CN115844977B - 一种可用于干眼spa雾化的抑菌草本组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药制剂技术领域，尤其涉及一种可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物及其制备方法。所述可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物包括：白茶水提物，菊花水提物，枸杞芽茶水提物，茶树精油稀释液，山茶油稀释液；其制备方法为：将白茶水提物、菊花水提物、枸杞芽茶水提物、茶树精油稀释液、山茶油稀释液加入到容器中，搅拌均匀，即得到所述可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物。本发明通过设计可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物，利用各草本成分的药用功能，发挥各组分协同作用，高效抑制干眼致病菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。
Description
技术领域
本发明涉及中药制剂技术领域，尤其涉及一种可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物及其制备方法。
背景技术
近几十年来，由于在日常生活中高强度，高频率的使用电脑、手机等视频终端产品，以及办公区对于空调环境的依赖，越来越多的人们，尤其是空调房中的电脑工作者，患有不同程度的干眼症。并且干眼症患者平常若不注重眼睛护理，加上滥用眼药水，则往往受到干眼症复发加重的困扰，使其逐渐发展成为一种慢性病。干眼症的表面症状常有视久疲劳，眼酸胀，干涩无泪，异物感等，由于干眼诱因错综复杂，且多数患者为混合型干眼，目前医院主流治疗手段是滴加人工泪液等，但治疗效果并不稳定；加之若长期使用，易产生依赖性；且眼药水中的化学药物成分亦可能对人体产生副作用。
从中医角度来说，干眼症属于白涩症，“神水枯瘁”等范畴，中医治疗干眼历史较为悠久，中医认其病机辨证运用五轮理论之轮脏隶属关系，强调眼表为标（轮），脏腑为本，宜辨轮脏虚实，治则标本兼顾。值得注意的是，干眼症的频发往往伴随着眼睛炎症的发生，而此种炎症多为有各种细菌，真菌，蠕形螨等感染引起的感染性炎症，以及眼部免疫功能损伤引起的非感染性炎症，两者综合作用的结果。一方面，眼干涩引起的泪液分泌量减少，以及泪液杀菌成分的变化，会加重眼睛感染的机率，从而产生结膜炎等轻中度炎症；而反过来，炎症可产生睑缘炎，堵塞睑板腺等，进而影响泪液分泌，使眼睛愈发干涩。因此，对干眼症而言，炎症与干涩两种并发症状之间相互密切影响。
目前干眼病较难治愈，治疗同时需长期进行保湿抗炎等的护理。中药雾化熏蒸在短期内对干眼症有着较显著的疗效，其不仅能够改善局部眼干、炎症等症状，而且在根本上给予辅助治疗，无毒副作用。因此，本发明旨在对以白茶为主的5种中草药复配液的抗菌效果进行分析，筛选得到一种对干眼炎症致病菌有较佳抑制效果的复合配方，并结合配方中各中草药护肝明目，活血生津等的功效，将此抑菌消炎配方应用至干眼SPA中的雾化熏蒸理疗中，从而为干眼症的缓解治疗提供一种新型的，天然的辅助性措施，以减弱干眼病患者对化学药物的依赖性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物及其制备方法。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物，其包括以下质量份数的组分：白茶水提物8份，菊花水提物2份，枸杞芽茶水提物2份，茶树精油稀释液5份，山茶油稀释液0~5份。
优选的，上述一种可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物，其包括以下质量份数的组分：白茶水提物8份，菊花水提物2份，枸杞芽茶水提物2份，茶树精油稀释液5份，山茶油稀释液5份。
其中所述白茶水提物由包括下述步骤的方法制备得到：提供经干燥至水分含量为6.24%的白茶，加工成细粉，加20~100倍质量的无菌水（优选为加20倍质量的无菌水），在温度90~100℃条件下浸提45min，将浸提液用纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到目标物白茶水提物。
其中，所述菊花水提物由包括下述步骤的方法制备得到：所述白茶水提物由包括下述步骤的方法制备得到：提供经干燥至水分含量为8.12%的菊花，加工成细粉，加10~30倍质量的无菌水（优选为加10倍质量的无菌水），沸水浴加热浸提45min，将浸提液用纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到目标物菊花水提物。
其中，所述枸杞芽茶水提物由包括下述步骤的方法制备得到：提供经干燥至水分含量为7.98%的枸杞芽茶，加工成细粉，加10~30倍质量的无菌水（优选为加10倍质量的无菌水），沸水浴加热浸提45min，将浸提液用纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到目标物枸杞芽茶水提物。
其中，所述茶树精油稀释液由包括下述步骤的方法制备得到：向高纯茶树精油中加入30vol%乙醇水溶液进行稀释，使得稀释后的茶树精油的浓度为4vol%，即得茶树精油稀释液。
其中，所述山茶油稀释液由包括下述步骤的方法制备得到：向高纯山茶油中加入30vol%乙醇水溶液进行稀释，使得稀释后的山茶油的浓度为4vol%，即得山茶油稀释液。
一种制备上述的可用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物的方法，具体为：将白茶水提物、菊花水提物、枸杞芽茶水提物、茶树精油稀释液、山茶油稀释液加入到容器中，搅拌均匀，即得到所述用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物。
上述一种抑菌草本组合物在制备治疗干眼病的药物中的应用。
本发明所涉及的5种中草药的药理活性如下：
白茶：早在《神农本草经》便记载有：“神农尝百草，日遇七十二度毒，得荼而解之”，阐明了茶的解毒等功效。随着近代研究的深入，亦发现茶具有抗菌明目等功效，尤其是白茶，其研究结果表明其能有效抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等眼致病细菌，同时对人体保肝护肝有一定作用。这些功效与茶叶中的茶多酚及其氧化产物，茶皂素，茶多糖，维生素c，维生素a等内含成分密切相关。
枸杞芽（叶）茶：枸杞芽（叶）茶属于绿茶，研究发现枸杞芽（叶）茶中的多酚类、黄酮类，多糖类等有良好的抗炎、抑菌杀螨，以及保护肝脏的作用。
菊花：研究表明其具有疏风清热，平肝明目等功效，同时菊花水提液对金黄色葡萄球菌等有良好的抑制作用。菊花已被应用于干眼症患者雾化熏蒸的临床治疗。
山茶油：山茶油主要通过影响细胞壁与细胞膜的通透性，甚至破坏细胞膜的完整性以达到抑菌抗炎的效果。
茶树精油：茶树精油作为一种天然抑菌剂，其内含成分：单萜烯类，醇类及倍半萜烯类化合物发挥着主要作用。茶树精油还被添加至护眼贴等中，被应用于干眼SPA热敷理疗以及眼科疾病中螨虫性睑缘炎的治疗。
本发明的显著优点在于：
（1）本发明采用天然中草药充分浸提后制成抑菌复合配方，不含化工合成抑菌剂和防腐剂，安全性高，对眼睛和眼部皮肤温和不刺激，可长期使用；
（2）本发明根据不同中草药的特性采取不同的提取工艺，并对多种中草药提取液进行复配，各中草药组分之间产生协同效应，对干眼致病菌（金葡菌和大肠杆菌）有较优的抑制效果；
（3）本发明为干眼SPA雾化熏蒸治疗提供一种天然草本配方，可在为干眼病患者雾化保湿的同时，也能够发挥其消炎抗菌的功效，有望对治疗干眼炎症（睑缘炎、感染性结膜炎等）有一定作用，从而减小干眼病患者对化学药剂的依赖性。
附图说明
图1：红茶水提物（BT）、绿茶水提物（GT）、白茶水提物（WT）、乌龙茶水提物（OT）、菊花水提物（J）、枸杞芽茶水提物（G）、茶树精油稀释液（CS）及山茶油稀释液（SC）对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果。
图2：三三复配抑菌草本组合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果。
图3：四四复配抑菌草本组合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果。
图4：五五复配抑菌草本组合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果。
图5：抑菌草本组合物对镰刀菌Fusarium.sp的抑菌效果。
图6：热处理及紫外线照射对抑菌草本组合物抑菌稳定性的影响。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
绿茶水提物的制备：提供经干燥至水分含量为5.22%的绿茶，加工成细粉，加20~100倍质量的无菌水，在温度90~100℃条件下浸提45min，将浸提液用三层纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到绿茶水提物。
白茶水提物的制备：提供经干燥至水分含量为6.24%的白茶，加工成细粉，加20~100倍质量的无菌水，在温度90~100℃条件下浸提45min，将浸提液用三层纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到白茶水提物。
红茶水提物的制备：提供经干燥至水分含量为6.82%的红茶，加工成细粉，加20~100倍质量的无菌水，在温度90~100℃条件下浸提45min，将浸提液用三层纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到红茶水提物。
乌龙茶水提物的制备：提供经干燥至水分含量为5.87%的乌龙茶，加工成细粉，加20~100倍质量的无菌水，在温度90~100℃条件下浸提45min，将浸提液用三层纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到乌龙茶水提物。
菊花水提物的制备：提供经干燥至水分含量为8.12%的菊花，加工成细粉，加10~30倍质量的无菌水，沸水浴加热浸提浸提45min，将浸提液用四层纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到菊花水提物。
枸杞芽茶水提物的制备：提供经干燥至水分含量为7.98%的枸杞芽茶，加工成细粉，加10~30倍质量的无菌水，沸水浴加热浸提浸提45min，将浸提液用三层纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到枸杞芽茶水提物。
茶树精油稀释液的制备：向高纯茶树精油中加入30vol%乙醇水溶液进行稀释，使得稀释后的茶树精油的浓度为4vol%，即得茶树精油稀释液。
山茶油稀释液的制备：向高纯山茶油中加入30vol%乙醇水溶液进行稀释，使得稀释后的山茶油的浓度为4vol%，即得山茶油稀释液。
对以上绿茶水提物、白茶水提物、红茶水提物、乌龙茶水提物、菊花水提物、枸杞芽茶水提物、茶树精油稀释液及山茶油稀释液进行抑菌活性测定：LB琼脂培养基斜面接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，37℃下培养18~24h，培养完后用液体LB培养基制成菌悬液（106CFU/m L），备用；取102型新华滤纸，经打孔器制成6mm的圆片，将100片滤纸圆片装于干燥的三角瓶中，置于高压蒸汽灭菌锅，121℃下灭菌15min，取出置于60℃鼓风干燥箱干燥，之后取出置于阴凉干燥处备用；将高温蒸汽杀菌后烘干备用的滤纸片分别放入绿茶水提物、白茶水提物、红茶水提物、乌龙茶水提物、菊花水提物、枸杞芽茶水提物、茶树精油稀释液、山茶油稀释液中浸泡12h，捞出沥干；取大肠杆菌与金黄色葡萄球菌菌悬液200微升于相应平板上用涂布棒将菌液涂布均匀，再用无菌镊子夹取沥干的滤纸片贴在含菌平板表面，每个平板2片，2片滤纸片置于距平板中心2cm外圈处，左右各一片；之后将贴有滤纸片的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌含菌平板置于37℃的恒温培养箱培养24h。用游标卡尺以十字交叉法测量抑菌圈直径。
结果显示（图1），料液质量比1:20条件下所得茶叶水提物抑菌效果较好，且白茶水提物对干眼致病菌（金葡菌和大肠杆菌）的整体抑制作用最强；料液质量比1:10条件下所得菊花水提物和枸杞芽茶水提物抑菌效果较好；白茶水提物抑菌活性显著高于枸杞芽茶水提物、菊花水提物、山茶油稀释液。枸杞芽茶与菊花药性偏寒，而白茶性温和；且茶树精油与山茶油为精油类，纯浓度的茶树精油与山茶油对眼睛与眼部皮肤有一定刺激性，其在复合配方中浓度不宜过高；故复配液采取以白茶为主要成分进行复配，作为优选方案。
实施例2
参照实施例1提供的方法制备白茶水提物（料液质量比1:20）、菊花水提物（料液质量比1:10）、枸杞芽茶水提物（料液质量比1:10）、茶树精油稀释液和山茶油稀释液。
按照下表中配方，将白茶水提物、菊花水提物、枸杞芽茶水提物、茶树精油稀释液、山茶油稀释液加入到容器中，搅拌均匀，得到抑菌草本组合物。
对抑菌草本组合物进行抑菌活性测定：LB琼脂培养基斜面接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，37℃下培养18~24h，培养完后用液体LB培养基制成菌悬液（106 CFU/m L），备用；取102型新华滤纸，经打孔器制成6mm的圆片，将100片滤纸圆片装于干燥的三角瓶中，置于高压蒸汽灭菌锅，121℃下灭菌15min，取出置于60℃鼓风干燥箱干燥，之后取出置于阴凉干燥处备用；将高温蒸汽杀菌后烘干备用的滤纸片放入抑菌草本组合物中浸泡12h，捞出沥干；取大肠杆菌与金黄色葡萄球菌菌悬液200微升于相应平板上用涂布棒将菌液涂布均匀，再用无菌镊子夹取沥干的滤纸片贴在含菌平板表面，每个平板2片，2片滤纸片置于距平板中心2cm外圈处，左右各一片；之后将贴有滤纸片的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌含菌平板置于37℃的恒温培养箱培养24h。用游标卡尺以十字交叉法测量抑菌圈直径。取直径6mm的镰刀菌Fusarium.sp菌饼接种于平皿中央；再夹取在抑菌草本组合物中浸泡10 min的2片滤纸片对称地置于离真菌菌饼2cm处，28℃培养72h后观察并测量抑菌圈。
结果显示（图2至图4），抑菌草本组合物WT+G+CS-2、WT+J+G+CS-1、WT+G+SC-2、WT+J+G+CS+SC-1对干眼致病细菌（金葡菌、大肠杆菌）的综合抑制效果最好，其中WT+G+CS-2表现最强；WT+J+G-1、WT+J+G-2、WT+J+CS+SC-1、WT+CS+SC-1对干眼致病细菌（金葡菌、大肠杆菌）的综合抑制效果最弱。抑菌草本组合物WT+J+G+CS-1和WT+J+G+CS+SC-1对镰刀菌Fusarium.sp有一定抑制作用（图5），其余抑菌草本组合物无抑制效果。总的来说，大多数抑菌草本组合物在茶树精油的存在下均表现出良好的抑菌活性。同时考虑到干眼SPA雾化熏蒸治疗中，高纯茶树精油会对眼睛与眼部皮肤产生一定的刺激性，因此或更建议WT+J+G+CS-1或WT+J+G+CS+SC-1作为优化的抑菌草本组合物，以保证抑菌抗炎疗效的同时，提高茶树精油稀释度来增强亲和性。
实施例3
参照实施例1提供的方法制备白茶水提物（料液质量比1:20）、菊花水提物（料液质量比1:10）、枸杞芽茶水提物（料液质量比1:10）、茶树精油稀释液和山茶油稀释液。
将8质量份白茶水提物、2质量份菊花水提物、2质量份枸杞芽茶水提物、5质量份茶树精油稀释液加入到容器中，搅拌均匀，得到抑菌草本组合物WT+J+G+CS-1。
将8质量份白茶水提物、2质量份菊花水提物、2质量份枸杞芽茶水提物、5质量份茶树精油稀释液、5质量份山茶油稀释液加入到容器中，搅拌均匀，得到抑菌草本组合物WT+J+G+CS+SC-1。
（1）热处理对抑菌草本组合物稳定性的影响：将抑菌草本组合物WT+J+G+CS-1或WT+J+G+CS+SC-1分别在40℃、60℃和80℃下处理45min，随后参照实施例2提供的方法进行抑菌活性测定。以未处理的优化配方作对照。
（2）紫外线照射对抑菌草本组合物抑菌稳定性的影响：将抑菌草本组合物WT+J+G+CS-1或WT+J+G+CS+SC-1分别置于紫外灯下照射10min、20min和30min，随后参照实施例2提供的方法进行抑菌活性测定。以未处理的优化配方作对照。
结果显示（图6），各抑菌草本组合物在经过不同温度处理后，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌几乎无抑制效果；与对照组相比，抑菌效果下降明显。紫外照射时间达30min时，WT+J+G+CS-1对大肠杆菌的抑菌效果显著下降（P<0.05），WT+J+G+CS+SC-1的抑菌效果变化则不显著；紫外照射对WT+J+G+CS+SC-1抑制金葡菌的效果影响大，10min后显著下降（P<0.05），WT+J+G+CS-1的抑菌效果变化则不显著。因此，抑菌草本组合物WT+J+G+CS-1和WT+J+G+CS+SC-1应当在低温下保存；抑菌草本组合物在紫外照射下的抑菌效果不稳定，应当避光保存。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (3)
1.一种用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物，其特征在于：所述抑菌草本组合物由以下质量份数的组分制成：白茶水提物8份，菊花水提物2份，枸杞芽茶水提物2份，茶树精油稀释液5份，山茶油稀释液0~5份；
所述白茶水提物由下述步骤的方法制备得到：提供经干燥至水分含量为6.24%的白茶，加工成细粉，加20~100倍质量的无菌水，在温度90~100℃条件下浸提45min，将浸提液用纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到目标物白茶水提物；
所述菊花水提物由下述步骤的方法制备得到：提供经干燥至水分含量为8.12%的菊花，加工成细粉，加10~30倍质量的无菌水，沸水浴加热浸提45min，将浸提液用纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到目标物菊花水提物；
所述枸杞芽茶水提物由下述步骤的方法制备得到：提供经干燥至水分含量为7.98%的枸杞芽茶，加工成细粉，加10~30倍质量的无菌水，沸水浴加热浸提45min，将浸提液用纱布过滤，滤出滤渣得一次过滤液，一次过滤液进一步减压过滤，得到目标物枸杞芽茶水提物；
所述茶树精油稀释液由下述步骤的方法制备得到：向高纯茶树精油中加入30vol%乙醇水溶液进行稀释，使得稀释后的茶树精油的浓度为4vol%，即得茶树精油稀释液；
所述山茶油稀释液由下述步骤的方法制备得到：向高纯山茶油中加入30vol%乙醇水溶液进行稀释，使得稀释后的山茶油的浓度为4vol%，即得山茶油稀释液；
所述用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物的制备方法为：将白茶水提物、菊花水提物、枸杞芽茶水提物、茶树精油稀释液、山茶油稀释液加入到容器中，搅拌均匀，即得到所述用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物。
2.根据权利要求1所述的用于干眼SPA雾化的抑菌草本组合物，其特征在于：所述抑菌草本组合物由以下质量份数的组分制成：白茶水提物8份，菊花水提物2份，枸杞芽茶水提物2份，茶树精油稀释液5份，山茶油稀释液5份。
3.如权利要求1所述的抑菌草本组合物在制备治疗干眼症的药物中的应用。
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Citations (4)
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| CN1141786A (zh) * | 1995-07-28 | 1997-02-05 | 李震超 | 治疗外眼病用的滴眼药物 |
| CN105560586A (zh) * | 2014-10-09 | 2016-05-11 | 澳门大学 | 一种人工泪液凝胶用组合物及由其制备的人工泪液凝胶 |
| CN106726898A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-05-31 | 杭州银茗生物技术有限公司 | 一种白茶提取物及其制备方法与应用 |
| CN113332366A (zh) * | 2020-03-02 | 2021-09-03 | 张腾龙 | 医药组成物用于制备治疗干眼症的药物的用途 |
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2022
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| 眼部蠕形螨的研究进展;沈满意;马晓萍;;复旦学报(医学版)(04);第587页第2段，第588页第4段 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| CN115844977A (zh) | 2023-03-28 |
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