CN115479998B

CN115479998B - 一种农残原位采样-在管富集-质谱检测方法

Info

Publication number: CN115479998B
Application number: CN202110663190.5A
Authority: CN
Inventors: 王志国; 梁秋菊; 吴倩; 刘巍; 孙志伟; 谭超; 杜文
Original assignee: China Tobacco Hunan Industrial Co Ltd
Current assignee: China Tobacco Hunan Industrial Co Ltd
Priority date: 2021-06-15
Filing date: 2021-06-15
Publication date: 2024-03-12
Anticipated expiration: 2041-06-15
Also published as: CN115479998A

Abstract

本发明属于检测技术领域，具体公开了一种高灵敏度的农药残留的原位质谱检测新方法，包括下述的步骤：通过微液节点原位采样探针得到的连续采样液流直接通过阳离子交换涂层毛细管，将农残选择性的富集在柱上，然后通过六通阀将涂层毛细管由探针采样流路切换到洗脱流路，用注射泵将涂层毛细管中富集的农残直接洗脱进入质谱检测。本发明方法可以做到基本不改变微液节点采样体系的采样处理和检测的时间的基础上有效的提高原位检测农残的灵敏度以及减小采样液的基质效应，解决了原位采样量小、基质效应大和灵敏度低等问题。

Description

一种农残原位采样-在管富集-质谱检测方法

技术领域

本发明涉及一种化学物质检测技术，具体涉及一种农药残留的快速无损检测方法。

背景技术

在农业生产中，农药被广泛应用于作物与农田以防止病害以及野草和昆虫的泛滥，目前已经有超过1100种农药应用于实际生产中，但由于长期滥用单一农药以及不按照规定地使用农药，部分病虫害对化学农药有了严重的抗药性，人们不得不加大农药用量来防治有害病菌与昆虫，以保证农作物的产量与质量，然而相当一部分的农药会残留在植物组织表面并超过安全限量。相关研究表明，人体长时间地摄入过量的农药残留物会增加罹患癌症、阿尔茨海默病和帕金森症等疾病的风险，因此必须严格监测和控制农作物中的农药残留以保障公众的健康。

目前常用的农残的检测方法主要有气相色谱法、液相色谱法和色-质联用法。这些方法都需要通过复杂的样品前处理将农残从烟叶样品中提取出来并经过纯化富集后进行上样检测。这些繁琐的过程不但限制了烟叶检测的速度同时需要耗费大量的人力物力。所以，近年来一些快速检测农残的方法也逐步发展起来。新型的农药残留快速检测技术主要有酶抑制法、酶联免疫法、表面增强拉曼光谱法与快速原位质谱法等。其中原位质谱法由于其在快速原位的前提下还具有质谱的多通道检测和强定性能力的特点而备受关注。目前，应用于农残检测的快速质谱法主要有纸喷雾电离质谱(PSI-MS)、实时直接分析质谱(DART-MS)、直接取样探针结合热解吸电喷雾电离质谱(TD-ESI-MS)、激光解析电喷雾电离(ELDI-MS)等。这些快速质谱方法对农残的检测主要都还是属于定性检测，难以实现绝对定量，且对于一些质谱信号强度低或含量低的农残通常难以进行检测。

发明内容

为解决现有技术存在的不足，本发明第一目的在于，提供一种农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，旨在实现农残的无损、原位快速、且高灵敏度和选择性的测定。

本发明第二目的在于，提供一种实现所述原位测定的系统。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：

一种农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，对待测样品进行原位采样，将采样液在采样流路中富集；随后再利用六通阀切换至洗脱流路，将采样流路中富集的样品洗脱并进行质谱分析；

其中，原位采样探针的出口管、六通阀、涂层毛细管和真空泵相连构成采样流路；六通阀流路切换后，洗脱液泵(洗脱液来路)、六通阀、涂层毛细管和质谱相连构成洗脱流路；

所述的涂层毛细管的内壁设置有强阳离子交换材料涂层。

本发明创新地提供了一种原位采样-管内在线富集-洗脱质谱测定的农残检测方法，其对待测样品进行原位采样，将采样液在采样流路管内进行在线富集，随后再利用洗脱液对采样流路中富集的样品进行洗脱，并进行质谱分析。研究发现，本发明方法能够无损、高效且高灵敏度地测定农残，并能够有效避免漏检率。

本发明中，所述的涂层毛细管具有贯穿液流方向的空腔。也即是，设置在毛细管内的涂层没有完全封闭毛细管内腔室。

本发明中，可以采用现有技术在毛细管内形成能够富集农残的涂层。

作为优选，涂层毛细管的制备方法为：预先在毛细管内壁涂覆光固化胶，随后填充强阳离子交换材料，最后经光固化处理即得。

作为优选，所述的强阳离子交换材料为修饰有阳离子交换基团的多孔颗粒；优选为修饰有阳离子交换基团的硅胶填料或交换树脂。

作为优选，所述的阳离子交换基团为磺酸基团。

作为优选，所述的强阳离子交换材料的粒径<50μm；

优选地，所述的毛细管为石英毛细管。所述的毛细管的横截面优选为圆形。

所述的毛细管内的涂层具有均匀的厚度，且所述的厚度的两倍小于毛细管内壁的直径。

如图3所示，所述的六通阀上对位孔2和5连接涂层毛细管，而与此对位相邻的两个邻位孔1和6分别连接微液节点采样探针和真空泵，而另两个邻位孔3和4与洗脱液和质谱相连；

采样采样-富集过程中，所述的采样探针与六通阀孔1、孔2、涂层毛细管、孔5、孔6以及真空泵入口流路连接构成采样流路；

洗脱过程中，六通阀通过A、B位的切换，使洗脱液泵、孔3、孔2、涂层毛细管、孔5和孔4以及质谱入口流路连接构成洗脱流路。

作为优选，所述的原位采样为微液节点采样。

作为优选，微液节点采样过程中，通过向微液节点采样探针不断泵入采样溶液(萃取剂)，并在探针尖端形成液节点，液节点与样品表面接触时实现萃取；并同时通过真空泵提供的负压将萃取液(萃取后的采样液)连续地流经涂层毛细管，并在涂层毛细管内富集。

优选地，采样探针包括毛细管内外套管、双孔石英管、鹅形管或折管。

所述微液节点采样的方式为单点采样或区域扫描采样；

其中，单点采样即将探针停留在植物叶片表面的某个点不动，采样一段时间；

区域扫描采样指将探针以一定移动速度在植物叶片的一个区域内进行扫描一段时间，期间固定针尖-样品距离；

优选地，所述区域扫描采样的探针移动速度在100-1000μm/s。

本发明研究发现，为了实现所述的原位采样-管内富集以及洗脱检测思路，其需要克服原位采样、管内富集、洗脱工艺难适配，以及采样效率、管内富集效率与倍数以及洗脱效果互相干扰所致的检测灵敏度和准备率不高等技术难题。针对该技术难题，本发明在所述的测定构思基础上，进一步通过原位采样和管内富集的萃取剂、洗脱剂以及泵送流速条件的协同控制，能够解决原位采样-在线富集-管路洗脱互相不兼容或干扰所致的测定灵敏度不理想的问题。

作为优选，萃取剂为乙腈、乙腈-水溶液、含有甲酸或乙酸的乙腈-水溶液。

作为优选，萃取剂为含有0.1～2v％甲酸或乙酸的乙腈溶液；进一步优选为含有0.5～1v％甲酸或乙酸的乙腈溶液。

作为优选，原位采样过程中，泵入的萃取剂流速在1-20μL/min，最优为1-5μL/min。

作为优选，所述洗脱液为甲醇-水溶液、氨水-甲醇溶液；

优选地，洗脱液为5％氨水-95％甲醇溶液(体积比)。

作为优选，洗脱检测过程中，所述洗脱液流速在1-20μL/min，最优为1-5μL/min；

优选地，质谱检测的质谱离子源包括电喷雾电离源或大气压化学电离源。

本发明测定的对象可以是所有怀疑含有农残的样品，例如可以为植物叶片，或者其他形式的样品。

例如，所述的待测样品为植物叶片，例如，可以是烟叶、蔬菜叶等。

本发明所述的农残为待测样品中需要控制的任一农残成分。

作为优选，所述的农残包括但不限于马来酰肼、吡虫啉、噻虫嗪、多菌灵、烯酰吗啉、啶虫脒中的至少一种。

本发明一种优选的高灵敏度的用于农残原位检测的微液节点采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，微液节点采样探针的出口管通过六通阀与涂层毛细管相连再与真空泵相连，由微液节点采样探针通过萃取液在植物叶片表面直接萃取采样得到的农残分析物随采样流路直接与涂层毛细管接触从而实现采样溶液的富集。通过六通阀的切换将涂层材料在富集流路和洗脱流路进行切换，在洗脱流路由洗脱液将农残从涂层材料上洗脱进入质谱检测。

本发明还提供了一种实施所述方法的系统，包括原位采样探针，其中，原位采样探针的出口管与六通阀、涂层毛细管和真空泵相连，该连接的管路为采样流路；

六通阀的另外两个相邻孔分别和洗脱液以及质谱检测器连接；通过切换六通阀，能将洗脱液泵与六通阀、涂层毛细管和质谱检测器连接构成洗脱流路；

所述的涂层毛细管为内壁涂覆有富集材料的毛细管。

本发明所述的系统，在采样时，采样液在真空负压驱动下路径涂层毛细管中，并进行农残的富集，随后再切换六通阀，采用洗脱液对富集在涂层毛细管中的农残洗脱并进入质谱中进行检测。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明方法将原位采样(如微液节点采样)与在管富集在线相连，实现了采样溶液的高效富集，极大的提高了原位直接采样农残时的采样液中农残的浓度，从而相比于传统原位质谱方法提高了农残原位检测灵敏度。

(2)本发明方法采用的在线富集材料强阳离子交换材料对于农残的吸附具有一定选择性，可以在富集的同时除去从复杂叶片表面萃取出的基质成分，从而减小质谱检测的背景噪音和离子抑制，进一步提高检测灵敏度和准确性。

(3)本发明方法通过前期探索发现了叶片农残采样溶剂与在管富集吸附溶剂环境的兼容性，使得采样的同时可以在线实现富集，所以在采样体系与富集体系联用的过程中仍然保持了原位采样-质谱检测的快速的特点，实现高灵敏度的快速原位检测。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为强阳离子交换基团键合的多孔硅胶(SCX)涂覆的涂层毛细管的显微镜图

图2为强阳离子交换基团键合的多孔硅胶(SCX)在不同溶剂环境下对农残的吸附回收率特性图

图3为微液结点采样-管内固相萃取-质谱原位检测体系的示意图

图4为农残在涂层毛细管中吸附与脱附的动力学考察。A-1到A-4为上样流速分别为50μL/min、20μL/min、10μL/min、5μL/min的上样流出液中农残相对浓度随上样体积的变化曲线；B-1到B-4为洗脱流速分别为10μL/min、5μL/min、2.5μL/min、1μL/min的洗脱液中农残相对浓度随洗脱体积的变化曲线。

图5为管内固相萃取富集前后农残的原位检测信号的比较。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下文将结合说明书附图和较佳的实施例对本发明做更全面、细致地描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。

除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。

除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。

本发明一个具体实施方式的烟叶中6种农残的原位检测方法，包括下述的步骤：

S1.涂层毛细管的制备：将石英毛细管(630μmO.D./450μmI.D.)通过注射器泵入紫外光固化胶，使毛细管内壁涂有一层光固化胶(ergo 8500，kisling AG,瑞士)。然后将涂有光固化胶的石英毛细管通过氮气压入阳离子交换基团键合的硅胶填料(SCX，43μm粒径)。将填满填料的石英毛细管在紫外灯(356nm)下照射一个小时使其固化并粘结一层阳离子交换填料。然后再通过氮气加压将石英毛细管中未粘结的填料吹出。最后形成的涂层毛细管的显微镜图如图1所示。(涂层厚度约50μm)

S2.搭建微液节点采样-在管富集-质谱的联用装置：

如图3所示。微液节点采样探针固定在三轴平台的z轴平台上，而样品固定在xy轴平台上，通过三轴移动来控制定位探针与样品之间的位置关系。探针上端出口与接有涂层毛细管的六通阀相连，六通阀再与真空泵相连(探针出口-孔1-孔2-涂层毛细管-孔5-孔6和真空系统流路连接，构成采样流路)。六通阀上与涂层毛细管连接孔相邻的另两个邻位孔(3,4)分别与洗脱液注射泵和质谱相连。洗脱检测过程中，六通阀切换使涂层毛细管在采样体系与液相色谱-质谱进样体系之间切换；使洗脱液泵、孔3、孔2、涂层毛细管、孔5、孔4和质谱检测器流路连接形成洗脱流路；

质谱离子源可以是电喷雾电离源或大气压化学电离源等。

S3.原位检测过程：

采样过程中，探针入口与注射泵相连向探针内不断泵入采样溶液，在探针尖端形成液节点。液节点与样品表面接触时实现萃取。采用显微摄像头实时观察探针与样品表面形成的液节点。通过真空泵将萃取后的萃取液连续不断的抽吸入涂层毛细管。

采样探针可以是毛细管内外套管、双孔石英管、鹅形管或折管等。

微液节点采样探针可以在叶片的单点上进行采样，也可以通过将探针在叶片表面以一定移动速度扫描一个区域进行采样。采样溶液的流速为1-5μL/min，采样时间或采样体积由涂层毛细管长度而定。对于15cm涂层毛细管，根据我们前期实验的结果，采样体积不能超过25μL。

上样完毕后，将六通阀切换到另一位，使涂层毛细管与另一注射泵和质谱入口相连。注射泵向涂层毛细管中推入洗脱溶液，将富集在涂层毛细管中的分析物洗脱进质谱中。质谱得到农残在阳离子交换涂层毛细管中洗脱的洗脱曲线。

其中采样溶液(萃取剂)可以是乙腈、乙腈-水溶液、含有甲酸或乙酸的乙腈-水溶液。最优的采样溶液为1％甲酸-99％乙腈(体积比)。

其中分析物的洗脱液可以是甲醇-水溶液、氨水-甲醇溶液。其中最优的为5％氨水-95％甲醇溶液(体积比)。

采样探针扫描的速度为0-1000μm/s，在这个速度范围内探针形成的微液结点才稳定，微液结点始终保持恒定的液结点覆盖面积且无气泡产生。

S4.叶片表面农残的原位定量：由于农残在烟叶中属于外源性物质，可以采用空白烟叶加标法定量。通过在空白烟叶(未施加农药的烟叶)表面滴加不同量的农残标样的方式制备农残不同浓度梯度的标准烟叶。将这些烟叶同样采用以上原为检测方法进行检测，得到农残的信号值。从而做出农残在烟叶中浓度与农残检测信号的线性关系。最后，通过实际待测烟叶测得得农残信号值以及定量线性关系(标准曲线)得到实际烟叶中信号对应得农残在烟叶中得浓度。

其中标准烟叶中加标的农残浓度(C，μg/m²)的计算公式为：

C＝(C_标*V_标)/S_标

其中C_标为滴加的标样溶液中农残标样的浓度(μg/mL)，V_标为滴加到烟叶表面的标样体积(mL)，而S_标为滴加的农残在烟叶上形成的斑点的面积(m²)。

样品中待测物的定量检测范围(也即采样深度)是从样品最表层到离样品最表层250～280μm的深度范围内，也就是说，从样品最表层到250～280μm的深度范围内的待测物可以被定量检测，根据微液节点在不同固体样品表面渗透率不同而采样深度稍有不同。若样品本身厚度小于250μm(如一般的烟叶片等)，则定量检测范围是整个样品厚度，也就是说样品整个厚度范围的待测物都可以被定量检测。比如，实施例3-4中的定量检测范围是整个样品。根据这个定量检测范围计算固体样品采样的体积，可得到待测物在固体样品中的体积含量。

以下通过实施例对本发明做进一步的介绍。

实施例1：强阳离子交换材料在不同溶剂条件下对6种农残的吸附作用。

1)不同溶剂环境下农残标准样品的制备：将1mg/mL6种农残混标(马来酰肼、吡虫啉、噻虫嗪、多菌灵、烯酰吗啉和啶虫脒)分别稀释到以下溶液中制成10μg/mL标样：0.1％甲酸-乙腈、1％甲酸-乙腈、1％甲酸-60％乙腈-40％水、0.1％甲酸-60％乙腈-40％水、5％氨水-10％乙腈-90％水、5％氨水-60％乙腈-40％水、5％氨水-100％乙腈、1％甲酸-10％甲醇-90％水、1％甲酸-60％甲醇-40％水、1％甲酸-100％甲醇、5％氨水-10％甲醇-90％水、5％氨水-60％甲醇-40％水、5％甲醇-100％乙腈。配置的溶液储存于4℃备用。

2)静态固相萃取平衡实验：称取2mg磺酸基团键合的硅胶颗粒并分散于以上不同的农农残混标溶液400μL中。将以上悬浊液涡旋1h。然后离心，取出上清液，并与未分散键合硅胶颗粒的各标准溶液一同进行质谱检测。

3)液相色谱-质谱分析：将收集的上清液和未进行吸附实验前的农残混标溶液一同进样于液相色谱-质谱检测系统。液相色谱条件为：日本岛津LC-30AD UPLC系统；色谱柱为ACQUITYUPLC HSS C18(2.1×50mm,1.7μm,Waters)；流动相为：A相0.1％甲酸-水，B相0.1％甲酸-乙腈。洗脱梯度为95％A相维持1min，1min-5min由95％A线性梯度变为0％A相，5min-9min保持0％A相。流速为0.4mL/min。质谱检测条件为：质谱为电喷雾离子源-离子阱串联飞行时间质谱(IT-TOF，岛津公司，日本)。离子源在正离子模式下工作，喷雾针所加电压为4500V，离子源温度200℃，雾化气体(N₂)流量1.5L/min。质量分析器进行一级质谱全扫描模式，扫描范围为100-500m/z。

4)结果分析：通过不同溶剂条件下吸附前和吸附后的各农残信号值就可以计算出静态平衡吸附状态下各农残在键合硅胶上吸附的回收率，由图2所示。由图2可知，首先所有的农残在含有甲酸的乙腈溶液中都具有最大的萃取回收率。对于个别农残，如噻虫嗪，0.1％FA乙腈溶液环境的萃取回收率要略低于1％FA乙腈溶液。这可能是由于噻虫嗪弱的碱性使得需要更高的酸性环境才能使之电离。由此可知，这种填料的上样吸附溶剂环境为含有酸的乙腈环境为最优。另外，当溶液中加入一定量的水对大部分农残的萃取回收率都有负面影响，如1％FA60％乙腈-40％水的溶剂环境下，所有的农残的萃取回收率都比1％FA-乙腈的要低。在碱性环境下，大部分农残都具有极低的萃取回收率，除了马来酰肼和烯酰吗啉。烯酰吗啉只有在甲醇溶剂环境的碱性溶液中才具有低的吸附，而在乙腈环境下的碱性溶液中都具有很高的吸附回收率。马来酰肼则只有在水含量很高的碱性溶剂中才具有低的萃取回收率，这应该与马来酰肼本身高的极性有关。由此可知碱性的甲醇溶液可以作为农残在材料上解析洗脱的溶剂条件。

实施例2：在管富集与洗脱条件的考察

1)涂层毛细管的制备：参考具体实施方案S1.毛细管长度为15cm。

2)不同溶剂环境下农残标准样品的制备：选取实施例1中得出的最佳上样与洗脱溶剂环境，即1％甲酸-乙腈和5％氨水-甲醇，作为农残混标在管吸附动力学考察的上样溶液和洗脱溶液。

3)农残标样上样涂层毛细管的动力学考察：以5μL/min、10μL/min、20μL/min、50μL/min的流速向涂层毛细管中推入25μL农残上样液。在上样液流出的过程中，在毛细管后端接收馏分，每5μL接收一管。将每一管分别进液相色谱-质谱检测。

4)农残标样在涂层毛细管中洗脱的动力学考察：以5μL/min流速先向涂层毛细管中推入25μL农残上样液。然后以不同的流速(1μL/min、2.5μL/min、5μL/min、10μL/min)推入洗脱液。洗脱液同样按照每5μL接一管的速度来接收馏分，一共接收35μL。将每一管洗脱液分别进液相色谱-质谱检测。

5)质谱分析：同实施例1。

6)结果分析：将每一管上样液和洗脱液测得的农残信号对上样和洗脱体积作图可以得到如图4所示的上样突破曲线图和洗脱曲线图。从图中可以看出，当上样流速越大时，农残单位体积的吸附量是越小的，且吸附突破的体积也减小。如当上样流速为20μL/min以上时，基本上第一管上样液中吸附后农残的残留量就达到了上样液自身浓度的80％以上，说明在第一管时涂层毛细管就已经被突破了，这主要是因为流速越大单位时间内农残接触吸附材料的时间就越短，吸附处于动力学非平衡阶段，吸附效率很低。而当上样流速为5μL/min时，多菌灵在25μL农残上样液的体积下仍没有突破。其他农残也有较高的回收率。而洗脱曲线也是一样，在5μL/min洗脱液流速的条件下，农残在第一管溶液中就基本全部洗脱，其浓度是上样时农残浓度的3-4倍。

实施例3：采用原位采样-管内富集-质谱检测得到的叶片中农残的信号与无在线富集的原位采样-质谱检测的信号对比。

1)涂层毛细管的制备：参考具体实施方案S1.

2)加标烟叶的制备：参考具体实施方案S4.这里滴加到烟叶上的农残标样浓度为10ppm，体积为4μL，标样滴加斑点为16mm²。所以加标烟叶中农残在烟叶上的浓度为0.25μg/cm²。

3)原位采样-在管富集-质谱检测体系的搭建：采用微液结点采样-质谱技术(LMJSS-MS)。采样探针为同轴毛细管(外毛细管尺寸251μm I.D./356μm O.D.，内毛细管尺寸100μmI.D./163μm O.D.)，外毛细管与注射泵相连，内毛细管对于两种不同的在线还原形式有不同的连接方式。探针固定在z轴平台上，而样品固定在xy轴平台上，通过三轴移动来控制定位探针与样品之间的位置关系。采用显微摄像头实时观察探针与样品表面形成的液节点。内毛细管与六通阀出口1相连，出口2和5接有涂层毛细管(15cm)，6位与真空腔和真空泵相连。3和4位与注射泵和液相色谱相连。

4)原位采样-在管富集-质谱检测过程：以5μL/min的流速向同轴毛细管外管泵入1％甲酸-99％乙腈萃取剂，这时六通阀切换到采样位，即同轴毛细管内管与涂层毛细管相连，萃取液直接通过涂层毛细管使得农残被富集。探针以500μm/s的移动速度在加标烟叶上移动5min，使得25μL萃取液通过涂层毛细管。扫描结束后，六通阀切换到进样位，涂层毛细管与质谱入口以及洗脱液注射泵相连，注射泵以5μL/min的流速向涂层毛细管泵入5％氨水-95％甲醇溶液进行洗脱，得到洗脱曲线。

5)原位采样-质谱检测体系的搭建与原位检测烟叶中农残的检测过程：在进行无涂层管富集的原位检测时，其原位采样-质谱检测系统与有涂层管富集的几乎一样，只是将六通阀上的2-5位连接的涂层毛细管换为没有涂层的定量环(25μL)，且操作过程与有涂层管富集的步骤一样。

4)质谱分析：同实施例1。

5)结果分析：从结果可以看出，对于同样的加标烟叶，有涂层毛细管富集的体系其检测到农残的信号基本是没有涂层毛细管富集的3-5倍。

Claims

1.一种农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，对待测样品进行原位采样，将采样液在采样流路中富集；随后再利用六通阀切换至洗脱流路，将采样流路中富集的样品洗脱并进行质谱分析；

其中，原位采样探针的出口管、六通阀、涂层毛细管和真空泵相连构成采样流路；六通阀流路切换后，洗脱液泵、六通阀、涂层毛细管和质谱相连构成洗脱流路；

所述的涂层毛细管的内壁设置有强阳离子交换材料涂层；

所述的涂层毛细管具有贯穿液流方向的空腔；涂层毛细管的制备方法为：预先在毛细管内壁涂覆光固化胶，随后填充强阳离子交换材料，最后经光固化处理即得；

所述的强阳离子交换材料为修饰有阳离子交换基团的多孔颗粒；阳离子交换基团为磺酸基团；

所述的原位采样为微液节点采样；

微液节点采样过程中，通过向微液节点采样探针不断泵入萃取剂，并在探针尖端形成微液节点，微液节点与样品表面接触时实现萃取；并同时通过真空泵提供的负压将萃取的采样液连续地流经涂层毛细管，并在涂层毛细管内富集；

萃取剂为含有0.1~2v%甲酸或乙酸的乙腈溶液；

采样过程中，泵入的萃取剂流速为1-5µL/min；

所述洗脱液为甲醇-水溶液、氨水-甲醇溶液；

洗脱检测过程中，所述洗脱液流速为1-5µL/min；

所述的农残为马来酰肼、吡虫啉、噻虫嗪、多菌灵、烯酰吗啉、啶虫脒中的至少一种；

质谱检测的离子源包括电喷雾电离源或大气压化学电离源。

2.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，所述的强阳离子交换材料为修饰有阳离子交换基团的硅胶填料或交换树脂。

3.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，所述的强阳离子交换材料的粒径<50µm。

4.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，所述的毛细管为石英毛细管。

5.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，所述的六通阀上对位孔2和5连接涂层毛细管，而与此对位相邻的两个邻位孔1和6分别连接微液节点采样探针和真空泵，而另两个邻位孔3和4与洗脱液和质谱相连；

采样-富集过程中，所述的采样探针与六通阀孔1、孔2、涂层毛细管、孔5、孔6以及真空泵入口流路连接构成采样流路；

洗脱过程中，六通阀通过A、B位的切换，使洗脱液泵、孔3、孔2、涂层毛细管、孔5、孔4以及质谱入口流路连接构成洗脱流路。

6.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，采样探针包括毛细管内外套管、双孔石英管、鹅形管或折管。

7.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，所述微液节点采样的方式为单点采样或区域扫描采样；

区域扫描采样指将探针以一定移动速度在植物叶片的一个区域内进行扫描一段时间，期间固定针尖-样品距离。

8.如权利要求7所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，所述区域扫描采样的探针移动速度在100-1000µm/s。

9.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，萃取剂为含有0.5~1v%甲酸或乙酸的乙腈溶液。

10.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，洗脱液为5v%氨水-95v%甲醇溶液。

11.如权利要求1所述的农残原位采样-在管富集-质谱检测方法，其特征在于，所述的待测样品为植物叶片。