 1
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Cys
            20                  25                  30
<210> 2
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 2
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Gln Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Cys
            20                  25                  30
<210> 3
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 3
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Leu Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Lys Gln Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Gly Gly Pro
            20                  25                  30
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 4
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 4
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Leu Gly
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Cys
            20                  25                  30
<210> 5
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 5
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Leu Gly
1               5                   10                  15
Gln Gln Gln Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Gly Gly Pro
            20                  25                  30
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 6
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 6
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Lys Gly Cys
            20                  25                  30
<210> 7
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 7
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Lys Gly Cys
            20                  25                  30
<210> 8
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 8
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Lys Gly Cys
            20                  25                  30
<210> 9
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 9
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Cys
            20                  25                  30
<210> 10
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 10
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Gly Pro
            20                  25                  30
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 11
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 11
Xaa Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Tyr Leu Asp Ser
1               5                   10                  15
Arg Arg Gln Gln Leu Phe Val Gln Trp Leu Lys Ala Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 12
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 12
Xaa Gly Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Leu Ser Lys Tyr Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Gln Ala Val Gln Leu Phe Val Glu Trp Leu Met Ala Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 13
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 13
Xaa Gly Glu Gly Thr Phe Ile Ser Asp Tyr Ser Ile Gln Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile Ala Val Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 14
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 14
Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Gln Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile Ala Val Arg Asp Phe Val Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 15
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 15
Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 16
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 16
Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Asp Ser
1               5                   10                  15
Glu Ala Gln Gln Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 17
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 17
Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Arg Glu Phe Ile Glu Trp Leu Leu Ala Gln Lys Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 18
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 18
Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Asp Ser
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Arg Glu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Thr Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 19
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 19
Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Ile Gln Tyr Asp Ser
1               5                   10                  15
Glu His Gln Arg Asp Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asp Thr Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 20
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<400> 20
Xaa Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Ile Gln Tyr Glu Glu
1               5                   10                  15
Glu Ala Gln Gln Asp Phe Val Glu Trp Leu Lys Asp Thr Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
        35                  40
<210> 21
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 21
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Cys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 22
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 22
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 23
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 23
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Cys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys
            20                  25                  30
Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr
        35                  40
<210> 24
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 24
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Cys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 25
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 25
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 26
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 26
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Ser
1               5                   10                  15
Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 27
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 27
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Arg Ala Cys Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gln Gly Gly Pro
            20                  25                  30
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35                  40
<210> 28
<211> 41
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 28
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Gln Glu Phe Val Cys Trp Leu Leu Ala Gln Lys Gly Lys
            20                  25                  30
Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr
        35                  40
<210> 29
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 29
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Thr Cys
            20                  25                  30
<210> 30
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 30
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr Cys
            20                  25                  30
<210> 31
<211> 29
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 31
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Cys Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Ala Gln
            20                  25
<210> 32
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 32
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Cys Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 33
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 33
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 34
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 34
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 35
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 35
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 36
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 36
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Cys Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Gly
        35                  40
<210> 37
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 37
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Cys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Gly
        35                  40
<210> 38
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 38
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Ser Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Ser
        35                  40
<210> 39
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 39
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln His Ala Gln Cys Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Gly Pro
            20                  25                  30
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35                  40
<210> 40
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 40
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Arg Ala Cys Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 41
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<400> 41
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Cys Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 42
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 42
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 43
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 43
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Cys Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 44
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<400> 44
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Gln Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 45
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<400> 45
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Met Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Ala Ala Gln Asp Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 46
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<400> 46
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Gln His Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 47
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<400> 47
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Arg Ala Gln Glu Phe Val Ala Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 48
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<400> 48
His Gly Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Gly
1               5                   10                  15
Gln Arg Ala Gln Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 49
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 49
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Cys Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys
            20                  25                  30
<210> 50
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 50
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 51
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 51
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Thr Cys
            20                  25                  30
<210> 52
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 52
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr Cys
            20                  25                  30
<210> 53
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 53
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
            20                  25                  30
<210> 54
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 54
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asp Trp Leu Leu Ala Glu Cys
            20                  25                  30
<210> 55
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 55
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
            20                  25                  30
<210> 56
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 56
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
            20                  25                  30
<210> 57
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 57
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Cys
            20                  25                  30
<210> 58
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 58
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Thr Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 59
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 59
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Cys Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys
            20                  25                  30
<210> 60
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 60
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys His Cys Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys
            20                  25                  30
<210> 61
<211> 30
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Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
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Ile Ala Cys Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys
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Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Lys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
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Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
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Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Arg Ala Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gly Gly Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
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Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Cys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<400> 65
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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Cys Arg Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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Cys Ala Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<400> 68
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<400> 69
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
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Arg Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 70
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 71
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Arg Ala Cys Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
        35
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
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Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Cys Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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Arg Ala Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
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Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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Cys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Cys Leu Asp Glu
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<400> 75
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 76
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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<220>
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<222> (2)
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<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 77
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Ala Lys Asp Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
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<220>
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<222> (16)..(20)
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<400> 78
His Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 79
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
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<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
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<220>
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<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 80
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 81
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
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<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
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<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 82
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
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Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
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<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 84
Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
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<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
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<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
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Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
            20                  25                  30
<210> 86
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 86
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Cys
            20                  25                  30
<210> 87
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 87
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Cys
            20                  25                  30
<210> 88
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 88
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asn Thr Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 89
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 89
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Thr Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 90
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 90
Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 91
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 91
Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asp Trp Leu Leu Ala Glu Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 92
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 92
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 93
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 93
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Gln Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gln Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 94
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa是4-咪唑乙酰基 (CA)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 94
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Ala Met Asp Glu
1               5                   10                  15
Ile His Gln Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asn Thr Lys Cys
            20                  25                  30
<210> 95
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 95
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Cys His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 96
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 96
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp His Cys Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 97
<211> 39
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 97
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Cys His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
        35
<210> 98
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 98
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 99
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 99
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Ala Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp His His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 100
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 100
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Gln Trp Leu Leu Asp Gln His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 101
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 101
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Ala Lys Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp Gln His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 102
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 三重激动剂
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa是氨基异丁酸 (Aib)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)..(20)
<223> 第16和20位的氨基酸形成环
<400> 102
Tyr Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Ala Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Lys Ala Ala Lys Asp Phe Val Asn Trp Leu Leu Asp Gln His Pro Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
        35                  40
<210> 103
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 通式1
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa 是 His (H), 4-咪唑乙酰基 (CA), 或 Tyr (Y)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa 是 Gly (G), α-甲基-谷氨酸, 或 Aib
(氨基异丁酸)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (3)
<223> Xaa 是 Glu (E) 或 Gln (Q)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)
<223> Xaa 是 Thr (T) 或 Ile (I)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)
<223> Xaa 是 Leu (L), Tyr (Y), Lys (K), Cys (C), 或 Val (V)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (12)
<223> Xaa 是 Lys (K), Ser (S), 或 Ile (I)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (13)
<223> Xaa 是 Gln (Q), Tyr (Y), Ala (A), 或 Cys (C)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (14)
<223> Xaa 是 Leu (L), Met (M), 或 Tyr (Y)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (15)
<223> Xaa 是 Cys (C), Asp (D), Glu (E), 或 Leu (L)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)
<223> Xaa 是 Gly (G), Glu (E), 或 Ser (S)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (17)
<223> Xaa 是 Gln (Q), Arg (R), Ile (I), Glu (E), Cys (C), 或 Lys (K)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (18)
<223> Xaa 是 Ala (A), Gln (Q), Arg (R), 或 His (H)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (19)
<223> Xaa 是 Ala (A), Gln (Q), Cys (C), 或 Val (V)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (20)
<223> Xaa 是 Lys (K), Gln (Q), 或 Arg (R)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (21)
<223> Xaa 是 Glu (E), Gln (Q), Leu (L), Cys (C), 或 Asp (D)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (23)
<223> Xaa 是 Ile (I) 或 Val (V)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (24)
<223> Xaa 是 Ala (A), Gln (Q), Cys (C), Asn (N), Asp (D), 或 Glu (E)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (27)
<223> Xaa 是 Val (V), Leu (L), Lys (K), 或 Met (M)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (28)
<223> Xaa 是 Cys (C), Lys (K), Ala (A), Asn (N), 或 Asp (D)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (29)
<223> Xaa 是 Cys (C), Gly (G), Gln (Q), Thr (T), Glu (E), 或 His (H)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (30)
<223> Xaa 是 Cys (C), Gly (G), Lys (K), 或 His (H), 或不存在; 并且
Xaa 可以进一步连接至 R1, 其中 R1 是 Cys (C),
GKKNDWKHNIT, m-SSGAPPPS-n, 或 m-SSGQPPPS-n, 或不存在, 并且
其中 m 是 -Cys-, -Pro-, 或 -Gly-Pro-, 并且 n 是 -Cys-, -Gly-,
-Ser-, 或 -His-Gly-, 或不存在
<400> 103
Xaa Xaa Xaa Gly Thr Phe Xaa Ser Asp Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
1               5                   10                  15
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Phe Xaa Xaa Trp Leu Xaa Xaa Xaa Xaa
            20                  25                  30
<210> 104
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 通式 2
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa 是 His (H), 4-咪唑乙酰基 (CA), 或 Tyr (Y)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa 是 Gly (G), α-甲基-谷氨酸, 或 Aib
(氨基异丁酸)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (10)
<223> Xaa 是 Tyr (Y) 或 Cys (C)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (13)
<223> Xaa 是 Gln (Q), Tyr (Y), Ala (A), 或 Cys (C)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (14)
<223> Xaa 是 Leu (L), Met (M), 或 Tyr (Y)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (15)
<223> Xaa 是 Asp (D), Glu (E), 或 Leu (L)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (16)
<223> Xaa 是 Gly (G), Glu (E), 或 Ser (S)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (17)
<223> Xaa 是 Gln (Q), Arg (R), Ile (I), Glu (E), Cys (C), 或 Lys (K)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (18)
<223> Xaa 是 Ala (A), Gln (Q), Arg (R), 或 His (H)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (19)
<223> Xaa 是 Ala (A), Gln (Q), Cys (C), 或 Val (V)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (20)
<223> Xaa 是 Lys (K), Gln (Q), 或 Arg (R)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (21)
<223> Xaa 是 Glu (E), Gln (Q), Leu (L), Cys (C), 或 Asp (D)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (23)
<223> Xaa 是 Ile (I) 或 Val (V)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (24)
<223> Xaa 是 Ala (A), Gln (Q), Cys (C), Asn (N), 或 Glu (E)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (28)
<223> Xaa 是 Cys (C), Lys (K), Asn (N), 或 Asp (D)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (29)
<223> Xaa 是 Cys (C), Gly (G), Gln (Q), 或 His (H)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (30)
<223> Xaa 是 Cys (C), Gly (G), Lys (K), 或 His (H)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (31)
<223> Xaa 是 Pro (P) 或 Cys (C)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (40)
<223> Xaa 是 Cys (C), 或不存在
<400> 104
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Xaa Ser Lys Xaa Xaa Xaa Xaa
1               5                   10                  15
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Phe Xaa Xaa Trp Leu Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Xaa
        35                  40
<210> 105
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 通式 3
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)
<223> Xaa 是 His (H) 或 Tyr (Y)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)
<223> Xaa 是 α-甲基-谷氨酸, 或Aib (氨基异丁酸)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (13)
<223> Xaa 是 Tyr (Y), Ala (A), 或 Cys (C)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (17)
<223> Xaa 是 Arg (R), Cys (C), 或 Lys (K)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (18)
<223> Xaa 是 Ala (A) 或 Arg (R)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (19)
<223> Xaa 是 Ala (A) 或 Cys (C)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (21)
<223> Xaa 是 Glu (E) 或 Asp (D)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (24)
<223> Xaa 是 Gln (Q) 或 Asn (N)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (28)
<223> Xaa 是 Cys (C) 或 Asp (D)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (29)
<223> Xaa 是 Cys (C), Gln (Q), 或 His (H)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (30)
<223> Xaa 是 Cys (C) 或 His (H)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (31)
<223> Xaa 是 Pro (P) 或 Cys (C)
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (40)
<223> Xaa 是 Cys (C), 或不存在
<400> 105
Xaa Xaa Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Xaa Leu Asp Glu
1               5                   10                  15
Xaa Xaa Xaa Lys Xaa Phe Val Xaa Trp Leu Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Ser
            20                  25                  30
Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Xaa
        35                  40
<210> 106
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 106
Gly Lys Lys Asn Asp Trp Lys His Asn Ile Thr
1               5                   10
<210> 107
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 107
Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
1               5
<210> 108
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 108
Ser Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
1               5
<210> 109
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 109
Cys Ser Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
1               5
<210> 110
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 110
Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
1               5                   10
<210> 111
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 111
Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Cys
1               5                   10
<210> 112
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 112
Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser
1               5
<210> 113
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 113
Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Gly
1               5                   10
<210> 114
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 114
Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser His Gly
1               5                   10
<210> 115
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 115
Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Ser
1               5                   10
<210> 116
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 116
Pro Ser Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser
1               5
<210> 117
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R1
<400> 117
Pro Ser Ser Gly Gln Pro Pro Pro Ser Cys
1               5                   10
<210> 118
<211> 29
<212> PRT
<213> 智人
<400> 118
His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser
1               5                   10                  15
Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Met Asn Thr
            20                  25
<210> 119
<211> 12
<212> PRT
<213> 智人
<400> 119
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro
1               5                   10
<210> 120
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 120
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Pro Ser Cys Pro
1               5                   10
<210> 121
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 121
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Pro
1               5                   10
<210> 122
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 122
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser
1               5                   10
<210> 123
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 123
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro
1               5                   10
<210> 124
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 124
Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser
1               5
<210> 125
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 125
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
1               5
<210> 126
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 126
Glu Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
1               5
<210> 127
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 127
Glu Ser Pro Ser Cys Pro
1               5
<210> 128
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 128
Glu Pro Ser Cys Pro
1               5
<210> 129
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 129
Pro Ser Cys Pro
1
<210> 130
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 130
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Ser Cys Pro
1               5                   10
<210> 131
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 131
Lys Tyr Gly Pro Pro Pro Ser Cys Pro
1               5
<210> 132
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 132
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Ser Cys Pro
1               5
<210> 133
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 133
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
1               5
<210> 134
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 134
Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro
1               5
<210> 135
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 135
Glu Ser Lys Pro Ser Cys Pro
1               5
<210> 136
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 136
Glu Ser Pro Ser Cys Pro
1               5
<210> 137
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 137
Glu Pro Ser Cys
1
<210> 138
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 铰链区的变体
<400> 138
Ser Cys Pro
1
<210> 139
<211> 221
<212> PRT
<213> 智人
<400> 139
Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
1               5                   10                  15
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
            20                  25                  30
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln
        35                  40                  45
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
    50                  55                  60
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
65                  70                  75                  80
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
                85                  90                  95
Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
            100                 105                 110
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
        115                 120                 125
Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
    130                 135                 140
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
145                 150                 155                 160
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
                165                 170                 175
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
            180                 185                 190
Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
        195                 200                 205
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
    210                 215                 220

Claims (19)

1.用于预防或治疗高血脂症的药物组合物，其包含对胰高血糖素受体、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体具有活性的分离的肽，
其中所述肽包含由下述通式1表示的氨基酸序列：
Xaa1–Xaa2–Xaa3–Gly–Thr–Phe–Xaa7–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Xaa12–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Xaa27–Xaa28–Xaa29–Xaa30–R1(通式1，SEQ ID NO:103)
其中在以上通式1中，Xaa1是组氨酸(His，H)、4-咪唑乙酰基(CA)或酪氨酸(Tyr，Y)，Xaa2是甘氨酸(Gly，G)、α-甲基-谷氨酸或氨基异丁酸(Aib)，Xaa3是谷氨酸(Glu，E)或谷氨酰胺(Gln，Q)，Xaa7是苏氨酸(Thr，T)或异亮氨酸(IIe，I)，Xaa10是亮氨酸(Leu，L)、酪氨酸(Tyr，Y)、赖氨酸(Lys，K)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，Xaa12是赖氨酸(Lys，K)、丝氨酸(Ser，S)或异亮氨酸(Ile，I)，Xaa13是谷氨酰胺(Gln，Q)、酪氨酸(Tyr，Y)、丙氨酸(Ala，A)或半胱氨酸(Cys，C)，Xaa14是亮氨酸(Leu，L)、甲硫氨酸(Met，M)或酪氨酸(Tyr，Y)，Xaa15是半胱氨酸(Cys，C)、天冬氨酸(Asp，D)、谷氨酸(Glu，E)或亮氨酸(Leu，L)，Xaa16是甘氨酸(Gly，G)、谷氨酸(Glu，E)或丝氨酸(Ser，S)，Xaa17是谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)、异亮氨酸(Ile，I)、谷氨酸(Glu，E)、半胱氨酸(Cys，C)或赖氨酸(Lys，K)，Xaa18是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)或组氨酸(His，H)，Xaa19是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，Xaa20是赖氨酸(Lys，K)、谷氨酰胺(Gln，Q)或精氨酸(Arg，R)，Xaa21是谷氨酸(Glu，E)、谷氨酰胺(Gln，Q)、亮氨酸(Leu，L)、半胱氨酸(Cys)，C)或天冬氨酸(Asp，D)，Xaa23是异亮氨酸(Ile，I)或缬氨酸(Val，V)，Xaa24是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C))、天冬酰胺(Asn，N)、天冬氨酸(Asp，D)或谷氨酸(Glu，E)，Xaa27是缬氨酸(Val，V)、亮氨酸(Leu，L)、赖氨酸(Lys，K)或甲硫氨酸(Met，M)，Xaa28是半胱氨酸(Cys，C)、赖氨酸(Lys，K)、丙氨酸(Ala，A)、天冬酰胺(Asn，N)或天冬氨酸(Asp，D)，Xaa29是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、谷氨酰胺(Gln，Q)、苏氨酸(Thr，T)、谷氨酸(Glu，E)或组氨酸(His，H)，Xaa30是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、赖氨酸(Lys，K)或组氨酸(His，H)或不存在，以及
R1是半胱氨酸(Cys，C)、GKKNDWKHNIT(SEQ ID NO:106)、m–SSGAPPPS–n(SEQ ID NO:107)或m–SSGQPPPS–n(SEQ ID NO:108)或不存在，
其中m是–Cys–、–Pro–或–Gly–Pro–，以及n是–Cys–、–Gly–、–Ser–或–His–Gly–或不存在。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中在以上通式1中，Xaa14是亮氨酸或甲硫氨酸，并且Xaa15是半胱氨酸、天冬氨酸或亮氨酸。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中在以上通式1中，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸、半胱氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸、亮氨酸、谷氨酸或天冬氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸、谷氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸、精氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是半胱氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、谷氨酸或天冬氨酸，以及Xaa27是亮氨酸或赖氨酸。
4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述肽是包含以下通式2的氨基酸序列的肽：
Xaa1–Xaa2–Gln–Gly–Thr–Phe–Thr–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Lys–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Leu–Xaa28–Xaa29–Xaa30–Xaa31–Ser–Ser–Gly–Gln–Pro–Pro–Pro–Ser–Xaa40(通式2，SEQ ID NO:104)
其中在以上通式2中，Xaa1是4-咪唑乙酰基、组氨酸或酪氨酸，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa10是酪氨酸或半胱氨酸，Xaa13是丙氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸、甲硫氨酸或酪氨酸，Xaa15是天冬氨酸、谷氨酸或亮氨酸，Xaa16是甘氨酸、谷氨酸或丝氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa20是赖氨酸、谷氨酰胺或精氨酸，Xaa21是半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是半胱氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺或谷氨酸，Xaa28是赖氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa29是甘氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸或组氨酸，Xaa30是半胱氨酸、甘氨酸、赖氨酸或组氨酸，Xaa31是脯氨酸或半胱氨酸，以及Xaa40是半胱氨酸或不存在。
5.根据权利要求1所述的药物组合物，其中在以上通式1中，Xaa2是甘氨酸、α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸、半胱氨酸或缬氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸、半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是丙氨酸、谷氨酰胺、半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，以及Xaa27是亮氨酸或赖氨酸。
6.根据权利要求2所述的药物组合物，其中在以上通式2中，Xaa13是丙氨酸、酪氨酸或半胱氨酸，Xaa15是天冬氨酸或谷氨酸，Xaa17是谷氨酰胺、精氨酸，半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa21是半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺或天冬氨酸，Xaa23是异亮氨酸或缬氨酸，Xaa24是半胱氨酸、谷氨酰胺或天冬酰胺，Xaa28是半胱氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa29是谷氨酰胺、半胱氨酸或组氨酸，以及Xaa30是半胱氨酸、赖氨酸或组氨酸。
7.根据权利要求1所述的药物组合物，其中在以上通式1中，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸或半胱氨酸，Xaa12是赖氨酸或异亮氨酸，Xaa13是酪氨酸、丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是亮氨酸或甲硫氨酸，Xaa15是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa16是谷氨酸，Xaa17是精氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸、精氨酸或组氨酸，Xaa19是丙氨酸、谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸或谷氨酰胺，Xaa21是谷氨酸或天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是谷氨酰胺、天冬酰胺或天冬氨酸，Xaa27是亮氨酸，以及Xaa28是半胱氨酸、丙氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸。
8.根据权利要求1所述的药物组合物，其中在以上通式1中，Xaa1是组氨酸或4-咪唑乙酰基，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa3是谷氨酰胺，Xaa7是苏氨酸，Xaa10是酪氨酸，Xaa12是异亮氨酸，Xaa13是丙氨酸或半胱氨酸，Xaa14是甲硫氨酸，Xaa15是天冬氨酸，Xaa16是谷氨酸，Xaa17是异亮氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸或组氨酸，Xaa19是谷氨酰胺或半胱氨酸，Xaa20是赖氨酸，Xaa21是天冬氨酸，Xaa23是缬氨酸，Xaa24是天冬酰胺，Xaa27是亮氨酸，Xaa28是丙氨酸或天冬酰胺，Xaa29是谷氨酰胺或苏氨酸，以及Xaa30是半胱氨酸或赖氨酸或不存在。
9.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述肽是包含以下通式3的氨基酸序列的肽Xaa1–Xaa2–Gln–Gly–Thr–Phe–Thr–Ser–Asp–Tyr–Ser–Lys–Xaa13–Leu–Asp–Glu–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Lys–Xaa21–Phe–Val–Xaa24–Trp–Leu–Leu–Xaa28–Xaa29–Xaa30–Xaa31–Ser–Ser–Gly–Gln–Pro–Pro–Pro–Ser–Xaa40(通式3，SEQ ID NO:105)，
其中在以上通式3中，Xaa1是组氨酸或酪氨酸，Xaa2是α-甲基-谷氨酸或Aib，Xaa13是丙氨酸、酪氨酸或半胱氨酸，Xaa17是精氨酸、半胱氨酸或赖氨酸，Xaa18是丙氨酸或精氨酸，Xaa19是丙氨酸或半胱氨酸，Xaa21是谷氨酸或天冬氨酸，Xaa24是谷氨酰胺或天冬酰胺，Xaa28是半胱氨酸或天冬氨酸，Xaa29是半胱氨酸、组氨酸或谷氨酰胺，Xaa30是半胱氨酸或组氨酸，Xaa31是脯氨酸或半胱氨酸，以及Xaa40是半胱氨酸或不存在。
10.根据权利要求1所述的药物组合物，其中R1是半胱氨酸、GKKNDWKHNIT(SEQ IDNO:106)、CSSGQPPPS(SEQ ID NO:109)、GPSSGAPPPS(SEQ ID NO:110)、GPSSGAPPPSC(SEQ IDNO:111)、PSSGAPPPS(SEQ ID NO:112)、PSSGAPPPSG(SEQ ID NO:113)、PSSGAPPPSHG(SEQ IDNO:114)、PSSGAPPPSS(SEQ ID NO:115)、PSSGQPPPS(SEQ IDNO:116)或PSSGQPPPSC(SEQ IDNO:117)，或不存在。
11.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述肽包含选自SEQ ID NO:l至102的氨基酸序列。
12.根据权利要求1至9中任一项所述的药物组合物，其中在自所述通式的N端起第16位氨基酸和第20位氨基酸之间形成环。
13.根据权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，其中所述肽的C端被酰胺化。
14.根据权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物具有增加LDL吸收、抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性以及促进脂肪酸降解的效果中的至少一种。
15.用于预防或治疗高血脂症的药物组合物，其包含由以下化学式1表示的缀合物，
[化学式1]
X-La-F
其中X是对胰高血糖素受体、GLP-1受体和GIP受体具有活性的肽，
L是聚乙二醇，
a是0或自然数，其中当a为2或更大时，各L是独立的，
F是免疫球蛋白Fc区；以及
所述肽是包含由以下通式1表示的氨基酸序列的肽：
Xaa1–Xaa2–Xaa3–Gly–Thr–Phe–Xaa7–Ser–Asp–Xaa10–Ser–Xaa12–Xaa13–Xaa14–Xaa15–Xaa16–Xaa17–Xaa18–Xaa19–Xaa20–Xaa21–Phe–Xaa23–Xaa24–Trp–Leu–Xaa27–Xaa28–Xaa29–Xaa30–R1(通式1，SEQ ID NO:103)
在以上通式1中，
Xaa1是组氨酸(His，H)、4-咪唑乙酰基(CA)或酪氨酸(Tyr，Y)，
Xaa2是甘氨酸(Gly，G)、α-甲基-谷氨酸或氨基异丁酸(Aib)，
Xaa3是谷氨酸(Glu，E)或谷氨酰胺(Gln，Q)，
Xaa7是苏氨酸(Thr，T)或异亮氨酸(Ile，I)，
Xaa10是亮氨酸(Leu，L)、酪氨酸(Tyr，Y)、赖氨酸(Lys，K)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，
Xaa12是赖氨酸(Lys，K)、丝氨酸(Ser，S)或异亮氨酸(Ile，I)，
Xaa13是谷氨酰胺(Gln，Q)、酪氨酸(Tyr，Y)、丙氨酸(Ala，A)或半胱氨酸(Cys，C)，
Xaa14是亮氨酸(Leu，L)、甲硫氨酸(Met，M)或酪氨酸(Tyr，Y)，
Xaa15是半胱氨酸(Cys，C)、天冬氨酸(Asp，D)、谷氨酸(Glu，E)或亮氨酸(Leu，L)，
Xaa16是甘氨酸(Gly，G)、谷氨酸(Glu，E)或丝氨酸(Ser，S)，
Xaa17是谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)、异亮氨酸(Ile，I)、谷氨酸(Glu，E)、半胱氨酸(Cys，C)或赖氨酸(Lys，K)，
Xaa18是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、精氨酸(Arg，R)或组氨酸(His，H)，
Xaa19是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C)或缬氨酸(Val，V)，
Xaa20是赖氨酸(Lys，K)、谷氨酰胺(Gln，Q)或精氨酸(Arg，R)，
Xaa21是谷氨酸(Glu，E)、谷氨酰胺(Gln，Q)、亮氨酸(Leu，L)、半胱氨酸(Cys，C)或天冬氨酸(Asp，D)，
Xaa23是异亮氨酸(Ile，I)或缬氨酸(Val，V)，
Xaa24是丙氨酸(Ala，A)、谷氨酰胺(Gln，Q)、半胱氨酸(Cys，C)、天冬酰胺(Asn，N)、天冬氨酸(Asp，D)或谷氨酸(Glu，E)，
Xaa27是缬氨酸(Val，V)、亮氨酸(Leu，L)、赖氨酸(Lys，K)或甲硫氨酸(Met，M)，
Xaa28是半胱氨酸(Cys，C)、赖氨酸(Lys，K)、丙氨酸(Ala，A)、天冬酰胺(Asn，N)或天冬氨酸(Asp，D)，
Xaa29是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、谷氨酰胺(Gln，Q)、苏氨酸(Thr，T)、谷氨酸(Glu，E)或组氨酸(His，H)，
Xaa30是半胱氨酸(Cys，C)、甘氨酸(Gly，G)、赖氨酸(Lys，K)或组氨酸(His，H)，或不存在，以及
R1是半胱氨酸(Cys，C)、GKKNDWKHNIT(SEQ ID NO:106)、m–SSGAPPPS–n(SEQ ID NO:107)或m–SSGQPPPS–n(SEQ ID NO:108)，或不存在，
其中m是–Cys–、–Pro–或–Gly–Pro–，以及
n是–Cys–、–Gly–、–Ser–或–His–Gly–，或不存在。
16.根据权利要求15所述的药物组合物，其中所述免疫球蛋白Fc区是IgG Fc区。
17.根据权利要求15所述的药物组合物，其中所述药物组合物具有增加LDL吸收、抑制3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性以及促进脂肪酸降解的效果中的至少一种。
18.根据权利要求1所述的药物组合物，其中在自给予所述药物组合物24至48小时后，3-羟基-3-甲基戊二酰基-辅酶A还原酶(HMGCR)的活性小于50％。
19.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物减少血液中的甘油三酯水平和LDL水平。
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