CN115791340B - 一种子痫复合质控品及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

一种子痫复合质控品及其制备方法和应用，所述质控品包括：胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶‑1抗原、人血清基质、Tris和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂。本质控品制备方法简单，均匀性、稳定性良好，2‑8℃保存，便于运输。本质控品适用于磁微粒化学发光平台，以及所述平台临床常见胎盘生长因子检测试剂盒、可溶性fms样酪氨酸激酶‑1检测试剂盒、胎盘生长因子和可溶性fms样酪氨酸激酶‑1复合检测试剂盒。本质控品可用于胎盘生长因子和可溶性fms样酪氨酸激酶‑1项目的室内质量控制、实验室能力验证、检测系统性能评价等。

Description

一种子痫复合质控品及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于体外诊断免疫分析技术领域，涉及一种子痫复合质控品及其制备方法和应用。

背景技术

先兆子痫（PE），又称子痫前期，是妊娠期高血压患者中最常见的一种特有疾病，其主要特征为患者在妊娠20周以后，出现高血压和蛋白尿，并可出现头痛、眼花、恶心、呕吐等不适症状。

胎盘生长因子（PLGF）是血管内皮生长因子（VEGF）家族中的一员，其分子结构为糖蛋白同型二聚体分子。PLGF主要由合体滋养层细胞合成，与位于滋养层细胞和血管内皮细胞的酪氨酸酶受体结合，对滋养层细胞和内皮细胞功能有独特的调节作用。

可溶性fms样酪氨酸激酶-1（sFlt-1）是一种具有酪氨酸激酶活性的抗血管生成蛋白，由血管内皮生长因子受体1（VEGFR-1）胞外域剪接而成，是VEGFR-1进入母体血液循环的可溶性形式。

胎盘生长因子（PLGF）、胎盘生长因子（PLGF）和可溶性fms样酪氨酸激酶-1（sFlt-1）的比值对先兆子痫的预测和辅助诊断具有重要意义，在先兆子痫孕妇中，sFlt-1浓度自妊娠20周开始增加，直至分娩。过量的游离sFlt-1竞争性地结合PLGF，使PLGF水平进一步下降，sFlt-1/PLGF比值增大预示子痫前期的发生。对于孕37周前疑似子痫前期孕妇，sFlt-1/PLGF＜38，一周内不发生PE的概率是99.3%，sFlt-1/PLGF＞38，四周内发生PE的概率是36.7%。

控制物质（control materials）是被其制造商预期用于验证体外诊断医疗器械性能特征的物质、材料或物品。通常又被称为质控物或质控品。通常与试剂盒配套使用，用于体外诊断领域测量的室内质量控制、实验室能力验证、检测系统性能评价等。

患先兆子痫的妇女可溶性fms样酪氨酸激酶-1（sFlt-1）水平高于正常妊娠水平，同时胎盘生长因子（PLGF）水平低于正常妊娠水平，sFlt-1和PLGF作为先兆子痫辅助诊断的标志物，测定其比值比单独检测sFlt-1或PLGF更有价值。使用免疫学方法检测母体血液中sFlt-1和PLGF的浓度，并结合临床症状和子宫动脉多普勒超声等可提高先兆子痫的诊断准确性。

由于可溶性fms样酪氨酸激酶-1（sFlt-1）和胎盘生长因子（PLGF）两个检测项目在临床上存在大量需求，迫切需要稳定和性能优良的质控品进行质量控制。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种子痫复合质控品。本发明提供的子痫复合质控品能够作为第三方质控品，对胎盘生长因子、可溶性fms样酪氨酸激酶-1项目进行室内质量控制，适用于磁微粒化学发光平台临床上常见的胎盘生长因子检测试剂盒、可溶性fms样酪氨酸激酶-1检测试剂盒、胎盘生长因子和可溶性fms样酪氨酸激酶-1复合的子痫检测试剂盒；同时，本发明提供的子痫复合质控品具有良好的长期稳定性，能够长期在2-8℃条件下保存，且便于运输。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种子痫复合质控品，包括以下组分：胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、人基质血清、Tris（三羟甲基氨基甲烷）和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂。

优选地，所述质控品包括：按浓度计，胎盘生长因子抗原40-1700 pg/mL、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原800-45000 pg/mL、0.1M-0.5M Tris和/或枸橼酸盐；按重量百分比计，1%-5%甘露醇和/或山梨糖醇、1%-8%海藻糖和/或蔗糖、0.5%-3%蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、0.1%-0.5%防腐剂；按体积计，用人血清基质定容至配制体积。

可选地，所述防腐剂为KroVin500和KroVin300中一种或两种。

优选地，本发明的子痫复合质控品为冻干粉。

优选地，所述胎盘生长因子抗原和可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原选用重组抗原。

本发明的另一目的是提供一种子痫复合质控品的制备方法，包括以下步骤：

S1：将人血清从-85~-65℃取出后放入-25~-15℃至少稳定4h，再从-25~-15℃放入2-8℃条件下直至完全复融，拿出使其恢复至室温，转移至容器中，放上搅拌器进行搅拌；

S2：在搅拌状态下向人血清中依次加入Tirs、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂，并充分混匀获得混合液，再向上述混合液中加入胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原，每加入一种物料充分混匀至少3min后再加入下一种物料；

S3：在化学发光仪上使用磁微粒化学发光试剂盒测定质控品的配制浓度，测定结果在合格范围内方可进行分装；

S4：子痫复合质控品根据需求的分装量进行分装；

S5：将分装好的子痫复合质控品放入冻干机中冻干，冻干后的质控品在2-8℃条件下保存。

优选地，步骤S3中质控品的配制浓度为：水平1：胎盘生长因子浓度50 ±5 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度1000±100 pg/mL；水平2：胎盘生长因子浓度100 ±10 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度3000±300 pg/mL；水平3：胎盘生长因子浓度1500±150pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度40000±4000 pg/mL。

优选地，步骤S4中分装过程在经过消毒的生物安全柜中进行。

本发明的另一个目的是提供上述子痫复合质控品或上述制备方法在磁微粒化学发光平台的应用。

优选地，所述子痫复合质控品在使用前恢复至室温，用称重法或经计量合格的移液器加入去离子水复溶，并使用配套的试剂盒及分析仪进行测定，确定质控品的靶值及其合格范围；复溶后在2-8℃条件下保存能够稳定至少14天，在-20℃条件下保存能够稳定至少30天。

相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：

1、本发明采用重组的胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原，将两种抗原同时添加到质控品中，制备成两个项目的复合质控品，便于先兆子痫两个关键标志物的联合检查和质量控制，既可以分别监测两个项目的质控品测值，也可以监测两个项目的比值。

2、本发明采用重组的胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原，由于两种抗原表面决定簇的可兼容性，本发明子痫复合质控品可兼容多种品牌的磁微粒化学发光检测系统，成为真正的第三方质控品。

3、本发明利用人血清作为制备子痫复合质控品的基质材料，与临床待测样本基质相近，可大大降低基质效应对测量结果的影响。

4、本发明子痫复合质控品为冻干粉，冻干后在2-8℃条件下保存，可稳定至少24个月，易于保存和运输。

具体实施方式

下面对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述。显然，所描述的实施方式仅仅是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明的实施方式，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明的保护范围。

本发明提供了一种适用于磁微粒化学发光平台的子痫复合质控品及其制备方法，该质控品包括：胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、人基质血清、Tris和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂。本发明子痫复合质控品以人血清为基质，尽量还原胎盘生长因子和可溶性fms样酪氨酸激酶-1在血液中的存在状态，与临床上检测的样本基质接近，减小测定过程中基质效应对测定结果的影响。

本发明的胎盘生长因子抗原和可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原选用重组抗原，使两者能在同一质控品中同时添加，但是不会相互造成影响。

本发明的质控品包括：按浓度计，胎盘生长因子抗原40-1700 pg/mL、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原800-45000 pg/mL、0.1M-0.5M Tris和/或枸橼酸盐；按重量百分比计，1%-5%甘露醇和/或山梨糖醇、1%-8%海藻糖和/或蔗糖、0.5%-3%蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、0.1%-0.5%防腐剂；按体积计，用人血清基质定容至配制体积。

本发明的胎盘生长因子抗原和可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原为蛋白质，蛋白质的稳定性极易受其所处环境酸碱性的影响。本发明子痫复合质控品中添加 Tris和/或枸橼酸盐，使质控品在冷冻过程中pH值变化控制在最小范围内，起到缓冲作用，避免蛋白质聚集，同时Tris和/或枸橼酸盐具有生物相容性。

本发明子痫复合质控品中添加甘露醇和/或山梨糖醇作为冻干填充剂，其在慢速冻结时会结晶，形成稳定的海绵体，在抗原表面形成保护壳，从而为活性组分提供支撑结构，且不与活性组分发生反应。

本发明子痫复合质控品中添加海藻糖和/或蔗糖，能在高低温、高渗透压及失水等条件下在细胞表面形成独特的保护膜，有效地保护蛋白质等大分子的生物活性。海藻糖、蔗糖作为冷冻干燥保护剂，对冷冻干燥过程中所产生的低温应力、冻结应力、干燥应力均有效，可以防止冻干过程中蛋白质的聚集。

本发明子痫复合质控品中添加蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD，在蛋白质表面形成保护膜，使蛋白结构免受破坏，两者联合使用效果更佳。

本发明子痫复合质控品中添加防腐剂，为KroVin500、KroVin300的一种或者两种。防腐剂能够杀灭或抑制微生物，特别是细菌和真菌。防腐剂通过作用于微生物的细胞膜、细胞壁及酶等多个靶点，破坏细胞的分裂，抑制微生物的生长和繁殖，达到防腐的目的，使质控品可以长期保存。

如无特殊说明，本发明涉及的试剂均为市售产品，均可以通过稳定的商业渠道获得。

本发明还提供了上述子痫复合质控品的制备方法：将人血清复融并恢复至室温，向恢复至室温的人血清中依次加入Tris和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂，并充分混匀获得混合溶液；确定质控品配制浓度，取胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、添加至混合溶液中，混匀后得到子痫复合质控品；子痫复合质控品充分混匀后进行分装；分装好的子痫复合质控品放入冻干机内进行冻干。

本发明在分装前先对子痫复合质控品进行预定值。作为一种可实施的方式，优选使用化学发光仪及磁微粒化学发光测定试剂盒进行定值，确定子痫复合质控品分装前的浓度。

本发明子痫复合质控品的浓度为三个水平：水平1：胎盘生长因子浓度50 ±5 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度1000±100 pg/mL；水平2：胎盘生长因子浓度100 ±10pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度3000±300 pg/mL；水平3：胎盘生长因子浓度1500±150 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度40000±4000 pg/mL。

本发明对制备方法中的混匀方式没有特殊限定，采用本领域中常规的混匀方式即可。作为一种可实施的方式，本发明将人血清复融后加入容器内，并采用上搅拌的搅拌仪，在持续搅拌状态下将Tris和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂添加至人血清中，并将混合液搅拌至少30分钟，再向上述混合液中加入胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原，再进行搅拌，使子痫复合质控品充分混匀。

本发明子痫复合质控品充分混匀后，在生物安全柜中进行分装，可选每瓶分装量为3.0 mL，所述生物安全柜在使用前进行消毒处理，；将分装好的子痫复合质控品放入冻干机中进行冻干，冻干后的质控品于2~8℃条件下保存。

本发明还提供了一种上述子痫复合质控品或制备方法在磁微粒化学发光平台的应用。本发明子痫复合质控品能够应用于磁微粒化学发光平台，并且适用于所述平台临床上常见的胎盘生长因子检测试剂盒、可溶性fms样酪氨酸激酶-1检测试剂盒、胎盘生长因子和可溶性fms样酪氨酸激酶-1复合的子痫检测试剂盒，可作为第三方质控品，用于胎盘生长因子、可溶性fms样酪氨酸激酶-1项目的室内质量控制、实验室能力验证、检测系统性能评价等。

本发明子痫复合质控品在使用前需恢复至室温，按照标示量加入去离子水复溶后使用，并使用配套的仪器和试剂盒进行检测，进行质控品靶值范围的确定。作为一种可实施的方式，本领域技术人员可使用称重法或使用经计量校准的移液器加去离子水进行质控品的复溶。本发明复溶后的质控品2-8℃可冷藏保存可稳定至少14天，-20℃冷冻保存可稳定至少30天，冻干品在2-8℃条件下保存可稳定至少24个月。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M Tirs、3.0%山梨糖醇、1.5%海藻糖、1.5%蔗糖、1.0%蛋白保护剂DBP、1.0%复合蛋白保护剂HPD、0.1%防腐剂KroVin500、0.1%防腐剂KroVin300；

配制步骤按如下进行：

（1）将人血清从-85~-65℃取出后放入-25~-15℃至少稳定4h，再从-25~-15℃放入2-8℃条件下直至完全复融，拿出使其恢复至室温，转移至容器中，放上搅拌器进行搅拌；

（2）在搅拌状态下向人血清中依次加入Tirs、山梨糖醇、海藻糖、蔗糖、蛋白保护剂DBP、复合蛋白保护剂HPD、KroVin500、KroVin300，并充分混匀获得混合液，再向上述混合液中加入胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原，每加入一种物料进行充分混匀至少3min后再加入下一种物料；

（3）在化学发光仪上使用磁微粒化学发光试剂盒测定质控品的配制浓度为水平1：胎盘生长因子浓度50 ±5 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度1000±100 pg/mL；水平2：胎盘生长因子浓度100 ±10 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度3000±300 pg/mL；水平3：胎盘生长因子浓度1500±150 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度40000±4000pg/mL；测定结果在合格范围内方可进行分装；

（4）子痫复合质控品根据需求的分装量进行分装，分装过程在经过消毒的生物安全柜中进行；

（5）将分装好的子痫复合质控品放入冻干机中冻干，冻干后的质控品在2-8℃条件下保存。

实施例2~18

子痫复合质控品组分：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原，其余组分配比见表1和表2。

表1  实施例2-9子痫复合质控品组分（按重量百分数计%）

表2  实施例10-18子痫复合质控品组分（按重量百分数计%）

配制步骤如实施例1。

对比例1

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M Tirs、3.0%木糖醇、1.5%海藻糖、1.5%蔗糖、1.0%蛋白保护剂DBP、1.0%复合蛋白保护剂HPD、0.1%防腐剂KroVin500、0.1%防腐剂KroVin300，其余步骤与实施例1相同。

对比例2

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M 枸橼酸盐、3.0%木糖醇、1.5%海藻糖、1.5%蔗糖、1.0%蛋白保护剂DBP、1.0%复合蛋白保护剂HPD、0.1%防腐剂KroVin500、0.1%防腐剂KroVin300，其余步骤与实施例1相同。

对比例3

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M Tris、1.5%甘露醇、1.5%山梨糖醇、3.0%麦芽糖、1.0%蛋白保护剂DBP、1.0%复合蛋白保护剂HPD、0.1%防腐剂KroVin500、0.1%防腐剂KroVin300，其余步骤与实施例1相同。

对比例4

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M 枸橼酸盐、1.5%甘露醇、1.5%山梨糖醇、3.0%麦芽糖、1.0%蛋白保护剂DBP、1.0%复合蛋白保护剂HPD、0.1%防腐剂KroVin500、0.1%防腐剂KroVin300，其余步骤与实施例1相同。

对比例5

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M Tris、1.5%甘露醇、1.5%山梨糖醇、1.5%海藻糖、1.5%蔗糖、0.1%防腐剂KroVin500、0.1%防腐剂KroVin300，其余步骤与实施例1相同。

对比例6

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M 枸橼酸盐、1.5%甘露醇、1.5%山梨糖醇、1.5%海藻糖、1.5%蔗糖、0.1%防腐剂KroVin500、0.1%防腐剂KroVin300，其余步骤与实施例1相同。

对比例7

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M Tris、1.5%甘露醇、1.5%山梨糖醇、1.5%海藻糖、1.5%蔗糖、1.0%蛋白保护剂DBP、1.0%复合蛋白保护剂HPD、0.2%防腐剂ProClin300，其余步骤与实施例1相同。

对比例8

子痫复合质控品组分为：人血清、胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、0.15M 枸橼酸盐、1.5%甘露醇、1.5%山梨糖醇、1.5%海藻糖、1.5%蔗糖、1.0%蛋白保护剂DBP、1.0%复合蛋白保护剂HPD、0.2%防腐剂ProClin300，其余步骤与实施例1相同。

实施例19

对实施例1-18和对比例1-8制备的质控品进行稳定性评估。

（1）质控品37℃条件下加速稳定性

将本发明实施例1-18和对比例1-8制备的水平2浓度质控品于37℃条件下保存，并分别于第0天、第5天、第9天、第14天、第19天、第24天各取一瓶进行复溶，采用深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司配套的试剂盒及化学发光分析仪iFlash 3000-C进行测定，每瓶重复测定3次，并计算均值与靶值的相对偏差，结果见表3和表4。

表3  不同质控品37℃稳定性胎盘生长因子测定结果

表4  不同质控品37℃稳定性可溶性fms样酪氨酸激酶-1测定结果

表3和表4实验结果表明，本发明实施例1-18制备的子痫复合质控品水平2在37℃条件下能够稳定24天。其中，实施例9和实施例18在37℃条件下稳定性最好。本发明对比例1-8制备的子痫复合质控品37℃条件下保存一段时间后，测量结果与靶值的相对偏差超出±10%范围。可见，本发明质控品添加的Tris和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂KroVin500和/或KroVin300具有协同作用，可使本发明配制的质控品在37℃条件下加速稳定性良好。

（2）质控品复溶后2-8℃条件下稳定性

将本发明实施例9和实施例18制备的水平2子痫复合质控品复溶后于2-8℃条件下保存，分别于第0天、第3天、第6天、第9天、第12天、第14天各取两瓶进行复溶，采用深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司配套的试剂盒及化学发光分析仪iFlash 3000-C进行测定，每瓶重复测定3次，并计算均值与靶值的相对偏差。

实验结果表明，本发明实施例9和实施例18制备的子痫复合质控品水平2复溶后在2-8℃条件下能够稳定至少14天。本发明质控品添加的Tris和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂KroVin500和/或KroVin300具有协同作用，可使本发明配制的质控品复溶后2-8℃条件下保存，具有良好的稳定性。

实施例20

对实施例9和实施例18制备的质控品进行性能验证。

（1）均匀性

子痫复合质控品水平1、水平2、水平3每个水平各随机抽取15瓶，并进行1-15的编号，每个包装单元分别测量3次。

考虑测量系统随时间等因素引起的随机变异，3次测量采用不同的顺序进行测量，例如第一遍：1、3、5、7、9、11、13、15、2、4、6、8、10、12、14；第二遍：15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1；第三遍：2、4、6、8、10、12、14、1、3、5、7、9、11、13、15。

均匀性实验结果的数据处理及判定标准参照中华人民共和国医药行业标准YY/T1652-2019《体外诊断试剂用质控物通用技术要求》。

均匀性实验结果见表5、均匀性检验分析结果见表6。

表5  子痫复合质控品均匀性测量结果

表6  子痫复合质控品均匀性检验分析结果

表5和表6实验结果表明，本发明子痫复合质控品包含的胎盘生长因子和可溶性fms样酪氨酸激酶-1两个项目均匀性测量数据使用F检验进行方差分析，分析结果F值均小于F_临界，表明本发明的子痫复合质控品具有良好的均匀性。

（2）稳定性

（2-1）效期稳定性

子痫复合质控品按照规定的贮存条件2-8℃贮存，分别在贮存第0个月、第3个月、第6个月、第9个月、第12个月、第18个月、第24个月每个水平各取出两瓶放入对照的液氮中。直至第24个月采用同步等时法在重复性条件下进行效期稳定性研究，实验结果采用经验的线性拟合模型，用t检验进行测量数据的趋势分析，稳定性实验结果的数据分析及判定标准参照中华人民共和国医药行业标准YY/T 1652-2019《体外诊断试剂用质控物通用技术要求》。

表7  子痫复合质控品效期稳定性测量结果

表8  子痫复合质控品效期稳定性分析结果

本发明子痫复合质控品在2-8℃条件下保存效期稳定性为至少24个月。

（2-2）短期稳定性

（2-2-1）复溶后2-8℃短期稳定性

子痫复合质控品复溶后在2-8℃条件下贮存，分别在贮存第0天、第3天、第6天、第9天、第12天、第14天每个水平各取出两瓶进行测定，实验结果采用经验的线性拟合模型，用t检验进行测量数据的趋势分析。稳定性实验结果的数据分析及判定标准参照中华人民共和国医药行业标准YY/T 1652-2019《体外诊断试剂用质控物通用技术要求》。

表9  子痫复合质控品复溶后2-8℃稳定性测量结果

表10  子痫复合质控品复溶后2-8℃稳定性分析结果

本发明子痫复合质控品复溶后在2-8℃条件下保存可稳定至少14天。

（2-2-2）复溶后-20℃短期稳定性

子痫复合质控品复溶后在-20℃条件下贮存，分别在贮存第0天、第4天、第8天、第15天、第30天每个水平各取出两瓶进行测定，实验结果采用经验的线性拟合模型，用t检验进行测量数据的趋势分析。稳定性实验结果的数据分析及判定标准参照中华人民共和国医药行业标准YY/T 1652-2019《体外诊断试剂用质控物通用技术要求》。

表11  子痫复合质控品复溶后-20℃稳定性测量结果

表12  子痫复合质控品复溶后-20℃稳定性分析结果

本发明子痫复合质控品复溶后在-20℃条件下保存可稳定至少30天。

综上所述，本发明的子痫复合质控品具有良好的均匀性和稳定性，质控品原包装在2-8℃条件下保存可稳定至少24个月，复溶后在2-8℃条件下保存可稳定至少14天，复溶后在-20℃条件下保存可稳定至少30天。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施方式，可以理解的是，上述实施方式是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施方式进行变化、修改、替换和变型。本发明的保护范围由权利要求书及其等同技术方案限定。

Claims (9)

1.一种子痫复合质控品，其特征在于，由以下组分构成：胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原、人血清基质、Tris和/或枸橼酸盐、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂；按浓度计，胎盘生长因子抗原40-1700 pg/mL、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原800-45000 pg/mL、0.1M-0.5M Tris和/或枸橼酸盐；按重量百分比计，1%-5%甘露醇和/或山梨糖醇、1%-8%海藻糖和/或蔗糖、0.5%-3%蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、0.1%-0.5%防腐剂；按体积计，用人血清基质定容至配制体积。

2.根据权利要求1所述的子痫复合质控品，其特征在于，所述防腐剂为KroVin500和KroVin300的一种或两种。

3.根据权利要求1所述的子痫复合质控品，其特征在于，所述质控品为冻干品。

4.根据权利要求1所述的子痫复合质控品，其特征在于，所述胎盘生长因子抗原和可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原选用重组抗原。

5.根据权利要求1-4任一项所述的子痫复合质控品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将人血清从-85~-65℃取出后放入-25~-15℃至少稳定4h，再从-25~-15℃放入2-8℃条件下直至完全复融，拿出使其恢复至室温，转移至容器中，放上搅拌器进行搅拌；

S2：在搅拌状态下向人血清中依次加入Tirs、甘露醇和/或山梨糖醇、海藻糖和/或蔗糖、蛋白保护剂DBP和/或复合蛋白保护剂HPD、防腐剂，并充分混匀获得混合液，再向上述混合液中加入胎盘生长因子抗原、可溶性fms样酪氨酸激酶-1抗原，每加入一种物料充分混匀后再加入下一种物料；

S3：在化学发光仪上使用磁微粒化学发光试剂盒测定质控品的配制浓度，测定结果在合格范围内方可进行分装；

S4：子痫复合质控品根据需求的分装量进行分装；

S5：将分装好的子痫复合质控品放入冻干机中冻干，冻干后的质控品在2-8℃条件下保存。

6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中质控品的配制浓度为：胎盘生长因子浓度50 ±5 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度1000±100 pg/mL；水平2：胎盘生长因子浓度100 ±10 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度3000±300 pg/mL；水平3：胎盘生长因子浓度1500±150 pg/mL，可溶性fms样酪氨酸激酶-1浓度40000±4000 pg/mL。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中分装过程在经过消毒的生物安全柜中进行。

8.根据权利要求1-4任一项所述的子痫复合质控品或根据权利要求5-7任一项所述的制备方法在磁微粒化学发光平台的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述子痫复合质控品在使用前恢复至室温，用去离子水复溶，复溶后在2-8℃条件下保存能够稳定至少14天，在-20℃条件下保存能够稳定至少30天。