CN115515960A

CN115515960A - 氨基嘧啶环酰胺

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Publication number: CN115515960A
Application number: CN202180032686.0A
Authority: CN
Inventors: 安格丽卡·伯里尔; 卢克·格林; 克里斯蒂安·克拉默; 德米特里·马祖宁; 伊曼纽尔·皮纳德; 哈萨内·拉特尼
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2020-06-08
Filing date: 2021-06-07
Publication date: 2022-12-23
Also published as: WO2021249904A3; US20230123268A1; JP2023529638A; EP4161928A2; WO2021249904A2

Abstract

本发明提供了具有通式(I)的新型化合物，其中R¹、R²、R³和n如本文所定义；包含所述化合物的组合物；以及使用所述化合物的方法。

Description

氨基嘧啶环酰胺

本发明涉及用于在哺乳动物中进行治疗或预防的有机化合物，并且特别是涉及自粘蛋白(ATX)抑制剂(其为对溶血磷脂酸(LPA)产生的抑制剂并因此为LPA水平和相关信号传导的调节剂)，用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、呼吸系统的病症、血管和心血管病症、纤维化疾病、癌症、眼部病症、代谢病症、胆汁郁积和其他形式的慢性瘙痒以及急性和慢性器官移植排斥。

本发明提供了新型式(I)化合物，

其中

R¹选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C_3-8-环烷基，

iv)C_3-8-环烷基烷基，

v)C_1-6-烷氧基，

vi)C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基，

vii)杂环烷基，

viii)杂环烷基烷基，

ix)经取代的C_3-8-环烷基，

x)经取代的C_3-8-环烷基烷基，

xi)经取代的杂环烷基，

xii)经取代的杂环烷基烷基，

xiii)卤代-C_1-6-烷基，

xiv)羟基-C_1-6-烷基，

其中经取代的C_3-8-环烷基或经取代的杂环烷基被一个或多个选自H、C_1-6-烷基、卤素、羟基和C_1-6-羰基的取代基取代；

R²选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)卤素，

iii)卤代-C_1-6-烷基，

iv)C_1-6-烷基，

v)氰基，

其中R¹和R²中的至少一者并非H；

R³选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)卤素，

并且n为0或1，

或药用盐。

此外，本发明包括所有外消旋混合物、所有它们相应的对映异构体和/或光学异构体。

自粘蛋白(ATX)是分泌性酶，也称为外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶2或溶血磷脂酶D，其对于将溶血磷脂酰胆碱(LPC)转化为生物活性信号传导分子溶血磷脂酸(LPA)很重要。已经表明血浆LPA水平与ATX活性密切相关，并且ATX因此被认为是细胞外LPA的重要来源。使用原型ATX抑制剂的早期实验表明，此类化合物能够抑制小鼠血浆中的LPA合成活性。1970年代和1980年代初进行的工作证明LPA可以引发广泛的细胞应答，包括平滑肌细胞收缩、血小板活化、细胞增殖、趋化性等。LPA通过向若干G蛋白偶联受体(GPCR)的信号传导来介导其作用；第一成员最初被表示为Edg(内皮细胞分化基因)受体或心室区基因-1(vzg-1)，但现在称为LPA受体。原型组现在由LPA1/Edg-2/VZG-1、LPA2/Edg-4和LPA3/Edg-7组成。最近，已描述另外三种LPA受体LPA4/p2y9/GPR23、LPA5/GPR92和LPA6/p2Y5，这些受体与核苷酸选择性嘌呤能受体的关系比与原型LPA1-3受体的关系更密切。ATX-LPA信号传导轴参与大范围的生理和病理生理功能，包括例如神经系统功能、血管发育、心血管生理、生殖、免疫系统功能、慢性炎症、肿瘤转移和进展、器官纤维化以及肥胖和/或其他代谢疾病(诸如糖尿病)。因此，ATX活性增加和/或LPA水平增加、LPA受体表达改变和对LPA应答的改变可能有助于与ATX/LPA轴相关的许多不同病理生理病症的引发、进展和/或结果。

根据本发明，式(I)化合物或其药用盐和酯可用于治疗或预防与自粘蛋白的活性和/或溶血磷脂酸(LPA)的生物活性相关的疾病、病状或病症。

本文的式(I)化合物或其药用盐和酯抑制自粘蛋白活性并因此抑制LPA产生并调节LPA水平和相关信号传导。本文所述的自粘蛋白抑制剂可用作治疗或预防疾病或病症的药剂，在该药剂中有ATX活性和/或LPA信号传导参与、涉及疾病的病因学或病理学或以其他方式与至少一种疾病的症状相关。ATX-LPA轴已暗示牵涉例如血管生成、慢性炎症、自身免疫疾病、纤维化疾病、癌症和肿瘤转移和进展、眼部病症、代谢病症(诸如肥胖和/或糖尿病)、病症(诸如胆汁郁积或其他形式的慢性瘙痒)以及急性和慢性器官移植排斥。

本发明的目的是式(I)化合物及其上述盐和酯及其作为治疗活性物质的用途、制备所述化合物的方法、中间体、药物组合物、含有所述化合物的药物、其药用盐或酯、所述化合物、盐或酯用于治疗或预防与ATX活性和/或溶血磷脂酸(LPA)的生物活性相关的病状或病症的用途，特别是用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、呼吸系统的病症、血管和心血管病症、纤维化病症、癌症、眼部病症、代谢病症、胆汁郁积以及其他形式的慢性瘙痒和急性和慢性器官移植排斥反应的用途以及所述化合物、盐或酯用于生产用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、呼吸系统的病症、血管和心血管病症、纤维化疾病、癌症、眼部病症、代谢病症、胆汁郁积和其他形式的慢性瘙痒以及急性和慢性器官移植排斥的药物的用途。更特别地，式(I)化合物及其上述盐和酯以及其作为治疗活性物质的用途、制备所述化合物的方法、中间体、药物组合物、含有所述化合物的药物、其药用盐或酯、所述化合物、盐或酯用于治疗或预防眼部病症，更特别地是青光眼的用途。

术语“C_1-6-烷氧基”表示式-O-R′的基团，其中R′为C_1-6-烷基基团。C_1-6-烷氧基基团的示例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基。

术语“C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基”表示C_1-6-烷基基团，其中该C_1-6-烷基基团的至少一个氢原子被C_1-6-烷氧基基团取代。特定示例是甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、异丙氧基甲基和异丙氧基乙基。

术语“C_1-6-烷基”表示具有1至6个碳原子的单价直链或支链饱和烃基。在一些实施例中，如果没有另行说明，则烷基包含1至6个碳原子(C_1-6-烷基)或1至4个碳原子(C_1-4-烷基)。C_1-6-烷基的示例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基和戊基。特定烷基基团包括甲基、异丙基和叔丁基。当命名具有特定碳数的烷基残基时，可涵盖具有该碳数的所有几何异构体。因此，例如“丁基”可包括正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基，并且“丙基”可包括正丙基和异丙基。

术语“羰基”表示-C(O)-基团。

术语“氰基”表示-C≡N基团。

术语“C_3-8-环烷基”表示单环或多环饱和或部分不饱和的非芳族烃。在一些实施例中，除非另有说明，环烷基包含3至8个碳原子(C_3-8-环烷基)、3至6个碳原子(C_3-6-环烷基)或3至5个碳原子(C_3-5-环烷基)。在一些实施例中，环烷基是饱和单环或多环烃。在其他实施例中，环烷基包含一个或多个双键(例如稠合至芳基或杂芳基环的环烷基，或包含一个或两个双键的非芳族单环烃)。多环环烷基可包含螺环、稠合或桥接的多环部分，其中每个环为饱和或部分不饱和的非芳族烃。单环环烷基的示例是环丙基、环丁烷基、环戊基、环己基、羟基环丁基、二氟环丁基、二氟-甲基-环丁基和甲基环丙基。双环环烷基的示例是二氟螺庚烷基。

术语“环烷基烷基”表示其中烷基基团的至少一个氢原子已被环烷基基团代替的烷基基团。环烷基烷基的示例包括环丙基甲基、环丙基乙基、环丙基丁基、环丁基丙基、2-环丙基丁基、环戊基丁基、环己基甲基、环己基乙基和羟环丙基甲基。

术语“卤素”、“卤化物”和“卤代”在本文中可互换使用并且表示氟、氯、溴或碘。特定卤素是氟。

术语“卤代-C_1-6-烷氧基”表示C_1-6-烷氧基基团，其中该C_1-6-烷氧基基团的至少一个氢原子已被相同或不同的卤素原子代替。特定示例是二氟甲氧基、三氟甲氧基、二氟乙氧基和三氟乙氧基。

术语“卤代-C_1-6-烷基”表示C_1-6-烷基基团，其中该C_1-6-烷基基团的至少一个氢原子已被相同或不同的卤素原子代替。特定示例是氟乙基、二氟甲基、三氟甲基、二氟乙基、三氟乙基和2-氟-1-(氟甲基)乙基。

术语“杂环烷基”单独或组合表示具有4至9个环原子的单价饱和或部分不饱和的单环或双环体系，其包含1、2或3个选自N、O和S的杂原子，剩余的环原子是碳。双环意指由两个具有至少一个共同环原子的环组成。杂环烷基可以是饱和或不饱和的，并且除非另有说明，可包含5、6、7、8或9个环原子，其中环原子是指一个或多个环中的碳和杂原子的总和(例如，5元、6元、7元、8元或9元杂环烷基)。杂环烷基可包括包含1至5个环杂原子、1至4个杂原子、1至3个环杂原子、1或2个环杂原子或1个环杂原子的基团。在一些实施例中，杂环烷基包含一个环、两个环、三个环、四个环或更多，例如作为多环稠合体系。在一些实施例中，包含多个环的杂环烷基包括螺环体系，其中一个或多个环包含一个或多个杂原子。单环杂环烷基的示例是氧杂环丁烷基、甲基氧杂环丁烷基、四氢吡喃基、乙酰基哌啶基、四氢呋喃基。

术语“杂环烷基”表示烷基基团，其中该烷基基团的至少一个氢原子已被杂环烷基基团代替。杂环烷基烷基的示例包括氧杂环丁烷基甲基和(甲基氧杂环丁烷基)甲基。

术语“羟基”表示-OH基团。

术语“羟基-C_1-6-烷基”表示C_1-6-烷基基团，其中该C_1-6-烷基基团的一个氢原子被羟基基团代替。特定示例是羟甲基、羟乙基和羟甲基丙基。

术语“药用盐”是指保留游离碱或游离酸的生物效果和特性的那些盐，这些盐在生物学或其他方面不是不合需要的。这些盐用无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等(特别是盐酸)和有机酸诸如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲基磺酸、乙基磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、N-乙酰基半胱氨酸等形成。此外，这些盐可通过将无机碱或有机碱加入游离酸中来制备。衍生自无机碱的盐包括但不限于钠、钾、锂、铵、钙、镁盐等。衍生自有机碱的盐包括但不限于以下各项的盐：伯胺、仲胺和叔胺、取代胺(包括天然存在的取代胺)、环胺和碱性离子交换树脂(诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、赖氨酸、精氨酸、N-乙基哌啶、哌啶、聚亚胺树脂等)。特定式(I)化合物的药用盐为盐酸盐、甲磺酸盐和柠檬酸盐。

“药用酯”意指通式(I)的化合物可在官能团处衍生化以提供能够在体内转化回母体化合物的衍生物。此类化合物的示例包括生理上可接受的和代谢不稳定的酯衍生物，诸如甲氧基甲酯、甲硫基甲酯和新戊酰氧基甲酯。另外，类似于代谢不稳定的酯，能够在体内产生通式(I)的母体化合物的通式(I)的化合物的任何生理上可接受的等同形式均在本发明的范围内。

缩写uM意指微摩尔，并且与符号μM等同。

缩写uL意指微升，并且与符号μL等同。

缩写ug意指微克，并且与符号μg等同。

式(I)的化合物可含有若干不对称中心，并且能以光学纯对映异构体、对映异构体的混合物(例如外消旋体)、光学纯非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构外消旋体或非对映异构外消旋体的混合物的形式存在。

根据Cahn-Ingold-Prelog惯例，非对称碳原子可以是“R”或“S”构型。

本发明的一个实施例也提供如本文所述的根据式(I)的化合物及其药用盐或酯，特别是如本文所述的根据式(I)的化合物及其药用盐，更特别地是如本文所述的根据式(I)的化合物。

本发明的一个特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中

R¹选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C_3-8-环烷基，

iv)C_3-8-环烷基烷基，

v)C_1-6-烷氧基，

vi)C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基，

vii)杂环烷基，

viii)杂环烷基烷基，

ix)经取代的C_3-8-环烷基，

x)经取代的C_3-8-环烷基烷基，

xi)经取代的杂环烷基，

xii)经取代的杂环烷基烷基，

xiii)卤代-C_1-6-烷基，

xiv)羟基-C_1-6-烷基，

R²选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)卤素，

iii)卤代-C_1-6-烷基，

iv)C_1-6-烷基，

v)氰基，

其中R¹和R²中的至少一者并非H；

R³选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)卤素，

且n为0或1。

或药用盐。

本发明的一个特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R³为卤素。

本发明的一个更特定的实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R³为Cl。

本发明的另一个更特定的实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R²选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)氰基。

本发明的一个特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R¹选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C_3-8-环烷基，

iv)C_3-8-环烷基烷基，

v)C_1-6-烷氧基，

vi)C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基，

vii)杂环烷基，

viii)杂环烷基烷基，

ix)经取代的C_3-8-环烷基，

x)经取代的C_3-8-环烷基烷基，

xi)经取代的杂环烷基，

xii)经取代的杂环烷基烷基，

xiii)卤代-C_1-6-烷基，

xiv)羟基-C_1-6-烷基，

其中经取代的C_3-8-环烷基或经取代的杂环烷基被一个或多个选自H、C_1-6-烷基、卤素、羟基和C_1-6-羰基的取代基取代，并且“杂环烷基”为包含一个选自N和O的杂原子的4-6原子环系。

本发明的一个特定实施例提供如本文所述的根据式I的化合物，其中R³为Cl，R²为H或氰基，且R¹选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C_3-8-环烷基，

iv)C_3-8-环烷基烷基，

v)C_1-6-烷氧基，

vi)C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基，

vii)杂环烷基，

viii)杂环烷基烷基，

ix)经取代的C_3-8-环烷基，

x)经取代的C_3-8-环烷基烷基，

xi)经取代的杂环烷基，

xii)经取代的杂环烷基烷基，

xiii)卤代-C_1-6-烷基，

xiv)羟基-C_1-6-烷基，

其中经取代的C_3-8-环烷基或经取代的杂环烷基被一个或多个选自H、C_1-6-烷基、卤素、羟基和C_1-6-羰基的取代基取代，并且“杂环烷基”是包含一个选自N和O的杂原子的4-6原子环系统

其中R¹和R²中的至少一者并非H；

且n为0或1。

或药用盐。

如本文所述的式(I)化合物的特定示例选自

2-((5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基)-6-(氧杂环丁烷-3-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-5-酮；

2-((5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基)-6-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-5-酮；

(S)-6-氯-2-((6-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

2-((5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基)-6-(6，6-二氟螺[3.3]庚烷-2-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-5-酮；

2-((5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基)-6-(3，3-二氟环丁基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-5-酮；

(S)-6-氯-2-((6-(3，3-二氟-1-甲基环丁基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(6，6-二氟螺[3.3]庚烷-2-基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(3，3-二氟环丁基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((5-氧代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((5-氧代-6-(2，2，2-三氟乙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S，S)和(S，R)-6-氯-2-((5-氧代-6-(四氢呋喃-3-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-异丙基-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-环丙基-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(氧杂环丁烷-3-基甲基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(1-甲基环丙基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(氧杂环丁烷-3-基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(氧杂环丁烷-3-基)-5-氧代-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(环丙基甲基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-((1r，3S)-3-羟基环丁基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(2-甲氧基乙基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(2-羟基-2-甲基丙基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(2-氟乙基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-甲基-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-((1-羟基环丙基)甲基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-2-((6-(1-乙酰基哌啶-4-基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-6-氯-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(1，3-二氟丙烷-2-基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((5-氧代-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)甲基)-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((5-氧代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-异丙基-5-氧代-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-(环丙基甲基)-5-氧代-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S，S)和(S，R)-6-氯-2-(((5-氧代-6-(四氢呋喃-3-基))-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-乙基-5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((6-乙基-5-氧代-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((5-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

(S)-6-氯-2-((5-氧代-6-(2，2，2-三氟乙基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-4-甲腈；

及其药用盐。

用于制备如本文所述的式(I)化合物的方法也是本发明的目的。

本发明的式I化合物及其药用盐可以通过本领域中已知的方法，例如通过下述方法制备，该方法包括将式化合物

与氧化剂(如3-氯过苯甲酸)反应，以将II转化为其相应的甲基砜衍生物，该甲基砜衍生物随后在碱(如N，N-二异丙基乙胺)的存在下与式化合物反应，

以提供下式化合物：

其中取代基如上所定义。

式I化合物可根据上述方法变体和以下方案1-3制备。起始材料是可商购的或可根据已知方法制备。

方案1

通式I化合物(其中n为0)可通过使硫甲基衍生物II与氧化剂(如3-氯过苯甲酸)反应以将II转化为其相应的甲基砜衍生物，该甲基砜衍生物随后与胺衍生物III反应来制备。式II硫甲基衍生物可通过胺V与式IV卤代-甲基衍生物反应来制备，该卤代-甲基衍生物本身可在卤化剂(如溴)的存在下由VI制备。

方案2

通式I化合物(其中n为1)可通过使硫甲基衍生物II与氧化剂(如3-氯过苯甲酸)反应以将II转化为其相应的甲基砜衍生物，该甲基砜衍生物随后与胺衍生物III反应来制备。式II硫甲基衍生物可通过醛或酮与胺VII在还原剂(如三乙酰氧基硼氢化钠)的存在下的还原胺化，然后进行原位环化来制备。VII可由2，4-二氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯VIII在1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺和2-甲基异硫脲的存在下在溶剂(如乙醇)中制备，然后用酸(如HCl)处理。

方案3

替代地，通式I化合物(其中n为1)可通过使硫甲基衍生物II与氧化剂(如3-氯过苯甲酸)反应，以将II转化为其相应的甲基砜衍生物来制备，该甲基砜衍生物随后与胺衍生物III反应。式II硫甲基衍生物可通过环酰胺IX在烷基化剂R1-X的存在下的烷基化来制备，其中X为卤素或烷基-三氟甲磺酸酯和碱(如二异丙基乙胺)。IX可由2，4-二氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯VIII在1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺和2-甲基异硫脲的存在下在溶剂(如乙醇)中制备，然后用酸(如HCl)处理。

本发明的另一个目的是如本文所述的根据式(I)的化合物，该化合物用作治疗活性物质。

同样，本发明的一个目的是一种药物组合物，该药物组合物包含如本文所述的根据式(I)的化合物以及治疗惰性载体。

本发明的一个目的是如本文所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、呼吸系统的病症、血管和心血管病症、纤维化疾病、癌症、眼部病症、代谢病症、胆汁郁积和其他形式的慢性瘙痒以及急性和慢性器官移植排斥的用途。

肾脏病症包括但不限于急性肾损伤和伴有或不伴有蛋白尿的慢性肾脏疾病(包括终末期肾脏疾病(ESRD))。更具体地，这包括肌酐清除率降低和肾小球滤过率降低、微量白蛋白尿、白蛋白尿和蛋白尿、肾小球硬化伴网状系膜基质扩张伴有或不伴有显著细胞增多(特别是糖尿病性肾病和淀粉样变性)、肾小球毛细血管局灶性血栓形成(特别是血栓性微血管病)、全身纤维蛋白样坏死、缺血性病变、恶性肾硬化(如缺血性回缩、肾血流量减少和肾动脉病)、毛细血管内(内皮和系膜)和/或毛细血管外细胞(新月体)的肿胀和增殖(如肾小球肾炎实体)、局灶节段性肾小球硬化、IgA肾病、血管炎/全身性疾病以及急性和慢性肾移植排斥。

肝脏病症包括但不限于肝硬化、肝充血、胆汁郁积性肝脏疾病(包括瘙痒)、非酒精性脂肪性肝炎以及急性和慢性肝移植排斥。

炎症性病症包括但不限于关节炎、骨关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、炎症性肠道疾病、异常排空障碍等以及炎症性气道疾病(诸如特发性肺纤维化(IPF)、慢性阻塞性肺病(COPD)或慢性支气管哮喘)。

呼吸系统的其他病症包括但不限于其他不同病因的弥漫性肺间质疾病(包括医源性药物引起的纤维化、职业和/或环境引起的纤维化)、全身性疾病和血管炎、肉芽肿性疾病(结节病、过敏性肺炎)、胶原血管疾病、肺泡蛋白沉积症、朗格汉斯细胞肉芽肿病、淋巴管平滑肌瘤病、遗传性疾病(Hermansky-Pudlak综合征、结节性硬化症、神经纤维瘤病、代谢性贮积症、家族性间质性肺病)、辐射诱发的纤维化、矽肺、石棉诱发的肺纤维化或急性呼吸道窘迫综合征(ARDS)。

神经系统的病症包括但不限于神经病性疼痛、精神分裂症、神经炎症(例如星形胶质细胞增生)、外周和/或自主(糖尿病性)神经病等。

血管病症包括但不限于动脉粥样硬化、血栓性血管疾病以及血栓性微血管病、增殖性动脉病(诸如被粘液细胞外基质包围的肿胀的肌内膜细胞和结节状增厚)、动脉粥样硬化、血管顺应性降低(诸如僵硬、心室顺应性降低和血管顺应性降低)、内皮功能障碍等。

心血管病症包括但不限于急性冠状动脉综合征、冠心病、心肌梗塞、动脉和肺动脉高压、心律失常(诸如心房颤动)、卒中和其他血管损伤。

纤维化疾病包括但不限于心肌和血管纤维化、肾纤维化、肝纤维化、肺纤维化、皮肤纤维化、硬皮病和包膜性腹膜炎。

癌症和癌症转移包括但不限于乳腺癌、卵巢癌、肺癌、前列腺癌、间皮瘤、神经胶质瘤、肝癌、胃肠癌及其进展和转移侵袭性。

眼部病症包括但不限于增殖性和非增殖性(糖尿病性)视网膜病、干湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)、黄斑水肿、中央动脉/静脉闭塞、外伤、青光眼等。特别地，眼部病症是青光眼。

代谢病症包括但不限于肥胖症和糖尿病。

本发明还涉及如本文所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、纤维化疾病以及急性和慢性器官移植排斥的用途。

本发明还涉及如本文所述的根据式(I)的化合物用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症和纤维化疾病的用途。

本发明的一个特定实施例是如本文所述的根据式(I)的化合物，其用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、纤维化疾病以及急性和慢性器官移植排斥。

本发明的一个特定实施例是如本文所述的根据式(I)的化合物，其用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症和纤维化疾病。

本发明还涉及如本文所述的根据式(I)的化合物用于制备用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、纤维化疾病以及急性和慢性器官移植排斥的药物的用途。

本发明还涉及如本文所述的根据式(I)的化合物用于制备用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症和纤维化疾病的药物的用途。

本发明的另一个目的是用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、纤维化疾病以及急性和慢性器官移植排斥的方法，该方法包括施用有效量的如本文所述的根据式(I)的化合物。

本发明的另一个目的是用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症和纤维化疾病的方法，该方法包括施用有效量的如本文所述的根据式(I)的化合物。

本发明的另一个实施例提供如本文所述的式(I)化合物，其根据所述的方法中的任一者进行制备。

测定程序

生产带有及不带HIS标签的人全长ATX

自粘蛋白(ATX-ENPP2)克隆：cDNA是从商用人造血细胞总RNA制备的，并在重叠PCR中用作模板，以生成带有或不带3′-6xHis标签的全长人ENPP2 ORF。这些全长插入物被克隆到pcDNA3.1V5-His TOPO(Invitrogen)载体中。验证若干单一克隆的DNA序列。来自正确的全长克隆的DNA用于转染Hek293细胞以验证蛋白表达。经编码的ENPP2序列符合Swissprot条目Q13822，带有或不带另外的C端6xHis标签。

ATX发酵：通过在20L受控搅拌罐生物反应器(Sartorius)中大规模瞬时转染来产生重组蛋白。在细胞生长和转染期间，温度、搅拌器速度、pH和溶解氧浓度分别保持在37℃、120rpm、7.1和30％DO。FreeStyle 293-F细胞(Invitrogen)在FreeStyle293培养基(Invitrogen)中悬浮培养，并以约1-1.5x10E6细胞/mL，用上述质粒DNA，使用X-tremeGENERo-1539(商业产品，Roche Diagnostics)作为络合剂进行转染。向细胞供应浓缩营养液(JImmunol Methods 194(1996)，19，1-199(第193页))，并在转染后72小时用丁酸钠(2mM)诱导并在转染后96小时进行收集。通过蛋白印迹、酶测定和/或分析性IMAC色谱法分析表达。在流通式热交换器中将细胞悬浮液冷却至4℃后，通过Zeta Plus 60M02 E16(Cuno)和Sartopore 2 XLG(Sartorius)过滤器单元进行细胞分离和上清液的无菌过滤。在纯化前在4℃储存上清液。

ATX纯化：通过添加Brij 35至最终浓度为0.02％并使用1M HCl将pH调节至7.0，对20升培养上清液进行超滤处理。然后将上清液首先通过0.2μm Ultran-Pilot OpenChannel PES过滤器(Whatman)微滤，并随后通过具有30kDa MWCO (Whatman)的Ultran-Pilot Screen Channel PES过滤器浓缩至1升。在IMAC色谱法之前，添加NiSO₄至最终浓度为1mM。然后将澄清的上清液施用于先前在50mM Na₂HPO₄ pH 7.0、0.5M NaCl、10％甘油、0.3％CHAPS、0.02％NaN₃中平衡的HisTrap柱(GE Healthcare)。分别用含有20mM、40mM和50mM咪唑的相同缓冲液逐步洗涤该柱。随后在15个柱体积中使用线性梯度洗脱蛋白至0.5M咪唑。使用配备有30kDa PES滤膜的Amicon细胞合并并浓缩含有ATX的级分。在Superdex S-200 prep grade(XK 26/100)(GE Healthcare)上，在20mM BICINE pH 8.5、0.15MNaCl、10％甘油、0.3％CHAPS、0.02％NaN₃中通过尺寸排阻色谱法进一步纯化蛋白。纯化后蛋白的最终产率为每升培养上清液5-10mg ATX。在-80℃储存蛋白。

人ATX酶抑制测定为了鉴定人自粘蛋白(ATX)酶的抑制剂，已开发了使用溶血磷脂酰胆碱(LPC)作为底物和重组酶的体外生化分析测定。ATX活性经由偶联酶形式测定，其中LPC水解产生的胆碱通过胆碱氧化酶(CO)转化为过氧化氢。过氧化氢又被辣根过氧化物酶(HR)用作辅助底物，以氧化Amplex

并生成红色荧光产物(试卤灵)。

材料/试剂

500mM Tris-HCl pH-8.0；1M NaCl；250mM CaCl₂；250mM KCl；250mM MgCl₂；在H2O中的10％Triton X-100溶液。

测定缓冲液

50mM Tris-HCl(pH 8.0)；120mM NaCl；20mM CaCl₂；5mM KCl；1mM MgCl₂；0.01％Triton X-100，无菌过滤并在4℃储存

试剂稀释缓冲液

50mM Tris-HCl(pH 8.0)；150mM NaCl

人自粘蛋白(hATX)：0.97mg/ml(9.718μM)分子量99817。本测定中使用1.5μM工作溶液。

溶解在试剂稀释缓冲液中的100mM 18：1LPC。

试剂稀释缓冲液中的500U/ml胆碱氧化酶。

在试剂稀释缓冲液(10.95mg/ml)中的2540U/ml辣根过氧化物酶。

DMSO中的20mM Amplex Red(10-乙酰基-3，7-二羟基吩噁嗪)。

反应板

黑色，384孔板，底部透明的黑色，未处理表面。

接受在DMSO中预稀释的测试化合物作为11点浓度响应(0.5mM最高浓度；稀释度3.162比1)。测试化合物在使用前在96孔锥形底板中按1∶1(10μL化合物+10μL测定缓冲液)进行预稀释。

程序

ATX在测定缓冲液中稀释至2.2nM。胆碱氧化酶和辣根过氧化物酶分别稀释至7.3U/ml和14.7U/ml。18：1LPC和Amplex

分别稀释至110μM和183.3μM(溶液避光)。将2.2μL化合物预稀释液或50％DMSO加入反应板中，然后加入25μL ATX或测定缓冲液(阴性对照)。将测定板混合并在室温孵育10分钟。然后加入15μL胆碱氧化酶/辣根过氧化物酶。为了开始反应，加入15μL LPC 18∶1/Amplex Red。将测定板混合并在室温避光孵育。在5分钟(用于背景扣除)和90分钟时测量荧光。

最终测定浓度：

从90分钟的终点数据中减去5分钟的荧光，并相对于阳性对照进行归一化。计算IC₅₀值。

提供针对式(I)化合物的酶促ATX抑制测定的结果。

表1.

如本文所述的式(I)化合物及其药用盐或酯具有介于0.00001μM与1000μM之间的IC₅₀值，特定化合物具有介于0.0005μM与500μM之间的IC₅₀值，进一步特定的化合物具有介于0.0005μM与50μM之间的IC₅₀值，更特定的化合物具有介于0.0005μM与5μM之间的IC₅₀值。这些结果已通过使用上述酶测定获得。

式(I)的化合物及其药用盐可以用作药物(例如，以药物制剂的形式)。药物制剂可内部给药，诸如经口(例如，以片剂、包衣片剂、糖衣丸、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬剂的形式)、经鼻(例如，以鼻喷雾剂的形式)、经直肠(例如，以栓剂的形式)或经眼部局部(例如，以溶液、软膏、凝胶剂或水溶性聚合物插入物的形式)给药。但是，也可通过肠胃外诸如肌内、静脉内或眼内(例如，以无菌注射液的形式)给药。

式(I)化合物及其药用盐可与药学上惰性的无机或有机助剂一起加工，以用于生产片剂、包衣片剂、糖衣丸、硬明胶胶囊、注射液或局部制剂。例如，可使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐等作为片剂、糖衣丸和硬明胶胶囊的此类助剂。

用于软明胶胶囊的合适的助剂为例如植物油、蜡、脂肪、半固体物质和液体多元醇等。

用于制备溶液和糖浆的合适的助剂为例如水、多元醇、蔗糖、转化糖、葡萄糖等。

用于注射液的合适的助剂为例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。

用于栓剂的合适的助剂为例如天然或硬化油、蜡、脂肪、半固体或液体多元醇等。

用于局部眼用制剂的合适的助剂为例如环糊精、甘露醇或本领域已知的许多其他载体和赋形剂。

此外，药物制剂可以含有防腐剂、增溶剂、增粘物质、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、香料、用于改变渗透压的盐、缓冲剂掩模剂或抗氧化剂。它们还可以含有其他有治疗价值的物质。

剂量可以在宽范围内变化，当然将适合每种特定情况下的各种要求。一般而言，口服给药的日剂量为每kg体重约0.1mg至20mg、优选为每kg体重约0.5mg至4mg(例如每人约300mg)应当是合适的，其优选地分为1-3个单独的剂量(可由例如相同的量组成)。在局部给药的情况下，该制剂可包含按重量计0.001％至15％的药物，并且所需剂量可介于0.1mg至25mg之间，其每天或每周给药一次、或每天给药多次(2至4次)或每周给药多次。但是，显而易见的是，当显示为适用时，可超过本文中给出的上限或下限。

本发明通过以下实例示出，这些实例不具有限制性。

如果制备例以对映异构体的混合物的形式获得，则纯对映异构体可通过本文所述的方法或本领域的技术人员所知的方法获得，该方法诸如手性色谱法或结晶法。

实例

如果没有另行说明，则所有实例和中间体在氮气气氛下制备。

中间体A

中间体A1：5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-胺盐酸盐

中间A1是商用的(CAS：73536-86-4)

中间体A2：(S)-6-氯-4-氰基-2，3-二氢-1H-茚-2-氯化铵

步骤1：4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-1H-茚-2- 基)氨基甲酸酯

将4，4，4′，4′，5，5，5′，5′-八甲基-2，2′-双(1，3，2-二氧硼烷)(2.42g，9.34mmol)、(1，5-环辛二烯)(甲氧基)铱(I)二聚体(309mg，467μmol)、(5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.50g，9.34mmol，CAS：1934835-81-0)和3，4，7，8-四甲基-1，10-菲咯啉(221mg，934μmol)在微波小瓶中混合(使用高真空干燥并用氩气冲洗)并悬浮在干燥THF(10ml)中。在混合这些试剂时，悬浮液变成深绿色。将氩气鼓泡通过悬浮液持续10分钟。将反应混合物加热至80℃并搅拌15小时(变成深紫色)。将反应混合物通过烧结玻璃过滤，并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-30％纯化粗料，以提供标题化合物，其为灰白色固体(2.30g，63％产率)。MS(ESI)：m/z＝294.2[M-Boc+H]⁺

步骤2：(6-氯-4-羟基-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸叔丁酯

将4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸酯(850mg，1.84mmol)溶解于THF(5.56ml)和水(556μl)中并加入过硼酸钠一水合物(549mg，5.51mmol)。在室温将反应物搅拌18小时。蒸发溶剂并使残余物在水中吸收并用EtOAc萃取。使各层分离，并将水层用EtOAc再萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发至干燥。粗产物经受快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-50％，以提供标题化合物，其为灰白色固体(220mg，42％产率)。MS(ESI)：m/z＝282.2[M-H]⁺

步骤3：2-((叔丁氧基羰基)氨基)-6-氯-2，3-二氢-1H-茚-4-基三氟甲磺酸酯

将(6-氯-4-羟基-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，176μmol)溶解于干燥DCM(705μl)并添加三乙胺(19.6mg，27μl，194μmol)。向该经搅拌的溶液中加入1，1，1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(69.2mg，194μmol)。在室温将反应物搅拌3小时，倒入水中并用EtOAc萃取。使各层分离，并将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发至干燥。粗产物经受快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-50％，以提供标题化合物，其为白色固体(42mg，57％产率)。MS(ESI)：m/z＝414.1[M-H]⁺

步骤4：(6-氯-4-氰基-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸叔丁酯

将2-((叔丁氧基羰基)氨基)-6-氯-2，3-二氢-1H-茚-4-基三氟甲磺酸酯(60mg，144μmol)、氰化锌(9.32mg，79.4μmol)和四(三苯基膦)钯(0)(16.7mg，14.4μmol)溶解于干燥DMF(721μl)中，并将氩气鼓泡通过反应物持续5分钟。然后将反应物加热至110℃持续2小时。将反应物倒入LiCl 10％中，并用EtOAc萃取。使各层分离，并将水层用EtOAc再萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并蒸发至干燥。粗产物经受快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-50％，以提供标题化合物，其为白色固体(24mg，57％产率)。MS(ESI)：m/z＝237.1[M-tBu]⁺

步骤5：(S)-叔丁基(6-氯-4-氰基-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸酯

将(6-氯-4-氰基-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸叔丁酯(65mg，222μmol)在手性柱(OZ-H，12nm，5μm，250x4.6mm)在SFC条件下分离，以提供标题化合物，其为白色固体(32mg，49.2％产率，96％ee，第二洗脱对映异构体，保留时间：6.6分钟)。MS(ESI)m/z：237.1[M-tBu]⁺

步骤6：(S)-6-氯-4-氰基-2，3-二氢-1H-茚-2-氯化铵

将(S)-叔丁基-(6-氯-4-氰基-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基甲酸酯溶液(300mg，1.02mmol)和在二噁烷(3.84ml，15.4mmol)中的HCl 4M在二噁烷(2ml)中的溶液在室温搅拌15小时。将所得悬浮液在真空下浓缩，以提供标题化合物(237mg，100％产率)，其为白色固体。MS(ESI)：m/z＝193.1[M+H]+

中间体B

中间体B1：4-(溴甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸甲酯

向4-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸甲酯(1.00g，4.79mmol，CAS：166392-24-1)在乙酸(10ml)中的溶液中加入溴(774mg，249μl，4.79mmol)。将反应混合物加热至60℃并搅拌1小时。再次加入溴(232mg，74.6μl，1.44mmol)并在60℃继续搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩，倒入水中并用EtOAc萃取两次。合并的有机层经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-50％纯化粗料，以提供标题化合物，其为淡黄色粘稠油状物(822mg，54％产率)。MS(ESI)：m/z＝277.0[M+H]⁺

中间体B2：4-(2-氨基乙基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯盐酸盐

步骤1：4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯

将2，4-二氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.00g，9.19mmol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(1.24g，1.38ml，10.1mmol)在甲苯(20ml)中的悬浮液在室温搅拌1小时。将所得黄色溶液在真空下浓缩并用EtOH(40ml)稀释。添加硫代氨基甲酸甲酯半硫酸盐(1.44g，5.06mmol)和碳酸钾(1.92g，13.8mmol)。将反应混合物在室温搅拌20小时，倒入水/盐水中并用EtOAc萃取两次。合并的有机层经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-50％纯化粗料，以提供标题化合物，其为白色固体(2.36g，75％产率)。MS(ESI)：m/z＝342.2[M+H]⁺

步骤2：4-(2-氨基乙基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯盐酸盐

标题化合物由4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯按照针对中间体A2所述的程序(步骤6)制备(100％产率，白色固体)。MS(ESI)：m/z＝242.2[M+H]⁺

中间体B3：2-(甲硫基)-5-氧代-7，8-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸叔丁酯

将2，4-二氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.3mmol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(311mg，346μl，2.53mmol)在甲苯(5ml)中的悬浮液在室温搅拌1小时。将所得黄色溶液在真空下浓缩并用EtOH(10ml)稀释。添加硫代氨基甲酸甲酯半硫酸盐(359mg，1.26mmol)和碳酸钾(481mg，3.45mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时，倒入水中并用EtOAc萃取两次。合并的有机层经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-50％纯化粗料，以提供标题化合物，其为白色固体(317mg，47％产率)。MS(ESI)：m/z＝296.2[M+H]+

中间体C

中间体C1：2-(甲硫基)-6-(氧杂环丁烷-3-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-5-酮

将4-(溴甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸甲酯(413mg，1.3mmol，中间体B1)、氧杂环丁烷-3-胺(484mg，464μl，6.48mmol)和N，N-二异丙基乙胺(342mg，452μl，2.59mmol)在DMA(6ml)中的溶液在室温搅拌2小时。将反应混合物加热至65℃并搅拌3小时。将反应混合物倒入水中并用EtOAc萃取两次。合并的有机层经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-100％纯化粗料，以提供标题化合物，其为灰白色固体(158mg，51％产率)。MS(ESI)：m/z＝238.1[M+H]⁺

以下中间体C2-24类似于中间体C1由指定的商用胺结构单元和4-(溴甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸甲酯(中间体B1)制备

中间体C25：2-(甲硫基)-6-(氧杂环丁烷-3-基)-7，8-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮

向4-(2-氨基乙基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯盐酸盐(140mg，504μmol，中间体B2)和氧杂环丁烷-3-酮(74.1mg，65.9μl，1.01mmol)在1，2-二氯乙烷(4ml)中的经搅拌的悬浮液中加入乙酸(60.5mg，57.7μl，1.01mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(320mg，1.51mmol)。将反应混合物在室温搅拌20小时。用EtOH(140μl)淬灭所得混浊溶液。添加N，N-二异丙胺(266mg，352μl，2.02mmol)。在室温继续搅拌2小时并在70℃搅拌2小时。将反应混合物倒入饱和碳酸钠溶液中并用二氯甲烷萃取两次。合并的有机层经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-100％纯化粗料，以提供标题化合物，其为白色固体(45mg，36％产率)。MS(ESI)：m/z＝252.1[M+H]⁺

以下中间体C26-30类似于中间体C25由指定的商用醛或酮结构单元和4-(2-氨基乙基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯盐酸盐(中间体B2)制备

中间体C31：2-(甲硫基)-7，8-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮

标题化合物由2-(甲硫基)-5-氧代-7，8-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-6(5H)-甲酸叔丁酯(中间体B3)按照针对中间体A2所述的程序(步骤6)制备(100％产率，白色固体)。MS(ESI)：m/z＝196.1[M+H]+

中间体C32：2-(甲硫基)-6-(2，2，2-三氟乙基)-7，8-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-5(6H)-酮

将4-(2-氨基乙基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯盐酸盐(200mg，720μmol，中间体B2)在1，2-二氯乙烷(3.5ml)中的悬浮液冷却至0℃。添加2，2，2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(201mg，124μl，864μmol)在1，2-二氯乙烷(0.5ml)中的溶液，随后添加N，N-二异丙基乙胺(285mg，377μl，2.16mmol)。将反应混合物在室温搅拌20小时并在70℃搅拌3小时。将反应混合物用EtOAc稀释并用水洗涤两次。有机层经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残余物用二噁烷(2.5ml)稀释。滴加甲苯中的三甲基铝2M(720μl，1.44mmol)。将反应混合物加热至80℃并搅拌2小时。用水小心地淬灭反应混合物并用EtOAc萃取两次。有机层经硫酸钠干燥并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-100％纯化粗料，以提供标题化合物，其为橙色固体(55mg，23％产率)。MS(ESI)：m/z＝278.1[M+H]⁺

实例

实例1：2-((5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-基)氨基)-6-(氧杂环丁烷-3-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-5-酮

将2-(甲硫基)-6-(氧杂环丁烷-3-基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-d]嘧啶-5-酮(中间体C1)(67mg，282μmol)在1，2-二氯乙烷(3ml)中的悬浮液冷却至0℃。添加3-氯过氧苯甲酸(133mg，593μmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌1小时。添加5-氯-2，3-二氢-1H-茚-2-胺盐酸盐(72mg，339μmol，中间体A1)和N，N-二异丙基乙胺(112mg，148μl，847μmol)并在室温继续搅拌1小时。将所得深红色溶液倒入饱和碳酸氢盐溶液中并用二氯甲烷萃取两次。合并的有机层经硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过快速色谱法，经硅胶，使用梯度乙酸乙酯/庚烷0-100％纯化粗料，以提供标题化合物，其为灰白色固体(21mg，21％产率)。MS(ESI)：m/z＝357.2[M+H]⁺

以下实例2-36类似于实例1由指定的二氢-1H-茚-2-胺中间体A1或A2和硫代-甲基中间体C2-32制备。

实例A

式(I)的化合物能以本身已知的方式用作产生以下组成的片剂的活性成分：

实例B

式(I)化合物能以本身已知的方式用作产生以下组成的胶囊的活性成分：

Claims

1.式(I)化合物，

R¹选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C_3-8-环烷基，

iv)C_3-8-环烷基烷基，

v)C_1-6-烷氧基，

vi)C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基，

vii)杂环烷基，

viii)杂环烷基烷基，

ix)经取代的C_3-8-环烷基，

x)经取代的C_3-8-环烷基烷基，

xi)经取代的杂环烷基，

xii)经取代的杂环烷基烷基，

xiii)卤代-C_1-6-烷基，

xiv)羟基-C_1-6-烷基，

R²选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)卤素，

iii)卤代-C_1-6-烷基，

iv)C_1-6-烷基，

v)氰基，

其中R¹和R²中的至少一者并非H；

R³选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)卤素，

并且n为0或1，

或药用盐。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R³为卤素。

3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R³为Cl。

4.根据权利要求1至3所述的化合物，其中R²选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)氰基。

5.根据权利要求1至4所述的化合物，其中R¹选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C_3-8-环烷基，

iv)C_3-8-环烷基烷基，

v)C_1-6-烷氧基，

vi)C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基，

vii)杂环烷基，

viii)杂环烷基烷基，

ix)经取代的C_3-8-环烷基，

x)经取代的C_3-8-环烷基烷基，

xi)经取代的杂环烷基，

xii)经取代的杂环烷基烷基，

xiii)卤代-C_1-6-烷基，

xiv)羟基-C_1-6-烷基，

6.根据权利要求1至5所述的化合物，其中R³为Cl，R²为H或氰基，并且R¹选自由以下项组成的组：

R¹选自由以下项组成的组：

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C_3-8-环烷基，

iv)C_3-8-环烷基烷基，

v)C_1-6-烷氧基，

vi)C_1-6-烷氧基-C_1-6-烷基，

vii)杂环烷基，

viii)杂环烷基烷基，

ix)经取代的C_3-8-环烷基，

x)经取代的C_3-8-环烷基烷基，

xi)经取代的杂环烷基，

xii)经取代的杂环烷基烷基，

xiii)卤代-C_1-6-烷基，

xiv)羟基-C_1-6-烷基，

其中经取代的C_3-8-环烷基或经取代的杂环烷基被一个或多个选自H、C_1-6-烷基、卤素、羟基和C_1-6-羰基的取代基取代，并且“杂环烷基”为包含一个选自N和O的杂原子的4-6原子环系，

并且其中R¹和R²中的至少一者并非H；

并且n为0或1，

或药用盐。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其选自

及其药用盐。

8.一种制备根据权利要求1至6中任一项所述的化合物的方法，其包括式(II)化合物在式(III)化合物存在下的反应，

9.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其用作治疗活性物质。

10.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至7中任一项所述的化合物以及治疗惰性载体。

11.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、呼吸系统的病症、血管和心血管病症、纤维化疾病、癌症、眼部病症、代谢病症、胆汁淤积性和其他形式的慢性瘙痒以及急性和慢性器官移植排斥的用途。

12.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、纤维化疾病以及急性和慢性器官移植排斥。

13.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、纤维化疾病以及急性和慢性器官移植排斥。

14.一种用于治疗或预防肾脏病症、肝脏病症、炎症性病症、神经系统的病症、纤维化疾病以及急性和慢性器官移植排斥的方法，所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至7中任一项所述的化合物。

15.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其根据权利要求8所述的方法进行制备。

16.如前所述的本发明。