CN115702638A - 一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液 - Google Patents

一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液 Download PDF

Info

Publication number
CN115702638A
CN115702638A CN202110932618.1A CN202110932618A CN115702638A CN 115702638 A CN115702638 A CN 115702638A CN 202110932618 A CN202110932618 A CN 202110932618A CN 115702638 A CN115702638 A CN 115702638A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cell
adipose
mesenchymal stem
cells
preservation solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202110932618.1A
Other languages
English (en)
Inventor
王飞
赵荻骏
叶青
徐栋
张露亿
吴军峰
余舒倩
张丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wuxi Cellular Biopharmaceutical Group Ltd
Original Assignee
Wuxi Cellular Biopharmaceutical Group Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wuxi Cellular Biopharmaceutical Group Ltd filed Critical Wuxi Cellular Biopharmaceutical Group Ltd
Priority to CN202110932618.1A priority Critical patent/CN115702638A/zh
Priority to PCT/CN2022/111667 priority patent/WO2023016510A1/zh
Publication of CN115702638A publication Critical patent/CN115702638A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts

Abstract

本发明公开了一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液，包含复方电解质注射液、葡萄糖氯化钠注射液、维生素和氨基酸。本发明的保存液，能够用于低温下保存脂肪间充质干细胞，有效保持脂肪间充质干细胞的活率，满足临床需求。

Description

一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体地，涉及一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液。
背景技术
脂肪间充质干细胞(简称MSCs)是从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。有以下优点：取材相对容易、量大、免疫原性低，以及容易过伦理。是目前备受关注可在体外培养扩增一类具有多向分化潜能的成体干细胞，可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞以及肌肉细胞等多种组织细胞。
细胞治疗需要大量细胞才能满足临床需求，所以在生产中要建大量细胞库用以冻存，生产按照临床需求用细胞保存液复苏、洗涤制备终产品，并在2-8℃冷链运输至运输中心。
冻存后的细胞相对于新鲜细胞来说，脆弱易破碎，而复苏细胞至终产品期间步骤多，时间长，若缺合适的细胞保存液难以确保MSCs的活率，从而影响产品质量和细胞治疗效果。为确保MSCs临床效果，具有较高的细胞活率、良好的生存能力亟需在本领域开发一种能够有效在低温保存脂肪间充质干细胞的保存液。
发明内容
本发明的目的在于一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液。
本发明的第一方面，提供一种细胞保存液，包含：
复方电解质注射液；
葡萄糖氯化钠注射液；
维生素；
氨基酸。
在另一优选例中，所述维生素选自维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K中的一种或两种以上的组合。
在另一优选例中，所述氨基酸选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸中的一种或两种以上的组合。
在另一优选例中，所述维生素为水溶性维生素，每250ml细胞保存液中，含1/48～1/24支水溶性维生素。
在另一优选例中，每支水溶性维生素包含：硝酸硫胺2-5mg，核黄素磷酸钠4-6mg，烟酰胺30-50mg，盐酸吡多辛4-6mg，泛酸钠15-18mg，维生素c钠100-135mg，生物素50-80ug，叶酸0.2-0.6mg，维生素B12 3-8ug。
在另一优选例中，每支水溶性维生素包含：硝酸硫胺3.1mg，核黄素磷酸钠4.9mg，烟酰胺40mg，盐酸吡多辛4.9mg，泛酸钠16.5mg，维生素c钠113mg，生物素60ug，叶酸0.4mg，维生素B12 5.0ug。
本发明中，水溶性维生素符合卫生部药品标准(二部)第五册第44页“注射用水溶性维生素”的标准要求。
在另一优选例中，所述的细胞保存液中，所述氨基酸的体积占所述保存液总体积的0.2％-3％，较佳为0.2％-2.5％。
在另一优选例中，每250ml氨基酸包含：丙氨酸2-5g、精氨酸1-4g、天冬氨酸0.4-0.8g、胱氨酸0.01-0.08g、谷氨酸0.8-1.5g、甘氨酸1-2g、组氨酸0.8-1.5g、亮氨酸1-2g、异亮氨酸0.8-1.5g、甲硫氨酸0.8-1.5g、苯丙氨酸1-2g。
在另一优选例中，每250ml氨基酸包含：丙氨酸3.05g、精氨酸2.10g、天冬氨酸0.63g、胱氨酸0.05g、谷氨酸1.05g、甘氨酸1.48g、组氨酸1.2g、亮氨酸1.48g、异亮氨酸1.05g、甲硫氨酸1.05g、苯丙氨酸1.48g。
在另一优选例中，每1000ml复方电解质注射液中包含：氯化钠4-6g、葡萄糖酸钠4-6g、醋酸钠3-5g、氯化钾0.2-0.5g、氯化镁0.2-0.5g。
在另一优选例中，每1000ml复方电解质注射液中包含：氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g、氯化镁0.30g。
在另一优选例中，复方电解质占保存液的体积比为80％～98％(V/V)，较佳为85％～96％(V/V)。
在另一优选例中，每100ml葡萄糖氯化钠注射液中含4-6g葡萄糖，含0.85-0.95g氯化钠。
在另一优选例中，所述葡萄糖氯化钠注射液的体积占所述保存液总体积的1％-15％。
在另一优选例中，所述葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖含量5％，氯化钠含量0.9％。
在另一优选例中，所述葡萄糖氯化钠注射液的体积占所述保存液总体积的2％-14％，较佳为3％-12％。
本发明的第二方面，提供一种脂肪间充质干细胞混合物，所述脂肪间充质干细胞混合物包含脂肪间充质干细胞和第一方面所述的保存液。
在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞为复苏后的脂肪间充质干细胞。
在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞与保存液的比例为：1～5×107个细胞：1-3mL保存液。
在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞中，占总细胞数量95％以上的细胞具有表面抗原CD90，
占总细胞数量95％以上的细胞具有表面抗原CD73；
占总细胞数量95％以上的细胞具有表面抗原CD105；
具有表面抗原HLA-DR的细胞占总细胞数量的0-0.5％；
具有表面抗原CD45的细胞占总细胞数量的0-5％；和/或
具有表面抗原CD14的细胞占总细胞数量的0-5％。
本发明的第三方面，提供一种细胞低温保存方法，所述方法包括步骤：将细胞悬浮于第一方面所述的细胞保存液中，然后在低温下进行保存。
在另一优选例中，所述低温是指2-8℃。
在另一优选例中，所述细胞为脂肪间充质干细胞。
在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞为复苏后的脂肪间充质干细胞。
本发明的第四方面，提供一种脂肪间充质干细胞库，所述脂肪间充质干细胞库包含第二方面所述的脂肪间充质干细胞混合物。
本发明的第五方面，提供第一方面所述的保存液的用途，用于保存脂肪间充质干细胞，或用于建立脂肪间充质干细胞库，或用于保持脂肪间充质干细胞的活率，或用于保持脂肪间充质干细胞表面标记物。
在另一优选例中，所述保存是指低温保存，其中低温是指2-8℃。
在另一优选例中，所述脂肪间充质干细胞为复苏后的脂肪间充质干细胞。
本发明提供的用于保存脂肪间充质干细胞的保存液，复方电解质加入氨基酸、维生素及葡萄糖氯化钠，于2-8℃低温条件下保存细胞72h后，细胞活率达到70％以上，满足临床需求。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。限于篇幅，在此不再一一赘述。
附图说明
图1为0h细胞形态图，其中A：保存在CE01KS中0h的细胞接种后第1天的细胞形态；B：保存在CE01KS中0h的细胞接种后第3天的细胞形态C：保存在生理盐水中0h的细胞在接种后第1天的细胞形态；D：保存在生理盐水中0h的细胞在接种后第3天的细胞形态。
图2为24h细胞形态图，其中E：保存在CE01KS放置冰箱24h的细胞在接种后第1天的细胞形态；F：保存在CE01KS放置冰箱24h的细胞在接种后第4天的细胞形态；G：保存在生理盐水中放置冰箱24h的细胞在接种后第1天的细胞形态；H：保存在生理盐水放置冰箱24h的细胞在接种后第4天的细胞形态。
图3为48h细胞形态图，其中I：保存在CE01KS放置冰箱48h的细胞在接种后第1天的细胞形态；K：保存在CE01KS放置冰箱48h的细胞在接种后第6天的细胞形态；J：保存在生理盐水中放置冰箱48h的细胞在接种后第1天的细胞形态；L：保存在生理盐水放置冰箱48h的细胞在接种后第6天的细胞形态。
图4为0h、冰箱放置24h、48h、72h后的细胞凋亡流式图。
图5为0h、冰箱放置24h、48h后的细胞表面标记物的变化。
图6为0h的细胞表面标记物的流式图。
图7为冰箱放置24h后的细胞表面标记物的流式图。
图8为冰箱放置48h后的细胞表面标记物的流式图。
具体实施方式
本发明人基于长期而深入的研究，研发出一种用于保存脂肪间充质干细胞尤其是复苏后的脂肪间充质干细胞的保存液，复方电解质加入氨基酸、维生素及葡萄糖氯化钠作为保存液，于2-8℃低温条件下保存细胞72h后，细胞活率达到70％以上。在此基础上，完成了本发明。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例
保存液的配制
采用表1所示的组分和量配制保存液，标记为CE01KS。
表1 CE01KS保存液配方(按总体积250ml配制)
Figure BDA0003211606840000061
每1000ml复方电解质注射液中包含：氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g、氯化镁0.30g。
每100ml葡萄糖氯化钠注射液中含5g葡萄糖，含0.9g氯化钠。
250ml氨基酸包含：丙氨酸3.05g、精氨酸2.10g、天冬氨酸0.63g、胱氨酸0.05g、谷氨酸1.05g、甘氨酸1.48g、组氨酸1.2g、亮氨酸1.48g、异亮氨酸1.05g、甲硫氨酸1.05g、苯丙氨酸1.48g。
每支水溶性维生素包含：硝酸硫胺3.1mg，核黄素磷酸钠4.9mg，烟酰胺40mg，盐酸吡多辛4.9mg，泛酸钠16.5mg，维生素c钠113mg，生物素60ug，叶酸0.4mg，维生素B12 5.0ug。
CE01KS与生理盐水细胞悬液的制备
1)细胞复苏：CEO1KS与生理盐水2组各取30ml提前于37℃水浴锅中预热10min后，各取1支冻存脂肪间充质干细胞进行细胞复苏，取300ul计数。
2)细胞离心：放置于已预冷的离心机中4℃，800～1000rpm,离心5～10分钟；
3)细胞洗涤：弃去上清，重悬细胞，加入30ml上述2种液体用于洗涤，按照上述细胞离心方式离心，再次弃去上层细胞上清，取300ul计数。
4)过滤：重悬底层沉淀，加上述2种液体至30ml，100um滤器过滤去除大团的细胞块，取300ul计数。
5)NC200细胞计数仪计数：完全按照细胞计数仪操作说明书操作，取50ul细胞悬液与配套solution 1 1:1混合，取Via1上样，选取“Viability and Cell Count-AggregatedCells Assay”，再取一块新Via1吸取未加solution的原液，上样，读取细胞数。
6)细胞悬液定容：细胞过滤后，按照步骤2离心后，按照1.3*107/ml重悬。
7)活细胞、坏死及凋亡占比以及细胞活率、细胞表面标记物、细胞形态
细胞凋亡检测：将细胞发放装瓶，该时间点定为0h，放置于2-8℃冰箱内，分别于0h、24h、48h，各组取60ul细胞，用1％HSA DPBS洗涤2次后，每组流式管中细胞加入5ul FITCAnnexin V，在室温闭光15min，加入5ul的Propidium Iodide在美天旎MACSQuant Analyzer10检测。
细胞表面marker检测：分别于0h、24h、48h取60μl细胞，用1％HSA-DPBS洗涤液洗涤1次后，分装成3份，再次洗涤1次后，第1管加入HLA-DR-PE/CD14-FITC/CD45-APC各1ul，第2管加CD73-PE/CD90-FITC/CD105-APC各1ul，第3管加PE/FITC/APC ios各1ul，4℃孵育40分钟，洗涤后加入7AAD后孵育10分钟，在美天旎MACSQuant Analyzer 10检测。
分别于0h、24h、48h取6*105细胞于6ml CBMG培养基中，接种3孔，每孔2ml，分别在接种再培养后每天拍照。
结果
经保存的细胞的活率结果如表2所示，细胞形态如图1-3所示。
表2：保存细胞的细胞活率变化
Figure BDA0003211606840000071
从表中看出细胞活率变化情况：0h细胞活率达90％以上，放置72h后，CE01KS保存的细胞的活率仍然维持在70％以上，而生理盐水保存的细胞活率低于35％。
图1为0h细胞形态图，其中A：保存在CE01KS中0h的细胞接种后第1天的细胞形态；B：保存在CE01KS中0h的细胞接种后第3天的细胞形态C：保存在生理盐水中0h的细胞在接种后第1天的细胞形态；D：保存在生理盐水中0h的细胞在接种后第3天的细胞形态。
图2为24h细胞形态图，其中E：保存在CE01KS放置冰箱24h的细胞在接种后第1天的细胞形态；F：保存在CE01KS放置冰箱24h的细胞在接种后第4天的细胞形态；G：保存在生理盐水中放置冰箱24h的细胞在接种后第1天的细胞形态；H：保存在生理盐水放置冰箱24h的细胞在接种后第4天的细胞形态。
图3为48h细胞形态图，其中I：保存在CE01KS放置冰箱48h的细胞在接种后第1天的细胞形态；K：保存在CE01KS放置冰箱48h的细胞在接种后第6天的细胞形态；J：保存在生理盐水中放置冰箱48h的细胞在接种后第1天的细胞形态；L：保存在生理盐水放置冰箱48h的细胞在接种后第6天的细胞形态。
表3：冰箱放置0h、24h、48h、72h后的细胞凋亡情况
Figure BDA0003211606840000081
细胞凋亡结果如表3所示，表中看出细胞在发放0h、放置24h、48h及72h后的细胞凋亡情况。在发放0h到放置72h，活细胞会随着细胞放置时间延长而降低，坏死细胞随之增加，但是保存在CE01KS中细胞活细胞降低幅度较慢，能较好维持细胞活率，而生理盐水细胞活细胞降低较快，仅维持24h细胞活率达70％，具体细胞凋亡如图4所示。
表4：冰箱放置0h、24h、48h后的细胞表面标记物的变化
Figure BDA0003211606840000091
表4中示出放置在冰箱不同时间点检测表面标记物结果，可以看出，阳性>95％，阴性<2％。
实验结论
保持较好的细胞活率及细胞功能是临床细胞发挥细胞效能最大的挑战。本实验复方电解质加入氨基酸、维生素及葡萄糖氯化钠，按照细胞悬液制备标准操作规程发放细胞，放置在2-8℃冰箱保存细胞，分别在0h、24h、48h、72h取样，比较细胞在不同时间点细胞活率稳定性、细胞凋亡变化趋势、细胞表面标记物、细胞形态及细胞增殖能力，获得以下结果：
细胞保存在CE01KS与生理盐水细胞形态差异不大，但是对于细胞疗法，FDA制定了细胞最低生存能力标准(通常设置为70％)，本发明中采用CE01KS，在放置72h后细胞活率大于70％，且细胞凋亡也很缓慢(而生理盐水仅能维持24h)，且细胞表面标记物及在发放后变化不大，各时间点阳性均在95％以上，阴性低于2％。
综合所述：相对于生理盐水，CE01KS较好保存细胞。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种细胞保存液，其特征在于，包含：
复方电解质注射液；
葡萄糖氯化钠注射液；
维生素；
氨基酸。
2.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述维生素为水溶性维生素，每250ml细胞保存液中，含1/48～1/24支水溶性维生素。
3.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述的细胞保存液中，所述氨基酸的体积占所述保存液总体积的0.2％-3％。
4.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，每1000ml复方电解质注射液中包含：氯化钠4-6g、葡萄糖酸钠4-6g、醋酸钠3-5g、氯化钾0.2-0.5g、氯化镁0.2-0.5g。
5.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，每100ml葡萄糖氯化钠注射液中含4-6g葡萄糖，含0.85-0.95g氯化钠。
6.一种脂肪间充质干细胞混合物，其特征在于，所述脂肪间充质干细胞混合物包含脂肪间充质干细胞和权利要求1-5任一项所述的保存液。
7.如权利要求6所述的脂肪间充质干细胞混合物，其特征在于，所述脂肪间充质干细胞与保存液的比例为：1～5×107个细胞：1-3mL保存液。
8.一种细胞低温保存方法，其特征在于，所述方法包括步骤：将细胞悬浮于如权利要求1所述的细胞保存液中，然后在低温下进行保存。
9.一种脂肪间充质干细胞库，其特征在于，所述脂肪间充质干细胞库包含权利要求6所述的脂肪间充质干细胞混合物。
10.如权利要求1-5任一项所述的保存液的用途，其特征在于，用于保存脂肪间充质干细胞，或用于建立脂肪间充质干细胞库，或用于保持脂肪间充质干细胞的活率，或用于保持脂肪间充质干细胞表面标记物。
CN202110932618.1A 2021-08-13 2021-08-13 一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液 Pending CN115702638A (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110932618.1A CN115702638A (zh) 2021-08-13 2021-08-13 一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液
PCT/CN2022/111667 WO2023016510A1 (zh) 2021-08-13 2022-08-11 一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110932618.1A CN115702638A (zh) 2021-08-13 2021-08-13 一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115702638A true CN115702638A (zh) 2023-02-17

Family

ID=85180263

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110932618.1A Pending CN115702638A (zh) 2021-08-13 2021-08-13 一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN115702638A (zh)
WO (1) WO2023016510A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116077448B (zh) * 2023-04-03 2023-07-04 北京细胞治疗集团有限公司 人间充质干细胞注射液及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104542578A (zh) * 2015-02-05 2015-04-29 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 一种细胞保存液及其制备方法、应用
CN107926933A (zh) * 2018-01-14 2018-04-20 上海赛立维生物科技有限公司 一种细胞保存液
CN108990966A (zh) * 2018-08-24 2018-12-14 上海中溢精准医疗科技有限公司 一种脐带间充质干细胞运输保护液及其保护方法
CN111869654A (zh) * 2020-06-24 2020-11-03 暨赛再生医学科技有限公司 一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液及其制备方法和应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103060264B (zh) * 2012-12-20 2015-01-21 上海市第十人民医院 一种干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法
MX2015011801A (es) * 2015-09-07 2017-03-06 Alvaro Galue Eduardo Proceso de obtención de un compuesto de aspersión de celulas endoteliales microvasculares de piel y celulas madre mesenquimales y su método de aplicación para la regeneración tisular.
CN106922648A (zh) * 2017-02-22 2017-07-07 海南新生命干细胞医疗有限公司 一种间充质干细胞低温保存液及其制备方法
CN109329270A (zh) * 2018-11-19 2019-02-15 成都清科生物科技有限公司 一种静脉回输用间充质干细胞保存液及其制备方法
CN109453202A (zh) * 2018-12-21 2019-03-12 广州益养生物科技有限公司 一种可直接注射应用的细胞制剂及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104542578A (zh) * 2015-02-05 2015-04-29 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 一种细胞保存液及其制备方法、应用
CN107926933A (zh) * 2018-01-14 2018-04-20 上海赛立维生物科技有限公司 一种细胞保存液
CN108990966A (zh) * 2018-08-24 2018-12-14 上海中溢精准医疗科技有限公司 一种脐带间充质干细胞运输保护液及其保护方法
CN111869654A (zh) * 2020-06-24 2020-11-03 暨赛再生医学科技有限公司 一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023016510A1 (zh) 2023-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ponnaiyan et al. Comparison of phenotype and differentiation marker gene expression profiles in human dental pulp and bone marrow mesenchymal stem cells
Lawson et al. Microvesicles and exosomes: new players in metabolic and cardiovascular disease
Bustos et al. Activation of human mesenchymal stem cells impacts their therapeutic abilities in lung injury by increasing interleukin (IL)-10 and IL-1RN levels
EP3560334A1 (en) Cell freezing medium for clinical use
CN108651442A (zh) 一种间充质干细胞4℃储存液
Choudhery et al. Cryopreservation of whole adipose tissue for future use in regenerative medicine
KR102639313B1 (ko) 미분화 세포가 제거된 분화 유도 세포집단, 이의 용도 및 이의 제조 방법
CN102334472B (zh) 一种脐带保存液及其制备方法
CN102948413B (zh) 一种肝干细胞保存液及其应用
Zhang et al. Gene therapy of ovarian cancer using IL-21-secreting human umbilical cord mesenchymal stem cells in nude mice
CN103583511A (zh) 一种间充质干细胞冻存液及注射液
CN113016782B (zh) 一种细胞保存液及其制备方法和应用
S Choudhery et al. Utility of cryopreserved umbilical cord tissue for regenerative medicine
CN111248191A (zh) 一种常温细胞保存液和注射用细胞制剂
Li et al. Isogenic mesenchymal stem cells transplantation improves a rat model of chronic aristolochic acid nephropathy via upregulation of hepatic growth factor and downregulation of transforming growth factor β1
CN106212443A (zh) 临床级细胞保护液及其制备方法和应用
JP6800757B2 (ja) 免疫疾患の治療
CN115702638A (zh) 一种用于低温保存脂肪间充质干细胞的保存液
CN107372464B (zh) 一种维持间充质干细胞活性的运输保存液与制备方法
JP2018531269A (ja) 脂肪由来幹細胞に基づく幹細胞治療
CN105454220B (zh) 一种胎盘保存方法、胎盘保存液及其制备方法
Polet et al. Malaria: extracellular amino acid requirements for in vitro growth of erythrocytic forms of Plasmodium knowlesi
CN108719275A (zh) 一种用于体外保存脂肪颗粒的保存液及其使用方法
CN112056309B (zh) 一种细胞保存液及其在保存脐血nk细胞中的应用
CN111235107B (zh) 一种用于免疫细胞培养的添加剂、培养基及免疫细胞的培养方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination