CN115683697A - 一种植物韧皮部组织切片方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种植物韧皮部组织切片方法，属于植物组织实验领域。本方法使用聚苯乙烯溶液，在切片前涂覆于植物组织样本表面形成薄膜，在植物组织切片过程中起到支撑和保护作用，减少了切片过程中植物韧皮部内皮和外皮脱离现象和切片破损的产生，有利于形成完整的切片，且使用材料易于获取。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织实验领域，具体为一种植物韧皮部组织切片方法。
背景技术
植物组织切片是通过徒手切取或用切片机切取的动植物组织薄片。供光学显微镜观察用的植物组织切片，其厚度一般为5-20微米，其通常采用石蜡包埋切片制作法制作。石蜡包埋切片制作法，包括以下步骤：(I)采集、分割样品：(2)杀死与同定：利用药剂如F.A.A固定液等迅速把样品细胞杀死。(3)脱水：用脱水剂如酒精等除去样品组织巾的水分；(4)透明：用透明剂如二甲苯、氛仿等将脱水剂从样品中除去，使样品透明；(5)浸蜡：用包埋剂石蜡逐渐除去样品的透明剂；(6)包埋：将样品放入包理盒，用包埋剂石蜡包埋，然后将包埋盒放置低溢下冷却，制成蜡块；(7)修块，按照所需的切面切小蜡块，直至观察到样品切面；(8)切片用切片机切出符合要求的切片。上述方法适用于普通较易制得的植物组织，对于植物韧皮部组织，由于其组织细胞比较疏松，存在内皮和外皮两组部分，各部分组织细胞的硬度有较大差异，使用常规石蜡包埋切片方法，切片过程中植物韧皮部内皮和外皮容易发生脱离，且切片容易发生破损无法形成完整的组织切片，影响实验和观察效果。
现有技术关于植物韧皮部组织切片方法研究如下：
如专利CN 105973673 B公开了一种桉树组织的石蜡切片方法。采用了传统的石蜡切片方法，包括取材和固定、洗涤、脱水、透明、透蜡、包埋、切片、展片、贴片和烤片、脱蜡复水、染色、脱水和复染、封片的流程。使用完全无毒的TO透明剂代替二甲苯，改善了传统石蜡制备的有毒有害问题。但是，并不能解决植物组织存在各个区域细胞软硬程度有区别，植物组织进行切片时，容易破碎的问题。
又如专利CN 106525530 B公开了种树木茎干组织的石蜡切片方法公开了一种树木茎干组织的石蜡切片方法。为了解决树木茎干组织存在韧皮部、形成层和木质部三者因硬度不一致而导致切片过程中组织易碎等问题，将软化处理分为两步操作，一是在组织固定后，增加用乙醇/甘油混合液软化组织的操作，二是在包埋粗切削后，增加用温水浸泡的操作，以软化待切组织。但是，由于统一的软化处理，无法区分韧皮部、形成层和木质部。所以，后期又增加了染色和封片步骤，步骤繁杂、花费的时间长。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种植物韧皮部组织切片方法，具备无需脱蜡过程，减少切片过程组织发生破损的优点，解决了现有切片方法的切片过程中植物韧皮部内皮和外皮容易发生脱离，且切片容易发生破损无法形成完整的组织切片问题。
为了解决上述问题，本发明提供了一种植物韧皮部组织切片方法，包括以下步骤：
(1)取植物韧皮部组织修整成试样，将试样用乙醇水溶液浸泡后，取出试样，再用乙二胺水溶液浸润做软化处理，得到软化后的试样；
(2)将软化后的试样取出，用流动的水冲洗，去除试样表面残留的乙二胺水溶液，得到冲洗后的试样；
(3)将冲洗后的试样依次置于浓度由低到高的聚乙二醇水溶液和熔融的聚乙二醇中浸润，得到脱水后的试样；
(4)用熔融的聚乙二醇包埋脱水后的试样，得到被聚乙二醇包埋的试样；
(5)将聚苯乙烯磨制粉末状，用乙酸丁酯溶解聚苯乙烯粉末得到聚苯乙烯溶液；
(6)修剪被聚乙二醇包埋的试样，使被聚乙二醇包埋的试样需要观察的部位表面暴露，在被聚乙二醇包埋的试样的暴露部位表面均匀涂覆步骤(5)中制得的聚苯乙烯溶液，静置、干燥，使得聚苯乙烯溶液在被聚乙二醇包埋的试样暴露部位表面形成薄膜；
(7)使用组织切片机进行切片，得到植物韧皮部组织切片；
(8)将组织切片置于纯水中，使组织切片上的聚乙二醇溶解，得到去除聚乙二醇的组织切片；
(9)将去除聚乙二醇的组织切片置于载玻片上，滴加乙酸丁酯浸润组织切片，使组织切片表面的薄膜溶解；溶解完全后，除去组织切片周边的液体，得到可用于显微观察的组织切片。
优选地，所述(1)中，乙醇水溶液中乙醇的浓度为70-80wt％(即100g乙醇水溶液中含有乙醇70-80g)；浸泡试样的时间为10-30min。
优选地，所述(1)中，乙二胺水溶液中乙二胺的浓度为8wt％(即100g乙二胺水溶液中含有乙二胺8g)；浸润试样的时间为1-4天。
优选地，所述(3)中，浓度由低到高的聚乙二醇水溶液包括20wt％的聚乙二醇水溶液(即100g聚乙二醇水溶液中含有聚乙二醇20g)、40wt％的聚乙二醇水溶液(即100g聚乙二醇水溶液中含有聚乙二醇40g)、80wt％的聚乙二醇水溶液(即100g聚乙二醇水溶液中含有聚乙二醇80g)。
优选地，用20wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为0.5-1h；用40wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1-1.5h；用80wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1-2h。
优选地，用熔融的聚乙二醇浸润试样的时间为为1-2h。
优选地，所述(3)中，每次浸润后的试样均在温度为60℃的烘箱中加热24h。
优选地，所述(3)和(4)中的聚乙二醇包括聚乙二醇2000；
所述聚乙二醇2000的分子量为1800-2200，熔点为49-53℃。
优选地，所述(5)中，聚苯乙烯溶液时，聚苯乙烯粉末与乙酸丁酯的质量体积比为0.5-2.0g/1-2mL。
优选地，所述(9)中，乙酸丁酯的滴加速率为0.5mL/s。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明采用的切片方法，通过将聚苯乙烯溶解于乙酸丁酯，将该胶状液体涂覆在被包埋后的试样，干燥后在样品表面形成薄膜。薄膜形成后在试样表面形成张力，当试样使用切片机进行下一步切片时，形成的薄膜对切片的细胞形成保护的力，减少切片过程中组织细胞因为没有直接保护作用而受力破碎，造成切片破碎不完整。
除此以外，整个制作植物组织切片的流程相较于常规的制备过中，采用乙二胺作为植物组织软化剂，乙二胺相较于氢氟酸等传统软化剂，具有毒性小、无刺激气味等优点；用聚乙二醇作为脱水剂，相较于普遍采用的二甲苯，不仅没有毒性，而且通过反复浸置-烘干-浸置步骤，在浓度递增的聚乙二醇水溶液和聚乙二醇中，能够彻底的将植物组织切片中水分除去，更好的进行下一步的包埋步骤。
本方案使用聚苯乙烯溶液，在切片前在植物组织样本表面形成薄膜，在植物组织切片过程中起到支撑和保护作用，减少了切片过程中植物韧皮部内皮和外皮脱离现象和切片破损的产生，有利于形成完整的切片，且使用材料易于获取。
附图说明
图1为实施例1中枫香树韧皮部组织切片的显微图；
图2为实施例2中枫香树韧皮部组织切片的显微图；
图3为实施例3中枫香树韧皮部组织切片的显微图；
图4为实施例4中杨树韧皮部组织切片的显微图；
图5为实施例5中枫香树韧皮部组织切片的显微图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例公开一种枫香树韧皮部组织的切片方法，包括以下步骤：
1、取枫香树韧皮部组织修整成长1cm，宽0.5cm，高0.4cm的试样，将试样用70wt％的乙醇水溶液浸泡20min，取出试样，再用8wt％的乙二胺水溶液浸润软化处理3天，得到软化后的试样。
2、将软化后的试样取出，用流动的水冲洗，去除试样表面残留的乙二胺水溶液，得到冲洗后的试样。
3、将冲洗后的试样依次浸置于20wt％的聚乙二醇水溶液、40wt％的聚乙二醇水溶液、80wt％的聚乙二醇水溶液和熔融的聚乙二醇中浸润；20wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为0.5h；40wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1h；80wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1h；熔融的聚乙二醇浸润试样的时间为1h；每次浸润后的试样均在温度为60℃的烘箱中加热24h，最终得到脱水后的试样。
4、用熔融的聚乙二醇包埋脱水后的试样，直至聚乙二醇完全凝固，得到被聚乙二醇包埋的试样。
5、将聚苯乙烯磨制粉末状，每1g聚苯乙烯粉末中加入1mL乙酸丁酯，静置3小时，乙酸丁酯将聚苯乙烯溶解，形成聚苯乙烯溶液。
6、修剪被聚乙二醇包埋的试样，使被聚乙二醇包埋的试样需要观察的部位表面暴露，在被聚乙二醇包埋的试样的暴露部位表面均匀涂覆步骤5中制得的聚苯乙烯溶液，静置至聚苯乙烯溶液干燥，使得聚苯乙烯溶液在被聚乙二醇包埋的试样暴露部位表面形成薄膜。
7、使用组织切片机进行切片，得到组织切片。
8、将组织切片置于纯水中，使组织切片表面的聚乙二醇溶解，得到去除聚乙二醇的组织切片。
9、将去除聚乙二醇的组织切片置于载玻片上，用胶头滴管滴加乙酸丁酯浸润组织切片，使组织切片表面的薄膜溶解。其中，胶头滴管的滴加速率为0.5mL/s；溶解完全后，用胶头滴管吸取以除去组织切片周边的液体，得到可用于显微观察的组织切片。
实施例2
本实施例公开一种枫香树韧皮部组织的切片方法，包括以下步骤：
1、取枫香树韧皮部组织修整成长1cm，宽0.5cm，高0.4cm的试样，将试样用80wt％的乙醇水溶液浸泡10min，取出试样，再用8wt％的乙二胺水溶液浸润软化处理3天，得到软化后的试样。
2、将软化后的试样取出，用流动的水冲洗，去除试样表面残留的乙二胺水溶液，得到冲洗后的试样。
3、将冲洗后的试样依次浸置于20wt％的聚乙二醇水溶液、40wt％的聚乙二醇水溶液、80wt％的聚乙二醇水溶液和熔融的聚乙二醇中浸润；20wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1h；40wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1.5h；80wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为2h；熔融的聚乙二醇浸润试样的时间为2h；；每次浸润后的试样均在温度为60℃的烘箱中加热24h，最终得到脱水后的试样。
4、用熔融的聚乙二醇包埋脱水后的试样，直至聚乙二醇完全凝固，得到被聚乙二醇包埋的试样。
5、将聚苯乙烯磨制粉末状，每2g聚苯乙烯粉末中加入1mL乙酸丁酯，静置4小时，乙酸丁酯将聚苯乙烯溶解，形成聚苯乙烯溶液。
6、修剪被聚乙二醇包埋的试样，使被聚乙二醇包埋的试样需要观察的部位表面暴露，在被聚乙二醇包埋的试样的暴露部位表面均匀涂覆步骤5中制得的聚苯乙烯溶液，静置至聚苯乙烯溶液干燥，使得聚苯乙烯溶液在被聚乙二醇包埋的试样暴露部位表面形成薄膜。
7、使用组织切片机进行切片，得到组织切片。
8、将组织切片置于纯水中，使组织切片表面的聚乙二醇溶解，得到去除聚乙二醇的组织切片。
9、将去除聚乙二醇的组织切片置于载玻片上，用胶头滴管滴加乙酸丁酯浸润组织切片，使组织切片表面的薄膜溶解。其中，胶头滴管的滴加速率为0.5mL/s；溶解完全后，用胶头滴管吸取以除去组织切片周边的液体，得到可用于显微观察的组织切片。
实施例3
本实施例公开一种枫香树韧皮部组织的切片方法，包括以下步骤：
1、取枫香树韧皮部组织修整成长1cm，宽0.5cm，高0.4cm的试样，将试样用70wt％的乙醇水溶液浸泡20min，取出试样，再用8wt％的乙二胺水溶液浸润软化处理3天，得到软化后的试样。
2、将软化后的试样取出，用流动的水冲洗，去除试样表面残留的乙二胺水溶液，得到冲洗后的试样。
3、将冲洗后的试样依次浸置于20wt％的聚乙二醇水溶液、40wt％的聚乙二醇水溶液、80wt％的聚乙二醇水溶液和熔融的聚乙二醇中浸润；20wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为0.5h；40wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1h；80wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1.5h；熔融的聚乙二醇浸润试样的时间为1.5h；每次浸润后的试样均在温度为60℃的烘箱中加热24h，最终得到脱水后的试样。
4、用熔融的聚乙二醇包埋脱水后的试样，静置20min，直至聚乙二醇完全凝固，得到被聚乙二醇包埋的试样。
5、将聚苯乙烯磨制粉末状，每0.5g聚苯乙烯粉末中加入1mL乙酸丁酯，静置2.5小时，乙酸丁酯将聚苯乙烯溶解，形成聚苯乙烯溶液。
6、修剪被聚乙二醇包埋的试样，使被聚乙二醇包埋的试样需要观察的部位表面暴露，在被聚乙二醇包埋的试样的暴露部位表面均匀涂覆步骤5中制得的聚苯乙烯溶液，静置至聚苯乙烯溶液，使得聚苯乙烯溶液在被聚乙二醇包埋的试样暴露部位表面形成薄膜。
7、使用组织切片机进行切片，得到组织切片。
8、将组织切片置于纯水中，使组织切片表面的聚乙二醇溶解，得到去除聚乙二醇的组织切片。
9、将去除聚乙二醇的组织切片置于载玻片上，用胶头滴管滴加乙酸丁酯浸润组织切片，使组织切片表面的薄膜溶解。其中，胶头滴管的滴加速率为0.5mL/s；溶解完全后，用胶头滴管吸取以除去组织切片周边的液体，得到可用于显微观察的组织切片。
实施例4
本实施例公开一种杨树韧皮部组织的切片方法，包括以下步骤：
1、取杨树韧皮部组织修整成长1cm，宽0.5cm，高0.4cm的试样，将试样用80wt％的乙醇水溶液浸泡30min，取出试样，再用8wt％的乙二胺水溶液浸润软化处理2天，得到软化后的试样。
2、将软化后的试样取出，用流动的水冲洗，去除试样表面残留的乙二胺水溶液，得到冲洗后的试样。
3、将冲洗后的试样依次浸置于20wt％的聚乙二醇水溶液、40wt％的聚乙二醇水溶液、80wt％的聚乙二醇水溶液和熔融的聚乙二醇中浸润；20wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为0.5h；40wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1h；80wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1.5h；熔融的聚乙二醇浸润试样的时间为1.5h；每次浸润后的试样均在温度为60℃的烘箱中加热24h，最终得到脱水后的试样。
4、用熔融的聚乙二醇包埋脱水后的试样，静置30min，直至聚乙二醇完全凝固，得到被聚乙二醇包埋的试样。
5、将聚苯乙烯磨制粉末状，每1g聚苯乙烯粉末中加入1mL乙酸丁酯，静置3小时，乙酸丁酯将聚苯乙烯溶解，形成聚苯乙烯溶液。
6、修剪被聚乙二醇包埋的试样，使被聚乙二醇包埋的试样需要观察的部位表面暴露，在被聚乙二醇包埋的试样的暴露部位表面均匀涂覆步骤5中制得的聚苯乙烯溶液，静置至聚苯乙烯溶液干燥，使得聚苯乙烯溶液在被聚乙二醇包埋的试样暴露部位表面形成薄膜。
7、使用组织切片机进行切片，得到组织切片。
8、将组织切片置于纯水中，使组织切片表面的聚乙二醇溶解，得到去除聚乙二醇的组织切片。
9、将去除聚乙二醇的组织切片置于载玻片上，用胶头滴管滴加乙酸丁酯浸润组织切片，使组织切片表面的薄膜溶解。其中，胶头滴管的滴加速率为0.5mL/s；溶解完全后，用胶头滴管吸取以除去组织切片周边的液体，得到可用于显微观察的组织切片。
对比例
本实施例公开一种枫香树韧皮部组织切片，包括以下步骤制备而成：
1、取枫香树韧皮部组织修整成长1cm，宽0.5cm，高0.4cm的试样，将试样用70wt％的乙醇水溶液浸泡20min，取出试样，再用8wt％的乙二胺水溶液浸润软化处理3天，得到软化后的试样。
2、将软化后的试样取出，用流动的水冲洗，去除试样表面残留的乙二胺水溶液，得到冲洗后的试样。
3、将冲洗后的试样依次浸置于20wt％的聚乙二醇水溶液、40wt％的聚乙二醇水溶液、80wt％的聚乙二醇水溶液和熔融的聚乙二醇中浸润；20wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为0.5h；40wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1h；80wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1.5h；熔融的聚乙二醇浸润试样的时间为1.5h；每次浸润后的试样均在温度为60℃的烘箱中加热24h，最终得到脱水后的试样。
4、用熔融的聚乙二醇包埋脱水后的试样，静置20min，直至聚乙二醇完全凝固，得到被聚乙二醇包埋的试样。
6、修剪被聚乙二醇包埋的试样，使被聚乙二醇包埋的试样需要观察的部位表面暴露，在被聚乙二醇包埋的试样的暴露部位表面均匀涂覆新鲜的鸡蛋清，静置至鸡蛋清干燥，使得鸡蛋清在被聚乙二醇包埋的试样暴露部位表面形成薄膜。
7、使用组织切片机进行切片，得到组织切片。
8、将组织切片置于纯水中，使组织切片表面的聚乙二醇溶解，得到去除聚乙二醇的组织切片。
9、将去除聚乙二醇的组织切片置于载玻片上，用胶头滴管滴加乙酸丁酯浸润组织切片，使组织切片表面的薄膜溶解。其中，胶头滴管的滴加速率为0.5mL/s；溶解完全后，用胶头滴管吸取以除去组织切片周边的液体，得到可用于显微观察的组织切片。
本发明各个实施例、对比例在步骤3中采用的聚乙二醇的分子量为2000；在步骤5中采用的聚苯乙烯固体为颗粒状；本发明各个实施例、对比例所制得的组织切片装片，使用Nikon-N550L光学显微镜在X10倍目镜下进行观察。
实施例1-4得到的植物组织切片试样的显微图片分别对应图1-4、对比例得到的植物组织切片试样的显微图片对应图5。
其中，图1的枫香树植物韧皮部的切片组织采用1g的聚苯乙烯粉末和1mL乙酸丁酯进行混合溶解，得到涂覆被聚乙二醇包埋的聚苯乙烯溶液；该比例是聚苯乙烯和乙酸丁酯的最佳比例，得到的切片形态完整清晰；而实施例2中，聚苯乙烯为2g、乙酸丁酯为1mL，由于溶剂含量较小，聚苯乙烯分散不均匀、容易产生团聚现象，聚苯乙烯溶液涂覆在被聚乙二醇包埋的试样表面，切割中受力不均，导致组织切片试样效果不如图1；对于图3，聚苯乙烯为0.5g、乙酸丁酯为1mL，由于聚苯乙烯含量偏低，涂覆浓度不够，导致在切片过程中未实现对薄膜的有力支撑，从而得到的切片样品形态不佳；实施例4更换韧皮部组织切片所采取的树种，但是采用1g的聚苯乙烯粉末和1mL乙酸丁酯的最佳比例进行混合溶解，得到的聚苯乙烯溶液对于杨树的韧皮部组织切片仍然能够进行较好的保护，所以可以获得形态清晰完整的杨树韧皮部组织切片。
而对于图5，采用新鲜的鸡蛋清涂覆在被聚乙二醇包埋的试样表面，相较于聚苯乙烯和乙酸丁酯的混合形成的聚苯乙烯溶液，形成的薄膜不能对切片过程起到较好的支撑和保护作用，显微图片的韧皮部组织细胞存在破损现象。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种植物韧皮部组织切片方法，包括以下步骤：
(1)取植物韧皮部组织修整成试样，将试样用乙醇水溶液浸泡后，取出试样，再用乙二胺水溶液浸润做软化处理，得到软化后的试样；
(2)将软化后的试样取出，用流动的水冲洗，去除试样表面残留的乙二胺水溶液，得到冲洗后的试样；
(3)将冲洗后的试样依次置于浓度由低到高的聚乙二醇水溶液和熔融的聚乙二醇中浸润，得到脱水后的试样；
(4)用熔融的聚乙二醇包埋脱水后的试样，得到被聚乙二醇包埋的试样；
(5)将聚苯乙烯磨制粉末状，用乙酸丁酯溶解聚苯乙烯粉末得到聚苯乙烯溶液；
(6)修剪被聚乙二醇包埋的试样，使被聚乙二醇包埋的试样需要观察的部位表面暴露，在被聚乙二醇包埋的试样的暴露部位表面均匀涂覆步骤(5)中制得的聚苯乙烯溶液，静置、干燥，使得聚苯乙烯溶液在被聚乙二醇包埋的试样暴露部位表面形成薄膜；
(7)使用组织切片机进行切片，得到植物韧皮部组织切片；
(8)将组织切片置于纯水中，使组织切片上的聚乙二醇溶解，得到去除聚乙二醇的组织切片；
(9)将去除聚乙二醇的组织切片置于载玻片上，滴加乙酸丁酯浸润组织切片，使组织切片表面的薄膜溶解；溶解完全后，除去组织切片周边的液体，得到可用于显微观察的组织切片。
2.根据权利要求1所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，所述(1)中，乙醇水溶液中乙醇的浓度为70-80wt％；浸泡试样的时间为10-30min。
3.根据权利要求1所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，所述(1)中，乙二胺水溶液中乙二胺的浓度为8wt％；浸润试样的时间为1-4天。
4.根据权利要求1所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，所述(3)中，浓度由低到高的聚乙二醇水溶液包括20wt％的聚乙二醇水溶液、40wt％的聚乙二醇水溶液、80wt％的聚乙二醇水溶液。
5.根据权利要求4所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，用20wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为0.5-1h；用40wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1-1.5h；用80wt％的聚乙二醇水溶液浸润试样的时间为1-2h。
6.根据权利要求5所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，用熔融的聚乙二醇浸润试样的时间为为1-2h。
7.根据权利要求1所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，所述(3)中，每次浸润后的试样均在温度为60℃的烘箱中加热24h。
8.根据权利要求1所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，所述(3)和(4)中的聚乙二醇包括聚乙二醇2000。
9.根据权利要求1所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，所述(5)中，聚苯乙烯溶液时，聚苯乙烯粉末与乙酸丁酯的质量体积比为0.5-2.0g/1-2mL。
10.根据权利要求1所述的一种植物韧皮部组织切片方法，其特征在于，所述(9)中，乙酸丁酯的滴加速率为0.5mL/s。
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| CN202211102302.0A Pending CN115683697A (zh) | 2022-09-09 | 2022-09-09 | 一种植物韧皮部组织切片方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115683697A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116840020A (zh) * | 2023-08-30 | 2023-10-03 | 广东省农业科学院环境园艺研究所 | 一种软硬相接植物组织石蜡切片的制备方法 |
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2022
- 2022-09-09 CN CN202211102302.0A patent/CN115683697A/zh active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116840020A (zh) * | 2023-08-30 | 2023-10-03 | 广东省农业科学院环境园艺研究所 | 一种软硬相接植物组织石蜡切片的制备方法 |
| CN116840020B (zh) * | 2023-08-30 | 2023-11-17 | 广东省农业科学院环境园艺研究所 | 一种软硬相接植物组织石蜡切片的制备方法 |
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