CN115429749B - 一种复合溶菌酶抑菌凝露及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及医药制剂技术领域，具体公开了一种复合溶菌酶抑菌凝露及其制备方法。复合溶菌酶抑菌凝露按重量百分比计包括如下组分：生物杀菌剂0.0001‑1%，粘附剂0.001‑10%，抗菌药物0.2‑0.4%，抗冲刷微球3.2‑3.6%，余量由缓冲溶液补足至100%，生物杀菌剂的组分包括溶菌酶和溶葡萄球菌酶，抗菌药物的组分中至少有一种物质含有胺基，粘附剂的分子中带有羧基，抗冲刷微球的组分包括明胶和阿拉伯胶的交联产物。本申请的抗冲刷微球通过表面的粘附剂粘附在眼部的黏膜处，延长了生物杀菌剂以及抗菌药物在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。

Description

一种复合溶菌酶抑菌凝露及其制备方法
技术领域
本申请涉及医药制剂技术领域，更具体地说，它涉及一种复合溶菌酶抑菌凝露及其制备方法。
背景技术
目前，在细菌性眼病的临床治疗中，抗生素滴眼液有着广泛的应用，但是随着抗生素的大量应用，眼病细菌中的耐药菌株也在不断增加。同时，抗生素眼药水具有一定的副作用，不宜长期使用。在这一背景下，溶葡萄球菌酶、溶菌酶以及抗菌肽等生物杀菌剂受到了广泛的关注。
相关技术中有一种生物杀菌滴眼液制剂，按照重量百分比计包括如下组分：生物杀菌成分0.0001-1％，负电荷生物黏附材料0.001-10％，抑菌剂0-0.4％，余量由缓冲液补足至100％。
针对上述中的相关技术，发明人认为，相关技术中的生物杀菌成分和抑菌剂虽然能够在眼部发挥灭菌的效果，但是眼科疾病患者的眼泪容易过度分泌。而眼泪对滴眼液具有冲刷和稀释作用，过度分泌的眼泪会导致抑菌剂和生物杀菌成分在眼部的停留时间缩短，影响滴眼液对细菌性眼病的治疗效果。
发明内容
相关技术中，对于眼泪过度分泌的患者而言，眼泪的冲刷和稀释作用会导致抑菌剂和生物杀菌成分在眼部的停留时间缩短，影响滴眼液对细菌性眼病的治疗效果。为了改善这一缺陷，本申请提供一种复合溶菌酶抑菌凝露及其制备方法。
第一方面，本申请提供一种复合溶菌酶抑菌凝露，采用如下的技术方案：
一种复合溶菌酶抑菌凝露，所述复合溶菌酶抑菌凝露按重量百分比计包括如下组分：生物杀菌剂0.0001-1％，粘附剂0.001-10％，抗菌药物0.2-0.4％，抗冲刷微球3.2-3.6％，余量由缓冲溶液补足至100％，所述生物杀菌剂的组分包括溶菌酶和溶葡萄球菌酶，所述抗菌药物的组分中至少有一种物质含有胺基，所述粘附剂的分子中带有羧基，所述抗冲刷微球的组分包括明胶和阿拉伯胶的交联产物。
通过采用上述技术方案，本申请的抗菌凝露与相关技术中的滴眼液制剂相比，在配方中添加了抗冲刷微球。由于抗冲刷微球的组分包括明胶和阿拉伯胶的交联产物，因此抗冲刷微球中含有肽链。粘附剂中含有羧基的成分能与抗冲刷微球中的肽链形成氢键，一部分羧基还能够与肽链的端氨基相互吸附，从而在抗冲刷微球表面引入了粘附剂，增强了抗冲刷微球的粘性。抗冲刷微球为粘附剂和生物杀菌剂提供了附着位点，粘附剂中含有羧基的成分还能够通过羧基与抗菌药物中的胺基结合，有助于缓解眼泪对生物杀菌剂、抗菌药物和粘附剂的稀释作用。
抗冲刷微球一方面能够通过表面的粘附剂粘附在眼部的黏膜处，另一方面还能够通过表面的粘附剂对生物杀菌剂以及抗菌药物进行粘附，从而减弱了眼泪对生物杀菌剂和抗菌药物的冲刷作用，延长了生物杀菌剂和抗菌药物在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
作为优选，所述复合溶菌酶抑菌凝露按重量百分比计包括如下组分：生物杀菌剂0.2-0.8％，粘附剂4-6％，抗菌药物0.25-0.35％，抗冲刷微球3.3-3.5％，余量由缓冲溶液补足至100％。
通过采用上述技术方案，优选了复合溶菌酶抑菌凝露的原料配比，有助于改善复合溶菌酶抑菌凝露对细菌性眼病的治疗效果。
作为优选，所述抗冲刷微球按照如下方法制备：
(1)将明胶和水混合，加热至明胶完全溶解，得到明胶溶液；将阿拉伯胶和水混合，加热至阿拉伯胶完全溶解，得到阿拉伯胶溶液；
(2)将明胶溶液、阿拉伯胶溶液、交联助剂和润滑剂混合，得到原料液，然后对原料液进行均质乳化，再在冰水浴条件下将原料液冷却至3-5℃，然后加入谷氨酰胺转氨酶并静置2-3h；
(3)将酸化剂加入原料液与谷氨酰胺转氨酶的混合物中，得到混合液，继续静置混合液16-20h，然后对混合液进行过滤，得到的滤渣经过碳酸氢钠溶液洗涤和干燥后得到抗冲刷微球。
通过采用上述技术方案，本申请的方法先分别制备了明胶溶液和阿拉伯胶溶液，然后在谷氨酰胺转氨酶的催化下使明胶和阿拉伯胶在溶液中发生交联，交联产物与交联助剂结合后形成颗粒产物。经过酸化剂处理后，谷氨酰胺转氨酶发生失活，剩余的颗粒产物经过过滤、碳酸氢钠溶液洗涤和干燥后即为抗冲刷微球。润滑剂能够阻碍颗粒产物之间的粘结和团聚，有助于改善抗冲刷微球的分散性能。碳酸氢钠溶液能够去除抗冲刷微球表面附着的酸化剂，改善了对颗粒产物的清洗效果。
作为优选，所述交联助剂选用羧甲基纤维素或壳寡糖。
通过采用上述技术方案，羧甲基纤维素和壳寡糖均容易与明胶和阿拉伯胶形成氢键，间接增强了明胶和阿拉伯胶之间的结合力。其中，羧甲基纤维素能够增加抗冲刷微球中游离羧基的含量，而羧基容易与抗菌药物中的胺基结合，因此含有羧甲基纤维素的抗冲刷微球的能够在抑菌凝露中吸附一部分抗菌药物。当抗菌凝露被滴入患者眼中后，抗冲刷微球对抗菌药物起到了缓释作用，减少了抗菌药物在眼泪的冲刷作用下发生流失的可能。
作为优选，所述原料液中明胶和阿拉伯胶的重量比为(1.1-1.3)：1。
通过采用上述技术方案，优选了明胶和阿拉伯胶的用量之比，由于明胶的用量略大于阿拉伯胶，因此制成的抗冲刷微球在水溶液中带有一部分正电荷。通过自身带有的正电荷，抗冲刷微球与粘附剂中带有羧基的组分更容易发生静电吸附，从而增强了对生物杀菌剂的粘附效果，延长了生物杀菌剂在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
作为优选，所述润滑剂选用大豆油、失水山梨醇脂肪酸酯中的一种。
通过采用上述技术方案，大豆油和失水山梨醇脂肪酸酯均可起到润滑作用，其中，失水山梨醇脂肪酸酯在润滑的同时具有良好的抗静电性能，能够减少明胶和阿拉伯胶的交联产物之间由于静电吸附而发生的团聚现象，改善了抗冲刷微球的分散性能，有利于控制抗冲刷微球的粒径增长。减小抗冲刷微球的粒径能够缓解眨眼和眼泪冲刷产生的搬运作用，延长了生物杀菌剂和抗菌药物在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果作为优选，所述酸化剂选用醋酸、柠檬酸中的一种。
通过采用上述技术方案，醋酸和柠檬酸均可通过酸化使得谷氨酰胺转氨酶失活，其中醋酸在通过羧基与谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球中的游离氨基结合之后，也同时将甲基附着到了谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球的表面，从而在酸处理过程中暂时提高了谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球的疏水性，减少了谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球在酸处理过程中发生团聚的可能，有利于控制抗冲刷微球的粒径。
作为优选，所述混合液的pH为3.2-3.6。
通过采用上述技术方案，优选了混合液的pH范围，有利于使谷氨酰胺转氨酶失活，减少了谷氨酰胺转氨酶使得抗冲刷微球之间继续发生交联的可能，有利于控制抗冲刷微球的粒径。
作为优选，所述粘附剂的组分包括透明质酸和羧甲基纤维素钠。
通过采用上述技术方案，透明质酸中含有大量的羧基，而羧甲基纤维素钠能够在水溶液中电离出羧基阴离子，二者均容易和抗冲刷微球发生吸附，有助于提高抗冲刷微球对生物杀菌剂的粘附作用。
第二方面，本申请提供一种复合溶菌酶抑菌凝露的制备方法，采用如下的技术方案。
一种复合溶菌酶抑菌凝露的制备方法，包括以下步骤：
(1)将生物杀菌剂与水混合均匀，经过滤膜过滤后得到杀菌剂溶液；将粘附剂与水混合均匀，经过滤膜过滤后得到粘附剂溶液；
(2)将粘附剂溶液、杀菌剂溶液、抗菌药物和抗冲刷微球混合并搅拌，得到原液，使用缓冲溶液对原液稀释，经过静置后即可得到复合溶菌酶抑菌凝露。
通过采用上述技术方案，本申请先分别制备了杀菌剂溶液和粘附剂溶液，然后将粘附剂溶液、杀菌剂溶液、抗菌药物和抗冲刷微球混合，通过粘附剂使抗冲刷微球和生物杀菌剂发生结合，再通过缓冲溶液的稀释和静置得到了复合溶菌酶抑菌凝露。当患者使用本申请的抑菌凝露时，抗冲刷微球表面的粘附剂与患者眼部的黏膜发生粘附，从而令生物杀菌剂附着到了黏膜表面，减弱了眼泪对生物杀菌剂的冲刷作用，延长了生物杀菌剂在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1、本申请通过抗冲刷微球为粘附剂和生物杀菌剂以及抗菌药物提供了附着位点，缓解了眼泪的稀释作用，抗冲刷微球通过表面的粘附剂粘附在眼部的黏膜处，延长了生物杀菌剂以及抗菌药物在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
2、本申请中优选大豆油、失水山梨醇脂肪酸酯中的一种作为润滑剂，其中失水山梨醇脂肪酸酯在润滑的同时，还能够减少明胶和阿拉伯胶的交联产物之间由于静电吸附而发生的团聚现象，改善了抗冲刷微球的分散性能，有利于控制抗冲刷微球的粒径。
3、本申请的方法，在将各原料混合之后，通过粘附剂使抗冲刷微球和生物杀菌剂发生结合，再通过缓冲溶液的稀释和静置得到了复合溶菌酶抑菌凝露。在本申请的方法制备的抑菌凝露中，抗冲刷微球表面的粘附剂对生物杀菌剂进行了粘附，减弱了眼泪对生物杀菌剂的冲刷作用，延长了生物杀菌剂在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果
具体实施方式
以下结合实施例、制备例和对比例对本申请作进一步详细说明，本申请涉及的原料均可通过市售获得。
抗冲刷微球的制备例
以下以制备例1为例说明。
制备例1
本制备例中，抗冲刷微球按照以下方法制备：
(1)将2kg明胶和10kg水混合，加热至明胶完全溶解，得到明胶溶液；将2kg阿拉伯胶和10kg水混合，加热至阿拉伯胶完全溶解，得到阿拉伯胶溶液；
(2)将步骤(1)的明胶溶液、步骤(1)的阿拉伯胶溶液、0.6kg交联助剂和1kg润滑剂混合，得到原料液，然后对原料液进行均质乳化，再在冰水浴条件下将原料液冷却至4℃，然后加入0.3kg谷氨酰胺转氨酶并静置2.5h；本步骤中，交联助剂为壳寡糖，润滑剂为大豆油；
(3)将酸化剂加入原料液与谷氨酰胺转氨酶的混合物中，得到pH为3.8的混合液，继续静置混合液18h，然后对混合液进行过滤，得到的滤渣经过质量分数5％的碳酸氢钠溶液洗涤，再在105℃干燥2h后得到抗冲刷微球；本步骤中，酸化剂为柠檬酸。
如表1，制备例1-5的不同之处在于原料液中明胶和阿拉伯胶的含量不同。
表1
样本 明胶/kg 阿拉伯胶/kg
制备例1 1 1
制备例2 1.1 1
制备例3 1.2 1
制备例4 1.3 1
制备例5 1.4 1
制备例6
本制备例与制备例3的不同之处在于，交联助剂为羧甲基纤维素。
制备例7
本制备例与制备例6的不同之处在于，润滑剂选用失水山梨醇脂肪酸酯(司盘80)。
制备例8
本制备例与制备例7的不同之处在于，酸化剂选用醋酸。
如表2，制备例8-12的不同之处在于混合液的pH不同。
表2
样本 制备例8 制备例9 制备例10 制备例11 制备例12
混合液pH 3.8 3.6 3.4 3.2 3.0
实施例
实施例1-5
以下以实施例1为例进行说明。
实施例1
本实施例中，生物杀菌剂由溶菌酶、溶葡萄球菌酶及抗菌肽按照8:2:3的重量比混合而成，粘附剂由透明质酸和羧甲基纤维素钠按照1:1的重量比混合而成，抗菌药物由洗必泰、三氯叔丁醇、苯氧乙醇按照5:4:3的重量比混合而成。
本实施例中，复合溶菌酶抑菌凝露包括如下组分：生物杀菌剂0.0001kg、粘附剂0.001kg、抗菌药物0.2kg、抗冲刷微球3.2kg、余量由pH6.5的磷酸盐缓冲液补足至100kg。
本实施例中，复合溶菌酶抑菌凝露按照以下步骤制备：
(1)将生物杀菌剂与水按照1:20的重量比混合均匀，经过滤膜过滤后得到杀菌剂溶液；将粘附剂按照1:20的重量比与水混合均匀，经过滤膜过滤后得到粘附剂溶液；
(2)将粘附剂溶液、杀菌剂溶液、抗菌药物和制备例1的抗冲刷微球混合并搅拌，得到原液，使用缓冲溶液对原液稀释，经过静置后即可得到复合溶菌酶抑菌凝露。
如表3,实施例1-5的不同之处主要在于复合溶菌酶抑菌凝露的原料配比不同
表3
样本 生物杀菌剂/kg 粘附剂/kg 抗菌药物/kg 抗冲刷微球/kg
实施例1 0.0001 0.001 0.2 3.2
实施例2 0.2 4 0.25 3.3
实施例3 0.5 5 0.3 3.4
实施例4 0.8 6 0.35 3.5
实施例5 1 10 0.4 3.6
实施例6-16
如表4，实施例6-16与实施例3的不同之处在于，抗冲刷微球的制备例不同。
表4
对比例
对比例1
本对比例中，生物杀菌成分由溶菌酶、溶葡萄球菌酶及抗菌肽按照8:2:3的重量比混合而成，负电荷生物黏附材料由透明质酸和羧甲基纤维素钠按照1:1的重量比混合而成，抑菌剂由洗必泰、三氯叔丁醇、苯氧乙醇按照5:4:3的重量比混合而成，缓冲液为pH6.5的磷酸盐缓冲溶液。
本对比例提供一种生物杀菌滴眼液制剂，包括如下组分：生物杀菌成分0.5kg，负电荷生物黏附材料5kg，抑菌剂0.2kg，余量由缓冲液补足至100kg。
对比例2
本对比例与实施例3的不同之处在于，复合溶菌酶抑菌凝露的组分不包括粘附剂。
对比例3
本对比例与实施例3的不同之处在于，复合溶菌酶抑菌凝露的组分不包括抗冲刷微球。
对比例4
本对比例与实施例3的不同之处在于，抗菌药物由三氯叔丁醇、苯氧乙醇按照4:3的重量比混合而成，抗菌药物的组分中不包括洗必泰。
对比例5
本对比例与实施例3的不同之处在于，粘附剂选用聚乙二醇。
性能检测试验方法
准备家兔样本：取体重2.5±0.2kg的健康成年无眼疾的新西兰家兔，在家兔后耳缘静脉注射2.5mL浓度为30mg/mL的戊巴比妥钠。待角膜反射消失后用1mL注射器抽取浓度为5×107CFU/mL的金黄色葡萄球菌0.1mL，自角膜近中央注入角膜实质层内，将注射过金黄色葡萄球菌的家兔单笼饲养3d，得到家兔样本。
配制试剂：将实施例1-16、对比例2-3的抑菌凝露以及对比例1的滴眼液制剂分别与5mg/mL的荧光素胶束按照5:1的重量比混合均匀，得到受检试剂。将生理盐水与5mg/mL的荧光素胶束生理盐水按照5:1的重量比混合均匀，得到对照试剂。
试验步骤：将家兔样本每4只编为一组(雌雄各2只)，按组在家兔样本的结膜囊内滴加受检试剂，滴加量为20μL/只，每组家兔样本对应一种受检试剂，记录每组家兔样本眼内荧光的平均持续时间T1，结果见表5。另取一组家兔样本，在家兔样本的结膜囊内滴加对照试剂，滴加量为20μL/只，记录该组家兔样本眼内荧光的平均持续时间T2，结果为306.8s。
首次滴加受检试剂后，每隔6h在家兔样本的结膜囊内滴加一次与前次相同的试剂，每次的滴加量均为20μL/只，记录各组家兔样本从滴加受检试剂开始到炎症完全痊愈的平均给药次数(四舍五入保留整数)，结果见表5。
结膜炎症痊愈标准：肉眼观察无充血，无水肿和浑浊，无残留菌斑，无分泌物。
表5
结合实施例1-5和对比例1并结合表5可以看出，实施例1-5测得的T1均大于对比例1，且平均给药次数均小于对比例1，说明实施例1-5的抗冲刷微球延长了生物杀菌剂和抗菌药物在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
结合实施例3和对比例2并结合表5可以看出，实施例3测得的T1大于对比例2，且平均给药次数小于对比例2，说明当抑菌凝露的配方中不含粘附剂时，生物杀菌剂和抗菌药物在眼部的留存时间相对较短，不利于治疗细菌性眼病。
结合实施例3和对比例3并结合表5可以看出，实施例3测得的T1大于对比例3，且平均给药次数小于对比例3，说明当抑菌凝露的配方中不含抗冲刷微球时，生物杀菌剂和抗菌药物在眼部的留存时间相对较短，不利于治疗细菌性眼病。
结合实施例3和对比例4并结合表5可以看出，实施例3测得的T1大于对比例4，且平均给药次数小于对比例4，说明当抗菌药物的组分中不包括带有胺基的化合物时，抗菌药物与粘附剂之间的粘附力减弱，抗菌药物在眼部的留存时间相对较短，不利于治疗细菌性眼病。
结合实施例3和对比例5并结合表5可以看出，实施例3测得的T1大于对比例5，且平均给药次数小于对比例5，说明当粘附剂的分子中不含羧基时，粘附剂对抗冲刷微球、生物杀菌剂以及抗菌药物中含有胺基的组分的粘附效果下降，不利于治疗细菌性眼病。
结合实施例3和实施例6-9并结合表5可以看出，当原料液中明胶和阿拉伯胶的重量比为(1.1-1.3)：1时，抗冲刷微球与粘附剂中带有羧基的组分更容易发生静电吸附，从而增强了对生物杀菌剂的粘附效果，延长了生物杀菌剂在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。当明胶和阿拉伯胶的重量比超过1.3:1时，抑菌凝露对细菌性眼病的治疗效果提升不明显。
结合实施例7、实施例10并结合表5可以看出，实施例10测得的T1大于实施例7，且平均给药次数均小于实施例7，说明实施例10的抗冲刷微球对抗菌药物起到了缓释作用，减速了抗菌药物的流失，增强了抗菌药物药效的持久度，改善了对细菌性眼病的治疗效果。
结合实施例10、实施例11并结合表5可以看出,实施例11测得的T1大于实施例10，且平均给药次数均小于实施例10，说明失水山梨醇脂肪酸酯减少了明胶和阿拉伯胶的交联产物之间发生的团聚现象，减小了抗冲刷微球的粒径，缓解了眨眼和眼泪冲刷对抗冲刷微球的搬运作用，延长了生物杀菌剂和抗菌药物在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
结合实施例11、实施例12并结合表5可以看出，实施例12测得的T1大于实施例11，且平均给药次数均小于实施例11，说明醋酸在通过羧基与谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球中的游离氨基结合之后，也同时将甲基附着到了谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球的表面，从而在酸处理过程中暂时提高了谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球的疏水性，减少了谷氨酰胺转氨酶以及抗冲刷微球在酸处理过程中发生团聚的可能，减小了抗冲刷微球的粒径，缓解了眨眼和眼泪冲刷对抗冲刷微球的搬运作用，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
结合实施例12-16并结合表5可以看出，当混合液的pH为3.2-3.6之间时，谷氨酰胺转氨酶失活已经较为彻底，因此抗冲刷微球的颗粒之间不容易继续发生交联，从而减小了抗冲刷微球的粒径，缓解了眨眼和眼泪冲刷对抗冲刷微球的搬运作用，延长了生物杀菌剂和抗菌药物在眼部的留存时间，有助于改善对细菌性眼病的治疗效果。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (1)

1.一种复合溶菌酶抑菌凝露，其特征在于，所述复合溶菌酶抑菌凝露按重量百分比计包括如下组分：生物杀菌剂0.2%-0.8%，粘附剂4%-6%，抗菌药物0.25%-0.35%，抗冲刷微球3.3%-3.5%，余量由pH6.5 的磷酸盐缓冲液补足至100%；所述生物杀菌剂由溶菌酶、溶葡萄球菌酶及抗菌肽按照 8:2:3 的重量比混合而成，所述粘附剂由透明质酸和羧甲基纤维素钠按照 1:1 的重量比混合而成，所述抗菌药物由洗必泰、三氯 叔丁醇、苯氧乙醇按照 5:4:3 的重量比混合而成；
所述抗冲刷微球按照如下方法制备：
（1）将明胶和水混合，加热至明胶完全溶解，得到明胶溶液；将阿拉伯胶和水混合，加热至阿拉伯胶完全溶解，得到阿拉伯胶溶液；所述原料液中明胶和阿拉伯胶的重量比为1.2:1；
（2）将明胶溶液、阿拉伯胶溶液、交联助剂和润滑剂混合，得到原料液，然后对原料液进行均质乳化，再在冰水浴条件下将原料液冷却至3-5℃，然后加入谷氨酰胺转氨酶并静置2-3h；所述交联助剂为羧甲基纤维素，所述润滑剂为失水山梨醇脂肪酸酯；
（3）将酸化剂加入原料液与谷氨酰胺转氨酶的混合物中，得到混合液，继续静置混合液16-20h，然后对混合液进行过滤，得到的滤渣经过碳酸氢钠溶液洗涤和干燥后得到抗冲刷微球；所述酸化剂为醋酸，所述混合液的pH为3.2-3.6；
所述复合溶菌酶抑菌凝露的制备方法包括以下步骤：
（1）将生物杀菌剂与水混合均匀，经过滤膜过滤后得到杀菌剂溶液；将粘附剂与水混合均匀，经过滤膜过滤后得到粘附剂溶液；
（2）将粘附剂溶液、杀菌剂溶液、抗菌药物和抗冲刷微球混合并搅拌，得到原液，使用缓冲溶液对原液稀释，经过静置后即可得到复合溶菌酶抑菌凝露。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102552889A (zh) * 2010-12-27 2012-07-11 上海高科联合生物技术研发有限公司 一种生物杀菌滴眼液制剂
CN102961324A (zh) * 2012-11-16 2013-03-13 沈阳药科大学 一种溶菌酶眼用凝胶剂及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102552889A (zh) * 2010-12-27 2012-07-11 上海高科联合生物技术研发有限公司 一种生物杀菌滴眼液制剂
CN102961324A (zh) * 2012-11-16 2013-03-13 沈阳药科大学 一种溶菌酶眼用凝胶剂及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
眼科缓释新剂型——微粒体眼用给药系统;张俊杰等;《眼科研究》;第14卷(第3期);第207-211页 *

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