CN115697406A - 抗体配制品及其用途 - Google Patents

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Abstract

本文提供了抗体配制品以及制备和使用这些配制品的方法。该配制品可用于静脉内施用。在一些实施例中，该配制品用于皮下施用。在一些实施例中，该配制品包含抗C5抗体，例如依库珠单抗。

Description

抗体配制品及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求2020年5月29日提交的美国临时申请号63/031,634的权益，将其通过引用以其全部内容并入本文。
序列表
本申请连同电子格式的序列表一起提交。序列表以标题为A-2590-WO-PCT_Final_SeqListing_05282021的文件提供，该文件创建于2021年5月28日，大小为21.3KB。电子格式的序列表中的信息通过引用以其全文并入本文。
技术领域
本公开涉及抗体的配制品以及制备和使用此类配制品的方法。
背景技术
补体系统包含一系列蛋白质，它们作为免疫应答的一部分以级联方式彼此相互作用，与抗体免疫应答一起发挥互补作用，在宿主防御微生物和调节炎症反应中具有重要作用。补体通过三种途径被激活：经典途径、替代途径和凝集素途径，其中每个途径最初涉及不同的蛋白质，但所有途径都在补体成分C3的裂解上趋同。C3被裂解成C3a，其促进炎症并募集循环免疫细胞，而C3b与其他成分形成复合物以引发补体系统的后续成分之间的级联反应。C3b与其他补体成分复合形成C5转化酶复合物。补体成分C5被C5转化酶复合物裂解成C5a和C5b。C5a例如通过充当炎性细胞的化学引诱物来促进炎症。C5b保持附着于细胞表面，在细胞表面它触发膜攻击复合物(MAC)的形成。MAC是一种亲水性孔，其跨越膜并促进流体自由流入和流出细胞，从而破坏细胞。
补体系统失调可导致不同的病理状态。细胞表达保护它们免受补体级联效应影响的蛋白质，以确保补体系统的靶标限于致病细胞。许多补体相关障碍和疾病与补体级联对自身细胞的异常破坏有关。这种障碍的实例是阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)，PNH可由耗尽一种或多种细胞保护性蛋白的基因突变引起，这些蛋白防止红细胞血小板和其他血细胞被补体介导的攻击破坏，并且可表征为溶血性贫血(由于细胞裂解导致RBC数量减少)、血红蛋白尿(由于RBC裂解导致尿液中的血红蛋白)和/或血红蛋白血症(由于RBC裂解导致血流中的游离血红蛋白)。
可用于治疗补体相关障碍的治疗剂为可抑制C5裂解的药剂，诸如结合补体C5的抗体。这种治疗剂的一个实例是依库珠单抗(eculizumab)，其以
Figure BDA0003969624020000021
(亚力兄制药，康涅狄格州纽黑文(Alexion Pharmaceuticals,Inc.,New Haven,CT))销售。另一个实例是瑞利珠单抗(ravulizumab)，其以
Figure BDA0003969624020000022
(亚力兄制药，康涅狄格州纽黑文(AlexionPharmaceuticals,Inc.,New Haven,CT))销售。
本公开提供了满足对稳定的、具有较少聚集和/或其他优点的抗体配制品的需求的配制品。
发明内容
本文提供了抗体配制品以及制备和使用此类配制品的方法。配制品可以是药物配制品或药物组合物。在一些实施例中，抗体是抗C5抗体。
在一个实施例中，配制品包含缓冲剂、稳定剂和螯合剂。在一些实施例中，缓冲剂包含乙酸盐。乙酸盐的浓度可为0.1mM至50mM，诸如0.5mM至50mM、1mM至50mM、2.5mM至40Mm、5mM至30mM或10mM至20mM。在一个实施例中，乙酸盐浓度为约10mM。在一些实施例中，配制品的稳定剂是多元醇，例如山梨糖醇。在一个实施例中，多元醇如山梨糖醇的浓度为约5％(w/v)。在一个实施例中，配制品中螯合剂的浓度在0.01mM和0.05mM之间，例如约0.05mM。在一个实施例中，螯合剂是乙二胺四乙酸(EDTA)。在一些实施例中，表面活性剂的浓度在0.001％和0.1％(w/v)之间，例如0.01％(w/v)。在一些实施例中，表面活性剂是聚山梨醇酯80。配制品可具有在乙酸盐的缓冲能力内的pH。在一个实施例中，pH在4.5和5.8之间。在一个实施例中，pH为约5.2。
在一些实施例中，抗体是依库珠单抗或瑞利珠单抗。在一些实施例中，抗体可包含CDRH1-3，其中CDRH1-3分别具有SEQ ID NO:1-3或4、5和3的氨基酸序列。在一个实施例中，抗体包含CDRL1-3，其中CDRL1-3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:12-14。在一些实施例中，抗体包含SEQ ID NO:6或7的重链可变区。在一些实施例中，抗体包含SEQ ID NO:15的轻链可变区。在一些实施例中，抗体包含具有SEQ ID NO:8或9的氨基酸序列的重链恒定区。在一些实施例中，抗体包含具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链恒定区。在一些实施例中，抗体包含具有SEQ ID NO:10或11的氨基酸序列的重链。在一些实施例中，抗体包含具有SEQID NO:17的氨基酸序列的轻链。在另一个实施例中，抗体包含含有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的轻链。在另一个实施例中，抗体包含含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的轻链。在一些实施例中，抗体的浓度为约10mg/ml。
附图说明
图1显示了通过SE-UHPLC在25℃下对在不具有可检测的痕量金属的山梨糖醇配制品、具有可检测的痕量金属的山梨糖醇配制品(来自两个不同批次，批次A和批次B的依库珠单抗)和PBS配制品中的10mg/ml依库珠单抗持续6个月测量的高分子量物质的百分比。
图2显示了在50℃下，依库珠单抗在PBS配制品、不含EDTA的山梨糖醇配制品和含EDTA的山梨糖醇配制品中的相对效力(％)。
图3显示了在具有不同水平的EDTA的山梨糖醇配制品中在40℃持续13周通过HIC-HPLC预峰测量的依库珠单抗的氧化形式的百分比。
图4显示了在具有不同水平的EDTA的山梨糖醇配制品中在40℃持续13周通过SE-UHPLC测量的高分子量物质的百分比。
图5显示了在50℃孵育14天的强制降解条件(FD)下，使用非SUS生产的依库珠单抗药物产品(DP)(GMP DP1、GMP DP2、GMP DP3)和使用SUS生产的依库珠单抗DP(SUS DP)通过SE-UHPLC测量的高分子量物质的百分比。
图6A显示了在50℃孵育2周的强制降解条件(FD)下，使用非SUS生产的依库珠单抗药物产品(DP)(GMP 1DP、GMP 2DP)和使用SUS生产的依库珠单抗DP(SUS DP)的W107的氧化百分比。
图6B显示了在50℃孵育2周的强制降解条件(FD)下，使用非SUS生产的依库珠单抗药物产品(DP)(GMP 1DP、GMP 2DP)和使用SUS生产的依库珠单抗DP(SUS DP)的相对效力(％)。
图7显示了在50℃孵育2周的强制降解条件(FD)下，使用非SUS生产的依库珠单抗药物产品(DP)(GMP 2DP)和使用SUS生产的依库珠单抗DP(SUS DP)的通过HIC-HPLC测量的主峰百分比。
图8显示了在50℃孵育2周的强制降解条件(FD)下，使用非SUS生产的依库珠单抗药物产品(DP)(GMP 2DP)和使用SUS生产的依库珠单抗DP(SUS DP)的通过HIC-HPLC测量的预峰百分比。
具体实施方式
本公开提供了抗体配制品以及制备和使用这些配制品的方法。在一个实施例中，抗体是特异性结合补体蛋白C5的抗体。抗体可以是抗C5抗体。在一个实施例中，抗体是依库珠单抗。在另一个实施例中，抗体是瑞利珠单抗。
在一个实施例中，抗体包含重链CDR，其具有CDRH1的氨基酸序列GYIFSNYWIQ(SEQID NO:1)、CDRH2的氨基酸序列EILPGSGSTEYTENFKD(SEQ ID NO:2)和CDRH3的氨基酸序列YFFGSSPNWYFDV(SEQ ID NO:3)。在一些实施例中，抗体包含重链CDR，其具有CDRH1的氨基酸序列GHIFSNYWIQ(SEQ ID NO:4)、CDRH2的氨基酸序列EILPGSGHTEYTENFKD(SEQ ID NO:5)和CDRH3的氨基酸序列SEQ ID NO:3。
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的重链可变结构域：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWMGEILPGSGSTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARYFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:6)
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的重链可变区：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGHIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWMGEILPGSGHTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARYFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:7)
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的重链恒定区：ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQ ID NO:8)
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的重链恒定区：ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSLGK(SEQ ID NO:9)
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的重链：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWMGEILPGSGSTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARYFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK(SEQ ID NO:10)
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的重链：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGHIFSNYWIQWVRQAPGQGLEWMGEILPGSGHTEYTENFKDRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARYFFGSSPNWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVLHEALHSHYTQKSLSLSLGK(SEQ ID NO:11)
在一些实施例中，抗体包含轻链CDR，其具有CDRL1的氨基酸序列GASENIYGALN(SEQID NO:12)、CDRL2的氨基酸序列GATNLAD(SEQ ID NO:13)和CDRL2的氨基酸序列QNVLNTPLT(SEQ ID NO:14)。
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的轻链可变区：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCGASENIYGALNWYQQKPGKAPKLLIYGATNLADGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQNVLNTPLTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:15)
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的轻链恒定区：RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:16)
在一个实施例中，抗体包含具有以下氨基酸序列的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCGASENIYGALNWYQQKPGKAPKLLIYGATNLADGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQNVLNTPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:17)
在一个实施例中，抗体包含含有CDRH1-3的重链，其中CDRH1-3分别包含SEQ IDNO:1-3的氨基酸序列；和包含CDRL1-3的轻链，其中CDRL1-3分别包含SEQ ID NO:12-14的氨基酸序列。在另一个实施例中，抗体包含含有CDRH1-3的重链，其中CDRH1-3分别包含SEQ IDNO:4、5和3的氨基酸序列；和包含CDRL1-3的轻链，其中CDRL1-3分别包含SEQ ID NO:12-14的氨基酸序列。
在另一个实施例中，抗体包含重链，所述重链包含含有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的可变区；和轻链，所述轻链包含含有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的可变区。在另一个实施例中，抗体包含重链，所述重链包含含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的可变区；和轻链，所述轻链包含含有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的可变区。
在又另一个实施例中，抗体包含重链，所述重链包含分别包含SEQ ID NO:6和8的氨基酸序列的可变区和恒定区；和轻链，所述轻链包含分别包含SEQ ID NO:15和16的氨基酸序列的可变区和恒定区。在又另一个实施例中，抗体包含重链，所述重链包含分别包含SEQ ID NO:7和9的氨基酸序列的可变区和恒定区；和轻链，所述轻链包含分别包含SEQ IDNO:15和16的氨基酸序列的可变区和恒定区。
在另一个实施例中，抗体包含含有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链和含有SEQID NO:17的氨基酸序列的轻链。在另一个实施例中，抗体包含含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的轻链。
在一些实施例中，1至300mg/ml的抗C5抗体存在于本文公开的配制品中。在一些实施例中，本文所述的配制品包含1至50mg/ml、1至300mg/ml、1至250mg/ml、1至200mg/ml、1至100mg/ml的抗C5抗体。在一个实施例中，配制品包含10至50mg/ml的抗C5抗体。在一个实施例中，配制品包含小于300mg/ml、小于250mg/ml、小于200mg/ml、小于100mg/ml、小于50mg/ml、小于45mg/ml、小于40mg/ml、小于30mg/ml或小于25mg/ml的抗C5抗体。在一个实施例中，配制品包含约300mg/ml、约250mg/ml、约200mg/ml、约100mg/ml、约50mg/ml、约45mg/ml、约40mg/ml、约30mg/ml、约25mg/ml、约10mg/ml或约5mg/ml的抗C5抗体。在一个实施例中，配制品包含约10mg/ml的抗C5抗体。
在一些实施例中，配制品包含抗C5抗体(例如，约10mg/ml的包含具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链和SEQ ID NO:17的轻链序列的抗体)、缓冲剂(例如，包含10mM乙酸盐的缓冲剂)、螯合剂(例如，0.05mM EDTA)和任选地稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))和/或表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80)。在一些实施例中，配制品的pH为约5.2。
在一些实施例中，配制品包含缓冲剂，例如乙酸盐。在一个实施例中，乙酸盐或乙酸盐缓冲剂的浓度为0.1mM至50mM、0.5mM至50mM、1mM至50mM、1mM至40mM、2.5mM至40mM、1mM至30mM、1mM至20mM、1mM至10mM、1mM至5mM、5mM至30mM或10mM至20mM。在一个实施例中，乙酸盐或乙酸盐缓冲剂的浓度为约0.5mM、约1mM、约2.5mM、约5mM、约10mM、约20mM、约25mM、约30mM、约40mM或约50mM。在一个实施例中，乙酸盐或乙酸盐缓冲剂的浓度为10mM。
在一些实施例中，配制品的pH为4.5与5.8之间。在一些实施例中，配制品的pH为约4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7或5.8。在一个实施例中，配制品的pH为约5.2。
在一些实施例中，配制品包含稳定剂。在一个实施例中，稳定剂是多元醇或糖。在一些实施例中，稳定剂是蔗糖、山梨糖醇、甘油、海藻糖(例如，α,α-海藻糖或海藻糖二水合物)、甘露醇、右旋糖、右旋糖酐、葡萄糖或其任何组合。在一个实施例中，稳定剂是山梨糖醇。稳定剂的浓度可以为0至50％(w/v)的稳定剂。在一些实施例中，配制品包含0至25％(w/v)的稳定剂。在一些实施例中，配制品包含0至20％(w/v)、5％至50％(w/v)、10％至20％(w/v)、0至10％(w/v)、5％至10％(w/v)或2％至10％(w/v)的稳定剂。在一些实施例中，配制品包含约1.5％、约2％、约2.5％、约3％、约3.5％、约4％、约4.5％、约5％、约5.5％、约6％、约6.5％、约7％、约7.5％、约8％、约8.5％、约9％、约9.5％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％或约20％(w/v)的稳定剂，例如山梨糖醇。在一个实施例中，配制品包含约5％(w/v)的山梨糖醇。
在一个实施例中，配制品包含螯合剂。螯合剂可以是1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、1,4,7-三氮杂环壬烷、1-戊二酸-4,7乙酸(NODAGA)、1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、肼烟酸(HYNIC)、巯基乙酰基甘氨酰三甘氨酸(MAG3)、乙二胺四乙酸(EDTA)、三乙烯四胺(TETA)、亚氨基二乙酸、二乙烯三胺-N,N,N',N',N”-五乙酸(DTPA)和/或其组合。在一个实施例中，螯合剂是EDTA。螯合剂的浓度可以在0.01mM至0.10mM之间，例如约0.01mM、0.02mM、0.03mM、0.04mM、0.05mM、0.06mM、0.07mM、0.08mM、0.09mM或0.10mM。在一个实施例中，螯合剂如EDTA的浓度为约0.05mM。
在一个实施例中，配制品还包含表面活性剂。表面活性剂可以是聚氧乙二醇烷基醚、聚氧丙二醇烷基醚、葡糖苷烷基醚、聚氧乙二醇辛基苯酚醚、聚氧乙二醇烷基苯酚醚、甘油烷基酯、聚氧乙二醇脱水山梨糖醇烷基酯、脱水山梨糖醇烷基酯、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA、十二烷基二甲胺氧化物、泊洛沙姆、聚乙氧基化牛脂胺(POEA)或其组合。在一个实施例中，表面活性剂是聚山梨醇酯。在一个实施例中，表面活性剂是聚山梨醇酯20。在另一个实施例中，表面活性剂是聚山梨醇酯80。在又另一个实施例中，表面活性剂是泊洛沙姆，例如泊洛沙姆188。在一个实施例中，表面活性剂是
Figure BDA0003969624020000101
F-68。在一些实施例中，配制品包含0.001％至3％(w/v)、0.001至2％(w/v)、0.001％至1％(w/v)、0.001％至0.5％(w/v)或0.01％至0.1％(w/v)的表面活性剂。在一些实施例中，配制品包含约0.01％(w/v)的表面活性剂，例如聚山梨醇酯80。
在一些实施例中，配制品还包含一种或多种另外的赋形剂或药剂，例如防腐剂、缓冲剂、张度剂、抗氧化剂、稳定剂、非离子润湿剂或澄清剂和/或增粘剂。
在一些实施例中，本文公开的配制品用于静脉内注射或输注(IV)、皮下注射(SC)、腹膜内(IP)注射、眼内注射、关节内注射或肌内注射(IM)。
配制品可用于治疗或预防补体相关障碍，例如类风湿性关节炎(RA)；抗磷脂抗体综合征；狼疮性肾炎；缺血再灌注损伤；非典型溶血性尿毒综合征(aHUS)；典型或感染性溶血性尿毒综合征(tHUS)；致密沉积物病(DDD)；阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)；视神经脊髓炎(NMO)或视神经脊髓炎谱系障碍(NMOSD)；多灶性运动神经病(MMN)；多发性硬化(MS)；黄斑变性(例如，年龄相关性黄斑变性(AMD))；溶血、肝酶升高和低血小板(HELLP)综合征；血栓性血小板减少性紫癜(TTP)；自发性胎儿丢失；Pauci免疫性血管炎；大疱性表皮松解；复发性胎儿丢失；或创伤性脑损伤。在一些实施例中，补体相关障碍是补体相关血管病，例如糖尿病相关血管病、视网膜中央静脉闭塞、心血管病、心肌炎、脑血管病、外周血管病、肾血管病、肠系膜/肠血管病、移植和/或再植的血管再建、血管炎、过敏性紫癜性肾炎、系统性红斑狼疮相关血管炎、与类风湿性关节炎相关的血管炎、免疫复合性血管炎、高安氏病、扩张型心肌病、糖尿病性血管病、川崎病(动脉炎)、静脉气栓(VGE)和支架放置、冠状动脉旋磨术或经皮经腔冠状动脉成形术(PTCA)后的再狭窄。在一些实施例中，补体相关病为重症肌无力(MG)、冷凝集素病、皮肌炎、格雷夫斯病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病、格-巴综合征、德戈斯病(Degos'disease)、移植物排斥(例如移植排斥)、败血症、烧伤(例如严重烧伤)、全身性炎症反应败血症、败血性休克、脊髓损伤、肾小球肾炎、桥本甲状腺炎、I型糖尿病、牛皮癣、天疱疮、自身免疫性溶血性贫血(AIHA)、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、古德帕斯丘综合征(Goodpasture syndrome)、抗磷脂综合征(APS)或灾难性APS(CAPS)。在一些实施例中，本文所述的配制品可用于治疗血栓性微血管病(TMA)，例如与补体相关病相关的TMA的方法中。在一个实施例中，配制品用于治疗PNH、aHUS、全身性MG(gMG)或难治性gMG和/或NMOSD。
在一些实施例中，配制品是抗C5抗体的浓缩溶液，其可以被稀释到药学上可接受的稀释剂中，用于例如将抗体全身递送到受试者。在一个实施例中，配制品在300mg浓度为10mg/mL的抗C5抗体的单个单位小瓶中，并且可以稀释至5mg/mL的最终浓度。稀释剂可以是氯化钠溶液(例如0.45％或0.9％氯化钠)、右旋糖溶液(例如5％右旋糖水溶液)或林格氏溶液。
在一些实施例中，包含抗C5抗体与螯合剂(例如EDTA)的配制品比不含螯合剂的配制品具有更大的稳定性。例如，在特定pH(例如，约5.2)下，包含抗C5抗体(例如，10mg/mL的依库珠单抗)、缓冲剂(例如，10mM乙酸盐)、稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))、表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80(w/v))和螯合剂(例如，0.05mM EDTA)的配制品可以比不含EDTA的相同配制品(即，10mg/mL的依库珠单抗，10mM乙酸盐，5％山梨糖醇(w/v)，0.01％PS80，pH 5.2)或包含缓冲剂、张度剂和表面活性剂且无螯合剂(例如，10mM磷酸钠，150mM氯化钠，0.02％PS80，pH 7.0))的另一种配制品更稳定。
在一个实施例中，在给定时间段(例如，约1天、约2天、约3天、约4天、约5天、约6天、约7天、约8天、约9天、约10天、约11天、约12天、约13天、约14天或约15天；或约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周、约12周、约13周、约14周或约15周)后，包含抗C5抗体与螯合剂(例如，EDTA)的配制品比不含螯合剂的配制品具有更大的稳定性。在一个实施例中，在给定温度或应力条件下，例如在约50℃、40℃、约30℃、约25℃、约5℃、约-20℃或约-30℃下，包含抗C5抗体与螯合剂(例如EDTA)的配制品具有比不含螯合剂的配制品更大的稳定性。
在一个实施例中，在给定时间段和给定温度(例如，约1天、约2天、约3天、约4天、约5天、约6天、约7天、约8天、约9天、约10天、约11天、约12天、约13天、约14天或约15天；或约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周、约12周、约13周、约14周或约15周；在约50℃、40℃、约30℃、约25℃、约5℃、约-20℃或约-30℃下)后，包含抗C5抗体与螯合剂(例如EDTA)的配制品具有比不含螯合剂的配制品更大的稳定性。
配制品的稳定性可通过本领域已知的任何方法测定。在一个实施例中，配制品的稳定性通过色谱法测定，例如尺寸排阻色谱法，例如尺寸排阻高效液相色谱法(SE-HPLC)或尺寸排阻超高效液相色谱法(SE-UHPLC)或疏水高效液相色谱法(HIC-HPLC)，其中与在应力过程和/或储存条件之前和之后其第一峰和第二峰的变化或差异较大的第二配制品相比，在应力过程和/或储存条件之前来自第一配制品的第一峰与在应力过程和/或储存条件之后来自相同配制品的第二峰相比的变化或差异较低，表明第一配制品比第二配制品更稳定。
在另一个实施例中，配制品的稳定性通过配制品的浊度(例如，在OD405 nm下测量的)、回收的蛋白质的百分比(例如，通过SE-HPLC测定)和/或蛋白质的纯度(例如，通过SE-HPLC测定)来确定，其中较低的浊度、较高的回收百分比和较高的纯度表示较高的稳定性。在一些实施例中，SDS-PAGE(还原或非还原)用于确定配制品的稳定性。在一些实施例中，CE-SDS(还原或非还原)用于确定配制品的稳定性。在一些实施例中，使用不对称流场流分级(AF4)。在其他实施例中，使用等电聚焦(IEF)，例如毛细管等电聚焦(cIEF)。在一些实施例中，使用AEX-HPLC。与第二配制品相比，第一配制品中IEF的片段和/或变化增加将表明第一配制品较不稳定。可以使用任一种方法或方法的组合来确定配制品的稳定性。
在一些实施例中，包含抗C5抗体与螯合剂(例如EDTA)的配制品比不含螯合剂的配制品具有更大的效力。例如，在特定pH(例如，约5.2)下，包含抗C5抗体(例如，10mg/mL的依库珠单抗)、缓冲剂(例如，10mM乙酸盐)、稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))、表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80(w/v))和螯合剂(例如，0.05mM EDTA)的配制品比不含螯合剂诸如EDTA的相同配制品(即，10mg/mL的依库珠单抗、10mM乙酸盐、5％山梨糖醇(w/v)、0.01％PS80，pH 5.2)或包含缓冲剂、张度剂和表面活性剂且不含螯合剂(例如，10mM磷酸钠、150mM氯化钠、0.02％PS80，pH 7.0)的另一种配制品更有效。效力可以通过本领域已知的任何测定来确定。效力还可以通过测量抗C5抗体抑制补体蛋白C5活性的能力来确定。
在一个实施例中，使用溶血测定法测定抗C5抗体的效力。在一个实施例中，所述测定是定量抗C5抗体对鸡红细胞裂解(终末补体激活下游的终点)的抑制的生物学表征方法。在该测定中，将不同浓度的抗C5抗体与固定浓度的正常人血清一起孵育。然后将该混合物与包被有兔抗鸡红细胞抗体的鸡红细胞一起孵育。孵育后，将混合物离心，并通过测量释放到上清液中的血红蛋白的吸光度(例如，在A405 nm下)来定量溶血程度。补体激活的量与吸光度的强度相关。结果可以报告为相对效力百分比(效力％)值。
在另一个实施例中，通过检测由终末补体激活产生的产物进行补体激活的溶血测定来测定效力，其中产生的产物的量与补体的功能活性成比例。在一个实施例中，所述测定是酶联免疫吸附测定(ELISA)，其测量抗C5抗体抑制人血清中补体蛋白C5的激活的能力。该测定可以使用标记的检测试剂(例如，特异性碱性磷酸酶标记的人C5b-9单克隆抗体)用于由于终末补体激活产生的产物(例如，人C5b-9单克隆抗体对其具有特异性的新抗原)，其中产生的产物(例如，C5b-9新抗原)的量与补体的功能活性成比例。在一个实施例中，在补体激活剂(例如酵母聚糖)存在下，将不同浓度的抗C5抗体与固定浓度的正常人血清一起孵育。在孵育期间，正常人血清补体被酵母聚糖激活，并且由于终末补体激活产生的产物C5b-9复合物与酵母聚糖结合。用碱性磷酸酶标记的C5b-9抗体检测C5b-9，检测的C5b-9的量与补体激活的量相关。该测定测量对标记的C5b-9的抗C5抗体剂量依赖性检测(即，增加抗体剂量，C5b-9检测减少并因此补体激活)。测试样品活性可以通过比较测试样品反应与用参考标准获得的反应(即相对效力)来确定。
在一个实施例中，在给定时间段(例如，约1周、约2周；或约1天、约2天、约3天、约4天、约5天、约6天、约7天、约8天、约9天、约10天、约11天、约12天、约13天、约14天或约15天)后，包含抗C5抗体与螯合剂(例如EDTA)的配制品具有比不含螯合剂的配制品更大的效力。
例如，在约1天、约2天、约3天、约4天、约5天、约6天、约7天、约8天、约9天、约10天、约11天、约12天、约13天、约14天或约15天后，在特定pH(例如，约5.2)下，包含抗C5抗体(例如，10mg/mL的依库珠单抗)、缓冲剂(例如，10mM乙酸盐)、稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))、表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80(w/v))和螯合剂(例如，0.05mM EDTA)的配制品比不含螯合剂诸如EDTA的相同配制品(即，10mg/mL的依库珠单抗、10mM乙酸盐、5％山梨糖醇(w/v)、0.01％PS 80，pH 5.2)或包含缓冲剂、张度剂和表面活性剂且不含螯合剂(例如，10mM磷酸钠、150mM氯化钠、0.02％PS 80，pH 7.0)的另一种配制品更有效。
在一些实施例中，包含抗C5抗体与螯合剂(例如EDTA)的配制品比不含螯合剂的配制品具有减少的聚集。例如，在特定pH(例如，约5.2)下，包含抗C5抗体(例如，10mg/mL的依库珠单抗)、缓冲剂(例如，10mM乙酸盐)、稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))、表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80(w/v))和螯合剂(例如，0.05mM EDTA)的配制品比不含螯合剂诸如EDTA的相同配制品(即，10mg/mL的依库珠单抗、10mM乙酸盐、5％山梨糖醇(w/v)、0.01％PS80，pH 5.2)或包含缓冲剂、张度剂和表面活性剂且不含螯合剂(例如，10mM磷酸钠、150mM氯化钠、0.02％PS 80，pH 7.0)的另一种配制品具有更少的聚集。聚集水平可以通过本领域已知的方法测定，例如通过尺寸排阻超高效液相色谱(SE-UHPLC)或疏水相互作用色谱高效液相色谱(HIC-HPLC)。
在一个实施例中，在给定时间段(例如，约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周、约12周、约13周、约14周或约15周)后，包含抗C5抗体与螯合剂(例如EDTA)的配制品比不含螯合剂的配制品具有更少的聚集。
例如，在约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周、约12周、约13周、约14周或约15周后，在特定pH(例如，约5.2)下，包含抗C5抗体(例如，10mg/mL的依库珠单抗)、缓冲剂(例如，10mM乙酸盐)、稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))、表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80(w/v))和螯合剂(例如，0.05mM EDTA)的配制品比不含螯合剂诸如EDTA的相同配制品(即，10mg/mL的依库珠单抗、10mM乙酸盐、5％山梨糖醇(w/v)、0.01％PS 80，pH 5.2)或包含缓冲剂、张度剂和表面活性剂且不含螯合剂(例如，10mM磷酸钠、150mM氯化钠、0.02％PS 80，pH 7.0)的另一种配制品具有更少的聚集。
在另一个实例中，在约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周、约12周、约13周、约14周或约15周后；在约50℃、40℃、约30℃、约25℃、约5℃、约-20℃或约-30℃下，在特定pH(例如，约5.2)下，包含抗C5抗体(例如，10mg/mL的依库珠单抗)、缓冲剂(例如，10mM乙酸盐)、稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))、表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80(w/v))和螯合剂(例如，0.05mM EDTA)的配制品比不含螯合剂诸如EDTA的相同配制品(即，10mg/mL的依库珠单抗、10mM乙酸盐、5％山梨糖醇(w/v)、0.01％PS80，pH5.2)或包含缓冲剂、张度剂和表面活性剂且不含螯合剂(例如，10mM磷酸钠、150mM氯化钠、0.02％PS 80，pH 7.0)的另一种配制品具有更少的聚集。
不受理论束缚，在特定pH(例如，约5.2)下，抗C5抗体(例如，10mg/mL的依库珠单抗)、缓冲剂(例如，10mM乙酸盐)、稳定剂(例如，5％山梨糖醇(w/v))、表面活性剂(例如，0.01％聚山梨醇酯80(w/v))和螯合剂(例如，0.05mM EDTA)比不含螯合剂诸如EDTA的相同配制品(即，10mg/mL的依库珠单抗、10mM乙酸盐、5％山梨糖醇(w/v)、0.01％PS 80，pH 5.2)或包含缓冲剂、张度剂和表面活性剂且不含螯合剂(例如，10mM磷酸钠、150mM氯化钠、0.02％PS 80，pH 7.0)的另一种配制品具有增加的效力和/或更少的聚集，因为抗C5抗体可由于痕量金属的存在而在其重链中具有氧化修饰，其可导致结构改变，导致聚集体形成增加和/或生物活性降低。例如，依库珠单抗可以在重链CDR3(CDRH-3)色氨酸(SEQ ID NO:3的位置9，对应于SEQ ID NO:10的位置107)W107上具有氧化修饰，其可以导致结构改变和聚集体形成，由于存在痕量金属而导致生物活性降低。由于其CDRH-3的氧化，与没有可检测的痕量金属的配制品相比，在具有依库珠单抗的配制品中存在痕量金属可导致较高百分比的HMW物质和/或较低的效力。在具有可检测的痕量金属的配制品中依库珠单抗的不稳定性可能是由于依库珠单抗的金属催化的氧化(例如，铁催化的氧化、芬顿反应)。配制品中螯合剂的存在可以抵消痕量金属存在的影响(例如，抑制铁催化的氧化、芬顿反应)，从而减少依库珠单抗的氧化修饰，例如W107的氧化。
在一些实施例中，依库珠单抗在一次性系统(SUS)中制造。在一些实施例中，与在非SUS中制造的依库珠单抗相比，在SUS中制造的依库珠单抗具有减少的依库珠单抗的氧化修饰(例如，W107的氧化)。例如，在一些实施例中，在SUS中制造的依库珠单抗使得与在非SUS中制造的依库珠单抗相比痕量金属减少。在一些实施例中，在依库珠单抗药物产品或在SUS中制造的药物物质中，痕量金属不存在或不能通过常规手段如通过电感耦合等离子体质谱法(IPC-MS)检测到。与具有可检测的痕量金属的依库珠单抗相比，用减少的痕量金属和/或没有可检测的痕量金属存在制造的依库珠单抗可具有增加的稳定性和/或效力(例如，由于依库珠单抗的金属催化的氧化，如铁催化的氧化或芬顿反应，如在CRH-3色氨酸(SEQ ID NO:3的位置9，对应于SEQ ID NO:10的位置105)。
在一些实施例中，依库珠单抗药物物质在SUS中制造。在一些实施例中，依库珠单抗药物产品在SUS中制造。在一些实施例中，依库珠单抗药物物质和药物产品在SUS中制造。在一些实施例中，SUS包括使用由塑料材料制成的一次性材料。例如，在SUS中使用的容器可以是市售的一次性使用加工容器，例如可从EMD Millipore(马萨诸塞州伯灵顿(Burlington,MA))获得的那些，例如用PureFlexTM膜制成的容器，例如具有由超低密度聚乙烯(ULDPE)构成的产品层的PureFlexTM袋，其可用于制备或制造用于缓冲剂、配制品、过程中保持和填充(例如缓冲罐)单元操作的药物产品的过程中。在一些实施例中，在SUS中使用的容器由不具有金属或不浸出金属的材料制成。在一些实施例中，材料是塑料。在一些实施例中，材料是乙酸乙烯乙酯(EVA)。
在一个实施例中，在使用SUS(例如在该方法的一个或多个步骤中使用由塑料而不是金属制成的容器)制成的药物物质(例如依库珠单抗药物物质)中检测到的金属水平低于使用非SUS(例如在该方法的一个或多个相同的相应步骤中使用不锈钢容器)制成的药物物质。在一个实施例中，SUS方法包括使病毒过滤产品通过SUS容器或容器(例如缓冲罐)而不是不锈钢容器或容器(例如缓冲罐)。在另一个实施例中，SUS方法包括用于在UF/DF之后回收产品的SUS容器或容器(例如渗余物容器)，而不是不锈钢容器或容器(例如渗余物容器)。在一些实施例中，DS储存在SUS容器(例如袋)中。
在另一个实施例中，在使用SUS(例如在该方法的一个或多个步骤中使用由塑料而不是金属制成的容器)制成的药物产品(例如依库珠单抗药物产品)中检测到的金属水平低于使用非SUS(例如在该方法的一个或多个相同的相应步骤中使用不锈钢容器)制成的药物产品。容纳药物产品例如一段时间的配制品和/或贮存罐可以由SUS中的这些塑料材料(例如EVA)制成。塑料材料可以允许药物产品具有最小的金属接触或没有金属接触，从而不会浸出金属。在一个实施例中，在使用SUS制备的药物产品(例如依库珠单抗)中，金属的水平是最小的，例如不可检测的。非SUS主要包括使用不锈钢(SS)组件而非一次性使用容器。例如，容纳药物产品一段时间的配制品和/或贮存罐由SS制成，而不是一次性使用的容器，例如由塑料材料制成的容器。在一些实施例中，这些SS组件具有将金属浸出到配制或过滤的药物产品中的潜力，这可增加蛋白质的降解。
详细描述和以下实例说明了本发明，并且不应解释为将本发明限制于此。本领域技术人员可以基于本发明的描述进行各种改变和修改，并且这些改变和修改也包括在本发明中。
实例
实例1
开发了具有冻融稳定性和在不同温度条件下储存的能力的配制品。通过尺寸排阻超高效液相色谱(SE-UHPLC)、肽作图、疏水相互作用色谱-高效液相色谱(HIC-HPLC)和基于ELISA的效力测定，评估在山梨糖醇配制品中浓度10mg/ml的依库珠单抗(SEQ ID NO:10)的液体稳定性。
基于在5℃的储存条件下和在40℃的加速条件下和在50℃的强制降解条件下，基于ELISA的效力测定产生的效力数据，与在PBS配制品(10mM磷酸钠，150mM氯化钠，0.02％聚山梨醇酯80(w/v)，pH 7.0)中浓度10mg/ml的依库珠单抗相比，在山梨糖醇配制品(10mM乙酸盐，5％山梨糖醇(w/v)，0.01％聚山梨醇酯80(w/v)，pH5.2)中浓度10mg/ml的依库珠单抗显示出产品不稳定性。
在该基于ELISA的效力测定中，通过测定产生的C5b-9新抗原的量来测量依库珠单抗抑制人血清中补体蛋白C5激活的能力，所述量与补体的功能活性成比例。在酵母聚糖(补体激活剂)存在下，将不同浓度的依库珠单抗与固定浓度的正常人血清(NHS)一起孵育。在孵育期间，正常人血清补体被测定板上的酵母聚糖包被激活，并且由于终末补体激活产生的C5b-9复合物与酵母聚糖结合。然后洗涤板孔，用碱性磷酸酶标记的C5b-9抗体检测C5b-9。向板孔中加入碱性磷酸酶底物溶液后，在405nm处测量吸光度。补体激活的量与405nm处的吸光度相关，这提供了405nm吸光度处依库珠单抗剂量依赖性降低的测量。然后通过将样品反应与用参考标准获得的反应(相对效力)进行比较来确定活性。
据认为，不稳定性可能是由低水平的痕量金属(<1ppm)引起的，因为将铁掺加到含有依库珠单抗的PBS配制品中导致与使用山梨糖醇配制品中的依库珠单抗观察到的HIC-HPLC和肽作图分析所确定的相同的降解谱。
为了确定是否是这种情况，在山梨糖醇配制品(10mM乙酸盐，5％山梨糖醇(w/v)，0.01％聚山梨醇酯80(w/v)，pH 5.2)中10mg/ml的依库珠单抗，没有可检测的痕量金属，例如铁(通过IPC-MS检测)，在山梨糖醇配制品(10mM乙酸盐，5％山梨糖醇(w/v)，0.01％聚山梨醇酯80(w/v)，pH 5.2)中10mg/ml的依库珠单抗，具有可检测的痕量金属(两个不同批次的依库珠单抗在山梨糖醇配制品中配制，批次A和批次B)，以及在PBS配制品(10mM磷酸钠，150mM氯化钠，0.02％聚山梨醇酯80(w/v)，pH7.0)中10mg/ml的依库珠单抗在25℃储存6个月，并在2周、1个月、2个月、3个月和6个月通过SE-UHPLC分析(图1)。SE-UHPLC基于流体动力学体积的差异来分离蛋白质，其中具有较大流体动力学体积的分子比具有较小体积的分子更早洗脱。将样品加载到SE-UHPLC柱(BEH200，UPLC柱，4.6mm×150mm，1.7μm(WatersCorp.,186005225)上，用磷酸钠/氯化钠缓冲剂等度分离，并且通过UV吸光度(280nm)监测洗脱液。通过计算各分离组分相对于总积分面积的百分比来确定纯度(通过确定HMW峰的总面积相对于总峰面积来计算HMW聚集体的水平)。
与没有可检测的痕量金属的山梨糖醇配制品相比，以及与PBS配制品相比，通过SEC-UHPLC检测的高分子量(HMW)物质的百分比在具有可检测的痕量金属的山梨糖醇配制品中以更快的速率增加。
由于与不具有可检测的痕量金属的山梨糖醇配制品相比，具有可检测的痕量金属(例如，铁)的山梨糖醇配制品导致更高百分比的HMW物质，因此认为在具有可检测的痕量金属的山梨糖醇配制品中依库珠单抗的不稳定性可能是由于依库珠单抗的金属催化的氧化(例如，铁催化的氧化、芬顿反应)。对山梨糖醇配制品中的依库珠单抗进行肽作图。减少样品，然后在用胰蛋白酶或Asp-N消化之前通过基于尺寸排阻的脱盐柱除去过量的试剂。然后通过RP-HPLC在三氟乙酸/乙腈(TFA/ACN)梯度中分离所得肽，并通过UV在214nm用MS和MS/MS数据收集监测。将每种类型的翻译后修饰(PTM)的水平与通过使用质量分析仪软件获得的含有感兴趣残基的修饰肽以及含有未修饰和修饰残基的肽的UV迹线中的积分峰面积进行比较。
结果显示形成+16Da、+32Da和+14Da肽，代表对重链CDR3(CDRH-3)色氨酸(SEQ IDNO:3的位置9，对应于SEQ ID NO:10的位置107)W107的氧化修饰。这些修饰可能伴随着结构变化和聚集体形成，导致生物活性降低。经测定，含有可检测的微量金属的山梨糖醇配制品中依库珠单抗的相对效力低于不含有可检测微量金属的山梨糖醇配制品中的依库珠单抗，且经测定，这种效力损失是由于W107的氧化所致，这是通过还原肽作图测定的。
为了确定在具有可检测的痕量金属的山梨糖醇配制品中依库珠单抗的效力的降低是否可以降低(例如，通过抑制依库珠单抗的金属催化的氧化)，将EDTA添加到山梨糖醇配制品中。在50℃的加速条件下持续两周，将含有EDTA的山梨糖醇配制品(10mM乙酸盐，5％山梨糖醇(w/v)，0.01％聚山梨醇酯80(w/v)，0.05mM EDTA，pH 5.2)中依库珠单抗(10mg/ml)的相对效力与PBS配制品(10mM磷酸钠，150mM氯化钠，0.02％聚山梨醇酯80(w/v)，pH7.0)和不含EDTA的山梨糖醇配制品(10mM乙酸盐，5％山梨糖醇，0.01％聚山梨醇酯80，pH5.2)中依库珠单抗(10mg/ml)进行比较(图2)。与含有EDTA的山梨糖醇配制品中的依库珠单抗和PBS配制品中的依库珠单抗相比，山梨糖醇配制品中依库珠单抗的效力以更大的速率降低。
为了确定配制品中EDTA的量是否可以控制依库珠单抗的氧化水平，在其中依库珠单抗以10mg/ml存在的山梨糖醇配制品(10mM乙酸盐，5％山梨糖醇(w/v)，0.01％聚山梨醇酯80(w/v)，pH 5.2)中包括不同量的EDTA(0、0.01mM、0.03mM和0.05mM)。将配制品在40℃下储存13周。通过HIC-HPLC预峰测量氧化形式的依库珠单抗的形成(图3)。HIC-HPLC用于ABP959色氨酸氧化物质的定量纯度分析。将样品加载到串联连接的两个HIC-HPLC柱(PropacHIC-10，5μm，4.6x 100mm(Thermo，063655))上，在硫酸铵和乙酸钠缓冲剂的递减盐梯度中分离，并且通过220nm处的紫外(UV)吸光度监测洗脱液。通过计算每种分离组分相对于总积分面积的百分比来确定纯度。氧化色氨酸的水平与通过HIC-HPLC分析测定的预峰百分比水平具有线性相关性(预峰百分比等于预峰面积相对于总积分峰面积)。通过SEC-UHPLC测定聚集水平(通过HMW物质的百分比测量)(图4)。分别如图3和4所示，在没有EDTA的配制品中发现了最高量的氧化和HMW物质。
本实例说明了用于依库珠单抗的具有EDTA的山梨糖醇配制品，其通过防止金属催化的氧化(通过芬顿反应)和随后的聚集、沉淀和其他化学修饰而提供优异的蛋白质溶解性和稳定性。这种含有依库珠单抗和EDTA的配制品提供了不仅优于PBS配制品而且优于不含EDTA的山梨糖醇配制品的稳定性。
实例2
将使用非一次性使用系统(SUS)生产的依库珠单抗药物产品(DP)与使用SUS生产的依库珠单抗DP进行比较。
对SUS和非SUS DP进行了相同的药物过程。细胞培养过程在摇瓶、WaveBioreactorTM(Cytvia，美国马萨诸塞州马尔伯勒(Marlborough,MA,USA))、500L一次性生物反应器(SUB)和2000L生产SUB中进行。使用交替切向流(ATF)过滤器收集细胞并容纳在SUS(聚乙烯(PE)膜，Thermo ScientificTM ASITM imPULSE一次性使用混合器)中，然后用蛋白A纯化。将来自蛋白A纯化的洗脱液滴定至低pH用于病毒灭活和中和，然后过滤并在阳离子交换柱(CEX)上处理。然后用混合模式阴离子交换色谱(MMA)处理来自CEX的洗脱液。然后通过病毒过滤处理MMA流通物。在连接过程中对病毒过滤池进行超滤/渗滤(UF/DF)，这允许将病毒过滤池缓冲剂更换到配制品缓冲剂中并浓缩到依库珠单抗药物物质(DS)的目标浓度。然后用聚山梨醇酯80(PS80)掺入回收的UF/DF池，并过滤到SUS袋中，并在-30℃下储存。
在非SUS DP中，DS以10mg/ml的浓度配制在非SUS配制罐(不锈钢，SS)中的山梨糖醇配制品(10mM乙酸盐，5％山梨糖醇，0.01％聚山梨醇酯80，pH 5.2)中，然后通过0.22μmPVDF过滤器过滤，然后容纳在非SUS(SS)贮存罐中，再次用0.22μm PVDF过滤器过滤，然后在填充前容纳在缓冲SUS袋中。使用该方法生产的依库珠单抗DP被指定为GMP批次(参见图5-8)。
在用于DP的SUS中，该过程与非SUS DP过程相同，除了使用SUS乙酸乙烯乙酯(EVA)袋代替SS罐(即，使用SUS EVA袋代替SS配制罐；使用SUS EVA袋代替SS贮存罐)。使用该方法生产的依库珠单抗DP被指定为SUS批次(参见图5-8)。
在50℃的强制降解条件下持续14天，将使用非SUS生产的依库珠单抗DP批次(GMPDP1、GMP DP2和GMP DP3)中通过SE-UHPLC方法(如实例1中所述)测定的高分子量(HMW)物质的百分比与使用SUS生产的依库珠单抗DP批次(SUS DP)中HMW的百分比进行比较。测量HMW物质或聚集体的百分比并示于图5中。如图5所示，与强制降解条件下的非SUS依库珠单抗DP批次相比，强制降解条件下的SUS依库珠单抗DP批次中HMW的百分比大大降低。
使用非SUS生产的依库珠单抗DP批次(GMP 1DP，GMP 2DP)中重链CDR3(CDRH-3)色氨酸(SEQ ID NO:3的位置9，对应于SEQ ID NO:10的位置107)W107的氧化修饰量与使用SUS生产的依库珠单抗DP批次(SUS DP)在强制降解条件下进行比较，也通过肽作图确定(如实例1所述)。图6A显示，在强制降解条件下SUS依库珠单抗DP批次的W107氧化水平比在强制降解条件下非SUS依库珠单抗DP批次(GMP 1DP，GMP 2DP)的水平低得多。
将在强制降解条件下使用非SUS生产的依库珠单抗DP批次(GMP 1DP，GMP 2DP)的效力与在强制降解条件下使用SUS生产的依库珠单抗DP批次(SUS DP)的效力使用实例1中所述的基于ELISA的效力测定进行比较。如图6B所示，与非SUS依库珠单抗DP批次相比，在SUS依库珠单抗DP批次中未观察到效力损失。
此外，HIC-HPLC分析(如实例1中进行的)显示，与在强制降解条件下的非SUS依库珠单抗DP批次(GMP 2DP)相比，在强制降解条件下的SUS依库珠单抗DP批次没有显示出HIC主峰的损失，如图7所示，并且在强制降解条件下的SUS依库珠单抗DP批次没有显示出纯度的损失，如HIC预峰的百分比所示(图8)。
虽然已经根据各种实施例描述了本发明，但是应该理解，本领域技术人员将会想到许多变化和修改。因此，所附权利要求书旨在覆盖落入所要求保护的本发明范围内的所有此类的等效变化。另外，本文使用的章节标题只是出于组织的目的，并且不应被解释为限制所描述的主题。本申请中引用的所有参考文献出于任何目的通过引用明确并入本文。
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<212> PRT
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<223> DOE序列
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Gly Tyr Ile Phe Ser Asn Tyr Trp Ile Gln
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<223> DOE序列
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Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr Glu Tyr Thr Glu Asn Phe Lys
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Asp
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Tyr Phe Phe Gly Ser Ser Pro Asn Trp Tyr Phe Asp Val
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Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly His Thr Glu Tyr Thr Glu Asn Phe Lys
1 5 10 15
Asp
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Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr Glu Tyr Thr Glu Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Phe Phe Gly Ser Ser Pro Asn Trp Tyr Phe Asp Val Trp
100 105 110
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Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly His Ile Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly His Thr Glu Tyr Thr Glu Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Phe Phe Gly Ser Ser Pro Asn Trp Tyr Phe Asp Val Trp
100 105 110
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Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
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Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
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Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
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Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
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Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys
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Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
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Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
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Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
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Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
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Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
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Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
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Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
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Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
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Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys
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Ser Val Leu His Glu Ala Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
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Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Ser Asn Tyr
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Trp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
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Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr Glu Tyr Thr Glu Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
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Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Tyr Phe Phe Gly Ser Ser Pro Asn Trp Tyr Phe Asp Val Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
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Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
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Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser
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Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245 250 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
260 265 270
Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
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Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val
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Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
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Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
325 330 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340 345 350
Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355 360 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
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Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385 390 395 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser
405 410 415
Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420 425 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
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<213> 人工序列
<220>
<223> DOE序列
<400> 11
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly His Ile Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gln Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly His Thr Glu Tyr Thr Glu Asn Phe
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
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Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Tyr Phe Phe Gly Ser Ser Pro Asn Trp Tyr Phe Asp Val Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr
130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
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Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
165 170 175
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
180 185 190
Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp
195 200 205
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys
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Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser
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Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
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Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
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Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
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Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser
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Leu His Ser His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
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<211> 11
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<213> 人工序列
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Gly Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Gly Ala Leu Asn
1 5 10
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<213> 人工序列
<220>
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Gly Ala Thr Asn Leu Ala Asp
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<211> 9
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Gln Asn Val Leu Asn Thr Pro Leu Thr
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Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
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Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
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<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> DOE序列
<400> 17
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gly Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Gly Ala
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Thr Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Val Leu Asn Thr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210

Claims (60)

1.一种配制品，其包含：
a)抗C5抗体，
b)缓冲剂，
c)稳定剂，和
d)螯合剂。
2.如权利要求1所述的配制品，其中该抗体包含CDRH1、CDRH2和CDRH3，其中该CDRH1、CDRH2和CDRH3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:1、2和3，或SEQS ID NO:4、5和3。
3.如权利要求2所述的配制品，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:6或7的氨基酸序列的重链可变区。
4.如权利要求1-3中任一项所述的配制品，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:8或9的氨基酸序列的重链恒定区。
5.如权利要求1所述的配制品，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:10或11的氨基酸序列的重链。
6.如权利要求1-5中任一项所述的配制品，其中该抗体包含CDRL1、CDRL2和CDRL3，其中该CDRL1、CDRL2和CDRL3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:12、13和14。
7.如权利要求6所述的配制品，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的轻链可变区。
8.如权利要求1-7中任一项所述的配制品，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链恒定区。
9.如权利要求1-8中任一项所述的配制品，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的轻链。
10.如权利要求1所述的配制品，其中该抗体包含具有SEQ IDNO:10或11的氨基酸序列的重链和具有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的轻链。
11.如权利要求10所述的配制品，其中该重链具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列。
12.如权利要求10所述的配制品，其中该重链具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列。
13.如权利要求1-12中任一项所述的配制品，其中该缓冲剂包含乙酸盐。
14.如权利要求13所述的配制品，其中该乙酸盐的浓度为5mM至20mM。
15.如权利要求14所述的配制品，其中该乙酸盐的浓度为约10mM。
16.如权利要求1-15中任一项所述的配制品，其中该稳定剂是多元醇。
17.如权利要求16所述的配制品，其中该多元醇是山梨糖醇。
18.如权利要求17所述的配制品，其中山梨糖醇的浓度为约5％(w/v)。
19.如权利要求1-18中任一项所述的配制品，其中该螯合剂的浓度为0.01mM至0.05mM。
20.如权利要求19所述的配制品，其中该螯合剂的浓度为约0.05mM。
21.如权利要求1-20中任一项所述的配制品，其中该螯合剂是乙二胺四乙酸(EDTA)。
22.如权利要求1-21中任一项所述的配制品，其进一步包含表面活性剂，其中该表面活性剂的浓度为0.001％至0.1％(w/v)。
23.如权利要求22所述的配制品，其中该表面活性剂的浓度为约0.01％。
24.如权利要求22或23所述的配制品，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯80。
25.如权利要求1-24中任一项所述的配制品，其中该配制品的pH为4.5至5.8。
26.如权利要求25中任一项所述的配制品，其中该配制品的pH为约5.2。
27.如权利要求1-26中任一项所述的配制品，其中该抗体的浓度为约10mg/ml。
28.一种制备如前述权利要求中任一项所述的配制品的方法。
29.一种制备抗C5抗体药物产品的方法，该方法包括：
a)在一次性系统配制容器中，在包含缓冲剂、稳定剂和任选地螯合剂的配制品中配制抗C5抗体药物物质；
b)第一次过滤得到的药物产品；
c)将该药物产品容纳在一次性系统贮存容器中；
d)第二次过滤该药物产品；以及
e)将该药物产品容纳在缓冲容器中。
30.如权利要求29所述的方法，其中该配制容器、该贮存容器或该配制容器和贮存容器两者不含金属。
31.如权利要求30所述的方法，其中该配制容器、该贮存容器或该配制容器和贮存容器两者是塑料。
32.如权利要求29所述的方法，其中该配制容器、该贮存容器或该配制容器和贮存容器两者包含乙酸乙烯乙酯(EVA)。
33.如权利要求30-32所述的方法，其中与使用相同过程但使用包含金属的配制容器、贮存容器或配制容器和贮存容器两者制备的药物产品相比，该药物产品具有更少的聚集体、更低的氧化水平、降低的效力损失或降低的纯度损失。
34.如权利要求33所述的方法，其中该金属是不锈钢。
35.如权利要求29所述的方法，其中该抗体包含CDRH1、CDRH2和CDRH3，其中该CDRH1、CDRH2和CDRH3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:1、2和3，或SEQS ID NO:4、5和3。
36.如权利要求35所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ IDNO:6或7的氨基酸序列的重链可变区。
37.如权利要求36所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ IDNO:8或9的氨基酸序列的重链恒定区。
38.如权利要求37所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ IDNO:10或11的氨基酸序列的重链。
39.如权利要求29-38中任一项所述的方法，其中该抗体包含CDRL1、CDRL2和CDRL3，其中该CDRL1、CDRL2和CDRL3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:12、13和14。
40.如权利要求39所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ IDNO:15的氨基酸序列的轻链可变区。
41.如权利要求39或40所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的轻链恒定区。
42.如权利要求41所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ IDNO:17的氨基酸序列的轻链。
43.如权利要求29所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ IDNO:10或11的氨基酸序列的重链和具有SEQ ID NO:17的氨基酸序列的轻链。
44.如权利要求29所述的方法，其中该重链具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列。
45.如权利要求29所述的方法，其中该重链具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列。
46.如权利要求29-45中任一项所述的方法，其中该缓冲剂包含乙酸盐。
47.如权利要求46所述的方法，其中该乙酸盐的浓度为5mM至20mM。
48.如权利要求47所述的方法，其中该乙酸盐的浓度为约10mM。
49.如权利要求29-48中任一项所述的方法，其中该稳定剂是多元醇。
50.如权利要求49所述的方法，其中该多元醇是山梨糖醇。
51.如权利要求50所述的方法，其中山梨糖醇的浓度为约5％(w/v)。
52.如权利要求29-51中任一项所述的方法，其中该螯合剂的浓度为0.01mM至0.05mM。
53.如权利要求52所述的方法，其中该螯合剂的浓度为约0.05mM。
54.如权利要求29-53中任一项所述的方法，其中该螯合剂是乙二胺四乙酸(EDTA)。
55.如权利要求29-54中任一项所述的方法，其中该配制品还包含表面活性剂，其中该表面活性剂的浓度为0.001％至0.1％(w/v)。
56.如权利要求55所述的方法，其中该表面活性剂的浓度为约0.01％。
57.如权利要求55或56所述的方法，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯80。
58.如权利要求29-57中任一项所述的方法，其中该配制品的pH为4.5至5.8。
59.如权利要求58中任一项所述的方法，其中该配制品的pH为约5.2。
60.如权利要求29-59中任一项所述的方法，其中该抗体的浓度为约10mg/ml。
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