CN115397480A - 可流动纤维蛋白原凝血酶糊剂 - Google Patents
可流动纤维蛋白原凝血酶糊剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115397480A CN115397480A CN202080084467.2A CN202080084467A CN115397480A CN 115397480 A CN115397480 A CN 115397480A CN 202080084467 A CN202080084467 A CN 202080084467A CN 115397480 A CN115397480 A CN 115397480A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- composition
- blend
- oil
- paste
- weight
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
- A61L24/10—Polypeptides; Proteins
- A61L24/106—Fibrin; Fibrinogen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
- A61K38/4833—Thrombin (3.4.21.5)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/363—Fibrinogen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1658—Proteins, e.g. albumin, gelatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
- A61L24/043—Mixtures of macromolecular materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
- A61L2400/04—Materials for stopping bleeding
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Surgery (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明提供了组合物和用于制备受损组织中/上的纤维蛋白粘合密封剂的方法,这些组合物包含:(i)纤维蛋白原、凝血酶的共混物,其中该共混物呈多个粒子的形式,和(ii)疏水性分散剂,其中该组合物在10℃至37℃范围内的至少一个温度下呈糊剂的形式。
Description
技术领域
本发明尤其涉及止血组合物,该止血组合物包含纤维蛋白原、凝血酶和疏水性分散剂的共混物。
背景技术
特别是在外科手术中,控制出血对于使失血最小化、减少术后并发症、和缩短手术室中外科手术的持续时间是至关重要和关键的。
干燥密封剂粉末在与流体混合时可形成糊剂或浆液,该糊剂或浆液可用作可流动、可挤出且可注射止血剂并由血浆衍生的组分制成,这些血浆衍生的组分例如(a)纤维蛋白原混合物,该纤维蛋白原混合物主要由纤维蛋白原任选地连同催化量的因子XIII组成;和(b)高效能凝血酶。这种方法的主要缺点是全部在需要时和在使用时,将粉末与液体混合,将其捏合成糊剂并且将其回填到选择的递送装置中所需的时间。这些操作都是耗时的,并且潜在地可能损害所递送产品的无菌性。
标题为“Purified thrombin preparations”的美国专利4965203公开了使用稳定量的多元醇和特定pH的缓冲液使之在室温下稳定的改良凝血酶制剂。
标题为“Fibrin-based glue granulate and corresponding productionmethod”的欧洲专利1140235涉及含有凝血酶、因子XIII、纤维蛋白原和钙盐的呈粒度为大于50μm至1000μm的颗粒的形式的可流动纤维蛋白胶颗粒。
标题为“Formulations for wound therapy”的美国专利9717821涉及包含由纤维蛋白原和/或凝血酶的混合物构成的干燥粉末纤维蛋白密封剂的制剂用于治疗伤口或损伤,具体地用作局部止血组合物或用于外科手术。
标题为“Hemostatic compositions and devices”的美国专利7109163涉及已灭菌的和未灭菌的止血组合物,这些止血组合物含有生物相容性液体,该生物相容性液体具有适用于止血并且基本上不溶于该液体的生物相容性聚合物的粒子、各自基于该液体的重量计至多约20重量%的甘油和约1重量%的苯扎氯铵,所有这些成分均基本上均质地分散在整个液体中以形成基本上均质的组合物。
Retzinger等人已示出,纤维蛋白原自发地从含有该蛋白质的水性介质吸附到分散在那些相同介质中的液体疏水相的液滴(Arterioscler Thromb.Vasc.Biol.1998,1948-1957)。
发明内容
本发明尤其涉及止血组合物(也称为“组合物”),该止血组合物包含纤维蛋白原、凝血酶和疏水性分散剂的共混物。
本发明的目的是提供一种用于制备具有治疗或药用价值的可铺展的糊状止血剂的组合物,该组合物可容易地施用于有需要的部位,包括在身体的难以触及的区域中。
纤维蛋白原与凝血酶会在水性介质中相互作用。因此,对于包括纤维蛋白原和凝血酶两者的稳定液体/可流动组合物,在施用于出血部位上例如以进行密封和止血之前,应当使用非水性介质(分散剂)。
找到具有适当稠度的合适制剂并非易事,因为不能在不损害糊性、粘合性和/或止血功能的情况下使用常用的分散剂诸如水或亲水性分散剂。
本发明人已经发现,疏水性液体可提供纤维蛋白原和凝血酶粒子的流动性,同时在施用在出血组织中/上时维持其功能。
此外,由于止血作用对时间要求严格以便满足医疗需求,因此本发明所公开的组合物可在不重构的情况下立即使用,从而避免麻烦并节省医师的时间以及最大程度降低污染的风险。
因此,已经证实,本发明所公开的组合物是易于使用、稳定且有效的局部止血剂。
止血组合物可以糊剂形式用作止血剂,用于各种外科和伤口愈合局部施用,诸如防粘连屏障、止血剂、组织密封剂等。
根据本公开的一个方面,提供了一种组合物,该组合物包含:(i)纤维蛋白原和凝血酶的共混物,其中该共混物呈多个粒子的形式,和(ii)疏水性分散剂,其中该组合物在10℃至37℃范围内的至少一个温度下呈糊剂的形式。
在一些实施方案中,所述共混物与疏水性分散剂的相应重量比的范围是从0.5:1至低于0.9:1。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,组合物或糊剂还包含胶原。在一些实施方案中,胶原以按相应重量计低于20%的浓度存在。在一些实施方案中,胶原以按重量计至少约10%的浓度存在。
在一些实施方案中,糊剂的特征在于如在25℃的温度和10rad/sec的频率下测量的在约0.1Pa至约15Pa范围内的屈服点。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,疏水性分散剂选自植物油、矿物油以及它们的组合。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,疏水性分散剂选自包括以下中的一者或多者的油:大豆油、橄榄油、胆固醇油酸酯、玉米油、甘油三油酸酯、红花油、角鲨烯、角鲨烷和十二烷以及它们的任何混合物。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,疏水性分散剂包括矿物油。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,按共混物的重量计,纤维蛋白原以60%至95%或70%至90%的浓度存在。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,按共混物的重量计,纤维蛋白原以60%至85%的浓度存在,并且按共混物的重量计,凝血酶以5%至10%的浓度存在。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,纤维蛋白原和凝血酶分别以从5:1至20:1的范围内,例如,5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1或20:1(包括其间的任何范围)的相应重量比存在于共混物中。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,共混物包含按重量计小于6%的水。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,组合物包含按总重量计小于5%的水、小于4.5%的水、小于4%的水、小于3.5%的水或小于3%的水。在本公开的任何方面的一些实施方案中,组合物包含浓度为按总重量计至多5%的水、至多4.5%的水、至多4%的水、至多3.5%的水或至多3%的水。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,共混物还包含选自以下的一种或多种赋形剂:氨基酸、白蛋白、糖类以及它们的任何衍生物或混合物。术语“衍生物”是指含有母体的基本元素的化合物。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,赋形剂包括钙盐和/或赖氨酸。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,该多个粒子的特征在于最高至270μm的中值粒度。
在粒度的上下文中,术语“中值”是指将群体分成两半,使得50%的群体大于或小于该粒度的粒度。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,该多个粒子的特征在于约10μm至约270μm的中值粒度。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,组合物包含浓度小于12%的氧化纤维素(OC),或在一些实施方案中,甚至不含OC。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,共混物和/或组合物不含OC。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,OC包括氧化再生纤维素(ORC)。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,共混物是喷雾干燥混合的,或者另选地或附加地是高剪切混合的。在本公开的任何方面的一些实施方案中,共混物是高剪切混合的。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,凝血酶源自猪血浆。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,组合物是止血组合物。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,组合物在用于治疗出血组织的方法中使用。
在本公开的任何方面的一些实施方案中,组合物包含:(i)纤维蛋白原、凝血酶的共混物,其中共混物呈多个粒子的形式;和(ii)疏水性分散剂,该疏水性分散剂包括矿物油;和任选地(iii)选自钙盐和/或赖氨酸的一种或多种赋形剂或添加剂,其中:共混物(粉末)与疏水性分散剂(“介质”)的比率(也称为“油比率”)的范围是从0.5:1至0.9(重量/重量);该多个粒子的特征在于中值粒度为约100μm至约270μm,并且其中组合物在10℃至37℃范围内的至少一个温度下呈糊剂的形式。
根据本公开的另一个方面,提供了一种通过将其任何方面或实施方案中的本发明所公开的组合物施用在受损组织的表面中/上来制备受损组织中/上的纤维蛋白粘合密封剂的方法(被称为:“粘合密封剂制备方法”)。
在粘合密封剂制备方法的一些实施方案中,组织是软组织。在一些实施方案中,提供了通过在其任何实施方案中的粘合密封剂制备方法获得的密封剂层。在一些实施方案中,所获得的密封剂层的特征在于至少3.5N/m的最小粘结强度,任选地如通过T-剥离测试(例如,根据ASTM F2256-052015)测量的。
根据本公开的另一个方面,提供了一种组合物,该组合物包含:(i)纤维蛋白原、凝血酶的共混物,其中共混物呈多个粒子的形式;和(ii)疏水性分散剂,该疏水性分散剂包括矿物油;和任选地(iii)选自钙盐和/或赖氨酸的一种或多种赋形剂或添加剂,其中:所述共混物与疏水性分散剂的比率的范围是从0.5至低于0.9(重量/重量);该一种或多种赋形剂或添加剂选自钙盐和赖氨酸;该多个粒子的特征在于中值粒度为约10μm至约100μm,并且其中组合物在10℃至37℃范围内的至少一个温度下呈糊剂的形式,并且任选地不含OC(例如,ORC)。
根据本公开的另一个方面,提供了一种套件,该套件包括:
a.容器,该容器容纳在其任何方面和/或实施方案中的本发明所公开的组合物;
b.施用装置,该施用装置用于将组合物施用于组织;和任选地
c.使用说明。
除非另有定义,否则本文所用的所有技术和/或科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。尽管类似于或等同于本文所述那些的方法和材料可用于本发明的实施方案的操作或试验,但下文描述的是示例性方法和材料。如发生矛盾,应以专利说明书及其定义为准。另外,材料、方法和示例仅为示例性的,而非旨在进行必需的限制。
附图说明
图1A-图1D展示了如实施例1中所述的选定样品的流动性,这些图示出了:展示选定样品的流动性的摄影图像(图1A;从左图到右图:粉末/分散剂重量比:1/1.1=0.91、1/1.3=0.77、1/1.70=0.59、1/2=0.50;从上图到下图:大豆油、橄榄油、矿物油、丙二醇、甘油、聚乙二醇(PEG)400);示出具有若干粉末与大豆油比率的组合物的粘度特性的曲线图(图1B);以及示出当使用疏水性分散剂(诸如大豆油)时糊剂在用H2O固化7分钟之后形成完整层(图1C),而当分散剂是PEG 400时糊剂在相同条件下不能形成完整层(图1D)的比较摄影图像。
图2呈现了柱形图,该柱形图示出了根据下表2的每个所测试样品1-8的平均胶凝时间(N=3)。
图3A-图3B呈现了曲线图,这些曲线图展示了根据表3中所示的统计分析,对于胶凝时间的主要影响参数(图3A)和相互作用(图3B)(“siz”表示尺寸,“percenta”表示百分比)。
图4A-图4B呈现了:示出根据下表4的各种糊剂制剂样品每宽度的平均载荷的平均值的曲线图(图4A;使用合并标准偏差来计算区间);和呈现每对组合物的平均值差的图基联立检验(图4B)(如果区间不包含“零”,则对应的平均值具有显著性差异)。
图5呈现了柱形图,该柱形图示出了根据下表7的每个所测试样品的每宽度的载荷(“T-剥离测试”)。
图6A-图6B呈现了曲线图,这些曲线图展示了根据表12中所示的统计分析,对于T-剥离测试的主要影响参数(图6A)和相互作用(图6B)(“siz”表示尺寸,“percenta”表示百分比)。
图7呈现了柱形图,该柱形图示出了通过在施用80N的固定压制力之后在施用装置内的液相/固相分离(残余物)评估的制剂均质性。结果表明,对于下表13呈现的制剂样品,较小的粒子可实现更好的均质性糊剂。
图8呈现了柱形图,该柱形图示出了稳定性评估:在室温下在4个时间点:0天、7天、23天和30天时对下表14中描述的样品评估残余物(左四重柱:来自A组的粒度为10μm-52μm;右四重柱:来自B组的粒度为23μm-83μm)。通过在已经施用80N的固定压制力之后在施用装置内的液相/固相分离(残余物)评估制剂均质性。
图9示出了曲线图,这些曲线图示出了在实施例部分中的实施例5中描述的样品(1)至(5)(在图形区域中被标记为“1”至“5”)上进行的三间隔触变性测试的结果。虚线界定时间间隔“I”、“II”和“III”。
图10A-图10B呈现了摄影图像,这些摄影图像概述了在肝素化条件下使用脾脏活检穿孔器模型,用本文所公开的示例性组合物的6mm活检穿孔器在猪脾脏上进行的体内施用:视觉流程图图像(图10A从左图到右图:*受损组织中的出血部位;**在靠近出血部位的位置处接近预填充有组合物的注射器;***施用组合物;****填塞1min;和*****受损组织中/上的密封剂);以及如表15中所呈现的用于体内施用的所测试样品1-样品4的摄影图像(分别从上图到下图)(从左图到右图:出血部位、施用组合物和在填塞1分钟之后),这些图像示出粒度对止血功效没有显著影响(图10B)。
具体实施方式
凝血酶和纤维蛋白原共混物的商业制剂以粉末形式存在。对于有限和特定部位,施用粉末可能难以实现。为此,有利的是使用包含粉末的可流动组合物。
纤维蛋白原和凝血酶可在无水亲水性分散剂中保持不反应,并且一旦施用到出血部位,无水亲水性分散剂吸引水,从而促进纤维蛋白原和凝血酶反应并因此形成凝块。
然而,在本公开中,已令人惊讶地发现,使用疏水性分散剂提供优于无水亲水性分散剂的显著优势。
根据本公开的一个方面,提供了一种呈糊剂形式的组合物,该组合物包含分散在疏水性分散剂中的纤维蛋白原和凝血酶的共混物。有利地,糊剂可以是可流动的和/或均质的。本发明人发现例如0.3:1、0.4:1或0.5:1至低于0.9:1(分别为重量/重量)的共混物与分散剂的范围是合适的。在一些实施方案中,组合物在室温左右下呈糊剂的形式。
所谓“室温左右”意指在10℃至40℃、10℃至37℃或15℃至37℃范围内的至少一个温度值,例如10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、37℃或40℃,包括其间的任何值和范围。
所谓“0.3:1至低于0.9:1(重量/重量)”意指例如0.3:1、0.35:1、0.4:1、0.45:1、0.5:1、0.55:1、0.6:1、0.65:1、0.7:1、0.75:1、0.8:1或接近0.9:1重量/重量。在一些实施方案中,共混物与疏水性分散剂的比率为约0.6:1至约0.8:1,例如约0.8:1(重量/重量)。在一些实施方案中,共混物与疏水性分散剂的比率为约0.7:1(重量/重量)。
在下文实施例1中讨论的图1A示出了在室温下粉末与疏水性分散剂的相应比率为0.50:1、0.59:1、0.71:1和0.83:1的均质的糊剂。相比之下,以粉末与亲水性分散剂(除了聚乙二醇;PEG400)的相似比率制备的组合物在这些温度下不能表现为均质的糊剂。此外,结果显示,与用疏水性分散剂以粉末与分散剂的相似比率制备的糊剂相比,用PEG400制备的糊剂的粘合特性较差。根据本发明的结果,在糊剂的流动性、凝胶化和粘合性方面,由分散在疏水性分散剂中的包含纤维蛋白原和凝血酶的共混物制备的糊剂似乎优于由用非水性亲水性分散剂分散的包含纤维蛋白原和凝血酶的共混物制备的糊剂。
结果也显示,与其他糊剂制剂相比,矿物油(“MO”)提供最高的粘合特性。根据本公开已经发现,与较小粒子(<106μm)相比,包含较大粒子(106μm-250μm)的糊剂表现出更快的胶凝。然而,具有较大颗粒的糊剂通常表现出差的均质性,可能因为糊剂制剂包含两个分离的相:固体粒子和液体疏水性介质。不受任何机制的束缚,较小的颗粒可缓解相的分离,因此改善均质性和最终结果,改善了粘连性。实验结果已经显示ORC对胶凝速度或速率的积极效果,然而,粘连性的结果可能在不存在ORC时是优异的。具有更高油剂量的糊剂显示出较慢的胶凝性能。就反映糊剂粘连性的T-剥离测试而言,未观察到油剂量的主要效果。
如本文所用,术语“制剂”是指呈乳液、洗剂、霜剂、凝胶、糊剂等形式的媒介组合物。
还已经发现,当共混物(粉末)与疏水性分散剂的比率为低于约0.5:1重量/重量时,相关组合物将失去功效,例如胶凝时间缩短。
参考图2(其中的测试糊剂样品“3”和“4”),该图显示,对于粉末与油比率为1/1.4(0.71:1)的具有某些组分和组分特性的组合物,与例如1/1.7(0.58:1)的比率相比,胶凝时间增加了约100%,这导致长得多的胶凝时间。
如本文所用,并且除非另行指出,否则术语“按重量计”、“重量/重量”、“重量百分比”或“重量%”在本文中可互换使用,它们描述特定物质(例如共混物)在相应混合物、溶液、制剂或组合物的总重量中的浓度。
当提及“共混物”时,应当将其理解为至少两种成分的任何形式的混合物、均质和非均质的混合物。共混物可包含如下文进一步详述的其他成分。因此,术语“…的共混物”和“包含…的共混物”在本文通篇可互换使用。
在一些实施方案中,共混物是生物相容的。
在一些实施方案中,术语“生物相容的”或其任何语法变型被定义为材料在特定应用中以适当宿主反应起作用的能力。更具体地,在本公开的上下文中,“生物相容性”是指作为不引起任何不期望效果的止血剂起作用的能力。
因此,生物相容的组合物通常为生物活性提供合适的环境,而不会在宿主中诱导任何不期望的局部或全身反应。
在一些实施方案中,共混物呈多个粒子(通常是固体粒子)的形式。附加地或另选地,共混物可呈粉末的形式。
本文中,包含纤维蛋白原和凝血酶粉末的共混物也被称为“FTP”或“FTP共混物”。
如本文所用,术语“粉末”是指分散的干燥固体粒子,通常呈以在0.1微米至1000微米范围内的小粒度为特征的固体的多个粒子的形式。
在一些实施方案中,共混物呈聚集体或颗粒的形式。术语“聚集体”描述由组装的组分形成的颗粒。聚集体可任选地通过以下步骤来制备:加湿粉末组合物;压实,例如,通过辊压和/或重压粉末以形成聚集体;除湿;研磨;筛分聚集体;以及任选地将所得聚集体定量添加到储存容器中或递送装置中。术语“颗粒”或“颗粒材料”可具体地表示通常低于250微米、低于110微米、低于60微米或甚至低于20微米的离散固体粒子的凝聚体。在示例性实施方案中,利用高剪切混合将纤维蛋白原、凝血酶和任选地CaCl2和ORC组装成聚集体。在另一个实施方案中,组合物呈混合物的形式。在示例性实施方案中,混合物可包含喷雾干燥的第一微粒与喷雾干燥的第二微粒的组合,该喷雾干燥的第一微粒包含纤维蛋白原,该喷雾干燥的第二微粒包含凝血酶(例如,人凝血酶),这两种微粒一起形成例如10微米至约等于或超过250微米的粒子。
术语“固体”表征化合物或组合物在室温(例如25℃)和大气压(760mmHg)下的状态,即,在储存期间保持其形态的高稠度的化合物或组合物。在本申请中该术语还涉及非流体颗粒或溶解的物质。与“液体”化合物和组合物相反,固体不在其自身重量下流动。
如本文所用,术语“糊剂”涉及组合物在约室温的至少一个温度处的稠度,并且定义固体颗粒的流体混合物。通常,糊剂没有固定形状,因此不是固体或气体。根据本公开的术语“糊剂”还可包括浆液、软膏和膏剂。浆液在功能上可被认为是稀薄的油状糊剂。根据本公开的糊剂还可包括由可膨胀气体诸如空气构成的孔。因此,组合物是糊剂,或者是在10℃至37℃范围内的至少一个温度下处于糊状稠度。
如本文所用,在糊剂的上下文中,术语“可流动的”或其任何语法变型涉及在室温左右下具有流体稠度并且通常能够通过注射器施加并且/或者在将组合物施用在出血部位中/上至少1秒至10秒后仍然可流动。
糊剂可具有足够高的粘度和效能,以通过将戴手套手指浸入到糊剂中并将糊剂放置在出血部位上来允许其被外科医生止血有效地使用。
术语“可流动的”还涵盖粘稠溶液。术语“粘稠溶液”是指具有增加的流动阻力而又能够流动的溶液,该溶液通常但不仅仅具有大于约5Pa·s且小于约150Pa·s的静态粘度。在一些实施方案中,糊剂的特征在于5Pa·s至90Pa·s、10Pa·s至90Pa·s、10Pa·s至90Pa·s或20Pa·s至80Pa·s,例如5Pa·s、6Pa·s、7Pa·s、8Pa·s、9Pa·s、10Pa·s、11Pa·s、12Pa·s、13Pa·s、14Pa·s、15Pa·s、16Pa·s、17Pa·s、18Pa·s、19Pa·s、20Pa·s、21Pa·s、22Pa·s、23Pa·s、24Pa·s、25Pa·s、26Pa·s、27Pa·s、28Pa·s、29Pa·s、30Pa·s、31Pa·s、32Pa·s、33Pa·s、34Pa·s、35Pa·s、36Pa·s、37Pa·s、38Pa·s、39Pa·s、40Pa·s、41Pa·s、42Pa·s、43Pa·s、44Pa·s、45Pa·s、46Pa·s、47Pa·s、48Pa·s、49Pa·s、50Pa·s、51Pa·s、52Pa·s、53Pa·s、54Pa·s、55Pa·s、56Pa·s、57Pa·s、58Pa·s、59Pa·s、60Pa·s、61Pa·s、62Pa·s、63Pa·s、64Pa·s、65Pa·s、66Pa·s、67Pa·s、68Pa·s、69Pa·s、70Pa·s、71Pa·s、72Pa·s、73Pa·s、74Pa·s、75Pa·s、76Pa·s、77Pa·s、78Pa·s、79Pa·s、80Pa·s、81Pa·s、82Pa·s、83Pa·s、84Pa·s、85Pa·s、86Pa·s、87Pa·s、88Pa·s、89Pa·s或90Pa·s(包括其间的任何值)的静态粘度。
本文所用的术语“静态粘度”或“在静态阶段的粘度”是指在注射之前,通常在共混物与疏水性介质在环境压力和温度条件下接触后至多15秒至20秒内组合物的粘度。
在一些实施方案中,糊剂的特征在于在共混物与疏水性介质在环境压力和温度条件(被称为“环境条件”,即室温左右和大气压)下接触后20秒至30秒内5Pa·s至20Pa·s,例如5Pa·s、6Pa·s、7Pa·s、8Pa·s、9Pa·s、10Pa·s、11Pa·s、12Pa·s、13Pa·s、14Pa·s或15Pa·s(包括其间的任何值)的粘度。
参考图1B,该图呈现了不同粉末与油比率的粘度研究(对于大豆油模型而言)。共混物与油比率为0.59至0.77的样品的粘度在环境条件下接近10Pa.s。在静态阶段(点0),在环境条件下的适当的静态粘度介于10Pa.s-100Pa.s之间,在静态阶段的粘度越高,糊剂就越稳定。在0.77比率下曲线的快速下降意味着可通过可接受的力(手动)从注射器中挤出糊剂。
在本文中可互换使用的术语“疏水性液体”、“疏水性溶剂”、“疏水性分散剂”、“疏水性介质”、“油”、“油性液体”、“油性介质”、“非极性溶剂”、“非极性液体”或“疏水性液体”(也可被称为“亲脂性液体”)是在室温左右下为液体并且通常不可溶解的或在水溶液中具有有限溶解度并且可溶解于非极性有机溶剂中的物质。
术语“水性溶液”是指其中水作为溶剂的溶液。
术语“液体介质”、“介质”或“分散剂”在本文通篇可互换使用。本文中,术语“分散剂”意指液体介质,任选地具有糊状稠度或能够提供糊状稠度的液体介质。因此,术语“分散剂”以一般含义使用,并且不同于词语“溶剂”,可仅用于阐明由纤维蛋白原和凝血酶构成的共混物基本上不可溶于此类液体介质中,而是形成固体-液体体系。
油性液体具有油性构成,并且包括例如天然油和通过合成制备的油诸如橄榄油、其他植物和动物来源的油,以及无机油诸如硅油和/或其他矿物油。
疏水性液体的非限制性类型包括有机物质,诸如烷烃,尤其是长链烷烃、环烷烃,包括双环化合物、芳基化合物(取代和未取代的两种)和脂肪酸。
疏水性液体的另外的非限制性类型包括肉豆蔻酸胆固醇酯、月桂酸胆固醇酯、十二烷酸胆固醇酯、棕榈酸胆固醇酯、花生四烯酸胆固醇酯、二十二烷酸胆固醇酯、亚油酸胆固醇酯、亚麻酸胆固醇酯、油酸胆固醇酯、硬脂酸胆固醇酯、橄榄油、玉米油、甘油三油酸酯、甘油三油酸酯/油酸胆固醇酯混合物、红花油、角鲨烯、角鲨烷、十二烷以及它们的任何混合物,例如橄榄油和油酸胆固醇酯混合物和甘油三油酸酯/油酸胆固醇酯混合物。
疏水性物质也可通过其分配系数来确定。
分配系数是两种不混溶液体的混合物的两个相中的化合物在平衡时的浓度的比率。通常,选定的溶剂中的一种溶剂是水,而第二种溶剂是疏水性的,诸如辛醇。溶剂中未电离溶质的浓度的比率的对数被称为“logP”。
通常,疏水性液体的特征在于高于1的LogP;亲水性液体的特征在于低于1的LogP,并且两亲性液体的特征在于约1(例如,0.8至1.2)的LogP。
通常但非排他性地,所谓“在水溶液中的有限溶解度”意指在约25℃下小于20重量%、小于10重量%、小于5重量%或有时小于1重量%的疏水性物质可溶于水中。
如本文通篇所用,术语“亲水性”或“极性”是指可吸引到水、溶解于水中的溶剂并且其与水的相互作用在热力学上是有利的。通常但非排他地,亲水性溶剂在约25℃下在水或其他极性溶剂中的溶解度为至少10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL、40mg/mL、50mg/mL、60mg/mL、70mg/mL、80mg/mL、90mg/mL、100mg/mL、200mg/mL、300mg/mL、400mg/mL、500mg/mL或至少1000mg/mL。每种可能性代表本发明的单独实施方案。
在一些实施方案中,共混物是干燥的。在共混物的上下文中,所谓“干燥”意指按共混物的重量计,共混物包含小于8%、小于5%或小于1%的水。
在一些实施方案中,组合物是干燥的,例如,在施用到水性环境中/上(例如,施用到水溶液或出血部位中/上)之前,按组合物的重量计,包含小于8%、小于5%或小于1%的水。
在一些实施方案中,分散剂(例如,疏水性分散剂)是干燥的(也称为:“无水的”),例如,在施用到水溶液(诸如水、盐水)或出血部位中/上之前,按组合物的重量计,包含小于8%、小于5%或小于1%的水。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括矿物油。术语“矿物油”是指任选地通过蒸馏技术从凡士林中获得的液态烃中的一种液态烃或混合物。该术语与“液化石蜡”(例如具有CAS编号8020-83-5)、“液体凡士林”和“白色矿物油”同义。该术语还旨在包括“轻质矿物油”,即通过蒸馏凡士林类似地获得,但比白色矿物油具有略微更低的比重的油。参见例如Remington's Pharmaceutical Sciences,18th Edition(Easton,Pa.:Mack PublishingCompany,1990年,第788页和第1323页)。矿物油可从各种商业来源,例如J.T.Baker(Phillipsburg,PA)、USB Corporation(Cleveland,OH)获得。
可适用于本发明的组合物中的油是美国食品和药物管理局(FDA)法规批准的用于在人类中注射的油。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括植物油。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括选自矿物油和植物油的一种或多种油,例如,大豆油、低芥酸菜籽油和/或橄榄油。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括大豆油。本文所用的术语“大豆油”可广义地指含有适用于本发明的聚合反应的甘油三酯的至少一种形式或其衍生物的任何大豆原油或加工的大豆油。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括橄榄油。术语“橄榄油”是指从例如如木犀科的木犀榄属中分类的植物的果实获得的植物油。橄榄油可通过使用已知的压制方法和已知的精制方法从果实中获得。例如,橄榄油可通过以下方式来获得:利用在成熟果实上立即进行的冷压方法收集油(在不加热的情况下收集油),执行机械过滤或离心,并且然后执行精制工艺。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括杏仁油。术语“杏仁油”是指从例如在蔷薇科李属中分类的植物(例如,多种扁桃(蔷薇科)、甜杏仁)的果仁获得的植物油。杏仁油可通过使用已知的压制方法和精制方法从此类果仁中获得。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括小麦胚芽油。
术语“小麦胚芽油”是指可从例如禾本科的小麦属中分类的植物(例如,小麦(禾本科))的胚芽获得的植物油。小麦胚芽油可通过使用已知的压制方法和精制方法从此类胚芽中获得。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括山茶油。
术语“山茶油”是指从例如茶科的山茶属中分类的植物的籽粒获得的植物油。山茶油可通过使用已知的压制方法和已知的精制方法从此类籽粒中获得。例如,山茶油可通过研磨在太阳下晒干或人工干燥的种子,然后汽蒸、压紧和过滤所得物进行精制来获得。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括玉米油。
术语“玉米油”是指可从例如禾本科的玉蜀黍属中分类的植物(例如,玉蜀黍(禾本科))的胚芽获得的植物油。玉米油可通过使用已知的压制方法和已知的精制方法从此类胚芽中获得。例如,玉米油可通过下列方式来获得:从谷物中选择胚芽、用水洗涤胚芽,然后快速加热和干燥、压紧所得的胚芽,并且然后用己烷从果渣提取油。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括菜籽油。
术语“菜籽油”是指从十字花科芸苔属中分类的植物的籽粒获得的植物油(例如,Brassica campestris Linne subsp.napus Hooker filiuset Anderson var.nippo-oleifera Makino(十字花科))。菜籽油可通过使用已知的压制方法和已知的精制方法从此类籽粒中获得。例如,菜籽油可通过下列方式来获得:加热和压紧籽粒,对果渣执行分散剂提取,将提取的油与压出的油混合以产生原油,并且精制所获得的原油。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括葵花油。术语“葵花油”统指从菊科的向日葵属中分类的植物(例如,向日葵(菊科))的籽粒获得的植物油。葵花油可通过使用已知的压制方法和已知的精制方法从此类籽粒中获得。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括棉籽油。
术语“棉籽油”是指从例如锦葵科棉属中分类的植物(例如,陆地棉(棉属))或相同属(锦葵科)中分类的植物的籽粒获得的植物油。棉籽油可通过使用已知的压制方法和已知的精制方法从此类籽粒中获得。例如,棉籽油可通过精制通过在籽粒上执行压紧或提取工艺而获得的非挥发性脂肪油来获得。
在一些实施方案中,疏水性分散剂包括棕榈油。
术语“棕榈油”是指从棕榈科的椰子属中分类的植物(例如,椰子(棕榈科))的籽粒获得的植物油。棕榈油可通过使用已知的压制方法和已知的精制方法从此类籽粒中获得。例如,棕榈油可通过以下方式来获得:进一步研磨磨碎的椰子核、汽蒸、压紧,然后去除悬浮物质以进行精制。
本发明人已经发现,包含一些亲水性多元醇(诸如PEG 400)的组合物几乎不形成凝块(如在存在盐水的情况下测试的),这可提高对其止血功效的关注度,因为包含PEG400的组合物在胶凝测试期间不能形成完整层(参见图1C)。
所谓的“几乎不形成凝块”意指发现凝结时间超过20分钟。
如在本发明的上下文中使用的术语“凝结时间”通常可被定义为形成纤维蛋白凝块所需的时间。
因此,在一些实施方案中,组合物基本上不含亲水性分散剂。
所谓的“基本上不含”意指组合物包含小于8%、小于5%、小于3%、小于1%或甚至完全不存在相关组分(例如,亲水性分散剂),例如但不限于水和多元醇。例如,组合物可基本上不含多元醇。在一些实施方案中,组合物不含(即包含按重量计小于1%或有时小于0.5%的)PEG。
在一些实施方案中,组合物还包含胶原。
术语“胶原”旨在表示猪、牛或人类来源的任何已知胶原,例如天然胶原、酯化胶原,诸如甲基化、乙基化或另选地琥珀酰化的胶原或其衍生物中的一种衍生物,其可被加热或可不被加热,可被氧化或可不被氧化,或另选地,例如可与另一种化合物交联。出于本公开的目的,术语“天然胶原”旨在表示除了可能用例如胃蛋白酶处理以便消化端粒肽之外,尚未被化学改性的胶原。因此,为了本发明的目的,术语“非变性胶原”旨在表示尚未失去其螺旋结构的胶原。
表征组合物的质地的一种方式是测量流变特性,这些流变特性涉及存储剪切模量G'和剪切损耗模量G”以及两者之间的关系。术语“储存剪切模量”G'也可被视为弹性模量,而术语“剪切损耗模量”G″可被视为粘性模量。
可任选地使用剪切流变仪(例如,应变控制型旋转流变仪)以指定的温度和频率(例如,使用本文的实施例部分中描述的程序)来确定储存剪切模量和损耗剪切模量。
可任选地通过损耗角正切(G”/G')表征粘弹性的程度,损耗角正切是剪切损耗模量(G”)与储存剪切模量(G')的比率并且是在给定频率下对材料的粘性与弹性贡献的相对重要性的量度,并且可在给定振荡扭矩和给定温度下评估,使得G'>G”—凝胶特征并且弹性性能超过粘性性能,即结构显示出一定的刚性;G”>G′—液体特征:在这种情况下,粘性性能超过弹性性能,并且样品显示出液体的特征。G'和G”的交点(相交点)是屈服点(或相交点;tau,τ)。
在本文所述的实施方案中的任一个实施方案的一些实施方案中,糊剂(根据本文所述的相应实施方案中的任何实施方案)的特征在于在25℃的温度和10rad/sec的频率下,在约0.1Pa至15Pa范围内的屈服点。在一些此类实施方案中,屈服点在0.1Pa至13Pa的范围内。在一些此类实施方案中,损耗角正切在0.13Pa至5Pa的范围内。
如下文的实施例部分中所指出的,测量各个样品的tau值,从而示出推动样品所需的力与胶原浓度成正比,并且与粉末与油比率成反比。与对照(Surgiflo)相比,每个样品的屈服点较小,表明范围1:1.5至1:1.7和0%至20%胶原可导致制剂在施用期间具有适当推力和凝胶特征。
如下文的实施例部分中进一步表明,胶凝时间的结果显示,对于共混物与介质比率为1:1.7的不含胶原或含10%胶原的两种样品,水添加点与相交点之间的间隔(其表示样品的胶凝时间)均小于3分钟。在10分钟内不能看到共混物与介质比率为1:1.7的含20%胶原的样品的相交点,这表明这些制剂具有长胶凝时间,并且可能不太适合止血应用。
因此,在本文所述的实施方案中的任一个实施方案的一些实施方案中,糊剂(根据本文所述的相应实施方案中的任何实施方案)的特征在于在与水接触时小于10分钟的胶凝(也称为“胶凝作用”)时间。在一些此类实施方案中,糊剂(根据本文所述的相应实施方案中的任何实施方案)的特征在于在与水接触时至多约3分钟的胶凝时间。在一些此类实施方案中,糊剂(根据本文所述的相应实施方案中的任何实施方案)的特征在于在与水接触时至多约20秒至150秒的胶凝时间。在一些此类实施方案中,糊剂(根据本文所述的相应实施方案中的任何实施方案)的特征在于在与水接触时至多约30秒至120秒的胶凝时间。
在一些实施方案中,在组合物的任何实施方案中,组合物的特征在于小于20分钟、小于19分钟、小于18分钟、小于17分钟、小于16分钟、小于15分钟、小于14分钟、小于13分钟、小于12分钟、小于11分钟、小于10分钟、小于9分钟、小于8分钟、小于7分钟、小于6分钟或小于5分钟的胶凝时间。
在一些实施方案中,在组合物的任何实施方案中,组合物的特征在于约15分钟、约14分钟、约13分钟、约12分钟、约11分钟、约10分钟、约9分钟、约8分钟、约7分钟、约6分钟或约5分钟(包括其间的任何值和范围)的胶凝时间。
在一些实施方案中,在组合物的任何实施方案中,组合物的特征在于1分钟至15分钟或3分钟至15分钟,例如1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟、11分钟、12分钟、13分钟、14分钟或约15分钟(包括其间的任何值和范围)的胶凝时间。
在一些实施方案中,组合物包含吸水剂(例如,ORC),并且其特征在于小于15分钟、小于14分钟、小于13分钟、小于12分钟、小于11分钟、小于10分钟、小于9分钟、小于8分钟、小于7分钟、小于6分钟或小于5分钟的胶凝时间,同时保持组合物的优异粘合性(参见下表3和表8)。
在一些实施方案中,组合物包含吸水剂(例如,ORC),并且其特征在于约10分钟、约9分钟、约8分钟、约7分钟、约6分钟或约5分钟(包括其间的任何值和范围)的胶凝时间,同时保持组合物的优异粘合性。
如本文所用的术语“胶凝时间”是指组合物如从接触水性介质(例如,血液或盐水)的时间所测量的在体外失去流动性所花费的时间。如本文所用的“凝结时间”是指类似的体内过程,其中可涉及其他组分,例如血小板、组织因子。
通常,在胶凝时间处,组合物的粘度(例如,在约2s-1至3s-1的剪切速率下)突然增加至大于1000cP的值。
在示例性实施方案中,当形成凝胶并且凝胶可作为完整层剥离时,确定胶凝时间,并且可根据屈服点确定胶凝时间。
术语“凝胶”或其任何语法变型涉及粘性的和/或固体状的材料,其可具有软且薄弱至硬且坚韧范围内的特性。
凝胶可以是凝块,该凝块是凝结液体(尤其是血液)的浓稠物质。
在本发明的某些实施方案中,组合物还可包含止血剂或其他生物或治疗性化合物、部分或物类(包括药物和药剂)。
如下文的实施例部分中进一步表明,在评估不同糊剂制剂(触变性测试;参见图9)的变形和再生时,不含胶原的样品显示出非常缓慢的结构恢复性,表明样品一旦施用在伤口部位上就会移走。结果还表明,具有10%胶原的样品表现出快速的结构恢复性,并且具有20%胶原的样品表现出较不期望的恢复性能。
因此,在一些实施方案中,组合物还包含按重量计浓度超过0%最高至20%的胶原。在一些实施方案中,组合物还包含按重量计浓度超过0%最高至10%的胶原。在一些实施方案中,组合物还包含按重量计浓度超过0%最高至小于约20%,例如约10%、约11%、约12%、约13%、约14%、约15%、约16%、约17%、约18%或约19%(包括其间的任何值和范围)的胶原。
在一些实施方案中,组合物为止血组合物。
所谓的“止血组合物”意指组合物可容易地施用于有需要的部位,以例如在穿刺伤口或组织缺损的情况下用于实现止血。
术语“伤口”包括对活生物体中的任何组织的损伤。
因此,本发明所公开的组合物可施用于出血组织,能够辅助止血。
术语“组织”是指联合执行特定功能的一群细胞和/或细胞组分。组织中的细胞可全为一种类型或超过一种类型。组织可为人工组织,细胞在其中生长成以与生物活体中的组织类似的方式发挥功能。组织可为人体组织或动物组织。
在一些实施方案中,组织为软组织。如本文所用,术语“软组织”涉及未硬化或钙化的身体组织。该术语尤其涉及血管化的软组织,因此可能是出血的来源。此类组织的示例包括但不限于结缔组织(诸如肌腱、韧带、筋膜、皮肤、纤维组织、脂肪和滑膜)、肌肉、内部器官或血管。一般来讲,软组织意在排除骨组织。
在一些实施方案中,组织为骨组织。
止血(“Hemostasis”或“haemostasis”)是指伤口愈合的第一阶段。其是使出血停止的过程。所谓“辅助止血”意指帮助减少或停止出血。所谓“施用于出血部位”意指例如在出血部位(例如在外科部位)处局部施用组合物以控制出血。在包括伤口治疗的多种情况下需要控制出血。
“局部施用”意指局部施用于身体的一部分。
术语“血液”或其任何语法变型还包括血液级分,诸如血浆。
在一些实施方案中,组合物用于治疗性用途。
在一些实施方案中,组合物被施用于受损组织,例如出血组织。在一些实施方案中,组合物例如作为一种组分存在于管(诸如可挤压管)中。
如本文所用,术语“出血”是指血液从循环系统的任何组分外渗。因此“出血”涵盖与外科手术、创伤或其他形式的组织损伤有关的非期望、非受控且通常过多的出血以及患有出血性疾病的患者中的非期望的出血。
术语“创伤”被定义为由物理力引起的损伤;非限制性示例包括车辆事故、射击和烧伤的后果。
在另一个实施方案中,本发明所公开的组合物可与背衬、垫、绷带、纱布、海绵、支架或基质结合使用以提供机械强度以覆盖伤口表面。在这种情况下,该实例基质被支撑在衬垫上,以便于施用或填塞。
在一些实施方案中,组合物是无菌的。尤其是在处理血液制品时,无菌问题至关重要,特别是病毒灭活的问题。一般来讲,病毒灭活可通过任意种方法来执行,包括溶剂洗涤剂、热灭活、辐照和纳米过滤。通常,病毒灭活标准要求使用两种不同方法。另外,FDA的无菌性标准要求过滤。术语“制品”是指适用于治疗应用的生理上可接受的制品。
如本文所用,术语“无菌的”意指具有低生物负荷,是有效无菌的,例如基本上或甚至绝对不含微生物(例如,细菌和病毒)。灭菌是将生物负荷降低到有效无菌水平的过程。无菌液体或糊剂通常被定义为已经历无菌过滤的液体或糊剂。
如本文所用,“凝血酶”表示因凝血酶原(因子II)的蛋白水解裂解产生的活化酶。凝血酶可通过本领域已知的多种生产方法来产生,并且包括但不限于重组凝血酶和血浆源性凝血酶。人凝血酶是由通过二硫键连接的两个多肽链构成的295个氨基酸的蛋白质。人和非人(例如,牛)凝血酶均可在本公开的范围内使用。
本发明中使用的凝血酶的起源可来自一个或若干个来源,包括但不限于:血浆(例如,猪血浆)、重组细菌和/或细胞(Vu等人,2016年,J.Viet.Env.,8(1):21-25)、全血(从或不从若干献血汇集)和/或血级分(可从若干献血汇集,例如血浆)。凝血酶可由诸如强生公司(Johnson and Johnson)、百特公司(Baxter)和杰特贝林公司(CSL Behring)之类的制造商以独立产品的形式(例如)或以产品的组分的形式(例如,等)提供。
在一些实施方案中,按共混物的重量计,凝血酶以5%至10%或7%至8%的浓度存在。在一些实施方案中,按共混物的重量计,凝血酶以5%、5.5%、6%、6.5%、7%、7.5%、8%、8.5%、9%、9.5%或10%(包括其间的任何值和范围)的浓度存在。
术语“纤维蛋白原”(不具有更多)旨在包括任何类型的纤维蛋白原。“纤维蛋白原”是指具有单体结构(AαBβγ)的单体和二聚体纤维蛋白原分子、杂合分子及它们的变体,而无论是天然存在的、修饰的还是合成的。术语“纤维蛋白原”可指来自人的纤维蛋白原,但是可包括任何物种的纤维蛋白原,尤其是哺乳动物物种,诸如从猪血浆产生的纤维蛋白原。
在一些实施方案中,按共混物的重量计,纤维蛋白原以60%至95%或70%至90%的浓度存在。在一些实施方案中,按共混物的重量计,凝血酶以60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%或95%(包括其间的任何值和范围)的浓度存在。
再次参考图1A,该图示出对于一些分散剂(例如,甘油),虽然表现出高粘合特性(参见图5),但无法赋予组合物期望的流动性。
因此,在一些实施方案中,组合物基本上不含选自聚乙二醇(PEG;例如,小分子量的PEG,诸如PEG 400)和/或甘油的亲水性分散剂。
在一些实施方案中,组合物包含吸水剂(在本文中也称为:“水凝剂”或“虹吸剂”)。
在一些实施方案中,吸水剂包括氧化纤维素(OC)。例如,氧化纤维素可包括氧化再生纤维素(ORC)。
术语“吸水剂”是指从介质中吸收水,例如形成水合物的材料。如本文所用,术语“水合物”是指水与物质的组合。在一些实施方案中,吸水剂(例如,ORC)在与水性介质接触时快速吸收水,使得组合物中的水%在5分钟内升高2%至50%。在一些实施方案中,吸水剂(例如,ORC)在与水性介质接触时快速吸收水,从而与不包含吸水剂的组合物相比缩短胶凝时间。
术语“氧化纤维素”(或“OC”)是指其中例如葡糖酐单元的碳6上的至少一些伯醇基团被氧化成羧酸并且任选地被官能化的纤维素衍生物。OC可包括包含或基本上由OC组成的材料、产品、制品或组合物,例如,敷料、纤维蛋白胶、合成胶、垫、基质、粉末、片剂、丸剂、缝合线、纤维、支架(stent)、植入物、支架(scaffold)、溶液、凝胶、蜡、明胶等。
在一些实施方案中,OC(例如,ORC)呈多根纤维的形式。在一些实施方案中,OC(例如,ORC)呈中值粒度低于80μm的多根纤维的形式。在一些实施方案中,OC(例如,ORC)呈中值粒度在50μm至100μm或60μm至80μm的范围内,例如50μm、60μm、70μm、80μm、90μm、100μm(包括其间的任何值和范围)的多根纤维的形式。
可通过在纤维素上施加氧化剂来制备OC。氧化剂可选自但不限于氯、过氧化氢、过乙酸、二氧化氯、二氧化氮、过硫酸盐、高锰酸盐、重铬酸盐-硫酸、次氯酸、次卤酸盐、高碘酸盐、或它们的任何组合、和/或多种金属催化剂。根据氧化剂的性质和反应条件,作为原料纤维素的初始羟基基团的替代或补充,氧化纤维素还可包含羧酸、醛和/或酮基团。
术语“接触”以其最广泛的含义使用,并且例如是指使例如止血组合物与水、水溶液或血液足够接近,使得可形成凝块或凝胶的任何类型的组合作用。
在一些实施方案中,组合物基本上不含吸水剂(诸如ORC),因为似乎ORC的添加也可能降低粘合特性(T-剥离力)(参见例如下文的实施例部分中的表8)。
在一些实施方案中,按共混物的重量计,吸水剂(例如,ORC)(如果不存在的话)以至多3%、至多8%、至多10%、至多15%、至多20%或至多25%,例如3%至15%范围内的浓度存在。在一些实施方案中,按共混物的重量计,吸水剂以5%至25%的浓度存在。
在一些实施方案中,按共混物的重量计,吸水剂以5%至18%的浓度存在。
在一些实施方案中,吸水剂以按重量计3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%或25%(包括其间的任何值和范围)的浓度存在。在一些实施方案中,吸水剂以按重量计8%至18%的浓度存在。
在一些示例中,按共混物的重量计,纤维蛋白原可以例如60%至85%的浓度存在,按共混物的重量计,凝血酶可以例如5%至10%的浓度存在,并且在另一示例中,按共混物的重量计,润湿剂可以例如5%至18%的浓度存在。
在本发明的另外的实施方案中,本发明所公开的组合物可与各种添加剂组合以进一步改善止血特性、伤口愈合特性和处理特性。
利用本领域技术人员已知的添加剂包括例如:止血添加剂,诸如明胶、胶原、纤维素、壳聚糖、多糖、淀粉;基于生物制剂的止血剂,如通过凝血酶、纤维蛋白原和纤维蛋白举例说明。附加的生物制剂止血剂包括但不限于促凝血酶、蛋白质和肽。
在一些实施方案中,共混物可为例如高剪切混合的、喷雾干燥混合的或它们的组合。
术语“喷雾干燥”在本文中以广泛的含义使用,其包括但不限于用于将溶解或悬浮于液体中的固体转变为粉末状的方法。通常,喷雾干燥是用于由溶液、悬浮液或乳液形成粉末的干燥方法,该溶液、悬浮液或乳液在热气流中通过喷雾嘴雾化并且立即干燥。用于产生维持其活性的凝血酶和纤维蛋白原粉末的喷雾干燥工艺可通过若干工艺参数来控制,其中一些参数是:柱空气流量和温度、喷嘴尺寸和雾化空气流速和材料流速。下文实施例部分中提供了为了建立用以产生维持其活性、低水含量、高固体产率和期望的粉末粒度和分布的凝血酶和纤维蛋白原的共混物(例如,呈粉末形式)的稳健工艺所使用的非限制性示例性参数。
术语“高剪切混合”通常意指湍流式混合。在一些实施方案中,高剪切混合的特征在于范围从150rpm至500rpm的混合叶片的速度和/或切割刀片的速度。
附加地或另选地,可使用其他方法来获得干燥组合物,这些方法诸如但不限于纤维蛋白原溶液和/或凝血酶溶液的冻干,然后是微粉化。通常,在溶液的冻干之后,获得多孔和海绵状固体材料,其被称为“饼块”(在本文中也可被称为“固体组合物”)。
当例如从固体组合物产生的粒子的直径仅几微米时,使用术语“微粉化”。微粉化可通过包括但不限于喷射研磨、珠球研磨、高压均质化、RESS工艺(超临界溶液快速膨胀法)、SAS(超临界抗溶剂)方法或PGSS(气体饱和溶液微粒形成)方法的工艺来实现。通常但非排他性地,微粉化导致蛋白质粉末从其原始尺寸缩小30至400倍。
在一些实施方案中,共混物的特征在于0.2gr/mL至0.4gr/mL或0.25gr/mL至0.35gr/mL的密度。因此,在一些实施方案中,共混物的特征在于0.2gr/mL、0.25gr/mL、0.3gr/mL、0.35gr/mL或0.4gr/mL(包括其间的任何值和范围)的密度。
例如,在一些实施方案中,共混物是高剪切混合的,并且其特征在于0.3gr/mL至0.4gr/mL的密度。因此,在一些实施方案中,共混物是高剪切混合的,并且其特征在于0.3gr/mL、0.35gr/mL或0.4gr/mL(包括其间的任何值和范围)的密度。在另外的实施方案中,共混物是喷雾干燥混合的(不在高剪切混合之后),并且其特征在于0.2gr/mL至0.3gr/mL,例如0.2gr/mL、0.25gr/mL或0.3gr/mL(包括其间的任何值和范围)的密度。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于低于270μm、低于260μm或低于250μm的中值粒度。在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于超过80μm、超过90μm或超过100μm的中值粒度。
参考图2,该图示出了粒度在106μm至250μm范围内的粒子与较大粒子相比,提供更快的胶凝时间。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于约100μm至约270μm的中值粒度。在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于约106μm至约250μm的中值粒度。在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于约100μm、约110μm、约120μm、约130μm、约140μm、约150μm、约160μm、约170μm、约180μm、约190μm、约200μm、约210μm、约220μm、约230μm、约240μm、约250μm、约260μm或约270μm(包括其间的任何值和范围)的中值粒度。
在一些实施方案中,该组合物是均质的。如本文所用,所谓的“均质的”意指在整个油性介质中均匀的组成和质地,也就是说,共混物基本上均匀地分散在整个油性介质中。在本文中,“基本上均匀地分散”意味着在整个油中,疏水性介质内共混物的浓度按重量计在小于±30%、小于±20%、小于±10%、小于±5%内变化。通常,术语“均质的”是指在8℃至40℃、10℃至30℃或20℃至30℃下耐受液相/固相分离(例如,按重量计小于4%)的均匀呈现的产品(例如,糊剂)。
可通过本领域已知的方法检测相分离,例如,如下文实施例部分中所描述的(参见图7)。
在一些实施方案中,组合物为储存稳定的组合物。术语“储存稳定的”应当理解为是指通常存在于容器(例如,小瓶或注射器)中并且在预先选择的储存条件(参见下文)下稳定的制剂、组合物,这些预先选择的储存条件包括预先选择的储存温度、预先选择的制剂的物理状态。稳定性可通过本领域已知的方法来确定,例如通过在预先选择的储存条件下(例如,在组合物呈液体或糊剂形式时)测试制剂中的可见聚集、残余物和/或纤维蛋白凝块的不存在。此外,根据本公开,当提及稳定的封闭剂组合物或制剂时,其应当理解为不论制剂的储存条件如何,在使用时都具有有效凝血时间的制剂,例如,不论储存在室温(例如,8℃至40℃)还是甚至更低的温度(例如,低于8℃),封闭剂制剂都在基本上相同的时间段凝结。
当提及本发明所公开的糊剂时,术语“稳定的”和“稳定性”意指在糊剂穿过和/或接触水性介质(例如,盐水或血液)之前,在糊剂中基本上不存在纤维蛋白聚合/凝结,并且同时,在某一温度下特定的持续时间后保持至少70%活性,即能够形成纤维蛋白凝块。
在一些实施方案中,预先选择的储存条件包括在室温(例如,10℃至30℃)下储存并且封闭剂制剂稳定至少5分钟,有时稳定至少15分钟,或稳定至少1小时,稳定至少一天,稳定至少2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天或30天,有时稳定例如1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月或甚至24个月或更久,包括其间的任何值和范围。
在一些实施方案中,在30天之后检测到按重量计小于25%、小于24%、小于23%、小于23%、小于22%、小于21%或小于20%的残余物。
参考图7和图8,这些图示出了在示例性实施方案中,糊状组合物包含具有较小粒度的共混物(例如,至少90%粒度范围从10微米至52微米)并提供优异的均质性和稳定性。在储存30天的时间段内,具有小粒子(10μm-52μm)的共混物表现出小于5%的残余物浓度的差异(通过使用Instron测试系统进行挤出测试来检测残余物),而具有较大粒子(23μm-83μm)的共混物显示出至多20%的残余物浓度的差异。综上所述,粒度越大并且储存越久,则在注射器内可能留下越多残余物。
在一些实施方案中,糊状组合物包含具有范围从10微米至52微米的粒度的共混物,并且在30天之后检测到按重量计小于10%、小于9%、小于8%、小于7%、小于6%、小于5%或小于1%的残余物。
在一些实施方案中,共混物的粒子被描述为均质且稳定的,并且中值粒度为低于110μm,例如约10μm至约100μm。在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于约10μm至约60μm的中值粒度。在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于约10μm、约11μm、约12μm、约13μm、约14μm、约15μm、约16μm、约17μm、约18μm、约19μm、约20μm、约21μm、约22μm、约23μm、约24μm、约25μm、约26μm、约27μm、约28μm、约29μm、约30μm、约31μm、约32μm、约33μm、约34μm、约35μm、约36μm、约37μm、约38μm、约39μm、约40μm、约41μm、约42μm、约43μm、约44μm、约45μm、约46μm、约47μm、约48μm、约49μm或约50μm的中值粒度,包括其间的任何值和范围。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于范围从20μm至60μm或30μm至50μm的D10。在一些实施方案中,共混物的特征在于20μm、30μm、40μm或50μm(包括其间的任何值和范围)的D10。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于约106μm至约250μm的中值粒度,并且共混物的特征在于范围从20μm至60μm或30μm至50μm,例如20μm、30μm、40μm或50μm(包括其间的任何值和范围)的D10。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于高均质性和稳定性,并且共混物的粒子的特征在于范围从5μm至20μm或8μm至15μm的D10。在一些实施方案中,共混物的特征在于8μm、10μm、12μm或15μm(包括其间的任何值和范围)的D10。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于范围从130μm至150μm,例如130μm、135μm、140μm、145μm或150μm(包括其间的任何值和范围)的D50。在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于约106μm至约250μm的中值粒度,并且/或者共混物的特征在于范围从130μm至150μm,例如130μm、135μm、140μm、145μm或150μm(包括其间的任何值和范围)的D50。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于增加的均质性和稳定性,并且共混物的粒子的特征在于范围从20μm至40μm,例如20μm、25μm、30μm、35μm或40μm(包括其间的任何值和范围)的D50。
在一些实施方案中,共混物的特征在于D90的范围从280μm至340μm,例如280μm、290μm、300μm、310μm、320μm、330μm或340μm(包括其间的任何值和范围)的粒度。
在一些实施方案中,共混物的粒子的特征在于增加的均质性和稳定性,并且共混物的粒子的特征在于约8μm至约60μm的中值粒度并且其特征还在于范围从40μm至60μm,例如40μm、45μm、50μm、55μm或60μm(包括其间的任何值和范围)的D90。
D50的粒度是指与50体积%的基于体积的累积值相对应的中值直径。粒径D10是指与10体积%的基于体积的累积值相对应的中值直径。D90的粒度是指与90体积%的基于体积的累积值相对应的中值直径。
粒子的直径是指其中粒子被近似为具有球形形状并且可使用本领域已知的方法例如激光衍射粒子分析仪(例如,由马尔文公司(MALVERN)制造的MASTER SIZER)测量的粒径。
在本公开的一个方面,本发明所公开的组合物在其任何方面或实施方案中用于通过将其任何方面或实施方案中的本发明所公开的组合物施用在组织的表面上来制备受试者的受损组织中/上的纤维蛋白粘合密封剂的方法中。
在本公开的一个方面,提供了一种通过将其任何方面或实施方案中的本发明所公开的组合物施用在组织的表面上来制备受试者的受损组织中/上的纤维蛋白粘合密封剂的方法。
在本发明的上下文中,术语“封闭剂”也被称为“纤维蛋白密封剂”和“生物胶粘剂”,其应当理解为例如来源于或衍生自本发明所公开的组合物并具有这样的成分的单组分/一组分粘合剂/胶粘剂/止血剂:这些成分在与组织和/或血液接触(例如,接近组织和/或血液)时作出反应而随后形成凝块,充当组织粘合剂并由此防止、减少或停止出血,接合结构和/或封闭生理渗漏,例如脑脊液(CSF)、淋巴、胆汁、胃肠(GI)内容物的渗漏、肺的空气渗漏等。在一些实施方案中,封闭剂制剂还包含一种或多种治疗剂,使得在身体中形成的凝块自然降解时,该治疗剂释放。治疗剂可以是(而不限于)药物(诸如抗生素、止痛药、抗炎药、抗癌药等)、细胞(该细胞包括例如任何类型的干细胞,例如来自人或其他来源的胚胎干(ES)细胞、成体干细胞、多能干细胞(iPSC)等)。
本发明所公开的组合物还可能包含促进凝块形成的组分,诸如Ca、因子VIII、纤连蛋白、玻连蛋白、血管性血友病因子(vWF),这些组分可作为单独组分提供或者与共混物或糊剂一起配制。
如本文所用,术语“受检者”应意指任何动物,包括但不限于人、小鼠、大鼠、兔、非人灵长类或任何其他哺乳动物。在一些实施方案中,受检者是人,例如人类患者。受检者可为雄性或雌性。
如本文所用,术语“受损组织”(或“损伤组织”)是指由物理(例如,机械)力引起的对结构的正常连续性的破坏,诸如由外科手术、生物(例如,热或光化力)或化学手段引起的切口。术语“受损组织”还涵盖挫伤组织,以及例如通过撕裂、挠抓、压力和啃咬引起的切伤、刺伤、撕裂伤、开放性损伤、穿透性损伤、穿刺损伤。术语“受损组织”还涵盖如本文通篇所述的伤口和出血部位。
因此,在一些实施方案中,本发明所公开的组合物在其任何实施方案中可例如在微创外科(MIS)(诸如例如,内窥镜检查)期间在难以触及的出血部位中施用。内窥镜检查的常见形式中的一种形式是腹腔镜检查,腹腔镜检查是腹腔内部的微创检查和微创外科。
术语“外科”还涵盖外科手术或诊断过程期间或之后的时间。手术的其他非限制性示例包括神经外科手术、腹部外科手术、心血管外科手术、胸外科手术、头颈外科手术、盆腔外科手术及皮肤和皮下组织手术。对于这些情况中的至少一种情况,本发明的组合物可用作合适的密封剂,其允许粘连到出血伤口,并因此实现止血而不依赖于受伤组织的状况,例如出血的严重程度。密封剂的形成在相对短的凝血时间段内发生,随后在其任何方面和/或实施方案中将本发明所公开的组合物施用在受损组织上。通常,在使用1分钟至3分钟填塞之后,可形成不完全的凝块,该不完全的凝块能够停止出血,但是可能需要更长的时间来使凝结反应达到糊剂表面,从而形成完全的凝块。
在本文中,粘合强度可通过破坏伤口敷料与组织之间的接触所需的拉力强度来测量。
在一些实施方案中,本发明所公开的组合物在施用于伤口上时提供粘合密封剂,其特征在于对组织的优异粘合性。
本文中“优异粘合性”意指如使用T-剥离测试所测试的至少3.5N/m、至少4N/m或至少5N/m。
在一些实施方案中,“优异粘合性”意指使用T-剥离测试所测试的3.5N/m至约5.5N/m,例如约3.5N/m、约4N/m、约4.5N/m、约5N/m、约5.5N/m,包括其间的任何值和范围。
如本文所用的单位“N/m”(即平均载荷/宽度)是指当所测试主体和密封片材粘结在一起时的剥离强度,其中在所测试主体与密封片材之间的粘结部分被切割成某一mm的宽度并且该切割件作为测试样品进行T-剥离测试。该测试被称为“T-剥离”测试,因为当两个粘附体被拉开时,它们形成“T”形状。
如本文所使用的T-剥离测试是基于根据标题为“Standard Test Method forStrength Properties of Tissue Adhesives in T-Peel by Tension Loading”的ASTMF2256-05(2015)的测量过程,其中作出的修改是使用硅片材而不是猪表皮。
参考图4和图5,这些图示出了包含油诸如矿物油的组合物提供表现出优异粘合性的密封。
在本发明的另一个方面,提供了一种治疗伤口的方法,该方法包括将其任何方面和/或实施方案中的本发明所公开的组合物施用(例如,接触)到对其有需要的受试者的伤口上和/或中的步骤。
所谓“治疗伤口”进一步意在涵盖减少例如接受外科手术的患者中的组织的出血部位处的失血。
因此,在一些实施方案中,该方法用于减少例如接受外科手术的患者中的组织的出血部位处的失血和/或在此类组织中/上形成密封剂层,该方法包括使其一个实施方案中的本发明所公开的组合物与出血部位接触。任选地,该方法包括首先在此类组织上施用水溶液(诸如盐水),并且然后在水溶液上施用本发明所公开的组合物,以便促进快速凝血时间。
在另一方面,本发明还提供了一种止血试剂盒,该止血试剂盒在其一个实施方案中包括容器,该容器盛有本文所公开的组合物,例如包含纤维蛋白原、凝血酶的共混物的组合物,其中共混物与疏水性分散剂的比率范围从例如0.3:1、0.4:1或0.5:1至低于0.9:1(重量/重量)。在试剂盒的一些实施方案中,组合物在室温左右下呈糊剂的形式。
本文通篇所公开的组合物的任何方面和实施方案可并入试剂盒的方面和实施方案,包括组合物、疏水性分散剂和/或共混物的实施方案。
另选地,本发明提供了一种止血试剂盒,该止血试剂盒包括盛有本文所公开的纤维蛋白原和凝血酶的共混物的容器和盛有疏水性分散剂的另一容器。在此类实施方案中,试剂盒还可含有测量装置(例如量筒)以测量疏水性分散剂的体积,使得可将共混物与疏水性分散剂的比率确定为例如0.3、0.4或0.5至低于0.9。附加地或另选地,止血试剂盒可包括盛有共混物的注射器和盛有疏水性分散剂的注射器。
在一些实施方案中,试剂盒中的至少一个容器是预填充的注射器。在一些实施方案中,除了试剂盒的容器之外还提供了注射器。在一些实施方案中,容器为特定类型,诸如小瓶或施用装置。
在一些实施方案中,试剂盒中的至少一个容器是预填充的注射器。在一些实施方案中,除了试剂盒的容器之外还提供了注射器。术语“容器”可指可盛有例如糊剂的任何通用结构,诸如器皿或小瓶。
可使用施用装置来施用试剂盒,该施用装置可用于施用组合物的若干和连续注射。在一个实施方案中,施用装置在移动该装置时实现了固定剂量的混合组分在组织的2-D表面上的多次注射。在一个实施方案中,施用装置具有注射器,该注射器配有注射针,在完成注射之后该注射针任选地自动从患者的皮肤回缩而不必施用人员从注射表面向上提起该装置。在一个实施方案中,试剂盒可用于施用密封剂。
本发明的止血试剂盒可为用于减少、防止或停止例如开放性伤口中的血流的试剂盒,并且其可用于在手术期间诸如在外科手术诸如例如腹腔镜外科手术、神经外科手术、腹部外科手术、心血管外科手术、胸外科手术、头颈外科手术、盆腔外科手术及皮肤和皮下组织手术期间、之前或之后减少、防止或停止血流。该试剂盒可用于减少或防止来自皮肤或内部器官中的血流。
在一个实施方案中,该试剂盒可储存在室温下,诸如在8℃至40℃范围内的温度下或在更低温度下。
在本文所公开的试剂盒或组合物的任何方面的一些实施方案中,共混物可包含添加剂(例如,钙盐)和/或一种或多种赋形剂,该一种或多种赋形剂例如选自(而不限于)一种或多种氨基酸、白蛋白、糖类和/或糖类衍生物。
术语“添加剂”旨在被理解为可添加到组合物中的任何物质,并且也可包括如下文所述的活性添加剂,诸如钙盐。
如本文所用的术语“赋形剂”表示例如为提供所需的稠度或稳定效应而向药物组合物添加的非活性剂或非治疗剂。
钙是凝血级联反应中的重要元素,并且因子XIII活化为因子XIIIa需要钙,该因子XIIIa交联并稳定纤维蛋白以生成不溶凝块。
因此,在本发明所公开的试剂盒和/或组合物的任何方面的一些实施方案中,共混物还包含添加剂,诸如(但不限于)钙。与本发明一起使用的钙可呈盐(例如,氯化钙盐)的形式。另选地,可使用附加盐,诸如乙酸钙和/或柠檬酸钙。在试剂盒中,可在包含共混物的组合物中提供钙盐。另选地,可在试剂盒中的单独容器中提供赋形剂和/或钙盐,或可在试剂盒中的盛有共混物组分的相同容器中提供赋形剂和/或钙盐。
在试剂盒或组合物的一些实施方案中,按共混物的重量计,钙盐(例如氯化钙(CaCl2))以0.5%至4%或2.5%至3.5%的浓度存在。在一些实施方案中,按共混物的重量计,钙盐(例如氯化钙)以0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%或4%(包括其间的任何值和范围)的浓度存在。
在试剂盒和/或组合物的任何方面的一些实施方案中,共混物还包含选自氨基酸(例如赖氨酸)的赋形剂。在试剂盒和/或组合物的任何方面的一些实施方案中,共混物包含OC和赖氨酸。
在一些实施方案中,按共混物的重量计,赖氨酸以4%至8%或5%至7%的浓度存在。在一些实施方案中,赖氨酸以按重量计4%、4.5%、5%、5.5%、6%、6.5%、7%、7.5%或8%(包含其间的任何值和范围)的浓度存在。
在另一方面,在其任何实施方案中提供了一种制备本发明所公开的组合物的方法。
该方法可包括提供纤维蛋白原、凝血酶的共混物,其中共混物呈多个颗粒的形式,以及以范围从0.5:1至低于0.9:1(重量/重量)的共混物与疏水性分散剂的比率将疏水性分散剂添加到共混物,以便在10℃至37℃范围内的至少一个温度下提供糊剂。
在一些实施方案中,共混物例如通过压实纤维蛋白原和凝血酶的共混物而聚集,例如通过高剪切混合制备,并且如本文所述的一种或多种活性组分和/或赋形剂(例如,钙盐和/或赖氨酸)也存在于共混物中或组合物中。
在本发明的一个实施方案中,该方法还包括使共混物经受干燥、研磨和筛分的步骤,从而获得止血聚集体。
聚集体可通过以下步骤来制备:加湿止血粉末组合物;压实,例如,通过辊压和/或重压粉末以形成止血聚集体;喷雾干燥;高剪切混合;除湿;研磨;该步骤还可包括筛分止血聚集体;以及任选地将所得止血聚集体定量添加到储存容器中或递送装置中。
本文通篇描述了喷雾干燥和高剪切混合的实施方案。
粉末可被辊压和/或重压压实,然后可经受预破裂、除湿,并且随后进行最终研磨的步骤。可例如通过筛分期望的尺寸和/或分布分离(例如,在限定的D10、D50和D90范围内低于250μm或低于110μm)将所得聚集体选择为靶向的止血聚集体级分。
例如,当通过“干燥失重”方法测量时,旨在用于定量添加的止血共混物可具有按重量计小于约8%、小于约5%或小于2%的含水量。
如本文所用,术语“约”意指也旨在包括高于或低于所指示的值10%的值。一般来讲,本申请中的所有值旨在包括术语“约”。
术语“包含”、“含”、“具有”、“包括”、“含有”及其变化形式是指“包括但不限于”。术语“由…组成”是指“包括并且限于”。术语“基本上由…组成”是指组合物、方法或结构可包含附加成分、步骤和/或部件,但前提条件是该附加成分、步骤和/或部件不在本质上改变受权利要求书保护的组合物、方法或结构的基本特征和新颖特征。
词语“示例性”在本文中用于指“用作示例、实例或例证”。被描述为“示例性”的任何实施方案不一定被理解为比其他实施方案优选或有利并且/或者不包括其他实施方案的特征。
词语“任选地”在本文中用于指“在一些实施方案中提供而在其他实施方案中不提供”。本发明的任何具体实施方案可包括多个“任选的”特征,除非此类特征有冲突。
如本文所用,除非上下文另有明确说明,否则单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指代。例如,术语“一种化合物”或“至少一种化合物”可包括多种化合物(包括它们的混合物)。
在整个本申请中,本发明的各种实施方案可以范围格式呈现。应当理解,范围格式的描述仅仅是为了方便和简洁,并且不应被理解为是对本发明范围的固定限制。因此,范围的描述应被视为具有明确公开的所有可能子范围以及该范围内的各个数值。例如,范围诸如1至6的描述应被视为具有明确公开的子范围诸如1至3、1至4、1至5、2至4、2至6、3至6等,以及该范围内的各个数值,例如1、2、3、4、5和6。无论范围的宽度如何,这均适用。
每当本文指示数值范围时,其是指包括位于所指示范围内的任何列举的数字(分数或整数)。短语“范围是在”第一指示数字和第二指示数字之间以及“范围是从”第一指示数字“到”第二指示数字在本文中可互换使用,并且是指包括第一指示数字和第二指示数字以及其间的所有分数和整数。
如本文所用,术语“方法”是指用于完成给定任务的方式、手段、技术和程序,包括但不限于化学、药理学、生物学、生物化学和医学领域的从业者已知的或易于从已知的方式、手段、技术和程序开发的那些方式、手段、技术和程序。
如本文所用,医疗上下文中的术语“治疗”包括消除、基本上抑制、减缓或逆转病症的进展、基本上改善病症的临床或美学症状、或基本上阻止病症的临床或美学症状的出现。
如本文所用,术语“控制”、“防止”或“减少”(它们可在本文中的出血上下文中互换使用,包括其任何语法变化)指示与所公开的组合物没有在出血部位中/上接触的情况相比,血液的渗出率基本上被消除或降低例如初始出血率的10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或甚至100%。用于确定出血出现的水平的方法在本领域中是已知的。
此外,在一些实施方案中,出血上下文中的术语“控制”、“防止”或“减少”还意在涵盖至少部分地封闭出血部位处(例如,软组织中)的血管。
在其中使用类似于“A、B和C中的至少一者等”的惯例的那些情况下,一般而言,此类结构意在具有本领域的技术人员将理解所述惯例的意义(例如,“包含A、B和C中的至少一者的组合物”将包括但不限于具有仅A、仅B、仅C、A和B一起、A和C一起、B和C一起、和/或A、B和C一起等的组合物)。本领域的技术人员还应当理解,实际上,无论在具体实施方式、权利要求还是附图中,呈现两个或更多个替代术语的转折性词语和/或短语应被理解为涵盖包括所述术语中的一者、所述术语中的任一个或这两个术语的可能性。例如,短语“A或B”将被理解为包括“A”或“B”或“A和B”的可能性。
应理解,为清晰起见,在独立实施方案的上下文中描述的本发明的某些特征,也可在单个实施方案中组合提供。
相反,为简便起见,在单个实施方案的上下文中描述的本发明的各种特征还可分开地或以任何合适的亚组合或如本发明的任何其他所述实施方案中合适地提供。在各种实施方案的上下文中所述的某些特征不应视为那些实施方案的基本特征,除非实施方案在没有那些要素的情况下不起作用。
如上文所述以及如下文的权利要求部分所要求保护的本发明的各种实施方案和方面在以下非限制性实施例中得到实验支持。
实施例
现在参考以下实施例,这些实施例连同以上描述以非限制性方式示出了本发明的一些实施方案。
实施例1:表征分散在各种介质中的纤维蛋白原凝血酶共混物的选定样品的流动
性特性
需要认为如流动性和胶凝时间之类的特性是可流动止血组合物的基本特征。
在示例性程序中,进行实验以找出在不损害共混物作为止血剂的活性的情况下,选定分散介质对包含纤维蛋白原和凝血酶的粉末状共混物的组合物的糊状稠度的影响。
在用于流动性测试的示例性程序中,粉末状共混物包含纤维蛋白原(按重量计,88.23%)、凝血酶(按重量计,8.81%)和CaCl2(按重量计,2.94%)。以共混物与介质的各种重量比:1/1.1=0.91:1、1/1.3=0.77:1、1/1.7=0.59:1和1/2=0.50:1(表1)将每种共混物分散在特定介质(在本文中也被称为:“分散剂”)。
通过喷雾干燥来制备纤维蛋白原和凝血酶的组合物,然后将其与介质组合。在一些附加的示例性程序中,当下文指示为“HSMP”(高剪切混合粉末)或“颗粒”时,在组合之前,使用高剪切混合进行附加的工艺以形成在某一粒度范围内(<106μm或106μm-250μm)的粒状粉末。
介质选自以下两类:i)疏水性介质(具体地:大豆油,“SO”,来自Aladdin,CAS编号8001-22-7;橄榄油,“OO”,来自Aladdin,CAS编号8001-25-0;和矿物油,“MO”,来自Aladdin,CAS编号8020-83-5);和ii)亲水性介质(具体地:丙二醇、甘油和聚乙二醇(PEG)400)。
在示例性程序中,粉末状纤维蛋白原凝血酶的粒度低于106μm(使用高剪切工艺),这旨在增加制剂的均质性。
从视觉上测试选定样品的流动性。
表1呈现了用于流动性测试的样品的详细信息444s表1用于流动性测试的样品
*批次#:XW20190410-01(广州倍绣生物技术有限公司美国爱惜康公司(Bioseal,Guangzhou,Ethicon,US));在产生FTP后约3个月,通过将0.5g FTP称重到容器并且向其中添加0.55/0.65/0.85/1g所指示的分散剂,然后手动搅拌5分钟来制备样品。
结果在图1A中示出(图片是在将共混物掺入所指示的油中之后几秒钟内拍摄的)。
结果表明,油介质(SS、OO、MO)以0.59:1至0.77:1的共混物与油的重量比提供可流动组合物。更高的比率诸如0.83或0.91及以上几乎不提供期望的流动性。亲水性介质-丙二醇和甘油在所测试比率下不提供可流动组合物。
不同粉末与油比率的粘度研究显示(对于大豆油;图1B),共混物与油比率为0.59至0.77的样品的粘度接近10Pa.s。在静态阶段(点0),适当的静态粘度介于10Pa.s-100Pa.s之间,在静态阶段的粘度越高,糊剂就越稳定。在0.77比率下曲线的快速下降意味着可通过可接受的力(手动)从注射器中挤出糊剂。因此,上限为0.91(组合物过于干燥,难以挤出),并且下限为0.5(组合物过于稀薄,不稳定)。
虽然亲水性介质PEG400以0.59:1和0.50:1的共混物与油的重量比提供可流动组合物,但是在附加的实验测试中发现,包含PEG400的组合物在存在盐水的情况下几乎不形成凝块,由于PEG400组合物在胶凝测试期间不能形成完整的层,这提高了对其止血功效的关注度。图1C呈现了例示性对比摄影图像,这些图像示出当使用疏水性分散剂(大豆油)时,通过在7分钟后用水固化,糊剂形成完整的层,而对于PEG400,糊剂未能在所指示的时间之后通过用水固化而形成完整的层。
在附加的实验中发现,在以低于0.59:1的对应比率包含油的样品中,样品过于稀薄,并且组合物失去大量止血活性,如通过凝结时间所测量的。也就是说,较高的流动性导致组合物不能够停留在伤口部位,并且导致较慢的胶凝速率。
实施例2:选定样品的胶凝特性的表征—测试ORC、粉末粒度和油比率的效果
如以上实施例1中所述,发现油在流动性方面是合适的介质。
在另外的示例性程序中,进一步测试包含分散在油中的纤维蛋白原凝血酶共混物的组合物以评估另外的因素的效果:粒度、共混物与油比率和可充当润湿剂的ORC的存在。
在示例性程序中,使用大豆油测试如下表2中列出的选定样品的胶凝特性。设计由Minitab 18中的DOE产生,并涵盖3因素(“2水平”)。
表2:所测试样品和主要特性(使用大豆油;粉末是高剪切混合的)
*添加赖氨酸来中和ORC酸性以维持用于酶反应的中性体系
用于测试胶凝时间的示例性实验程序如下:
a.称取0.3g糊剂,将其均匀地放置在钢板上;糊剂的表面积为约5cm2。
b.将0.3mL盐水喷涂在糊剂上方,然后在37℃下温育,并且对时间计数。
当形成凝胶并且凝胶可作为完整的层剥离时,确定胶凝时间。
图2示出了如表2中所指示的组1-组8中的每个组的平均胶凝时间(N=3)。执行ANOVA以分析ORC浓度、粉末粒度和油比率之间的主要效果(参见下表3和表3在图3A中的图示说明,该图示出了胶凝时间的方差分析)。结果表明,所有三种因素对胶凝时间均具有主要效果,其中粉末与油比率贡献主要效果(根据线性模型等级为“52.38%”),并且尺寸在106微米-250微米范围内的粒子提供更快的胶凝时间。此外,ORC比率和粉末粒度的组合相互作用是显著的(等级为“6.37%贡献”),这表明胶凝时间与粉末粒度之间的相关程度取决于ORC浓度(参见图3B中的图示)。
表3胶凝时间的方差分析
综上所述,实验结果显示出ORC对胶凝速度的积极效果。此外,与较小粒子(<106μm)相比,含有较大粒子(106μm-250μm)的糊剂表现出更快的胶凝(例如将样品1和样品7相比较)。具有更高油剂量的糊剂显示出较慢的胶凝。
然而,在下面的实施例3中,将显示出,就反映糊剂粘连性的T-剥离测试而言,ORC对T-剥离力产生负面影响,并且在这方面未观察到油剂量或粒度的主要效果。
实施例3:表征各种因素对组合物的粘合特性的效果
当施用于伤口部位以实现有效止血时,粘连性对止血剂起着关键作用。为了筛选可流动纤维蛋白原凝血酶糊剂的基本因素,使用T-剥离测试来评估各种因素(包括分散介质类别(疏水性或亲水性)、共混物的粒度和组合物的共混物的密度)对粘连性的影响。
用于T-剥离测试的示例性程序是基于使用有机硅片材的ASTM F2256-05(2015),并且包括:
a.称取1g糊剂,将其施用在硅片材的表面上,然后进行盐水喷涂;
b.将另一硅片材置于糊剂上方,并且用重物压实5分钟;将片段切割成12cm×2cm的条带以适合有机硅片材。
c.将所制备的片材转移到Instron测试系统,并且根据ASTM F2256-05(2015)测量粘连力。
d.使用Instron 5944/100N传感器测量将两个粘附层彼此分离所需的力(称为剥离力)。
样品制备:FTP共混物由猪血浆制成。FTP包含猪纤维蛋白原、凝血酶,并且在一些所测试样品中还包含ORC和赖氨酸。使用喷雾干燥(并且在指示时,随后进行高剪切混合(HSM))使FTP具有更高(高剪切;0.35g/mL)或更低(0.25g/mL)密度。筛分FTP以产生具有不同粒度的两类共混物(d<106μm,d=106μm-250μm)。
在下面的实施例7中提供了用于喷雾干燥的方案。
第一组所测试样品:测试介质(疏水性相对于亲水性)和粒度的效果:
通过将纤维蛋白原凝血酶粉末状共混物(“FTP共混物”)与各种介质(“分散剂”)以固定比例(重量/重量=0.83)混合来制备具有可流动特性的测试样品。需注意,虽然0.83比率几乎不提供流动性,但T-剥离测试对样品流动性无要求,并且为了满足设备的最低检测限,以该比率测试样品,以便以更高的产率评估T-剥离力。
为此目的,将每个有机硅片材用盐水润湿,然后在盐水上施用1g组合物。在样品上再次喷涂盐水后,使用另一个有机硅片材来覆盖样品。将钢模具放置在片材上,将其压制5分钟,直到固化发生为止。
将所制备的片材转移到Instron中以通过上述T-剥离测试测量粘连性。本发明公开了关于平均、最小和最大剥离力和剥离强度值的结果。记录并分析每宽度的平均载荷。
如下列出了所测试样品的信息。
HSMP250/MO:高剪切混合制备的FTP(d=106μm-250μm)与矿物油的混合物。
HSMP/MO:高剪切混合制备的FTP(d<106μm)与矿物油的混合物。
SP/MO:喷雾制备的FTP(d<106μm)与矿物油的混合物。
HSMP/PEG400:高剪切混合制备的FTP(d<106μm)与PEG400的混合物。
HSMP/甘油:高剪切混合制备的FTP(d<106μm)与甘油的混合物。
HSMP/CO:高剪切混合制备的FTP(d<106μm)与低芥酸菜籽油的混合物。
HSMP/丙二醇:高剪切混合制备的FTP(d<106μm)与丙二醇的混合物。
结果
表4示出了以上列出的每个样品的每宽度的平均载荷的结果;(样品量=3)。如上所述,虽然发现甘油和丙二醇样品几乎不流动,但由于T-剥离测试方法对流动性没有严格的要求,因此可测试这些样品以提供额外的参考。
表4:每宽度的平均载荷
执行单向ANOVA以在确认通过正态性检验和等方差检验之后分析各组之间的差异(表5)。结果显示,与其他糊剂制剂相比,SP/MO达到最高的粘合特性(参见图4)。
表5针对平均值差的图基联立检验
*各个置信水平=99.58%
介质的效果:结果(表4)显示,与本研究中测量的其他制剂相比,作为SP/MO、HSMP/MO、HSMP/CO和HSMP/甘油的那些制剂表现出明显更高的粘合特性。
表5提供了所测试样品对之间的差异的进一步指示。
例如,如通过“T-剥离测试”所测试的HSMP/MO与HSMP/PEG400之间的粘合性的差异是3.142N/m(根据表4中呈现的平均值,即5.076-1.934),这表明与亲水性介质诸如PEG400相比,油(诸如矿物油)提供更强的粘合特性。
值得注意的是,亲水性介质(即甘油)的组合物显示相对强的粘合性(4.261N/m),然而,再次,此类疏水性介质几乎不满足如以上实施例1中所示的流动性要求,并且因此不是优选的。
不受任何特定理论的束缚,可设想含有油(诸如矿物油)的糊剂制剂显示出更好的粘连性,因为纤维蛋白原在此类介质中保持活性。
粒度的效果:还可以得出结论,粒度显著影响粘连性,如基于上表5所确定的(例如将HSM/MO与HSM250/MO相比较)。如以下实施例4中所示,具有较大颗粒的糊剂通常表现出差的均质性,可能因为糊剂制剂包含两个分离的相:固体粒子和液体疏水性介质。不受任何机制的束缚,较小的颗粒可缓解相的分离,因此改善均质性和最终结果。
第二组所测试样品—测试ORC和附加的成分的效果:
在另外的研究中,开发了另外的制剂,集中于例如疏水性分散剂、矿物油以及纤维蛋白原凝血酶粉末(FTP)的更精细共混物。
在示例性程序中,制备由FTP共混物构成的以下共混物样品以进行粘合性测试(更多详细信息参见表6):
#1HSMP-ORCF-SP:不含ORC的纤维蛋白原和凝血酶小粉末(d<106μm);
#2HSMP-ORCF-LP:不含ORC的纤维蛋白原和凝血酶大粉末(d=106μm-250μm);
#3HSMP-ORC15-SP:含有约15%ORC和6.24%赖氨酸的纤维蛋白原和凝血酶小粉末(d<106μm)。
表6:FTP共混物
根据如下所述的程序(喷雾干燥,之后进行高剪切),使用猪血浆制备FTP共混物;筛分包含猪纤维蛋白原和凝血酶的FTP共混物以产生两种粒度(d<106μm,d=106μm-250μm)。进一步测试含有15%ORC纤维(80μm)和6.24%赖氨酸的FTP。
对于可流动组合物而言,将FTP共混物的制剂与所指示的分散介质混合以形成可流动组合物。如以上实施例1所示,通过组合物外观确定介质与FTP共混物的合适比率,该组合物外观必须是适当可流动的。因此,根据实施例1中呈现的流动性测试来选择粉末与分散剂的固定比率0.59。以下(表7)示出这组示例性程序的所测试组合物的信息,包括上述#1-3共混物中的任一者(在表7中被称为“FTP#”)进一步与介质组合,从而形成糊状稠度。
表7:所测试样品
*甘油在0.59比率下没有糊状稠度。
结果
下面呈现了共同结果,这些结果示出平均、最小和最大剥离力和剥离强度值。记录并分析每宽度的平均载荷。
每个样品的每宽度的平均载荷如下(样品量=3)(表8):
表8:每个样品的每宽度的平均载荷
结果进一步示于图5中。
执行单向ANOVA以在确认通过正态性检验和等方差检验之后分析各组之间的差异,如表9中呈现的。
表9方差分析
方差分析显示,在各组之间观察到显著的差异(p=0.036)。表10中指示并呈现了每个相应测试的平均值的图基比较。
表10使用图基方法和95%置信度的分组信息
*不共享字母的平均值显著不同。
在表10中,不共享相同字母的平均值具有统计意义上的显著性。例如,结果表明,根据最高T-剥离力,与HSMP-ORCF-丙二醇(仅带字母“B”符号)相比,HSMP-ORCF-MO和HSMP-ORCF-LP-MO(两者均仅带字母“A”符号)的制剂表现出明显更高的粘合特性,这表明矿物油是期望的介质。
而且似乎ORC的添加会降低T-剥离力(将表8中的样品3和样品7相比较)。
在粘连性方面,在甘油、PEG400、橄榄油、大豆油的其他组合物中未观察到显著的差异。然而,如实施例1中提供的,需要认为如流动性以及胶凝时间之类的其他特性是此概念的基本特征。如上所呈现的,例如,甘油的组合物显示高粘合特性,但几乎不满足流动性的要求。
第三组所测试样品—测试ORC、粒度和油比率的组合效果:
表11中提供了所测试样品(为了方便起见,在这里复制表2)。
表11第三组所测试采样的所测试样品
进行T-剥离测试以评估表11中列出的纤维蛋白原糊剂的粘合特性。统计分析显示,ORC比率是关于促进粘连的主要因素(如下表12中所呈现的;线性模型中22.53%贡献)。
表12T-剥离测试统计信息
结果表明,ORC的添加会降低T-剥离力(参见图6A),这与其对胶凝过程的正面作用相矛盾(参见上文)。这种效果也与粒度相关,因为ORC比率和粒度的组合相互作用是显著的。由于其拮抗性相互作用,未观察到粒度或油比率本身的主要效果
(参见图6B)。然而,在下一实施例中显示,基于小粒度范围(诸如小于106微米)的制剂提供更好的均质性。
实施例4:均质性和稳定性测试
制剂均质性:方案提供了通过在施用表达力之后评估施用装置内的残余物来确定糊剂制剂的均质性的方法。
设备:Instron 5944/1kN传感器;固定保持器和电动卡尺。
在示例性程序中,对下表13中描述的制剂检查制剂均质性。
表13用于均质性检查的测试组(组B和组C是高剪切混合的)
制剂不均质性可基于观察到液相/固相分离来确定,在施用固定压制力之后,液相/固相分离导致施用装置(注射器)内产生残余物。
在示例性程序中,将3g无水糊剂填充到3mL注射器(施用装置)中。注射器中糊剂量的高度经电动卡尺测量为“H”。接下来,将填充的注射器转移到固定保持器上,同时确保注射器竖直地设置。在施用装置中将表达力的上限设置为80N。一旦达到80N,就停止表达力,称取注射器内的残余物。
因此,将测试程序设置为最大载荷为80N,速度为3.33mm/s。将传感器调整为接近柱塞并确保初始载荷在±0.03N的范围内。将表达力施用到填充的注射器,直到其达到最大载荷,并且将位移记录为“D”。
通过以下等式计算残余物浓度:
残余物=[(H-D)/H]X100%。
可接受的均质性标准是残余物小于5%。
结果呈现于图7中,该图显示,就包括在16微米至151微米范围内的粒度的配方而言,检测到4.9%(按重量计)残余物;就包括在23微米-83微米范围内的粒度的配方而言,检测到3.4%(按重量计)残余物;并且在包括10微米-52微米范围内的粒度的配方中未观察到残余物。因此,结果表明,在压制之后包含较小粒子的组合物在注射器中具有较少残余物,这表明较小粒子(低于106微米)可实现更好的均质性。
稳定性:在示例性程序中,对下表14中描述的制剂检查制剂稳定性。
表14用于稳定性检查的测试组(组B是高剪切混合的)
制剂稳定性:在示例性程序中,在施用装置中将表达力的上限设置为80N。如上文针对均质性测试所述那样进行示例性程序,其中在室温下在4个时间点评估注射器内的残余物:0天、7天、23天、30天。
结果呈现于图8中,该图显示,就包括较大粒度的配方而言,在23天后检测到约20%(按重量计)残余物;就包括较小粒度的配方而言,检测到仅4%(按重量计)残余物(在30天之后);因此,结果表明,较小的粒子可实现更好的稳定性。
实施例5:使用胶原来改善流变特性
在附加的示例性程序中,进行另一组实验以通过向其中添加胶原,进一步研究和改善所测试样品(1)-(5)的流变特性(购自上海笛柏生物科技股份有限公司(Shanghai D&BBiological Science and Technology Co.Ltd.))。
使用的油是大豆油。
样品(比率是指粉末与油的按重量计的比率;胶原的百分比是按包含油且无ORC的总重量计):
(1)1:1.7,无胶原;
(2)1:1.7,10%胶原;
(3)1:1.7,20%胶原;
(4)1:1.5,10%胶原;和
振幅扫描测试:在一组示例性实验中,通过剪切流变仪评估样品的剪切损耗模量(G')和剪切储存(G")模量。使用Anton Paar模块化紧凑型流变仪MCR102进行测量。所有测试均在25℃的温度下进行。进行应变扫描测试以确定样品的线性粘弹性方案。然后在0.01%至100%的剪切应变(振荡)范围和0rad/sec-10rad/sec范围内的角频率下进行扫描测试。
在振幅扫描期间,变形的振幅(或另选地剪切应力的振幅)变化,同时频率保持恒定。振幅是振荡运动的最大值。为了进行分析,绘制储能模量G'和损耗模量G″相对于变形的曲线图。
G'和G”的相交点是屈服点(τ)。τ=F/A,其中剪切应力为τ(tau),剪切力为F(以N为单位)并且剪切面积为A(以m2为单位)。样品(1)的tau值是0.1328Pa,样品(2)的tau值是0.7824Pa,样品(3)的tau值是4.501Pa,并且样品(4)的tau值是13.51Pa,这意味着推动样品前进所需的力与胶原浓度成正比,并且与粉末与油比率成反比。与对照(Surgiflo)相比,每个样品的屈服点较小,表明范围1:1.5至1:1.7和0%-20%胶原可导致制剂在施用期间具有适当推力。
触变性(3ITT)测试:在附加的一组示例性实验中,使用Anton Paar模块化紧凑型流变仪MCR102进行三间隔触变性测试。进行测试以评估不同糊剂制剂的变形和再生。具有三个间隔的测试的结果被描绘为时间依赖性粘度函数:(I)在开始时,在静止状态下高粘度(对于60秒的总间隔,每隔6秒一个点;剪切速率:恒定值,1/s),(II)通过由高剪切诱导的结构分解引起的粘度降低(对于5秒的总间隔,每隔5秒一个点;剪切速率:恒定值,100/s),(III)通过在静止状态下结构恢复引起的粘度增加(对于200秒的总间隔,每隔2秒一个点;剪切速率:恒定值,1/s)。结果示于图9中。可以看出,不含胶原的样品表现出非常缓慢的结构恢复性,表明样品一旦施用在伤口部位上就会移走。根据3ITT结果,粉末与油比率为1.5至1.7,并且胶原%使粘度特性提高最多至20%。
胶凝测试:在附加的一组示例性实验中,使用Anton Paar模块化紧凑型流变仪MCR102测试胶凝时间。将5mL水添加到每个样品。收集测试的结果(每2秒300个数据点;剪切应变振荡5%;恒定频率10Hz)。水添加点与相交点(G'=G”)之间的间隔表示每个所测试样品的胶凝时间。结果显示,对于样品(1)和(2),胶凝时间小于3分钟。样品(3)和(4)的相交点在10分钟内不可见,表明这两种制剂具有长胶凝时间,并且对于止血应用可能不太理想。
综上所述,可以得出结论,添加按重量计至多20%(最佳地10%左右)的胶原显著改善了糊剂的吸水性特性,这可能进一步影响实际应用中的止血时间。
实施例6:体内测试
在示例性程序中,在肝素化条件下在脾脏活检穿孔模型上测试以下样品。图10A呈现了典型的流程图,该典型的流程图示出了样品在活检穿孔出血模型上的使用。
在示例性程序中,测试以下样品(表15)。
表15用于体内检查的测试组(组2-组4是高剪切混合的)。
在示例性程序中,使用6mm穿孔器在脾脏的表面上打一个5mm的孔。在测试制品施用之前,用纱布或通过使用抽吸将过量的血液从目标出血部位吸干/去除,使得可在出血表面尽可能干燥的情况下将止血粉末直接施用于出血部位,然后施用产品。将足够量的糊剂或粉末施用于部位以用多层覆盖整个出血区域。然后立即施用干燥纱布以保持测试制品与出血区域接触。在等待2分钟之后,评估止血功效。在用10mL盐水冲洗部位后1分钟观察期期间评估持久的止血。
在肝素化条件下脾脏活检穿孔模型的代表性结果示于图10B中,该图示出在出血部位中、在注射1mL的制剂时和在手术部位中1分钟填塞之后粒度对止血功效粘连检测没有任何影响。
总之,在流动性范围内,较低的油剂量和较大的粒度允许实现更快的胶凝。然而,可能优选小尺寸的粒子,因为具有较大颗粒的糊剂通常表现出差的均质性和稳定性。对于ORC添加,如果存在的话,应当选择所测试的那些添加中的中等水平,以在胶凝速度和粘合特性的要求之间进行平衡。某些浓度下的胶原可改善流变特性。
实施例7:通过喷雾干燥方法产生凝血酶和纤维蛋白原粉末的工艺
原材料:
供应商:广州倍绣生物技术有限公司美国爱惜康公司(Bioseal,Guangzhou,Ethicon,US)。
凝血酶/纤维蛋白原的来源:猪血浆;
共混物中纤维蛋白原的量取决于ORC添加剂,如下:ORC=0,FIB%=88.23;ORC%=8.78,FIB%=77.44;ORC%=15.63,FIB=68.94:其余包括凝血酶、CaCl2、赖氨酸。参考下表16。
ORC(在一些样品中使用)的量为按重量计8.79%;ORC特征:粒度<70μm,纤维形式。
喷雾干燥:喷雾干燥是用于由溶液、悬浮液或乳液形成粉末的干燥方法,该溶液、悬浮液或乳液在热气流中通过喷雾嘴雾化并且立即干燥。喷雾干燥工艺通过若干工艺参数来控制,其中一些参数是:柱空气流量和温度、喷嘴尺寸和雾化空气流速、材料流速等。
在示例性程序中,使用喷雾干燥方法(喷雾干燥器:使用4M8-TriX喷雾干燥器(比利时泽尔扎特Pr℃epT nv公司(ProCepT nv,Zelzate,Belgium))如下产生凝血酶和纤维蛋白原粉末。
将所制备的凝血酶和纤维蛋白原猪纤维蛋白原溶液抽取到注射器中并放置在喷雾干燥器的注射器泵内部。将注射器泵设置为期望的流速并且关闭进料阀。在关闭注射器泵进料阀的同时,启动喷雾干燥器并且设置期望的雾化气体流速、干燥气体流速、干燥气体温度、冷却气体流速和旋流气体流速。
选择冷却气体流速和温度,诸如不破坏干燥塔中的层流,但是将气体流温度降低到组合物的玻璃化转变温度以下,以便防止粉末粘着到玻璃部件。
允许喷雾干燥器运行直到达到稳定状态,其中参数的实际测量值达到设定水平并保持稳定。然后打开进料阀,从而允许凝血酶/纤维蛋白原溶液流动穿过进料口,进入喷雾嘴以被雾化气体流雾化为小液滴,这些小液滴然后在干燥塔中被干燥。形成喷雾干燥的粉末,将这些粉末收集在喷雾干燥器的旋流器的粉末出口中。
将从旋流器回收的喷雾干燥的粉末在相对湿度低于30%的脱湿器中称重,并且分成介于100mg-200mg之间的样品。将每个样品单独密封在具有塞子的试管中,并用密封(美国威斯康星州奥什科什的毕玛时公司(Bemis,Oshkosh,Wisconsin,USA))直至进行评估。
凝血酶和纤维蛋白原保持其:活性、低水含量、高固体产率和期望的粉末粒度和分布。将所获得的粒子混合,添加分散剂添加剂,并且将所获得的制剂均质化。
主要喷雾干燥工艺参数范围详述于下表16和表17中。
表16纤维蛋白原制剂的喷雾干燥
参数 | 值 |
干燥柱 | 3(模式II) |
柱气流 | 0.6m<sup>3</sup>/min |
入口空气温度 | 150℃ |
喷嘴直径 | 0.8mm |
雾化气流 | 12L/min |
旋流气体 | 0.15m<sup>3</sup>/min |
表17凝血酶制剂的喷雾干燥
参数 | 值 |
干燥柱 | 2 |
柱气流 | 0.3m<sup>3</sup>/min |
冷却气流 | 0.3m<sup>3</sup>/min |
入口空气温度 | 160℃ |
喷嘴直径 | 0.4mm |
雾化气流 | 7L/min |
旋流气体 | 0.1m<sup>3</sup>/min |
高剪切:在制造粉末状共混物的一些示例性程序中,应用喷雾干燥工艺,并且在获得纤维蛋白原和凝血酶粒子时并且在添加分散剂之前,将粒子混合并且高剪切处理。此工艺涉及使用高剪切混合器用1L碗以100g材料的规模制造粉末。
设备详细信息:天平:SS1000;高剪切混合器:Mini-CG 1L;注射器泵:LSP01-1C;真空干燥箱:Vacucell 111;振荡筛网:Fritsch analysette 3。
材料:原材料制剂(重量百分比):1.含ORC:77.44%纤维蛋白原粉末;7.60%凝血酶粉末;2.64%CaCl2粉末;8.79%ORC粉末;3.52%赖氨酸粉末。2.不含ORC:88.32%纤维蛋白原粉末;8.67%凝血酶粉末;3.01%CaCl2粉末。悬浮剂:3M九氟甲氧基丁烷(HFE 7100)。粘结剂:纯化水。
环境:22℃-26℃;相对湿度:50%-70%。
在示例性程序中,在具有150rpm-500rpm高速混合叶片和150rpm-500rpm切割刀片的高剪切混合/剪切反应器中形成悬浮液。具体地,在预混合步骤中,称取总重量为100g的原材料。将材料放入高剪切混合器的1L碗中。将切碎机速度设置为150rpm,叶轮速度设置为150rpm,混合2分钟。接下来,将325mL HFE放置到碗中以悬浮原材料,混合2分钟。接下来,在制粒步骤中,将切碎机速度设置为200rpm,将叶轮速度设置为200rpm,并且将密封压力设置为0.05MPa。使用注射器泵,以4mL/min的流速和0.4mm的喷嘴尺寸将10mL纯化水喷射到碗中以结合悬浮的粒子。
雾化压力为0.05MPa。制粒时间:2分钟。接下来,在后制粒步骤中,将切碎机速度调节至300rpm,并且将叶轮速度调节至500rpm。然后继续制粒2分钟。在制粒步骤中,HFE挥发。需注意,由于HFE 7100用作悬浮剂,使用水浴护套来帮助HFE 7100挥发,因此,将水温设置为45℃。在该步骤结束时,不可见液体。
接下来,施用第一真空干燥:将所获得的组合物转移到托盘并放入真空干燥箱中。将真空压力设置为大约0Pa,保持3小时。接下来,筛分粉末:将粉末转移到振荡筛网托盘中,筛网尺寸依次为250微米/106微米。将振幅设置为1.5mm,筛分时间:10分钟。
接下来,施用第二真空干燥:将粉末转移到真空干燥箱中,保持干燥达3小时,其中真空压力为约0Pa。最后,收集在250μm筛下的产物。
下表18中提供了“原材料”和通过高剪切工艺获得的粒状粉末的粒度的示例性数据。
表18:原材料和粒状粉末的粒度(对于第1行和第2行,纤维蛋白原和凝血酶粉末是喷雾干燥工艺的输出,而不经过进一步的高剪切。对于其余行(标注为“粒状”),粒状粒子是高剪切混合工艺的输出)。
尽管本发明已结合其具体实施方案进行了描述,但显然许多替代、修改和变型对于本领域中那些技术人员而言是显而易见的。因此,本文旨在涵盖落入所附权利要求书的实质和广义范围内的所有此类另选形式、修改和变型。
Claims (32)
1.一种组合物,包含:(i)纤维蛋白原和凝血酶的共混物,其中所述共混物呈多个粒子的形式,和(ii)疏水性分散剂,其中所述组合物在10℃至37℃范围内的至少一个温度下呈糊剂的形式。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中所述糊剂的特征在于8Pa·s至80Pa·s的静态粘度。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其中所述糊剂还包含胶原。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物,其中所述胶原以按重量计低于20%的浓度存在。
5.根据权利要求4所述的组合物,其中所述胶原以按重量计至少约10%的浓度存在。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物,其中所述糊剂的特征在于如在25℃的温度和10rad/sec的频率下测量的在约0.1Pa至约15Pa范围内的屈服点。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物,其中所述共混物与所述疏水性分散剂的比率的范围分别是从0.5:1至小于0.9:1(重量/重量)。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物,其中所述疏水性分散剂选自植物油、矿物油以及它们的组合。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物,其中所述疏水性分散剂包括选自以下的油:大豆油、橄榄油、胆固醇油酸酯、玉米油、甘油三油酸酯、红花油、角鲨烯、角鲨烷、十二烷以及它们的任何混合物。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物,其中所述疏水性分散剂包括矿物油。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的组合物,其中按所述共混物的重量计,所述纤维蛋白原以60%至95%或70%至90%的浓度范围存在。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的组合物,其中按所述共混物的重量计,所述纤维蛋白原以60%至85%的浓度范围存在,并且按所述共混物的重量计,所述凝血酶以5%至10%的浓度范围存在。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的组合物,其中所述共混物包含按重量计小于6%的水。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的组合物,所述组合物包含按总重量计小于3.5%的水。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的组合物,其中所述共混物还包含选自以下的一种或多种赋形剂:氨基酸、白蛋白、糖类或它们的任何衍生物或混合物。
16.根据权利要求1至15所述的组合物,还包含钙盐和/或赖氨酸。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的组合物,其中所述多个粒子的特征在于最高至270μm的中值粒度。
18.根据权利要求17所述的组合物,其中所述多个粒子的特征在于约8μm至约60μm的中值粒度。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的组合物,包含浓度为小于12%,例如5%至小于12%的氧化纤维素(OC)。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的组合物,所述组合物不含OC。
21.根据权利要求19或20所述的组合物,其中所述OC是氧化再生纤维素(ORC)。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的组合物,其中所述共混物是喷雾干燥混合的。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的组合物,其中所述共混物是高剪切混合的。
24.根据权利要求1至23中任一项所述的组合物,其中所述凝血酶和/或纤维蛋白原源自猪血浆。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的组合物,所述组合物是止血组合物。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的组合物,所述组合物在用于治疗出血组织的方法中使用。
27.一种用于制备受损组织中/上的纤维蛋白粘合密封剂的方法,所述方法包括将根据权利要求1至26中任一项所述的组合物施用在所述组织的表面上。
28.根据权利要求26或27所述的方法,其中所述组织是软组织。
29.一种通过根据权利要求27或28所述的方法获得的密封剂层。
30.根据权利要求29所述的密封剂层,其特征在于至少3.5N/m的最小粘结强度,任选地如通过T-剥离测试(ASTM F2256-052015)测量的。
31.一种组合物,包含:(i)纤维蛋白原和凝血酶的共混物,其中所述共混物呈多个粒子的形式;(ii)疏水性分散剂,所述疏水性分散剂包括矿物油或大豆油;和(iii)一种或多种组分,所述一种或多种组分选自钙盐和/或赖氨酸,其中:
所述共混物与所述疏水性分散剂的比率的范围分别是从0.5:1至0.9:1(重量/重量);
所述多个粒子的特征在于中值粒度为约8μm至约60μm,并且其中所述组合物在10℃至37℃范围内的至少一个温度下呈糊剂的形式。
32.一种套件,包括:
a.容器,所述容器容纳根据权利要求1至25和31中任一项所述的组合物;
b.施用装置,所述施用装置用于将所述组合物施用于组织;和任选地
c.使用说明。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2019123652 | 2019-12-06 | ||
CNPCT/CN2019/123652 | 2019-12-06 | ||
PCT/CN2020/133059 WO2021109979A1 (en) | 2019-12-06 | 2020-12-01 | Flowable fibrinogen thrombin paste |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115397480A true CN115397480A (zh) | 2022-11-25 |
Family
ID=76221482
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202080084467.2A Pending CN115397480A (zh) | 2019-12-06 | 2020-12-01 | 可流动纤维蛋白原凝血酶糊剂 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20220409705A1 (zh) |
EP (1) | EP4069324A4 (zh) |
CN (1) | CN115397480A (zh) |
WO (1) | WO2021109979A1 (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113813291B (zh) * | 2021-11-10 | 2023-05-26 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种动物药材冻干粉的制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20130136775A1 (en) * | 2011-11-30 | 2013-05-30 | Andreas Voigt | Hydrophobic drug-delivery material, method for manufacturing thereof and methods for delivery of a drug-delivery composition |
US20190247474A1 (en) * | 2018-02-13 | 2019-08-15 | Guangzhou Bioseal Biotech Co. Ltd. | Hemostatic compositions and methods of making thereof |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IN184589B (zh) | 1996-10-16 | 2000-09-09 | Alza Corp | |
CN101374554A (zh) | 2005-09-27 | 2009-02-25 | 埃弗拉特生物聚合物有限公司 | 胶凝疏水性可注射聚合物组合物 |
US9474715B2 (en) | 2011-11-30 | 2016-10-25 | Andreas Voigt | Polymeric drug-delivery material, method for manufacturing thereof and method for delivery of a drug-delivery composition |
US9056092B2 (en) | 2011-12-02 | 2015-06-16 | Ethicon, Inc. | Hemostatic bioabsorbable device with polyethylene glycol binder |
EP3079731B1 (en) | 2013-12-11 | 2018-08-08 | Ferrosan Medical Devices A/S | Dry composition comprising an extrusion enhancer |
CN107754005B (zh) | 2016-08-15 | 2021-06-15 | 广州倍绣生物技术有限公司 | 止血组合物及其制造方法 |
-
2020
- 2020-12-01 WO PCT/CN2020/133059 patent/WO2021109979A1/en unknown
- 2020-12-01 EP EP20897608.4A patent/EP4069324A4/en active Pending
- 2020-12-01 US US17/780,256 patent/US20220409705A1/en active Pending
- 2020-12-01 CN CN202080084467.2A patent/CN115397480A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20130136775A1 (en) * | 2011-11-30 | 2013-05-30 | Andreas Voigt | Hydrophobic drug-delivery material, method for manufacturing thereof and methods for delivery of a drug-delivery composition |
US20190247474A1 (en) * | 2018-02-13 | 2019-08-15 | Guangzhou Bioseal Biotech Co. Ltd. | Hemostatic compositions and methods of making thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20220409705A1 (en) | 2022-12-29 |
WO2021109979A1 (en) | 2021-06-10 |
EP4069324A1 (en) | 2022-10-12 |
EP4069324A4 (en) | 2024-01-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9801976B2 (en) | Flowable matrix compositions and methods | |
US10034958B2 (en) | Nanocomposite hydrogels | |
JP6050320B2 (ja) | 止血組成物 | |
JP7395113B2 (ja) | 止血組成物を調製する方法 | |
Li et al. | Reinforced collagen with oxidized microcrystalline cellulose shows improved hemostatic effects | |
Dowling et al. | Determination of efficacy of a novel alginate dressing in a lethal arterial injury model in swine | |
BR112019003015B1 (pt) | Composições hemostáticas e métodos de preparo das mesmas | |
Irfan et al. | Gelatin-based hemostatic agents for medical and dental application at a glance: A narrative literature review | |
RU2739771C1 (ru) | Спрей на основе транексамовой кислоты для артропластики коленного сустава | |
US11052172B2 (en) | Hemostatic flowable | |
US2642375A (en) | Hemostatic compositions | |
CN115397480A (zh) | 可流动纤维蛋白原凝血酶糊剂 | |
CN112190770B (zh) | 可降解拔牙创填充组合物及其制备方法和应用 | |
JP2022509912A (ja) | 酸化セルロースを含む組成物 | |
JP2019528857A (ja) | 架橋化ヒアルロン酸誘導体マトリックスが含まれている止血組成物 | |
WO2022217492A1 (en) | Flowable hemostatic paste | |
RU2795399C2 (ru) | Текучее гемостатическое средство | |
WO2024068836A1 (en) | Haemostatic composition | |
NZ750516B2 (en) | Hemostatic flowable |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 40083709 Country of ref document: HK |