CN115820403A - 一种原位杂交仪液路 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种原位杂交仪液路，旨在克服现有技术中成本高和使用不便的问题，它该液路的各个器件之间采用管路连接在一起从而构成液路，该液路的器件包括试剂库、混匀室、反应器、废液收集器、动力泵，试剂库包括至少为五个试剂仓，五个以上的试剂仓内用于分开存放各类试剂，混匀室连接在试剂库上，反应器连接在混匀室上，反应器包括反应槽，动力泵用于提供流体在该液路内流动的动力，废液收集器连接在混匀室和反应器上。

Description

一种原位杂交仪液路

技术领域

本发明属于原位杂交技术，特指一种原位杂交仪液路。

背景技术

原位杂交技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。它是利用杂交的原理，用荧光染料标记探针DNA，变性成单链后与变性后的染色体或细胞核特定靶DNA序列杂交，然后通过荧光显微镜观测荧光信号位置、大小及数量来判断待测序列的缺失、扩增及易位等情况。原位杂交技术弥补了经典原位杂交和染色体带型技术的不足，可以在分子水平上进行细胞遗传学分析，具有灵敏度高、特异性强、定位准确等优点，广泛应用于基因诊断、基因组作图和基因定位、核组成、染色体机构与功能、染色体进化、染色体鉴别等多个方面。

而为了代替人工执行原位杂交流程，现有公告号“CN104053995A”的中国发明公开了一种处理载玻片上的组织样本的自动系统和方法，用于处理设置在载玻片上的一个或多个组织样本，该系统包括：控制器，多个载玻片处理模块，布置成接收多个载玻片；至少一个流体分配机器人，由控制器构造成通过设置在至少一个流体分配机器人上的输出喷嘴而将多个试剂分配至接收在载玻片处理模块中的所述多个载玻片，以相应地处理所述一个或多个组织样本；以及至少一个泵吸装置，用于将所述试剂从包括所述试剂的多个试剂容器泵吸至至少一个流体分配机器人的输出喷嘴，其中该至少一个流体分配机器人由控制器构造成按照用于每个载玻片处理模块的预定顺序来分配所述试剂，以独立地处理设置在每个载玻片上的一个或多个组织样本。

然而现有技术不够完善，现有的原位杂交仪液路系统存在如下缺陷：虽然流体分配机器人解决了在载玻片处理模块中分配试剂的问题，但是流体分配机器人存在价格高的问题，这就导致初期的投入成本十分巨大，而且在分配试剂前，需要对流体分配机器人的姿态和时序进行编程，但流体分配机器人的编程存在工作量较大的问题。

发明内容

为克服现有技术的不足及存在的问题，本发明提供一种原位杂交仪液路。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种原位杂交仪液路，包括；

试剂库，其包括至少为五个试剂仓，五个以上的试剂仓内用于分开存放各类试剂，其中，试剂包括纯化水、无水乙醇、预处理液、酶消化液和清洗液；

混匀室，其连接在试剂库上；

反应器；其连接在混匀室上，反应器包括反应槽；

动力泵，其用于提供流体在该液路内流动的动力，其中，流体包括试剂和废液；

废液收集器，其用于收集废液，废液收集器连接在混匀室和反应器上。

作为优选，所述试剂库还连接在反应器上。

作为优选，还包括三通阀，三通阀包括入口和两个出口，入口连接在试剂库上，一个出口连接在混匀室上，另一个出口连接在反应器上。

作为优选，所述试剂库还包括第一阀门总成，第一阀门总成用于开闭试剂仓。

作为优选，所述第一阀门总成包括第一开关阀，第一开关阀的数量不少于试剂仓的数量，五个以上的试剂仓上分别设置有第一开关阀。

作为优选，所述试剂库包括第一透气口，混匀室包括第二透气口，第一透气口上设置有第一开关阀，第二透气口上设置有第三开关阀。

作为优选，所述动力泵包括第一动力泵和第二动力泵，第一动力泵设置在试剂库和混匀室之间，第二动力泵设置在废液收集器和混匀室之间。

作为优选，所述第一动力泵和第二动力泵均为旋转泵。

作为优选，还包括流量计，流量计用于测量该液路内试剂的流量。

作为优选，所述流量计设置在试剂库和混匀室之间，流量计还设置在试剂库和反应器之间。

作为优选，还包括压力传感器，压力传感器用于检测该液路内流体的压力。

作为优选，所述压力传感器包括第一压力传感器和第二压力传感器，第一压力传感器设置在试剂库和混匀室之间，第一压力传感器还设置在试剂库和反应器之间，第二压力传感器设置在废液收集器和反应器之间，第二压力传感器还设置在废液收集器和混匀室之间。

本发明相比现有技术突出且有益的技术效果是：

在本发明中，采用了动力泵、各类阀门和液路结构替代了传统的流体分配机器人，相较之下，所需的成本大大降低，而且结构更加精简，不需要专业技术人员也可以操控本液路，因此具有降低设备成本、操作简便、劳动投入低的优点。

原位杂交反应中需要进行梯度脱水和梯度清洗，需要不同浓度的乙醇水溶液和清洗液，传统技术采用事先配置好各种浓度的乙醇水溶液和清洗液并封装在不同容器中，这无疑增加了设备占用空间以及设备投入成本，在本发明中，设置有混匀室，在需要使用不同浓度的乙醇水溶液和清洗液混匀室可现场进行配置，从而无需事先配置，降低了设备的占用空间和设备投入成本，而且，混匀室可以配置出任意浓度的乙醇水溶液和清洗液，从而满足了各种原位杂交反应的脱水和清洗需求，因此本发明具有现配现用、设备小巧灵活、进一步降低设备成本、脱水和清洗的适用范围广的优点。

附图说明

图1是本发明的液路结构示意图；

图中：1-试剂库、2-混匀室、3-反应器、4-第一动力泵、5-第二动力泵、6-废液收集器、7-流量计、81-第一压力传感器、82-第二压力传感器、83-第一三通管、84-第二三通管、85-第三开关阀、86-第四开关阀、87-第五开关阀、88-三通阀、11-试剂仓、12-第一阀门总成、121-第一开关阀、13-第一透气口、21-第二透气口、31-反应槽、32-第二阀门总成、321-第二开关阀。

具体实施方式

为了便于本领域技术人员的理解，下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步描述。

如图1所示，一种原位杂交仪液路，用于对样本进行原位杂交(fluorescence insitu hybridization，简称为FISH)，该液路的各个器件之间采用管路连接在一起从而构成液路，该液路的器件包括试剂库、混匀室、反应器、废液收集器、动力泵、流量计、压力传感器、三通阀、第一三通管、第二三通管、第三开关阀、第四开关阀和第五开关阀。

样本

样本指的是含有靶基因的被分析物质，靶基因可以包括蛋白质、多肽、酶、激素、抗体、靶核酸片段等生物活性物质，这些被分析物广泛存在于全血、血清、血浆、尿、唾液之中。靶基因能够与特异性核酸探针进行特异性反应，特异性核酸探针具有荧光编码微球，用户可通过荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪观察到被特异性核酸探针标记的靶基因，从而达到确定靶基因的形态和分布的作用，以及达到对靶基因进行定位的作用。

在本实施例中，样本被固定在载玻片上，以便于在该液路上完成原位杂交反应后通过荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪观察样本。样本在载玻片上的固定方法为现有技术，在此不再复述。

试剂库

试剂库用于分开存放各类试剂，包括至少五个试剂仓，试剂仓为一个中空的容器，试剂库内五个以上的试剂仓是相互独立且互不干扰的，可用于分开存放各类试剂，其中，试剂包括纯化水、无水乙醇、预处理液、酶消化液和清洗液。在本实施例中，试剂库为六个，其中五个试剂库分别用于存放纯化水、无水乙醇、预处理液、酶消化液和清洗液，剩余一个试剂库可以是空置的，作为备用的试剂库。

纯化水指的是去离子水，可以采用蒸馏法、离子交换法或反渗透法等方法制备得到，以满足原位杂交反应的需要，在原位杂交反应前，纯化水用于清洗该液路、配置不同浓度的乙醇水溶液和对样本进行水浴等。

无水乙醇指的是乙醇浓度在99.5％以上的乙醇水溶液，无水乙醇和纯化水作为配置不同浓度的乙醇水溶液的原料。

预处理液指的是预处理反应中使用到的溶液。预处理反应指的是样本在进行原位杂交之前的处理方法，主要用于去除影响原位杂交反应的影响因素和提高杂交率的作用，具体方法包括将样本放入预处理液中进行水浴处理，水浴温度在50-120℃之间。常见的预处理液包括1mol/L硫磺酸钠水溶液、30％质量分数酸性亚硫酸钠水溶液、10mmol/L柠檬酸水溶液中的至少一种。影响原位杂交反应的影响因素包括样本由于静电效应导致特异性核酸探针和样本发生非特异性结合而导致标记的问题。

酶消化液指的是包含蛋白水解酶的溶液，用于分解样本中靶基因周围的蛋白质，以增加特异性核酸探针与靶基因结合的机会，提高了杂交信号，在本实施例中，蛋白水解酶包括胃蛋白酶或蛋白酶K(Proteinase K)。

清洗液又称为缓冲液，用于清洗原位杂交反应后的样本，由于原位杂交后，反应槽中的样本上设置有多余未结合的特异性核酸探针，还设置有与样本非特异性结合的特异性核酸探针，为了清洗掉这些干扰杂交信号的因素，采用不同浓度的清洗液对样本进行梯度洗涤。在本实施例中，清洗液包括柠檬酸缓冲液、或枸橼酸缓冲液或PBS缓冲液或磷酸盐缓冲液。

试剂库还包括第一阀门总成，第一阀门总成用于开闭试剂仓，试剂仓通过第一阀门总成连接在混匀室和反应器上。在实际使用中，第一阀门总成开启时，试剂仓内的试剂可通过第一阀门总成流向混匀室和反应器；若第一阀门总成关闭时，第一阀门总成截止试剂仓内的试剂流向混匀室和反应器，从而得以控制试剂仓内的试剂与混匀室和反应器之间的通断。

第一阀门总成包括第一开关阀，第一开关阀的数量不少于试剂仓的数量，第一开关阀设置在对应的试剂仓，每个试剂仓上的第一开关阀均是相互独立的，每个试剂仓上的第一开关阀可以独立控制对应的试剂仓。在实际使用中，用户可以选择性地开闭第一开关阀，从而达到选择性地开启或关闭六个试剂仓，以助于不同种类的试剂按照原位杂交的反应步骤流向反应槽。在本实施例中，第一开关阀为七个，其中六个第一开关阀一一对应于六个试剂仓，剩余的一个第一开关阀连接在第一透气口上。而为了达到第一开关阀的自动化开闭，第一开关阀采用的是电磁阀。

试剂库还包括第一透气口，第一透气口连接在混匀室和反应器上，外界与混匀室和反应器通过第一透气口连通在一起。在实际使用中，外界中的空气可通过第一透气口流入该液路的管路中并流向混匀室和反应器，空气可带走该液路的管路、混匀室和反应器中残留的液体，用以保证器件的干燥。试剂仓设置在第一透气口和试剂库连接在该液路的管路位置之间，从而保证从第一透气口进入的气流可全方位地吹干试剂库和混匀室之间的管路。

为了能够在试剂库和混匀室之间形成单向气流，混匀室包括第二透气口。在实际使用中，第一透气口用于进气，第二透气口用于出气，试剂库和混匀室之间形成的单向气流可带走该液路的管路内以及混匀室内残余的液体。

第一透气口上设置有第一开关阀，第二透气口上设置有第三开关阀，第一开关阀用于控制第一透气口的开闭，第三开关阀用于控制第二透气口的开闭。为了实现第三开关阀的自动化控制，第三开关阀选用的是电磁阀。

混匀室

混匀室内用于混匀试剂，混匀室连接在试剂库上。在实际使用中，试剂仓内的试剂可流入混匀室内，两种以上的试剂可在混匀室内混合均匀，混合均匀的试剂可用于后续在反应器中参与原位杂交反应。混合均匀的试剂包括不同梯度浓度的乙醇水溶液和不同梯度浓度的清洗液，在原位杂交反应中，不同梯度的乙醇水溶液事先在混匀室内配制而成，不同梯度的乙醇水溶液用于对样本进行梯度脱水。相较于传统的采用事先配置好的各种梯度浓度乙醇水溶液用于梯度脱水，混匀室的设计降低了试剂库的占用空间，而且用户根据实际需要配置任意乙醇浓度的乙醇水溶液。

混匀室包括一个中空的容器，在该容器中用于存放试剂，混匀室可采用搅拌或者振匀的方式将两种以上的试剂混合均匀。若采用的是搅拌的方式时，混匀室可包括一个可转动的搅拌棒(图中未示出)，可转动的搅拌棒设置在该容器中，搅拌棒用于在试剂中转动以达到搅拌的目的。若采用的是振动的方式时，混匀室可包括一个生物摇床(图中未示出)，该容器可放置在生物摇床上，生物摇床用于产生振动从而达到振匀试剂的目的。

反应器

反应器指的是用于进行原位杂交反应的场所。反应器连接在混匀室上，试剂库中的试剂可通过混匀室流向反应器，反应器还连接在试剂库上，试剂库中的实际还可直接流向反应器。上述管路结构的设计考虑到有些试剂需要在混匀室配置后才能够参与原位杂交反应，还有些试剂能够直接参与原位杂交反应，例如，需要在混匀室配置的试剂包括纯化水和无水乙醇，能够直接参与原位杂交反应的试剂包括酶消化液。

第五开关阀设置在混匀室和反应器之间。在实际使用中，若第五开关阀开启时，混匀室内混合均匀的试剂可通过第五开关阀流向反应器；若第五开关阀关闭时，第五开关阀截止混匀室和反应器之间的连通。为了实现第五开关阀的自动化控制，第五开关阀采用的是电磁阀。

三通阀包括一个入口和两个出口，试剂库连接在入口上，混匀室连接在一个出口上，反应器连接在另一个出口上。在实际使用中，用户通过控制三通阀从而控制反应库内的试剂是流向混匀室还是流向反应器。而为了提高三通阀的自动化控制，三通阀选用的是电磁阀。

反应器包括反应槽，反应槽为一个带有槽口的容器，反应槽内用于放置试剂和样本。在实际使用中，用户可将固定有样本的载玻片放入反应槽内，按照原位杂交的反应步骤依次将试剂仓内的试剂加入到反应槽内，从而完成原位杂交检测。在本实施例中，反应槽为六个，六个反应槽是相互独立且互不干扰的，六个反应槽内可同时进行原位杂交反应，在实际使用中，反应器可对多个样本同时进行原位杂交反应。

反应器还包括第二阀门总成，第二阀门总成用于开闭反应槽，反应槽通过第二阀门总成连接混匀室和试剂库。在实际使用中，若第二阀门总成开启时，混匀室内的试剂或者试剂库内的试剂可通过第二阀门总成流向反应槽；若第二阀门总成关闭时，第二阀门总成截止混匀室内的试剂或者试剂库内的试剂流入反应槽。

第二阀门总成包括第二开关阀，第二开关阀的数量不少于反应槽的数量，第二开关阀设置在对应的反应槽，每个反应槽上的第二开关阀均是相互独立的，每个反应槽上的第二开关阀可以独立控制对应的反应槽。在实际使用中，用户可以选择性地开闭第二开关阀，从而达到选择性地开启或关闭六个反应槽，以助于不同样本的原位杂交反应在反应器中同时进行。在本实施例中，第二开关阀为七个，其中六个第二开关阀一一对应于六个反应槽，剩余的一个第二开关阀连接在废液收集器上。而为了达到第二开关阀的自动化开闭，第二开关阀采用的是电磁阀。

反应器还包括加热器(图中未示出)，加热器设置在反应槽上，加热器用于对反应槽进行加热，使得试剂能够在所需温度下对样本进行处理。

而为了反应槽内样本能够与试剂充分接触，提高处理速率，反应槽上还可设置生物摇床，生物摇床可对反应槽进行振动。

废液收集器

废液收集器用于收集废液，废液包括预处理产生的废液、梯度脱水产生的废液、梯度清洗产生的废液、酶消化产生的废液和原位杂交反应产生的废液。废液收集器为一个容器，收集到的废液可容纳在该容器内。

废液收集器连接在混匀室和反应器上，混匀室内产生的废液可直接流向废液收集器，反应器上产生的废液可直接流向废液收集器。

第四开关阀设置在混匀室和废液收集器之间。在实际使用中，若第四开关阀开启时，混匀室内的废液可通过第四开关阀流向废液收集器；若第四开关阀关闭时，第四开关阀截止混匀室和废液收集器连通在一起。为了能够对第四开关阀实现自动化控制，第四开关阀选用的是电磁阀。第二开关阀设置在反应器和废液收集器之间，也为电磁阀。其原理和第四开关阀相同，在此不再复述。

第一三通管包括三个开口，混匀室、第四开关阀和第五开关阀分别连接在三个开口上，使得混匀室内的废液可分流至第四开关阀以及混匀室内混合均匀的试剂分流至第五开关阀。

第二三通管包括三个管口，废液收集器、第二开关阀和第四开关阀分别连接在三个管口上，使得流经第二开关阀的废液和第四开关阀的废液可汇流至同一个废液收集器内。

动力泵

动力泵用于提供流体在该液路内流动的动力，其中，流体包括试剂和废液。若动力泵工作时，可驱动试剂库内的试剂流入混匀室或者反应器内，还可驱动混匀室内废液或者反应器内的废液流向废液收集器内。

动力泵包括第一动力泵，第一动力泵设置在试剂库和混匀室之间，第一动力泵还设置在试剂库和反应器之间，第一动力泵用于驱动试剂库内的试剂流入混匀室或者反应器内。具体地，试剂库通过第一动力泵连接在三通阀的入口上。

动力泵还包括第二动力泵，第二动力泵设置在废液收集器和混匀室之间，第二动力泵还设置在废液收集器和反应器之间，第二动力泵用于驱动混匀室内废液或者反应器内的废液流向废液收集器内。具体地，废液收集器通过第二动力泵连接在第二三通管的管口上。

第一动力泵和第二动力泵均为电动的旋转泵，旋转泵是依靠泵内转子旋转来吸入或排出流体的。在本实施例中，第一动力泵和第二动力泵采用的品牌为WELCH，采用的型号为P6Z-101杂，具有良好的抗腐蚀、耐磨损性能，使用寿命更长，无需经常更换泵的配件。

流量计

流量计用于测量该液路的管路中试剂的流量。若该液路中试剂流动时，流量计可对试剂的流量进行测量。流量计设置在试剂库和混匀室之间，流量计还设置在试剂库和反应器之间，流量计用于测量试剂库内的试剂流向混匀室和反应器的流量。具体地，流量计设置在试剂库和第一动力泵之间。

压力传感器

压力传感器用于检测该液路的管路中流体的压力。若试剂在该液路的管路中流动时，压力传感器能够检测试剂的流动压力；若废液在该液路的管路中流动是，压力传感器能够检测废液的流动压力。

压力传感器包括第一压力传感器，第一压力传感器设置在试剂库和混匀室之间，第一压力传感器还设置在试剂库和反应器之间，第一压力传感器用于检测试剂库内的试剂流向混匀室和反应器的流动压力。具体地，第一压力传感器设置在第一动力泵和三通阀的入口之间。在实际使用中，通过观察第一压力传感器检测到的压力可确定试剂库内的试剂是否正常流向混匀室和反应器、试剂库内的试剂量是否不足、流向混匀室和反应器的试剂是否堵塞在该液路的管路中。

压力传感器还包括第二压力传感器，第二压力传感器设置在废液收集器和反应器之间，第二压力传感器还设置在废液收集器和混匀室之间，第二压力传感器用于检测混匀室和反应器内的废液流向废液收集器的流动压力。具体地，第二压力传感器设置在第二动力泵和第二三通管的管口之间。在实际使用中，通过观察第二压力传感器检测到的压力可确定混匀室和反应器内的废液是否正常流向废液收集器、混匀室和反应器内的废液是否完全排出、流向废液收集器的废液是否堵塞在该液路的管路中。

控制器(图中未示出)

控制器用于按照预设程序控制该液路中的器件的处理器。第一开关阀、第二开关阀、第三开关阀、第四开关阀、第五开关阀、第一动力泵、第二动力泵、流量计、第一压力传感器、第二压力传感器、生物摇床和加热器分别电连接在控制器上，控制器根据预设的程序按顺序对第一开关阀、第二开关阀、第三开关阀、第四开关阀、第五开关阀、第一动力泵、第二动力泵、生物摇床和加热器进行控制，另外，当流量计检测到的流量信号、第一压力传感器检测到的流量信号和第二压力传感器检测到的流量信号异常时，可停止该液路的工作，用户可根据异常信号对该液路进行检修。在本实施例中，控制器为PLC，PLC具有编程操作简单、控制可靠和便于安装等优势。

一种原位杂交仪液路的检测方法

本发明还提供了一种原位杂交仪液路的检测方法，采用上述的液路执行。该方法包括如下步骤：

步骤1：初始化原位杂交仪液路，第一动力泵将试剂仓内的纯化水输送至混匀室和反应槽从而纯化水对混匀室和反应槽进行清洗，第二动力泵将混匀室和反应槽内产生的废液输送至废液收集器中，第一动力泵将空气输送至混匀室和反应槽从而空气吹干混匀室和反应槽；

上述步骤中，原位杂交仪液路的初始化指的是对该液路进行供电并复位流量计、第一压力传感器和第二压力传感器。清洗混匀室和反应槽的纯化水一般采用40ml。

步骤2：将样本放入反应槽内；

上述步骤中，样本是被固定在载玻片上，用户将设置有样本的载玻片手动放入反应槽内。

步骤3：第一动力泵将试剂仓内的纯化水输送至反应槽内，加热器对反应槽进行加热从而样本在反应槽内进行水浴处理，第二动力泵将反应槽内的废液输送至废液收集器中，第一动力泵将空气输送至反应槽从而空气吹干混匀室和反应槽；

上述步骤中，加热器将水浴温度控制在80℃，水浴时间控制在6min，水浴处理使用到的纯化水一般为40ml，6min后，第二动力泵将反应槽内的废液排出，并且加热器停止加热。

步骤4：第一动力泵将试剂仓内的预处理液输送至反应槽内，加热器对反应槽进行加热从而样本在反应槽内进行预处理，第二动力泵将反应槽内的废液输送至废液收集器中；

上述步骤中，加热器将预处理温度控制在88℃，预处理时间控制在15min，预处理使用到的预处理液一般为40ml，15min后，第二动力泵将反应槽内的废液排出，并且加热器将反应槽温度控制在37℃。预处理后去除样本中影响原位杂交反应的影响因素和提高杂交率。

步骤5：第一动力泵将试剂仓内的酶消化液输送至反应槽内，加热器对反应槽进行加热从而样本在反应槽内进行酶消化处理，第二动力泵将反应槽内的废液输送至废液收集器中，第一动力泵将试剂仓内的纯化水输送至混匀室和反应槽从而纯化水对混匀室和反应槽进行清洗，第二动力泵将混匀室和反应槽内产生的废液输送至废液收集器中；

上述步骤中，加热器将酶消化温度控制在37℃，酶消化处理使用到的酶消化液一般为40ml，酶消化时间控制在25min，25min后，再采用纯化水清洗反应槽。

步骤6：第一动力泵将试剂仓内无水乙醇输送至反应槽内，无水乙醇对样本进行脱水处理1min，第二动力泵将反应槽内产生的废液输送至废液收集器，第一动力泵将试剂仓内无水乙醇和纯化水输送至混匀室内配置成乙醇浓度为85％的乙醇水溶液，再将混匀室内85％的乙醇水溶液输送至反应槽内，85％的乙醇水溶液对样本进行脱水处理1min，第二动力泵将反应槽内产生的废液输送至废液收集器，第一动力泵将试剂仓内无水乙醇和纯化水输送至混匀室内配置成乙醇浓度为70％的乙醇水溶液，再将混匀室内70％的乙醇水溶液输送至反应槽内，85％的乙醇水溶液对样本进行脱水处理1min，第二动力泵将反应槽内产生的废液输送至废液收集器；

上述步骤中，对样本进行脱水的乙醇水溶液的浓度逐渐降低，从而达到梯度脱水的效果。

步骤7：将特异性核酸探针放入反应槽内，第一动力泵将试剂仓内的纯化水输送至反应槽内，特异性核酸探针和样本在反应槽内进行原位杂交反应；

上述步骤中，用户可手动特异性核酸探针放入反应槽内。输送至反应槽内的纯化水一般采用30ml，原位杂交反应时间一般为14小时，14小时后，将反应槽内的废液排出。

步骤8：第二动力泵将混匀室和反应槽内产生的废液输送至废液收集器中，第一动力泵将试剂仓内的清洗液输送至反应槽内，加热器对反应槽进行加热从而样本在反应槽内进行清洗处理，第二动力泵将反应槽内的废液输送至废液收集器中；

上述步骤中，加热器将清洗处理的温度控制在73℃，清洗处理的时间为2min，清洗液一般采用40ml，2min后，第二动力泵将反应槽内的废液输送至废液收集器中。

步骤9：第二动力泵将无水乙醇和纯化水输送至混匀室内配置成乙醇浓度为70％的乙醇水溶液，再将混匀室内70％的乙醇水溶液输送至反应槽内，70％的乙醇水溶液对样本进行脱水处理2min，第二动力泵将反应槽内产生的废液输送至废液收集器；

上述步骤中，第二动力泵将废液排出后，样本完成了原位杂交反应，用户可将反应槽内的样本取出，并可放置在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下进行观察，从而根据荧光信号确定靶基因的形态和分布。

上述实施例仅为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种原位杂交仪液路，其特征在于，包括；

试剂库，其包括至少为五个试剂仓，五个以上的试剂仓内用于分开存放各类试剂，其中，试剂包括纯化水、无水乙醇、预处理液、酶消化液和清洗液；

混匀室，其连接在试剂库上；

反应器；其连接在混匀室上，反应器包括反应槽；

动力泵，其用于提供流体在该液路内流动的动力，其中，流体包括试剂和废液；

废液收集器，其用于收集废液，废液收集器连接在混匀室和反应器上。

2.根据权利要求1所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，所述试剂库还连接在反应器上。

3.根据权利要求2所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，还包括三通阀，三通阀包括入口和两个出口，入口连接在试剂库上，一个出口连接在混匀室上，另一个出口连接在反应器上。

4.根据权利要求1所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，所述试剂库还包括第一阀门总成，第一阀门总成用于开闭试剂仓。

5.根据权利要求4所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，所述第一阀门总成包括第一开关阀，第一开关阀的数量不少于试剂仓的数量，五个以上的试剂仓上分别设置有第一开关阀。

6.根据权利要求1所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，所述试剂库包括第一透气口，混匀室包括第二透气口，第一透气口上设置有第一开关阀，第二透气口上设置有第三开关阀。

7.根据权利要求1所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，所述动力泵包括第一动力泵和第二动力泵，第一动力泵设置在试剂库和混匀室之间，第二动力泵设置在废液收集器和混匀室之间。

8.根据权利要求7所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，所述第一动力泵和第二动力泵均为旋转泵。

9.根据权利要求1所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，还包括流量计，流量计用于测量该液路内试剂的流量。

10.根据权利要求1所述的一种原位杂交仪液路，其特征在于，还包括压力传感器，压力传感器用于检测该液路内流体的压力。

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