CN115397421A - 包含tno155和那扎替尼的药物组合 - Google Patents

Abstract

本发明涉及包含TNO155和那扎替尼的药物组合；包含该药物组合的药物组合物；以及在治疗或预防SHP2抑制剂与EGFR抑制组合是例如在治疗癌症中有益的病症中使用此类组合和组合物的方法。

Description

包含TNO155和那扎替尼的药物组合

技术领域

本发明涉及包含TNO155和那扎替尼(NAZARTINIB)的药物组合；包含该药物组合的药物组合物；以及在治疗或预防其中SHP2抑制与EGFR抑制组合是有益的病症中、例如在治疗癌症中使用此类组合和组合物的方法。本发明还涉及TNO155、或其药学上的盐，用于治疗癌症，其中将TNO155、或其药学上的盐与那扎替尼、或其药学上可接受的盐共同施用。本发明还涉及那扎替尼、或其药学上的盐，用于治疗癌症，其中将那扎替尼、或其药学上的盐与TNO155、或其药学上的盐共同施用。

发明背景

异常受体酪氨酸激酶(RTK)信号传导是许多人类癌症的共同特征，经常导致对于靶向这些激酶的疗法的敏感性。此类癌症的实例包括EGFR突变型肺癌、KIT突变型胃肠道间质瘤(GIST)、和HER2阳性乳腺癌、以及头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)和RAS/BRAF-WT结直肠癌(CRC)，最后的两者经常过表达EGFR。SHP2是一种磷酸酶，与激活的RTK结合并在Ras/MAPK和PI3K/Akt途径的下游转导其信号传导。因此，SHP2的抑制会抑制RTK介导的信号传导。

还已经描述了SHP2调节PI3K、Fak、RhoA、Ca2+振荡、Ca2+/钙调神经磷酸酶和NFAT信号传导，且SHP2在Jak/Stat信号传导的调节中也在细胞因子信号传导下游起作用。此外，SHP2在免疫检查点分子PD-1、B和T淋巴细胞减毒剂(BTLA)和吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的下游发出信号。因此，SHP2通过调节肿瘤的迁移、侵袭、转移或抗肿瘤免疫应答，在肿瘤发生中可以具有独立于RAS/MAPK的功能。

在世界范围内，肺癌占全部总癌症病例的13％(160万)和癌症死亡的18％(140万)。在美国，每年超过160,000人死于肺癌。在西方国家，10％-15％的非小细胞肺癌(NSCLC)患者在他们的肿瘤内带有激活型表皮生长因子受体(EGFR)突变(在美国每年有20,000至30,000新患者)，而亚洲国家已报告的比率高达30％-40％。主要致癌EGFR突变(L858R以及ex19del)大约占EGFR突变型NSCLC的90％。这导致促进存活、增殖、血管发生和转移的多个途径的激活。

使用第1代EGFR抑制剂(例如埃罗替尼、吉非替尼)，患有EGFR突变型NSCLC的患者具有高疾病控制率，但是总是会发展抗性。大约50％的抗性肿瘤带有EGFR看门人T790M突变，同时另外50％带有多种遗传改变，这在很多情况下促进汇聚在SHP2上的平行信号传导(例如MET、ERBB2、HGF的扩增)。此外，使用第3代EGFR抑制剂(例如那扎替尼和奥希替尼)，发生EGFR T790M突变的患者具有高疾病控制率，但是也发展了对这些药剂的抗性。对这些药剂的抗性并没有很好地表征，但是在一些情况下，已经发现与EGFR C797S突变(这破坏了第3代EGFR抑制剂的结合)或MET或FGFR1的扩增相关。这些发现突出显示了这些癌症对RTK信号传导的连续依赖，这应该预测了对SHP2抑制的敏感性。对于这些患者而言，仍然没有分子靶向治疗选项。

约30％的NSCLC带有激活型KRAS突变，并且这些突变与对EGFR TKI的抗性相关。这些突变在位置12、13、或61处引入了氨基酸取代，并且G12C突变是肺癌中最常见的KRAS突变中的一种，见于约12％的肺腺癌中。有趣的是，在同一肿瘤中，很少检测到EGFR和KRAS突变，表明它们可能在肺肿瘤发生中起到功能上等效的作用。已经证明KRAS的直接抑制具有挑战性，除了在靶向KRASG12C的最近进展以外。而是，作为单一药剂或组合，在KRAS突变型NSCLC中，临床上已经开发并且测试了靶向KRAS的下游信号传导节点(例如RAF、MEK和ERK)的抑制剂。尽管有这些努力，然而，并没有批准靶向疗法用于患有KRAS突变型NSCLC的患者。

在世界范围内，每年诊断出大约550,000个头颈癌(HNSCC)的病例。在美国，估计每年发生大约50,000个病例，其中大约三分之一的患者在诊断的5年内去世。头颈癌特征在于EGFR、FGFR、及其配体的频繁扩增，并且大约90％具有鳞状组织学。此外，在转移性/不可切除的头颈部鳞状细胞癌中，已经表明靶向EGFR的单克隆抗体西妥昔单抗的抗肿瘤功效。然而，在这一患者群体中，使用含西妥昔单抗的方案的疾病控制是相对寿命短的，并且在关于标准照护疗法进展后，在此指示中，只保留了很少的治疗选项。在HNSCC中，RTK信号传导组分的高频率扩增或过表达，结合临床前数据，表明了HNSCC细胞系对抑制的SHP2阻抑的高敏感率，表明这些癌症可能是对SHP2抑制敏感的。

全球每年诊断出大约232,000个新的皮肤黑素瘤的病例，其中发病率已经稳定增加几十年。在黑素瘤的发展和进展中，MAPK途径起到主要作用。BRAF突变发生在40％-60％的黑素瘤患者中，并且NRAS突变发生在15％-20％的黑素瘤患者中。这些突变组成性地激活MAPK途径中的BRAF和下游信号转导，发出癌细胞增殖和存活的信号。在黑素瘤中，在MAPK途径中，突变频率最高的第三位基因是NF1，它在黑素瘤中以约14％突变，其中预测超过一半的其这些突变导致功能缺失。NF1突变的黑素瘤占约一半的BRAF和NRAS野生型黑素瘤。NF1突变的黑素瘤患者倾向于具有更高的突变负荷和更差的预后。很多这些患者确实响应于PD-1抑制剂，但是对于使用PD-1抑制剂治疗是难治的或在PD-1抑制剂治疗后已经复发的那些患者而言，仍然存在未满足的医学需求。

很多其他转移性/不可切除的实体恶性肿瘤显示了依赖于RTK信号传导，例如KIT或PDGFRA突变型GIST(它经常对于伊马替尼是敏感的)，K/NRAS-WT CRC(它可显示了对于西妥昔单抗和帕木单抗的敏感性)，髓样甲状腺癌(它经常对于RET、VEGFR、和EGFR靶向的TKI凡德他尼是敏感的)，或ALK重排的NSCLC(它通常响应于克唑替尼或色瑞替尼)。在其中对已经描述的此类药剂具有抗性的机制的情况下，RTK信号传导的重新激活是常见的，并且将预期它能预测对SHP2抑制的敏感性。

TNO155是野生型SHP2的选择性的、口服生物可利用的变构抑制剂。在临床前癌症模型(体外和体内)中，TNO155已经表明了显著的功效。在临床前模型中，对RTK抑制(suppression或inhibition)的敏感性预测了对TNO155的敏感性，而RAS、BRAF或PTPN11(编码SHP2的基因)中的组成性激活型突变的存在预测了缺乏对TNO155的敏感性。这些观察与RAS和BRAF上游的RTK信号传导中SHP2的作用、和TNO155抑制野生型SHP2的生物化学证据一致。在存活和增殖依赖于RTK信号传导的细胞系和异种移植物肿瘤模型中，TNO155表明了有效的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径药效动力学调节和抗增殖活性。

那扎替尼是第3代EGFR TKI，其不可逆地结合EGFR C797，并且针对EGFR敏化突变(例如ex19del、L858R)以及看门人突变T790M具有活性。对于第1代直到第3代EGFR TKI的描述的抗性机制包括以下突变：这些突变使得突变EGFR对于TKI不敏感，以及激活其他RTK旁路途径，例如MET或HGF扩增；甚至在给定肿瘤内，抗性机制可以是异质的。因此，甚至在异质性的背景下，TNO155与那扎替尼组合仍可以阻止或延迟很多描述的抗性机制。

由于二次EGFR突变或MET扩增，本发明的组合TNO155和那扎替尼可以克服对于EGFR抑制剂的获得性抗性。此外，TNO155和那扎替尼的组合是协同的，与持续的ERK抑制一致，并且在选自但不限于以下的癌症的治疗中将是有益的：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

发明内容

本发明提供了药物组合，所述药物组合包含：

(a)(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺(TNO155)或其药学上可接受的盐，具有以下结构：

(b)(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺(那扎替尼)或其药学上可接受的盐，具有以下结构：

TNO155或其药学上可接受的盐和那扎替尼或其药学上可接受的盐的组合在本文中也称为“本发明的组合”。

在本发明的组合的另一个实施例中，TNO155或其药学上可接受的盐和那扎替尼或其药学上可接受的盐是在相同配制品中。

在本发明的组合的另一个实施例中，TNO155或其药学上可接受的盐和那扎替尼或其药学上可接受的盐是在分开的配制品中。

在另一个实施例中，本发明的组合用于同时或依序(以任何顺序)施用。

在另一个实施例中是用于治疗或预防有需要的受试者中的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的本发明的组合。

在所述方法的另一个实施例中，癌症选自：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

在所述方法的另一个实施例中，癌症选自EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)。

在另一个实施例中，本发明提供了用于在癌症的治疗中使用的本发明的组合，所述癌症是例如选自以下的癌症：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中，本发明提供了用于在制造用于治疗选自以下的癌症的药物中使用的本发明的组合：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中是药物组合物，所述药物组合物包含本发明的组合。

在另一个实施例中，药物组合物进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。

附图说明

图1：TNO155和那扎替尼的组合剂量矩阵评估了它们针对PC-14和NCI-H1975细胞的抗增殖效应。显示了在6天测定和相应的Loewe过剩矩阵中，化合物处理的细胞的抑制百分比的平均值(n＝3)(相对于DMSO处理的对照)。

图2：与来自PC-14细胞的裂解液一起的所示蛋白的免疫印迹，其中用那扎替尼(0.1或0.3μM)、3μM TNO155，或那扎替尼和TNO155的组合处理这些细胞4h或24h。

图3：在用媒介物、奥希替尼(10mg/kg体重(mpk)，每天一次)、TNO155(10mpk，每天两次)、或奥希替尼和TNO155的组合进行处理后，在裸鼠中，EGFR突变型NSCLC患者来源的异种移植物的肿瘤体积随时间的百分比变化。

定义

除非另外说明，否则上文和下文中使用的通用术语优选在本披露的上下文中具有以下含义，其中无论在什么情况下使用的更通用的术语可以彼此独立地由更具体的定义代替或保留，从而定义本发明的更详细实施例：

如本文所用的，术语“受试者”或“患者”旨在包括易于患有癌症或任何障碍(直接或间接涉及癌症)或受其折磨的动物。受试者的实例包括哺乳动物，例如人、猿、猴、狗、乳牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、小鼠、兔、大鼠和转基因非人动物。在一个实施例中，受试者是人，例如患有癌症、具有患癌症的风险或可能易于患有癌症的人。

如本文所用的术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”包括解除、减轻或缓解受试者的至少一种症状或者实现疾病进展延迟的治疗。例如，治疗可以是减弱障碍的一种或几种症状或者完全根除障碍(如癌症)。在本披露的含义范围内，术语“治疗”还表示阻止、延迟发作(即在疾病的临床表现之前的时间段)和/或降低疾病发展或疾病恶化的风险。

除非另外指明，否则术语“包含”和“包括”在本文中以其开放式和非限制性的含义使用。

除非本文另外指明或明显与上下文矛盾，否则在描述本发明的上下文中(尤其是在以下权利要求的上下文中)，术语“一个”、“一种”和“所述”以及类似的指示词应当被解释为涵盖单数和复数这两者。当将复数形式用于化合物、盐等时，这也意指单一化合物、盐等。

按照本领域的惯例，剂量是指游离形式的治疗剂的量。例如，当提及150mg的那扎替尼的剂量，并且那扎替尼以其甲磺酸盐使用时，所用治疗剂的量相当于150mg游离形式的那扎替尼。

术语“约(about)”和“大约(approximately)”通常表示在给定测量的性质或精度的情况下测量的量的可接受的误差度。示例性误差度在给定值或值范围的20％内，典型地在10％内，并且更典型地，在5％内。特别地，当剂量被提及为“约”特定值时，其旨在包括在指定值±10％附近的范围。

特别地，当剂量被提及为“约”特定值，或剂量被称为特定值(即该特定值前无术语“约”)时，其旨在包括在指定值±10％或±5％附近的范围。

术语“组合疗法”或“与……组合”或“与……共同施用”是指施用两种或更多种治疗剂以治疗在本披露中描述的病症或障碍(例如癌症)。这种施用涵盖以基本上同时的方式共同施用这些治疗剂，如以具有固定比率的活性成分的单个胶囊施用。可替代地，这种施用涵盖在多个容器中或在每种活性成分的独立容器(例如，胶囊、粉末和液体)中共同施用。可以将粉末和/或液体在施用之前重构或稀释到所希望的剂量。另外，这种施用也涵盖在大致相同的时间或在不同的时间顺序使用每种类型的治疗剂。在任何一种情况下，治疗方案将在治疗本文所述的病症或障碍方面提供药物组合的有益作用。

组合疗法可以提供“协同”并且证明是“协同的”，即，当活性成分一起使用时所实现的效应大于由分别使用这些化合物所产生的效应的总和。当将活性成分为下述情形时可以获得协同效应：(1)共同配制并以组合的单位剂量配制品的形式同时施用或递送；(2)以单独配制品的形式交替或平行递送；或(3)通过一些其他方案进行。当以交替疗法递送时，可以在依序(例如通过在单独注射器中不同的注射)施用或递送化合物时获得协同效应。通常，在交替疗法期间，将有效剂量的每种活性成分依序地即顺次地施用，而在组合疗法中，将有效剂量的两种或更多种活性成分一起施用。

如本文所用，术语“药物组合”是指在一个剂量单位形式中的固定组合、或用于组合施用的非固定组合或成套药盒，其中两种或更多种治疗剂可以在同一时间独立地施用或在时间间隔内分别施用，特别地其中这些时间间隔允许组合配偶体显示合作性例如协同效应。

如本文所用的，“协同效应”是指两种治疗剂(例如像作为SHP2抑制剂的化合物TNO155、和作为EGFR抑制剂的那扎替尼)的作用，以产生如下效果，例如减缓增殖性疾病(特别是癌症)或其症状的症状进展)，这比自身施用的每种药物的效果的简单加和要大。可以例如使用合适的方法计算协同效应，所述合适的方法如Sigmoid-Emax方程(Holford,N.H.G.和Scheiner,L.B.,Clin.Pharmacokinet.[临床药代动力学]6:429-453(1981))、Loewe可加性方程(Loewe,S.和Muischnek,H.,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.[实验病理学与药理学档案]114:313-326(1926))以及中效方程(Chou,T.C.和Talalay,P.,Adv.EnzymeRegul.[酶调控研究进展]22:27-55(1984))。上面所指的每个方程式都可以应用于实验数据以生成相应的图以帮助评估药物组合的效果。与上文提到的方程相关的相应的图分别是浓度-效果曲线、等效线图曲线和组合指数曲线。

本发明的组合(TNO155和那扎替尼)还旨在表示未经标记的形式以及化合物的同位素标记形式。同位素标记的化合物的一个或多个原子被具有选定原子质量或质量数的原子取代。可以掺入TNO155和那扎替尼的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧和氯的同位素，例如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、³⁵S、³⁶Cl。本发明包括同位素标记的TNO155和那扎替尼，例如其中存在放射性同位素(如³H和¹⁴C)或非放射性同位素(如²H和¹³C)。同位素标记的TNO155和那扎替尼可用于代谢研究(用¹⁴C)、反应动力学研究(例如用²H或³H)、检测或成像技术，例如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，包括药物或底物组织分布测定，或用于患者的放射治疗。本发明的同位素标记的化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或与在使用适当的同位素标记的试剂的所附实例中所述的那些类似的方法来制备。

此外，用较重的同位素，特别是氘(即，²H或D)取代可以提供来源于更大的代谢稳定性(例如，体内半衰期延长或剂量需求减少或治疗指数改善)的某些治疗优点。应当理解，在此上下文中，氘可以被认为是TNO155或那扎替尼的取代基。这种较重的同位素(特别是氘)的浓度可以由同位素富集因子来定义。如本文所用的术语“同位素富集因子”是指同位素丰度与指定同位素的天然丰度之间的比率。如果TNO155或那扎替尼中的取代基指示氘，这种化合物具有针对每个指定的氘原子的同位素富集因子为至少3500(在每个指定的氘原子上52.5％氘掺入)、至少4000(60％氘掺入)、至少4500(67.5％氘掺入)、至少5000(75％氘掺入)、至少5500(82.5％氘掺入)、至少6000(90％氘掺入)、至少6333.3(95％氘掺入)、至少6466.7(97％氘掺入)、至少6600(99％氘掺入)、或至少6633.3(99.5％氘掺入)。

优选实施例的描述

TNO155是试验药剂，其是口服生物可利用的SHP2活性的小分子抑制剂。SHP2转导激活的RTK的下游信号传导。在临床前模型中，肿瘤对RTK的依赖预示着对SHP2的依赖。

在一个实施例中是治疗癌症的方法，所述方法包括将药物组合物与第二治疗剂组合施用于有需要的受试者，所述药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，癌症选自：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中，癌症处于晚期或转移性的阶段。

在另一个实施例中，受试者是患有以下的患者：晚期NSCLC，其带有激活型EGFR突变，和在用标准照护(SOC)EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)情况下具有进展(或不具有可获得的SOC EGFR TKI)，以及在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或晚期NSCLC，其带有KRASG12突变，在用SOC情况下具有进展；或晚期HNSCC，其在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或晚期食道SCC，其在用含铂化学疗法情况下具有进展；或晚期CRC，其缺乏激活型KRAS(除了KRAS G12C以外)、NRAS、或BRAF突变，和在用氟嘧啶、奥沙利铂、和伊立替康情况下具有进展；或晚期NRAS/BRAF WT皮肤黑素瘤，其在用SOC情况下具有进展；或晚期GIST，其在用SOC情况下具有进展。

在另一个实施例中，受试者是患有以下癌症中的一种或多种的患者：

a.晚期NSCLC，其在用奥希替尼或那扎替尼情况下进展后，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失、L858R)。

b.晚期NSCLC，其在用第1和/或第2代EGFR TKI(例如埃罗替尼、吉非替尼、阿法替尼)情况下进展后，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，并且在用这些药剂情况下进展后，已经显示出缺乏T790突变。

c.晚期NSCLC，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，在用作为最近现有疗法的奥希替尼情况下进展(持续奥希替尼治疗，直到开始研究治疗之前2周(并且因此在筛选期期间，继续奥希替尼治疗))或最近中断奥希替尼的此类患者。

在另一个实施例中，癌症是EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)。

在另一个实施例中，受试者是患有以下癌症中的一种或多种的患者：

a.晚期NSCLC，其在用奥希替尼或那扎替尼情况下进展后，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失、L858R)。

b.晚期NSCLC，其在用第1和/或第2代EGFR TKI(例如埃罗替尼、吉非替尼、阿法替尼)情况下进展后，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，并且在用这些药剂情况下进展后，已经显示出缺乏T790突变。

c.晚期NSCLC，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，在用作为最近现有疗法的奥希替尼情况下进展(持续奥希替尼治疗，直到开始研究治疗之前2周(并且因此在筛选期期间，继续奥希替尼治疗))或最近中断奥希替尼的此类患者。

在另一个实施例中，癌症是头颈部鳞状细胞癌。

在另一个实施例中，癌症是KRAS突变型非小细胞肺癌。

在另一个实施例中，癌症是头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)。

在另一个实施例中，癌症是黑素瘤。

在另一个实施例中，癌症是胃肠道间质瘤(GIST)。

在另一个实施例中，癌症是结直肠癌(CRC)。

在另一个实施例中，癌症是髓样甲状腺癌。

在另一个实施例中，癌症是ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和第二治疗剂同时地、分开地或在一段时间内施用。

在另一个实施例中，施用于有需要的受试者的(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和第二治疗剂的量对治疗癌症是有效的。

在另一个实施例中，第二治疗剂是EGFR抑制剂。

在另一个实施例中，第二治疗剂是奥希替尼或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，按范围从每天约40mg至约80mg的剂量，伴随或不伴随食物，口服施用奥希替尼。

在另一个实施例中，按80mg/天的剂量，伴随或不伴随食物，口服施用奥希替尼。

在另一个实施例中，所述EGFR抑制剂是(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺、或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，按范围从约1.5mg/天至约100mg/天，例如从约1.5mg/天至约60mg/天或从约20mg/天至约60mg/天的剂量，口服施用(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天、或70mg/天、或80mg/天、或90mg/天、或100mg/天的剂量口服施用。

在另一个实施例中，按2周停药随后是1周停药的周期，施用剂量(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺。因此，在另一个实施例中，按2周给药随后是1周停药的21天周期，以每天20mg、30mg、40mg、60mg、80mg或100mg的剂量，口服施用(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺。

在另一个实施例中，按范围从约75mg/天至350mg/天的剂量，口服施用(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺。

在另一个实施例中，按约75mg/天、或100mg/天、或150mg/天、或200mg/天、或250mg/天、或300mg/天、或350mg/天的剂量，口服施用(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺。

在另一个实施例中，按150mg/天，口服施用(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺。

在另一个实施例中是治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺，其以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天、或70mg/天、或80mg/天、或90mg/天、或100mg/天的剂量口服施用。

在另一个实施例中，按2周给药随后是1周停药的21天周期，以每天20mg、30、40或60mg的剂量，口服施用(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺。

在另一个实施例中，癌症选自：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中，癌症是EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)。

在另一个实施例中，癌症是头颈部鳞状细胞癌。

在另一个实施例中，癌症是KRAS突变型非小细胞肺癌。

在另一个实施例中，癌症是头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)。

在另一个实施例中，癌症是黑素瘤。

在另一个实施例中，癌症是胃肠道间质瘤(GIST)。

在另一个实施例中，癌症是结直肠癌(CRC)。

在另一个实施例中，癌症是髓样甲状腺癌。

在另一个实施例中，癌症是ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和第二治疗剂同时地、分开地或在一段时间内施用。

在另一个实施例中，第二治疗剂是EGFR抑制剂。

在另一个实施例中，第二治疗剂是奥希替尼或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，所述EGFR抑制剂是(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺、或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，按约75mg/天、或100mg/天、或150mg/天、或200mg/天、或250mg/天、或300mg/天、或350mg/天的剂量，口服施用(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺。

在另一个实施例中，按150mg/天，口服施用(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺。

在一个实施例中，关于本发明的药物组合，是包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和7(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐分开地、同时地或依序地(以任何顺序)施用。

在另一个实施例中，药物组合用于口服施用。

在另一个实施例中，(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺是呈口服剂型(剂量强度1.5mg、5mg、10mg和50mg的硬胶囊)。

在另一个实施例中，(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺是呈口服剂型(剂量强度25mg或50mg的硬胶囊)。

在另一个实施例中，是药物组合物，所述药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合以及至少一种药学上可接受的载剂。

在另一个实施例中，是(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合，用于在以下的治疗中使用：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中，是(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合，用于在EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)的治疗中使用。

在另一个实施例中，是(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合的用途，用于制造用于治疗选自以下的癌症的药物：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

在另一个实施例中，是治疗癌症的方法，所述癌症选自：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC；所述用途包括向有需要的患者施用(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合，或包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合以及至少一种药学上可接受的载剂的药物组合物。

在另一个实施例中，是治疗包括选自以下的癌症的方法：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC；向有需要的患者施用(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合，或包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺或其药学上可接受的盐的药物组合以及至少一种药学上可接受的载剂的药物组合物。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天的剂量口服施用。

在另一个实施例中，按约75mg/天、或100mg/天、或150mg/天、或200mg/天、或250mg/天、或300mg/天、或350mg/天的剂量，口服施用(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺。

在另一个实施例中，按约150mg/天的剂量，连续口服施用(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺。

药理学及效用

非小细胞肺癌-在2012年，在世界范围内，有大约180万人被诊断患有肺癌，并且估计有160万人死于这种疾病。非小细胞肺癌在肺癌中占大约85％，其中腺癌和鳞状细胞癌是最常见的亚型。针对在成药驱动癌基因(例如EGFR、ALK、或ROS)中不带有遗传改变的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的标准护理治疗包括并行或依序施用化学疗法和免疫疗法。虽然这些治疗提供了临床益处，但是大多数患者在一年内经历了疾病进展，并且患有晚期NSCLC的患者的预后仍然很差。使用免疫检查点抑制剂的用于NSCLC的免疫疗法已经表明是有前景的，其中一些NSCLC患者经历了持续数年的持久疾病控制。然而，此类长期非进展是不常见的，并且使用检查点抑制剂进行免疫疗法情况下，组合治疗策略可以增加响应并且实现持久缓解的患者的比例，对于这种策略是迫切需要的。在大约30％的肺腺癌中，KRAS癌基因中发生激活型突变，并且在一些研究中，这已经与差的结果相关。没有批准直接靶向突变KRAS的药物，所以用于晚期KRAS突变型NSCLC的标准护理也是上述化学疗法和免疫疗法。

全球每年诊断出大约232,000个新的皮肤黑素瘤的病例，其中发病率已经稳定增加几十年。在黑素瘤的发展和进展中，MAPK途径起到主要作用。BRAF突变发生在40％-60％的黑素瘤患者中，并且NRAS突变发生在15％-20％的黑素瘤患者中。这些突变组成性地激活MAPK途径中的BRAF和下游信号转导，发出癌细胞增殖和存活的信号。

在黑素瘤中，在MAPK途径中，突变频率最高的第三位基因是NF1，它在黑素瘤中以约14％突变，其中预测超过一半的其这些突变导致功能缺失。NF1突变的黑素瘤占约一半的BRAF和NRAS野生型黑素瘤。NF1突变的黑素瘤患者倾向于具有更高的突变负荷和更差的预后。很多这些患者确实响应于PD-1抑制剂，但是对于使用PD-1抑制剂治疗是难治的或在PD-1抑制剂治疗后已经复发的那些患者而言，仍然存在未满足的医学需求。

TNO155是野生型SHP2的同类首个变构抑制剂。SHP2是由两个N末端SH2结构域、一个经典的PTP结构域和一个C末端尾部组成的、泛表达的非受体蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)。磷酸酶活性被结合到PTP结构域(封闭构象)的两个SHP2结构域自身抑制。当受体酪氨酸激酶(RTK)激活时，SHP2被募集到质膜上，在此处与激活的RTK和许多衔接蛋白结合，通过激活RAS/MAPK途径来传递信号传导。TNO155结合SHP2的非活性或“封闭”构象，从而阻止其开口进入活性构象。这就阻止了从激活的RTK到下游RAS/MAPK途径的信号传导的转导。

TNO155已在多种RTK依赖性人癌细胞系和体内异种移植物中显示出功效。在例如以下的RTK依赖性人癌症模型中，TNO155的体外和体内临床前评估证明对SHP2磷酸酶的选择性和有效的抑制：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。可以通过评估MAPK信号传导途径中的生物标志物(如磷酸化ERK1/2(pERK)水平的降低和双特异性磷酸酶6(DUSP6)mRNA转录物的下调)测量SHP2抑制。在KYSE-520(食管鳞状细胞癌)和DETROIT-562(咽部鳞状细胞癌)癌细胞系中，体外pERK IC50分别为8nM(3.4ng/mL)和35nM(14.8ng/mL)，并且抗增殖IC50分别为100nM(42.2ng/mL)和470nM(198.3ng/mL)。TNO155的抗增殖效应揭示其在依赖RTK信号传导的癌细胞系中最为有效。在体内，通过口服施用TNO155(20mg/kg)抑制SHP2达到了DUSP6 mRNA转录物在EGFR依赖性DETROIT-562癌细胞系中降低大约95％并且当以每日两次方案给药时消退47％。剂量分级研究连同肿瘤DUSP6生物标志物的调节表明当至少80％的给药间隔获得50％PD抑制时达到最大功效。

表皮生长因子受体(EGFR)是携带激活EGFR突变的NSCLC中已确认的关键治疗靶标。用第1代(例如厄洛替尼(erlotinib)，吉非替尼(gefitinib))和第2代(例如阿法替尼(afatinib)，达克替尼(dacomitinib))EGFR抑制剂在EGFR突变体晚期/不可切除性NSCLC群体中进行了大量试验，并且始终证明在这一群体中，EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的功效优于化学疗法。已经表明，对第1代EGFR TKI的抗性是通过EGFR“看门人(gatekeeper)”T790M突变(所述突变削弱TKI的结合)的发展以及通过激活包括MET和ERBB2扩增在内的其他RTK途径而产生的。使用抑制EGFR激活和看门人突变的第3代不可逆EGFR抑制剂(例如奥希替尼(osimertinib)，诺司替尼(rociletinib))的临床试验已经证明，在EGFR T790M突变型NSCLC中的功效，从而突出了它们对EGFR信号传导的持续依赖性。对第3代抑制剂已经产生抗性的癌症的新数据表明这些癌症继续针对激活的RTK信号传导具有选择性，并且具有已描述的EGFR(C797S)中的抗性突变以及RTK扩增(MET、ERBB2、FGFR1)。对于已经对第1/2代和第3代EGFR TKI产生抗性的癌症患者，治疗选择有限。由于SHP2转导EGFR信号传导，并且临床前模型已经证明RTK依赖和SHP2依赖之间有很强的相关性，因此无论抗性是由EGFR的信号传导还是其他RTK的信号传导驱动，TNO155都有望在这些癌症中提供临床益处。

90％以上的头颈部癌症以EGFR的过表达或扩增为特征；其他RTK(特别是FGFR及其配体)的扩增/过表达也很常见。还证明了西妥昔单抗(cetuximab)在晚期HNSCC中抑制EGFR的临床益处，但疾病控制并不持久。HNSCC中的适度EGFR抑制功效可能与通过其他RTK的补偿性信号传导(其可以用TNO155治疗进行SHP2抑制来消除)有关。此外，临床前测试将头颈部癌细胞鉴定为对SHP2抑制具有最高频率敏感性的谱系。

患有转移性或不可切除性RTK驱动的癌症(如间变性淋巴瘤激酶(ALK)重排的NSCLC或干细胞因子受体(KIT)突变体胃肠道间质瘤(GIST))的患者受益于直接靶向这些RTK的分子，但总是会产生对这些药剂的抗性。抗性机制经常包括靶向RTK的药物抗性突变和/或旁路RTK途径的激活；在大多数情况下，另外的治疗选择是有限的。用TNO155靶向SHP2是此类RTK依赖性癌症中的合理方法。

那扎替尼是靶向型共价表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，其选择性抑制EGFR的一个或多个激活(L858R，外显子19缺失(ex19del))型突变和T790M抗性突变，同时保留野生型(WT)EGFR。已经在7个临床试验中，研究了那扎替尼。在患有EGFR突变的NSCLC的患者中的那扎替尼的首次人体研究中，确定了单剂那扎替尼的推荐II期剂量是150mg QD(在从75mg至350mg QD 7个剂量水平中测试-并没有确定最大耐受剂量，在所有剂量下，都观察到抗肿瘤功效)。在患有晚期EGFR突变的NSCLC的预治疗的和未进行治疗的患者中，已经显示出那扎替尼的有前景的抗肿瘤活性。

使用EGFR抑制剂(例如埃罗替尼、吉非替尼、奥希替尼)，患有EGFR突变型NSCLC的患者具有高疾病控制率，但是总是会发展抗性。抗性机制是异质的，但是常常导致突变EGFR信号传导的恢复和/或除了EGFR以外的RTK(例如MET)的或其配体的扩增或过表达。由于SHP2抑制损害经由多种RTK的信号传导，TNO155与那扎替尼的组合具有阻断多种异质抗性机制的潜力(这些机制可以在肿瘤内的不同克隆中出现)，同时维持对启动存在于每个肿瘤细胞中的驱动致癌EGFR突变的抑制。因为那扎替尼与降低的左室射血分数的不良事件不相关，所以选择那扎替尼来与TNO155组合。针对奥希替尼(另一种第3代EGFR TKI(

处方信息))已经描述了此类事件。

以下实例中展现的临床前数据提供了SHP2抑制剂(TNO155)和EGFR抑制剂(那扎替尼)的组合发挥了显著组合益处的体外和体内证据。

因此，预期本发明的组合疗法为患有例如以下的NSCLC的患者带来特别的益处，例如伴随耐受性的组合功效，例如伴随减少的副作用(例如减小的皮肤毒性和/或心肌病)：NSCLC(例如晚期NSCLC)，其带有激活型EGFR突变，和在用标准照护(SOC)EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)情况下具有进展(或不具有可获得的SOC EGFR TKI)，以及在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或NSCLC(例如晚期NSCLC)，其带有KRAS G12突变，在用SOC情况下具有进展；或HNSCC，其在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或

或为患有以下的患者带来特别的益处：

a.NSCLC(例如晚期NSCLC)，其在用奥希替尼或那扎替尼情况下进展后，带有EGFRTKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失、L858R)。

b.NSCLC(例如晚期NSCLC)，其在用第1和/或第2代EGFR TKI(例如埃罗替尼、吉非替尼、阿法替尼)情况下进展后，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，并且在用这些药剂情况下进展后，已经显示出缺乏T790突变。

c.NSCLC(例如晚期NSCLC)，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，在用作为最近现有疗法的奥希替尼情况下进展(持续奥希替尼治疗，直到开始研究治疗之前2周(并且因此在筛选期期间，继续奥希替尼治疗))或对于最近中断奥希替尼的患者。

药物组合物

在另一个方面，本发明提供了药学上可接受的组合物，所述组合物包含治疗有效量的TNO155和那扎替尼，其与一种或多种药学上可接受的载剂(添加剂)和/或稀释剂配制在一起。如下面详细描述的，本发明的药物组合物可特别配制用于固体或液体形式施用(包括适合口服施用的那些，例如浸液(水性或非水性溶液或悬浮液)、片剂(例如，针对口腔、舌下和全身吸收的那些)、大丸剂、粉剂、颗粒剂、糊剂(应用于舌))。

如本文所用的短语“治疗有效量”是指包含本发明化合物的化合物、材料或组合物的量，其对于在动物中的至少一个细胞亚群中以适用于任何医学治疗的合理的受益/风险比产生一些所期望的治疗效果是有效的。

本文使用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断的范围，适合用于与人和动物的组织接触而不产生过度毒性、刺激、过敏反应、或其他问题或并发症，同时具有相称的合理受益/风险比的那些化合物、材料、组合物、和/或剂型。

如本文所用的短语“药学上可接受的载剂”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如润滑剂、滑石镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌或硬脂酸)或溶剂包封材料，参与将主题化合物从一个器官或身体的一部分运送或运输到另一个器官或身体的一部分。在与配制品的其他成分相容并且对患者无害的意义上，每种载剂必须是“可接受的”。可用作药学上可接受的载剂的材料的一些实例包括：(1)糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；(4)粉状黄芪胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；(9)油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油、大豆油等；(10)二醇类，如丙二醇；(11)多元醇类，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)pH缓冲溶液；(21)聚酯，聚碳酸酯和/或聚酸酐；以及(22)药物配制品中使用的其他无毒相容物质。

如上文所述，本发明化合物的某些实施例可含有碱性官能团，例如氨基或烷基氨基，并且由此能够与药学上可接受的酸形成药学上可接受的盐。在这方面，术语“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的相对无毒的无机和有机酸加成盐。这些盐可以在施用媒介物或剂型制造过程中原位制备，或者通过使纯化的游离碱形式的本发明化合物与合适的有机或无机酸分别反应，并在随后的纯化期间分离由此形成的盐来制备。代表性盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐(napthylate)、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖醛酸盐和月桂基磺酸盐等。(参见例如Berge等人(1977)“Pharmaceutical Salts[药用盐]”,J.Pharm.Sci.[药物科学杂志]66:1-19)。

主题化合物的药学上可接受的盐包括化合物的常规的无毒盐或季铵盐，例如来自无毒的有机酸或无机酸。例如，此类常规无毒盐包括衍生自无机酸的那些，该无机酸例如为盐酸、氢溴酸、硫酸、胺磺酸、磷酸、硝酸等；以及从有机酸制备的盐，该有机酸例如为乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、异硫磺酸等。例如，TNO155的药学上可接受的盐是琥珀酸盐。例如，那扎替尼的药学上可接受的盐是甲磺酸盐。

在其他情况下，本发明的化合物可以含有一个或多个酸性官能团，并且因此能够与药学上可接受的碱形成药学上可接受的盐。在这些例子中，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的相对无毒的无机和有机碱加成盐。这些盐也可以在施用媒介物或剂型制造过程中原位制备，或者通过使纯化的游离酸形式的化合物与合适的碱(例如，药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)与氨、或与药学上可接受的有机伯、仲或叔胺分别反应来制备。代表性的碱或碱土金属盐包括锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铝盐等。可用于形成碱加成盐的代表性有机胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。(参见例如Berge等人，同上)

在组合物中还可以存在润湿剂、乳化剂和润滑剂，如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。

药学上可接受的抗氧化剂的实例包括：(1)水溶性抗氧化剂，如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等；(2)油溶性抗氧化剂，如抗坏血酸棕榈酸酯、丁羟茴醚(BHA)、丁羟甲苯(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和(3)金属螯合剂，如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。

本发明的配制品包括适合于口服、鼻、局部(包括口腔和舌下)、直肠、阴道和/或肠胃外施用的那些。配制品可以方便地以单位剂型存在并且可以通过药学领域熟知的任何方法制备。可以与载剂材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将取决于所治疗的宿主和特定的施用方式而变化。可以与载剂材料组合以产生单一剂型的活性成分的量通常为产生治疗效果的化合物的量。通常，在百分之百的范围内，量的范围为从约0.1％至约99％的活性成分，优选从约5％至约70％，最优选从约10％至约30％。

在某些实施例中，本发明的配制品包含选自由以下组成的组的赋形剂：环糊精、纤维素、脂质体、胶束形成剂(例如胆汁酸)和聚合物载剂(例如聚酯和聚酸酐)；和本发明的化合物。在某些实施例中，前述配制品使得本发明化合物在口服方面是生物可利用的。

制备这些配制品或组合物的方法包括将本发明的化合物与载剂和任选的一种或多种辅助成分结合的步骤。通常，通过将本发明的化合物与液体载剂或细碎固体载剂或两者均匀且紧密地结合，并且然后如果需要，使产物成形来制备配制品。

适用于口服施用的本发明的配制品可以呈胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)、粉剂、颗粒剂的形式，或作为在水性或非水性液体中的溶液、悬浮液或固体分散体，或作为水包油或油包水液体乳剂，或作为酏剂或糖浆，或作为软锭剂(使用惰性基质，例如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)，和/或作为漱口水等等，每一形式含有预定量的本发明的化合物作为活性成分。本发明的化合物还能以大丸剂、药糖剂或糊剂形式施用。

在本发明用于口服施用的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉剂、颗粒剂、含片(trouches)等)中，将活性成分与以下混合：一种或多种药学上可接受的载剂，如柠檬酸钠或磷酸二钙，和/或以下任何一种：(1)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合剂，例如像羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；(3)保湿剂，如甘油；(4)崩解剂，如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，如石蜡；(6)吸收促进剂，如季铵化合物和表面活性剂，如泊洛沙姆和十二烷基硫酸钠；(7)润湿剂，例如像鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯和非离子表面活性剂；(8)吸收剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠、硬脂酸锌、硬脂酸钠、硬脂酸及其混合物；(10)着色剂；和(11)控释剂，如交聚维酮或乙基纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，药物组合物还可以包含缓冲剂。还可以使用此类赋形剂，如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等，将相似类型的固体组合物用作软壳和硬壳明胶胶囊中的填料。

片剂可以通过压缩或模制(任选地与一种或多种辅助成分一起)来制备。可以使用粘合剂(例如，明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，羟基乙酸淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备压缩片剂。模制片剂可以通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物来制备。

片剂和本发明的药物组合物的其他固体剂型(如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂)可任选地进行刻痕或制备有包衣和外壳，例如肠溶包衣和药物配制领域熟知的其他包衣。也可以使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素将它们配制成使其中的活性成分缓慢或受控释放以提供所需的释放曲线、其他聚合物基质、脂质体和/或微球。可以将它们配制用于快速释放，例如冷冻干燥。它们可以例如通过细菌截留过滤器滤过，或通过并入呈无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，这些无菌固体组合物可以在使用前立即溶解于无菌水或一些其他无菌可注射介质中。这些组合物也可以任选地包含遮光剂并且可以是如下组合物，该组合物在胃肠道的某一部分中，任选地以一种延迟的方式仅或者优先释放一种或多种活性成分。可利用的嵌入式组合物的实例包括聚合物质以及蜡。活性成分还可以是微囊化形式，如果适当的话，可包含一种或多种上述赋形剂。

用于口服施用本发明的化合物的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性成分之外，液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂(例如像水或其他溶剂)、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇和脱水山梨醇脂肪酸酯，及其混合物。

除了惰性稀释剂之外，口服组合物还可包括辅助剂，例如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂以及防腐剂。

除了含有活性化合物外，悬浮液还可以含有悬浮剂如，例如乙氧化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝(aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂-琼脂和黄芪胶，及其混合物。

可以在本发明的药物组合物中使用的合适的水性和非水性载剂的实例包括水、乙醇、多元醇(如，甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其合适的混合物、植物油(如橄榄油)和可注射的有机酯(如油酸乙酯)。适当流动性可以例如通过以下方式来维持：通过使用包衣材料(如卵磷脂)，在分散体的情况下通过维持所需粒度，以及通过使用表面活性剂。

这些组合物也可以含有辅助剂如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可以通过包括各种抗细菌剂和抗真菌剂(例如，对羟苯甲酸酯、三氯叔丁醇、山梨酸苯酚等)确保阻止微生物对主题化合物起作用。还令人希望的是在组合物中包括等渗剂，如糖、氯化钠等。

当将本发明的化合物作为药物向人和动物施用时，它们可以本身或作为药物组合物给予，该药物组合物含有例如与药学上可接受的载剂组合的0.1％至99％(更优选10％至30％)的活性成分。

通过本领域技术人员已知的常规方法将本发明的化合物(其能以合适的水合形式使用)和/或本发明的药物组合物配制成药学上可接受的剂型。

可以改变本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平，以便获得一定量的活性成分，该活性成分的量有效地实现对于特定的患者、组合物和施用方式的所期望的治疗应答，而对患者没有毒性。

选择的剂量水平将取决于各种因素，包括所使用的本发明的具体化合物或其酯、盐或酰胺的活性，施用途径，施用时间，所采用的具体化合物的排泄率或代谢率，吸收的速度和程度，治疗的持续时间，与所采用的具体化合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料，正被治疗的患者的年龄、性别、体重、病症、一般健康状况和先前病史，以及在医学领域中熟知的类似因素。

具有本领域普通技术的医师或兽医可以容易地确定并开出所需的药物组合物的有效量。例如，医生或兽医能以低于实现所期望的治疗效果所需的水平开始给药于药物组合物中使用的本发明的化合物，并逐渐增加剂量直至达到所期望的效果。

通常，本发明的组合的合适日剂量将是每种化合物有效产生治疗效果的最低剂量的量。这样的有效剂量通常将取决于上述因素。

在另一个方面，本发明提供了药学上可接受的组合物，所述药学上可接受的组合物包含治疗有效量的一种或多种上述主题化合物，其与一种或多种药学上可接受的载剂(添加剂)和/或稀释剂配制在一起。

实例

TNO155和那扎替尼

(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺(TNO155)分别是根据WO 2015/107495中的实例69合成的。(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺(那扎替尼)是根据WO2013/184757的实例5合成的。

本文所述的TNO155和那扎替尼的效用可以通过以下实例中的测试来证明。

实例1

在EGFR突变型NSCLC细胞系中，TNO155和那扎替尼的组合协同作用

当在2012年建立CCLE时，使用基于PCR的检测技术(IDEXX BioAnalytics公司)，通过单核苷酸多态性分析验证源自CCLE(癌细胞系百科全书)的人癌症细胞系，并且测试其支原体感染。使用的所有细胞系均直接从CCLE收集原液解冻。在补充有10％ FBS(VWR)的RPMI培养基(赛默飞世尔科技公司(ThermoFisher Scientific)(除了HT-29(McCoy’s 5A)、RKO(MEMα)、MDST8(DMEM)、A-427(MEMα)和MIA PaCA-2(DMEM)以外)中培养所有细胞系。在解冻的15次传代内使用细胞系，并且将这些细胞培养少于6个月。

对于组合剂量矩阵测定，按80μL培养基/孔，将2000至3000个细胞接种到96孔板中。在第二天，随后添加两种组合剂的连续稀释，各自按6X的最终所示浓度，在20μL培养基中。3天后，通过CellTiter-Glo测定(普洛麦格公司(Promega)#G7573)测量细胞活力。确定了化合物处理的细胞的抑制(相对于DMSO处理的对照)的百分比的平均值和标准差(n＝3)，以及两种化合物之间的协同作用评分。认为大于2的协同作用评分具有协同效应而不是累加效应。

对于免疫印迹：将在2mL生长培养基中的细胞(200,000至750,000个)接种在6孔板(康宁公司(Corning)，#3506)。在24小时后，按指示的浓度和持续时间，用化合物或生长因子处理细胞。在补充有1mM EDTA和Halt蛋白酶以及磷酸酶抑制剂混合物(赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific)#1861281)的RIPA缓冲液(波士顿生物产品公司(BostonBioproducts)#BP-115)中，在冰上裂解细胞。在4℃下，按14,000rpm，将裂解液离心15分钟，并且使用BCA蛋白测定(赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific))确定蛋白浓度。在NuPAGE 4％-12％ Bis-Tris凝胶(赛默飞世尔科技公司(Thermo FisherScientific)#WG1402BX10)中，通过电泳分离等量的蛋白，并且转移到硝酸纤维素滤膜(伯乐公司(Bio-Rad)，#1704159)上，用于使用指示的第一抗体进行免疫印迹。使用与AlexaFluor 700缀合的山羊抗兔IgG第二抗体和与IRDye 800CW缀合的山羊抗小鼠IgG第二抗体将结合的第一抗体可视化，并且用Odyssey红外成像系统扫描(Li-Cor)。使用了以下第一抗体：磷酸基-ERK(细胞信号传导技术公司(Cell Signaling Technology)#4370)、磷酸基-AKT(细胞信号传导技术公司#4060)、微管蛋白(细胞信号传导技术公司#3873)、KRAS(Proteintech公司#12063-1-AP)、磷酸基-MEK(细胞信号传导技术公司#9154)、磷酸基-RSK3(细胞信号传导技术公司#9348)、NRAS(Proteintech公司#10724-1-AP)、HRAS(Proteintech公司#18925-1-AP)、磷酸基-RB(细胞信号传导技术公司#8516)、细胞周期蛋白D1(细胞信号传导技术公司#2978)、磷酸基-SHP2(Abcam#ab62322)、肌动蛋白(细胞信号传导技术公司#3700)、磷酸基-CRAF(细胞信号传导技术公司#9427)和磷酸基-CSF1R(细胞信号传导技术公司#3155)。

进行统计分析并且使用GraphPad Prism 8软件产生曲线拟合和IC₅₀值。使用非配对学生t检验、配对学生t检验、或Mann-Whitney检验，确定统计显著性。将显著性设置在p＝0.05。

用3倍连续稀释的来自3μM的那扎替尼和来自10μM的TNO155的8x8组合矩阵处理PC14和NCI-H1975细胞。在3天(PC14)或6天(NCI-H1975)后，使用Cell

测定测量细胞增殖，并且将每个剂量组合的发光信号标准化为DMSO(媒介物对照)组的发光信号。将生长抑制的百分比以数字地显示为8x8剂量格。PC14细胞的组合(Loewe过剩)协同作用评分是5.12，并且NCI-H1975细胞的组合协同作用评分是4.92。

在EGFR突变型NSCLC细胞系中，用TNO155和那扎替尼观察到组合协同作用，其中在测试的细胞系中，协同作用评分范围是从2.03至5.12(图1)。在PC14细胞中，与单剂那扎替尼或TNO155相比，可以将组合协同作用归因于持久的pERK抑制和凋亡标记(例如切割的聚(ADP核糖)聚合酶(PARP))的更高诱导。

尽管在治疗EGFR突变型肺癌中，EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)存在临床功效，并且从第一代至第三代EGFR抑制剂存在显著改善，例如保留WT EGFR，但是在大多数患者中不可避免地发生了获得性抗性。对EGFR TKI的抗性的一个常见机制是获得EGFR中的看门人突变，例如针对第一代TKI的T790M，和针对第三代TKI的C797S，它们妨碍了抑制剂结合。由于SHP2介导了EGFR下游的RAS激活，所以SHP2抑制剂的功效并未受EGFR T790M和C797S突变影响，甚至这两种突变共同存在于同一DNA链上(顺式)，如在用奥希替尼治疗情况下复发的一些EGFR T790M患者中所见。在EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系中，TNO155是广泛有效的。在测试的八个细胞系中，有六个细胞系对那扎替尼/EGF816敏感，并且三个细胞系中，TNO155具有活性，其中IC₅₀值低于1.5μM(NCI-H3255、HCC827和PC9)(参见表1)：

表1

在组合剂量矩阵测定中，TNO155与那扎替尼协同作用抑制EGFR突变型细胞增殖。有趣的是，在六个那扎替尼敏感的细胞系(包括对单独的TNO155不敏感的两个细胞系(PC14和NCI-H1975)中的五个细胞系中，TNO155和那扎替尼表现出强协同作用(协同作用评分>2)。跨越宽浓度范围的那扎替尼和处于低浓度的TNO155(例如0.124μM)，观察到在PC14和NCI-H1975细胞中，存在那扎替尼和TNO155的协同作用，其中在全部两个细胞系中，TNO155缺乏单剂活性(参见图1；Loewe过剩矩阵格)，显示出TNO155的贡献来自用EGFR TKI进行治疗后可以反馈激活的替代RTK信号传导的抑制。在PC14细胞中，在初始抑制后，用0.1μM那扎替尼进行24h处理后，观察到p-ERK水平的反弹，这可能不被更高剂量的那扎替尼(0.3μM)阻断(参见图2)。相似地，在4h时，TNO155有效降低了p-ERK水平，也发生了24h时的反弹，而TNO155和那扎替尼的组合实现了ERK的持续抑制。如提高水平的切割的PARP(c-PARP)和BIM所证实，在24h时，与任一种单剂相比，组合也诱导出更强的凋亡应答(参见图2)。

此外，按小鼠临床试验形式，在一组EGFR突变型肺癌患者来源的肿瘤模型中，评估了TNO155和奥希替尼(一种FDA批准的第三代EGFR TKI)的组合，并且发现在三个EGFR^(L858R)模型(29666HXXTM、29667HXXTM和29665HXXTM)中，组合是有益的。由于在小鼠中，TNO155的半衰期短，并且它的最大耐受剂量是20mg/千克体重(mpk)，所以在这些模型中(参见图3)，一天两次(BID)给予TNO155。在小鼠临床试验组合中，出于使用某些组合的耐受性的原因，将TNO155的剂量减少至10mpk。在29666HXXTM中，奥希替尼(10mpk，每天一次)仅显示了短暂的功效，同时TNO155(10mpk，BID)有效地减慢了肿瘤生长。组合实现了近乎完全的肿瘤消退。在29667HXXTM和29665HXXTM中，奥希替尼分别具有适度的和强的抗肿瘤活性，同时TNO155具有最小活性(如体外在一些EGFR突变型细胞系中所见)，但是明显增强了奥希替尼的功效。这些数据表明，TNO155可以克服对EGFR TKI的获得性抗性，并且也增强了它们的功效。

实例2

选择在基线时并且在本研究的疗法期间再次具有适合于活检的疾病的患者。患者具有以下任一项：晚期NSCLC，其带有激活型EGFR突变，和在用标准照护(SOC)EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)情况下具有进展(或不具有可获得的SOC EGFR TKI)，以及在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或晚期NSCLC，其带有KRAS G12突变，在用SOC情况下具有进展；或晚期HNSCC，其在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或晚期食道SCC，其在用含铂化学疗法情况下具有进展；或晚期CRC，其缺乏激活型KRAS(除了KRAS G12C以外)、NRAS、或BRAF突变，和在用氟嘧啶、奥沙利铂、和伊立替康情况下具有进展；或晚期NRAS/BRAF WT皮肤黑素瘤，其在用SOC情况下具有进展；或晚期GIST，其在用SOC情况下具有进展。

另外，包括患有以下的患者：

a.晚期NSCLC，其在用奥希替尼或那扎替尼情况下进展后，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失、L858R)。

b.晚期NSCLC，其在用第1和/或第2代EGFR TKI(例如埃罗替尼、吉非替尼、阿法替尼)情况下进展后，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，并且在用这些药剂情况下进展后，已经显示出缺乏T790突变。

c.晚期NSCLC，带有EGFR TKI敏化EGFR突变(例如外显子19缺失，L858R)，在用作为最近现有疗法的奥希替尼情况下进展(持续奥希替尼治疗，直到开始研究治疗之前2周(并且因此在筛选期期间，继续奥希替尼治疗))。对于最近中断奥希替尼治疗的患者而言，可能发生例外。

在此研究中，那扎替尼的起始剂量150mg QD，并且连续给药。在CEGF816X2101(那扎替尼的首次人体研究)中，研究的那扎替尼的剂量是从每天75mg至每天350mg。未确定最大耐受剂量，并且在所有剂量下，都观察到抗肿瘤功效；基于总体安全性、耐受性、和功效数据，选择每天150mg作为推荐的剂量，用于研究CEGF816X2101的II期部分。因此，150mg QD的那扎替尼的选择剂量是活性剂量，其小于患者中已经耐受的最高剂量的一半，由此允许足够的治疗窗口用于与TNO155组合。那扎替尼主要通过CYP3A4进行代谢。TNO155不是CYP3A4的诱导剂也不是其抑制剂，并且因此预计TNO155对那扎替尼血液水平没有影响。与那扎替尼组合的TNO155的起始剂量是20mg QD，2周给药/1周停药。在患者中，已经测试了TNO15560mg QD，2周给药/1周停药的方案，和40mg QD，3周给药/1周停药的方案，并且这些方案是耐受的。因此，20mg QD的起始剂量，2周给药/1周停药提供了足够的耐受性裕度，用于与那扎替尼150mg QD组合。

应理解，本文所述的实例和实施例仅用于举例说明目的，其各种修饰或改变对于本领域技术人员将是明了的，并包括在本申请的精神和范围内和所附权利要求书的范围内。

Claims (28)

1.一种治疗癌症的方法，所述方法包括将药物组合物与第二治疗剂组合施用于有需要的受试者，所述药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症选自：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和所述第二治疗剂同时地、分开地或在一段时间内施用。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中施用于所述有需要的受试者的(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐的量对治疗所述癌症是有效的。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中施用于所述有需要的受试者的(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和第二治疗剂的量对治疗所述癌症是有效的。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述第二治疗剂是EGFR抑制剂。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述EGFR抑制剂是(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺、或其药学上可接受的盐。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺以范围从约1.5mg/天至约100mg/天(例如从约1.5mg/天至约60mg/天、和从约20mg/天至约60mg/天)的剂量口服施用。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天、或80mg/天或100mg/天的剂量口服施用。

10.根据权利要求9所述的方法，其中将(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺以范围从约75mg/天至约350mg/天的剂量口服施用。

11.根据权利要求10所述的方法，其中将(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺以约75mg/天、或100mg/天、或150mg/天、或200mg/天、或250mg/天、或300mg/天、或350mg/天的大约剂量口服施用。

12.根据权利要求11所述的方法，其中将(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺以100mg/天或150mg/天口服施用。

13.根据权利要求11所述的方法，其中将(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺以150mg/天口服施用。

14.一种治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺，其以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天、或80mg/天或100mg/天的剂量口服施用。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述每天剂量按用药2周、随后停药1周的21天周期进行。

16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述癌症选自：EGFR突变型非小细胞肺癌(NSCLC)；KRAS突变型非小细胞肺癌；头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)；黑素瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；结直肠癌(CRC)；髓样甲状腺癌；以及ALK重排的NSCLC。

17.根据权利要求14所述的方法，所述方法进一步包括第二治疗剂。

18.根据权利要求17所述的方法，其中将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺或其药学上可接受的盐和所述第二治疗剂同时地、分开地或在一段时间内施用。

19.根据权利要求14至18中任一项所述的方法，其中所述第二治疗剂是EGFR抑制剂。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述EGFR抑制剂是(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺、或其药学上可接受的盐。

21.根据权利要求20所述的方法，其中将(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺以约75mg/天、或100mg/天、或150mg/天、或200mg/天、或250mg/天、或300mg/天、或350mg/天的剂量口服施用。

22.根据权利要求21所述的方法，其中将(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)氮杂

-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺以150mg/天口服施用。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的方法，其中所述患者或受试者是患有以下的患者：晚期NSCLC，其带有激活型EGFR突变，和在用标准照护(SOC)EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)情况下具有进展(或不具有可获得的SOC EGFR TKI)，以及在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或晚期NSCLC，其带有KRAS G12突变，在用SOC情况下具有进展；或晚期HNSCC，其在用含铂组合化学疗法情况下具有进展；或晚期食道SCC，其在用含铂化学疗法情况下具有进展；或晚期NRAS/BRAF WT皮肤黑素瘤，其在用SOC情况下具有进展；或晚期GIST，其在用SOC情况下具有进展。

24.根据权利要求1至23中任一项所述的方法，其中待治疗的癌症是NSCLC，所述NSCLC对于用奥希替尼、或其药学上可接受的盐进行治疗具有抗性或难治性。

25.一种用于在治疗癌症的方法中使用的化合物，其中所述化合物是TNO155、或其药学上可接受的盐，并且将TNO155与那扎替尼、或其药学上可接受的盐共同施用。

26.一种用于在治疗癌症的方法中使用的化合物，其中所述化合物是那扎替尼、或其药学上可接受的盐，并且将那扎替尼与TNO155、或其药学上可接受的盐共同施用。

27.根据权利要求25或26所述使用的化合物，其中所述方法是根据权利要求1至21中任一项所述。

28.一种药物组合物，所述药物组合物包含TNO155、或其药学上可接受的盐，以及那扎替尼、或其药学上可接受的盐。

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