CN115710255A - 一类含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途 - Google Patents
一类含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115710255A CN115710255A CN202110967007.0A CN202110967007A CN115710255A CN 115710255 A CN115710255 A CN 115710255A CN 202110967007 A CN202110967007 A CN 202110967007A CN 115710255 A CN115710255 A CN 115710255A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- substituted
- unsubstituted
- compound
- formula
- pharmaceutically acceptable
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途。具体地，本发明化合物具有式I所示结构，其中各基团和取代基的定义如说明书中所述。本发明还公开了所述化合物的制备方法及其在治疗自身免疫性疾病方面的用途。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体地涉及一类含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途。
背景技术
自身免疫性疾病(autoimmune diseases,ADs)在全世界范围内发病率高(5％-8％)，种类繁多。目前已识别的自身免疫性疾病有超过80多种，其中常见的包括：系统性红斑狼疮、I型糖尿病、类风湿关节炎、炎症性肠病等。大多数患者需要长期甚至终身服药，严重影响患者生活质量甚至威胁患者生命安全。因此，自身免疫性疾病成为了继心血管疾病、癌症后威胁人类健康的第三大杀手。
目前普遍用于治疗自身免疫性疾病的免疫调节药物(如硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、糖皮质激素、环孢素A等)作用广泛，无疾病特异性，与诸如感染和恶性肿瘤疾病等副作用有关。用于阻断了免疫系统的各种途径和成分的药物，如细胞因子、细胞粘附分子和共刺激分子等，此类药物均为生物大分子，存在治疗成本高，较严重的副作用。因此，探索具有新机制的自身免疫性疾病特异性小分子药物是该领域所面临的最迫切的需求。
干扰素基因刺激蛋白(stimulator of interferon genes,STING)是先天免疫cGAS-STING通路中重要的信号分子，当cGAS感知到内源或外源双链DNA(dsDNA)后被激活，其催化生成的环鸟腺苷酸(cGAMP)激活STING，继而招募TBK1蛋白，磷酸化干扰素调节因子3(IRF3)后激活先天免疫系统。当激活STING信号的dsDNA是源于坏死或者不适当的细胞凋亡时，将促进炎性细胞因子的分泌而引发炎症和自身免疫性疾病。已有研究结果表明，负向调控STING信号通路有望成为治疗自身免疫性疾病的重要策略。
尽管众多研究结果已经验证抑制cGAS-STING通路是治疗自身免疫性疾病的重要策略，然而靶向cGAS-STING通路抑制剂研究尚处于初期阶段。2018年Simone M.Haag等人在Nature上报道了一类硝基呋喃和吲哚类化合物C-178(式II)，H-151(式III)，这些化合物可与STING蛋白Cys91共价结合，阻断STING活化所诱导的棕榈酰化，进而阻断其在高尔基体组装成多聚体复合物，抑制下游信号通路传导。此外，该类抑制剂可以减少人和小鼠细胞中STING蛋白介导的炎性细胞因子的产生，减弱小鼠自身炎症疾病的病理特征。同年，王琛等人在Cell Reports上报道了从菊科植物紫菀中分离得到的小分子AstinC(式IV)。Astin C可与环二核苷酸(CDNs)竞争性结合并抑制STING(STING-R232 Kd＝53nM)。在Trex1基因缺陷小鼠模型中，静脉注射Astin C(1mg/kg)可降低细胞因子的表达与血清中自身抗体丰度，显著减轻小鼠的自身炎症反应。此外，2019年Merck公司在ACS Med.Chem.Lett.报道了一类具有四氢异喹啉母核结构的STING拮抗剂，该类化合物可以竞争性结合到cGAMP的结合位点，但细胞活性较弱。
基于STING抑制剂用于自身免疫性疾病的治疗潜力，各大制药巨头已聚焦STING抑制剂的开发。2018年9月，诺华与IFM Due公司签署8.4亿美元合作协议，旨在共同开展cGAS-STING抑制剂的研究。然而，至今报道的STING抑制剂结构类型极为有限，活性也多停留在分子水平，细胞活性大多较弱，更没有抑制剂进入临床研究。
因此，开展一种细胞和体内活性优异、稳定性强的STING抑制剂研究迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于提供一种式I所示化合物及其制备方法和其在抗肿瘤方面的用途。
本发明的第一方面，提供了一种式I所示化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐，
其中，
A为5到18元环，其中包括1-4个杂原子；杂原子选自氧、氮、硫、硼；
X选自CR1、N；
n选自0～4的整数，例如0、1、2、3、4；
R1选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、Ra取代或未取代C1-C8烷基、Ra取代或未取代C2-C8烯基、Ra取代或未取代C2-C8炔基、Ra取代或未取代C1-C8烷氧基、Ra取代或未取代C1-C8烷基酰基、Ra取代或未取代氨基酰基、Ra取代或未取代C1-C8烷基酰胺基、Ra取代或未取代C1-C8烯基酰胺基、Ra取代或未取代C1-C8烷基氨基、Ra取代或未取代C1-C8烷基硫醚基、Ra取代或未取代3-6元杂环基、Ra取代或未取代3-6元环烷基、Ra取代或未取代5-10元芳基、Ra取代或未取代5-10元杂芳基；
R2选自氢、卤素、Ra取代或未取代C1-C8烷基、Ra取代或未取代C1-C8烷基氨基；
m选自0～6的整数，例如0、1、2、3、4、5、6；
R3相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、羟基、Ra取代或未取代C1-C8烷基；
Ra选自氢、卤素、羟基、氰基、取代或未取代C1-C8烷基、取代或未取代C2-C8烯基、取代或未取代C1-C8卤代烷基、取代或未取代C1-C8烷氧基、取代或未取代C1-C8烷氧基酰基、取代或未取代C1-C8羟烷基、取代或未取代C1-C8烷基氨基、取代或未取代3-6元杂环基、取代或未取代3-6元环烷基、取代或未取代5-6元杂芳基、磷酸酯，所述取代选自氢、卤素、羟基、氰基、C1-C8烷基、C1-C8烷基酰基、3-6元杂环基、3-6元环烷基、C1-C4烷氧基。
在另一优选例中，A为饱和的或不饱和的或芳香族的环。
在另一优选例中，A为5-12(例如5、6、7、8、10、12)元环，其中包括1-4(例如1、2、3、4)个选自氧、氮、硫、硼的杂原子。
在另一优选例中，A为5-6元环，其中包括至少2个选自氧、硼的杂原子。
在另一优选例中，A为5-6元环，其中包括2个选自氧、硼的杂原子。
在另一优选例中，A选自二氧五环、二氧六环、氧硼杂环、12-冠-4醚。
在另一优选例中，A选自
在另一优选例中，R1选自氢、卤素、Ra取代或未取代C1-C6烷基、Ra取代或未取代C2-C6烯基、Ra取代或未取代C2-C6炔基、Ra取代或未取代C1-C6烷氧基、Ra取代或未取代C1-C6烷基硫醚基、Ra取代或未取代C1-C6氨基酰基、Ra取代或未取代C1-C6烷基酰胺基、Ra取代或未取代3-6元杂环基、Ra取代或未取代5-6元杂芳基，其中Ra如上所述。
在另一优选例中，R1选自氢、卤素、Ra取代或未取代C1-C6烷基、Ra取代或未取代C2-C6烯基、Ra取代或未取代C2-C6炔基、Ra取代或未取代C1-C6烷氧基、Ra取代或未取代C1-C6烷基硫醚基、Ra取代或未取代C1-C6氨基酰基、Ra取代或未取代5-6元杂芳基，其中Ra如上所述。
在另一优选例中，R2选自氢、Ra取代或未取代C1-C8烷基，其中Ra如上所述，优选为氢。
在另一优选例中，R3相同或不同，优选相同。
在另一优选例中，R3各自独立地选自氢、卤素、羟基、Ra取代或未取代C1-C8烷基，其中Ra如上所述。
在另一优选例中，Ra选自氢、卤素、羟基、氰基、取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C2-C6烯基、取代或未取代C1-C6卤代烷基、取代或未取代C1-C6烷氧基、取代或未取代C1-C6烷氧基酰基、取代或未取代C1-C6烷基羟基、取代或未取代3-6元环烷基、取代或未取代3-6元杂环基、取代或未取代5-6元杂芳基、磷酸酯基，所述取代选自氢、卤素、羟基、氰基、C1-C8烷基、C1-C8烷酰基、3-6元杂环基、3-6元环烷基、C1-C4烷氧基。
在另一优选例中，A环为5到18元环，其中包括1-4个杂原子；杂原子选自氧、氮、硫、硼。
X选自CH、N；
R1选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、Ra取代或未取代C1-C8烷基、Ra取代或未取代C2-C8烯基、Ra取代或未取代C2-C8炔基、Ra取代或未取代C1-C8烷氧基、Ra取代或未取代C1-C8烷基酰基、Ra取代或未取代氨基酰基、Ra取代或未取代C1-C8烷基酰胺基、Ra取代或未取代C1-C8烯基酰胺基、Ra取代或未取代C1-C8烷基氨基、Ra取代或未取代C1-C8烷基硫醚基、Ra取代或未取代3-6元杂环基、Ra取代或未取代3-6元环烷基、Ra取代或未取代5-6元杂芳基；
R2选自氢、卤素、Ra取代或未取代C1-C8烷基、Ra取代或未取代C1-C8烷基氨基；
m选自0～6的整数；
R3每次出现时独立地选自氢、卤素、羟基、Ra取代或未取代C1-C8烷基；
Ra选自氢、卤素、羟基、氰基、取代或未取代C1-C8烷基、取代或未取代C1-C8烷氧基、取代或未取代C1-C8烷氧基酰基、取代或未取代C1-C8烷基氨基、取代或未取代3-6元杂环基、取代或未取代3-6元环烷基、取代或未取代5-6元杂芳基、磷酸酯，所述取代选自氢、卤素、羟基、氰基、C1-C8烷基、C1-C8烷酰基、3-6元杂环基、3-6元环烷基、C1-C4烷氧烷氧基。
在另一优选例中，所述化合物选自表1所列化合物。
表1
在本发明的第二方面，提供了一种式I所示化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐的制备方法，所述方法选自下组：
方法一，包括步骤：
a-1)在叠氮化试剂存在下，式1化合物进行反应，得到式2化合物；
a-2)式2化合物进行重排反应，得到式3化合物；
a-3)式3化合物与式4化合物进行反应，得到式I化合物；
其中，A、R1、R2、R3、m如本发明第一方面所限定；
方法二、包括步骤：
b)在微波存在下，在偶氮化试剂存在下，式1化合物与式4化合物反应得到式I化合物；
其中，A、R1、R2、R3、m、n如本发明第一方面所限定。
在另一优选例中，所述偶氮化试剂选自下组：叠氮磷酸二苯酯、叠氮钠、叠氮三甲基硅烷、三丁基锡叠氮化物、叠氮化四丁基铵，或其组合。
在另一优选例中，步骤a-2)包括：将式2化合物加热回流，得到式3化合物。
在另一优选例中，所述微波的功率为100-200W。
在另一优选例中，所述方法选自下组：
方法一、包括步骤：
方法二、包括步骤：
在本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，包含：
(i)一种或多种治疗有效量的本发明第一方面所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐；和
(ii)药学上可接受的载体。
在另一优选例中，所述药物组合物为注射剂、囊剂、片剂、丸剂、散剂或颗粒剂。
在另一优选例中，所述药物组合物还包含一种或多种第二治疗剂，所述第二治疗剂为预防和/或治疗自身免疫性疾病的药物。
在本发明的第四方面，提供了一种本发明第一方面所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐或本发明第三方面所述的药物组合物的用途，用于制备一制剂，所述制剂用于预防和/或治疗与干扰素基因刺激蛋白相关的疾病。
在另一优选例中，所述与干扰素基因刺激蛋白相关的疾病选自下组：Singleton-Merten综合征(SMS)、Aicardi-Goutières综合征(AGS)、系统性红斑狼疮(SLE)、家族性冻疮性红斑狼疮(FCL)、视网膜血管病与脑白质营养不良(RVCL)、STING相关的婴儿期发病血管病变(SAVI)、银屑病、硬皮病、脑卒中、心肌梗死、脑外伤、动脉粥样硬化相关血管疾病、心血管疾病、糖尿病及其并发症、帕金森病、亨廷顿病、家族性肌萎缩侧索硬化症、神经退行性疾病、小肠吸收不良综合征、肠易激综合征、斯耶格伦氏综合征、多发性硬化、克罗恩病、非酒精性脂肪性肝炎、类风湿性关节炎、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、自身免疫性结肠炎、化脓性汗腺炎、葡萄膜炎、粘膜炎等炎症性疾病和自身免疫性疾病。
在本发明的第五方面，提供了一种干扰素基因刺激蛋白抑制剂，所述抑制剂包括一种或多种本发明第一方面所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐。
在本发明的第六方面，提供了一种预防和/或治疗与干扰素基因刺激蛋白相关的疾病的方法，包括步骤：将治疗有效量的一种或多种本发明第一方面所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐或本发明第三方面所述的药物组合物施用于所需患者。
在另一优选例中，所述方法是诊断性或非诊断性的。
在另一优选例中，所述方法是治疗性或非治疗性的。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
具体实施方式
本发明人经过长期而深入的研究，意外地制备了一种结构简单、合成方便、代谢稳定的式I所示化合物，所述化合物对干扰素基因刺激蛋白具有优异的抑制效果，从而抑制下游信号通路的传导，进而实现炎症和自身免疫性疾病的有效治疗。在此基础上，发明人完成了本发明。
术语
除非另有定义，否则本文中所用的全部技术术语和科学术语均具有如本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同含义。
如本文所用，在提到具体列举的数值中使用时，术语“约”意指该值可以从列举的值变动不多于1％。例如，如本文所用，表述“约100”包括99和101和之间的全部值(例如，99.1、99.2、99.3、99.4等)。
如本文所用，术语“含有”或“包括(包含)”可以是开放式、半封闭式和封闭式的。换言之，所述术语也包括“基本上由…构成”、或“由…构成”。
在本发明中，所述卤素为F、Cl、Br或I。
在本发明中，术语“C1-C6”是指具有1、2、3、4、5或6个碳原子，“C1-C8”是指具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子，依此类推。“5-6元”是指具有5-6个环原子，依此类推。
在本发明中，术语“烷基”表示饱和的线性或支链烃部分，例如术语“C1-C8烷基”是指具有1至8个碳原子的直链或支链烷基，非限制性地包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和已基等；优选乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。
在本发明中，术语“卤代烷基”表示被卤原子取代的上述烷基，包括氟代烷基、氯代烷基、溴代烷基或碘代烷基，非限制性地包括三氟甲基、五氟乙基、七氟异丙基、一氯甲基、二氯甲基、三氯甲基等。
在本发明中，术语“烷氧基”表示-O-(C1-C8烷基)基团。例如术语“C1-C8烷氧基”是指具有1至8个碳原子的直链或支链烷氧基，非限制性地包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基和丁氧基等。
在本发明中，术语“烷基硫醚基”表示-S-(C1-C8烷基)基团。例如术语“C1-C8烷基硫醚基”是指具有1至8个碳原子的直链或支链烷基硫醚基，非限制性地包括甲基硫醚基(-S-CH3)、乙基硫醚基(-S-CH2CH3)、丙基硫醚基、异丙基硫醚基和丁基硫醚基等。
在本发明中，术语“烯基”表示包含至少一个双键的直链或支链烃基部分，例如术语“C2-C8烯基”是指具有2至8个碳原子的含有一个双键的直链或支链烯基，非限制性地包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、异丁烯基、戊烯基和己烯基等。
在本发明中，术语“炔基”是指含有一个三键的直链或支链炔基，非限制性地包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、异丁炔基、戊炔基和己炔基等。
在本发明中，术语“环烷基”表示饱和的环状烃基部分，例如术语“C3-C8环烷基”是指在环上具有3至8个碳原子的环状烷基，非限制性地包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基和环癸基等。术语“C3-C6环烷基”、和“C5-C6环烷基”具有类似的含义。
在本发明中，术语“杂环基”表示包含至少一个(例如1、2、3个)环内杂原子(例如N、O或S)的环状基团，例如四氢呋喃基、吡咯基、四氢吡啶基或吡咯烷基、二氧五环基、二氧六环基、氧氮环丙烷基、氧氮环己烷基。
在本发明中，术语“芳基”表示包含一个或多个芳环的烃基部分。例如术语“C6-C10芳基”是指在环上不含杂原子的具有6至10个碳原子的芳香族环基，如苯基、萘基等。
在本发明中，术语“杂芳基”表示包含至少一个(例如1、2、3个)环内杂原子(例如N、O或S)的芳香族的环状基团，例如如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡唑基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、三唑基、四唑基等。
术语“烷基酰基”表示-CO-如上所述的烷基。
术语“烷基酰胺基”表示-NH-CO-如上所述的烷基。
术语“烯基酰胺基”表示-NH-CO-如上所述的烯基。
术语“烷基氨基”表示-NH-如上所述的烷基和-N-如上所述的烷基。
术语“羟烷基”表示-如上所述的烷基-OH。
术语“烷氧基酰基”表示-CO-如上所述的烷氧基。
术语“磷酸酯”表示
例如PO(OEt)2、PO(OMe)2。
除非另外说明，本文所述的烷基、卤代烷基、烷氧基、烷基硫醚基、环烷基、杂环基和芳基为取代的和未取代的基团。烷基、卤代烷基、烷氧基、烷基硫醚基、环烷基、杂环基和芳基上可能的取代基包括，但不限于：羟基、氨基、硝基、腈基、卤素、C1-C6烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C20环烷基、C3-C20环烯基、C1-C20杂环烷基、C1-C20杂环烯基、C1-C6烷氧基、芳基、杂芳基、杂芳氧基、C1-C10烷基氨基、C1-C20二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、C1-C10烷基氨磺酰基、芳基氨磺酰基、C1-C10烷基亚氨基、C1-C10烷基磺基亚氨基、芳基磺基亚氨基、巯基、C1-C10烷硫基、C1-C10烷基磺酰基、芳基磺酰基、酰基氨基、氨酰基、氨基硫代酰基、胍基、脲基、氰基、酰基、硫代酰基、酰氧基、羧基和羧酸酯基。另一方面，环烷基、杂环烷基、杂环烯基、芳基和杂芳基也可互相稠合。
本发明中，所述取代为单取代或多取代，所述多取代为二取代、三取代、四取代、或五取代。所述二取代就是指具有两个取代基，依此类推。
盐型
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。一类优选的盐是本发明化合物与酸形成的盐。适合形成盐的酸包括但并不限于：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸；甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、苯甲酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸等有机酸；以及脯氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等氨基酸。
另一类优选的盐是本发明化合物与碱形成的盐，例如碱金属盐(例如钠盐或钾盐)、碱土金属盐(例如镁盐或钙盐)、铵盐(如低级的烷醇铵盐以及其它药学上可接受的胺盐)，例如甲胺盐、乙胺盐、丙胺盐、二甲基胺盐、三甲基胺盐、二乙基胺盐、三乙基胺盐、叔丁基胺盐、乙二胺盐、羟乙胺盐、二羟乙胺盐、三羟乙胺盐，以及分别由吗啉、哌嗪、赖氨酸形成的胺盐。
术语“溶剂合物”指本发明化合物与溶剂分子配位形成特定比例的配合物。“水合物”是指本发明化合物与水进行配位形成的配合物。
术语“前药”包括其本身可以是具有生物学活性的或非活性的，当用适当的方法服用后，其在人体内进行代谢或化学反应而转变成式I的一类化合物，或式I的一个化合物所组成的盐或溶液。所述的前药包括(但不局限于)所述化合物的羧酸酯、碳酸酯、磷酸酯、硝酸酯、硫酸酯、砜酯、亚砜酯、氨基化合物、氨基甲酸盐、偶氮化合物、磷酰胺、葡萄糖苷、醚、乙缩醛等形式。
药物组合物和施用方法
本发明还提供了一种药物组合物，包含：
(i)一种或多种治疗有效量的式I所示的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐；和
(ii)药学上可接受的载体。
由于本发明化合物具有优异的抗肿瘤活性，因此本发明化合物及其各种晶型，药学上可接受的无机或有机盐，水合物或溶剂合物，以及含有本发明化合物为主要活性成分的药物组合物可用于治疗、预防以及缓解与肿瘤相关的疾病。
本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的本发明化合物或其药理上可接受的盐及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。治疗有效量根据治疗对象的年龄、病情、疗程等来确定。通常，药物组合物含有1-2000mg本发明化合物/剂，更佳地，含有10-1000mg本发明化合物/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个胶囊或药片。
所述的“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组分能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有糖(如葡萄糖、蔗糖、乳糖等)，淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)，明胶，滑石，固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油(如豆油，芝麻油，花生油，橄榄油等)，多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)，乳化剂(如吐温)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。
本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。
固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。
用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。
除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。
除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。
用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。
本发明中的上述式I所示的氨基苯并咪唑类衍生物和其药学上可接受的盐可以单独给药，或者与其他药学上可接受的治疗剂联合给药。
本发明治疗方法可以单独施用，或者与其它治疗手段或者治疗药物联用。
使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选50～1000mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
本发明的主要优点包括：
(1)所述化合物具有结构简单、易于合成、给药方式多样的特点；
(2)所述化合物对干扰素基因刺激蛋白具有优异的抑制效果，进而实现对自身免疫性疾病的有效治疗；
(3)所述化合物在人源细胞中对干扰素基因刺激蛋白激活的半数抑制浓度(IC50)可小于20nM。
下面结合具体实施，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
对于以下实施例，可以使用本领域技术人员已知的标准操作和纯化方法。除非另有规定，否则原料通常是从市售来源可获得的，比如Aldrich Chemicals Co.和AcrosOrganics。商购的溶剂和试剂一般在不进一步纯化的情况下使用，无水溶剂均通过标准方法处理，其他试剂为市售分析纯。除非另有说明，所有温度以℃(摄氏度)表示，室温或环境温度是指20～25℃。化合物的结构通过核磁共振谱(NMR)来确定的。核磁共振氢谱位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。核磁共振氢谱用Mercury-400MHz型核磁共振仪测定，氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)为溶剂，四甲基硅烷(TMS)为内标。
层析柱一般使用200～300目硅胶为载体。
实施例1.化合物的制备
以下制备例示例性的制备了本发明的部分式I化合物，各化合物分别以S1至S27表示。
1.化合物S1的合成
步骤1：将化合物1a(1eq)溶于甲苯中，在氮气保护下加入三乙胺(1eq)，约15分钟后加入叠氮磷酸二苯酯(1.1eq)，在室温下搅拌过夜。待反应完全后，旋干溶剂，而后过柱纯化，得化合物1b。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.70(s,1H),8.31–8.22(m,1H),7.95(d,J＝2.8Hz,1H),7.46–7.41(m,1H),7.34–7.29(m,2H).
步骤2：将化合物1b溶于甲苯中，在氮气保护下回流过夜。待反应完全后，旋干溶剂，抽干，得化合物1c。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.62(d,J＝7.9Hz,1H),7.36(d,J＝8.2Hz,1H),7.29–7.25(m,2H),7.20(t,J＝7.5Hz,1H),7.05(d,J＝2.3Hz,1H).
步骤3：将化合物1c(1eq)溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入化合物1d(1.2eq)和三乙胺(3eq)，于室温下反应过夜。反应完全后，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取，过柱纯化得化合物S1。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.59(d,J＝1.9Hz,1H),7.52(d,J＝7.9Hz,1H),7.42(s,1H),7.35(d,J＝8.2Hz,1H),7.13(t,J＝7.3Hz,1H),7.10(d,J＝8.7Hz,1H),7.04(t,J＝7.4Hz,1H),7.00(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H).
2.化合物S2的合成
将化合物1a(1eq)，化合物2a(1.5eq)，叠氮磷酸二苯酯(1.2eq)和三乙胺(3eq)混合于甲苯中，使用CEM Discover微波合成仪，150W，100℃反应15分钟。待反应液冷却后，倾入饱和碳酸氢钠溶液中，用乙酸乙酯萃取，收集有机相，而后过柱纯化，得化合物S2。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.75(s,1H),7.54(d,J＝7.9Hz,1H),7.46(s,1H),7.35(d,J＝8.2Hz,1H),7.16–7.03(m,3H),6.86(d,J＝8.1Hz,1H).
3.化合物S3的合成
将化合物3a(1eq)，化合物1d(1.5eq)，叠氮磷酸二苯酯(1.2eq)和三乙胺(3eq)混合于甲苯中，使用CEM Discover微波合成仪，150W，100℃反应15分钟。待反应液冷却后，倾入饱和碳酸氢钠溶液中，用乙酸乙酯萃取，收集有机相，而后过柱纯化，得化合物S3。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.91(s,1H),8.78(s,1H),8.50(s,1H),7.71(s,1H),7.55(s,1H),7.36–7.30(m,2H),7.23(d,J＝9.3Hz,1H),7.11(d,J＝8.1Hz,1H),6.95(t,J＝9.3Hz,1H).
4.化合物S4的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物4a替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物S4。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.00(s,1H),8.75(s,1H),8.59(s,1H),7.70(d,J＝2.0Hz,1H),7.54(d,J＝2.1Hz,2H),7.36(d,J＝8.6Hz,1H),7.31(d,J＝8.7Hz,1H),7.12-7.08(m,2H).
5.化合物S5的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物5a替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物S5。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.01(s,1H),8.72(s,1H),8.60(s,1H),7.70–7.69(m,2H),7.52(d,J＝2.4Hz,1H),7.32(d,J＝5.0Hz,1H),7.30(d,J＝5.2Hz,1H,7.20(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),7.11(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H).
6.化合物S6的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物6a替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物S6。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.56(s,1H),8.85(s,1H),8.59(s,1H),8.22(s,1H),7.75(dd,J＝9.4,2.5Hz,1H),7.69(d,J＝1.9Hz,1H),7.63(d,J＝2.4Hz,1H),7.31(d,J＝8.7Hz,1H),7.13(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H).
7.化合物S7的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物7a替换化合物1d，其他实验步骤相同，得化合物S7。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.86(s,1H),8.43(s,1H),8.35(s,1H),7.53(d,J＝2.3Hz,1H),7.33(dd,J＝8.8,4.5Hz,1H),7.24(d,J＝1.9Hz,1H),7.21(dd,J＝9.9,2.4Hz,1H),6.96-6.91(m,1H),6.82(d,J＝8.3Hz,1H),6.77(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),5.96(s,2H).
8.化合物S8的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物8a替换化合物1d，其他实验步骤相同，得化合物S8。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.93(s,1H),8.88(s,1H),8.56(s,1H),7.71(d,J＝2.3Hz,1H),7.55(d,J＝2.4Hz,1H),7.39–7.33(m,2H),7.27(dd,J＝9.0,2.4Hz,1H),7.22(dd,J＝9.8,2.3Hz,1H),6.97–6.92(m,1H).
9.化合物S9的合成
步骤1：将化合物9a溶于硝基甲烷中，冰浴下逐滴加入浓硫酸：浓硝酸为1：1的混合溶液，反应约半小时，待反应完全后，将反应液缓慢倾入水中，乙酸乙酯萃取，收集有机相过柱纯化，得化合物9b。
步骤2：将化合物9b(1eq)溶于甲醇中，加入氯化铵(10eq)，升温至80℃，而后加入铁粉(5eq)，反应约8小时，待反应完全后趁热过滤，用甲醇洗涤滤饼，收集滤液旋干得粗品化合物9c。
合成方法参考化合物S3，用化合物9c替换化合物1d，其他实验步骤相同，得化合物S9。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.87(s,1H),8.41(s,1H),8.37(s,1H),7.55(d,J＝2.4Hz,1H),7.34(dd,J＝8.9,4.5Hz,1H),7.28(d,J＝2.1Hz,1H),7.21(dd,J＝9.8,2.4Hz,1H),6.97–6.90(m,3H),4.08–4.03(m,4H),3.76–3.74(m,2H),3.69–3.67(m,2H),3.64(s,4H).
10.化合物S10的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物10a替换化合物1d，其他实验步骤相同，得化合物S10。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.85(s,1H),8.33(s,1H),8.31(s,1H),7.52(d,J＝2.4Hz,1H),7.33(dd,J＝8.8,4.5Hz,1H),7.20(dd,J＝9.8,2.4Hz,1H),7.12(d,J＝2.4Hz,1H),6.93(td,J＝9.2,2.5Hz,1H),6.80(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),6.75(d,J＝8.7Hz,1H),4.22–4.17(m,4H).
11.化合物S11的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物11a替换化合物1d，其他实验步骤相同，得化合物S11。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.86(s,1H),9.18(s,1H),8.56(s,1H),8.42(s,1H),7.86(d,J＝1.7Hz,1H),7.56–7.53(m,2H),7.36–7.29(m,2H),7.23(dd,J＝9.9,2.4Hz,1H),6.94(td,J＝9.2,2.4Hz,1H),4.93(s,2H).
12.化合物S12的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物12a替换化合物1d，其他实验步骤相同，得化合物S12。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.85(s,1H),9.17(s,1H),8.55(s,1H),8.41(s,1H),7.86(d,J＝1.3Hz,1H),7.56–7.54(m,2H),7.36–7.30(m,2H),7.23(dd,J＝9.8,2.1Hz,1H),6.94(td,J＝9.3,2.2Hz,1H),4.93(s,2H).
13.化合物S13的合成
步骤1：合成方法参考化合物S3，用化合物13a替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物13b。
步骤2：在氮气保护下，用封管作为反应容器，将化合物13b(1eq)和化合物13c(3eq)混溶于1,4-二氧六环中，加入二三苯基膦二氯化钯(0.05eq)，碘化亚铜(0.1eq)和N，N-二异丙基乙胺(4eq)，于110℃反应约8小时，待反应完全，冷却至室温，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相过柱纯化得化合物S13。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.66(s,1H),7.59(d,J＝2.0Hz,1H),7.47(s,1H),7.31(d,J＝8.4Hz,1H),7.20(dd,J＝8.5,1.4Hz,1H),7.10(d,J＝8.6Hz,1H),7.01(dd,J＝8.6,2.1Hz,1H),2.10(s,3H).
14.化合物S14的合成
合成方法参考化合物S13，用化合物14a替换化合物13c，其他实验步骤相同，得化合物S14。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.98(s,1H),8.72(s,1H),8.61(s,1H),7.71(d,J＝2.1Hz,1H),7.64(s,1H),7.51(d,J＝2.3Hz,1H),7.34–7.30(m,2H),7.14–7.09(m,2H),5.27(t,J＝5.9Hz,1H),4.30(d,J＝5.9Hz,2H).
15.化合物S15的合成
步骤1：在氮气保护下，将化合物15a(1eq)溶于N，N-二甲基甲酰胺中，加入二三苯基膦二氯化钯(0.02eq)，碘化亚铜(0.03eq)，三乙胺(2eq)和化合物15b(3eq)，于室温反应约两小时，待反应完全，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相过柱纯化得化合物15c。
步骤2：将化合物15c溶于甲醇中，加入碳酸钾(1eq)，于室温反应约5小时。待反应完全，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相过柱纯化得化合物15d。
步骤3：将化合物15d(1eq)溶于N，N-二甲基甲酰胺中，降温至0℃缓慢加入三氟乙酸酐(1.5eq)，加毕后移至室温反应约2小时，待反应完全，将反应液缓慢倾入水中，待固体充分析出后过滤，收集滤饼烘干直接用于下一步。
步骤4：将所得滤饼悬浮于4N氢氧化钠水溶液中，升温至回流，反应约3小时，待反应完全后，冷却至室温，用乙醚萃取3次，收集水相，用4N盐酸水溶调节pH值至4～5，待固体充分析出后过滤，烘干后用适量乙醚打浆，得化合物15f。
步骤5：合成方法参考化合物S3，用化合物15f替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物S15。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.01(s,1H),8.72(s,1H),8.63(s,1H),7.71–7.70(m,2H),7.53(d,J＝2.3Hz,1H),7.32(dd,J＝12.0,8.6Hz,2H),7.18(dd,J＝8.5,1.4Hz,1H),7.11(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),3.94(s,1H).
16.化合物S16的合成
步骤1：将化合物S15(1eq)溶于正丁醇与水(体积比为1：1)的混合溶剂中，而后加入五水合硫酸铜(0.2eq)，维生素C钠(0.4eq)和化合物16a(1.2eq)，于室温反应约3小时。待反应完全，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相过柱纯化得化合物S16。1HNMR(400MHz,DMSO)δ8.57(s,1H),7.97(s,1H),7.77(s,1H),7.57-7.56(m,1H),7.41(s,1H),7.37(s,1H),7.30(d,J＝8.8Hz,1H),6.79(s,2H),4.52(t,J＝4.8Hz,2H),3.91(t,J＝5.0Hz,2H),3.65–3.64(m,2H),3.56–3.54(m,2H),3.37(s,3H).
17.化合物S17的合成
合成方法参考化合物S16，用化合物17a(参考J.Med.Chem.2017,60,5407-5423.)替换化合物16a，其他实验步骤相同，得化合物S17。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.73(s,1H),8.01(s,1H),7.77(s,1H),7.53-7.52(m,1H),7.38(s,1H),7.31–7.29(m,2H),6.75(s,2H),4.48(t,J＝6.1Hz,2H),3.68–3.66(m,4H),2.84(t,J＝6.1Hz,2H),2.51–2.49(m,4H).
18.化合物S18的合成
合成方法参考化合物S16，用化合物18a替换化合物16a，其他实验步骤相同，得化合物S18。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.84(s,1H),8.81(s,1H),8.68(s,1H),8.39(s,1H),8.13(s,1H),7.73(d,J＝1.9Hz,1H),7.55–7.52(m,2H),7.39(d,J＝8.5Hz,1H),7.31(d,J＝8.7Hz,1H),7.10(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),5.09(t,J＝5.3Hz,1H),4.44(t,J＝5.3Hz,2H),3.84(q,J＝5.3Hz,2H).
19.化合物S19的合成
合成方法参考化合物S13，用化合物19a替换化合物13c，其他实验步骤相同，得化合物S19。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.57(d,J＝1.5Hz,1H),7.55(s,1H),7.43(s,1H),7.25(d,J＝8.5Hz,1H),7.12–7.08(m,2H),7.00(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),1.48–1.42(m,1H),0.87–0.83(m,2H),0.72–0.68(m,2H).
20.化合物S20的合成
步骤1：在氮气保护下，将化合物15f(1eq)溶于N,N-二甲基甲酰胺中，依次加入二苯基(三氟甲基)锍三氟甲磺酸盐(2eq)，碘化亚铜(1eq)，2,2'-联吡啶(1eq)和碳酸钾(1eq)，于60℃反应约5小时。待反应完全后，冷却至室温，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相过柱纯化得化合物20a。
步骤2：合成方法参考化合物S3，用化合物20a替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物S20。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.51(s,1H),8.22(s,1H),7.78(d,J＝2.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.5Hz,1H),7.43(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),7.35(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),7.17(d,J＝8.7Hz,1H).
21.化合物S21的合成
合成方法参考化合物S13，用化合物21a替换化合物13c，其他实验步骤相同，得化合物S19。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.78(s,1H),7.68(s,1H),7.59(d,J＝3.3Hz,2H),7.46(s,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.23(dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.09(d,J＝8.7Hz,1H),7.02(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),3.89(s,3H).
22.化合物S22的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物22a(参考J.Med.Chem.2019,62,11280-11300)替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物S20。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.70(s,1H),8.63(s,1H),8.33(s,1H),7.96(d,J＝8.2Hz,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,1H),7.75(d,J＝8.2Hz,1H),7.71(d,J＝8.7Hz,1H),4.62–4.55(m,4H),3.93(s,2H),1.82(t,J＝6.9Hz,6H).
23.化合物S23的合成
步骤1：在氮气保护下，将化合物13b(1eq)溶于超干乙腈中，依次加入化合物23a(1.5eq)，三(邻甲基苯基)磷(0.2eq)，醋酸钯(0.1eq)和三乙胺(3eq)，于90℃反应约6小时。待反应完全后，冷却至室温，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相过柱纯化得化合物S23。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.07(s,1H),8.82(s,1H),8.61(s,1H),7.81(s,1H),7.74(d,J＝15.9Hz,1H),7.71(d,J＝1.7Hz,1H),7.53–7.50(m,2H),7.37(d,J＝8.5Hz,1H),7.31(d,J＝8.7Hz,1H),7.12(dd,J＝8.7,2.2Hz,1H),6.48(d,J＝15.9Hz,1H),3.72(s,3H).
24.化合物S24的合成
合成方法参考化合物S23，用化合物24a替换化合物23a，其他实验步骤相同，得化合物S24。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.84(s,1H),8.78(s,1H),8.55(s,1H),7.71(d,J＝1.7Hz,1H),7.52(s,1H),7.47(d,J＝2.1Hz,1H),7.33–7.29(m,3H),7.10(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),6.74(d,J＝16.0Hz,1H),6.12–6.03(m,1H),3.54(d,J＝5.9Hz,2H).
25.化合物S25的合成
合成方法参考化合物S23，用化合物25a替换化合物23a，其他实验步骤相同，得化合物S25。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.13(s,1H),8.86(s,1H),8.59(s,1H),7.71(t,J＝8.1Hz,3H),7.53(s,1H),7.49(d,J＝8.5Hz,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(d,J＝8.4Hz,1H),7.11(d,J＝8.2Hz,1H),6.23(d,J＝16.4Hz,1H).
26.化合物S26的合成
步骤1：合成方法参考化合物S1，用化合物26a替换化合物1a，其他实验步骤相同，得化合物26d。
步骤2：将化合物26d溶于乙醇中，加入5％钯/碳(质量比为20％)，于氢气氛围下室温反应约6小时，待反应完全后，过滤除去钯/碳，用适量乙醇洗涤滤饼，收集滤液旋干得化合物26e，将粗品直接用于下一步。
步骤3：将化合物26e(1eq)溶于二氯甲烷中，加入三乙胺(2eq)和丙烯酰氯(2eq)，于室温下反应过夜。待反应完全后，将反应液倾入水中，用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相过柱纯化得化合物S26。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.98(d,J＝1.6Hz,1H),7.57(d,J＝1.9Hz,1H),7.42(s,1H),7.32(d,J＝8.7Hz,1H),7.21(dd,J＝8.7,1.6Hz,1H),7.07(d,J＝8.7Hz,1H),6.99(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),6.46(dd,J＝17.0,10.0Hz,1H),6.35(dd,J＝17.0,1.9Hz,1H),5.74(dd,J＝10.0,1.9Hz,1H).
27.化合物S27的合成
合成方法参考化合物S3，用化合物27a替换化合物3a，其他实验步骤相同，得化合物S27。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.72(s,1H),7.57(s,1H),7.39–7.28(m,4H).
实施例2.化合物在人源THP1-Dual及鼠源Raw-Lucia报告细胞中对STING的抑制活性
1.化合物在人源细胞中对STING激活的半数抑制浓度(IC50)测试
本发明通过测试化合物在人源THP1-Dual细胞中对STING激活的半数抑制浓度(IC50)来检测抑制活性。
1.1检测原理：人源单核细胞株THP1-Dual细胞中构建有干扰素刺激基因(ISG)和核转录炎症因子(NF-kB)的双报告系统，在激活剂或抑制剂的作用下可分别调控下游荧光素酶和碱性磷酸酶的表达，再通过加入相应的荧光素酶或碱性磷酸酶检测试剂来反映相应通路的信号强度。本研究中，由于STING调节剂主要对ISG通路进行调控，所以我们采用ISG通路报告系统，观察化合物对STING阳性激动剂MSA-2刺激的ISG通路的抑制，来推测化合物对STING通路的抑制活性。
1.2实验方法：
1)化合物用DMSO配制成10mM储液。
2)96孔板中，每孔加入20μL用生理盐水稀释的化合物，根据化合物的初筛活性，设定化合物的起始测试浓度(1μM)与浓度梯度(3倍稀释)，STING激动剂MSA-2的刺激浓度为10μM。
3)THP1-Dual细胞计数，调整细胞浓度5×105/mL，每孔加入180μL的细胞进行孵育。实验设不同组别，包括：细胞空白组(溶媒)、刺激组(MSA-2)、不同浓度梯度的加药组(MSA-2+化合物)，溶媒DMSO的含量为0.2％，各设三复孔。每孔细胞中分别加入20μL的不同组别试剂，因此每个测试孔的终体积为200μL。
4)37℃细胞培养箱中孵育24h后，每孔取20ul培养液至新的底部透光的96孔板中，随即加入荧光素酶检测试剂QUANTI-Luc素酶检测试剂，用spectra-MAX190(MolecularDevices)立即测定Lum荧光值。
5)计算IC50。先计算抑制率:抑制率(IR，％)＝[对照(Lum)-加药(Lum)]/对照(Lum)×100，然后IC50值通过GraphPad Prism 8.4.3软件的四参数拟合方法计算得到。
2.化合物在鼠源细胞中对STING激活的半数抑制浓度(IC50)测试
本发明通过测试化合物在鼠源Raw-Lucia报告细胞中对STING激活的半数抑制浓度(IC50)来检测抑制活性。
2.1检测原理：鼠源Raw-Lucia细胞作为实验对象，该细胞中构建有ISG的报告系统，在激活剂或抑制剂的作用下调控下游荧光素酶的表达。再通过加入相应的荧光素酶检测试剂来反映通路的信号强度。本研究中，我们观察化合物对STING阳性激动剂MSA-2刺激的ISG通路的抑制，来推测化合物对STING通路的抑制活性。
2.2实验方法
1)化合物用DMSO配制成10mM储液。
2)96孔板中，每孔加入20ul用生理盐水稀释的化合物，根据化合物的初筛活性，设定化合物的起始测试浓度(1μM)与浓度梯度(3倍稀释)，STING激动剂MSA-2的浓度为50μM。
3)Raw-Lucia细胞计数，调整细胞浓度1×106/ml，每孔加入180μl的细胞进行孵育。实验设不同组别，包括：细胞空白组、刺激组(细胞+MSA-2+溶媒)、不同浓度梯度的加药组(细胞+MSA-2+化合物)，溶媒DMSO的含量为0.6％，各设三复孔。每孔细胞中分别加入20μl的不同组别试剂，因此，每个测试孔的终体积为200μl。
4)37℃细胞培养箱中孵育24h后，每孔取20ul培养液至新的底部透光的96孔板中，随即加入荧光素酶检测试剂QUANTI-Luc素酶检测试剂，用spectra-MAX190(MolecularDevices)立即测定Lum荧光值。
5)计算IC50。先计算抑制率：抑制率(IR，％)＝[对照(Lum)-加药(Lum)]/对照(Lum)×100，然后IC50值通过GraphPad Prism 8.4.3软件的四参数拟合方法计算得到。
本发明的化合物在人源和鼠源细胞中对STING的抑制活性如下表2所示。
表2本发明的化合物在人源和鼠源细胞中对STING激活的半数抑制浓度(IC50)值
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
Claims (10)
1.一种式I所示化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐，
其中，
A为5到18元环，其中包括1-4个杂原子；所述杂原子选自氧、氮、硫、硼；
X选自CR1、N；
n选自0-4的整数，例如0、1、2、3、4；
R1选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、Ra取代或未取代C1-C8烷基、Ra取代或未取代C2-C8烯基、Ra取代或未取代C2-C8炔基、Ra取代或未取代C1-C8烷氧基、Ra取代或未取代C1-C8烷基酰基、Ra取代或未取代氨基酰基、Ra取代或未取代C1-C8烷基酰胺基、Ra取代或未取代C1-C8烯基酰胺基、Ra取代或未取代C1-C8烷基氨基、Ra取代或未取代C1-C8烷基硫醚基、Ra取代或未取代3-6元杂环基、Ra取代或未取代3-6元环烷基、Ra取代或未取代5-10元芳基、Ra取代或未取代5-10元杂芳基；
R2选自氢、卤素、Ra取代或未取代C1-C8烷基、Ra取代或未取代C1-C8烷基氨基；
m选自0～6的整数，例如0、1、2、3、4、5、6；
R3相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、羟基、Ra取代或未取代C1-C8烷基；
Ra选自氢、卤素、羟基、氰基、取代或未取代C1-C8烷基、取代或未取代C2-C8烯基、取代或未取代C1-C8卤代烷基、取代或未取代C1-C8烷氧基、取代或未取代C1-C8烷氧基酰基、取代或未取代C1-C8羟烷基、取代或未取代C1-C8烷基氨基、取代或未取代3-6元杂环基、取代或未取代3-6元环烷基、取代或未取代5-6元杂芳基、磷酸酯，所述取代选自氢、卤素、羟基、氰基、C1-C8烷基、C1-C8烷基酰基、3-6元杂环基、3-6元环烷基、C1-C4烷氧基。
2.如权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，A为5-12元环，其中包括1-4个选自氧、氮、硫、硼的杂原子。
3.如权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R1选自氢、卤素、Ra取代或未取代C1-C6烷基、Ra取代或未取代C2-C6烯基、Ra取代或未取代C2-C6炔基、Ra取代或未取代C1-C6烷氧基、Ra取代或未取代C1-C6烷基硫醚基、Ra取代或未取代C1-C6氨基酰基、Ra取代或未取代C1-C6烷基酰胺基、Ra取代或未取代3-6元杂环基、Ra取代或未取代5-6元杂芳基，其中Ra如权利要求1所述。
4.如权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R3相同或不同，各自独立地选自氢、卤素、羟基、Ra取代或未取代C1-C8烷基，其中Ra如权利要求1所述。
5.如权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物选自表1所列化合物。
表1
6.一种式I所示化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，所述方法选自下组：
方法一，包括步骤：
a-1)在叠氮化试剂存在下，式1化合物进行反应，得到式2化合物；
a-2)式2化合物进行重排反应，得到式3化合物；
a-3)式3化合物与式4化合物进行反应，得到式I化合物；
其中，A、R1、R2、R3、m如权利要求1所限定；
方法二、包括步骤：
b)在微波存在下，在偶氮化试剂存在下，式1化合物与式4化合物反应得到式I化合物；
其中，A、R1、R2、R3、m、n如权利要求1所限定。
7.一种药物组合物，其特征在于，包含：
(i)一种或多种治疗有效量的权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐；和
(ii)药学上可接受的载体。
8.一种权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐或权利要求7所述的药物组合物的用途，其特征在于，用于制备一制剂，所述制剂用于预防和/或治疗与干扰素基因刺激蛋白相关的疾病，其中所述与干扰素基因刺激蛋白相关的疾病选自下组：Singleton-Merten综合征(SMS)、Aicardi-Goutières综合征(AGS)、系统性红斑狼疮(SLE)、家族性冻疮性红斑狼疮(FCL)、视网膜血管病与脑白质营养不良(RVCL)、STING相关的婴儿期发病血管病变(SAVI)、银屑病、硬皮病、脑卒中、心肌梗死、脑外伤、动脉粥样硬化相关血管疾病、心血管疾病、糖尿病及其并发症、帕金森病、亨廷顿病、家族性肌萎缩侧索硬化症、神经退行性疾病、小肠吸收不良综合征、肠易激综合征、斯耶格伦氏综合征、多发性硬化、克罗恩病、非酒精性脂肪性肝炎、类风湿性关节炎、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、自身免疫性结肠炎、化脓性汗腺炎、葡萄膜炎、粘膜炎等炎症性疾病和自身免疫性疾病。
9.一种干扰素基因刺激蛋白抑制剂，其特征在于，所述抑制剂包括一种或多种权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐。
10.一种预防和/或治疗与干扰素基因刺激蛋白相关的疾病的方法，其特征在于，包括步骤：将治疗有效量的一种或多种权利要求1所述的化合物、或其异构体、前药、溶剂合物、水合物或其药学上可接受的盐或权利要求7所述的药物组合物施用于所需患者。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110967007.0A CN115710255A (zh) | 2021-08-23 | 2021-08-23 | 一类含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110967007.0A CN115710255A (zh) | 2021-08-23 | 2021-08-23 | 一类含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115710255A true CN115710255A (zh) | 2023-02-24 |
Family
ID=85230255
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110967007.0A Pending CN115710255A (zh) | 2021-08-23 | 2021-08-23 | 一类含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115710255A (zh) |
-
2021
- 2021-08-23 CN CN202110967007.0A patent/CN115710255A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3842433B1 (en) | Pyridone-pyrimidine derivative acting as krasg12c mutein inhibitor | |
| KR101797046B1 (ko) | 중수소화된 페닐 아미노 피리미딘 화합물 및 이 화합물을 함유하는 약물 조성물 | |
| CN111393404B (zh) | 一类苯并噻吩类化合物及其药物组合物及应用 | |
| Hafez et al. | Synthesis, biological and medicinal significance of S-glycosido-thieno [2, 3-d]-pyrimidines as new anti-inflammatory and analgesic agents | |
| CN101225070B (zh) | 用于抗肿瘤的药物 | |
| CN112125911B (zh) | Cdk9抑制剂及其制备方法与应用 | |
| EP4032890A1 (en) | Heterocyclic amide compound, pharmaceutically acceptable salt thereof, and preparation method therefor and use thereof | |
| EP3418277B1 (en) | Substituted amino six-membered nitric heterocyclic ring compound and preparation and use thereof | |
| CN113416199A (zh) | 一种石蒜碱β-芳基丙烯酸酯衍生物及其制备方法和用途 | |
| EP2832726B1 (en) | (2-heteroarylamino)succinic acid derivative | |
| CN115710255A (zh) | 一类含有苯并杂环取代的脲类衍生物及其制备和用途 | |
| JP7329052B2 (ja) | フッ素含有置換ベンゾチオフェン化合物ならびにその医薬組成物および応用 | |
| CN115710253B (zh) | 一类含有氨基苯并咪唑类衍生物及其制备和用途 | |
| CN111689975B (zh) | 一类异喹啉衍生物及其制备和用途 | |
| CN106946974B (zh) | 一类含吡唑杂环的熊果酰胺衍生物及其合成与应用 | |
| CN112920241B (zh) | 一种苯并咪唑衍生物bi308及其制备方法和应用 | |
| CN112812145B (zh) | 一种苯并咪唑衍生物bi293及其制备方法和应用 | |
| CN112375112B (zh) | 一种苯并咪唑衍生物bi361及其制备方法和应用 | |
| CN112358517B (zh) | 一种苯并咪唑衍生物bi305及其制备方法和应用 | |
| CN112321612A (zh) | 一种噻喹啉衍生物类化合物及在非小细胞肺癌治疗中的应用 | |
| EP4249479A1 (en) | Glucoside derivative, and preparation method therefor and application thereof | |
| CN115583945A (zh) | 二并杂环化合物及其作为atr抑制剂的用途 | |
| CN117800979A (zh) | 一类四氢苯并呋喃[2,3-c]吡啶类激酶抑制剂及其制备方法及用途 | |
| KR20220164216A (ko) | 신규한 에르고스텐올 유도체 및 이의 용도 | |
| CN114933601A (zh) | 汉防己甲素衍生物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |