CN115754113A - 一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法 - Google Patents
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Abstract
一种应用于药物检测领域中的通过高效液相检测吡拉西坦中间体和成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，该方法采用氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；乙腈和磷酸氢二钾缓冲溶液为流动相，能够有效检测吡拉西坦中间体和成品中催化剂四丁基溴化铵的含量，与现有技术相比具有专属性好，灵敏度高，线性、准确度、定量限、检测限均能符合要求、合成吡拉西坦的中间体和吡拉西坦成品都具有合理的保留时间、能够很好地对各组分进行分离的特点，能够广泛地应用于药物分析领域。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析领域中的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法。
背景技术
吡拉西坦又名吡咯烷酮乙酰胺、吡咯乙酰胺，是γ-氨基丁酸的衍生物，具有激活、保护和修复神经细胞作用，是唯一一类作用于中枢神经系统被称为益智药的药物，是目前临床广泛应用的治疗急性脑血管意外、脑外伤后、手术后、脑炎后的记忆障碍和轻中度脑功能障碍，儿童发育迟缓，老年性脑功能不全等症状，也可作为酒精中毒性脑病、肌阵挛性癫痫、镰状细胞贫血神经并发症的辅助治疗。吡拉西坦片和吡拉西坦胶囊被列为国家医保目录药品。
在吡拉西坦合成过程中，常采用四丁基溴化铵作为催化剂，以便达到提高产品收率的目的。催化剂四丁基溴化铵的含量，直接影响吡拉西坦中间体和成品的含量，但是，吡拉西坦相关产品中四丁基溴化铵含量的检测方法尚未见相关文献报道。因此，需要建立一种吡拉西坦相关产品中催化剂四丁基溴化铵含量的检测方法，用以考察催化剂在吡拉西坦中间体和成品中的含量情况，从而更好的控制吡拉西坦成品的质量。
发明内容
本发明的目的在于提供一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，该方法同时适用于合成吡拉西坦的中间体和吡拉西坦成品中四丁基溴化铵的检测，具有专属性好，灵敏度高，线性、准确度、定量限、检测限均能符合要求，合成吡拉西坦的中间体和吡拉西坦成品都具有合理的保留时间、能够很好地对各组分进行分离的特点。
本发明的目的是这样实现的：一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，该检测方法包括如下步骤：
(1)色谱条件：
色谱柱：氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；
流动相：组分A:磷酸氢二钾缓冲溶液；
组分B:乙腈；
检测器：紫外检测器；
(2)供试品溶液的制备：
精密称取供试品适量，加乙腈水溶液溶解并稀释，作为供试品溶液；
(3)对照品储备溶液的制备：
精密称取四丁基溴化铵对照品适量，加乙腈水溶液溶解并稀释，作为对照品储备溶液；
(4)对照品溶液的制备：
精密吸取对照品储备溶液适量，加乙腈水溶液稀释，作为对照品溶液；
(5)测定方法：
分别精密量取供试品溶液和对照品溶液适量，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算含量。
所述氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱选自CAPCELL PAK NH2色谱柱；所述色谱柱的规格为4.6×250mm×5μm；所述紫外检测器选自Waters 2489 UV/ViS检测器。
所述流动相中乙腈和磷酸氢二钾缓冲溶液的体积比为40-60:60-40，并用磷酸调节pH值至5.5-6.5；所述磷酸氢二钾缓冲溶液的配制方法为：称取磷酸氢二钾适量，加水溶解后定容为0.5-1.5g/L的磷酸氢二钾水溶液；所述乙腈水溶液的浓度为40-60％。
所述流动相中乙腈和磷酸氢二钾缓冲溶液的体积比为50:50，并用磷酸调节pH值至6.0；所述磷酸氢二钾缓冲溶液的配制方法为：称取磷酸氢二钾适量，加水溶解后定容为1.0g/L的磷酸氢二钾水溶液；所述乙腈水溶液的浓度为50％。
所述检测器的检测波长为190-220nm，所述流动相的流速为0.8-1.2mL/min，所述色谱柱的柱温为25-35℃，所述供试品溶液和对照品溶液的进样量为10-30μL。
所述流动相的流速为1.0mL/min，所述色谱柱的柱温为28℃，所述供试品溶液和对照品溶液的进样量为20μL，所述检测器的检测波长为205nm。
所述中间体选自N-乙酸甲酯吡咯烷酮、α-吡咯烷酮中的一种或几种。
当所述供试品选自吡拉西坦成品时，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取吡拉西坦成品0.1g于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；所述对照品储备溶液的制备方法为：精密称取四丁基溴化铵对照品10mg于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；所述对照品溶液的制备方法为：精密吸取对照品储备溶液1mL至100mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀。
当所述供试品选自N-乙酸甲酯吡咯烷酮时，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取N-乙酸甲酯吡咯烷酮25mg于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；当所述供试品选自α-吡咯烷酮时，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取α-吡咯烷酮0.04g于50mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀。
所述按照外标法以峰面积计算含量的计算公式如下：
其中：
W标：四丁基溴化铵对照品的重量，g；
W样：供试品的重量，g；
P：四丁基溴化铵对照品的纯度；
A标：四丁基溴化铵对照品的峰面积；
A样：供试品的峰面积。
本发明的要点在于建立了一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其原理是：该方法采用氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱、紫外检测器、磷酸氢二钾缓冲溶液-乙腈作为流动相。
一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法与现有技术相比，提供了一种吡拉西坦相关产品中催化剂四丁基溴化铵含量的检测方法，且该检测方法具有专属性好，灵敏度高，分离度高，线性、准确度、定量限、检测限均能符合要求的特点，能够广泛地应用于药物分析领域，同时为产品质量控制和工艺优化提供重要依据。
附图说明
图1是四丁基溴化铵对照品溶液的高效液相色谱图
图2是吡拉西坦供试品溶液的高效液相色谱图
图3是吡拉西坦中间体酯化物(N-乙酸甲酯吡咯烷酮)溶液的高效液相色谱图
图4是四丁基溴化铵对照品溶液和吡拉西坦中间体酯化物溶液的混合溶液的高效液相色谱图
图5是α-吡咯烷酮溶液的高效液相色谱图
图6是采用CAPCELL PAK C18色谱柱时，四丁基溴化铵对照品溶液的高效液相色谱图
图7是采用CAPCELL PAK C18色谱柱时，50％乙腈水溶液的高效液相色谱图
具体实施方式
以下实施例将有助于对本发明的了解，但这些实施例仅为了对本发明加以说明，本发明并不限于这些内容。
实施例一
液相色谱柱的选择
选择CAPCELL PAK C18(4.6×250mm×5μm)和CAPCELL PAK NH2(4.6×250mm×5μm)两种高效液相色谱柱。使用CAPCELL PAK C18色谱柱进行检测时，四丁基溴化铵对照品的主峰无法与溶剂峰有效地分离，且出峰的保留时间不稳定，导致无法准确地判断出供试品溶液中是否有四丁基溴化铵残留，因此该色谱柱无法满足样品检验需求，参见附图6和附图7。使用CAPCELL PAK NH2色谱柱进行检测时，四丁基溴化铵对照品的主峰能够与溶剂峰有效地分离，且出峰的保留时间稳定，因此选用CAPCELL PAK NH2(4.6×250mm×5μm)色谱柱进行样品检验。
实施例二
流动相的选择
选择乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝10:90、乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝50:50两种流动相体系。选用乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝10:90，并用磷酸调节pH值为6.0，作为高效液相色谱流动相时，四丁基溴化铵峰的保留时间在31.5min，液相色谱的运行时间较长，分析检验的周期较长。选用乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝50:50，并用磷酸调节pH值为6.0，作为高效液相色谱流动相时，四丁基溴化铵峰的保留时间在12.618min(参见附图1)，液相色谱的运行时间较短，缩短了检验周期，提高了检验效率，因此，选择乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝50:50体系作为流动相。
如无特别说明，实施例二中的色谱条件为：
色谱柱：CAPCELL PAK NH2柱(4.6×250mm×5μm)；
检测器：Waters 2489 UV/ViS；
流动相：乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝50:50；
检测波长：205nm；
流动相流速：1.0mL/min；
柱温：28℃。
实施例三
吡拉西坦中间体酯化物中催化剂四丁基溴化铵含量的测定
1.色谱条件：
色谱柱：CAPCELL PAK NH2(4.6×250mm,5μm)；检测波长205nm；流速1.0mL/min；柱温：28℃；流动相：乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝50:50(用磷酸调节至pH6.0)；
2.相关溶液及流动相的配制：
2.1相关溶液的配制
2.1.1磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)的制备
称取磷酸氢二钾1.0g，加水溶解并稀释至1000mL。
2.1.2酯化物溶液的制备
精密称取酯化物(N-乙酸甲酯吡咯烷酮)25mg于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，作为酯化物溶液。
2.1.3四丁基溴化铵对照品储备溶液的制备
精密称取四丁基溴化铵对照品约10mg于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，作为四丁基溴化铵对照品储备溶液。
2.1.4四丁基溴化铵对照品溶液的制备
精密吸取四丁基溴化铵对照品储备溶液1mL至100mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，作为四丁基溴化铵对照品溶液。
2.1.5α-吡咯烷酮溶液的制备
精密称取α-吡咯烷酮0.04g于50mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，作为α-吡咯烷酮溶液。
2.1.6四丁基溴化铵对照品和酯化物混合溶液制备
分别精密量取四丁基溴化铵对照品溶液3mL和酯化物溶液2mL，充分混合，作为四丁基溴化铵对照品和酯化物混合溶液。
2.2流动相的配制
将上述1.0g/L磷酸氢二钾水溶液和乙腈按照50:50的体积比例混合，作为流动相。
3.酯化物中催化剂四丁基溴化铵含量的测定方法
分别取酯化物溶液、四丁基溴化铵对照品溶液、α-吡咯烷酮溶液、四丁基溴化铵对照品和酯化物混合溶液各20μL，注入液相色谱仪，记录色图谱，采用外标法测定。
按照外标法以峰面积计算含量的计算公式如下：
其中：
W标：四丁基溴化铵对照品的重量，g；
W样：供试品的重量，g；
P：四丁基溴化铵对照品的纯度；(注：当四丁基溴化铵对照品的纯度为99％时，取0.99代入公式进行计算)；
A标：四丁基溴化铵对照品的峰面积；
A样：供试品的峰面积。
4.检测结果
高效液相色谱图显示，酯化物溶液中未检出四丁基溴化铵残留，酯化物溶液中酯化物峰的保留时间为2.611min，α-吡咯烷酮峰的保留时间为2.957min(参见附图3)。α-吡咯烷酮和酯化物的分离度为1.9。当酯化物溶液中加入四丁基溴化铵对照品后，色谱图中显示出四丁基溴化铵峰，其峰的保留时间为12.598min(参见附图4)。
实施例四
吡拉西坦成品中催化剂四丁基溴化铵含量的测定
1.色谱条件：
色谱柱：CAPCELL PAK NH2(4.6×250mm,5μm)；检测波长205nm；流速1.0mL/min；柱温：28℃；流动相：乙腈：磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)＝50:50(用磷酸调节至pH6.0)；
2.相关溶液及流动相的配制：
2.1相关溶液的配制
2.1.1磷酸氢二钾水溶液(1.0g/L)的制备
称取磷酸氢二钾1.0g，加水溶解并稀释至1000mL。
2.1.2吡拉西坦供试品溶液的制备
精密称取吡拉西坦成品0.1g于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，作为吡拉西坦供试品溶液。
2.1.3四丁基溴化铵对照品储备溶液的制备
精密称取四丁基溴化铵对照品约10mg于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，作为四丁基溴化铵对照品储备溶液。
2.1.4四丁基溴化铵对照品溶液的制备
精密吸取四丁基溴化铵对照品储备溶液1mL至100mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀，作为四丁基溴化铵对照品溶液。
2.2流动相的配制
将上述1.0g/L磷酸氢二钾水溶液和乙腈按照50:50的体积比例混合，作为流动相。
3.吡拉西坦成品中催化剂四丁基溴化铵含量的测定方法
分别取吡拉西坦供试品溶液和四丁基溴化铵对照品溶液各20μL，注入液相色谱仪，记录色图谱，采用外标法测定。
4.检测结果
高效液相色谱图显示，吡拉西坦供试品溶液中未检出四丁基溴化铵残留，吡拉西坦供试品溶液中吡拉西坦峰的保留时间为2.962min(参见附图2)。
实施例五
方法学的建立
1.专属性试验
精密称取四丁基溴化铵对照品20mg，置于20mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为对照品储备溶液；精密称取吡拉西坦成品1g，置于100mL容量瓶中，将对照品储备溶液精密吸取1mL，置于上述100mL容量瓶中，再用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为专属性试验溶液。精密量取20μL空白溶液、专属性试验溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，空白溶剂在四丁基溴化铵主峰位置处不出峰，对含量测定无干扰，且四丁基溴化铵主峰与吡拉西坦峰分离度为24.4，符合规定。
2.系统适用性试验
精密称取四丁基溴化铵对照品适量，加50％乙腈水溶液溶解并稀释制成10μg/mL的溶液，精密量取20μL注入液相色谱仪，连续进样5次，记录主成分的峰面积，并计算RSD值，测定结果见表1。
表1：系统适用性试验结果
试验结果表明，各组分峰面积的相对标准偏差均小于2.0％，系统性较好，符合规定。
3.线性试验
在进样浓度10％～120％的浓度范围内均匀取6个浓度点，以主峰浓度为横坐标，主峰峰面积为纵坐标画一条曲线，该曲线的线性回归系数R2应不小于0.999，具体操作过程如下：
精密称取四丁基溴化铵对照品20mg，置10mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密吸取1mL，置100mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液(进样浓度200％)。
精密量取1mL对照品储备溶液于20mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为10％标准溶液。
精密量取1mL对照品储备溶液于10mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为20％标准溶液。
精密量取2.5mL对照品储备溶液于10mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为50％标准溶液。
精密量取4mL对照品储备溶液于10mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为80％标准溶液。
精密量取5mL对照品储备溶液于10mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为100％标准溶液。
精密量取6mL对照品储备溶液于10mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为120％标准溶液。
精密量取上述标准溶液20μL注入高效液相色谱仪，按四丁基溴化铵含量测定项下方法检测，记录色谱图。线性结果见表2。
表2：线性试验数据
| 浓度(％) | 10％ | 20％ | 50％ | 80％ | 100％ | 120％ |
| A峰面积 | 27634 | 53460 | 127894 | 209415 | 254437 | 314707 |
以四丁基溴化铵浓度为横坐标x，峰面积为纵坐标y，做线性关系曲线，得到线性方程为y＝258465.7877x+896.1678，R2＝0.9993。
试验结果表明，线性回归系数R2均符合规定，线性关系良好，说明在线性范围内四丁基溴化铵浓度与峰面积呈线性关系。
4.准确度试验
采用标准加入法，通过测得量和理论值之间的回收率来实现，回收率在98.0％～102.0％之间，证明方法有良好的准确度。具体操作过程如下：
精密称取吡拉西坦成品0.1g，置10mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为供试品溶液；
分别精密称取6份四丁基溴化铵对照品各20mg，分别置于20mL容量瓶中，用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为对照品储备溶液；
精密吸取1mL对照品储备溶液，置于100mL容量瓶中，作为准确度系统适用性溶液；
分别精密称取6份吡拉西坦成品各1g(作为样1至样6)，分别置于100mL容量瓶中，将6份对照品储备溶液各精密吸取1mL(作为标1至标6)，分别置于上述100mL容量瓶中，再用50％乙腈水溶液定容，摇匀，作为回收率试验溶液。取上述溶液，照四丁基溴化铵含量的检验方法测定，结果见表3和表4。
表3：回收率试验数据
| 名称 | 加入量 | 总面积 | 供试品 | A<sub>1</sub>-A<sub>2</sub> | 检出量 | 回收率 |
| 样-1+标-1 | 20.26 | 252688 | 0 | 252688 | 19.91 | 98.27 |
| 样-2+标-2 | 20.37 | 254661 | 0 | 254661 | 20.07 | 98.53 |
| 样-3+标-3 | 20.24 | 251983 | 0 | 251983 | 19.86 | 98.12 |
| 样-4+标-4 | 20.08 | 252737 | 0 | 252737 | 19.92 | 99.20 |
| 样-5+标-5 | 20.04 | 250352 | 0 | 250352 | 19.73 | 98.45 |
| 样-6+标-6 | 20.11 | 259904 | 0 | 259904 | 20.48 | 101.84 |
表4：准确度系统适用性溶液测试结果
试验结果表明，四丁基溴化铵回收率为98.1％～101.8％，在98.0％～102.0％之间，符合验证试验对回收率的要求，证实了该方法具有良好的准确度。
5.定量限
取四丁基溴化铵对照品适量，精密称定，加50％乙腈水溶解并稀释成一系列浓度，精密量取20μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图，当S/N≈10时的进样浓度即为四丁基溴化铵定量限，此时进样浓度为0.51μg/mL。
6.检测限
取四丁基溴化铵对照品适量，精密称定，加50％乙腈水溶解并稀释成一系列浓度，精密量取20μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图，当S/N≈3时的进样浓度即为四丁基溴化铵检出限，此时进样浓度为0.10μg/mL。
说明：附图1中，保留时间12.618min为四丁基溴化铵峰；附图2中，保留时间2.962min为吡拉西坦峰；附图3中，保留时间2.611min为酯化物(N-乙酸甲酯吡咯烷酮)峰，2.957min为α-吡咯烷酮峰；附图4中，保留时间2.608min为酯化物峰，2.961min为α-吡咯烷酮峰，12.598min为四丁基溴化铵峰；附图5中，保留时间2.960min为α-吡咯烷酮峰；附图6中，保留时间3.489min为四丁基溴化铵峰，3.692min为溶剂峰；附图7中，保留时间3.562min和3.688min均为溶剂峰。
Claims (10)
1.一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：该检测方法包括如下步骤：
(1)色谱条件：
色谱柱：氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；
流动相：组分A:磷酸氢二钾缓冲溶液；
组分B:乙腈；
检测器：紫外检测器；
(2)供试品溶液的制备：
精密称取供试品适量，加乙腈水溶液溶解并稀释，作为供试品溶液；
(3)对照品储备溶液的制备：
精密称取四丁基溴化铵对照品适量，加乙腈水溶液溶解并稀释，作为对照品储备溶液；
(4)对照品溶液的制备：
精密吸取对照品储备溶液适量，加乙腈水溶液稀释，作为对照品溶液；
(5)测定方法：
分别精密量取供试品溶液和对照品溶液适量，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算含量。
2.根据权利要求1所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：所述氨基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱选自CAPCELL PAK NH2色谱柱；所述色谱柱的规格为4.6×250mm×5μm；所述紫外检测器选自Waters 2489UV/ViS检测器。
3.根据权利要求1所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：所述流动相中乙腈和磷酸氢二钾缓冲溶液的体积比为40-60:60-40，并用磷酸调节pH值至5.5-6.5；所述磷酸氢二钾缓冲溶液的配制方法为：称取磷酸氢二钾适量，加水溶解后定容为0.5-1.5g/L的磷酸氢二钾水溶液；所述乙腈水溶液的浓度为40-60％。
4.根据权利要求3所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：所述流动相中乙腈和磷酸氢二钾缓冲溶液的体积比为50:50，并用磷酸调节pH值至6.0；所述磷酸氢二钾缓冲溶液的配制方法为：称取磷酸氢二钾适量，加水溶解后定容为1.0g/L的磷酸氢二钾水溶液；所述乙腈水溶液的浓度为50％。
5.根据权利要求1所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：所述检测器的检测波长为190-220nm，所述流动相的流速为0.8-1.2mL/min，所述色谱柱的柱温为25-35℃，所述供试品溶液和对照品溶液的进样量为10-30μL。
6.根据权利要求5所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：所述流动相的流速为1.0mL/min，所述色谱柱的柱温为28℃，所述供试品溶液和对照品溶液的进样量为20μL，所述检测器的检测波长为205nm。
7.根据权利要求1所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：所述中间体选自N-乙酸甲酯吡咯烷酮、α-吡咯烷酮中的一种或几种。
8.根据权利要求1所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：当所述供试品选自吡拉西坦成品时，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取吡拉西坦成品0.1g于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；所述对照品储备溶液的制备方法为：精密称取四丁基溴化铵对照品10mg于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；所述对照品溶液的制备方法为：精密吸取对照品储备溶液1mL至100mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀。
9.根据权利要求7所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：当所述供试品选自N-乙酸甲酯吡咯烷酮时，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取N-乙酸甲酯吡咯烷酮25mg于10mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；当所述供试品选自α-吡咯烷酮时，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取α-吡咯烷酮0.04g于50mL容量瓶中，加50％乙腈水溶液溶解并定容至刻度，摇匀。
10.根据权利要求1所述的一种通过高效液相检测吡拉西坦中间体和/或成品中催化剂四丁基溴化铵含量的方法，其特征在于：所述按照外标法以峰面积计算含量的计算公式如下：
其中：
W标：四丁基溴化铵对照品的重量，g；
W样：供试品的重量，g；
P：四丁基溴化铵对照品的纯度；
A标：四丁基溴化铵对照品的峰面积；
A样：供试品的峰面积。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1231285A (zh) * | 1999-03-03 | 1999-10-13 | 东北制药总厂 | N－乙酸酯吡咯烷酮的制备方法 |
| CN101885697A (zh) * | 2009-05-15 | 2010-11-17 | 天津药物研究院 | 一种制备奥拉西坦的方法、产品及产品用途 |
| US20140200355A1 (en) * | 2011-06-10 | 2014-07-17 | Institute Of Chemistry Chinese Academy Of Sciences | Method for Preparing Optically Pure (-)-Clausenamide Compound |
| US20160143894A1 (en) * | 2014-11-25 | 2016-05-26 | Cadila Healthcare Limited | Process for the preparation of apixaban |
| CN109781900A (zh) * | 2019-03-11 | 2019-05-21 | 山东新华制药股份有限公司 | 一种奥拉西坦有关物质的hplc检测方法 |
-
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1231285A (zh) * | 1999-03-03 | 1999-10-13 | 东北制药总厂 | N－乙酸酯吡咯烷酮的制备方法 |
| CN101885697A (zh) * | 2009-05-15 | 2010-11-17 | 天津药物研究院 | 一种制备奥拉西坦的方法、产品及产品用途 |
| US20140200355A1 (en) * | 2011-06-10 | 2014-07-17 | Institute Of Chemistry Chinese Academy Of Sciences | Method for Preparing Optically Pure (-)-Clausenamide Compound |
| US20160143894A1 (en) * | 2014-11-25 | 2016-05-26 | Cadila Healthcare Limited | Process for the preparation of apixaban |
| CN109781900A (zh) * | 2019-03-11 | 2019-05-21 | 山东新华制药股份有限公司 | 一种奥拉西坦有关物质的hplc检测方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 李成 等: "钯催化的酰胺羰化反应研究", 分子催化, vol. 22, no. 02, 30 April 2008 (2008-04-30), pages 97 - 100 * |
| 赵会等: "左乙拉西坦的制备方法", 沈阳化工大学学报, no. 01, 31 December 2018 (2018-12-31), pages 63 - 66 * |
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