CN115804830B - 一种缩短迟滞期的戈舍瑞林缓释植入剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种缩短迟滞期的戈舍瑞林缓释植入剂，所述戈舍瑞林缓释植入剂按重量百分比计包含下述组分：戈舍瑞林18％～22％，水不溶性缓释聚合物78％～82％；所述水不溶性缓释聚合物按重量百分比计由50～95％的丙交酯乙交酯共聚物1和5～50％的丙交酯乙交酯共聚物2组成。本发明体内释药过程为在相对较短的突释期后，实现多肽连续释放，期间没有释药潜伏期。

Description

一种缩短迟滞期的戈舍瑞林缓释植入剂

技术领域

本发明涉及药物生产技术领域，特别涉及一种缩短迟滞期的戈舍瑞林缓释植入剂。

背景技术

戈舍瑞林(goserelin)是目前研究最广的治疗绝经前激素受体阳性乳腺癌患者的促性腺释放激素类似物(LHRH-A)。戈舍瑞林功效因给药方式和剂量的不同具体表现为正向促进和负向调节，当发生短期、低剂量给药时，对垂体-性腺轴起到促进作用，临床上可治疗性功能低下、不排卵、青春期延后等症状。长期使用则抑制垂体-性腺轴分泌LHRH，从而引起男性血清睾酮和女性血清雌二醇的下降，临床上用于治疗性激素依赖性疾病，如前列腺癌、乳腺癌、子宫肌瘤、子宫内膜异位症、性早熟等，停药后作用可逆转。

市售戈舍瑞林植入剂的商品名为诺雷得是一种长效的缓释制剂，作用时间可维持1个月。诺雷得于1987年在法国获准上市，1989年获FDA批准上市，1996年在中国上市，目前的销量在LHRHa制剂中世界排名第二。体内给药后，植入剂表面药物会引起血药浓度急剧上升，对垂体-性腺轴起到顺时兴奋作用，这个过程中体内性激素水平短暂上升，随后药物进入持续释放期，对垂体-性腺轴起到长期抑制作用，具体表现为性激素分泌能力下降。因此，适当的突释是很有必要的，将引发负反馈调节机制，睾酮浓度将一直保持在去势后的浓度范围，从而持续发挥治疗效果。

是由冻干加热熔挤出(HME)技术制成的，其专利US5366734披露的工艺流程为：戈舍瑞林与聚合物分别溶于醋酸→溶液混匀→过滤除菌→冷冻干燥→加热挤压→切割装配→包装，这种连续生产工艺，存在诸多优点：连续生产、步骤少、放大效应小，相比微球载药过程，工艺参数更简单、可控。由于该制备体系为无水体系，所以产品内部孔隙率极低，植入剂在体内产生极小的药物突释后，在很长一段时间进入释药潜伏期，不再释放有效的药物，直至聚合物充分水合、初步降解、形成新的药物通道后，再次迎来快速释药期。

体内多肽的释放行为，虽然发生在一段时间内，但是不连续的，导致其形成了双相的释放模式，起始的突释，很少或没有释放多肽的潜伏期，以及释放大部分剩余多肽的快速释放期。事实证明，漫长的药物释放潜伏期是不必要的，起效慢，也并没有延长其持续释药周期。

然而，具有完美释放行为的处方开发过程并不容易。

由多肽和聚合物组成的缓释组合物释放多肽通过两种不同的独立机制进行，前期：聚合物水合后，表面的多肽或组合物内部水通道附近的多肽是依赖浓度扩散到介质中；中后期：随着聚合物的水解，自催化降解，形成更多的水通道，多肽通过水通道从组合物中扩散。

由于在组合物中，多肽与聚合物的相容性极有限，通过聚合物基质扩散只能释放很少的多肽，尤其是高分子量聚合物，多肽的扩散速率是最低的，在最初突释后，多肽在聚合物中的扩散速率不足以实现连续将多肽从内部运输到表面，药物释放很快停止。所以，如果多肽从组合物中的初始扩散和聚合降解后多肽的再次释放在时间上被分开，那么多肽的释放行为便是不连续的。就会出现少量的初始释放，很少或没有释放多肽的潜伏期，以及快速释放期，在此期间，基本上所有剩余的多肽都将被释放。

通过选择适当组合物参数，使基质扩散阶段和聚合物降解诱导的释放阶段可以在时间上重叠。或者延长初始扩散阶段，或者使聚合物降解诱导相更早的开始，或者两者相互作用的重叠。

初始释放阶段是不易延长的，延长初始释放的周期，将会引起更大程度的起始突释，使大量的药物在起始阶段释放，不但引起血药浓度的急剧上升，超出起效浓度，也给后期药物释放带来负面的影响，即装载10～20％的药物在该阶段释放，减少后期药物持续释放周期及平均血药浓度水平。

如果是通过更早的诱导聚合物降解，方式有如下：1)增加低聚体数量；2)增加基质中肽浓度，促进吸水；3)增加聚合物中乙交酯或乙醇酸片段长；4)选择高度异质性的聚合物，PDI比较宽。

增加低聚体的数量可以在一定程度上缩短迟滞期，是由于低聚体分子量较低、亲水性较好，降解及扩散速率较快，但起始突释增加是不可避免的，低聚体发挥作用的时期并没有被排除在起始突释期外，尤其低聚体增加后，也夹带了很多单体，都会增加起始突释效应。

增加基质中多肽的浓度，在一定程度上，利用多肽的亲水性，可以增加前期释放速率，缩短迟滞期。随着组合物中多肽浓度的增加，基质起始吸水性增加，使聚合物缝隙中的多肽转移至介质中，但对于存在于孤立的结构域中的多肽还是不会被释放，只有当聚合物降解形成的二次亲水路径可用，这些多肽才会被释放。所以，增加多肽浓度对缩短迟滞期没有本质上的影响，只是轻微延长了起始释放的作用时间。

增加聚合物中乙交酯或乙醇酸片段长，可以提高聚酯降解速率，丙交酯乙交酯共聚物或聚乳酸乙醇酸共聚物是由丙交酯、乙交酯单体或乳酸、乙醇酸单体熔融共聚，或脱水缩聚所形成。其中，两种单体的反应速率及降解速率都存在一定的差异，聚乙醇酸片段比聚乳酸片降解要快，其分子量更低，亲水性更强，聚合物更强的亲水性会缩短迟滞期，使聚合物降解加快，同时也会带来更快的快速释放期，使药物在短时间内完全释放，降低聚合物释放的持续周期。增加聚合物中乙交酯或乙醇酸片段长，增加前期释放，但不一定满足后期持续释放。

选择高度异质性的聚合物，例如PDI比较宽的单一聚合物。与增加聚合物中低聚体的数量有着异曲同工之处，都是通过增加低分子量部分增加起始释放行为，但并不能卓越的将漫长的迟滞期消除，且这种高度异质性聚合物的获得也很难，聚合物合成的发展方向是更均一、分子量分布更可控的高聚合物，通过将高分子量聚合物水解可以获得高度异质性的聚合物，但是控制过程比较繁琐。

基于对上述各种路径进行大量深入研究后，均不能满足需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种缩短迟滞期的戈舍瑞林缓释植入剂，其体内释药过程为在相对较短的突释期后，实现多肽连续释放，期间没有释药潜伏期。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种缩短迟滞期的戈舍瑞林缓释植入剂，所述戈舍瑞林缓释植入剂按重量百分比计包含下述组分：戈舍瑞林18％～22％，水不溶性缓释聚合物78％～82％；

所述水不溶性缓释聚合物按重量百分比计由50～95％的丙交酯乙交酯共聚物1和5～50％的丙交酯乙交酯共聚物2组成；

所述丙交酯乙交酯共聚物1中，丙交酯与乙交酯摩尔比为75:25～45:55，其合成底物丙交酯为D,L-丙交酯或D,L-乳酸；

所述丙交酯乙交酯共聚物2中，丙交酯与乙交酯摩尔比为75:25～45:55，其合成底物丙交酯选自L-丙交酯、L-乳酸、D,L-丙交酯和L-丙交酯的混合物、D,L-乳酸和L-乳酸的混合物中的一种。本发明的戈舍瑞林缓释植入剂为直径1.1～1.3mm，长度10～13mm的棒状物。

为获得一种既要满足前期快速释放，又满足后期持续释放的高聚物组合物。为此，我们开展了大量的关于聚合物的研究。聚酯类作为载体的多肽释放行为几乎与聚合物载体基质的吸水行为相同步。也就是说，当多肽释放是不连续的时，吸水也是不连续的，相反，当多肽释放是连续的时，吸水也是连续发生的过程。进一步的研发了一种具有光学活性的丙交酯乙交酯共聚物。这种具有光学活性的聚合物，具有极低的突释行为，更快速的水合周期，可显著缩短迟滞期，使多肽释放呈连续态。可满足对这种理想聚合物的需求。具有低的突释行为，快速的水合周期，可缩短迟滞期，使多肽释放呈连续态。具体的技术方案是，通过混合包括具有不同的降解机制的两种丙交酯乙交酯共聚物，作为药物载体，获得了既满足前期极小的突释，显著缩短的迟滞期，又满足后期持续28d以上的释药行为。

这里需要说明的是，起始突释在体内是有效的(5-8ng/mL)，该浓度范围即可引起后期的负反馈调节，所以我们并不打算增加起始突释，这对于后期的药物释放是不利的，浪费了一部分药物，但没有增加治疗疗效。我们保留了一定的起始突释水平，又针对于缩短迟滞期提出了一种新的组合物，来解决上述困境。

本发明的技术方案提供了一种戈舍瑞林缓释植入剂，其在体内释放行为是，在少量的初始释放后，便开始缓慢逐渐增强的持续释放，以及接下来的快速释放期，其快速释放周期不短于

所述的植入剂组成成分如下：戈舍瑞林18％～22％，水不溶性缓释聚合物78％～82％。该药物组成可满足植入剂在体内持续释放周期不短于28d，且血浆药物浓度始终维持在治疗窗内。

其中，所述的戈舍瑞林为碱或盐的形式，盐形式可以是醋酸盐、双羟萘酸盐等。

当植入剂在体内持续释放周期为28d时，所述的戈舍瑞林优选为醋酸盐形式。

作为优选，所述丙交酯乙交酯共聚物1的比旋度为-5°～+5°；所述丙交酯乙交酯共聚物2为具有光学活性的聚合物，其比旋度为-60°～-180°。

作为优选，所述丙交酯乙交酯共聚物2为具有光学活性的聚合物，其比旋度为-120°～-160°，更优选为-145°～-155°。

作为优选，所述丙交酯乙交酯共聚物1，其丙交酯成分中L型占比为50％；所述丙交酯乙交酯共聚物2，其丙交酯成分中L构型占比为50％～100％。

作为优选，所述丙交酯乙交酯共聚物2，其丙交酯成分中L构型占比为80％～100％。

作为优选，所述水不溶性缓释聚合物按重量百分比计由75～90％的丙交酯乙交酯共聚物1和10～25％的丙交酯乙交酯共聚物2组成。

上述两种聚合物的有效组合，可以实现本发明的要求：既要满足前期极小的突释，显著缩短的迟滞期，又满足后期持续28d以上的释药行为。丙交酯乙交酯共聚物1单独的释放特征为，少量的初始释放(＜1d)，没有释放多肽的潜伏期(1～8d)，以及快速释放期(8～30d)。丙交酯乙交酯共聚物2单独释放特征为，少量的初始释放(＜1d)，以及快速释放期(1-14d)，任何一种单独的聚合物都不具备理想的降解行为及释放行为学。

丙交酯乙交酯共聚物1底物丙交酯为内消旋构型，丙交酯乙交酯共聚物2底物丙交酯为左旋构型或部分左旋构型和部分内消旋构型的混合。

丙交酯乙交酯共聚物1不具有光学活性或仅微弱的光学活性，其比旋度为(-5～+5)°；丙交酯乙交酯共聚物2为具有光学活性的聚合物，其比旋度为(-60～-180)°。作为行业公知，目前已上市的聚酯类产品中还没有一种聚酯为具有光学活性的聚酯，基本为非光学活性聚酯。采用具有光学活性的聚酯作为植入剂聚合物载体，本发明为首创。

这种具有光学活性的聚酯是通过现有的熔融聚合、溶液聚合或缩聚聚合的方式获得；1)熔融聚合是采用L-丙交酯、乙交酯作为底物，或D，L-丙交酯、L-丙交酯、乙交酯作为底物，在无氧、无水、高温、催化剂条件下进行开环聚合，所获得聚酯为具有一定光学活性的丙交酯乙交酯共聚物；2)溶液聚合比熔融聚合增加了溶剂体系，是通过加入溶剂溶解上述底物，随后在无氧、无水、高温、催化剂条件下进行开环聚合，所获得聚酯为具有一定光学活性的丙交酯乙交酯共聚物；3)缩聚聚合是通采用将L-乳酸、乙醇酸作为底物，或D，L-乳酸、L-乳酸、乙醇酸作为底物，在无氧、无水、高温、高真空条件下进行脱水聚合，所获得聚酯为具有一定光学活性的聚乳酸乙醇酸共聚物。

在本发明人实验探索中发现，即使是具有相同分子量及分布的聚酯，其光学活性有差异，其降解行为差异显著，从而导致其释药行为不一致。具有光学活性的聚乙交酯丙交酯共聚物，其降解速率较快，不会造成显著起始突释，即水合速率的提升体现在1d之后，这正是我们所需要的。

因此，丙交酯乙交酯共聚物1不具备光学活性，或仅具有轻微的光学活性，这取决于其合成底物D，L-丙交酯或D，L-乳酸，丙交酯乙交酯共聚物1旋光度检测值为(-5～+5)°。

丙交酯乙交酯共聚物2具备光学活性，具有很强的左旋光学活性，这取决于其合成底物为L-丙交酯或L-乳酸的旋光度及聚合物的聚合程度，丙交酯乙交酯共聚物2旋光度检测值为(-60～-180)°。

作为优选，所述丙交酯乙交酯共聚物1中，丙交酯与乙交酯摩尔比为55:45～45:55；所述丙交酯乙交酯共聚物2中，丙交酯与乙交酯摩尔比为75:25～50:50。所述丙交酯乙交酯共聚物1中，丙交酯与乙交酯摩尔比更优选50:50。所述丙交酯乙交酯共聚物2中，丙交酯与乙交酯摩尔比更优选75:25。

作为优选，所述水不溶性缓释聚合物的重均分子量为15000Da至25000Da。

作为优选，所述丙交酯乙交酯共聚物1的重均分子量为18000Da至22000Da；所述丙交酯乙交酯共聚物2的重均分子量为17000Da至20000Da。

作为优选，所述戈舍瑞林为碱或盐的形式，盐形式包括醋酸盐、双羟萘酸盐。

本发明除了提供了这种优选戈舍瑞林缓释植入剂的组成，还提供了植入剂的制备方法，具体为：

1)将戈舍瑞林及水不溶性缓释聚合物溶解于有机体系中形成液体物料；所述液体物料中有机体系占比为72-80wt％；

2)去除步骤1)液体物料中的有机体系，获得具有低溶剂残留水平、均匀分散的药物/载体粉末或微粒；

3)将步骤2)中的粉末或微粒喂入热熔挤出机，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂。

所述步骤1)中有机体系包括至少一种有机溶剂，有机溶剂选自冰乙酸、甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷。

所述步骤1)中有机体系为二元有机体系时，有机溶剂为冰乙酸与(甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷)其中一种的混合物，冰乙酸在有机体系中比例为5％～100％(不包括100％)，具体组合可以是冰乙酸-二氯甲烷、冰乙酸-甲醇、冰乙酸-乙醇、冰乙酸-三氯甲烷。二元有机体系共沸点不高于60℃；所述二元有机体系表面张力不低于25mn/m。

所述步骤1)中有机体系为一元有机体系时，有机溶剂为冰乙酸，冰乙酸为戈舍瑞林与聚合物的良载体。

本发明对所述步骤2)中去除有机溶剂的方式不做具体限定，可以是转盘法、喷雾干燥法、冷冻干燥法，或者其它可以获得具有低溶剂残留水平、均匀分散的药物/载体粉末或微粒的技术方案。但优选为转盘法、冷冻干燥法，更优选为转盘法，其为连续式的生产方式(可参见CN209791507U)。转盘法得到的微粒的中位粒径为1～200μm，PDI为1.0～5.0。

所述步骤3)对热熔挤出机的形式不做任何限定，可以是单螺杆挤出机，可以是双螺杆挤出机，优选为双螺杆挤出机；双螺杆挤出机根据螺钉的旋转方向，可为协同旋转和反向旋转，优选为反向旋转。

热熔挤出过程中，物料的加热是通过挤出机桶体外壁的加热单元来控制，本发明仅对加热区温度进行限制，热熔挤出温度为60～100℃，温度分布沿着物料挤出方向逐渐增加。

进一步的，本发明的热熔挤出机加热区设置温度为60～80℃，最高温区温度不超过80℃。

本发明所述的戈舍瑞林植入剂，在熔融挤出后经过切割后的直径为1.1～1.3mm，长度为10～13mm的棒状物。这保证了本发明提供的植入剂可在体内持续释放周期不低于28d，血药浓度水平维持在治疗窗内的保持时间不短于

本发明所述的热熔挤出法为优选实施方法，利用本发明的处方采用复乳化溶剂挥发法、乳化溶剂萃取法、喷雾干燥法等常规制剂技术所获得的戈舍瑞林缓释制剂均在本发明保护范围之内。

本发明所提供的醋酸戈舍瑞林植入剂的生产过程为无菌生产，无菌保障的实现是通过将醋酸戈舍瑞林、不溶性缓释聚合物溶解在有机体系中，通过PTFE材质滤膜除菌过滤，获得无菌料液，随后的去除溶剂、粉末或微粒收集、喂料、挤出、切割、灌装等下游一系列工艺所采用的设备均为无菌验证通过的设备。

需要说明的是，热熔挤出植入物也可以通过辐照过程进行灭菌，但任何一种辐照本身均会对多肽及聚合物造成不可逆的降解，并非优选方式。尤其是，聚合物降解后，其辐照前后的释放行为学发生了显著的变化。

与现有技术(US5366734)相比：本发明所提供的植入剂，具有显著缩短的迟滞期，在体内持续释放周期不低于28d(有效血药浓度水平＞1ng/mL)，有关物质水平远低于本发明通过引入一种具有光学活性的丙交酯乙交酯共聚物2弥补了常规聚合物开发成植入剂具有迟滞期长、释放水平低的问题，同时没有带来起始突释水平的增加。

附图说明

图1实施例1与大鼠体内结果对比；

图2实施例4与大鼠体内结果对比。

具体实施方式

下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。

本发明中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。

实施例1

1)称量10.8g醋酸戈舍瑞林、38.7g丙交酯乙交酯共聚物5050(聚合物1：分子量20,000Da，比旋度+3.54°))、4.3g丙交酯乙交酯共聚物7525(聚合物2：分子量18,000Da，比旋度-155.0°)溶解于120g冰乙酸中，搅拌使其完全溶解；

2)进行冷冻干燥得到微粒，干燥条件如下：

预冻温度：-40℃，3h；

升温：-40℃～-10℃，1h，0.2mbar；

主干燥：-10℃，20h，0.2mbar；

升温：-10℃～25℃，1h，0.05mbar；

解析干燥：25℃，3h，0.05mbar；

出箱：25℃，1000mbar；

3)将步骤2)得到的微粒喂入热熔挤出机，控制热熔挤出终端温度80℃、螺杆转速50rpm，挤出扭矩在1.0～3.0范围内波动，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂，直径为1.2mm，长度为10mm的棒状植入物。

实施例2

1)称量10.8g醋酸戈舍瑞林、38.7g丙交酯乙交酯共聚物5050(聚合物1：分子量20,000Da，比旋度+3.54°)、4.3g丙交酯乙交酯共聚物7525(聚合物2：分子量18,000Da，比旋度-155.0°)150g冰乙酸-二氯甲烷混合液中(冰乙酸占比19.0％)，搅拌使其完全溶解；

2)将步骤1)得到的物料供入一种具有转盘结构的装置进行造粒(其中，杯状容器转速设置为50m/s，第一层碟形转盘转速为100m/s，第二层碟形转盘转速为150m/s)，微粒液滴飞出碟形转盘后，在干燥罐60℃条件下进行固化，收集微粒，获得的微粒粒径为10～50μm，PDI为1.0～3.0；

3)将步骤2)得到的微粒喂入热熔挤出机，控制热熔挤出终端温度72℃、螺杆转速50rpm，挤出扭矩在1.0～3.0范围内波动，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂，直径为1.2mm，长度为10mm的棒状植入物。

实施例3

1)称量10.8g醋酸戈舍瑞林、34.4g丙交酯乙交酯共聚物5347(聚合物1：分子量19,000Da，比旋度+0.02°、8.6g丙交酯乙交酯共聚物7525(聚合物2：分子量20,000Da，旋光度-147.4°)150g冰乙酸-二氯甲烷混合液中(冰乙酸占比19.0％)，搅拌使其完全溶解；

2)将步骤1)得到的物料供入一种具有转盘结构的装置进行造粒(其中，杯状容器转速设置为50m/s，第一层碟形转盘转速为100m/s，第二层碟形转盘转速为150m/s)，微粒液滴飞出碟形转盘后，在干燥罐60℃条件下进行固化，收集微粒，获得的微粒粒径为10～50μm，PDI为1.0～3.0；

3)将步骤2)得到的微粒喂入热熔挤出机，控制热熔挤出终端温度70℃、螺杆转速50rpm，挤出扭矩在1.0～3.0范围内波动，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂，直径为1.2mm，长度为10mm的棒状植入物。

实施例4

1)称量10.8g醋酸戈舍瑞林、38.7g丙交酯乙交酯共聚物5347(聚合物1：分子量19,000Da，旋光度+0.02°)、4.3g丙交酯乙交酯共聚物7525(聚合物2：分子量20,000Da，旋光度-68.7°)溶解于120g冰乙酸中，搅拌使其完全溶解；

2)将步骤1)得到的物料进行冷冻干燥得到微粒，干燥条件如下：

预冻温度：-40℃，3h；

升温：-40℃～-10℃，1h，0.2mbar；

主干燥：-10℃，20h，0.2mbar；

升温：-10℃～25℃，1h，0.05mbar；

解析干燥：25℃，3h，0.05mbar；

出箱：25℃，1000mbar；

3)将步骤2)得到的微粒喂入热熔挤出机，控制热熔挤出终端温度80℃、螺杆转速50rpm，挤出扭矩在1.0～3.0范围内波动，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂，直径为1.2mm，长度为10mm的棒状植入物。

实施例5(旋光度在范围外的对比例)

1)称量10.8g醋酸戈舍瑞林、38.7g丙交酯乙交酯共聚物5545(聚合物1：分子量19,000Da，旋光度+0.72°)、4.3g丙交酯乙交酯共聚物7525(聚合物2：分子量16,000Da，旋光度-14.7°)溶解于120g冰乙酸中，搅拌使其完全溶解；

2)将步骤1)得到的物料进行冷冻干燥得到微粒，干燥条件如下：

预冻温度：-40℃，3h；

升温：-40℃～-10℃，1h，0.2mbar；

主干燥：-10℃，20h，0.2mbar；

升温：-10℃～25℃，1h，0.05mbar；

解析干燥：25℃，3h，0.05mbar；

出箱：25℃，1000mbar；

3)将步骤2)得到的微粒喂入热熔挤出机，控制热熔挤出终端温度95℃、螺杆转速50rpm，挤出扭矩在1.0～3.0范围内波动，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂，直径为1.2mm，长度为10mm的棒状植入物。

实施例6(仅聚合物1的对比例)

1)称量10.8g醋酸戈舍瑞林、42.5g丙交酯乙交酯共聚物5545(聚合物1：分子量19,000Da，旋光度+0.72°)溶解于100g冰乙酸中，搅拌使其完全溶解；

2)将步骤1)得到的物料进行冷冻干燥得到微粒，干燥条件如下：

预冻温度：-40℃，3h；

升温：-40℃～-10℃，1h，0.2mbar；

主干燥：-10℃，20h，0.2mbar；

升温：-10℃～25℃，1h，0.05mbar；

解析干燥：25℃，3h，0.05mbar；

出箱：25℃，1000mbar；

3)将步骤2)得到的微粒喂入热熔挤出机，控制热熔挤出终端温度80℃、螺杆转速50rpm，挤出扭矩在1.0～3.0范围内波动，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂，直径为1.2mm，长度为10mm的棒状植入物。

实施例7(仅聚合物2的对比例)

1)称量10.8g醋酸戈舍瑞林、42.5g丙交酯乙交酯共聚物7525(聚合物2：分子量20,000Da，旋光度-147.4°)溶解于150g冰乙酸中，搅拌使其完全溶解；

2)将步骤1)得到的物料进行冷冻干燥得到微粒，干燥条件如下：

预冻温度：-40℃，3h；

升温：-40℃～-10℃，1h，0.2mbar；

主干燥：-10℃，20h，0.2mbar；

升温：-10℃～25℃，1h，0.05mbar；

解析干燥：25℃，3h，0.05mbar；

出箱：25℃，1000mbar；

3)将步骤2)得到的微粒喂入热熔挤出机，控制热熔挤出终端温度72℃、螺杆转速50rpm，挤出扭矩在1.0～3.0范围内波动，进行热熔挤出、切割，获得所述植入剂，直径为1.2mm，长度为10mm的棒状植入物。

实施例8

药物和聚合物称量参照实施例2，溶解于120g冰乙酸-甲醇混合液中，(冰乙酸占比70％)，搅拌使其完全溶解；采用实施例1的条件进行冷冻干燥，随后热熔挤出获得本发明所述植入剂。

实施例9

药物和聚合物称量参照实施例1，溶解于160g冰乙酸-乙醇混合液中，(冰乙酸占比60％)，搅拌使其完全溶解；采用实施例1的条件进行冷冻干燥，随后热熔挤出获得本发明所述植入剂。

实施例10

药物和聚合物称量参照实施例3，溶解于150g冰乙酸-乙醇混合液中，(冰乙酸占比25％)，搅拌使其完全溶解；采用实施例2的转盘法进行造粒并去除溶剂，获得微粒进行热熔挤出获得本发明所述植入剂。

测试

一、聚合物旋光度的检测方法

供试品溶液：称取聚合物约0.50g，置50mL量瓶中，用三氯甲烷溶解后，定容至刻度。

仪器校准：采用空白溶剂三氯甲烷调0，对供试品进行测定检测参数：试管长度100mm，测试次数6次，检测波长589nm，温度20℃，检测结果结束再次测定氯仿，漂移值小于0.01。

表1

二、含量的检测方法

照高效液相色谱法(中国药典2020版二部附录VD)测定。

色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以0.044mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调节pH值至3.0)—甲醇(45：55)为流动相，检测波长为220nm，柱温为35℃。分别精密量取六肽对照品及醋酸戈舍瑞林对照品适量，加20％乙腈制成含六肽对照品200ug/ml及醋酸戈舍瑞林对照品200ug/ml的混合液，精密量取混合液10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，其中六肽与醋酸戈舍瑞林的分离度应大于4.0。

测定法

取各实施例中的植入剂10支，取出每支的聚合物分别置50ml量瓶中，加85％乙腈35ml，超声溶解，放冷至室温后，用85％乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取醋酸戈舍瑞林对照品1支，精密加入85％乙腈溶液3ml溶解。精密量取1ml置10ml量瓶中，加85％乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取上述供试品溶液和对照品溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算每支植入剂醋酸戈舍瑞林的含量，应符合规定(中国药典2020年版二部附录X E)。

与含量均匀度的对比

表2

三、释放度的检测方法

取无水磷酸氢二钠25.8g，柠檬酸1.92g与叠氮化钠0.2g，加水溶解至1000ml，必要时用无水磷酸氢二钠或者柠檬酸调节pH值7.4±0.05，用0.22μm微孔滤膜过滤得到磷酸盐缓冲液。

取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支，置专用溶出杯中，一式三份，以磷酸盐缓冲液50ml为释放介质，加盖，置39℃±0.5℃恒温箱中保温，于168小时(7天)、336小时(14天)、408小时(17天)、504小时(21天)与672小时(28天)时分别取样，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液(pH7.4)稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液(pH7.4)5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置39℃±0.5℃恒温箱中继续保温。

另取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加磷酸盐缓冲液(pH7.4)溶解并定量稀释制成每1ml中约含醋酸戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外可见分光光度法(中国药典2020年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；计算各时间点的释放量。

与释放度的对比

表3

实施例1-4为本发明范围内的实施例，实施例5-7均为本发明范围外的对比例。根据释放度数据，实施例1-4与现有技术比较，第3天的释放度即呈明显提高的趋势，即从1d后开始释放加快，预测其在体内可缩短迟滞期，且释放度数据均理想持续至28天，实施例1-2为最优释放度数据。

四、有关物质的检测方法

有关物质I

照高效液相色谱法(中国药典2020年版二部附录V D)测定。

色谱条件与系统实用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相(Spherisorb ODS，250×4.6mm)；以0.027mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调节pH至3.0)—乙腈(73：27)为流动相，流速1.8ml/min；检测波长为220nm。分别精密量取4-的-丝氨酸醋酸戈舍瑞林对照品及醋酸戈舍瑞林对照品适量，加85％乙腈制成含两种对照品均为20ug/ml的混合液，精密量取混合液5ul注入液相色谱仪，记录色谱，4-D-丝氨酸醋酸戈舍瑞林与醋酸戈舍瑞林的分离度应大于4.5，醋酸戈舍瑞林峰的拖尾因子应小于2。

测定法

取各实施例中的植入剂10支，取出聚合物，精密称定，置50ml量瓶中，加85％乙腈35ml溶解聚合物，超声溶解，放冷至室温后，用85％乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取醋酸戈舍瑞林对照品1支，精密加入85％乙腈溶液3ml，超声溶解(约5分钟)后室温放冷。精密量取1ml至100ml量瓶中，加85％乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液及对照品溶液各5ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，以醋酸戈舍瑞林为对照，按外标法以峰面积计算，单一杂质峰面积不得过表示量的1.0％，杂质总量不得过表示量的4.0％。

有关物质II

取各实施例中的植入剂10支，取出聚合物，精密称定，置50ml量瓶中，加85％乙腈35ml溶解聚合物，超声溶解，放冷至室温后，用85％乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取醋酸戈舍瑞林对照品1支，精密加入85％乙腈溶液3ml，超声溶解后室温放冷，作为对照品溶液。照含量测定项下的方法测定，精密量取供试品溶液和对照品溶液各5ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，供试品溶液如显示杂质峰，以醋酸戈舍瑞林为对照，按外标法以峰面积计算，包封聚合物(相对保留时间为0.05～0.65)不得过标示量的5.5％，杂质K(相对保留时间0.95)不得过表示量的2.0％，杂质总量不得过标示量的10.0％(包括杂质Ω)。

有关物质III

照高效液相色谱法(中国药典2020年版二部附录VD)测定。

色谱条件与系统适用性试验

用凝胶为固定相的体积排阻色谱柱，以100mmol/L的高氯酸钠溶液—乙腈(125：875)为流动相，流速2.0ml/min；检测波长为280nm。

6-(des-t-丁基-D-丝氨酸)-醋酸戈舍瑞林溶液的制备；称取4±0.5mg醋酸戈舍瑞林对照品至20ml量瓶中，加浓三氟乙酸250ul，静置24h小时。加入85％乙腈溶液5ml溶解并用相同溶剂稀释至刻度，摇匀。取各实施例中的植入剂5支，取处聚合物至10ml量瓶中，加85％乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。量取1ml，加上述配好的6-(des-t-丁基-D-丝氨酸)-醋酸戈舍瑞林溶液20ul，摇匀，作为系统适用性试验溶液。精密量取系统适用性试验溶液50ul注入液相色谱仪，6-(des-t-丁基-D-丝氨酸)-醋酸戈舍瑞林峰的保留时间应约为17.5分钟(相对保留时间约为1.6)，杂质Ω峰的相对保留时间应为1.7±0.1，醋酸戈舍瑞林峰和6-(des-t-丁基-D-丝氨酸)-醋酸戈舍瑞林峰的分离度应不低于1.5，杂质Ω峰的拖尾因子应低于1.5。

测定法

取各实施例中的植入剂10支，取出聚合物，精密称定，置50ml量瓶中，加85％乙腈35ml溶解聚合物，超声溶解，放冷至室温后，用85％乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取醋酸戈舍瑞林对照品1支，精密加入85％乙腈溶液3ml，超声溶解后室温放冷，精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各50ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，供试品溶液如显杂质Ω峰，以醋酸戈舍瑞林为对照，按外标法以峰面积计算，杂质Ω不得过表示量的1.0％。

与有关物质的对比

表4

由表4可知，本发明实施例1-7有关物质水平显著低于杂质I及杂质II项总杂及总杂+杂质Ω均显著低于本发明实施例的杂质III项未检出。

根据本发明的植入剂，通过不同的制备工艺获得，即实施例1、4-7API和聚合物混合过程为所述的冷冻干燥法，实施例2、3造粒过程是通过所述的转盘法，与相比均降低了有关物质水平，本发明所述的转盘法更优于冷冻干燥法。

五、醋酸的检测方法

照气相色谱法(中国药典2020版二部附录VE)测定。

色谱条件与系统适用性试验

色谱柱长10-12.5米，内径0.32mm，内层涂有0.2-0.3um的FFAP-CB熔融石英毛细管柱。分流比100：1，柱温程序：起始温度50℃，保留时间0.10分钟，升温速率30℃/分钟，最终温度200℃，保持时间3分钟，进样温度：200℃，检测器温度：250℃，进样量1ul，理论板数按醋酸峰计算应不低于5000，醋酸峰与内标峰的分离度应不低于15，醋酸峰的拖尾因子应小于2。

供试品溶液的制备与测定

取各实施例中的植入剂4支，取出聚合物，精密称定，置5ml量瓶中，加二甲基甲酰胺1ml溶解，精密加入250ul内标溶液，用二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀。量取1ul注入气相色谱仪，按内标法以峰面积计算。

与醋酸残留的对比

表5

根据本发明所述的实施例1-6，醋酸残留均低于或明显低于均符合的EP标准＜2.5％(w/w)。

六、大鼠药代动力学检测

实验鼠

药代动力学实验鼠为SD雄性大鼠，平均重量230～250g，动物给药前禁食不禁水12h，给药后4h加粮，动物全程不禁水。

给药

给药方式为侧腹皮下注入，确保制剂被送到大鼠皮下位置，给药剂量1.2mg/只，采血点：采集给药前0h，给药后0.5h，1.0h，6h，24h(D1)，D2，D5，D8，D9，D10，D11，D12，D13，D14，D15，D18，D21，D24，D28，D30合计20个采血点。

血浆处理

血浆抗凝剂：EDTA-K2；稳定剂：抑肽酶

预先在采血管中用微量注射器或已校准的移液枪加入抑肽酶，5μL/管，可提前一天加好。抑肽酶在使用前可置于-20℃冰箱保存，使用时提前拿出所需的量进行化冻，化冻后的抑肽酶建议放在4℃冰箱保存，在4℃冰箱保存能继续使用14天。

离心管内提前加入EDTA-K2和抑肽酶，采血前置于冰上预冷，采血0.5mL，并在30分钟内离心，离心条件为：3500rpm，4℃，离心10分钟，冰浴条件下分离血浆，取尽上层血浆到0.5mL离心管中，操作过程全程冰浴，1小时内转移至超低温冰箱(–70℃～-90℃)。

采用质谱仪对血浆样品进行分析。

实施例1和4均显示自1d开始(图1和图2)，血药浓度持续明显提高，预测其在人体内可同样缩短迟滞期，实施例1更为显著快速释放，三者血药浓度数据均理想持续至28天。

以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案，并非对本发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。

Claims (7)

1.一种缩短迟滞期的戈舍瑞林缓释植入剂，其特征在于，所述戈舍瑞林缓释植入剂按重量百分比计包含下述组分：戈舍瑞林18%~22%，水不溶性缓释聚合物78%~82%；

所述水不溶性缓释聚合物按重量百分比计由75~90%的丙交酯乙交酯共聚物1和10~25%的丙交酯乙交酯共聚物2组成；

所述丙交酯乙交酯共聚物1中，丙交酯与乙交酯摩尔比为55:45~45:55，其合成底物丙交酯为D,L-丙交酯或D,L-乳酸；

所述丙交酯乙交酯共聚物2中，丙交酯与乙交酯摩尔比为75:25，其合成底物丙交酯选自L -丙交酯、L-乳酸、D,L-丙交酯和L-丙交酯的混合物、D,L-乳酸和L-乳酸的混合物中的一种；

所述丙交酯乙交酯共聚物1的比旋度为-5°~+5°；所述丙交酯乙交酯共聚物2为具有光学活性的聚合物，其比旋度为-60°~ -180°；

所述比旋度的测定条件：溶剂采用三氯甲烷，试管长度100mm，检测波长589nm，温度20℃。

2.根据权利要求1所述的戈舍瑞林缓释植入剂，其特征在于，所述丙交酯乙交酯共聚物2为具有光学活性的聚合物，其比旋度为-120°~ -160°。

3.根据权利要求1或2所述的戈舍瑞林缓释植入剂，其特征在于，所述丙交酯乙交酯共聚物1，其丙交酯成分中L型占比为50%；所述丙交酯乙交酯共聚物2，其丙交酯成分中L构型占比为50%~100%。

4.根据权利要求3所述的戈舍瑞林缓释植入剂，其特征在于，所述丙交酯乙交酯共聚物2，其丙交酯成分中L构型占比为80%~100%。

5.根据权利要求1或2所述的戈舍瑞林缓释植入剂，其特征在于，所述水不溶性缓释聚合物的重均分子量为15000Da至25000Da。

6.根据权利要求1或2所述的戈舍瑞林缓释植入剂，其特征在于，所述丙交酯乙交酯共聚物1的重均分子量为18000Da至22000Da；所述丙交酯乙交酯共聚物2的重均分子量为17000Da至20000Da。

7.根据权利要求1或2所述的戈舍瑞林缓释植入剂，其特征在于，所述戈舍瑞林为碱或盐的形式，盐形式包括醋酸盐、双羟萘酸盐。