CN115669934A - 一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品及应用 - Google Patents
一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本技术方案公开了一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品及应用。该抗过敏功能性食品制作中鸡蛋卵清白蛋白:木犀草素的浓度比为10μM:500μM；木犀草素为抗敏成分；鸡蛋卵清蛋白作为载体去负载木犀草素进入人体，进而被人体吸收，发挥生物学活性缓解由牛奶导致的过敏症状。本技术方案解决的技术问题是：如何利用木犀草素形成抗过敏功能性食品。
Description
技术领域
本发明涉及一种抗过敏功能性食品，具体的是说是一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品，本发明还涉及上述食品的应用。
背景技术
食物过敏是一种常见的过敏性疾病 ,其特征是由过敏原驱动的免疫紊乱进而引起超敏反应，以呼吸道阻塞(哮喘、胸闷心悸、呼吸困难等)、皮肤过敏(过敏性皮炎、荨麻疹等)和胃肠道疾病(胃痛、腹痛、腹泻等)等为主要临床表现，严重者可能会过敏性休克甚至死亡。牛奶是八大食物致敏原之一,能引起严重的过敏反应。牛奶主要过敏原为β-乳球蛋白（β-Lg）。
目前对该疾病的治疗方法主要有抗组胺药物，过敏反应介质阻释药和抑制抗原抗体反应药物等，可缓解过敏症状，临床常用的主要是组胺H1受体拮抗药，如苯海拉明、异丙嗪、氯苯那敏等，是目前应用最广泛的非特异性异常抗变态反应药，虽有一定的疗效，但会产生因中枢抑制作用引起的头痛和嗜睡以及抗胆碱作用所致的口干、视力模糊、排尿困难、便秘等副作用，长期服用不仅会引起药物失效，严重者还会出现种种不良反应，甚至毒副作用。并且部分人群对此类药物敏感性较高，不宜使用。木犀草素（luteolin）是一种天然黄酮类化合物，存在于多种植物中。具有多种药理活性，如消炎、抗过敏、降尿酸、抗肿瘤、抗菌、抗病毒等，多以糖苷的形式存在于多种植物中，这些植物以全叶青兰、辣椒、野菊花、金银花、紫苏含量较高。但是，由于其溶解性问题，难以被很好的利用，且没有很好的载体将其传送到人体内，加以应用。
经检索，中国专利申请号2017110601272公开了一种木犀草素-甘草酸共轭牛血清白蛋白载药纳米粒及其制备方法和应用，其通过甘草酸化学修饰牛血清白蛋白获得甘草酸共轭牛血清白蛋白的载药纳米粒系统，并使木犀草素包被于所述的甘草酸共轭牛血清白蛋白的载药纳米粒系统内形成；其中，具有肝靶向性的甘草酸共轭牛血清白蛋白的载药纳米粒作为载体，木犀草素作为抗肝癌原料药，该专利作用是作为一种药品。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品，解决的技术问题是：如何利用木犀草素形成抗过敏功能性食品。
本发明的另一个目的是提供上述食品的应用。
一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品，食品制作中鸡蛋卵清白蛋白:木犀草素的浓度比为10μM:500μM；木犀草素为抗敏成分；鸡蛋卵清蛋白作为载体去负载木犀草素进入人体，进而被人体吸收，发挥生物学活性缓解由牛奶导致的过敏症状。
所述食品制作中鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的混合时间为2小时，摇床转速为120转/分钟。
所述木犀草素的剂量为5-20 mg/kg .bw。
一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品的应用，其可应用于制备缓解由β-Lg过敏原引起的食物过敏的过敏反应保健食品或抗过敏药物。
一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品的应用，其可应用于制备缓解由β-Lg过敏原引起的特异性皮炎的过敏反应保健食品或抗过敏药物。
一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品的应用，其可应用于制备缓解由β-Lg过敏原引起的β-Lg特异性IgE含量升高的过敏反应保健食品或抗过敏药物。
本发明的有益效果是：
本发明对基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素进行了研究，利用动物实验，采用皮肤早期暴露过敏原结合食物过敏小鼠模型，从特异性皮炎病变程度、过敏症状和机体的免疫应答等方面考察基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素在特定条件下结合干预对模型小鼠的影响，实验研究发现：相比于模型组，基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素可一定程度改善过敏小鼠特异性皮炎病变程度和过敏反应给小鼠生长发育带来的影响，降低过敏小鼠血清中特异性抗体的水平。
附图说明
图1为实施例1中造模期间小鼠的体重变化；
图2为实施例1中小鼠血清中β-Lg-特异性IgE的水平；
图3为实施例1中小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞分化水平。
图4为实施例2中造模期间小鼠的体重变化；
图5为实施例2中小鼠血清中β-Lg-特异性IgE的水平；
图6为实施例2中小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞分化水平。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解实施例是为了更好地解释本发明，不用于限制本发明。
本发明用到的小鼠经皮肤致敏的食物过敏模型是参照公开号为CN114010766A的专利中的一种小鼠经皮肤致敏的食物过敏模型的构建方法，并做了适当的修改。
实施例1：基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素在特定浓度条件下缓解小鼠食物过敏方面的应用
通过皮肤早期暴露β-Lg过敏原结合食物过敏的方法造模。将60只小鼠平均分为6组，每组6只小鼠，分别为空白组、MC903组、模型组、低鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和5 mg/kg .bw）、中鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）、高鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和20 mg/kg .bw）。所有小鼠均经过7天适应性喂养，从第8天开始每天相应灌胃生理盐水或者相应剂量的3’-唾液酸乳糖。造模过程包括致敏阶段(前14天)和激发阶段(后4天)，共18天。在致敏阶段：除空白组和MC903组外，每天上午为每只小鼠的双耳涂抹MC903乙醇溶液(浓度为0 .1mmol/L，涂抹量为双耳共20μL)，待小鼠双耳的乙醇自然风干后，再在双耳上涂抹含β-Lg的PBS溶液(浓度为10g/L，涂抹量为双耳共10μL)；对空白组小鼠，每天上午对每只小鼠的双耳仅涂抹相同剂量的不含β-Lg的PBS溶液；对MC903组小鼠，每天上午对每只小鼠的双耳涂抹MC903乙醇溶液，待乙醇自然风干后，再在双耳上涂抹不含β-Lg的PBS溶液；连续涂抹14天后，进入激发阶段。激发阶段：在致敏阶段结束的第二天上午，除空白组和MC903组外，对其他组别的每只小鼠灌胃含β-Lg的PBS溶液进行第一次激发；在致敏阶段结束的第五天下午，除空白组和MC903组外，对其他组别的每只小鼠灌胃含β-Lg的PBS溶液进行第二次激发；灌胃的β-Lg溶解在PBS(pH＝7 .4)溶液中，浓度为250g/L，每只小鼠灌胃量为200μL；对于空白组和MC903组，两次激发均灌胃不含β-Lg的PBS溶液。
实验方法：在动物实验期间，每天称量小鼠的体重，绘制体重变化曲线。第二次激发后次日，处死小鼠，收集血液，采用ELISA法测定小鼠血清中的特异性IgE/IgG1的水平。同时，取小鼠的脾脏于PBS中，进行流式细胞染色实验，观察并计算Th1/Th2细胞分化水平。
对本实施例得到的结果进行分析，结果如图1-图3所示：
(1) 造模期间小鼠的体重变化如图1所示：致敏阶段(0-14d)，空白组小鼠的体重稳定上升，其他组小鼠生长速率明显降低，其中MC903组和模型组小鼠平均体重明显下降，每日灌胃低鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和5 mg/kg .bw）的小鼠体重出现的下降，中鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）的小鼠体重呈现较低剂量组明显上升，且中鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）与高鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和20 mg/kg .bw）体重差别较小。激发阶段(14-18d)，模型组小鼠的平均体重仍在持续下降，每日灌胃中与高鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）的小鼠体重均未见明显下降，尽管生长速率较空白组有所降低，低鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和5 mg/kg .bw）下降较多。说明基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素能够传递木犀草素进小鼠体内发挥一定程度减轻过敏反应给小鼠生长发育带来的影响，尤其是在特定浓度下进行混合的鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg.bw）相比较能够最大程度上减轻过敏反应给小鼠生长发育带来的影响。
(2) 小鼠血清中β-Lg特异性IgE的水平如图2所示：过敏小鼠血清中特异性IgE的水平较空白组和MC903组明显升高。其中每日灌胃低、中、高鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素的小鼠血清中特异性IgE水平比模型组分别低了27.79％、41.52％和40.72％。
(3) 小鼠脾脏细胞中Th1/Th2细胞分化水平如图3所示：过敏小鼠的脾脏细胞中Th1/Th2细胞分化水平较空白组和MC903组明显降低，其中每日灌胃中鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素的小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞分化水平明显高于模型组和每日灌胃低鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素组，与高鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素组无显著性差异，说明以鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素能够传递木犀草素进小鼠体内发挥一定程度减轻过敏反应给小鼠脾脏细胞中Th1/Th2细胞分化水平，从而减轻小鼠的过敏反应症状，且中鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素组为最佳。
实施例2：基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素在特定时间条件下缓解小鼠食物过敏方面的应用
通过皮肤早期暴露β-Lg过敏原结合食物过敏的方法造模。将60只小鼠平均分为6组，每组6只小鼠，分别为空白组、MC903组、模型组、鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）、鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合0小时，0转/分钟和10mg/kg .bw）。所有小鼠均经过7天适应性喂养，从第8天开始每天相应灌胃生理盐水或者相应剂量的3’-唾液酸乳糖。造模过程包括致敏阶段(前14天)和激发阶段(后4天)，共18天。在致敏阶段：除空白组和MC903组外，每天上午为每只小鼠的双耳涂抹MC903乙醇溶液(浓度为0 .1mmol/L，涂抹量为双耳共20μL)，待小鼠双耳的乙醇自然风干后，再在双耳上涂抹含β-Lg的PBS溶液(浓度为10g/L，涂抹量为双耳共10μL)；对空白组小鼠，每天上午对每只小鼠的双耳仅涂抹相同剂量的不含β-Lg的PBS溶液；对MC903组小鼠，每天上午对每只小鼠的双耳涂抹MC903乙醇溶液，待乙醇自然风干后，再在双耳上涂抹不含β-Lg的PBS溶液；连续涂抹14天后，进入激发阶段。激发阶段：在致敏阶段结束的第二天上午，除空白组和MC903组外，对其他组别的每只小鼠灌胃含β-Lg的PBS溶液进行第一次激发；在致敏阶段结束的第五天下午，除空白组和MC903组外，对其他组别的每只小鼠灌胃含β-Lg的PBS溶液进行第二次激发；灌胃的β-Lg溶解在PBS(pH＝7 .4)溶液中，浓度为250g/L，每只小鼠灌胃量为200μL；对于空白组和MC903组，两次激发均灌胃不含β-Lg的PBS溶液。
实验方法：在动物实验期间，每天称量小鼠的体重，绘制体重变化曲线。第二次激发后次日，处死小鼠，收集血液，采用ELISA法测定小鼠血清中的特异性IgE/IgG1的水平。同时，取小鼠的脾脏于PBS中，进行流式细胞染色实验，观察并计算Th1/Th2细胞分化水平。
对本实施例得到的结果进行分析，结果如图4-图6所示：
(1) 造模期间小鼠的体重变化如图4所示：致敏阶段(0-14d)，空白组小鼠的体重稳定上升，其他组小鼠生长速率明显降低，其中MC903组和模型组小鼠平均体重明显下降，每日灌胃鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）的小鼠体重出现一定程度的增加，尽管生长速率较空白组有所降低，鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合0小时，0转/分钟和10 mg/kg .bw）的小鼠体重呈现明显下降。激发阶段(14-18d)，模型组小鼠的平均体重仍在持续下降，每日灌胃鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）的小鼠体重均未见明显下降，尽管生长速率较空白组有所降低；鸡蛋卵清白蛋白与木犀草素（混合0小时，0转/分钟和10 mg/kg .bw）的小鼠体重相比较前者呈现明显下。说明基于鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素基于鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素（混合2小时，120转/分钟和10 mg/kg .bw）能够传递木犀草素进小鼠体内发挥一定程度减轻过敏反应给小鼠生长发育带来的影响，尤其是与没有在特定时间下进行混合的鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素（混合0小时，0转/分钟和10 mg/kg .bw）相比较能够最大程度上减轻过敏反应给小鼠生长发育带来的影响。
(2) 小鼠血清中β-Lg特异性IgE的水平如图5所示：过敏小鼠血清中特异性IgE的水平较空白组和MC903组明显升高。其中每日灌胃鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素（混合2小时）的小鼠血清中特异性IgE水平比模型组低了39.83％,每日灌胃鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素（混合0小时）的小鼠血清中特异性IgE水平与模型组基本相一致。
(3) 小鼠脾脏细胞中Th1/Th2细胞分化水平如图6所示：过敏小鼠的脾脏细胞中Th1/Th2细胞分化水平较空白组和MC903组明显降低，其中每日灌胃鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素（混合2小时）的小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞分化水平明显高于模型组和每日灌胃鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素（混合0小时）组，说明以鸡蛋卵清白蛋白为载体的木犀草素能够传递木犀草素进小鼠体内发挥一定程度减轻过敏反应给小鼠脾脏细胞中Th1/Th2细胞分化水平，从而减轻小鼠的过敏反应症状。
Claims (6)
1.一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品，其特征在于：食品制作中鸡蛋卵清白蛋白:木犀草素的浓度比为10μM:500μM；木犀草素为抗敏成分；鸡蛋卵清蛋白作为载体去负载木犀草素进入人体，进而被人体吸收，发挥生物学活性缓解由牛奶导致的过敏症状。
2.根据权利要求1所述的一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品，其特征在于：所述食品制作中鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的混合时间为2小时，摇床转速为120转/分钟。
3.根据权利要求1所述的一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品，其特征在于：所述木犀草素的剂量为5-20 mg/kg .bw。
4.权利要求1至3任一项所述的一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品的应用，其特征在于：其可应用于制备缓解由β-Lg过敏原引起的食物过敏的过敏反应保健食品或抗过敏药物。
5.权利要求1至3任一项所述的一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品的应用，其特征在于：其可应用于制备缓解由β-Lg过敏原引起的特异性皮炎的过敏反应保健食品或抗过敏药物。
6.权利要求1至3任一项所述的一种基于鸡蛋卵清白蛋白和木犀草素的抗过敏功能性食品的应用，其特征在于：其可应用于制备缓解由β-Lg过敏原引起的β-Lg特异性IgE含量升高的过敏反应保健食品或抗过敏药物。
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