CN115697397A

CN115697397A - 接种脊髓灰质炎疫苗对抗冠状病毒

Info

Publication number: CN115697397A
Application number: CN202180040947.3A
Authority: CN
Inventors: 谢七一
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2020-04-11
Filing date: 2021-01-20
Publication date: 2023-02-03
Also published as: CA3109897A1; EP3914293A4; EP3914293B1; JP2022524251A; JP2023060048A; EP3914293A1

Abstract

本发明提供了一种用于防止人感染冠状病毒科病毒的脊髓灰质炎疫苗。本发明还提供了一种用于诱导人针对冠状病毒科病毒的保护性免疫应答的脊髓灰质炎疫苗。

Description

接种脊髓灰质炎疫苗对抗冠状病毒

相关申请的交叉引用

本申请要求于2020年4月11日提交美国专利局，申请号为63/008,664的美国临时申请，于2020年4月15日提交美国专利局，申请号为63/010,678的美国临时申请，于2020年4月22日提交美国专利局，申请号为63/013,561的美国临时申请，以及于2020年11月15日提交美国专利局，申请号为17/098,449的美国申请的优先权。上述每一个申请的全部公开内容通过引用结合在本申请中。

技术领域

序列列表的引用

本说明书附带有计算机可读形式(CRF)的序列列表，其标题为805A002WO01_SEQ_LISTING_ST25.txt，大小为20,153字节，创建2021年1月20日，其内容通过引用整体结合在本申请中。

背景技术

冠状病毒疾病2019(COVID-19)是由严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的。Gorbalenya et al.,Nat.Microbiol.2020,5,536-44；Zhang et al.,Science2020,368,409-12.2020年3月11日，世界卫生组织宣布COVID-19为全球流行性疾病。Zhanget al.,Science 2020,368,409-12；Dai et al.,Science 2020,368,1331-5.到2020年7月中期，COVID-19几乎已经传播到世界的每个角落。截至2020年10月，全球有近5000万确诊病例和100多万死亡病例。COVID-19的大流行对世界构成了巨大的公共卫生威胁。

COVID-19可以是致命的，特别是针对于老年人和原先就有疾病的人。Shahid etal.,J.Am.Geriatr.Soc.2020,68,926-9.COVID-19的常见症状包括发热或发冷，咳嗽，呼吸急促或呼吸困难，乏力，肌肉或身体酸痛，头痛，味觉或嗅觉丧失，喉咙痛，充血或流鼻涕，恶心或呕吐，以及腹泻。目前，尚无FDA批准的COVID-19疫苗。因此，迫切需要一种免疫方法来对抗COVID-19流行病。

发明内容

本发明提供了一种用于防止人感染第IV组病毒的方法，该方法包括向人施用有效量的脊髓灰质炎疫苗。

本发明还提供了一种用于治疗患有由第IV组病毒引起的传染病的人的方法，包括对人施用有效量的脊髓灰质炎疫苗。

另外，本发明提供了诱导人针对冠状病毒科病毒的保护性免疫应答的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

此外，本发明提供了诱导人针对冠状病毒科病毒的保护性胃肠道免疫应答的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

本发明提供了诱导人针对由冠状病毒科病毒感染引起的严重急性呼吸综合症的保护性免疫应答的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

本发明提供了降低人体内由冠状病毒科病毒引起的传染病的一种或多种症状严重程度的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

本发明提供了降低人体内由冠状病毒科病毒感染引起的严重急性呼吸综合症的一种或多种症状严重程度的方法，包括向人用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

本发明提供了抑制人体内冠状病毒科病毒的复制的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

附图说明

图1显示为成年受试者在脊髓灰质炎病毒疫苗免疫前后的抗-SARS-CoV-2 RDRP抗体的水平。

图2显示为儿童受试者在COVID-19流行病之前和期间的抗-SARS-CoV-2 RDRP抗体的水平。

具体实施方式

为了便于理解本发明所公开的内容，下面对多个术语进行了定义。

通常，本发明所使用的命名法以及本发明所描述的生物化学、生物学、免疫学、病毒学和药理学中的实验步骤是本领域公知且通常采用的。除非另有定义，否则本发明使用的所有技术和科学术语通常具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。

术语“治疗”旨在包括减轻或消除病症、疾病或病情，或与所述病症、疾病或病情相关的一种或多种症状，或减轻或根除所述病症、疾病或病情本身的起因。

术语“预防”旨在包括一种延迟和/或阻止病症、疾病或病情和/或其伴随症状的发作的方法,以防止人获得病症、疾病或病情，或降低人获得疾病、疾病或病情的风险。

术语“缓解”是指缓和或减轻病症、疾病或病情的一种或多种症状(例如，疼痛)。该术语也可以指减少与活性成分相关的不良影响。有时，受试者从预防剂或治疗剂中获得的有益效果不会使得病症、疾病或病情的治愈。

术语“有效量”或“免疫有效量”旨在包括施用时足以防止所预防或减轻的病症、疾病或病情的一种或多种症状的发展或在一定程度上减轻所预防或减轻的病症、疾病或病情的一种或多种症状的疫苗的量。

术语“约”或“大约”是指本领域普通技术人员确定的特定值的可接受误差，这部分取决于如何测量或确定所述特定值。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”表示在1、2或3个标准偏差范围内。在某些实施方案中，术语“约”或“大约”是指在给定值或给定范围的25％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、或0.05％范围内。

在一个实施方案中，本发明提供了一种用于防止人感染第IV组病毒的方法，包括向人施用有效量的脊髓灰质炎疫苗。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗患有由第IV组病毒引起的传染病的人的方法，包括向人施用有效量的脊髓灰质炎疫苗。

在某些实施方案中，第IV组病毒是动脉炎病毒科、星状病毒科、杯状病毒科、冠状病毒科、黄病毒科、小核糖核酸病毒科、或披膜病毒科病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是动脉炎病毒科病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是星状病毒科病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是杯状病毒科病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是冠状病毒科病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是黄病毒科病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是小核糖核酸病毒科病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是披膜病毒科病毒。

在某些实施方案中，第IV组病毒是动脉炎病毒、星状病毒、杯状病毒、冠状病毒、黄病毒、小核糖核酸病毒、或披膜病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是动脉炎病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是星状病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是杯状病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是冠状病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是SARS冠状病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是COVID-19冠状病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是黄病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是小核糖核酸病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是披膜病毒。

在某些实施方案中，第IV组病毒是乙型冠状病毒。在某些实施方案中，第IV组病毒是冠状病毒亚科病毒。在某些实施方案中，冠状病毒亚科病毒是严重急性呼吸综合症冠状病毒-1(SARS-CoV-1)、严重急性呼吸综合症冠状病毒-2(SARS-CoV-2)、或中东呼吸综合症相关冠状病毒(MERS-CoV)。在某些实施方案中，第IV组病毒是SARS-CoV-1。在某些实施方案中，第IV组病毒是SARS-CoV-2。在某些实施方案中，第IV组病毒是MERS-CoV。

在某些实施方案中，传染性疾病是由动脉炎病毒科、星状病毒科、杯状病毒科、冠状病毒科、黄病毒科、小核糖核酸病毒科、或披膜病毒科病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由动脉炎病毒科病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由星状病毒科病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由杯状病毒科病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由冠状病毒科病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由黄病毒科病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由小核糖核酸病毒科病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由披膜病毒科病毒引起的。

在某些实施方案中，传染性疾病是由动脉炎病毒、星状病毒、杯状病毒、冠状病毒、黄病毒、小核糖核酸病毒、或披膜病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由动脉炎病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由星状病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由杯状病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由冠状病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由SARS冠状病毒(也称为SARS-CoV-1)引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由COVID-19冠状病毒(也称为SARS-CoV-2)引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由黄病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由小核糖核酸病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由披膜病毒引起的。

在某些实施方案中，传染性疾病是由乙型冠状病毒引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由冠状病毒亚科病毒引起的。在某些实施方案中，所述传染性疾病是由SARS-CoV-1、SARS-CoV-2、或MERS-CoV引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由SARS-CoV-1引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由SARS-CoV-2引起的。在某些实施方案中，传染性疾病是由MERS-CoV引起的。

在某些实施方案中，传染性疾病是冠状病毒病，也称为COVID-19(新型冠状病毒肺炎)。在某些实施方案中，传染性疾病是严重急性呼吸综合症。

在另一个实施方案中，本发明提供了诱导人针对冠状病毒科病毒的保护性免疫应答的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

在另一个实施方案中，本发明提供了诱导人针对冠状病毒科病毒的保护性胃肠道免疫应答的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

在另一个实施方案中，本发明提供了诱导人针对由冠状病毒科病毒感染引起的严重急性呼吸综合症的保护性免疫应答的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

在另一个实施方案中，本发明提供了降低人体内由冠状病毒科病毒引起的传染病的一种或多种症状严重程度的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。在一个实施方案中，传染性疾病是严重急性呼吸综合症。

在另一个实施方案中，本发明提供了降低人体内由冠状病毒科病毒感染引起的严重急性呼吸综合症的一种或多种症状严重程度的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

在一些实施方案中，严重急性呼吸综合症的症状是发热或发冷，咳嗽，呼吸急促或呼吸困难，乏力，肌肉或身体酸痛，头痛，味觉或嗅觉丧失，喉咙痛，充血或流鼻涕，恶心或呕吐，或者腹泻。

在另一个实施方案中，本发明提供了抑制人体内冠状病毒科病毒的复制的方法，包括向人施用免疫有效量的脊髓灰质炎疫苗。

在某些实施方案中，冠状病毒科病毒是冠状病毒亚科病毒。在某些实施方案中，冠状病毒科病毒是乙型冠状病毒。在某些实施方案中，冠状病毒科病毒是SARS-CoV-1、SARS-CoV-2、或MERS-CoV。在某些实施方案中，冠状病毒科病毒是SARS-CoV-1。在某些实施方案中，冠状病毒科病毒是SARS-CoV-2。在某些实施方案中，冠状病毒科病毒是MERS-CoV。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗或减毒的脊髓灰质炎活疫苗。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗是口服脊髓灰质炎疫苗(OPV)。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是单价、二价、或三价脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是单价脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是二价脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是三价脊髓灰质炎疫苗。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗(IPV)。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗，包含灭活的1型(Mahoney)脊髓灰质炎病毒、灭活的2型(MEF-1)脊髓灰质炎病毒、灭活的3型(Saukett)脊髓灰质炎病毒、或其混合物。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗包括灭活的1型脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗包括灭活的2型脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗包括灭活的3型脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗包括灭活的1型脊髓灰质炎病毒、灭活的2型脊髓灰质炎病毒和灭活的3型脊髓灰质炎病毒。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗，包括约40D抗原单位的灭活的1型脊髓灰质炎病毒、约8D抗原单位的灭活的2型脊髓灰质炎病毒、32D抗原单位的灭活的3型脊髓灰质炎病毒、或其混合物。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗，包括约40D抗原单位的灭活的1型脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗，包括约8D抗原单位的灭活的2型脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗，包括约32D抗原单位的灭活的3型脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗，包括约40D抗原单位的灭活的1型脊髓灰质炎病毒、约8D抗原单位的灭活的2型脊髓灰质炎病毒、以及32D抗原单位的灭活的3型脊髓灰质炎病毒。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是单价、二价、或三价的灭活的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是单价的灭活的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是二价的灭活的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是三价的灭活的脊髓灰质炎疫苗。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括Sabin脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括Sabin脊髓灰质炎病毒I、Sabin脊髓灰质炎病毒II、Sabin脊髓灰质炎病毒III、或其混合物。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括Sabin脊髓灰质炎病毒I(LS-c,2ab)。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括具有Nomoto et al.,Proc.Nat’l.Acad.Sci.U.S.A.1982,79,5793-7中公开的核苷酸序列的Sabin脊髓灰质炎病毒I，该文章通过引用结合在本申请中。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括Sabin脊髓灰质炎病毒II(P712,Ch,2ab)。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括Sabin脊髓灰质炎病毒III(Leon 12ab)。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括Sabin脊髓灰质炎病毒I、Sabin脊髓灰质炎病毒II和Sabin脊髓灰质炎病毒III。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒I、具有约10⁵的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒II、具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒III、或其混合物。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒I。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括具有约10⁵的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒II。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒III。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗，包括具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒I、具有约10⁵的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒II以及具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒III。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是单价、二价、或三价的减毒的脊髓灰质炎活疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是单价的减毒的脊髓灰质炎活疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是二价的减毒的脊髓灰质炎活疫苗。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗是三价的减毒的脊髓灰质炎活疫苗。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗通过口服或胃肠外途径给药。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗通过口服给药。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗通过胃肠外途径给药。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗通过皮内途径给药。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗通过肌内途径给药。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗通过皮下途径给药。

在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗通过口服或胃肠外途径给药。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗通过口服给药。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗通过胃肠外途径给药。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗通过皮内途径给药。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗通过肌内途径给药。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗通过皮下途径给药。

在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗通过口服或胃肠外途径给药。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗通过口服给药。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗通过胃肠外途径给药。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗通过皮内途径给药。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗通过肌内途径给药。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗通过皮下途径给药。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在一生中施用约1至约50次、约1至约20次、约1至约10次、或约1至约5次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在一生中施用约1至约50次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在一生中施用约1至约20次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在一生中施用约1至约10次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在一生中施用约1至约5次。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用一次或两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用一次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗作为加强剂量施用一次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗作为加强剂量在流行病期间施用一次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗作为加强剂量在COVID-19流行病期间施用一次。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在约一年、约6个月、约3个月、约2个月、约1个月、或约14天内施用两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在约一年内施用两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在约6个月内施用两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在约3个月内施用两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在约2个月内施用两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在约1个月内施用两次。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗在约14天内施用两次。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次时的间隔为约7天至约6个月，约7天至约3个月，约7天至约2个月，或者约7天至约1个月。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次时的间隔为约7天至约6个月。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次时的间隔为约7天至约3个月。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次时的间隔为约7天至约2个月。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次时的间隔为约7天至约1个月。

在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次时，其中第一次剂量作为初次剂量，第二次剂量作为加强剂量。在某些实施方案中，脊髓灰质炎疫苗施用两次时，两次剂量均为加强剂量。

在某些实施方案中，待施用脊髓灰质炎疫苗的受试者未接种针对脊髓灰质炎病毒的疫苗。在某些实施方案中，未接种疫苗的受试者接受1、2或3剂量的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，未接种疫苗的受试者接受1剂量的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，未接种疫苗的受试者在约1个月或约2个月内接受2剂量的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，未接种疫苗的受试者在约3个月或约两年内接受3剂量的脊髓灰质炎疫苗。

在某些实施方案中，待施用脊髓灰质炎疫苗的受试者未完全接种针对脊髓灰质炎病毒的疫苗。在某些实施方案中，未完全接种疫苗的受试者接受1或2剂量的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，未完全接种疫苗的受试者接受1剂量的脊髓灰质炎疫苗。在某些实施方案中，未完全接种疫苗的受试者在约1个月或约2个月内接受2剂量的脊髓灰质炎疫苗。

在某些实施方案中，待施用脊髓灰质炎疫苗的受试者完全接种针对脊髓灰质炎病毒的疫苗。在某些实施方案中，完全接种疫苗的受试者接受1剂量的脊髓灰质炎疫苗。

在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗的免疫有效量为约1D至约500D、约2D至约200D、约5D至约100D、或者约10D至约100D抗原单位的灭活脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗的免疫有效量为约1D至约500D抗原单位的灭活脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗的免疫有效量为约2D至约200D抗原单位的灭活脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗的免疫有效量为约5D至约100D抗原单位的灭活脊髓灰质炎病毒。在某些实施方案中，灭活的脊髓灰质炎疫苗的免疫有效量为约10D至约100D抗原单位的灭活脊髓灰质炎病毒。

在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗的免疫有效量具有约1,000至约10¹⁰、约10⁴至约10⁸、或约10⁵至约10⁷的CCID₅₀。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗的免疫有效量具有约1,000至约10¹⁰的CCID₅₀。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗的免疫有效量具有约10⁴至约10⁸的CCID₅₀。在某些实施方案中，减毒的脊髓灰质炎活疫苗的免疫有效量具有约10⁵至约10⁷的CCID₅₀。

本发明将通过以下的非限制性实施例进一步阐述。

实施例

实施例1接种针对COVID-19的灭活的脊髓灰质炎疫苗

四名受试者在COVID-19大流行期间，根据

Label的推荐各自自愿接受了

的加强剂量。受试者1(44岁，女性)是一名从业超过20年的医疗保健专业人员。在COVID-19大流行期间，受试者1多次暴露于COVID-19的环境中。受试者1和她的家人正计划出国旅行。受试者1鼓励她的家庭成员(受试者2-她的丈夫(47岁)，受试者3-她的姐姐(50多岁)，受试者4-她的父亲(79岁)，和受试者5-她的母亲(76岁))在旅行前更新他们的免疫接种。受试者1和3至5在COVID19大流行期间于2020年6月接受了

的加强剂量，但受试者2决定不接受加强剂量。

未接受加强剂量的受试者2随后生病，不久后被检测为COVID-19阳性。受试者2自此一直持续低热(超过五周)，意识模糊和慢性无力。即使受试者1和3至5与受试者2经常接触，他们都没有生病。

受试者4和5(受试者1的父母)是老年人，且健康状况不佳。受试者3是受试者1的姐妹，健康状况也很差，有中风和脑瘫的既往史。他们三个人都接种了疫苗，尽管他们接触了受试者2，但仍然表现良好，没有疾病迹象。

实施例2接种针对COVID-19的灭活的脊髓灰质炎疫苗

受试者A是一名70岁的健康女性，在2019年10月去摩洛哥旅行之前接受了

的加强剂量。她的丈夫，受试者B，是一名69岁的基本健康的男性，根据他的医生的建议，在2020年10月12日接受了

的加强剂量。受试者A和B已婚并生活在一起。

2020年10月14日时，他们的管家出现了喉咙干燥的症状，但继续在他们的房子里工作。在房子里工作时，管家戴着3级口罩，面罩和手套。在管家工作的时候，受试者A在房子里。管家随后被检测出COVID-19阳性。管家的丈夫也接受了检测，当时检测的结果为阴性。

受试者A在与管家接触的5天后，她因喉咙痛而醒来，喉咙痛的症状从2020年10月16日开始并持续到2020年10月19日。2020年10月19日时，她被检测出COVID-19阳性。2020年10月20日时，她的症状消失了，再次接受了检测，但检测结果呈阴性。受试者B最近接受了脊髓灰质炎疫苗加强剂量，在2020年10月14日和24日均被检测为COVID-19阴性。

总而言之，两个老年受试者(受试者A和B)与COVID-19阳性的管家接触。于一年前接受脊髓灰质炎疫苗加强剂量的受试者A，出现轻微症状，在暴露后的第一天PCT检测为COVID-19阳性，但第二天使用相同的PCT检测时结果为阴性。受试者B最近接受了脊髓灰质炎疫苗加强剂量，在此期间从未出现症状，且呈COVID-19阴性。

实施例3接种针对COVID-19的灭活的脊髓灰质炎疫苗

一家医疗保健相关机构有6名员工，发生了工作场所的COVID-19爆发。五名员工接受了

的加强剂量,而第六名员工(一名年轻的成年男性)则没有。随后，第六名员工感染了COVID-19并在无症状期间将病毒带到工作场所。几天后，他开始出现COVID-19的症状。其余5名员工经PCR检测为COVID-19阳性，但他们均未出现COVID-19症状。

实施例4接种针对COVID-19的减毒的脊髓灰质炎活疫苗

在2020年12月的第一周，一成年人接种了2滴OPV溶液。这位成年人在马来西亚的除夕晚会上接触了六个人。几天后，这六个人都感染了COVID-19。然而，该成年男性仍为COVID-19阴性。

实施例5接种针对COVID-19的减毒的脊髓灰质炎活疫苗

在2020年12月的第一周，一个家庭的所有成年人除一怀孕的女性外均接种了2滴OPV溶液。在新年家庭聚会后，该怀孕的女性感染了COVID-19并具有轻微症状，而与她同住的丈夫被检测为COVID-19阴性并且没有COVID-19的症状。

实施例6重组RDRP的制备

从由SARS-CoV-2病毒RNA逆转录得到的SARS-CoV-2 cDNA中通过PCR扩增出SARS-CoV-2 RDRP基因编码区，并将其克隆到

昆虫细胞表达载体pADX50中。测序确认后，将纯化的载体瞬时转染到昆虫细胞系Schneider 2(S2)中。在经过ADX诱导剂诱导后，通过亲和Ni-NTA色谱柱纯化表达的RDRP蛋白，并通过DETA琼脂糖凝胶色谱法进一步纯化。

实施例7使用Western Blot分析人抗SARS-CoV-2 RDRP抗体

将1个重组脊髓灰质炎病毒RDRP蛋白(SEQ ID NO：1)和2个重组SARS-CoV-2 RDRP蛋白(SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3)与SDS-PAGE上样缓冲液混合，并在蛋白凝胶上进行电泳分离。通过电泳将凝胶上的蛋白转移到硝酸纤维素膜上后，用5％BSA封闭膜，然后用稀释的待分析的人血清样品处理30分钟。清洗膜，并与与HRP酶缀合的山羊抗人IgG/IgA/IgM孵育30分钟。再清洗膜，并用PIERCE^TMECL Western blotting底物处理以产生化学发光信号，对其进行检测和分析。使用该试验分析了四名受试者，结果总结在表1中，其中阳性对照为最近接受了

加强剂量的受试者。

表1

实施例8使用ELISA法分析人抗SARS-CoV-2 RDRP抗体

将一重组脊髓灰质炎病毒RDRP蛋白(SEQ ID NO：1)和两种重组SARS-CoV-2 RDRP蛋白(SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3)分别包被在ELISA板的孔上，具体地，将含有上述蛋白中某一种蛋白(100μL)的包被缓冲液(100mM碳酸钠)加入到孔中。将ELISA板在室温下孵育过夜或在37℃下孵育4小时，然后用5％ BSA的磷酸盐缓冲盐水溶液封闭。将待分析的稀释的人血清或血浆添加到孔中，并将该ELISA板在室温下孵育。用ELISA洗涤缓冲液洗涤该ELISA板后，将该ELISA板与与HRP酶缀合的山羊抗人IgG/IgA/IgM孵育。添加TMB底物。通过添加2M硫酸停止反应。用ELISA酶标仪读取该ELISA板。分析了四名人类受试者的抗-SARS-CoV-2RDRP抗体，结果总结在表2中。

另外对来自成年人类受试者的69个血清样品进行了抗-SARS-CoV-2 RDRP抗体分析，其中48个是接种脊髓灰质炎病毒疫苗前的样品，21个是接种脊髓灰质炎病毒疫苗后的样品。为了分析，每个血清样品按1:250稀释。结果如图1所示。为进行比较，类似地，同时对57个儿童受试者的血清样本进行了抗SARS-CoV-2 RDRP抗体分析，其中40个为流行病前的样本，17份为流行病样本。结果如图2所示。

表2

实施例9针对活SARS-CoV-2的抗病毒活性

测试了四个血清样本(样本1、2、3和4)针对活SARS-CoV-2(MEX-BC2/2020菌株)的抗病毒活性。样本1是来自一个5岁以下的个体的血清样本。样本2是来自一个5岁以下的个体的血清样本。样品3是来自一个43岁的女性个体的血清样本，她于2020年6月接受了

的加强剂量。样品4是来自一个47岁的男性个体的血清样本，他尚未接受加强剂量。使用两种不同的检测方案(方案1和2)来评估抗病毒活性。

抗病毒试验-方案1:

为了评估针对SARS-CoV-2(MEX-BC2/2020)的抗病毒活性，通过在存在或不存在血清样品的情况下感染Vero E6细胞来进行基于细胞病变效应(Cytopathic Effect,CPE)的抗病毒试验。感染4天后，细胞的感染会导致明显的细胞病变效应和细胞死亡。在该试验中，在存在血清样品的情况下，CPE降低的情况用于确定其抗病毒活性。同时，对每个血清样本并行进行生存力试验。

Vero E6细胞在含10％胎牛血清(FBS)的DMEM中培养。接种细胞并培养24h，然后与血清样本预培养。从细胞中取出细胞培养液后，将连续稀释的各血清样本加入细胞中，在加湿培养箱中于37℃下培养1小时。然后用重悬于含2％FBS的DMEM中的病毒接种物与细胞接触。预先滴定确定病毒接种物的量，以使得具有抗SARS-CoV-2活性的抗病毒物产生线性抑制反应。在存在病毒接种物和血清样品的情况下孵育细胞96h。然后使用中性红摄取试验测定细胞活力。

感染3天后在显微镜下监测病毒诱导的CPE，并在第4天，用中性红对细胞进行染色以测定细胞活力。活细胞的溶酶体中含有中性红。摄取依赖于活细胞维持溶酶体内pH值低于细胞质的能力。这个过程需要ATP。在溶酶体内，染料带电并保留。在用中性红(0.033％)孵育3小时后，洗涤额外的染料，然后用含有50％乙醇和1％乙酸的溶液提取溶酶体所摄取的中性红15min，以监测在540nm处的吸光度。

使用连续2倍稀释的稀释液对各血清样本进行重复评估。对照物包括未感染的细胞(“模拟感染”)和仅添加媒介物的感染细胞。恢复期的患者(COV(+))和GS-441524的阳性血浆的全曲线作为阳性对照抑制组。GS-441524是瑞德西韦(remdesivir)的主要代谢产物，瑞德西韦是一种广谱抗病毒物，可阻断SARS-CoV-2的RNA聚合酶。

计算感染细胞中(仅存在媒介物的情况下)观察到的在540nm处的平均吸光度(A540)，然后从所有样本中减去以确定由病毒诱导的CPE的抑制作用。然后，在减去在感染细胞中观察到的吸光度信号后，将数据点标准化为未感染细胞中观察到的平均A540信号(“模拟”)。在基于中性红CPE的试验中，未感染的细胞保持活力，并且对染料的摄取水平高于非活细胞。在没有抗病毒剂的情况下，病毒诱导的CPE杀死感染的细胞并导致较低的A540(该值等于0％抑制作用)。相比之下，与抗病毒剂(COV(+)或GS-441524)共培养可防止病毒诱导的CPE并使得吸光度水平与在未感染细胞中观察到的水平相近。感染细胞的细胞活力的完全恢复意味着对病毒复制的100％抑制。

抗病毒试验-方案2:

为了评估针对SARS-CoV-2(MEX-BC2/2020)的抗病毒活性，通过在存在或不存在血清样品的情况下感染Vero E6细胞来进行基于CPE的抗病毒试验。感染4天后，细胞的感染会导致明显的细胞病变效应和细胞死亡。在该试验中，在存在血清样本的情况下CPE的减少用于确定其抗病毒活性。同时，对每个血清样本并行进行生存力试验。

Vero E6细胞在含10％胎牛血清(FBS)的DMEM中培养。将细胞接种并培养24小时，然后与病毒预培养。在从细胞中取出细胞培养物后，将重悬浮于含2％FBS的DMEM中的病毒接种物与细胞接触，在加湿培养箱中于37℃下培养3h。预先滴定确定病毒接种物的量，以使得具有抗SARS-CoV-2活性的抗病毒物产生线性抑制反应。然后将感染细胞添加到连续稀释的各血清样本中。在存在病毒接种物和血清样本的情况下培养细胞96h，然后使用中性红摄取试验测定细胞活力。

感染3天后在显微镜下监测病毒诱导的CPE，并在第4天，用中性红对细胞进行染色以测定细胞活力。活细胞的溶酶体中含有中性红。摄取依赖于活细胞维持溶酶体内pH值低于细胞质的能力。这个过程需要ATP。在溶酶体内，染料带电并保留。在用中性红(0.033％)培养3小时后，洗涤额外的染料，然后用含有50％乙醇和1％乙酸的溶液提取溶酶体所摄取的中性红15min，以监测在540nm处的吸光度。

活力试验:

将未感染细胞与抗病毒试验中使用的8种浓度的血清样本共同培养。培养的温度和培养的持续时间模仿了预防病毒诱导CPE试验的条件，并使用与抗病毒试验相同的中性红摄取法评价细胞活力。通过测量在540nm处的吸光度来监测活力的程度。分析数据时，将所有数据点减去从没有细胞的孔中获得的背景水平。吸光度读出值以与仅用媒介物处理的未感染细胞中观察到的平均信号的百分比表示。

结果:

在1:8和1:32稀释度下，观察到样本1和3的抗病毒作用。与病毒吸附后添加血清样本(方案2)相比，血清样本与Vero E6细胞预培养(方案1)的抗病毒作用更强。在方案1中，与未感染的细胞相比，样本2和3的中性红摄取水平分别达到约25％和约40％。如预期的那样，方案1中的样本2和4没有显示出对病毒诱导的CPE的显著抑制。

当用方案2评估血清样本时，样品4中观察到对CPE的一些预防，但是中性红摄取仅达到在未感染细胞中观察到的水平的25-30％。当病毒吸附后添加血清样本时，在样品1、2和3中未观察到效果。

在各血清样本的评价浓度下，活力试验中未观察到细胞毒性。

本发明描述的序列在下面的序列表中提供。

序列表

*****

本发明提供的上述实施例是为了给本领域普通技术人员提供关于如何制造和使用所要求保护的实施方案的完整公开和描述，并且不旨在限制本发明所公开的内容的范围。对于本领域技术人员来说显而易见的修改应该在以下权利要求的范围内。本说明书中引用的所有出版物、专利和专利申请通过引用结合在本发明中，就像每个这样的出版物、专利或专利申请被具体和单独地表明通过引用结合在本发明一样。

序列表

<110> 谢七一

<120> 接种脊髓灰质炎疫苗对抗冠状病毒

<140> PCT/US2021/014253

<150> 63/008,664

<151> 2020-04-11

<150> 63/010,678

<151> 2020-04-15

<150> 63/013,561

<151> 2020-04-22

<150> 17/098,449

<151> 2020-11-15

<160> 4

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 430

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

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<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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Gly Val Pro Phe Val Val Ser Thr Gly Tyr His Phe Arg Glu Leu Gly

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Val Val His Asn Gln Asp Val Asn Leu His Ser Ser Arg Leu Ser Phe

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370 375 380

Gly Asn Leu Leu Leu Asp Lys Arg Thr Thr Cys Phe Ser Val Ala Ala

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Leu Thr Asn Asn Val Ala Phe Gln Thr Val Lys Pro Gly Asn Phe Asn

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<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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595 600

Claims

1.一种脊髓灰质炎疫苗在(i)防止人感染冠状病毒科病毒，(ii)诱导人针对冠状病毒科病毒的保护性免疫应答，(iii)诱导人针对由冠状病毒科病毒感染引起的严重急性呼吸综合症的保护性免疫应答，或(iv)减轻人体内由冠状病毒科病毒引起的传染病的一种或多种症状的严重程度中的用途。

2.根据权利要求1所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述脊髓灰质炎疫苗用于防止人被冠状病毒科病毒感染。

3.根据权利要求1或2所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述冠状病毒科病毒是冠状病毒亚科病毒。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述冠状病毒科病毒是严重急性呼吸综合症冠状病毒-1、严重急性呼吸综合症冠状病毒-2，或中东呼吸综合症相关冠状病毒。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述冠状病毒科病毒是严重急性呼吸综合症冠状病毒-2。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述脊髓灰质炎疫苗是灭活的脊髓灰质炎疫苗。

7.根据权利要求6所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中灭活的脊髓灰质炎疫苗包含灭活的1型(Mahoney)脊髓灰质炎病毒、灭活的2型(MEF-1)脊髓灰质炎病毒、灭活的3型(Saukett)脊髓灰质炎病毒、或其混合物。

8.根据权利要求6或7所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述灭活的脊髓灰质炎疫苗包括灭活的1型脊髓灰质炎病毒、灭活的2型脊髓灰质炎病毒和灭活的3型脊髓灰质炎病毒；或者所述灭活的脊髓灰质炎疫苗包括约40D抗原单位的灭活的1型脊髓灰质炎病毒，约8D抗原单位的灭活的2型脊髓灰质炎病毒，和约32D抗原单位的灭活的3型脊髓灰质炎病毒。

9.根据权利要求1至5中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述脊髓灰质炎疫苗是减毒的脊髓灰质炎活疫苗。

10.根据权利要求9所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述减毒的脊髓灰质炎活疫苗包括Sabin脊髓灰质炎病毒I、Sabin脊髓灰质炎病毒II、Sabin脊髓灰质炎病毒III、或其混合物。

11.根据权利要求9或10所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述减毒的脊髓灰质炎活疫苗包括Sabin脊髓灰质炎病毒I、Sabin脊髓灰质炎病毒II和Sabin脊髓灰质炎病毒III；或者

所述减毒的脊髓灰质炎活疫苗包括具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒I，具有约10⁵的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒II和具有约10⁶的CCID₅₀的Sabin脊髓灰质炎病毒III。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述脊髓灰质炎疫苗配制成口服或胃肠外给药。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述脊髓灰质炎疫苗配制成口服给药。

14.根据权利要求1至12中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述脊髓灰质炎疫苗配制成胃肠外给药。

15.根据权利要求1至12和14中任一项所述的脊髓灰质炎疫苗的用途，其中所述脊髓灰质炎疫苗配制成皮内、肌内、或皮下给药。